Professional Documents
Culture Documents
is-demetoksikurkumin Kurkumin tidak larut air, petroleum eter, dan heksana, cuk
up larut dalam enzena, klororform dan eter, dan larut aik dalam etanol dan ase
ton. Untuk mengekstraksi kurkuminoid dari tepung kunir, pelarut enzena mempunya
i keleihan sea dia hanya memawa sedikit pengotor dari kunir. Oleh karenanya,
pelarut ini digunakan untuk mengeakstraksi kurkumin dari pigmen-pigmen, dan jug
a dalam kromatografi (Srinivasan, 1953). 2. Adsoren Srinivasan (1953) telah men
coa eerapa jenis adsoren dalam prosedur kromatografi isolasi senyawa-senyawa
kurkuminoid, dengan memandingkan kekuatan adsorsinya, kecepatan pengemangann
ya, pemisahan dan kenampakan pita-pita pada
Praktikum Isolasi
128
kolom. Alumina dan magnesia cukup aktif, akan tetapi pita-pita tidak jelas dan
eerapa zat yang terserap tidak dapat dikeluarkan dari kolom dengan pelarut-pela
rut sederhana. Kalsium karonat, magnesium karonat, sodium karonat, tepung kan
ji dll mempunyai kekuatan adsorsi yang sangat rendah terhadap kurkumin. Silika
kering juga tidak memerikan hasil yang memuaskan, adsoren ini temus pandang
ila sudah kontak dengan pelarut sehingga kenampakan dan pemisahan pita kurang je
las. Akan tetapi ila silika dicampur dengan air seanyak 50 % erat maka dipero
leh hasil yang cukup memuaskan. 3. Reaksi dan Spektra Serapan UV-Vis. Reaksi sen
yawa kurkuminoid dengan eerapa pereaksi disimpulkan dalam Tael 1, dan data se
rapan UV-Vis.-nya dieerikan dalam Tael 2. Tael 1. Reaksi-reaksi Senyawa FeCl3
Asam orat Orange Kuning terang erfluoros ensi Asam oratoksalat Pink Orange d
an merah Pink dengan fluorosensi orange Natrium hidroksida 1% Merah Orange Asam
sulfat pekat Merah tua Merah orange
Kurkumin Demetoksi kurkumin Bisdemetoksi kurkumin
Coklat tua kemerah an -
Sumer: Srinivasan (1953)
Pereaksi-pereaksi: 1. Feri klorida larutan 1 % FeCl3 anhidrus dalam asam asetat
glasial. 2. Asam orat larutan 0,5 % dalam asam asetat glasial. 3. Asam orat-oks
alat 1 g asam oksalat, dan 0,5 g asam orat dilarutkan dalam 100 mL asam asetat
glasial. 4. Natrium hidroksida larutan erair 1 %. 5. Asam sulfat pekat.
Praktikum Isolasi
129
Tael 2. Data asorpsi Senyawa Kurkumin Demetoksikurkumin Bisdemetoksikurkumin S
umer: Srinivasan (1953) D. PROSEDUR 1. Penyiapan contoh Tepung kunir kering 25
g diayak dengan ayakan 80 mesh, disokletasi dengan petroleum eter (t.d. 40 sampa
i 60o) selama 3 jam. Residu di keringkan, dan selanjutnya disokletasi dengan 200
mL pelarut enzena selama 6 jam. Ekstrak yang diperoleh didiamkan selama satu m
alam disaring, dan dievaporasi sampai volume menjadi kurang leih 10 mL. 2. Pem
uatan Kolom Alat kromatografi yang digunakan adalah kolom kromatografi yang ter
uat dari gelas pyrex (2,2 cm x 120 cm). Kolom diisi dengan enzena dan disumat
dengan gelas wool, kemudian sumat terseut ditekan ke awah sampai ujung. Buur
silika gel yang diuat dalam pelarut enzena dituang ke dalam kolom dan iarkan
mengendap. Ketinggian silika gel dalam kolom diuat hingga 45 cm. Kira-kira 80
g silika gel yang diperlukan untuk memuat kolom setinggi ini. Untuk menghomogen
kan paking, maka pada ujung atas kolom dieri tekanan 20 sampai 30 cm Hg. Keting
gian pelarut di atas permukaan paking adalah sekitar 2-4 mm. 3. Pengisian kolom
dan elusi Ekstrak kunir dimasukkan ke dalam kolom (gunakan pipet) samil keran k
olom diuka pelan-pelan, dan ketika semua ekstrak sudah masuk, enzena yang erk
esetimangan dengan air ditamahkan ke dalam kolom untuk mengemangkan kromatogr
am. Pada ujung atas kolom dierikan tekanan sehingga kecepatan alir eluent sekit
ar 3 mL/menit. Di sini terjadi pemisahan pita-pita dalam kolom. maks 430 425 420
Etano 1560 1580 1640 Bnsna maks 420 415 410 1225 1350 1640
Praktikum Isolasi
130
4. Pmisahan Fraksi-fraksi Pngmbangan dilanjutkan dngan plarut bnzna. Elua
t yang yang kluar dari kolom ditampung sbagai pial-pial (10 mL). Stiap pial d
iuji dngan KLT, dan pial-pial yang nilai Rf-nya sama disatukan, dipkatkan, did
inginkan dalam lmari s, disaring, dicuci dngan bnzna dingin, dan dikringka
n. Stlah dirkristalisasi dari tanol maka diprolh kristal murni. 5. Idntif
ikasi fraksi-fraksi Komponn yang prtama kluar dari kolom adalah minyak volati
l kunir yang masih trsisa dari kstraksi dngan ptrolum tr, dan trkumpul s
bagai suatu fraksi kuning pucat. Jika plarut diuapkan maka akan trtinggal rs
idu munyak yang brwarna kuning dan brbau khas kunir. Fraksi ini tidak mmpunya
i batas darah yang jlas. Fraksi-fraksi slanjutnya adalah kurkumin, disusul d
ngan dmtoksi kurkumin dan bisdmtoksi kurkumin. Ujilah smua fraksi dngan d
ngan praksi-praksi warna sprti dalam Tabl 1. Slanjutnya lakukan analisis
spktroskopi. =====
Praktikum Isolasi
131
PERCOBAAN 9 ISOLASI STRYCHNINE AND BRUCINE DARI KECAMBA Strychnos nux vonica
N N O O
CH3O CH3O
N N O O
Strychnin
Brucin
A. PENDAHULUAN Strychinin, C21H22O2N2, dan brucin, C23H26O4N2, prtama-tama di
isolasi olh Plltir dan Cavntou pada tahun 1819 dari kcamba dan kulit Stryc
hnous nux vonica. Kcamba Strychnous nux vonica mngandung 3% alkaloid, lbih dar
i sparuhnya mrupakan strychnin, alkaloid yang lain brupa brucin, colubrin,
vomicin, dan psudostrychnin. Bbrapa tahun kmudian snyawa-snyawa trsbu
t brsama alkaloid lain ditmukan dalam spsis Strychnos Australia dan Kongo. S
trychnin sangat pahit; satu bagian strychnin mampu mmbrikan rasa pahit 500.0
00 bagian air. Snyawa ini sangat bracun dan digunakan sbagai obat kuat dan p
rangsang. Brucin lbih pahit daripada strychnin, digunakan sprti strychnin
ttapi aksinya lbih lmbut shingga digunakan scara luas untuk dnaturasi tan
ol. B. MAKSUD PERCOBAAN 1. Mmprknalkan salah satu cara mngisolasi snyawa go
longan alkaloid. 2. Mngisolasi strychnin dan brucin dari kcambah kacang, dan
mngubahnya mnjadi snyawa-snyawa sulfatnya. C. PRINSIP PERCOBAAN Di dalam pr
osdur brikut, suatu campuran strychnin dan brucin dikstraksi dngan klorofo
rm dari bubuk kacang-kacangan yang tlah diolah dngan kalsium hidroksida slama
smalam. Kristalisasi campuran dari tanol 50% mnghasilkan kristal strychnin,
yang slanjutnya diubah mnjadi snyawa sulfatnya. Brucin yang lbih larut dal
am alkohol di prolh dari mothr liquor, juga sbagai sbagai sulfatnya.
Praktikum Isolasi
132
D. BAHAN DAN ALAT 1. Alat-Alat : Ekstraktor Soxhlt Prangkat alat distilasi vak
um
2. Bahan-Bahan : aston asam astat glasial kalsium hidroksida kloroform tanol
95% asam nitrat kcamba Nux vomica kalium dikromat natrium karbonat natrium hidr
oksida asam sulfat
D. CARA KERJA Sbanyak 200 g kacang tanah dicampur dngan 200 mL suspnsi kalsiu
m hidroksida 10% dalam air, dan dibiarkan slama smalam pada tmpratur kamar.
Stlah pngringan dngan udara, bubur trsbut dikstraksi dngan kloroform da
lam sbuah kstraktor Soxhlt slama 3 jam. Larutan kloroform kmudian dikstrak
siu bbrapa kali dngan larutan 5% asam sulfat, dan slanjutnya dibasakan dnga
n larutan 10% natrium hidroksida. Stlah pndinginan, kristal disaring, ditamba
hkan 1,5 volum tanol 50%, dan campuran dirfluks sampai hampir smua padatan t
lah larut. Stlah pnambahan sdikit karbon aktif, laruatn disaring panas-pana
s dan dibiarkan slma smalam. Kristal strychnin disaring dan dicuci dngan sd
ikit tanol 50%. Filtrat dan cairan cuciannya disimpan untuk isolasi brucin.
Pmbuatan Strychnin Sulfat Strychnin kotor dilarutkan dalam 9 volum air mndi
dih, dan ditambahkan planplan dngan larutan 15% asam sulfat, diaduk hingga s
dikit asam trhadap mrah Congo. Ditambahkan karbon aktif, larutan dirfluks sl
ama 1 jam, kmudian disaring
Praktikum Isolasi
133
panas-panas. Snyawa sulfat yang mngkristal pada pndinginan disaring dan dicuc
i dngan air dingin. Pmurnian Strychnin Strychnin sulfat dilarutkan dalam 15
volum air pada 80oC dan dintralkan dngan larutan 10% natrium karbonat; stla
h pnambahan karbon aktif, larutan disaring panas-panas. Strychnin mngndap pa
da pnambahan larutan natrium karbonat dan pndinginan. Endapan disaring dngan
corong Buchnr dan dicuci dngan air dingin. Rkristalisasi dari tanol mmbrik
an hasil yang mmpunyai titik llh 286288oC. Spktra UV strychnin
EtOH 240m ( og 4,15); 270(3,92); 294(3,72) maks
Spktra srapan UV strychnin sangat mirip spktra hksahidrokarbazol. Brucin S
ulfat Filtrat yang trsisa stlah pmisahan strychnin, dipkatkan dalam vapor
ator di atas pnangas air hingga hampir smua alkohol tlah dipindahkan. Rsidu
diasamkan dngan asam sulfat ncr hingga pH 6 dan kmudian dipkatkan mnjadi 3
-4 mL. Stlah disimpan dalam lmari pndingin slama smalam, hasilnya disaring
dan dicuci dngan air dingin. Bucin sulfat dimurnikan dngan cara mlarutkan d
alam 4.5 volum akuads panas dan didihkan dngan sdikit karbon aktif slama sa
tu jam. Disaring panas-panas dan disimpan dalam lmari pndingin slama bbrapa
hari. Brucin yang ditmukan dari sulfatnya dngan cara yang sama dngan strych
nin.; rkristalisasi dari larutan aston-air mngasilkan kristal yang titik ll
hnya 178oC. Catatan : harus hati-hati slama mngrjakan prcobaan ini. Tangan
harus dicuci brsih karna sifat racun yang kuat snyawa alkaloid ini.
======
Praktikum Isolasi
134
PERCOBAAN 10 ISOLASI EUGENOL DARI BUNGA CENGKEH
CH2CH=CH2
CH=CHCH3
OCH3 OH OH
OCH3
ugnol
isougnol
A. PENDAHULUAN
Fnilpropanid adalah snyawa fnol alam yang mmpunyai cincin aromatik dngan ra
ntai samping yang trdiri atas tiga atom karbon. Salah jnis golongan snyawa in
i mmpunyai pranan pnting dalam bau dan cita rasa atsiri tumbuhan. Biasanya f
nilpropna trdapat dalam fraksi minyak atsiri jaringan tumbuhan, brsama-sama t
rpna atsiri. Kduanya larut dalam lmak, jadi brbda dngan kbanyakan snyaw
a fnol. Bbrapa snyawa trsbut trsbar luas, sprti ugnol, yaitu kandung
an utama minyak cngkh, antol trdapat dalam anis dan adas (kduanya umbllif
ra), miristisin yang prtama kali diprknalkan sbagai kandungan pala, Myristi
ca fragnans dijumpai pula dalam tumbuhan umbllifra. Eugnol dan isougnol ad
alah pasangan isomr alil dan propnil. Pnggisomran bntuk alil k bntuk prop
nil dapat dilakukan di laboratorium, ttapi hanya trjadi pada kondisi drastis
(misalnya dngan basa kuat). Pngisomran dmikian itu kcil skali kmungkinann
ya trjadi pada kondisi normal swaktu isolasi (kstraksi dngan tr, dan sbag
ainya).
B. MAKSUD PERCOBAAN
1. Mmpknalkan salah satu mtod isolasi snyawa pnydap rasa (flavor). 2. M
ngisolasi ugnol dari bunga cngkh.
C. PRINSIP PERCOBAAN
Di dalam prcobaan ini, ugnol dngan snyawa-snyawa volatil lainnya dikstrak
si dari jaringan bunga cngkh dngan mtod distilasi uap. Campuran
Praktikum Isolasi
135
Eugnol dipisahkan dari fas air dngan mnggunakan plarut dikloromtana, yang
slanjutnya dikstraksi dngan larutan basa. Mlalui pngaturan pH campuran dng
an pnambahan larutan asam, ugnol dapat diisolasi dngan mnggunakan plarut d
ikloromtana kmbali sbagai pngkstraksi.
D. CARA KERJA Masukkan bungan cngkh k dalam labu alat bulat 500 mL yang bris
i 300 mL air, campuran didistilasi hingga diprolh distilat sbanyak 200 mL (ha
ti-hati, jangan mndidihkan labu sampai kring). Pindahkan distilat brminyak t
rsbut k dalam corong pisah,kstraksi dngan 2 x 30 mL dikloromtana dan cuci l
apisan organik dngan dngan 100 mL. Ekstraksi dikloromtana trsbut dngan 2 x
50 mL larutan natrium hidroksida 3 M, dan tambahkan asam pkat dngan cara tt
s-tts k dalam kstrak larutan basa hingga pH lbih rndah daripada 9, dan ks
traksi campuran sprti trsbut dngan 2 x 30 mL dikloromtana. Kringkan kstr
ak organik dngan MgSO4, saring k dalam labu vaporator dan pindahkan plarutny
a dngan vaporator rotary. Tntukan rkaman spktra produk yang diprolh dnga
n UV (dalam tanol 95%), IR (film), dan NMR (dalam CDCl3). Uji kmurnia produk d
ngan KLT (tr-ptrolum tr = 2 : 1 di atas plat silika), tampakkan noda dn
gan iodin. Uji kasaman produk trsbut dngan mngamati klarutan satu atau dua
tts dalam larutan natrium hidroksida dan larutan natrium bikarbonat. Uji kti
dak-jnuhan dngan larutan Br2. Anda dapat pula mmbandingkan bau khas produk d
ngan bahan obat-obatan gigi, tnggorokan, dan batuk yang brmrk dari pasaran.
====
Praktikum Isolasi
136
PERCOBAAN SINTESIS : PERCOBAAN 1 SINTESIS NITROBENZENA (NITROBENZOL)
+
HNO3
H2SO4
NO2
Praksi
: - bnzna - H2SO4 pkat . 60 mL . 80 mL
- HNO3 (b.j. 1,4) . 70 mL - Na2CO3, CaCl2 anhidrous
Pralatan
: - labu alas bulat 500 m - rlnmyr 1 L - rlnmyr kcil - corong pisah 1 L
- trmomtr 250 oC - pnangas air (watr bath) - pndingin udara .............
.................... 2 buah
............................................. 1 buah ..... 1 buah ....................
............ 1 buah . 1 buah
Prosdur
:
K dalam rlnmyr 500 mL dimasukkan 100 g (70 mL) HNO3 pkat lalu dngan hati-
hati ditambahkan 148 g (80 mL) H2SO4 pkat sdikit dmi sdikit sambil dikocok u
ntuk mmbntuk campuran asam. Pada raksi ini dilpaskan panas shingga dibutuhk
an pndinginan hingga 10 15oC sblum pnambahan dilakukan, dan campuran dijaga
ttap dingin slama pnambahan. K dalam labu alas bulat 500 mL diisi dngan 52
g (60 mL) bnzna, dinginkan dngan air, lalu campuran asam ditambahkan sdikit
dmi sdikit sambil digoyang-goyang agar brcampur dngan baik (suhu campuran ti
dak bolh mlbih 55oC, kalau prlu dinginkan dngan air-s).
Praktikum Sintsis.docx Kimia Organik
137
Stlah campuran asam slsai ditambahkan, campuran dirfluks raksi di atas pn
angas air (60 oC) sambil diaduk dngan pngaduk magntik slama 40 45 mnit, km
udian didinginkan dan dituang k dalam glas piala 1 litr yang brisi air dingi
n sbanyak 500 mL sambil diaduk dngan baik untuk mncuci sisa asam. Slanjutnya
didiamkan. Pada lapisan bawah trbntuk nitrobnzna, dan lapisan atas yang mn
gandung campuran asam pisahkan dan disisihkan. Dngan cara yang sama, pncucian
dilakukan kmbali dngan larutan 3 % Na2CO3 sbanyak dua kali, lalu dngan air s
atu kali lagi. Kringkan dngan CaCl2 (granular). Jika masih kruh (karna trja
di mulsi), campuran dipanaskan di atas pnangas air sambil dikocok, maka kkru
hannya akan hilang. Campuran disaring dngan mnggunakan krtas saring, dan filt
rat nitrobnzna dipindahkan k dalam labu distilasi, ditambahkan bbrapa biji
batu didih lalu didistilasi. Gunakan kondnsr udara dan rlnmyr kcil untuk
pnadah distilat. Bagian yang trsuling pada suhu 206-211oC ditampung. Nitrobnz
na adalah cairan bracun brwarna kuning pucat, dan mmiliki bau khas snyawa a
romatik.
Praktikum Sintsis.docx Kimia Organik
138
PERCOBAAN 2 SINTESIS ANILIN
NO2 + F + HCl
NH2
Praksi : - nitrobnzna 1 cc 2g 3 cc 1 cc 3g
- tpung bsi (rduktor) - HCl pkat - mtanol - NaOH - ditil tr - NaCl - KOH
Pralatan : - tabung raksi ukuran sdang - ktl dstilasi uap - kondnsor Lib
ig ukuran kcil - corong pisah ukuran kcil - rlnmyr brkapasitas 50 cc .. 2 bua
h 1 buah 1 buah 1 buah 2 - 3 buah . 1 buah
- labu brcabang brkapasitas 50 cc .. - trmomtr 250 oC .. - tabung raksi b
sdang ..
- tabung raksi ukuran kcil .. - pnangas air Prosdur :
K dalam tabung raksi ukuran sdang dimasukkan 1 cc bnzna, 1 cc mtanol, 2 g
tpung bsi, dan 3 cc HCl lalu dilngkapi dngan kondnsor kcil. Raksi sgra
brlangsung dngan kras, ttapi brakhir dalam bbrapa mnit. Jika tidak trja
di raksi, dngan hati-hati tabung dipanaskan di atas asbs, dan jika raksi mul
ai
Praktikum Sintsis.docx Kimia Organik
139
brlangsung, tabung dijauhkan dari api. Jika raksi sudah mulai mrda, tabung d
ipanaskan di atas asbs dan campuran raksi dididihkan scara tnang. Jika bau n
itrobnzna hampir tidak trcium lagi (stlah 30 - 40 mnit) maka tabung diding
inkan, sifat campuran raksi dijadikan basa dngan pnambahan 3 g NaOH yang dila
rutkan dalam sdikit air lalu isi tabung dipindahkan k dalam labu brcabang. Ba
gian dalam tabung raksi dicuci bbrapa kali dngan air dan air cucian trsbut
dimasukkan pula k dalam labu brcabang. Kondnsor Libig dipasangkan pada caba
ng labu dan isi labu didstilasi uap. Karna adanya anilin, distilat mula-mula t
ampak kruh, ttapi stlah mnjadi bning dstilasi ditruskan slama 5 - 10 m
nit. Dstilat dipindahkan k dalam corong pisah yang brisi larutan jnuh NaCl,
ditambahkan 5 cc ditil tr dan dikstraksi. Lapisan atas (lapisan ditil tr)
dipisahkan, ditambahkan KOH dan dibiarkan bbrapa saat (pross pngringan). L
arutan ditil tr dipindahkan k dalam tabung raksi ukuran sdang brcabang, k
ondnsor Libig dipasangkan pada cabang dan tr idstilasi k luar. Kmudian ko
ndnsor dilpas dan pmanasan srta dstilasi dilaksanakan di atas asbs. Fraksi
dngan titik didih 180 186 oC ditampung. Prolhan hasilnya (yild) adalah 0,5
g; waktu yang dibutuhkan kira-kira 1,5 jam. Anilin adalah cairan dngan titik di
dih 184oC; kontak dngan udara mngalami oksidasi dan lambat laun warnanya mnja
di coklat.
======
Praktikum Sintsis.docx Kimia Organik
140
PERCOBAAN 3 SINTESIS DIFENILUREA
NH2 2 + H2NCONH2 NH CO NH
Praksi : - anilin (yang baru didstilasi) . 2 cc - ura - tanol Pralatan : - tabu
ng raksi ukuran sdang . 1 buah - rlnmyr brkapasitas 50 cc - filtr dngan png
isap - pnangas air; pnangas minyak - trmomtr 200 oC . 1 buah . 3 buah
Prosdur : K dalam tabung raksi (mnngah) dimasukkan 2 cc anilin dan 0,5 g ur
a lalu campuran dipanaskan di dalam pnangas minyak pada suhu 1400-1500 C slam
a 1,5 jam. Stlah didinginkan ditambahkan 5 cc air dan campuran raksi dididihk
an di atas asbs. Bbrapa mnit kmudian zat-zat yang larut dalam air panas dib
uang dngan cara dkantasi. K dalam tabung raksi dimasukkan lagi 5 cc air, did
ihkan, dan bbrapa mnit kmudian didkantasi lagi untuk mmbuang zat-zat yang
larut dalam air panas. Rsidu dipisahkan k dalam rlnmyr, ditambahkan ssdi
kit mungkin tanol dan dilarutkan dngan pmanasan dalam pnangas air, lalu disa
ring dalam kadaan panas. Filtrat didinginkan dan mngndaplah kristal-kristal.
Kristal-kristal disaring dan dicuci dngan sdikit tanol. Prolhan hasilnya (y
ild) adalah 0,5-0,7 g, waktu yang dibutuhkan kira-kira 2,5 jam. Difnilura ada
lah kristal dngan titik llh 237 oC. ======
Praktikum Sintsis.docx Kimia Organik
141
PERCOBAAN 4 SINTESIS IODOBENZENA
NH2 + NaNO2 + H2SO4
N2HSO4 KI
I
Praksi : Pralatan: - glas piala brkapasitas 50 cc - labu brcabang brkapas
itas 50 cc - corong pisah ukuran kcil - tabung raksi brcabang ukuran kcil . 1
buah - tabung raksi kcil - trmomtr 2 3 buah 1 buah 2 3 buah 1 buah a
3,0 g 2 cc
asam sulfat pkat .. NaNO2 KI NaOH CaCl2 anhidrous s krtas tampung KI ..
..