1.

1 EXTRACCIN DE ADN DE SALIVA

En la saliva hay numerosas clulas, por tanto, es un buen

material para obtener ADN.

Importante
Material y reactivos
Haz un esquema o resumen
del procedimiento antes de Vaso de plstico Tubo de ensayo
realizar la prctica. transparente Agua potable
Pipetas de 5 y 10 mL Disolucin de
Traga saliva antes de
enjuagarte la boca para evitar Cuchara de plstico lavavajillas al 25 %
que las enzimas de la saliva Aguja enmangada Disolucin de sal comn
interfieran en el proceso. curvada al 5 %
Vaso de precipitados Lquido limpiador para
El alcohol tiene que estar fro, lentillas
djalo en la nevera el da
anterior a la prctica o en un
bao de hielo unas horas antes.
2 Procedimiento

Aadir por este orden:

1
1. 5 mL de solucin salina.
2. 5 mL de solucin de lavavajillas.
3. 3 mL de limpiador para lentillas

Agitar suavemente. Si se forma espuma

retrala con una esptula.

La funcin del detergente es romper la

membrana plasmtica y nuclear, tambin
facilita la separacin entre el ADN y las
protenas. La sal aporta iones y crea un
medio hipertnico que contribuye a la
ruptura de las cubiertas nucleares. El
limpiador de lentillas es un proteoltico.
Pon 20 mL de agua en un
vaso de plstico (dos
cucharadas) y enjuaga la boca
con esta agua durante medio
minuto. Devuelve el agua al
vaso. 5
3
4
Introduce una aguja enmangada
curva y muvela de un lado a otro en
Aade 10 mL de alcohol fro
la zona de la interfase entre el alcohol
sobre la muestra con mucho
Deja reposar unos minutos, en y la muestra, las hebras de ADN se
cuidado, dejndolo caer sobre las
la interfase se acumularn unos irn enrollando en la aguja.
paredes del vaso de precipitados.
hilos blancos que son las hebras Pon algunas de las hebras en un
Deben quedar dos fases
de ADN. porta y obsrvalas con el microscopio.
separadas.
El ADN precipita en la
interfase alcohol-agua.

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 Cuestiones y dibujos
Lee detenidamente el procedimiento y completa la siguiente tabla:

Accin Causa
El detergente desorganiza la membrana al
Detergente Rompe la membrana plasmtica y formar una emulsin con los lpidos.
nuclear. Facilita la separacin entre
ADN y protenas

Contenido muy alto de iones, los cationes

Disolucin salina Crea un medio hipertnico, el agua se Na+ se unirn a las cargas negativas del ADN.
desplazar desde el ncleo al citoplasma y
de este al medio externo, se romper la
membrana nuclear y la membrana
plasmtica, el ADN quedar libre. La sal
aporta iones
Todos son proteolticos
Lquido limpia lentillas, Lisa las protenas que contaminan el ADN,
zumo de pia o es un paso imprescindible, cuanto mejor se
ablandador de carnes haga mayor ser la calidad del ADN
obtenido.

El ADN es soluble en agua pero insoluble en

Permite ver y recoger el ADN porque ste es
Alcohol
insoluble en alcohol y precipita.
alcohol. La sal aadida con el tampn
proporciona cationes Na+ que se unen a las
cargas negativas del ADN provocando cambios
fisicoqumicos en ste, su densidad disminuye y
asciende hacia la interfase donde precipita.

Dibuja las hebras que has observado al microscopio.

En la fotografa pueden observarse las

hebras de ADN en un tubo de ensayo con
alcohol.

Es importante recordar que el ADN no

procede directamente de la saliva sino de
las clulas del epitelio bucal que se
desprenden y pasan a la saliva.

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