Laboratorio de Experimentacin

Clnica

Pacheco Hernndez Norma

Lira de Len Karla Isabel

Prctica 11: Funcionamiento Heptico. .

Herrera Lpez Estephany. Snchez Ortiz Laura Karen. Zamora Zepeda Zayra

Universidad Autnoma de Quertaro. Facultad de Qumica

I. Introduccin.
El funcionamiento normal del tejido heptico, debido a su dotacin
enzimtica, garantiza el aporte de nutrientes al resto de los tejidos en
condiciones de demanda energtica, mientras que constituye una
importante fuente de reserva glucocdica en forma de glucgeno posterior a
loa ingesta.

Este tejido cumple funciones destoxificacin y sntesis de protenas,

garantizando as la transformacin y eliminacin de productos del
metabolismo celular y de compuestos ingeridos en los alimentos y
medicamentos; adicionalmente, sintetiza albumina, globulinas y factores
proteicos que participan en la hemostasia.

Con base en lo anterior, la distribucin heptica, causada por diversas

enfermedades, algunas de las cuales son muy comunes, conduce a
trastornos sistmicos que compromete el funcionamiento normal del
organismo.

El papel de la determinacin de laboratorio en la valoracin del estado del

hgado en la salud y en la enfermedad ha ido evolucionando
continuamente.

Las mediciones y exmenes de laboratorio no se utilizan slo s, si no

obtencin de imagen y en unin con tcnicas de obtencin de imagen y
operaciones de biopsias.
 Los resultados de las medicines o exmenes se utilizan para valorar el
estado del hgado.

Las mediciones en sangre reflejan el estado de un factor bioqumico

determinado en un momento preciso, pueden compararse con una biopsia
bioqumica.
Los resultados estn influidos no slo por lo que pasa en el hgado, sino
tambin en otros rganos y en el individuo en su conjunto
(Henry.2001)
II. Objetivo.

Identificar las tcnicas que evalan la funcin heptica.

III. Conocimientos previos.

Albmina. Es la protena ms abundante en el plasma, con una
concentracin de 15 g/L. Por su alta concentracin esta protena
constituye escensialmente a la conservacin la presin
coloidosmotica de la sangre y representa una de las reservas
ms importantes de aminocidos.
Funciona como protena transportadora, ya que tiene sitios de
unin a sustancia no polares.
(Sabn J. 2009)
Globulinas. Estas protenas se basan en sus respectivas
solubilidades, pero son solubles solamente en presencia de sal
(concentracin de 0.15 M de ClNa).
(McGilvery R. 1997)
Hipoprotena. Disminucin de la concentracin srica de
protenas (menor a 6.5 g/dL). Las causas ms frecuentes son las
mal nutriciones, sndrome de mala absorcin, prdidas renales o
dficit de sntesis.
(Sabn J. 2009)
Hiperprotenas. Condicin que se caracteriza por el aumento de
la concentracin de protenas en el suero. Pueden deverse a un
consumo de protenas.
(Sabn J. 2009)
Bilis. Es el producto de una serie de procesos complejos que
tienen lugar en el hgado. Gracias a este fluifo se realizan tanto
las funciones secretoras que est rgano desempea.
(Herrera J. 1996)
Bilirrubina. Es un pigmento de color amarillo anaranjado que
encontramos en la bilis.
 Una elevada concentracin de bilirrubina en sangre puede
generar ictericia, que produce coloracin amarilla en l piel, ojos o
membranas mucoides.
Clulas de Kupffer. Tambin denominadas como clulas
estrelladas, por la frecuencia que adoptan esta forma. Se sitan
en el interior de la luz sinusoidal y de presentan perifricamente
seudpodos. Cumplen funciones macrfagas, fagocitando todo
aquello, intil o inocuo que es transportado por la sangre
sinusoidal.
(Herrera J. 1996)
Cirrosis. Es la cicatrizacin y funcionamiento deficiente del
hgado. Es la ltima fase de la enfermedad heptica crnica.
(McGilvery R. 1997)
Hepatitis. Es una inflamacin del hgado. La afeccin puede
remitir espontanea mente o evoluciona hacia una fibrosis
(cicatrizacin) una cirrosis o un cncer de hgado.

Los virus de hepatitis son las causa ms frecuentes de las

hepatitis pero tambin puede deberse a otras infecciones
sustancias toxicas (alcoholismo u otras drogas) enfermedades
autoinmunitarias.
(Herrera J. 1996)

Urobilingeno. Las bacterias intestinales convierten la bilirrubina

en una combinacin de urobilingeno y estercobilingeno.
Parte de urobilingeno se reabsorbe desde el intestino hacia la
sangre, recircula al hgado y se excreta de nuevo al hgado a
travs del conducto biliar.
(UNAM. 2010)

IV. Metodologa
a) Determinacin de Bilirrubina
Se ajustaron las condiciones de acuerdo a lo descrito en la seccin de
diagramas de flujo, se mezclaron los volmenes de acuerdo a la tabla 1,
despus se incubo por 5 minutos y se ley su absorbancia a 555 nm para
calcular la concentracin de bilirrubina directa y total en la muestra.
b) Determinacin de Protenas totales
Se ajustaron las condiciones de acuerdo a lo descrito en la seccin de
diagramas de flujo, se mezclaron los volmenes de acuerdo a la tabla 2,
 despus se incubo por 5 minutos y se ley su absorbancia a 540 nm para
calcular la concentracin Protenas totales en la muestra.
c) Determinacin de Albmina
Se ajustaron las condiciones de acuerdo a lo descrito en la seccin de
diagramas de flujo, se mezclaron los volmenes de acuerdo a la tabla 3,
despus se incubo por 5 minutos y se ley su absorbancia a 630 nm para
calcular la concentracin albmina en la muestra.

V. Diagrama de flujo.
a) Determinacin de Bilirrubina

Condiciones:

= 555 nm
celda = 1 cm
Paso de luz
T= 37C / 15 25 C
Cero= agua destilada

Tabla 1. Volmenes de reactivos para determinacin de Bilirrubina

Blanco B total Blanco B Directa

R1(ml) --- --- 1.5 1.5
R2 (ml) 1.5 1.5 --- ---
R3 (l) --- 50 --- 50
Muestra
100 100 100 100
calibrador (l)
 Agregar los
volmenes de Incubar 5 min a 15
Leer Abs
acuerdo a la tabla 25 C
1
Clculos:

Con calibrador:
 b) Determinacin de Protenas totales

Condiciones:

= 540 nm
celda = 1 cm
Paso de luz
T= 37C / 15 25 C
Estabilidad: mnimo 30 min.
Cero= agua destilada

Tabla 2. Volmenes de reactivos para determinacin de Protenas totales

Blanco Patrn Muestra

R (ml) 1.0 1.0 1.0

Patrn (l) --- 25 ---

Muestra(l) --- --- 25

Agregar los
Incubar 5 min a 37
volmenes de Leer Abs
C o 10 a T amb.
acuerdo a la tabla
 c) Determinacin de Albmina

Condiciones:

= 630 nm
celda = 1 cm
Paso de luz
T= 37C
Cero= agua destilada

Tabla 3. Volmenes de reactivos para determinacin de Albmina

Blanco Patrn Muestra

R (ml) 1.0 1.0 1.0

Patrn (l) --- 5 ---

Muestra(l) --- --- 5

Agregar los
Incubar 5 min a 37
volmenes de Leer Abs
C o 10 a T amb.
acuerdo a la tabla
VI. Resultados.

Determinacin Concentracin Valores de referencia.

Albumina
CN 0 g/dL 3.5-5.0 g/dL
CP 5.1 g/dL
Muestra 5.32 g/dL
Protenas Totales
CN 8.2 g/dL 6.6-8.3 g/dL
CP 4.0 g/dL
Muestra 7.2 g/dL
Bilirrubina
Bilirrubina Directa 0.60 mg/dL Hasta 0.25 mg/Dl
Bilirrubina Total 5.32 mg/dL Hasta 1.10 mg/dL
Resultados determinados con analizador semiautomtico Spinlab.

VII. Discusin.

El hgado desempea funciones metablicas complejas que repercuten en todo

el organismo. Este puede enfermar debido a procesos primarios, esto es a
procesos o afecciones propias como infecciones, inflamaciones, tumores o
traumatismos, pero tambin puede ser procesos secundarios por infecciones
por microorganismos y clulas tumorales provenientes de otras regiones.

(Cassanova D. 2004)

Las pruebas de funcin heptica sirven para detectar la enfermedad y

establecer el diagnstico exacto. En la prctica clnica se utilizan pruebas como
la determinacin de albumina, protenas totales, Bilirrubina, fosfatasa alcalina,
transaminasas, entre otras.

(Cassanova D. 2004)

Para la prueba de albmina srica podemos observar que tanto el control

patolgico como la muestra se encuentran elevados, esto es por encima de los
valores de referencia. Estos resultados nos hablan de una alteracin el hgado,
dado que esta protena se sintetiza exclusivamente en l. La sntesis de la
albmina puede verse alterada en pacientes con cirrosis heptica y ascitis,
aunque tambin un estado nutricional deteriorado, la inflamacin sistmica y
cambios en el balance hormonal pueden modificar los niveles de albmina.

(Salomn R. 2003)
 En esta determinacin se obtuvo un valor de cero para el control normal, esto
fue debido a un error por parte del analista dado que olvidamos agregarle el
patrn y solo haban agregado los reactivos.

La segunda prueba realizada fue la determinacin de protenas totales, en la

que obtuvimos que los valores se encuentran dentro del valor de referencia y
que el control patolgico y se encuentra alterado.

La Tercer y ltima prueba que se realiz fue la determinacin de bilirrubina

para la cual se encontr una concentracin aumentada en la muestra lo que
sugiere la presencia de ictericia que puede ser causada por una enfermedad
hemoltica, esto debido a que la bilirrubina es producto de la degradacin de la
hemoglobina, o tambin puede ser causada por hepatitis aguda y cirrosis.

(Gennaro A. 2000)

Segn el tipo de alteracin heptica, el aumento de la concentracin de

bilirrubina es plasma se debe mayoritariamente a la bilirrubina no esterificada o
la esterificada, esto debido a la capacidad secretora de reserva del hgado.

(Fuentes X. 1998).

VIII. Conclusin.

Se identificaron las tcnicas y determinaciones que permiten evaluar la funcin

heptica.

IX. Anexos

1.- Cules son las consecuencias de la hiperbilirrubinemia en recin

nacidos?

La acumulacin de bilirrubina en el recien nacido es una situacin

potencialmente peligrosa ya que esta tiene afinidad por los ganglios basales
del cerebro y causa alteraciones de los mismos. A consecuencia de ello
aparecern convulsiones y si el recin nacido logra sobrevivir presentara
graves daos neurolgicos. (Mialee, J. 1985)

2.- Qu tipo de hepatitis es causada por un virus de ADN?

Hepatitis tipo B.

3.- En pacientes con hepatitis B, el antgeno de la hepatitis se encuentra

en el suero solo cuando tambin se encuentran presentes:
a) Antgeno superficial.
 b) Anticuerpo para el antgeno superficial.
c) Anticuerpo para la hepatitis E.
d) Anticuerpo de la hepatitis C IgG.
e) Anticuerpo de la hepatitis C IgM.

4.- Qu enzimas se usan con ms frecuencia para establecer el origen

heptico de una elevada fosfatasa alcalina srica?
La enzima 5-nucleotidasa o GGT. (Longo, D. 2010)

5.- Para que se usa el reactivo de Ehrlich:

Para realizar la determinacin de bilirrubina, ya que esta reacciona con el

reactivo de Ehrlich, desarrollando un color rojo-violaceo, susceptible de medida
colorimtrica. (Macarulla, J, 1994)

X. Bibliografa y otras fuentes.

Miale, J. 2010. Hematologa. Medicina de laboratorio. Editorial Revert

S.A. Mxico.
Longo, D. 2010. Gastroenterologa y hepatologa. Mc Graw Hill. Mxico.

Gennaro, A. 2003. Remington:Farmacia. 20Edicin. Editorial Mdica

Panamericana. Mxico.
Daz, J. Fernndez, M. 1997. Aspectos bsicos de Bioqumica Clnica.
Ediciones Daz de Santos. Espaa.