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Marzo 2014
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APUNTE
GUA DE LABORATORIO BIOLOGA
CTEDRA: Biologa
AO: 2014
Profesor: TANYA NEIRA PEA
PRESENTACIN.................................................................................................................................... 4
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO .................................................................................. 5
OBLIGACIONES DEL ESTUDIANTE .................................................................................................... 7
PAUTA ELABORACIN DE INFORMES ................................................................................................. 8
LABORATORIOS ................................................................................................................................. 10
ACTIVIDAD ENZIMTICA ................................................................................................................... 11
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 11
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 12
Reactivos y Materiales .............................................................................................................. 12
Metodologa .............................................................................................................................. 12
MICROSCOPA ................................................................................................................................... 14
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 14
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 19
METABOLISMO .................................................................................................................................. 21
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 21
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 22
MEIOSIS ............................................................................................................................................. 23
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 23
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 25
CARIOTIPO ......................................................................................................................................... 31
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 31
CONCLUSIONES ................................................................................................................................. 39
REFERENCIAS ..................................................................................................................................... 40
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Facultad de Salud, Deporte y Recreacin
Departamento de Ciencias Qumico-Biolgicas
PRESENTACIN
El presente apunte tiene como principal propsito entregar de manera ordenada los
contenidos y trabajos prcticos a realizarse en los laboratorios de Biologa impartidos para
las carreras de la Facultad de Salud, Deporte y Recreacin.
A travs de stos, se espera que los estudiantes consoliden sus conocimientos mediante la
ejecucin y anlisis de experiencias prcticas, las cuales han sido planificadas acorde a las
temticas desarrolladas durante la ctedra. Se espera que los estudiantes se familiaricen
con el trabajo en un laboratorio a travs del desarrollo de habilidades relacionadas con la
observacin y anlisis de fenmenos biolgicos. Igualmente importante es que los
estudiantes desarrollen la rigurosidad en sus prcticos y la capacidad de trabajar en
equipo.
b) Pautas de realizacin de informes: El estudiante al final del curso deber ser capaz de
comunicar, analizar y discutir los resultados obtenidos en los trabajos prcticos a
travs de un informe de laboratorio, el cual debe cumplir con las pautas analizadas en
esta seccin.
Antes de realizar una prctica, debe leerse detenidamente para adquirir una idea
clara de su objetivo, fundamento y tcnica. Los resultados deben ser siempre
anotados cuidadosamente apenas se conozcan.
Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que
es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin.
No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin
consultar con el profesor.
Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados de
las llamas de los mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos,
se har al bao Mara, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas
se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama.
Cuando se manejan productos corrosivos (cidos, lcalis, etc.) deber hacerse con
cuidado para evitar que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se vertern
bruscamente en los tubos de ensayo, sino que se dejarn resbalar suavemente por su
pared.
Cuando se quiera diluir un cido, nunca se debe echar agua sobre ellos; siempre al
contrario: cido sobre agua.
No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la bomba manual, una jeringuilla o
artilugio que se disponga en el Centro.
Las pipetas se cogern de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo
superior para regular la cada de lquido.
Al enrasar un lquido con una determinada divisin de escala graduada debe evitarse
el error de paralaje levantando el recipiente graduado a la altura de los ojos para que
la visual al enrase sea horizontal.
Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen lquidos debe evitarse
la ebullicin violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de
ensayo se acercar inclinado a la llama y procurando que sta acte sobre la mitad
Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se
engrasen.
LABORATORIOS
ACTIVIDAD ENZIMTICA
MARCO TERICO
Las enzimas son protenas que tienen como funcin catalizar una reaccin al
interior de la clula, es decir, hacer que una reaccin sea ms eficiente. Esto lo logra
acercando los sustratos, de manera que aumenten las probabilidades de que estos se
encuentre. Adems, una vez que los sustratos entran en contacto con la enzima, estos
adquieren la ubicacin espacial esencial para que ocurra la reaccin.
Las enzimas son activas en un rango estrecho de pH, con una actividad mxima a
un valor de pH denominado pH ptimo. Por tal motivo la actividad enzimtica se mide en
presencia de tampones o amortiguadores de pH.
TRABAJO PRCTICO
Reactivos y Materiales
Preparacin enzimtica: Lavado bucal con agua destilada, filtrado y mantenido en hielo.
Tampn fosfato 0.1 M, pH 7.0, pH 5.0, pH 6.0 y pH 8.0
Solucin de cloruro de sodio 0.03 M
Solucin de almidn 1% p/v
Solucin de lugol
Bao termoregulado y de agua hirviendo
Metodologa
MICROSCOPA
MARCO TERICO
Sistema ptico
Sistema mecnico
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser
suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de
objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo
anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca
distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances:
incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con
aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de
inmersin.
Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos
indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite.
Mantencin y Precauciones
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin
de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del
borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el
objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos
recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y
con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que
limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este
tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las
lentes y su sujecin.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao
humedecido en xilol.
TRABAJO PRCTICO
NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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METABOLISMO
MARCO TERICO
TRABAJO PRCTICO
2.- Deje reposar las preparaciones hasta que observe alguna variacin en las
bombitas. Tome nota de los cambios ocurridos. Deje reposar 20 minutos todas las
preparaciones manteniendo los tubos en el bao de agua tibia.
3.- Observe el estado final de las bombitas en cada una de las preparaciones.
MEIOSIS
MARCO TERICO
La meiosis es una divisin celular que ocurre solo en las clulas que darn origen a
los gametos. Se caracteriza por pasar por una etapa de duplicacin del material gentico
(S), seguida de dos divisiones celulares, la Meiosis I y la Meiosis II, de manera que al
finalizar la meiosis II, se obtiene a partir de una clula, 4 clulas que poseen la mitad del
material gentico. En el caso de las clulas diploides (2n, c), se obtienen 4 clula n, c
(haploides), todas distintas entre s y distintas a la clula progenitora.
Meiosis I
Meiosis II
La meiosis II es muy similar a la mitosis.
Profase II. Aparece el huso mittico, el ncleo comienza a desorganizarse.
Metafase II. Los cromosomas se ubican en el ecuador y se enganchan al huso mittico.
Anafase II. El huso tracciona las cromtidas hermanas de cada cromosoma hacia polos
opuestos de la clula.
Telofase II. Comienza a reorganizarse el ncleo.
Citoquinesis.
El resultado final son 4 clulas haploides con material gentico simple, n, c.
TRABAJO PRCTICO
Observe en aumento 10x, 40x y 100x las siguientes muestras e identifique clulas
en distintas etapas de meiosis.
Ovario de rata
Testculo de rata
Anteras de Lilium
NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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CARIOTIPO
MARCO TERICO
A B
1 2 3 4 5
6 7 8 9 10 11 12
D E
13 14 15 16 17 18
Crs.
sexuales
19 20 21 22
X Y
F G
32 Gua de laboratorio de Biologa
Facultad de Salud, Deporte y Recreacin
Departamento de Ciencias Qumico-Biolgicas
Por otra parte, las anomalas cromosmicas pueden afectar a los autosomas o a los
cromosomas sexuales.
Anomalas autosmicas:
Sndrome de Down, por trisoma del cromosoma 21, translocacin 21/21 o translocacin
14/21.
Sndrome Cri du Chat, por delecin parcial del brazo corto del cromosoma 5 (5p).
Sndrome de DiGeorge, por delecin parcial del brazo largo del cromosoma 22 (22q11).
Cromosoma Filadelfia, formado por una translocacin entre los cromosomas 9 y 22.
positivos suelen plantear conflictos ticos y emocionales. Si bien, en muchos casos este
tipo de diagnstico es el nico posible, como cuando la anomala cromosmica se produce
en las clulas germinales de uno de los progenitores.
Actividad.
2.- Determine si los pacientes presentan o no una alteracin gentica y determine que
tipo de anomala es.
CONCLUSIONES
REFERENCIAS
Audesirk, T. y G. Audesirk, (2008) Biologa. La vida en la Tierra .8va edicin. Prentice Hall.