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Citologa sangunea en pequeos animales.

Hallazgos ms comunes y su
interpretacin (I)

Anlisis y estudio del frotis sanguneo


Mircoles 16 de noviembre de 2011, 15:33h

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En la prctica clnica diaria de pequeos animales. la evaluacin citolgica de la sangre es una
importante herramienta diagnstica para el veterinario. El estudio de extensiones o frotis de
sangre perifrica es fundamental para la valoracin de la mayora de pacientes y, de hecho, se ha
instaurado como una tcnica rutinaria en los procedimientos diagnsticos veterinarios.

Prez-cija, RA
Estepa, JC
Mendoza, FJ.
Dpto. Medicina y Ciruga Animal. Facultad de Veterinaria
Universidad de Crdoba (Espaa)
Imgenes cedidas por los autores

Este mtodo nos permite, mediante una tcnica de fcil realizacin y bajo coste, obtener rpidamente
contajes de clulas de la serie roja y blanca y, lo que es ms importante, identificar anomalas
morfolgicas o lesiones especficas de ambas series que suelen ser uno de los signos ms tempranos
en numerosas enfermedades (linfomas, anemias inmunomediadas, procesos parasitarios, etc.).

La presente revisin tiene por objeto poner a disposicin del veterinario clnico una gua rpida y de fcil
comprensin acerca de la evaluacin y caracterizacin de las lesiones ms comnmente identificadas
mediante citologa sangunea en pequeos animales. as como establecer los principales diagnsticos
diferenciales en funcin de las mismas.

Para cumplir con este objetivo, enumeraremos en cada apartado los procesos que afectan a hemates,
leucocitos (diferenciando entre monocitos, linfocitos y granulocitos) y plaquetas. Dentro de cada uno de
los apartados se diferenciarn tanto los procesos que afectan a estos componentes cuantitativamente,
como las patologas con efecto sobre la morfologa de las clulas sanguneas.
Debido a lo extenso del tema, hemos dividido esta revisin en varias partes. en esta primera parte
trataremos de forma especfica las diferentes tcnicas tintoriales que existen a disposicin de los
clnicos, con indicaciones sobre la correcta metodologa y los distintos artefactos que suelen aparecer
en la citologa sangunea.
Tcnicas de tincin
A la hora de realizar una correcta evaluacin de una extensin sangunea es esencial conocer el tipo de
tcnica histoqumica realizada sobre la misma. Este conocimiento tambin nos servir a la hora de
formular el diagnstico, pues existen determinadas tcnicas especficas para la visualizacin de ciertas
caractersticas a nivel celular o agentes patgenos. Igualmente, hemos de tener constancia de que la
muestra ha sido recolectada adecuadamente y la extensin o frotis se ha realizado correctamente para
as poder discernir los artefactos que pueden aparecer a consecuencia de estos fallos y que pueden
dirigirnos hacia un diagnstico errneo.

Normalmente, las tinciones usadas en los laboratorios hematolgicos son las denominadas de tipo
Romanowsky, las cuales se basan en el uso combinado de los colorantes eosina y azul de metileno.
Con este tipo de tincin se pueden distinguir los siguientes aspectos morfolgicos de las clulas:
1.- La forma y dimensin de los hemates (de color rosa plido), leucocitos (clulas nucleadas) y
plaquetas (pequeos corpsculos).
2.- El ncleo: de color prpura.
3.- El citoplasma: de color azulado, si bien a veces presenta coloracin griscea en los linfocitos y
monocitos.
4.- Granulaciones: son caractersticas de los granulocitos y tienen diferente color segn la clula en
cuestin. As, pueden aparecer como una mezcla de colores pardos (neutrfilos), anaranjados
(eosinfilos) o bien azul oscuro (basfilos).

Dentro de este tipo de tinciones, unas de las ms conocidas son las denominadas rpidas, como las
basadas en el mtodo Diff-Quick o el Dip-Stat, ambas de uso extendido en las clnicas veterinarias
debido a su facilidad y rapidez. La tcnica Diff-Quick, por ejemplo, se realiza en tres pasos, tras el
secado de la extensin:
1.- Fijacin, utilizando metanol.
2.- Tincin de elementos formes con eosina.
3.- Contratincin de elementos nucleares y con basofilia usando el azul de metileno.

Sin embargo, este tipo de tinciones rpidas presentan ciertos inconvenientes, como la formacin de
precipitados, si se usa sangre con heparina como anticoagulante, o la incapacidad de distinguir ciertos
elementos intracelulares como parsitos hemticos, etc.

Otras tinciones de tipo Romanowsky ms especficas a las que podemos acudir para apreciar ms
correctamente determinados cambios morfolgicos, o bien para la identificacin de ciertos parsitos o
componentes celulares, son las siguientes:
Tincin de Giemsa. Muy buena para valorar la morfologa celular y permite la identificacin de ciertos
hemoparsitos como p.ej. Babesia spp.
Tincin de Wright. Ideal para evaluar la morfologa celular y muy buena para identificar los grnulos
citoplasmticos.

De manera general, estas tinciones de tipo Romanowsky son suficientes para evaluar muestras
hematolgicas. Sin embargo, si queremos diferenciar ms especficamente detalles nucleares o
nucleolares (por ejemplo, a la hora de identificar clulas neoplsicas) podemos optar por otro tipo de
tcnicas como la tincin de Papanicolau.
La tincin NMB (nuevo azul de metileno o New Methylene Blue) es una de las denominadas tinciones
vitales que ms ampliamente se usa para distinguir entre eritrocitos maduros e inmaduros en citologa
sangunea. Las formas maduras se tien de manera homognea mientras que los eritrocitos inmaduros
(que an conservan restos de ribosomas en su citoplasma) presentan grnulos azulados oscuros. La
mayora de los reticulocitos caninos presentan unos precipitados azulados de considerable tamao que
se corresponden a los polirribosomas (figura 1), por lo que tambin se denominan reticulocitos
agregata. en el caso de los gatos tambin pueden aparecer como pequeos grnulos aislados
positivos a la tincin (reticulocitos punctata). Este ltimo subtipo se ha de diferenciar de Hemobartonella
felis o artefactos de tincin.

Figura 1. Tincin NMB sobre frotis sanguneo de perro. Ntense los numerosos reticulocitos, los cuales aparecen con un
punteado o agregados azulados en su citoplasma (flechas). NMB en sangre de perro, 40x.

Artefactos en los frotis sanguneos


en numerosas ocasiones podemos encontrar en las extensiones Hallazgos que pueden orientarnos
hacia un diagnstico errneo y que aparecen debido a fallos en la recoleccin de la sangre, preparacin
del frotis o la tcnica de tincin. Es de suma importancia poder reconocer estos artefactos y saber
diferenciarlos de otros Hallazgos que s tienen importancia diagnstica. Los artefactos ms comunes en
extensiones sanguneas de pequeos animales son los siguientes:

Eritrocitos crenados (crenocitos)


Son especialmente frecuentes en extensiones de sangre felina. Se trata de eritrocitos con numerosas
proyecciones puntiagudas, cortas, uniformemente repartidas por toda la superficie de la membrana.
Pueden aparecer debido a un secado muy lento de la preparacin, o por un exceso de anticoagulante
en la muestra, as como por fallos en el almacenaje (figura 2). Estos crenocitos tambin pueden
aparecer a veces en animales con fluidoterapia hipertnica muy agresiva.

Torocitos o clulas perforadas


Son eritrocitos que presentan el halo central llamativamente plido y con una transicin muy brusca a la
zona perifrica coloreada, la cual presenta un tono normal e incluso aumentado (figura 2). Este tipo de
hallazgo suele responder a un artefacto de la preparacin y hemos de diferenciarlo de la hipocromasia,
que cursa con una disminucin generalizada de la coloracin de los hemates.
Efectos de envejecimiento de la muestra. Idealmente el frotis se ha de realizar con la sangre recin
tomada. Un inadecuado almacenaje de la muestra o cuando trascurre demasiado tiempo entre la toma
de la misma y la preparacin de la extensin provoca una serie de artefactos, que son ms llamativos en
la lnea blanca. Estos cambios pueden ser tanto a nivel nuclear (picnosis nuclear- ncleos
homogneamente basfilos y retrados- , cariorrexis - ncleos fragmentados, sobre todo visible en los
granulocitos-); como en el citoplasma celular (aparicin de vacuolizaciones, o restos nucleares,
fenmeno este ltimo conocido como cariolisis).
Figura 2. Principales artefactos que se pueden observar a nivel de la serie roja. en esta muestra se pueden apreciar
numerosos
crenocitos (cabezas de flecha), torocitos (clulas bajo los asteriscos) y tambin precipitado azulado del colorante (flecha
normal).
Este ltimo hallazgo se ha de diferenciar de los cuerpos de Heinz. Tambin se puede distinguir un codocito o clula diana
(zona superior, flecha con doble cola). Tincin Diff-Quick sobre sangre de perro. 100x.

Defectos tintoriales
Son muy comunes y para descartarlos podemos comparar muestras de diferentes animales. Para evitar
su aparicin es esencial controlar la calidad de los colorantes y tambin el pH del agua de lavado, que
puede interferir con la tincin. Como defectos tintoriales ms comunes, podramos destacar los
siguientes:
Una tincin llamativamente plida del ncleo celular, sin otros cambios tintoriales, suele aparecer
cuando se produce una fatiga del azul de metileno (por excesivo uso, suciedad, etc.).
Una tincin demasiado azulada en una tcnica tipo Romanowsky se suele deber a excesivo tiempo en
el colorante basfilo, lavados inadecuados, preparaciones muy gruesas, pH muy alcalino del buffer o de
los diluyentes, exposicin a formol, fijacin de la muestra cuando la misma an estaba hmeda, fijacin
demasiado tarda o portaobjetos defectuosos.
Una tincin excesivamente rosada se debe a un tiempo insuficiente de tincin en el colorante bsico,
lavados demasiado prolongados, pH cido de los productos, tiempos inadecuados en ambos colorantes
o montaje antes de que la preparacin est completamente seca.
Tambin podemos encontrar una tincin desigual en diferentes zonas del portaobjetos por variaciones
de pH en la superficie del mismo (p.ej. portaobjetos sucios), lavado desigual, colorantes distribuidos
desigualmente, etc.

Precipitado de los colorantes


Suele aparecer debido a un filtrado inadecuado de los mismos, lavado inadecuado, portas sucios, etc.
Es ms comn en la tcnica de Wright que en tinciones rpidas como el Diff-Quick, pero hemos de
diferenciar estos precipitados de inclusiones intracelulares.

Cuerpos refringentes en los eritrocitos


Un secado inadecuado de la muestra puede provocar la aparicin de estas estructuras vacuolares
dentro de los eritrocitos que suelen ser refringentes y a veces se rodean por el colorante.

Evaluacin de la tincin y extensin


Antes de iniciar el estudio de cada uno de los componentes de una extensin sangunea necesitamos
valorar la adecuada realizacin de la misma. Para ello visualizaremos a pocos aumentos el tipo y
calidad de tincin, la distribucin de las clulas y comprobaremos las zonas donde las mismas se
disponen formando una monocapa (figura 3). Es esencial realizar la valoracin de las clulas, sobre todo
la de los eritrocitos, en esta zona de menor celularidad. Si encontramos problemas a la hora de obtener
esta monocapa una opcin es disminuir el ngulo de incidencia del portaobjetos que realiza la
extensin, consiguiendo as una monocapa ms extensa. Por el contrario, si la muestra procede de un
animal muy anmico y no conseguimos una suficiente densidad celular, podemos hacer lo contrario en
pos de una valoracin ms cmoda.
Figura 3. Aspecto de la zona de monocapa en un frotis sanguneo. Se aprecia cmo, en un animal normal,
los eritrocitos aparecen individualizados y una distancia escasa. Igualmente se puede constatar la diferencia de tamao
entre glbulos rojos y blancos (4 neutrfilos en la fotografa). Tincin Diff-Quick sobre sangre de perro. 20x.

Esta monocapa, sobre la cual vamos a realizar el estudio citolgico, suele aparecer en las zonas ms
distales de la extensin, y se reconoce porque es transparente al trasluz. Sobre esta zona y, a pocos
aumentos (10-20x), podremos realizar un primer estudio somero tanto de componentes de la serie roja
como blanca. A estos aumentos podemos valorar la proporcin relativa de cada componente celular y
tambin reconocer grandes parsitos hemticos (como microfilarias).

ms tarde, con mayores aumentos (40x) podemos observar y valorar cada uno de los elementos formes
sanguneos y, en el caso de que queramos identificar ciertos hemoparsitos o cambios morfolgicos
ms finos en los glbulos blancos, usaremos el objetivo de inmersin (100x).

en animales normales los eritrocitos aparecen individualizados y cercanos entre s en la zona de


monocapa, mientras que en zonas ms gruesas de la preparacin aparecen numerosas capas de
eritrocitos superpuestas que apenas dejan adivinar su morfologa.

en animales con una anemia severa los eritrocitos en la monocapa aparecen muy distanciados y la zona
ms gruesa nicamente presenta una o dos capas de hemates. Estos Hallazgos han de confirmarse
con un estudio del hematocrito y contajes si es posible.

Respecto a la serie blanca, se pueden realizar contajes rpidos de la misma a pocos aumentos, usando
para ello tablas de conversin y la cmara Neubauer; pero, sobre todo, la citologa sangunea nos
permitir evaluar la morfologa de estas clulas a mayores aumentos (40-100x).

Las plaquetas, cuyo tamao es inferior al resto de elementos formes, pueden ser valoradas tambin a
40-100x.

en todos los casos expuestos, hemos de conocer los valores normales que ha de arrojar el contaje de
clulas en animales sanos (tabla 1).

Bibliografa
Baker, R., Lumsden, J.H. Color atlas of cytology of the dog and cat. Editado por Baker, R.,
Lumsden, J.H. St. Louis (USA): Mosby, Inc, 2000. ISBN 0-81-510402-2.
Nelson, R.W., Couto, C.G. Medicina interna de animales pequeos. Editado por InterMedica. 2
ed. Buenos Aires (Repblica Argentina): Intermedica, 2000. pp. 1262- 1322. ISBN 950-555-228-
9.

Reagan, W.J., Sanders, T.G., DeNicofa, D.B. Hematologa veterinaria. Atlas de especies
domsticas comunes. Editado por Reagan, W.J., Sanders, T.G., DeNicofa, D.B. Barcelona
(Espaa): Ediciones S, 1999. ISBN 978-84-87736-25-4.

Valli, V.E.O. Histological Classification of Hematopoietic Tumors Of Domestic Animals:


Hematopoectic Tumors of Domestic Animals (WHO International Classification of Tumors of
Domestic Animals). Editado por AFIP. Washington (USA): American Registry of Pathology, 2002.
ISBN 1-88-104175-1.

Valli, V.E.O., 1993. The hematopoietic system. en Jubb, K.V.F., Kennedy, P.C., Palmer, N., (dir),
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101-138. ISBN 0-12-391607-0 vol. 3.

Walker, D., 1999. Peripheral blood smears. en Cowell, R.L., Tyler, R.D., Meeinkoth, J.H., (dir.),
Diagnostic cytology and hematology of the dog and cat. 2 ed. St. Louis (USA): Mosby, Inc,
1999, pp. 254-283. ISBN 0-8151-0362-X.

Citologa sangunea en pequeos animales. Hallazgos ms comunes y su


interpretacin (II)
Alteraciones de la serie roja
Viernes 29 de junio de 2012, 14:33h

La segunda parte de esta serie de artculos sobre citologa sangunea se centra en las
alteraciones morfolgicas de los eritrocitos: fragmentacin, daos oxidativos, cambios en la
forma, poiquilocitosis, daos inmunomediados y cambios en el tamao celular o la coloracin.

Prez-cija, RA
Estepa, JC
Mendoza, FJ
Dpto. Medicina y Ciruga Animal Facultad de Veterinaria
Universidad de Crdoba (Espaa)
Imgenes cedidas por los autores
en la prctica clnica diaria de pequeos animales. la evaluacin citolgica de la sangre es una
importante herramienta diagnstica para el veterinario.

El estudio de extensiones o frotis de sangre perifrica es fundamental para la valoracin de la mayora


de pacientes y, de hecho, se ha instaurado como una tcnica rutinaria en los procedimientos
diagnsticos veterinarios.

en la primera parte de esta revisin, ahondamos en las distintas tcnicas tintoriales a disposicin del
clnico, as como en los diferentes artefactos que pueden aparecer en las extensiones. en esta segunda
parte nos centraremos en el estudio de la serie roja, en concreto en aquellas alteraciones morfolgicas
de los eritrocitos reconocibles en la citologa sangunea. en la siguiente revisaremos alteraciones
cuantitativas de esta serie roja as como los eritroparsitos ms frecuentemente observados.

Apariencia de los eritrocitos normales en extensiones sanguneas

Los eritrocitos son el principal componente de la sangre y por ello las clulas ms numerosas. en el
perro y el gato son anucleados y, al ser bicncavos, suelen aparecer con un halo plido central
caracterstico. Dicho halo es mucho ms llamativo y fcilmente reconocible en perro que en gato.
Respecto al tamao, suelen tener dimetros de 7 micras en la especie canina, y de 5,5 a 6 micras en
felinos. De manera sistemtica, el tamao del eritrocito nos va a permitir diferenciar algunos glbulos
blancos por comparacin.
Figura 1. Cambios eritrocitarios asociados a fragmentacin y desnaturalizacin de los lpidos de membrana del glbulo rojo.
en la fotografa se pueden observar dacriocitos (flecha normal) y clulas en burbuja (flecha roma), hallazgo caracterstico
de procesos que cursan con fragmentacin. Igualmente se observan clulas en diana (flecha con doble cola) y clulas en
barra
(cabeza de flecha), ambas asociadas a daos lipdicos en la membrana eritrocitaria. Tincin Diff-Quick sobre sangre felina.
100x.

Alteraciones morfolgicas en los eritrocitos

Los principales cambios en la morfologa de los glbulos rojos se pueden clasificar en seis categoras:
fragmentacin, daos oxidativos, cambios en la forma, poiquilocitosis, daos inmunomediados y
cambios en el tamao celular.

Daos por fragmentacin del eritrocito


Normalmente se asocian a anemias hemolticas por disturbios en el flujo sanguneo. Tericamente
pueden aparecer tanto por procesos macroangiopticos (problemas de estenosis valvular o filariosis en
corazn y grandes vasos), as como por formas microangiopticas que cursan con un excesivo depsito
de fibrina en los capilares (coagulacin intravascular diseminada o en inflamaciones de tejidos muy
vascularizados como el bazo, pulmn, etc.). Igualmente, ambos mecanismos acontecen en tumores muy
vascularizados, como seran los hemangiosarcomas. Estos daos por fragmentacin tambin aparecen
como consecuencia de defectos primarios en los hemates, caso del dficit severo de hierro o los daos
oxidativos. Si en el frotis sanguneo encontramos ms del 1% de las clulas fragmentadas se ha de
sospechar fragmentacin de eritrocitos. Con ms del 10% encontraremos otros Hallazgos laboratoriales
que soportarn el diagnstico de un proceso de hemolisis intravascular.

Dentro de las formas fragmentadas de los eritrocitos podemos diferenciar entre las siguientes.

Esquistocitos
Son clulas de forma irregular que tienen en su membrana proyecciones de bordes puntiagudos o
afilados. Dichas proyecciones aparecen con una distribucin irregular a lo largo de la membrana del
eritrocito, lo cual permite diferenciarlos de clulas crenadas (las cuales constituyen un artefacto).

Queratocitos
Son clulas que presentan dos proyecciones con forma de cuernos por prdida parcial de la membrana
celular; a veces tienen aspecto de clulas mordidas.

Clulas tipo burbuja


Parecen ser formas intermedias hacia las anteriores y presentan una vescula incolora en uno de sus
laterales (figura 1).

Dacriocitos
Clulas con forma de lgrima que, aun cuando no est demostrado sobradamente, parecen ser una
forma de fragmentacin y en algunas ocasiones se han asociado a casos de mielofibrosis (figura 1).

Clulas fantasma
Slo son membranas remanentes de glbulos rojos lisados intravascularmente (figura 2).
Figura 2. Numerosas clulas fantasma (flechas) aparecen en este frotis de sangre felina. Dichas clulas
representan los remanentes de eritrocitos fragmentados. Tincin de Giemsa sobre sangre felina. 100x.

Daos oxidativos
Se deben a la desnaturalizacin de la hemoglobina de los eritrocitos a causa de a una excesiva accin
oxidante (que puede acontecer por analgsicos como la benzocana, el acetaminofeno, etc.). Se
distinguen los cuerpos de Heinz y los excentrocitos.

Cuerpos de Heinz
Los cuerpos de Heinz (figura 3) son proyecciones nicas circulares que protruyen desde la membrana
del eritrocito y que suelen presentar una zona ms clara de citoplasma en su base. A veces no hacen
prominencia en la membrana y se observan como zonas circulares refrctiles que aparecen sobre el
eritrocito. Para una mejor observacin de estos cuerpos de Heinz se puede usar la tincin NMB, pues
aparecern teidos. Se ha de tener en cuenta que, en ocasiones, estos cuerpos de Heinz se
desprenden del eritrocito y aparecen como pequeas masas circulares rosadas, refrctiles y de manera
libre en la extensin. en el caso del gato, el hallazgo de estos cuerpos de Heinz puede ser, hasta cierto
punto, fisiolgico (si aparecen con un tamao pequeo y en menos del 10% de los eritrocitos). Si
aparecen en un mayor porcentaje de eritrocitos o son de un tamao mayor habra que sospechar de
intoxicacin por frmacos oxidantes (paracetamol, etc.).

Excentrocitos
Los excentrocitos aparecen como glbulos rojos con zonas de citoplasma excntrico ms claro (figura
4), quedando el resto del citoplasma condensado y parecen ser formas intermedias hacia los cuerpos de
Heinz.
Adems de por frmacos o productos altamente oxidantes, este tipo de dao en el eritrocito puede
aparecer en diabetes mellitus, linfoma, hipertiroidismo e IRC.

Figura 3. en la imagen se pueden ver varios cuerpos de Heinz (flechas), que aparecen como proyecciones
semicirculares de punta roma y nicas en la superficie eritrocitaria. Es caracterstico que presenten
un cierto halo plido en su base y son propios de procesos oxidativos.
Tincin de Diff-Quick sobre sangre canina. 100x.

Poiquilocitosis
Se denomina as el hallazgo, dentro de una extensin sangunea, de numerosas y diferentes
morfologas en un alto porcentaje de eritrocitos (10% o ms).

Dentro de este trmino se engloban clulas con morfologa muy variada y diferente, tales como:
Los equinocitos, que son clulas de tamao y forma irregular pero con proyecciones similares a los
crenocitos, es decir, uniformemente repartidas por su superficie. Sin embargo, a la hora de diferenciarlos
hemos de tener en cuenta que se producen in vivo en determinadas clulas, mientras que los crenocitos
aparecen en toda la preparacin debido a problemas en la preparacin de la misma. Este tipo de clulas
se ha asociado frecuentemente con enfermedades renales.
Los acantocitos, que son clulas de aspecto parecido a los equinocitos pero tienen una morfologa ms
similar a un eritrocito normal. De igual manera, presentan proyecciones de membrana, pero en este
caso estn irregularmente distribuidas y son de diferente tamao (figura 4). Este tipo celular se ha
asociado en algunas ocasiones a lipidosis heptica felina.
Los eliptocitos u ovalocitos son eritrocitos con forma ovalada y que se suelen asociar con fenmenos
de lipidosis heptica felina.
Los codocitos o clulas diana presentan en su zona central un halo claro con una zona de citoplasma
teido en su interior, lo cual les da su aspecto caracterstico (figura 1). en el caso del perro, estas clulas
diana se han asociado con enfermedades hepticas y con hipercolesterolemia secundaria a
hipotiroidismo. Una forma parecida seran las clulas en barra, que presentan una lnea gruesa
coloreada que atraviesa diametralmente el halo plido central (figura 1).

Daos inmunomediados
Son caractersticos de anemias autoinmunes o inmunomediadas, ya sean primarias o secundarias a
frmacos o agentes microbianos. Se diferencian dos lesiones: los esferocitos y/o el fenmeno de
aglutinacin.
Los esferocitos son clulas pequeas (menos de dos tercios el tamao normal) y muy teidas, sin el
tpico halo central. Estos esferocitos son caractersticos de fases tempranas en procesos anmicos
hemolticos inmunomediados, pero nicamente son reconocibles en aquellas especies en las que los
eritrocitos muestran claramente este halo plido central (perro).
La aglutinacin que acontece por procesos inmunomediados graves se ha de diferenciar de una
aglutinacin inespecfica (denominada pilas de monedas), la cual puede aparecer prcticamente por
cualquier proceso inflamatorio e incluso en condiciones no patolgicas (figura 5). Para ello podemos
mezclar suero salino (2-3 gotas) con una gota de sangre, lo cual separar los eritrocitos unidos de
manera inespecfica y a continuacin analizar si persiste dicha aglutinacin.

Figura 4. Excentrocito (flecha normal) y varios anisocitos y Figura 5. Eritrocitos felinos formando acmulos y pilas de monedas.
equinocitos (flecha con cola doble). Tincin Wright en sangre canina. Para determinar si se trata de un cuadro autoinmune o es
100x. consecuencia de un proceso inflamatorio inespecfico hemos de
pretratar la muestra con solucin salina. Tincin Giemsa en sangre
felina. 100x.

Cambios en el tamao celular


Cuando los eritrocitos aparecen de forma general con un tamao mayor o menor al usual se habla,
respectivamente, de macrocitosis o microcitosis. Usualmente, para una correcta evaluacin de estos
cambios, se ha de comparar el tamao de los glbulos rojos con los leucocitos circundantes. Si
queremos realizar una valoracin ms adecuada hemos de acudir a mtodos automticos.
Microcitosis
La microcitosis es caracterstica de la anemia ferropnica, y es tpico que encontremos Hallazgos
citolgicos de un proceso poco regenerativo junto con microcitos e hipocromasia, si bien el cambio en el
tamao celular es el ms temprano de los cambios. Tambin podemos encontrar microcitos de forma
fisiolgica en ciertas razas de perro (Akita, Shar Pei).

Macrocitosis
La macrocitosis se suele acompaar de policromasia (que a veces no se distingue adecuadamente con
tinciones rpidas), y ambas son caractersticas de anemias regenerativas. Es un hallazgo normal en
ciertas razas caninas (Caniche). Una anemia macroctica normocrmica es caracterstica de procesos
mieloproliferativos por infeccin con leucemia felina o ciertas razas toy. Si la misma se acompaa de
neutropenia e hipersegmentacin de los neutrfilos en un Schnauzer Gigante, el proceso se debe a una
malabsorcin de vitamina B12.

Cambios en la coloracin

Entre los cambios ms comunes cabe diferenciar los siguientes:

Policromasia
Se define como la aparicin de eritrocitos con diferentes tonalidades de color dentro del frotis sanguneo
(figura 5). Es caracterstica de eritrocitos inmaduros y suele aparecer en clulas de mayor tamao a las
normales, que adems son ligeramente ms basfilas. Este hallazgo es normal entre el 0,5 y 1% de los
eritrocitos en pequeos animales. pero una mayor proporcin indica cambios regenerativos.

Hipocromasia
Consiste en la aparicin de glbulos rojos que aparecen tenuemente teidos. Es caracterstica del dficit
grave de hierro. Estos eritrocitos presentan un halo central muy prominente y una franja teida muy fina,
suelen ser microcitos y se suelen acompaar de otros cambios morfolgicos.
Figura 6. Varios cuerpos de Howell-Jolly (flechas) aparecen en esta imagen. Destacar que son zonas
intensamente basfilas pero nicas en el citoplasma del eritrocito y no se corresponden con precipitados
del colorante. Tincin Diff-Quick sobre sangre canina. 40x.

Estomatocitos
Estas clulas presentan caractersticas tintoriales normales, y el hecho diferencial es que el halo central
plido no es circular, sino ovalado. Si bien a veces se han asociado a problemas metablicos en la
membrana eritrocitaria, la mayora de las ocasiones aparecen como consecuencia de un artefacto.

Cuerpos de Howell-Jolly
Zonas esfricas de color azulado a negruzco y normalmente nicas en el citoplasma eritrocitario (figura
6). Son reminiscencia del ncleo del eritrocito que, si aparecen ocasionalmente, carecen de importancia
diagnstica. Sin embargo, suelen ser muy numerosos en anemias regenerativas as como tambin en
anomalas en la eritropoyesis (por ejemplo, si existe un dficit en la funcin macrofgica debido a una
esplenectoma). Nunca se han de confundir con hemoparsitos.

Punteado basfilo
Hallazgo inespecfico en respuestas regenerativas. A veces se ha asociado a intoxicacin con plomo
pero normalmente esto no se acompaa de una anemia grave. Se ha de diferenciar de los denominados
cuerpos de Pappenheimer, que son restos de hierro que aparecen en eritrocitos maduros o inmaduros
(siderocitos y sideroblastos, respectivamente). Para dicha diferenciacin se requieren tcnicas
especiales como p. ej. el azul de Prusia.
Eritrocitos nucleados
Tambin denominados normoblastos y que aparecen ocasionalmente en animales sanos (figura 7). El
aumento del nmero de eritrocitos nucleados en la muestra (si son menos del 5%) es caracterstico de
anemias regenerativas o disfunciones esplnicas que conllevan un menor atrapamiento en el bazo de
las clulas nucleadas, como p. ej. en hemangiosarcomas o traumas esplnicos. Este hallazgo tambin
se ha correlacionado con hiperadrenocorticismo (tanto endgeno como exgeno) debido al efecto sobre
el bazo de los corticoides. Un porcentaje de normoblastos mayor al 5% indica una hipoxia en la mdula
sea (como la que se produce en el shock hipovolmico por anemias agudas). ms del 15% indicara
una severa mielopata (intoxicacin por plomo, etc.).

Cuando estos eritrocitos nucleados se acompaan por progenitores de la lnea roja (metarubricitos,
rubricitos y rubriblastos) el diagnstico apuntara a un desorden mieloproliferativo (ms comn en gatos
que en perros). Sin embargo, ciertas razas caninas (Schnauzer, Dachshund) pueden presentar de forma
fisiolgica formas inmaduras de eritrocitos en sangre circulante.

Figura 7. Eritrocito nucleado (rubricito). Para diferenciarlo de los glbulos rojos nos hemos de fijar
en su tamao y marcada basofilia citoplasmtica. en esta fotografa tambin se observa una marcada
policromasia con clulas muy basfilas y grandes (eritrocitos inmaduros). Tincin Wright sobre sangre canina. 40x.

Bibliografa
Baker, R., Lumsden, J.H. Color atlas of cytology of the dog and cat. Editado por Baker, R., Lumsden,
J.H. St. Louis (USA): Mosby, Inc, 2000. ISBN 0-81-510402-2.
Nelson, R.W., Couto, C.G. Medicina interna de animales pequeos. Editado por InterMedica. 2 ed.
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Walker, D., 1999. Peripheral blood smears. en Cowell, R.L., Tyler, R.D., Meeinkoth, J.H., (dir.),
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Citologa sangunea en pequeos animales. Hallazgos ms comunes y su


interpretacin (III)
Alteraciones de la serie roja y de las plaquetas
Martes 28 de agosto de 2012, 11:56h

y de las plaquetas" alt="Alteraciones de la serie roja y


de las plaquetas">

El tercer artculo de este curso concluye con la serie roja, tratando los eritroparsitos, las
anemias y las policitemias. Tambin recoge las alteraciones morfolgicas y cuantitativas de las
plaquetas.

Prez-cija, RA
Estepa, JC
Mendoza, FJ
Dpto. Medicina y Ciruga Animal. Facultad de Veterinaria
Universidad de Crdoba (Espaa)
Imgenes cedidas por los autores

en la prctica clnica diaria de pequeos animales. la evaluacin citolgica de la sangre es una


importante herramienta diagnstica para el veterinario.

El estudio de extensiones o frotis de sangre perifrica es fundamental para la evaluacin de la mayora


de pacientes y, de hecho, se ha instaurado como una tcnica rutinaria en los procedimientos
diagnsticos veterinarios.
Anteriormente hemos comentado las distintas tcnicas tintoriales, artefactos ms comnmente
encontrados en las citologas sanguneas, as como los cambios morfolgicos de la serie roja que
podemos observar en una extensin. A continuacin pasaremos a detallar las principales alteraciones
cuantitativas de esta serie, junto con una revisin de sus principales causas, haciendo tambin mencin
a los eritroparsitos ms habitualmente observados en estas citologas. Tambin trataremos las
principales anomalas de las plaquetas.
Eritroparsitos

Es muy importante, a la hora de identificar hemoparsitos, constatar que la imagen observada no se


debe a un artefacto (precipitado del colorante, plaquetas superpuestas a los eritrocitos, etc.). De la
misma forma, la mayora de estos parsitos se pueden observar a 40x, pero para su correcta
caracterizacin es preferible usar el objetivo de inmersin (100x). A pesar de que existen numerosos
eritroparsitos que pueden afectar a los pequeos animales segn la zona geogrfica, los dos ms
comunes en la clnica veterinaria suelen ser Hemobartonella felis y Babesia canis.

Hemobartonella felis
Caracterstico del gato, este organismo induce una moderada anemia hemoltica. Suelen aparecer como
estructuras cocceas, normalmente formando filas, y son de color basfilo aunque a veces se liberan y
se observan como pequeos anillos en la membrana de los eritrocitos. Se han de diferenciar de
artefactos y hemos de considerar que se suelen observar mejor en muestras frescas sin anticoagulante.

Babesia canis
Los parsitos de esta especie son caractersticas de perros. Son formas piriformes o ameboides que
ocupan la mayor parte del citoplasma del eritrocito. De manera tpica aparecen en parejas, unidas por su
extremo ms afilado. Otras especies de Babesia, especialmente las de pequeo tamao como B.
gibsoni, son ms difcilmente reconocibles ya que adoptan formas mucho ms variables a lo largo de su
ciclo biolgico (figura 1). en las formas agudas de babesiosis se pueden observar mltiples organismos
en frotis sanguneos, si bien son muy raros en formas crnicas.

A la hora de diagnosticar este proceso se puede optar por recoger sangre capilar, donde los parsitos
son ms frecuentes. La grave hemlisis intravascular que produce la babesiosis en animales con
infecciones muy graves hace que sean esperables otros sntomas en los mismos como, por ejemplo,
hemoglobinuria, bilirrubinuria y bilirrubinemia. Siempre hemos de tener presente que el grado de anemia
que acompaa a la babesiosis es bastante variable, dependiendo del animal, gravedad y fase de la
enfermedad.
Figura 1.En esta imagen se observan numerosas formas evolutivas de Babesia gibsoni (punteados basfilos
nicos con forma ligeramente anular, flechas normales) y tambin de Babesia canis (formas piriformes por parejas
en el citoplasma del eritrocito, flecha grande de doble cola). Tincin de Wright sobre sangre canina. 100x.

Alteraciones cuantitativas de la serie roja

De manera ideal el recuento del nmero de eritrocitos se ha de hacer mediante anlisis automtico o
usando cmaras de Neubauer. Sin embargo, la citologa sangunea nos puede orientar cuando existen
fuertes variaciones en el recuento eritrocitario.

Policitemia o eritrocitosis
Si bien ambos trminos se consideran sinnimos en numerosos textos de referencia, se ha de
diferenciar entre una policitemia (aumento del nmero de todas las lneas celulares sanguneas) y una
eritrocitosis, la cual nicamente afecta a los glbulos rojos.

La causa ms comn de eritrocitosis en pequeos animales es la deshidratacin (eritrocitosis relativa).


La eritrocitosis verdadera o absoluta suele aparecer de manera secundaria a una esplenocontraccin.
Otras causas de eritrocitosis seran la hipoxia crnica (usualmente por enfermedad pulmonar
obstructiva, mal de las alturas, etc.) o bien por una exacerbada produccin de eritropoyetina en el rin
(lo cual suele acontecer en cuadros de hidronefrosis, neoplasias renales u otros tipos de neoplasias que
pueden liberar eritropoyetina dando eritrocitosis como sndrome paraneoplsico). La policitemia primaria
o policitemia vera (eritrocitosis junto con leucocitosis y trombocitosis) es un proceso muy raro en
pequeos animales a cuyo diagnstico se llega por exclusin de otras causas de eritrocitosis.
Anemia
Es uno de los Hallazgos ms comunes en extensiones sanguneas de pequeos animales y se suele
sospechar previamente a la realizacin de la extensin sangunea. La existencia de anemia ha de
establecerse teniendo en cuenta los valores del recuento de hemates, el hematocrito, la concentracin
de hemoglobina, los ndices eritrocticos as como el recuento de reticulocitos y el ndice de produccin
de reticulocitos (IPR).

Anemias regenerativas
Se describen cuando el IPR es mayor a 2 y/o existen signos de regeneracin a nivel citolgico
(macrocitosis, policromasia, corpsculos de Howell-Jolly, eritrocitos nucleados, punteado basfilo, etc.).
Otro hallazgo comn en procesos regenerativos es la anisocitosis, donde se pueden observar eritrocitos
de diferentes tamaos. Las anemias regenerativas son caractersticas de hemorragias o procesos
hemolticos.

Las anemias hemorrgicas presentan caractersticas diferentes segn el curso que adopten. en las
formas agudas (por heridas, traumatismos, alteraciones de la coagulacin, etc.) la citologa inicialmente
no se altera, si bien ms tarde aparece una fuerte respuesta reticulocitaria. en las formas crnicas se
describe la aparicin de una anemia regenerativa tpicamente macroctica y de normo a hipocrmica. Si
el proceso contina, debido a la constante prdida de hierro, acaba apareciendo una anemia
ferropnica, que es arregenerativa, microctica e hipocrmica.

Por su parte, dentro de las anemias hemolticas podemos diferenciar varios subtipos segn la causa:
a) Las anemias hemolticas inmunomediadas. Pueden aparecer de manera primaria o idioptica o bien
ser secundarias a frmacos: sulfamidas, antiepilpticos, penicilina, cefalosporinas; agentes infecciosos:
babesiosis, ehrlichiosis o como consecuencia de vacunaciones. Estas anemias hemolticas
inmunomediadas suelen cursar bsicamente con presencia de esferocitos y fenmenos de
autoaglutinacin. El diagnstico de un proceso anmico autoinmune requiere la realizacin del test de
Coombs, que demuestra la unin de anticuerpos propios a la superficie del glbulo rojo.
b) Las anemias hemolticas debidas a la accin de sustancias oxidantes provocan la aparicin de
corpsculos de Heinz y, posteriormente, la fragmentacin de los eritrocitos. Suelen estar asociadas a
frmacos como el paracetamol, los nitrofuranos o el propofol, pero tambin aparecen por consumo de
ciertas plantas como el arce rojo, el roble o la cebolla.
c) Las anemias hemolticas angiopticas aparecen cuando la fragmentacin de los eritrocitos se debe a
procesos que causan una alteracin en el flujo sanguneo (defectos valvulares, hemangiosarcomas,
etc.). en este tipo de anemia el hallazgo ms constante es la aparicin de esquistocitos.
d) Anemias hemolticas intrnsecas. Son aquellas que se deben a dficits en determinadas enzimas
eritrocitarias, como la piruvatocinasa o fosfofructocinasa. Este tipo de proceso requiere de tcnicas
genticas o inmunocitoqumicas para su diagnstico definitivo.

Anemias arregenerativas
Tpicamente presentan un IPR
Alteraciones de las plaquetas

Las plaquetas son los elementos formes sanguneos de menor tamao en los frotis sanguneos de
pequeos animales. Suelen ser redondeadas u ovaladas y presentan una tincin rosada plida y
finamente granular. El dimetro de las plaquetas vara entre 2 y 4 micras, aunque a veces son mayores
en felinos. No es raro observarlas formando agregados o aglutinadas, sobre todo en extensiones de
sangre felina (figura 2).

Figura 2. Varias plaquetas (figuras granulares rosceas) formando un agregado con fibrina. Esta imagen no es extraa en
numerosos
frotis sanguneos de pequeos animales. Tcnica Diff-Quick sobre sangre de perro. 100x.

Alteraciones cuantitativas
Como suceda con los glbulos rojos, se pueden realizar contajes someros de las plaquetas con objetivo
de inmersin a 100X aumentos. Sin embargo, el mtodo ideal para cuantificarlas consiste en el uso de
instrumental automtico.

El hallazgo ms normal respecto a cambios cuantitativos en pequeos animales es la trombocitopenia


(nmero reducido de plaquetas), mientras que la trombocitosis (nmero aumentado) es muy rara.

Las principales causas de trombocitopenia en pequeos animales son los procesos autoinmunes (son
frecuentes las trombocitopenias inmunomediadas idiopticas en la especie canina), aunque tambin se
han caracterizado ciertas trombocitopenias producidas por frmacos (cefalosporinas, cloranfenicol,
penicilinas, trimetroprim-sulfametoxazol, fenobarbital, cido acetilsaliclico, fenilbutazona, paracetamol,
diazepam, digitlicos, estrgenos, heparina). en el diagnstico diferencial de la trombocitopenia tambin
hemos de considerar cualquier proceso que curse con coagulacin intravascular diseminada (que
provoca un excesivo consumo y destruccin plaquetaria), as como infecciones vricas (parvovirus felino
y canino, peritonitis infecciosa felina) o por rickettsias (una de las causas ms comunes en Espaa es la
ehrlichiosis, pero tambin aparece en dirofilariosis, leishmaniosis, babesiosis, etc). Hemos de considerar
que la trombocitopenia nicamente conllevar sintomatologa clnica cuando sea muy intensa o bien se
acompae de otra alteracin en la hemostasia.

en cuanto a la trombocitosis, puede aparecer como una respuesta reactiva a anemias graves, as como
en las leucemias megacariocticas (muy raras en pequeos animales..

Alteraciones morfolgicas
Respecto a los cambios morfolgicos, el ms usual es el hallazgo de plaquetas de tamao aumentado,
con dimetro similar al del glbulo rojo o incluso mayores (plaquetas gigantes, macroplaquetas o
megatrombocitos).

El hallazgo de macroplaquetas en sangre perifrica de gato no es extrao, aun estando el animal sano.
Sin embargo, si son muy numerosas y/o se observa igualmente la presencia de plaquetas fragmentadas
y de forma irregular puede llevarnos a un diagnstico de trombopoyesis anormal por un trastorno
mieloproliferativo o mielofibrosis (p. ej. como consecuencia de la infeccin por virus de la leucemia
felina).

en el caso del perro, la presencia de dichas macroplaquetas es indicativa de un excesivo consumo de


plaquetas por procesos como coagulacin intravascular diseminada o hemorragias generalizadas (figura
3).
Figura 3. en esta fotografa se observan numerosas plaquetas (zona central) con su caracterstico aspecto
granular. Entre ellas existen varias macroplaquetas de tamao similar e incluso mayor a los eritrocitos.
Tincin de Giemsa sobre sangre felina. 100x.

Bibliografa
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Valli, V.E.O. Histological Classification of Hematopoietic Tumors Of Domestic Animals: Hematopoectic
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Walker, D., 1999. Peripheral blood smears. en Cowell, R.L., Tyler, R.D., Meeinkoth, J.H., (dir.),
Diagnostic cytology and hematology of the dog and cat. 2 ed. St. Louis (USA): Mosby, Inc, 1999, pp.
254-283. ISBN 0-8151-0362-X.
Citologa sangunea en pequeos animales. Hallazgos ms comunes y su
interpretacin (IV)
Alteraciones morfolgicas de la serie blanca
Martes 18 de septiembre de 2012, 11:09h

(Foto: PV Argos)

En captulos anteriores de esta revisin hemos tratado las distintas alteraciones reconocibles en
la serie roja y plaquetas. A continuacin nos centraremos en el aspecto fisiolgico de los
leucocitos en las extensiones sanguneas, as como en las principales alteraciones morfolgicas
que pueden aparecer en los mismos.

Prez-cija, R. A.
Estepa, J. C.
Mendoza, F. J.
Dpto. Medicina y Ciruga Animal. Facultad de Veterinaria
Universidad de Crdoba (Espaa)
Imgenes cedidas por los autores

La evaluacin citolgica de la sangre es una importante herramienta diagnstica para el veterinario, y es


de un uso cada vez ms frecuente en la prctica clnica diaria de pequeos animales.

El estudio de extensiones o frotis de sangre perifrica es fundamental para la evaluacin de la mayora


de pacientes y, de hecho, se ha instaurado como una tcnica rutinaria en los procedimientos
diagnsticos veterinarios.

Apariencia de los leucocitos normales en extensiones sanguneas

Las principales caractersticas que nos ayudarn a reconocer los diferentes tipos de leucocitos que
podemos encontrar en un frotis sanguneo aparecen recogidas en la tabla.
Polimorfonucleares neutrfilos
Los neutrfilos se caracterizan por su ncleo separado en numerosos lbulos, habitualmente entre 3 y 5.
La cromatina nuclear aparece densamente compactada (basfila) con zonas puntuales menos
condensadas. El citoplasma es claro, plido y a veces se puede observar una vacuolizacin finamente
granular que suele ser incolora y puede tornarse ligeramente acidfila (no confundir con los eosinfilos,
que presentan unos grnulos intensamente rosceos). El tamao normal de los neutrfilos en pequeos
animales es de 12 micras (recordemos que para discernir los tamaos de los leucocitos se usa el
hemate como referencia).

Neutrfilos bandados o cayados


Son formas inmaduras de los polimorfonucleares y, en condiciones fisiolgicas, son escasos en sangre
perifrica de pequeos animales. Se caracterizan por un ncleo que, en vez de aparecer multilobulado,
muestra una forma caracterstica de U o C. Todas las formas inmaduras de los neutrfilos (cayados,
mielocitos, metamielocitos, etc.) presentan los grnulos secundarios ya descritos, si bien en estas
clulas son muy difciles de demostrar (figura 1).
Figura 1. Ejemplo de polimorfonuclear neutrfilo bandado. Figura 2. Eosinfilo felino, con sus caractersticos grnulos muy
Obsrvese el caracterstico ncleo sin lobulaciones y con forma de acidfilos y pequeos que ocupan completamente el citoplasma
C o U, as como la cromatina poco compacta, que indica la celular, apareciendo el ncleo bilobulado. Tincin Diff-Quick sobre
inmadurez de la clula (al contrario que la imagen que aparece, por sangre de gato. 100x.
ejemplo, en un eosinfilo degranulado). El tamao relativo respecto
a los eritrocitos ayuda a descartar su confusin con un monocito.
Tincin Diff-Quick sobre sangre de perro. 100x.

Eosinfilos
Estas clulas suelen ser de mayor tamao que los neutrfilos y normalmente se encuentran en bajo
nmero en animales sanos. El ncleo aparece segmentado pero se divide en pocos lbulos (dos de lo
ms normal), con cromatina poco compacta y citoplasma claro que presenta grnulos llamativamente
rosceos. Estos grnulos suelen ser uniformes y pequeos en gato (figura 2), ocupando completamente
el citoplasma. en el perro, al contrario, son de tamao y forma variable, y aparecen usualmente cuatro o
cinco que ocupan todo el citoplasma. Al igual que sucede en los neutrfilos, estos grnulos se pueden
observar en las formas inmaduras. A veces podemos identificar en un frotis (ms frecuentemente en el
perro y, sobre todo, en los galgos) eosinfilos degranulados (figura 3). La imagen es muy similar a la de
un neutrfilo, pero son de mayor tamao y presentan numerosas vacuolas vacas e irregulares en su
citoplasma.

Basfilos
Son los granulocitos de mayor tamao, si bien son muy escasos en las extensiones sanguneas de
animales sanos.

su ncleo aparece escasamente segmentado y se caracterizan por un citoplasma moderadamente


basfilo que contiene grnulos.

en el perro los grnulos de los basfilos son escasos y de tincin violcea, mientras que en gatos
presentan numerosos grnulos de color lila (figura 4). Dichos grnulos tambin aparecen en las formas
inmaduras de los basfilos.
Figura 3. Comparacin entre un neutrfilo maduro (clula A) y un Figura 4. Basfilo canino (flecha). Ntense la tpica granulacin de
eosinfilo degranulado (B). Obsrvese que el tamao es muy similar, color azul oscuro en el citoplasma celular y el tamao comparado
lo cual ayuda a descartar que la clula B sea un monocito. El respecto a los neutrfilos circundantes. El ncleo del basfilo suele
eosinfilo presenta un ncleo bilobulado y, al haberse degranulado, aparecer poco segmentado, al igual que los eosinfilos. Tincin Diff-
aparecen unas vacuolizaciones citoplasmticas caractersticas. Quick sobre sangre de perro. 100x.
Tincin Giemsa sobre sangre de perro. 100x.

Monocitos
Lo ms caracterstico de estas clulas es que son de tamao mayor a los neutrfilos, y que su dimetro
vara entre 15 y 20 micras. El ncleo es de morfologa muy variable (desde formas de rin, C o U
parecidas a los neutrfilos bandados hasta formas multilobuladas). Se caracterizan porque la mayora
de su cromatina est escasamente compactada, a diferencia de los granulocitos; mientras que el
citoplasma presenta una fina textura granular, a veces con vacuolas. Los bordes citoplasmticos son
irregulares e incluso eventualmente presentan estructuras parecidas a seudpodos (figura 5).

Linfocitos
Son de pequeo tamao, escasamente mayores a un eritrocito y con un ncleo redondeado
densamente teido donde predomina la cromatina compacta. El citoplasma es escaso y a veces incluso
imperceptible (figura 6).

Alteraciones morfolgicas de la serie blanca

Neutrfilos txicos
Suele ser el cambio morfolgico ms frecuente en leucocitos y aparecen por efecto de una inflamacin o
infeccin sistmica (tpicamente por bacterias Gram (-)) que afecta a la granulopoyesis medular. Segn
la gravedad de la alteracin podemos distinguir entre: cuerpos de Dhle, basofilia generalizada,
granulacin txica, neutrfilos gigantes y clulas con ncleo en anillo.
Cuerpos de Dhle
Son la forma ms leve de cambio txico y
aparecen como parches grises irregulares
en el citoplasma debido a alteraciones en
el retculo endoplsmico (figura 7). en
felinos se pueden encontrar
frecuentemente en animales normales
pero, en caninos, son especficos de
inflamacin sistmica con accin sobre la
granulopoyesis. Se pueden encontrar Figura 5. Monocito felino. El ncleo suele aparecer con una
tanto en neutrfilos maduros como en forma arrionada y la cromatina poco compactada. Es
bandados. tpico de estas clulas su gran tamao (comparar con los
eritrocitos) as como el citoplasma vacuolizado y una
membrana celular poco ntida que a veces (como en la
La forma irregular y el tpico color grisceo imagen) presenta pequeas proyecciones. Tincin de
Giemsa sobre sangre de gato. 100x.
ayuda a diferenciarlos de los grnulos del
neutrfilo.

Basofilia generalizada
Una forma ms severa de dao txico es
la basofilia generalizada del citoplasma, la
cual se visualiza como una coloracin
azulada difusa homognea. en daos ms
graves aparece una vacuolizacin
espumosa del citoplasma por dao en los
lisosomas, dndole una aparicin
burbujeante (figura 8).

Granulacin txica
Se caracteriza porque la clula presenta
pequeos grnulos citoplasmticos de
Figura 6. Linfocito canino. Ncleo redondeado con
color rojizo. cromatina compacta y escaso citoplasma, siendo la clula
poco mayor a un eritrocito. Tincin Diff-Quick sobre sangre
Neutrfilos gigantes de perro. 100x.

Estas clulas son similares en apariencia


a los neutrfilos normales pero tienen un
dimetro ms de dos veces mayor. Son
ms frecuentes en gatos e indican
igualmente un dao txico.

Clulas con ncleo en anillo


Los neutrfilos con ncleo en anillo son
caractersticos de procesos spticos e
indican un dao txico mximo.

Granulocitos inmaduros

Figura 7. Ejemplo de proceso txico en sangre canina. en la


Dentro de las formas inmaduras de granulocitos podemos diferenciar entre las clulas bandadas o
cayados, metamielocitos y mielocitos (figuras 1 y 8). La aparicin de granulocitos inmaduros en el frotis
sanguneo se denomina desviacin a la izquierda. Este hallazgo se asocia normalmente a un aumento
en el reclutamiento medular de granulocitos por mayores necesidades orgnicas debido a procesos
inflamatorios agudos. De ah que en la mayora de las ocasiones la aparicin de granulocitos inmaduros
se acompae de leucocitosis (desviacin a la izquierda regenerativa).

Por el contrario, cuando el nmero de formas inmaduras supera a las formas maduras o bien el 10% de
los neutrfilos es bandado en un animal con neutropenia, se habla de desviacin a la izquierda
degenerativa. sta ltima acontece cuando la mdula sea ha agotado las reservas de clulas maduras
pero an contina el requerimiento de clulas defensivas. A veces se puede constatar una muy marcada
desviacin a la izquierda conjuntamente con grave neutrofilia. Este hecho se denomina reaccin
leucemioide y es caracterstico de procesos muy purulentos y graves (como ejemplo dogmtico de
enfermedad que provoque esta respuesta en pequeos animales cabra citar la piometra).

Anomala de Pelger-Hut
Se trata de una alteracin gentica caracterstica de ciertas razas (Pastor Australiano, Coonhound,
Foxhound, etc.), en la que los granulocitos presentan fallo a la hora de segmentar el ncleo. Para
diferenciar esta alteracin de una grave desviacin a la izquierda tenemos que comprobar el aspecto de
la cromatina, ya que si aparece empaquetada se tratara de clulas maduras, independientemente de su
hiposegmentacin.

Neutrfilos hipersegmentados
Son clulas envejecidas que presentan 5 o ms lobulaciones y que se pueden encontrar en animales
con hiperadrenocorticismo o corticoterapia crnica, as como en procesos que cursan con neutrofilia
prolongada (piometra). Este cambio tambin se denomina desviacin a la derecha.

Linfocitos reactivos
Son linfocitos activos que estn produciendo elementos inmunes, presentan la cromatina poco
compactada, citoplasma muy basfilo y un caracterstico halo plido perinuclear que se corresponde con
el aparato de Golgi (figura 9). No son especficos de ninguna enfermedad y nicamente indican una
respuesta inmune activa. en algunas ocasiones se consideran las clulas plasmticas como linfocitos
reactivos plasmacitoides, si bien este tipo celular se halla raramente en frotis sanguneos. El aspecto de
las clulas plasmticas es el mismo que el descrito, pero se trata de clulas de mayor tamao y que a
veces presentan inclusiones citoplasmticas vacuolares denominadas cuerpos de Russell.

Es esencial diferenciar estas formas reactivas de los linfoblastos, los cuales son caractersticos de
procesos leucmicos. La diferenciacin en funcin de la morfologa puede ser muchas veces
complicada y requerir el diagnstico de un patlogo entrenado. Sin embargo, como regla genrica,
hemos de considerar que, an cuando el proceso frente al que se produce la respuesta sea grave, el
nmero de linfocitos reactivos por preparacin es mucho menor que el nmero de linfoblastos en las
leucemias linfoides (en este ltimo caso los linfoblastos son la poblacin predominante en el frotis
sanguneo).

Linfoblastos
Normalmente estas clulas no aparecen en sangre circulante, y su presencia es indicativa de leucemias
o linfomas en fase leucmica. Son clulas de mayor tamao que los linfocitos, ms basfilas y con un
ncleo grande con cromatina poco compactada; pueden observarse claramente uno o varios nucleolos.
A veces podemos observar figuras mitticas (con la cromatina divida y separada), formas aberrantes,
etc.

Mastocitos
Los mastocitos se reconocen por un granulado rosceo que ocupa prcticamente todo su citoplasma e
incluso en algunas ocasiones con el ncleo oculto. Son muy infrecuentes en frotis sanguneos de
animales sanos y su aparicin masiva se suele asociar a mastocitosis sistmica (subtipo de leucemia).

Figura 8. Ejemplo de granulocito txico por un proceso de sepsis. en Figura 9. en la fotografa aparecen dos neutrfilos (flechas normales)
la imagen se puede apreciar un neutrfilo bandado con numerosas y dos linfocitos. Se ha de destacar la diferencia entre un linfocito
vacuolizaciones citoplasmticas debidas a dao a nivel lisosomial. inactivo (asterisco) y un linfocito activo (flecha con doble cola), el cual
Tincin de Wright sobre sangre canina. 100x. presenta un ncleo ms irregular, con cromatina menos compacta,
citoplasma ms abundante y basfilo, as como una zona clara
perinuclear. Tincin Giemsa sobre sangre felina. 100x.

Inclusiones celulares en los leucocitos

Las inclusiones que nos podemos encontrar dentro de los leucocitos son las siguientes:
Restos fagocitados. en el citoplasma de monocitos y neutrfilos podemos observar tanto restos
celulares como pigmentos. Como ejemplo de estos ltimos cabe mentar la hematoidina y hemosiderina
(color negruzco o pardo refrctil), que aparecen despus de que la clula fagocite eritrocitos. su
presencia es caracterstica de anemias hemolticas o inflamaciones graves.
Moquillo canino. Los cuerpos de inclusin del moquillo canino, patognomnicos del proceso, pueden
aparecer tanto en glbulos rojos como en blancos. Se trata de cuerpos ovales o redondeados,
eosinfilos, que pueden variar desde uno nico a una pareja en el citoplasma de linfocitos y monocitos.
Cuando aparecen en los neutrfilos se suelen ver ms basfilos. en eritrocitos aparecen como
estructuras redondeadas de color azul plido. Es ms comn en estadios iniciales de la enfermedad.
en perros que padecen Ehrlichia canis se puede observar dentro de los linfocitos y monocitos una
mrula durante las fases tempranas de la infeccin. Son estructuras citoplasmticas redondeadas de
color rosado a lila.
Hepatozoon canis tambin puede provocar la aparicin de inclusiones en neutrfilos y monocitos
caninos. Sin embargo, en esta enfermedad, aun cuando la infeccin es grave, las inclusiones aparecen
de manera escasa. El gametocito de este organismo es incoloro y desplaza el ncleo y el citoplasma de
la clula hospedadora.

Citologa sangunea en pequeos animales. Hallazgos ms comunes y su


interpretacin (y V)
Alteraciones cuantitativas de la serie blanca
Martes 06 de noviembre de 2012, 12:17h

En esta ltima parte de la revisin trataremos las principales alteraciones cuantitativas que
pueden aparecer en la serie blanca haciendo igualmente mencin de los procesos tumorales
(leucemias) de la misma. Al tratarse de una revisin eminentemente clnica y concisa, los autores
remiten al lector a la bibliografa para obtener una visin ms profunda de este ltimo tema.

Prez-cija, RA
Estepa, JC
Mendoza, FJ
Dpto. Medicina y Ciruga Animal. Facultad de Veterinaria
Universidad de Crdoba (Espaa)
Imgenes Argos

La evaluacin citolgica de la sangre es una importante herramienta diagnstica para el veterinario, y es


de uso cada vez ms frecuente en la prctica clnica diaria de pequeos animales.

El estudio de extensiones o frotis de sangre perifrica es fundamental para la valoracin de la mayora


de pacientes y, de hecho, se ha instaurado como una tcnica rutinaria en los procedimientos
diagnsticos veterinarios.
Alteraciones cuantitativas de la serie blanca

en la tabla 2 se muestran los principales procesos que afectan a la serie blanca en pequeos animales.
junto con los Hallazgos que los acompaan en la extensin sangunea, as como las causas ms
comunes de los mismos.

Dentro de las alteraciones cuantitativas en el nmero de glbulos blancos se ha de diferenciar entre


aquellas que afectan a toda la poblacin leucocitaria (leucocitosis y leucopenia) y aquellas donde
nicamente un subtipo celular es el que sufre un aumento o reduccin en su nmero. Sin embargo, al
ser los neutrfilos la poblacin ms numerosa en la sangre perifrica, tanto de perro como de gato, la
mayora de las leucocitosis y leucopenias son consecuencia de una neutrofilia y neutropenia,
respectivamente.
Neutrofilia
El aumento en el nmero de neutrfilos sanguneos puede aparecer de manera fisiolgica y por cortos
periodos de tiempo en respuesta al estrs (a excepcin del gato, donde este hecho provoca linfocitosis y
no neutrofilia). De manera no fisiolgica, la neutrofilia suele aparecer secundaria a infecciones o
inflamaciones agudas, y de manera menos frecuente a niveles elevados de corticoides. Para dirimir la
causa de la neutrofilia hemos de considerar si es continua o no (el estrs provoca picos de neutrofilia
que desaparece en pocas horas), as como la existencia de cambios morfolgicos en los neutrfilos
(desviacin a la izquierda y/o cambios txicos), los cuales son tpicos de procesos infecciosos
localizados y no ocurren en la neutrofilia por hipercorticismo. De manera excepcional, en el Setter
Irlands existe un sndrome autosmico recesivo que cursa con neutrofilia y se acompaa por defectos
funcionales en dichas clulas.

Neutropenia
Normalmente la neutropenia es la principal causa de leucopenia en pequeos animales y es
caracterstica de procesos que cursan con inmunodeficiencia (en la inmunodeficiencia felina la
neutropenia es un hallazgo constante en animales infectados). en este caso, al existir una aplasia
medular, la neutropenia se acompaa de una cada en el resto de lneas celulares.

Podemos encontrar neutropenia igualmente en cuadros de anorexia, pirexia y en cuadros


gastroentricos (es muy tpica de infecciones por parvovirus tanto canino como felino).

Tambin podemos observar neutropenia por el uso de frmacos con efecto mielosupresor y en
determinados casos de leucemias mielocticas agudas y sndromes mielodisplsicos (leucemia felina).

en el caso de perros de raza Collie de capa gris plateada existe un proceso denominado hematopoyesis
cclica que cursa con fases de neutropenia seguidas por neutrofilias con desviacin a la izquierda
regenerativa. Tambin en el Schnauzer Gigante, debido a malabsorcin de vitamina B12, aparece
neutropenia junto con hipersegmentacin de los neutrfilos y anemia arregenerativa normocrmica y
macroctica.

en el caso especfico del gato, podemos encontrar animales con neutropenias leves (1.800 a 2.300/L)
durante largos periodos de tiempo sin que exista una causa patolgica subyacente.

Linfocitosis
Es caracterstica de tres procesos: neoplasias linfoides, infecciones crnicas con estmulo antignico
prolongado (leishmaniosis, babesiosis, ehrlichiosis) y secundaria a estrs en el caso del gato. Para
poder diferenciar entre los dos primeros procesos se tiene que constatar si la poblacin predominante es
de linfocitos reactivos o de linfoblastos, para lo cual es fundamental la evaluacin de la citologa
sangunea. Respecto a la respuesta a estmulos antignicos prolongados, cabe destacar que, sobre
todo en el perro, las vacunaciones provocan una linfocitosis moderada durante el periodo posvacunal a
base de linfocitos reactivos. Igualmente, un animal con ehrlichiosis crnica muestra una linfocitosis muy
marcada (aparte de otros sntomas en el frotis sanguneo, como trombocitopenia).
Por ltimo, se ha descrito que el hipoadrenocorticismo felino cursa con linfocitosis.

Linfopenia
Es un hallazgo bastante comn e inespecfico, y constituye uno de los Hallazgos ms frecuentes en
cualquier animal hospitalizado o enfermo. Suele aparecer como consecuencia de un aumento de
corticoides endgeno (tpico leucograma de estrs, con neutrofilia y linfopenia) o exgeno, por estrs
prolongado o por enfermedades vricas que conllevan aplasia medular (acompandose de leucopenia
generalizada), como por ejemplo en casos de parvovirosis canina, moquillo, hepatitis vrica canina,
peritonitis infecciosa felina, leucemia felina o inmunodeficiencia felina. Tambin se describe en casos de
enteropata con prdida de protena, entre otros.

Monocitosis
De forma genrica es un hallazgo bastante inespecfico, y que normalmente acompaa a la neutrofilia.
Se suele asociar a cuadros donde aparece un dao tisular muy extenso y grave o bien a procesos
piogranulomatosos.

Eosinofilia
Principalmente es un hallazgo relacionado con procesos alrgicos o parasitarios. Por ejemplo, se
describe una eosinofilia marcada en animales con dermatitis atpica por picadura de pulgas, complejo
eosinoflico del gato, endoparasitosis gastrointestinales, etc. en el caso de los parsitos, nicamente
observaremos eosinofilia durante la migracin tisular de las formas parasitarias, y no existe cuando el
adulto est libre en la luz intestinal. Tambin aparece eosinofilia en las leucemias eosinoflicas, aunque
stas son raras en Medicina Veterinaria.

Basofilia
Es bastante rara y comparte etiologa con la eosinofilia, ya que suelen cursar juntas. Puede encontrarse
de manera secundaria a alergias, dirofilariosis, mastocitosis sistmica, leucemia basoflica, etc.

Leucemias

Bajo el trmino de leucemia se conoce un amplio rango de procesos, que tienen en comn el hecho de
que se trata de neoplasias que afectan a las clulas progenitoras sanguneas. Pueden aparecer
alteraciones tanto a nivel de la mdula sea como en sangre circulante.

Los dos subtipos ms comunes en Veterinaria son las leucemias linfoides y las mieloides o mielocticas
(que a su vez se pueden subdividir segn la poblacin afectada en leucemias granulocticas,
monocticas, megacariocticas y eritrocticas).

Es esencial el estudio citolgico de sangre perifrica a la hora de diagnosticar las leucemias as como
para diferenciar leucemias mieloides de linfoides, cuyo tratamiento es totalmente diferente. Sin embargo,
en todas ellas, se hace necesario acompaarlo con un estudio citolgico de la mdula sea e incluso, a
veces, para la correcta tipificacin del proceso, se requieren estudios inmunocitoqumicos.

De forma general, podemos sospechar de un problema de leucemia cuando se observan figuras


mitticas, atpicas o bizarras en los leucocitos de una extensin sangunea. Sin embargo, tambin
existen leucemias que nicamente se presentan con un aumento persistente de un tipo celular sin que
exista explicacin evidente (por ejemplo, la leucemia linfoctica crnica).

La mayora de los pequeos animales con leucemia presentan una leucocitosis persistente, tratndose
la mayora de leucocitos neoplsicos. El subtipo predominante depender del tipo de leucemia del
animal.

en la mayora de los casos, esta leucocitosis a base de clulas neoplsicas se suele acompaar con
una eritropenia y trombopenia, si bien, a veces, aparecen tambin alteraciones en estas lneas celulares
(macrocitos, megatrombocitos, eritrocitos nucleados, etc.), lo cual indicara una alteracin generalizada
en la mdula sea. Normalmente no se observan cambios txicos en los leucocitos neoplsicos.

Leucemias linfoides
Hemos de considerar que hasta el 10% de los linfomas slidos (sobre todo en la forma multicntrica y
usualmente en pacientes caninos) pueden provocar linfocitos leucmicos circulantes y, por tanto,
compartir Hallazgos citolgicos con leucemias linfoides. Las leucemias linfoides ms frecuentes en
pequeos animales son la leucemia aguda linfoblstica (LAL) y la leucemia crnica linfoctica (LCL).
LAL. Afecta ms frecuentemente a animales jvenes o de edad media. Las clulas circulantes son del
tipo linfoblasto con ncleos ovales a irregulares, cromatina reticular y una cantidad moderada de
citoplasma basfilo. Se pueden distinguir igualmente uno o ms nucleolos. Este tipo de leucemia es
frecuente en felinos (asociada al virus de la leucemia felina) y ms rara en perros. El hallazgo de estas
clulas tumorales circulantes se acompaa de una anemia arregenerativa con neutropenia y
trombocitopenia debido a que las clulas tumorales invaden la mdula sea.
LCL. Las clulas circulantes son similares a linfocitos maduros, aunque suelen presentar citoplasma
muy oscuro y de tamao muy variable. ms llamativo que el cambio morfolgico es sin duda el
cuantitativo, pues dichas clulas son muy numerosas. El animal presentar leucocitosis con linfocitosis y
neutropenia y debido a la accin tumoral en la mdula sea, anemia arregenerativa y trombocitopenia.
Este proceso aparece tanto en el perro como en el gato (en este ltimo no suele estar asociado a
FeLV).

Leucemias mieloides
Entre las leucemias mieloides, las ms comunes son las agudas. Segn la lnea celular afectada se
pueden diferenciar varios procesos:
Leucemia aguda granuloctica. Predomina en animales jvenes, sobre todo en el perro. Se caracteriza
por leucocitosis grave, conformada por numerosas formas inmaduras parecidas a mieloblastos,
neutrfilos bandados gigantes y metamielocitos. Se pueden observar clulas an ms inmaduras que
presentan una cromatina muy poco compacta con un citoplasma amplio y granulado eosinoflico.
Leucemia aguda mielomonoctica. Las clulas leucmicas presentan caractersticas tpicas de los
monocitos. Es la ms frecuentemente descrita entre las leucemias mieloides en el gato.
Mielosis eritrmica o eritroleucemia. en este tipo de leucemia la serie roja es la tumoral. Es un proceso
ms comn en el gato que en el perro y cursa con una anemia no regenerativa grave y un elevado
nmero de eritrocitos nucleados circulantes. A veces se acompaa de anisocitosis (macrocitosis).
Unos procesos muy relacionados con las leucemias mieloides son los sndromes mielodisplsicos.
Estos sndromes cursan con citopenias y anomalas en la maduracin de una o varias lneas celulares. A
excepcin del gato (por infeccin con virus de la leucemia felina o virus de la inmunodeficiencia felina),
estos procesos mielodisplsicos son raros en Veterinaria.

Bibliografa disponible en www.argos.grupoasis.com/bibliografias/citologia119.doc

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