MICROSCOPIA I Y II.

Manuela Gil Berrio, Aura Mariana Gmez, Lina Marcela Suarez, Luisa Fernanda Taborda.

INTRODUCCION.

La microscopa es la tcnica que nos permite observar objetos que por su tamao no
pueden ser percibidos a simple vista por el ojo humano, esta observacin puede llevarse
a cabo por medio del microscopio siempre y cuando se haga un buen uso de ste; la
invencin del microscopio se le atribuye a Zacharias Janssen, en el ao 1590. Desde la
aparicin de primer microscopio y gracias al avance tecnolgico, con el paso del tiempo
se han creado variedad de microscopios, entre los cuales se encuentran: el microscopio
compuesto, microscopio digital, microscopio fluorescente, microscopio electrnico y
microscopio estreo. En estas prcticas de microscopia utilizamos el microscopio
compuesto que consta de dos sistemas de lentes que nos permiten proyectar la imagen.

Antes de realizar cualquier prctica de microscopa, se debe conocer el microscopio, sus

partes y la funcin de cada una de estas, con el propsito de dar un uso correcto al
mismo, esto nos permitir conocer como se hace un montaje en fresco y cuando es
necesario utilizar el aceite de inmersin.

La funcin del microscopio no solo se reduce a la proyeccin de imgenes ampliadas de

objetos diminutos, ste tambin nos permite realizar clculos que son tiles para
determinar la forma, el tamao y dems caractersticas de un objeto especfico. El poder
de aumento, poder de resolucin y el campo visual, son conceptos claves a la hora de
realizar una prctica de microscopa.

Gracias al microscopio se han dado importantes avances cientficos ya que ha permitido

al hombre estudiar algunos microorganismos y descubrir cules de estos son perjudiciales
y cuales son beneficiosos o necesarios para el organismo de los seres vivos y para el
ambiente. Adems se ha podido estudiar la composicin de la sangre y por medio de esta
determinar factores genticos que pueden llegar a explicar las anomalas presentes en
determinados individuos.

Sin la ayuda del microscopio posiblemente se presentara una tasa de mortalidad global
muy elevada, debido a que el hombre no tendra la capacidad de observar y estudiar los
agentes patgenos que da a da se presentan en el medio cambiante en el cual se
desarrollan las poblaciones y por lo tanto no sabra a qu se est enfrentando y por ende
no sabra cmo combatirlo, y al no tener las herramientas o los conocimientos necesarios
para actuar se quedara simplemente estupefacto observando como su entorno
evoluciona no solo para bien sino en contra de l mismo.

Debemos estar agradecidos y conscientes de los beneficios que trae para la sociedad en
general el microscopio, siempre y cuando este sea utilizado con fines investigativos y
cientficos en pro del desarrollo y el mejoramiento de la calidad de vida de la humanidad.
MATERIALES Y METODOS.

MICROSCOPIA I:

Microscopio compuesto.
Portaobjetos y cubreobjetos.
Hilos de color.
Goteros.
Toallas de papel absorbente.
Papel delgado con letras impresas por un solo lado.

Con los materiales mencionados anteriormente se realiza dos montajes en fresco en

primer lugar de la hebra de hilo y en segundo lugar del papel delgado con letras impresas,
ste montaje se hace sobre un portaobjetos, al cual se le echa una gota de agua, acto
seguido se pone la hebra de hilo sobre la gota en uno de los montajes y en el otro
montaje se coloca de igual manera el papel con la letra impresa, se tapan con un
cubreobjetos. Estos montajes los colocamos en la platina de tal manera que queden
ajustados al carro, y se suben stos completamente con ayuda de la perilla macromtrica;
regulamos la luz y enfocamos las imgenes primero con el objetivo 4x, luego con el
objetivo 10x y por ltimo con el objetivo 40x, ajustando cada vez su nitidez con la perilla
micromtrica y se procede a observarlo con el microscopio compuesto, con cada uno de
sus objetivos:

Hilo de color:

Objetivo 4x: La perspectiva visual de la hebra de hilo cambia, se ve aumentada su

estructura y se puede apreciar como una especie de trenza despeinada, con hebras que
salen de ella y la forma del hilo deja de parecer lisa y uniforme para verse gruesa y
desaliada, adems se pueden observar pequeas burbujas de agua a su alrededor.
Objetivo 10x: Se pueden observar con mayor detalle las fibras del hilo, pero mas
delgadas, y se puede ver como todas las hebras parece seguir un patrn al momento de
compactarse y formar la trenza vista con el objetivo 4x, siguen sobresaliendo fibras
sueltas de la estructura trenzada y se siguen observando loas burbujas de agua a su
alrededor.

Objetivo 40x: Se observa con mayor detalle las fibras que componen el hilo, y podemos
enfocar una sola de ellas que constituye la hebra de hilo, en dicha fibra se pueden
apreciar gotas de agua muy pequeas que parecen estar adheridas a ella. Con este
objetivo se observa con mucho aumento y mayor nitidez.
Papel delgado con letras impresas:

Objetivo 4x: Podemos observar la letra un poco borrosa, pero lo ms impactante es que
su orientacin inicial no es la misma que la que observamos con el microscopio, pues se
ve su orientacin invertida, esto se debe a la forma convexa del lente del microscopio este
fenmeno se da (Por qu los microscopios compuestos invierten las imgenes?)
Despus de que la luz pasa a travs de la muestra, pasa el lente objetivo y pasa el punto
focal del lente objetivo, as la imagen formada se invertir. Esta imagen es el objetivo que
se ve a travs de la lente del ocular. ste acta como un aumentador sencillo y alarga la
imagen creada por el lente objetivo. Como resultado, la imagen que se ve a travs de un
microscopio compuesto se invierte al compararla con la muestra que se est
examinando.1
Objetivo 10x: Se observa la forma de la letra, con los contornos an marcados o
delineados, pero con la diferencia de que al verse ms grande y detallada la letra
podemos ver en su interior trazos de tinta bruscos; en la imagen tambin podemos
observar las burbujas de aire que hay en el agua y la textura del papel como si estuviera
en capas.
Objetivo 40x: En la perspectiva de la imagen ya no se distingue la forma de la letra y por
la cercana con la que se ve, se puede notar como la tinta esta distorsionada
permitindonos identificar en qu lugares del papel hay ms tinta.

Discusin de resultados:

Al comparar nuestro trabajo con una prctica realizada por otro grupo de estudiantes
montada a internet, obtuvimos los mismos resultados, no hay explicaciones muy
cientficas por el hecho de ser un trabajo para conocer el microscopio y de carcter
sencillo, los resultados obtenidos por el otro grupo de trabajo fueron los siguientes : En el
montaje del hilo el objetivo de 4X nos muestra imagen igual a la de un a lupa sencilla,
mientas que con el objetivo de 40X se observa el hilo sombreado, en forma de arco.

En el caso de la letra la imagen que vemos con cualquiera de los objetivos es invertida, es
decir la imagen no es real y es de mayor tamao, con el objetivo de 10X se observa que
color es ms claro y en el borde de la letra se muestra un pequeo sombreado de color
amarillo.

Pasando a los objetivos de 40X y 100X, parte de la letra se pierde el campo visual es
menor del cual hablaremos ms adelante; claramente se distingue una serie de colores
como: el rojo, el amarillo, el gris en algunas partes del papel y algunos puntos negros;
tambin se observa el pigmento del papel y su estructura2

Comparado con el trabajo de nosotros son muy similares y los resultados no varan de
forma importante.
MATERIALES Y METODOS.

MICROSCOPIA II:

Microscopio compuesto.
Portaobjetos y cubreobjetos.
Aceite de inmersin.
Goteros.
Toallas de papel absorbente.
Placas permanentes (de sangre).
Papel para limpiar lentes.
Tela suave para limpiar el microscopio.

La primera parte de la practica estuvo destinada al anlisis de algunos concepto de

microscopia, tales como el poder de resolucin que nos proporciona la nitidez de la
imagen, al realizar la ecuacin para determinar el poder de resolucin nos dimos cuenta
que entre ms pequeo sea el resultado habr ms nitidez en la misma; el poder de
aumento que es la capacidad que tiene el microscopio compuesto en este caso de
producir una imagen ampliada de un objeto observado; el campo visual es el rea de lo
que vemos a travs de los oculares, esto lo pudimos comprobar empleando una hoja
milimetrada que fue observada por cada uno de los objetivos, concluyendo que mientras
menor es el poder de aumento del objetivo, mayor es el campo visual y a medida que se
observa con un objetivo de mayor aumento se reduce el campo visual y el dimetro del
mismo.
Aprendimos a utilizar el aceite de inmersin empleando un montaje en seco para
observar una placa de sangre fijada (el montaje en seco se utiliza para examinarlas
partculas atrapadas en los filtros de membrana transparente). Lo primero que hicimos fue
ubicar la placa de sangre en la platina del microscopio ajustndola con el carro, luego se
sube este con la perilla macromtrica, se ajusta la luz y se empieza a enfocar con la
perilla micromtrica con cada uno de los objetivos; como novedad vamos a observar con
el objetivo de 100x, antes de pasar a este debemos aplicarle a la placa de sangre una
gota de aceite de inmersin para que sta entre en contacto con el lente del objetivo y
evite que se presenten rayones tanto en la placa como en el lente, adems para el evitar
el paso de la luz directa a travs del objetivo.

Placas permanentes (de sangre):

Tomado de: http://www.public-domain-image.com/free-images/science/microscopy-

images/malaria-plasmodium/stained-microscope-slide-is-displaying-the-appearance-of-
both-a-thick-and-thin-blood-film-ready-for-examination.jpg

Objetivo 10x: Podemos observar unos pequeos puntos o cirulos muy abundantes de
color morado y dispersos por todo el campo visual, estos crculos son lo que conocemos
como glbulos presentes en la sangre, algunos de estos crculos se ven unidos con otros
como formando una cadena.

Objetivo 40x: Ac podemos ver que los glbulos son de mayor tamao, esto se debe a
que este objetivo permite verlos ms de cerca y detectamos que las cadenas visualizadas
anteriormente al parecer se unieron para formar un circulo de mayor dimensin, sta
podra ser una explicacin, aunque tambin pudo haber ocurrido que al cambiar de
objetivo y acercar ms la imagen se vean menor cantidad de stos y con mayor nitidez.

Objetivo 100x: La observacin con este objetivo es algo totalmente nuevo, ya que
utilizamos para ello el aceite de inmersin y vimos como la forma de los glbulos se ve
modificada como una imagen a mayor escala que nos permite ver el contorno de un
circulo que sera el glbulo y en su centro otro circulo de un color ms oscuro; en los
objetivos anteriores se vean los glbulos ms separados y en este los podemos ver uno
as cerca de otro.

Discusin de resultados:

Lo que observamos en el microscopio al analizar la muestra de sangre fue fascinante, la

profesora nos explic que lo que veamos eran glbulos rojos, pero como no tenamos
unos conocimientos previos para entender del todo lo que vimos tuvimos que hacer una
investigacin, lo que vimos se puede explicar as:

(observacin de clulas sanguneas). Al microscopio se vern con un dominio

predominante los glbulos rojos, hemates o eritrocitos teidos de color rojo por la eosina.
No tienen ncleo y son ms delgados por el centro que por los bordes.
Los glbulos blancos o leucocitos se identifican fcilmente por la presencia de ncleo,
teido de morado por la hematoxilina. Hay varias clases de leucocitos:

1. Linfocitos: de tamao aproximado al de los glbulos rojos, tienen un solo ncleo

que ocupa casi todo el glbulo.

2. Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, ncleo

grande, redondo, son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis.

3. Polimorfo nucleares: ncleo fragmentado o arrostrado. Pueden ser eosinfilos, con

abundantes granulaciones teidas de rojo por la eosina, neutrfilos y basfilos.3

Tomado de: http://2.fimagenes.com/i/5/a/56/412_180832_5829250_368350.jpg

1. Anlisis de algunos conceptos bsicos de microscopa.

a. Poder de resolucin.

Podra usted, por tanto, ver separados con el microscopio compuesto dos puntos que
estn a 10 micrmetros entre s?

R/: Si, pues el microscopio compuesto puede ver objetos separados a una distancia
mnima de 0,2 micrmetros.

Y dos puntos que estn a 0,02 micrmetros?

R/: No, porque 0,02 micrmetros es una distancia que el microscopio compuesto no
puede ver.

Objetivos Poderes de resolucin

4X 3200
10X 1280
40X 492,3
 100X 256

Cmo puede relacionar los valores numricos de los poderes de resolucin obtenidos
para cada objetivo y las observaciones de las letras que acaba de hacer en 4X, 10X Y
40X? Cmo explica lo anterior?

R/: De acuerdo a la observacin de la letra y teniendo en cuenta los poderes de

resolucin podemos concluir que contradiciendo los resultados obtenidos con las formulas
(que dan nmeros muy pequeos), el poder de resolucin es mayor y se va
incrementando a la par con el objetivo utilizado. Esto nos permite observar con mayor
detalle el objeto estudiado.

b. Poder de aumento

Poder de aumento del objetivo Poder de aumento del ocular Aumento Total

4X 10X 40X
40X 10X 400X
100X 10X 1000X

c. Campo visual

Con cul de los tres objetivos (4X, 10X Y 40X) ve un rea ms grande de una de esas
letras?

R/: Se puede observar que con el objetivo 4X se aprecia un campo visual o rea ms
grande en relacin a los dems objetivos.

Con cul hay mayor poder de resolucin?

R/: Con el objetivo que se aprecia mayor poder de resolucin es con el de 40X.

Dimetro (d) del campo visual

Objetivo Dimetro (mm) rea (en mm2)

4X 4,5 15,89
10X 1,8 2,54
40X 0,45 0,15
100X 0,18 8,1x10-3

Qu relacin hay entre los poderes de aumento del microscopio compuesto y los valores
de los dimetros de los campos visuales?
R/: La relacin que existe entre los poderes de aumento del microscopio compuesto y los
valores de los dimetros de los campos visuales es inversamente proporcional, mientras
ms pequeo sea el poder de aumento ms grande ser el dimetro y el campo visual.

Y entre los poderes de aumento y las reas de los campos visuales?

R/: La relacin entre los poderes de aumento y las reas de los campos visuales es la
contraria, a mayor poder de aumento menor ser el rea y a menor aumento mayor rea.

Est de acuerdo esto cono las observaciones que acaba de hacer al mirar las letras en
4X, 10X Y 40X?

R/: Si estamos de acuerdo, estos valores concuerdan lgicamente con lo que vimos al
hacer el montaje en fresco de las letras, mientras ms aumentbamos el poder de
resolucin se vea ms ntido, pero solo se vea una pequesima parte de la letra, el
campo visual, el rea y el dimetro disminua notablemente.

2. Unidades utilizadas en mediciones microscpicas

ngstrom Ao
Nanmetro nm
Micrmetro um
Milmetro mm

Teniendo en cuenta los datos anteriores, resuelva los ejercicios siguientes:

a. A cuntos nanmetros equivale un milmetro? Y a cuantos nanmetros

equivale un ngstrom?

R/: un milmetro equivale a 1000000 nanmetros y un angstrom equivale a 0,1

nanmetros.

b. Una clula tiene un dimetro de 1.2 micrmetros Cunto medir ese dimetro
en ngstroms? Y en milmetros?

R/: este dimetro medir 12000 angstrom y 1,2x10-3 milmetros

 c. Si un microorganismo A tiene 120 micrmetros de largo y un microorganismo
B tiene1200 ngstroms, Cul de los dos tiene mayor longitud?

R/: el microorganismo de mayor longitud es el A.

3. Observacin con el objetivo de inmersin

a. Qu funcin cumple el aceite de inmersin?

R/: el aceite de inmersin se utiliza para evitar que el contacto entre el lente del
objetivo y la muestra observada sea directo, esto se hace con el objetivo de
prevenir rayones en ambas partes; adems el aceite de inmersin tambin ayuda
a la refraccin de la luz, para que este no pase directamente por el objetivo.

b. Por qu no utilizo para este enfoque alguna de las preparaciones en fresco que
hizo?

R/: no utilice este objetivo para observar ninguna de las preparaciones en fresco
hechas anteriormente porque este enfoque solo puede realizarse en montajes
secos para poder utilizar el aceite de inmersin, de no hacerlo as podramos
causarle daos tanto a la muestra analizada como al microscopio.
 PREGUNTAS

1. Convierta

a. 0.0025 mm en um y en Ao

R/: 0,0025 mm= 2,5 um. 0,0025 mm= 25000 A0

b. 5x10-3 nm en mm y en Ao
R/: 5x10-3 nm= 5x10-9 mm. 5x10-3 nm= 0,05 A0

c. 1300 Ao en nm, en um y en mm

R/: 1300 A0= 130 nm. 1300 A0= 0,13 um. 1300 A0= 1,3x10-4 mm

2. Escriba, de mayor a menor, los poderes de resolucin mximos aproximados del

microscopio compuesto, del microscopio electrnico y del ojo humano

R/: Microscopio compuesto= 1750

Microscopio electrnico= 350000

Ojo humano= 4,86

3. Cuntas veces es mayor el poder de resolucin mximo del microscopio

compuesto, comparado con el del ojo humano?

R/: el poder de resolucin del ojo humano es igual a 72 micrmetros, mientras que el de
un microscopio compuesto es 0,2 micrmetros, lo que quiere decir que es mayor el poder
de resolucin del ojo humano aproximadamente 360 veces.
 4. Determine, segn los poderes de resolucin mximos aproximados del ojo
humano, del microscopio compuesto y del microscopio electrnico, con cual o con
cuales de estos se pueden ver las siguientes estructuras:

Estructuras Promedios de medidas Ojo Microscopio compuesto Microscopio

humano electrnico

Virus del polio 300 Ao de dimetro x

Virus de la viruela 2500 Ao de dimetro x x
Ribosomas de 140 a 180 Ao de dimetro x
eucariotas
Escherichia coli 20000 Ao de largo x x
Mitocondrias 0.2 a 5 um de dimetro x x
Cloroplastos 5.8 um de dimetro x x
Glbulos rojos de 7.5 um de dimetro x x
mamferos
Paramecium 0.1 a 0.3 mm de largo x x x
caudatum
vulo humano 0.15 mm de dimetro x x x

5. Suponga que usted mira un microorganismo con el objetivo de 10X de su

microscopio Cuntas veces ms (o menos) se vera aumentado (o disminuido)
ese microorganismo si lo mira con el objetivo de 40X?

R/: este microorganismo se vera aumentado 4 veces si lo miro con el objetivo 40x

Objetivo 10x: At= 10x X 10x= 100x

Objetivo 40x: At= 10x X 40x= 400x

6. Se tiene dos microorganismos A y B que miden de largo 50 y 100 micrmetros,

respectivamente. Cul de los dos se ver aumentado mayor nmero de veces si
se observan con el objetivo de 10X de un microscopio?

R/: ninguno de los dos microorganismos presentara mayor aumento que el otro, pues,
aunque ambos tienen tamaos diferentes si se ven con el objetivo de 10x se aumentaran
igual cantidad de veces, pues el aumento del objetivo es estndar para cualquier objeto
que se observe con l.

7. Al observar una clula en su microscopio con el objetivo de 10X se pudo

determinar que tena un dimetro aproximado de 0.5 milmetros. Cul ser si
dimetro si se observa con el objetivo de 40X?

R/: 0,5/40= 0,0125.

El dimetro de esta clula al observarla con el objetivo de 40x ser igual a 0,0125
milmetros.

8. Un estudiante observo en esta prctica de laboratorio unja clula con el objetivo

de 10X y determino que su dimetro media una cuarta parte del dimetro de ese
campo visual.

a. Cunto mide la clula?

R/: la clula mide 0,16 mm2

d= X (dimetro del campo visual)

d= X 1,8= 0,455 mm (dimetro de la clula)

(r)2

(0,225mm)2 = 0,05 mm2 = 0,16 mm2 (rea de la clula)

b. Se observar completamente esa clula si se utiliz el objetivo de 40X?

R/: si se puede observar toda la clula ya que el campo visual del objetivo tiene un rea
igual al rea de la clula.

d= 18L/ 40= 0,45 mm

(0,225mm)2 = 0,16 mm2 (rea del campo visual objetivo 40x)

9. Al observar en un microscopio un microorganismo determinado, con el objetivo de

100X, un estudiante vio que ocupaba, a lo largo, dos veces el dimetro del campo
visual. Cunto mide de largo ese microorganismo?

R/: el microorganismo mide de largo 0,36 mm.

d= 18L/100= 0,18 mm (dimetro del campo visual)

Dimetro del microorganismo= 0,18mm X 2=0,36 mm

10. Un microorganismo mide 300 micrmetros de dimetro. Cuntos de ellos se

podran alinear en el dimetro de cada uno de los campos visuales de su
microscopio?

a. 4X _______
d= 4,5 mm. 45/0,3= 15. Se pueden alinear 15 microorganismos en este
dimetro.
b. 10X _______
d= 1,8 mm. 1,8/0,3= 6. Se pueden alinear 6 microorganismos en este dimetro.
c. 40X _______
d= 0,45 mm. 0,45/0,3= 1,5. Se puede alinear solo 1 microorganismo completo.
d. 100X _______
 d= 0,18 mm. 0,18/0,3= 0,6. No se puede alinear ningn microorganismo en este
dimetro.

Conclusin

Esta prctica nos permiti adquirir conocimientos acerca de la funcionalidad del

microscopio y esto nos ser muy til para el resto de nuestras prcticas de laboratorio.
Esta prctica nos proporcion informacin suficiente para reconocer al microscopio como
un elemento fundamental en el desarrollo humano, que nos permite realizar prcticas tan
simples como sta, pero que tiene gran valor porque nos permite ver ms all de lo que
normalmente percibimos, tambin nos permite hacer prcticas ms complejas como la
investigacin de una bacteria o de un determinado microorganismo y estudiar qu efectos
pueden traer para el individuo y si son negativos encontrar por medio de una
investigacin un mtodo para contrarrestar dichos efectos. Para finalizar, gracias al
microscopio se han desarrollado hechos trascendentales para los avances cientficos en
muchas de las ramas del conocimiento a lo largo de la historia.
Referencias:
1
Por qu los microscopios compuestos invierten las imgenes? [Internet].eHowTM. .
Fecha de acceso: 18 de agosto de 2016. Disponible en:
http://www.ehowenespanol.com/microscopios-compuestos-invierten-imagenes-
como_167592/
2
Laboratorio de microscopia [Internet].blogspot. Fecha de acceso: 18 de agosto de 2016.
Disponible en: http://laboratoriosbiolo.blogspot.com.co/
3
Observacin de clulas sanguneas [Internet]. Daniel Tomas. IES Abastos, Valencia.
Fecha de acceso: 18 de agosto de 2016. Disponible en:
http://www.mclibre.org/otros/daniel_tomas/laboratorio/Celulas_sanguineas/sangre.html