LABORATORIO DE FISIOLOGA HUMANA

ESTUDIANTE: CALIXTO ASTO KEILA

CDIGO: 2015152601

SECCIN: 04B

DOCENTE: DRA. TATIANA TORRES

TERCER AO/ I SEMESTRE

30-04-17
 PRCTICA N 7

FISIOLOGA HEMATOLOGICA

EXPERIMENTO N 1: Observacin de los cambios morfolgicos de los

Eritrocitos

PROCEDIMIENTO:

En esta ocasin una participante donar un

poco de sangre para luego verificar la
morfologa de los eritrocitos en solucin
isotnicas, hipotnicas e hipertnicas

En la primera imagen se observa que los eritrocitos son clulas sin ncleos,
sabemos que contienen protenas transportadoras de oxgeno, conservan las
enzimas de la gliclisis. Se aprecia una forma bicncava que facilita su funcin de
intercambio, por presentar una amplia superficie de exposicin, para un volumen
determinado.

ANLISIS:

En la primera imagen cuando entra la

solucin salina con concentracin de 300
mOsm no ocurren cambios en la
estructura del eritrocito pues es un medio
isotnico que proporciona equilibrio. El
eritrocito en un medio isotnico no cambia
su estructura morfolgica bicncava.
ERITROCITOS ANTES DE LA
REACCIN
 En la segunda imagen muestra turgencia que
se define como la presin que ejerce el interior
de la clula hacia la pared de la misma por la
entrada de agua, ya que se encuentra en un
medio hipotnico lo cual hace que la clula se
hinche, cuando la clula no puede resistir la
carga de agua que recibe, la membrana se
rompe (hemlisis) y se libera la hemoglobina.
La hemlisis es un proceso que ocurre en una
poblacin mixta de clulas por lo que no
ocurre en un solo punto y a la misma velocidad ERITROCITO EN SOLUCIN
en todos los casos. HIPOTNICA

Aumento: 1000x

En la tercera imagen al microscopio se

observa el fenmeno de plasmlisis, al
encontrarse la clula en un
medio Hipertnico el agua de est tiende
a salir, deshidratando su citoplasma lo cual
encoge a la clula por falta de presin
hacia sus paredes, y en algunos casos
puede causar la muerte celular.
 CONCLUSIONES:

La forma y el volumen de los

ERITROCITO EN SOLUCIN
eritrocitos cambia cuando
HIPERTNICA
vara la cantidad de agua
contenida dentro de su Aumento: 1000X
membrana, pudiendo tomar
una forma estrellada o
espinosa (crenacin) o bien
inflndose hasta adquirir la
forma de una esfera
(esferocitos).

EXPERIMENTO N2: Tiempo en sangra

El tiempo de sangra es una prueba que se utiliza para determinar la rapidez con
la que la sangre se coagula para evitar una hemorragia. Consiste en realizar
cortes superficiales pequeos en la piel, similares a raspones menores.

Es una evaluacin bsica del funcionamiento de las plaquetas en la formacin de

cogulos. Las plaquetas, fragmentos diminutos de clulas que circulan por la
sangre, son las primeras clulas en reaccionar ante una lesin en un vaso
sanguneo. Sellan la herida para evitar que se escape la sangre.

Los resultados anormales de una prueba de tiempo de sangra pueden indicar lo

siguiente:

Anomalas funcionales
adquiridas de las plaquetas:
afecciones que se manifiestan
despus del nacimiento y que
afectan el funcionamiento de las
plaquetas. Es posible que el
organismo produzca una
cantidad insuficiente de
plaquetas o que estas no
funcionen correctamente
Anomalas en los vasos
sanguneos: cualquier trastorno
 que afecte la manera en la que los vasos sanguneos transportan la sangre
a las diferentes partes del organismo
Anomalas funcionales hereditarias de las plaquetas: afecciones presentes
desde el nacimiento que afectan el funcionamiento de las plaquetas. Un
ejemplo es la hemofilia
Trombocitemia primaria: una afeccin en la cual la mdula sea produce
una cantidad excesiva de plaquetas
Trombocitopenia: una afeccin por la cual el organismo produce una
cantidad insuficiente de plaquetas
Enfermedad de Von Willebrand: la afeccin hereditaria ms frecuente;
afecta la coagulacin de la sangre

OBSERVACIN:

La puncin no se realiz en el lbulo de la oreja sino en el dedo (hubo

previa limpieza del lbulo de la oreja)
Tras efectuar la puncin y absorber con papel filtro (Iniciar el cronometraje y
absorber la sangre con el papel filtro cada 30 segundos), el tiempo que
pas para que se detenga el sangrado fue de un minuto.
El tiempo de sangra fue de 1 minuto. Siendo el tiempo referencia: 1 a 5
minutos.

ANLISIS Y CONCLUSIONES:

Al realizar una puncin de tamao y profundidad estandarizados, la accin

conjunta de los vasos y plaquetas detuvo el sangrado en un corto tiempo, el
cual fue medido y comparado con el normal.

Los resultados estn dentro de los valores de referencia, esto indica que
nos sali bien.
 EXPERIMENTO N3: Tiempo de coagulacin

Coagulacin sangunea

Es el proceso por el cual la sangre

pierde su liquidez convirtindose en un
gel, para formar un cogulo. Este
proceso potencialmente desemboca
en la hemostasis, es decir, en el cese
de la prdida de sangre desde un vaso
daado, seguida por su reparacin.

Tiempo de coagulacin: tiempo que tarda en coagular la sangre sin

anticoagulantes a 37C depositada en un tubo de cristal. V.N. 8-12 minutos Valoro
la va intrnseca Mtodo de Lee-White

Mtodo de Lee-White:

Partimos de cuatro tubos de cristal introducidos en un bao a 37C

Depositamos aproximadamente 1 ml de sangre sin anticoagulante en cada
tubo y ponemos en marcha el cronmetro.
Uno de los tubos se saca del bao cada 30 segundos y se inclina para ver
si fluye la sangre.
Cuando la sangre no fluya se saca el segundo tubo del bao cada
15segundos, cuando la sangre no fluya se para el cronmetro y se anota el
tiempo.

Utilidad clnica:

Evaluacin global del sistema de

coagulacin.

Monitoreo de la terapia con heparina.

Screening prequirrgico.
 OBSERVACIN:

En el caso del tubo N 4 este se demor 4 minutos, inferior a los rangos

normales.
El tiempo que tarda este proceso est en relacin con el sistema de
procoagulantes e inhibidores fisiolgicos o adquiridos, que influyen en la
formacin de dicho cogulo.

ANLISIS Y CONCLUSIONES:

El tiempo de coagulacin fue de 4 minutos, siendo el rango ideal de 15 a

37 El tiempo de coagulacin se pudo haber visto afectado debido a fallos
en la realizacin de la prueba como la demora de colocar la sangre de un
tubo a otro, fallo en la medicin del tiempo, etc Un tiempo mayor al ideal
podra sugerir dficit de los factores de coagulacin excepto el VII y el XIII.

EXPERIMENTO N 4: Determinacin de la curva de fragilidad osmtica

RESULTADOS:

TUB OSMORALIDAD PORCENTAJE DE

ABSORBANCIAS
O DE SOLUCION HEMLISIS %
1 0 (agua destilada) 1,003 0%
2 25 0,888 88.5 %
3 50 0,863 86.0 %
4 75 0,841 83.8 %
5 100 0,817 81.4 %
6 125 0,612 61.0 %
7 150 0,083 8.2 %
8 175 0,051 5.0 %
9 200 0,040 3.9 %
10 300 0,004 0.39 %
Para poder hallar el porcentaje de hemolisis utilizamos la siguiente formula:

% DE HEMOLISIS= A/ Am X 100

Donde:

A: Absorbancia de cada tubo

Am: Absorbancia del lquido del tubo 01

ANALISIS

- Para determinar la hemolisis de eritrocitos podemos observar los

contenidos de los tubos despus del procedimiento realizado. Se considera
que no hay hemlisis cuando en el tubo se observa un sedimento en forma
de botn rojizo y un lquido sobrenadante incoloro y transparente (8,9 y 10);
que hay una hemlisis parcial si es que ve la presencia de sedimento rojizo,
pero que se acompaa de un sobrenadante algo rojo y transparente (7); y
se considera que la hemlisis es total cuando slo se aprecia la existencia
de un lquido total rojizo (1,2,3,4,5 y 6). Estos resultados son a causa de
que la hemoglobina es liberada al plasma tras la lisis del eritrocito, lo que
produce la coloracin rojiza presente en los primeros 6 tubos.
 - La absorbancia en los tubos nos indica la cantidad de luz absorbida por las
partculas que se encuentran disueltas en el medio; as tenemos que en el
agua destilada presente en el tubo N1 (mximo medio hipotnico), tuvo
una absorbancia mayor que los dems soluciones por la gran cantidad de
partculas liberadas del eritrocito como la hemoglobina, la explicacin de
este proceso radica en la osmosis del agua del medio extracelular al
intracelular como mecanismo de regulacin de las concentraciones
causando en momento turgencia y posteriormente la ruptura de la
membrana aun generada por el desequilibrio de concentraciones, por ello
se considera genera el 100% de hemolisis. Mientras que, la decreciente
absorbancia en lo tubos de ensayo es generada por el creciente medio
hipertnico (NaCl) en los mismos, de esta manera los porcentajes de
hemolisis causados se reducen hasta un mximo de 0.39% a una
concentracin de 300 mOsmm/L, a causa de la crenacin o plasmlisis
generada por la difusin de agua del interior del eritrocito al medio
extracelular.

CONCLUSIONES:

El estudio de esta fragilidad, valora la resistencia de los eritrocitos a

soluciones de presin osmtica decreciente, en condiciones constantes de
pH y de temperatura.
Cuando los eritrocitos estn en contacto con soluciones hipotnicas,
penetra agua a travs de su membrana y se hinchan. Al hincharse, una
parte de la hemoglobina que contienen puede salir al exterior a travs de
los poros de su membrana; y si la entrada de lquido es excesiva, los
hemates se rompen y dejan libre toda la Hb, lo que ocasiona la coloraci
rojiza.
1. Realice un grfico con el porcentaje de hemlisis de los eritrocitos
expuestos a soluciones salinas de diferentes osmolaridades, observe el
comportamiento de la curva de fragilidad osmtica y correlacinela con
los mecanismos de regulacin del volumen celular.

TUB OSMORALIDAD PORCENTAJE DE

ABSORBANCIAS
O DE SOLUCION HEMLISIS %
1 0 (agua destilada) 1,003 0%
2 25 0,888 88.5 %
3 50 0,863 86.0 %
4 75 0,841 83.8 %
5 100 0,817 81.4 %
6 125 0,612 61.0 %
7 150 0,083 8.2 %
8 175 0,051 5.0 %
9 200 0,040 3.9 %
10 300 0,004 0.39 %

CURVA DE FRAGILIDAD OSMOTICA(%)

100.00%
88.50%
86.00%
83.80%
81.40%

61.00%
Porcentaje de hemlisis

8.20%5.00%
3.90%0.39%
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Tubos con diferentes osmolaridades de S.S.

ABSORBANCIAS PORCENTAJE DE HEMOLISIS (%)

Al hallar el porcentaje de hemolisis en cada uno de los tubos, tuvimos como
resultado que donde hubo mayor lisis fue en las clulas fue del tubo 1 que
contena agua destilada, debido a esto es el eritrocito empez a llenarse con ms
cantidad de lquido con el objetivo de equilibrar su interior, sin embargo gracias a
la demasiada absorcin se produjo lisis y por lo tanto se liber Hb (lo que
ocasiona que el tubo se pinte de color rojo). Es por eso que al llevar un poco de
la solucin al espectrofotmetro, dio como resultado una absorbancia de 1.003.

De la misma manera sucedi con los 5 tubos que seguan, aunque como la
concentracin de soluto iba aumentando poco a poco, la absorbancia fue bajando.

Ocurri todo lo contrario en los ltimos tubos, donde al estar expuestos los
eritrocitos a un medio hipertnico, estos empezaron a drenar el lquido intracelular
hacia el exterior alterando su forma. En este caso no se produce lisis de la clula,
por lo que no se libera la Hb. y por lo tanto el sobrenadante tiene un color
transparente.

Eso explica por qu es que los tubos que tenan una coloracin roja (los 6
primeros) obtuvieron mayor absorbancia, que aquellos (los 4 ltimos) que tenan
un sobrenadante transparente.

Entonces sabemos que a menor concentracin extracelular de NaCl, mayor

turgencia, por lo tanto mayor posibilidad de lisis celular, entonces mayor
absorbancia.

Este resultado se ve reflejado en la curva de fragilidad donde se observa que el

porcentaje de hemolisis va disminuyendo en relacin a la concentracin de los
tubos.
 EXPERIMENTO N4: DETERMINACIN DEL HEMATOCRITO

1 PROCEDIMIENTO

Acceder a la pgina de inicio del programa de Physio Ex, y

seleccionar la actividad determinacin del hematocrito.
Luego mediante los siguientes datos, que revelan muestras de
sangre de seis individuos:

Muestra 1: Hombre sano que vive en Boston

Muestra 2: Mujer sana que vive en Boston
Muestra 3: Hombre sano que vive en Denver
Muestra 4: Mujer sana que vive en Denver
Muestra 5: Hombre con anemia aplsica
Muestra 6: Mujer con anemia ferropnica

Apartir de los datos, se proceder a arrastrar el tubo capilar

heparinizado hasta el tubo de ensayo respectivo para llenar el
capilar con la muestra del paciente respectivo; arrastrar la
muestra al recipiente sellador de un extremo del tubo.

Por ltimo arrastrar el tubo capilar a la centrfuga de

microhematocrito, ajustar el temporizador en 5 minutos,
pulsarIniciar y llevar hasta la regla para medir la altura de la
columna de sangree y la de cada una de las capas. Guardar datos
de cada muestra.

2 RESULTADOS

DETERMINACIN DEL HEMATOCRITO

ALTURA ALTURA DE ALTURA DE

TOTAL DE LA CAPA LA CAPA HEMATOCRI %GB
LA DE LEUCOCTI TO
COLUMNA GLBULOS CA (mm)
DE ROJOS
SANGRE (mm)
(mm)
 HOMBRE 100mm 48mm 1mm 48% 1%
SANO QUE
VIVE EN
BOSTON
MUJER 100mm 44mm 1mm 44% 1%
SANA QUE
VIVE EN
BOSTON
HOMBRE 100mm 55mm 1mm 55% 1%
SANO QUE
VIVE EN
DENVER
MUJER 100mm 53mm 1mm 53% 1%
SANA QUE
VIVE EN
DENVER
HOMBRE 100mm 19mm 0.5mm 19% 0.5%
CON
ANEMIA
APLSICA
MUJER 100mm 32mm 1mm 32% 1%
CON
ANEMIA
FERROPN
ICA

3 ANLISIS

Como se sabe el aumento en los niveles de hemoglobina y hematocrito

en los nativos de la altura, representa un modelo de adaptacin a la
altura. Este mecanismo se comprob en los resultados del experimento
desarrollado, Ya que la ciudad Denver presenta una altitud de 1600
msnm a diferencia de la ciudad de Boston que presenta una altitud de
146 msnm, indicndonos que en los pacientes que viven en Denver
presentan mayor hematocrito que los de Boston, ya que los pacientes de
Denver han desarrollado su proceso de aclimatacin.

Asimismo este experimento nos indic que el paciente con anemia

aplsica, presenta un hematocrito de 19%, comprobndose la
disminucin de cantidad de globulos rojos en sangre, debido a falta de
funcin de la mdula sea
En el caso de la paciente con anemia ferropnica, nos indic un
hematocrito de 32%, debido a que ella presenta una disminucin de
hemoglobina por debajo del desvo estndar respecto de la media para
sexo y edad. Causada bsicamente por un disbalance del contenido en
la dieta, biodisponibilidad y perdidas.

4 CONCLUSIONES

De acuerdo a lo desarrollado en el experimento, se pudo comprobar el

aumento o diminucin del porcentaje de hematocrito en relacin a la
altitud del lugar de procedencia.

Respecto al cuadro, los valores de hemoglobina y hematocrito de

acuerdo a la altitud en Per, nos indica que en altitudes mayores hay un
aumento de hemoglobina por decilitro por ende una disminucin del
hematocrito, desarrollado por el mecanismo de aclimatacin.

La anemia aplsica es una enfermedad grave poco frecuente, se da

cuando la mdula sea no produce suficientes clulas sanguneas. Los
recuentos sanguneos bajos producen anemia, hemorragias e
infecciones. La mayora de los expertos creen que la anemia aplsica se
produce cuando el sistema inmunolgico propio ataca y mata a las
clulas madre de la mdula sea. Estas son necesarias para producir
clulas sanguneas. Cuando se mata a las clulas madre de la mdula
sea, los recuentos sanguneos se reducen; a menudo, a niveles muy
bajos. Los sntomas de la anemia aplsica son causados por recuentos
bajos de las clulas sanguneas

La anemia ferropnica definida como disminucin de la masa de

glbulos rojos o de la concentracin de hemoglobina por debajo del
segundo desvo estndar respecto de la media para edad y sexo,
presenta las siguientes causas.

5 BICLIOGRAFA

http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOn
line/EnciclopediaOIT/tomo2/37.pdf
http://www.elsevier.es/es-revista-medicina-clinica-2-articulo-
saturacion-arterial-oxigeno-gran-altitud--13071480
 CUESTIONARIO

1. Con respecto a los cambios morfolgicos observados al microscopio en

los eritrocitos expuestos a la solucin de NaCl 1200 mOsm/L y al agua
destilada, correlacione estos cambios morfolgicos con la osmolaridad y
tonicidad de las soluciones.

La osmolalidad plasmtica oscila entre 275-290 mosml/kg. Las situaciones de hipo

o hiperosmolaridad pueden tener repercusiones neurolgicas graves e incluso la
muerte, para prevenir esto, la osmolaridad plasmtica la cual viene determinada
por la concentracin de sodio plasmtico, se mantiene habitualmente dentro de un
estrecho margen debido a adecuadas variaciones de la entrada y salida de agua
del organismo. Este sistema es gobernado por osmoreceptores hipotalmicos,
afectando a la entrada y salida de agua mediante el mecanismo de la SED
(entrada de agua) y la ADH (incrementa reabsorcin de agua en el tbulo).

Al aumentar la osmolaridad a 12oo mOsml, por encima de lo normal, el eritrocito

estar en una solucin hipertnica por tanto el hematie se crenar.

2. Cmo calculas el hematocrito despus de centrifugar la muestra de

sangre? Qu indica el resultado de este clculo?

CALCULO DEL HEMATOCRITO

A: Longitud totl de la sangre en el tubo

B: Longitud de la fraccin celular X: Hematocrito en %

Ej: Calculo utilizando una regla de tres A= 7.5 100 2.8 X X= 37.3%

VALORES NORMALES

De 37% - 42%

Se denomina policitemia cuando la concentracin de globulos rojos sobrepasa el

30% del valor normal

ALTERACIONES DE RESULTADOS:

DISMINUIDO

Hematocrito, Hipoxia, Eritrocitosis

AUMENTADO

Anemia, Leucemia, Artritis Reumatoide