Reviso da Literatura

Sistema colinrgico: revisitando receptores, regulao e a relao com a doena de

Alzheimer, esquizofrenia, epilepsia e tabagismo
Colinergic system: revisiting receptors, regulation and the relationship with Alzheimer disease, schizophrenia,
epilepsy and smoking
Ana L. M. Ventura1, Paula A. Abreu1,2, Rodrigo C. C. Freitas1, Plnio C. Sathler2, Natlia Loureiro2,
Helena C. Castro2
1Laboratrio de Neuroqumica da Universidade Federal Fluminense (UFF), Niteri, RJ.
2Laboratrio de Neuroqumica e Laboratrio de Antibiticos, Bioqumica e Modelagem Molecular (LABioMol) dos Programas de Ps-graduao em Neurocincias (EGB), e de Patologia (HUAP) da
UFF, Niteri, RJ.

Recebido: 5/9/2007 Aceito: 13/5/2009

Resumo
Objetivo: Revisar a estrutura e o funcionamento do sistema colinrgico central ressaltando seu papel na fisiologia e na fisiopatologia das doenas de Alzheimer e
Parkinson, esquizofrenia, epilepsia e tabagismo. Mtodo: Foi realizada uma pesquisa bibliogrfica no MedLine, LILACS, PubMed e ISI, e na Biblioteca da Fundao
Oswaldo Cruz, RJ, selecionando-se o perodo de 1914 a 2009, utilizando os descritores: receptors, cholinergic, Alzheimer disease, schizophrenia, epilepsy e
smoking, alm de referncias cruzadas dos artigos selecionados e anlise adicional de referncias na literatura especfica do tema. Resultados: Efeitos importantes
da ativao de receptores colinrgicos nicotnicos e muscarnicos sobre o desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC) tm sido descritos. A dessensibilizao
e a internalizao dos receptores acoplados protena G mediadas pela ativao de protenas cinases tm sido descritas em proliferao, diferenciao e morte
celular, alm de sndromes neuropsiquitricas. Concluso: As informaes produzidas a partir de estudos do sistema de neurotransmisso colinrgica podem
auxiliar no desenvolvimento de medicamentos mais especficos para o tratamento da doena de Alzheimer, esquizofrenia, epilepsia e tabagismo.

Ventura ALM, et al. / Rev Psiq Cln. 2010;37(2):66-72

Palavras-chave: Receptores colinrgicos, doena de Alzheimer, esquizofrenia, epilepsia, tabagismo.

Abstract
Objective: To review articles regarding important topics about cholinergic system and its ionotropic and G-protein coupled receptors as well as their regulation,
also enlightening its importance in central nervous system (CNS) development and in several neuropsychiatric conditions such as Alzheimer disease, schizo-
phrenia, epilepsy and smoking. Method: Bibliographical research was completed through MedLine, LILACS, PubMed, ISI and the Fundao Oswaldo Cruz
Library, RJ, specifically for 1914 to 2009, using the descritors: receptors, cholinergic, Alzheimer disease, schizophrenia, epilepsy and smoking, in addition
to the cross-reference of the articles selected and further analyses of bibliographical references on the theme. Results: Currently literature describes important
effects of nicotinic and muscarinic receptors activation on development of central nervous system (CNS). The protein G coupled receptors dessensibilization
and internalization mediated by kinases have been described in proliferation, differentiation and cell death, and also in neurologic disorders. Discussion: The
importance of the cholinergic system and its relationship with pathologies such as Alzheimer disease, schizophrenia, epilepsy is evident. The data produced so
far may help on planning medicaments more specific for these pathologies treatment.

Ventura ALM, et al. / Rev Psiq Cln. 2010;37(2):66-72

Keywords: Receptors, cholinergic, Alzheimer disease, schizophrenia, epilepsy, smoking.

Introduo A relao entre o sistema colinrgico e algumas doenas como

A acetilcolina (Ach) um mediador qumico de sinapses no sistema
nervoso central (SNC), no sistema nervoso perifrico e tambm na
juno neuromuscular1. A Ach, seus receptores e o aparato enzim-
tico responsvel por sua sntese e degradao constituem o sistema
de neurotransmisso colinrgica.
O conhecimento desse sistema, principalmente das vias de
sinalizao intracelular que se iniciam pela ativao dos recepto-
res colinrgicos, tem sido utilizado no desenvolvimento de novos
tratamentos para sndromes neurolgicas e psiquitricas. Nessas
sndromes, observa-se uma disfuno do sistema de neurotrans-
misso colinrgica, como transtornos do humor e alguns tipos de
esquizofrenia.
O aumento de receptores colinrgicos na doena de Parkinson
e a reduo destes no processo de envelhecimento do SNC, bem
como na morte sbita infantil, tambm j foram descritos na lite-
ratura mdica.
a de Parkinson e a esquizofrenia ressalta a importncia do bom
funcionamento desse sistema.
Neste artigo, pretende-se rever o sistema colinrgico, seus
receptores e sua regulao, bem como a participao de neuro-
transmissores e enzimas importantes no seu funcionamento. Foi
includa nesta reviso a relao entre o sistema colinrgico e alguns
quadros patolgicos importantes, como as doenas de Parkinson e
de Alzheimer, a esquizofrenia, a epilepsia e o tabagismo.
Sntese, captao e liberao da acetilcolina
A Colina-O-Acetil-Transferase (ChAT) a enzima responsvel pela
sntese da Ach a partir de acetil-coenzima A e colina. A glicerofos-
forilcolina, a fosforilcolina e a fosfatidilcolina geram a colina que
utilizada como substrato e transportada para o SNC atravs da
circulao sangunea. Assim, as fontes de colina para a sntese de

Endereo para correspondncia: Ana L. M. Ventura/Helena C. Castro. Rua Outeiro So Joo Batista. Universidade Federal Fluminense. Departamento de Neurobiologia, IB/CEG 24001-970
Niteri, RJ. Telefone: (21) 26292294/Fax: (21) 27195934. E-mails: almv@vm.uff.br e hcastrorangel@yahoo.com.br
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Ach provm da circulao, alm da sua recaptao aps a liberao
e degradao desse neurotransmissor.
Uma vez sintetizada, parte da Ach transportada e armazenada
em vesculas sinpticas. Esse processo realizado por um transpor-
tador vesicular de Ach (VAChT), capaz de elevar em at 100 vezes
sua concentrao no interior dessas vesculas. Aps ser liberada
inteiramente por exocitose, a Ach interage especificamente com
os receptores colinrgicos presentes nas membranas pr- e ps-
sinpticas2,3. A ao da acetilcolina cessa quando hidrolisada em
acetato e colina pela enzima acetilcolinesterase (AChE), presente
na fenda sinptica.
Atualmente existem descritos dois tipos de colinesterases
que incluem: a) enzimas com alta afinidade para a Ach ligadas
membrana neuronal e presentes em todas as sinapses colinrgicas;
b) enzimas com alta afinidade para a butirilcolina, tambm chamadas
de butiril-acetil-colinesterases (BchE) presentes em todos os tecidos
(Figura 1).
Figura 1. Sntese, liberao, degradao e recaptao da acetilcolina na
fenda sinptica. Transportador vesicular de acetilcolina (), transportador
de colina () e receptor de acetilcolina (R).
A AChE a enzima de maior eficincia cataltica conhecida na
atualidade e pode apresentar diferentes isoformas, que podem ser
classificadas como globulares ou assimtricas, dependendo da sua
conformao espacial. Todas essas formas apresentam uma alta
taxa de hidrlise enzimtica, de aproximadamente 5.000 molculas
de Ach/s4.
Receptores colinrgicos
Em 1914, Dale5 classificou as aes da Ach em muscarnicas e nico-
tnicas. Essa classificao foi baseada nos subtipos de receptores coli-
nrgicos capazes de se ligar nicotina e muscarina, respectivamente,
e que respondem ativao colinrgica com alta afinidade5.
Receptores colinrgicos nicotnicos
Os receptores colinrgicos nicotnicos (RCN) pertencem famlia de
receptores ionotrpicos que, quando ativados, adquirem a conforma-
o de canal aberto permevel aos ons Na+ e K+6. Quando compa-
rada transmisso sinptica induzida por receptores muscarnicos,
nota-se que os RCNs medeiam uma transmisso excitatria rpida.
Esses receptores so constitudos por cinco subunidades proteicas e
esto distribudos em vrios tecidos, incluindo o crebro e o tecido
muscular (Figura 2).
Os RCNs presentes nos msculos so heteropentmeros constitu
dos por subunidades , , , e (Figura 2), enquanto os receptores
do crebro so formados por vrias subunidades 2-10 e 2-47. Estes
75
receptores neuronais so constitudos por uma estequiometria geral
de 23. Entretanto, 7, 8 e 9 podem formar homo-oligmeros
constitudos por um nico tipo de subunidade. Em mamferos, 42 e
o pentmero homomrico 7 tm propriedades diferentes. O 7, que
liga com alta afinidade a -bungarotoxina (-BTX), uma neurotoxina
de veneno de serpente, tem uma dessensibilizao rpida e reversvel
e sua ativao promove um aumento da permeabilidade celular ao
clcio8. J a principal caracterstica do 42 possuir alta afinidade
por nicotina. Os RCNs so amplamente expressos no SNC. Os recep-
tores 3 e 2 esto presentes no crtex, no tlamo, no hipocampo e no
cerebelo. J o 4 expresso apenas no crtex e no cerebelo, enquanto
o 7 expresso no crtex, no hipocampo e no tlamo.
A estrutura das subunidades dos RCNs composta por:
a) um domnio hidroflico na regio N-terminal, posicionado na
poro extracelular e que apresenta o stio de glicosilao envolvido
na ligao do agonista, bem como na regulao da dessensibilizao
e permeabilidade inica;
b) quatro segmentos hidrofbicos (19-27 aminocidos) forman-
do os domnios transmembrana9 (Figura 2);
c) um pequeno domnio hidroflico altamente varivel;
d) um domnio C-terminal hidrofbico de aproximadamente
20 aminocidos10.
e) alas intracelulares compreendidas entre os segmentos trans-
membranas possuem stios de fosforilao envolvidos no processo
de dessensibilizao. Muitas drogas induzem a dessensibilizao
indiretamente, aumentando os nveis de clcio intracelular que levam
fosforilao por protenas cinases sensveis ao clcio. Os stios de
ligao aos agonistas parecem estar localizados na regio de interface
entre as subunidades, enquanto os stios para ligantes alostricos no
competitivos localizam-se diretamente nas subunidades.
Os RCNs localizados no crebro distribuem-se nas regies
pr-, ps-, peri- e extrassinpticas, podendo modular a liberao
de neurotransmissores e, consequentemente, a atividade sinptica
neuronal. Os RCNs tm importncia em diversos processos, como
o aprendizado e a memria, o desenvolvimento neuronal e participa
do sistema de recompensa11. Essa versatilidade funcional se correla-
ciona com as diferentes estruturas que esses receptores possuem nas
diversas reas do sistema nervoso. Como exemplos, podem-se citar
receptores com subunidades 354 que regulam a transmisso gan-
glionar e receptores com a subunidade 4 que regulam parcialmente
a liberao de dopamina e de glutamato. J receptores localizados
na regio estriatal que possuem a subunidade 3 alteram a atividade
motora por modular a liberao de dopamina, enquanto receptores
com a subunidade 2 controlam a liberao de GABA e a resposta de
neurnios dopaminrgicos no mesencfalo. Uma disfuno do gene
que sintetiza a subunidade 2 responsvel pela atrofia do crtex e
perda de neurnios, o que sugere que os RCNs estejam envolvidos
em processos de sobrevivncia de neurnios, alm da fisiologia e
manuteno dos circuitos sinpticos neuronais12.
A B
Figura 2. Receptor colinrgico nicotnico A Subunidades , , e .
B Domnios presentes em cada subunidade: N-terminal hidroflico (1),
quatro segmentos hidrofbicos transmembrana (2), domnio hidroflico
varivel (3), C-terminal hidrofbico (4) e alas intracelulares formando
stios de fosforilao (5).
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Os RCNs regulam a liberao e a ativao de neurotransmis-
sores nas regies pr- e ps-sinpticas, respectivamente, podendo
controlar a eficcia da transmisso sinptica. A atuao dos RCNs
nos processos de memria e aprendizado indica sua participao
na fisiopatologia e nos processos inflamatrios caractersticos da
doena de Alzheimer13 e o uso simultneo de antagonistas nicot-
nicos e de receptores glutamatrgicos do tipo N-metil-D-aspartato
(NMDA) tem atenuado ataques epilpticos induzidos em ratos e
camundongos, o que sugere uma ntima relao entre os sistemas de
neurotransmisso colinrgico e de NMDA na atividade excitatria
do SNC14. O comprometimento da atividade cooperativa entre RCN
e receptores dopaminrgicos na regio mesoestriatal pode estar
envolvido em algumas disfunes neurolgicas que predispem
pacientes doena de Parkinson15.
Receptores colinrgicos muscarnicos
Os receptores colinrgicos muscarnicos (RCMs) tambm so
amplamente distribudos por diversos sistemas biolgicos, onde
participam de vrias funes vitais3. A ativao desses receptores
no sistema nervoso perifrico tem aes que incluem a reduo da
frequncia e fora da contrao cardaca, o relaxamento de vasos
sanguneos perifricos e a constrio das vias respiratrias (brnquios
e bronquolos). No SNC, esto envolvidos no controle da funo
extrapiramidal, vestibular, em funes cognitivas como memria,
aprendizado e ateno, em respostas emocionais, na modulao do
estresse, no sono e na viglia.
O conhecimento das funes dos RCMs e de seus subtipos avan-
ou consideravelmente aps a clonagem de seus cinco genes distintos
(M1-M5) em clulas de mamferos16. Enquanto a expresso heter-
loga de RCMs em diferentes linhagens celulares favoreceu a desco-
berta das vias de sinalizao intracelular envolvidas, os anticorpos
especficos permitiram a localizao tecidual e celular dos subtipos
de RCMs em diferentes organismos. A identificao dos cinco genes
que codificam os RCMs permitiu ainda a localizao dos stios de
expresso de RNAm desses receptores em diferentes tecidos.
A utilizao de agentes farmacolgicos seletivos para RCMs tem
contribudo para o entendimento da funo e regulao desses recep-
tores. Riker e Wescoe17 foram os primeiros a demonstrar a existncia
de diferentes subtipos de RCMs, ao evidenciarem as propriedades
cardiosseletivas da galamina, um antagonista muscarnico17. Em
1976, Barlow et al.18 demonstraram diferenas significativas nas
propriedades farmacolgicas de RCMs entricos e atriais de cobaias,
enquanto estudos sobre a seletividade da ligao de drogas a RCMs
e suas diferenas funcionais no organismo contribuam para sua
comprovao in vivo18.
Entre os cinco subtipos de RCMs clonados (M1, M2, M3, M4,
M5), apenas o subtipo M5 ainda no foi totalmente caracterizado
no nvel farmacolgico e funcional. Todos os RCMs pertencem
superfamlia de receptores acoplados protena G e estruturalmente
so protenas de membrana contendo sete domnios transmembra-
nares (Figura 3). Stios de ligao especficos para Ach, agonistas e
antagonistas muscarnicos esto presentes na regio N-terminal e
nas alas extracelulares. A presena de um ou mais stios de glicosi-
lao no N-terminal, como nos receptores M2, refora a evidncia
da localizao extracelular dessa poro da molcula19. Na regio
intracelular, os RCMs conservam a regio C-terminal, alm de trs
alas intracelulares (i1, i2 e i3)19. A diferena funcional na ativao
dos diferentes subtipos de RCMs reside principalmente na consti-
tuio da ala i3 desses receptores (Figura 3). A i3 a regio dos
receptores muscarnicos que interage com a protena G e apresenta
variao na sequncia de aminocidos entre os RCMs. J as alas i1
e i2 so bastante conservadas em todos os subtipos. Os 18 primeiros
aminocidos presentes na regio i3 dos receptores M2 e M4 possuem
um alto grau de homologia enquanto, nos receptores M1, M3 e M5,
essa regio idntica. Com base nesse padro de homologia, os
RCMs foram divididos em dois grupos: a) receptores M1/M3/M5 e
b) receptores M2/M420.
Figura 3. Receptor colinrgico muscarnico mostrando os sete domnios
transmembrana e a ala de ligao protena G. Em zoom, parte da sequn
cia de aminocidos dessa ala importante para a ligao protena G,
revelando os aminocidos homlogos entre as classes de receptores M1,
M3 e M5 e entre M2 e M4, marcados em cinza-claro.
A variao da sequncia de aminocidos na ala i3 nos dois
grupos de receptores muscarnicos provavelmente determina o aco-
plamento distinto protena G, justificando os diferentes mecanismos
de regulao da resposta celular. Os receptores muscarnicos M1,
M3 e M5, quando ativados por agonistas colinrgicos, acoplam-se
preferencialmente com a protena Gq/11, induzem a ativao da
fosfolipase C, que promove a hidrlise de fosfoinositdeos presentes
na membrana e a produo de diacilglicerol e inositol trifosfato
(segundos mensageiros)21. De forma diferenciada, os receptores mus-
carnicos M2 e M4, quando ativados, acoplam-se preferencialmente
protena G inibitria, Gi/o, que inibe a atividade da adenilciclase
e reduz os nveis intracelulares de AMP cclico22.
Os subtipos de receptores colinrgicos muscarnicos
Os RCMs apresentam caractersticas funcionais e de localizao que
os diferenciam significativamente:
Receptores M1: no SNC, constituem cerca de 50% dos RCMs
presentes no hipocampo e foram localizados, por anlises de hi-
bridizao in situ, na regio do giro denteado, no bulbo olfatrio,
nas amgdalas e no crtex piriforme23. Recentemente, foi demons-
trado que so estimulados por carbacol, um agonista colinrgico,
e ativam as cinases reguladas por sinais extracelulares (ERKs) em
fatias de hipocampo de camundongos. Isso foi confirmado pelo
pr-tratamento com pirenzepina, um antagonista colinrgico, que
aboliu a ativao das ERKs nessa regio do sistema nervoso. Estudos
semelhantes demonstraram a deficincia na ativao das ERKs 1 e 2
em neurnios corticais de camundongos knockout para receptores
M1. O inositol-1,4,5-trifosfato(IP3) uma molcula formada pela
ao da fosfolipase C sobre fosfolipdios de membrana, atuando,
portanto, como um segundo mensageiro. A induo da produo
de IP3 por carbacol se mostrou 60% menor nos neurnios corticais
dos camundongos knockout, quando comparada com neurnios
de camundongos normais, sugerindo que a ativao das ERKs 1 e
2 induzida por carbacol mediada por receptores M1 acoplados
ativao da fosfolipase C24.
Receptores M2: no SNC, foram localizados principalmente em
neurnios estriatais, no tegumento mesopontino e no ncleo motor
do nervo craniano. A localizao da imunorreatividade para esse re-
ceptor semelhante ao padro de imunorreatividade para neurnios
colinrgicos no SNC, o que aponta esse subtipo de receptor como
um autorreceptor nesse tecido25.
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Estudos sobre a ao dos receptores M2 na fisiologia do corao
mostram a ativao da xido ntrico sintase (eNOS) em micitos em
vrias espcies. Entretanto, necessria a translocao dos receptores
M2 e da eNOS para compartimentos subcelulares especializados, cha-
mados cavolas, para viabilizar esse processo. A produo de xido
ntrico induzida pelos receptores M2 pode ser um dos fatores que
contribui para a resposta ionotrpica negativa geralmente observada
aps estimulao colinrgica do tecido cardaco.
A ativao de receptores M2 reduz a fora de contrao e tambm
a frequncia de batimentos cardacos em cobaias, o que est associado
inibio de canais de Ca2+ voltagem dependente e ativao de
canais retificadores de K+ atravs da estimulao da Gi/o22. Wang
et al.26 mostraram a relao entre a ativao de receptores M2 e a
regulao de canais inicos de clcio e de cloreto26. A estimulao de
receptores M2 transfectados transitoriamente em ocitos de Xenopus
promoveu a abertura de canais de Cl- dependentes de voltagem, um
efeito dependente da ativao da PI-3-cinase, demonstrando uma
nova via de sinalizao intracelular iniciada por receptores M2. Essa
via pode ser alternativa ao tradicional acoplamento desse subtipo de
receptor via Gi/o.
Receptores M3: segundo anlises de imunocitoqumica, hibridi-
zao in situ e autorradiografia, esto presentes em vrias regies
cerebrais que incluem o ncleo estriado, hipocampo, ncleo talmico
anterior, colculo superior, ncleo pontiforme, regio lmbica cortical
e camadas superficiais do neocrtex23. Os dados sugerem que esses
receptores medeiam vrios processos colinrgicos no crebro que
incluem a formao de memria, aprendizado, o controle da funo
motora e o comportamento social.
Os receptores M3 expressos transitoriamente em clulas CHO,
uma linhagem celular produzida a partir do ovrio de hamster
chins, tambm esto envolvidos na ativao de protenas cinases
ativadas por mitgenos (MAPKs), uma vez que agonistas como
oxotremorine-M e pilocarpina mimetizam a ativao dessa enzima
induzida por acetilcolina. Esse efeito bloqueado por inibidores
de protena cinase-dependente de clcio (PKC) e mimetizado por
agonistas seletivos para receptores M1 e M5, sugerindo que nessas
clulas a via de sinalizao intracelular para ativar as MAPKs integra
a ativao dos subtipos de receptores muscarnicos M1, M3 e M5,
bem como sua consequente mobilizao de IP3 e da PKC27.
Receptores M4: so abundantes em neurnios estriatais de ratos,
mas tambm esto presentes no hipocampo de roedores. Compem
importantes vias de sinalizao inibitria ou estimulatria para a
formao da memria, juntamente com receptores M1 e M223.
De forma interessante, o RNAm para os receptores M4 foi loca-
lizado no ncleo caudado, putmen e nas camadas plexiformes do
bulbo olfatrio. Kimura e Baughman28 demonstraram que receptores
M4 modulam negativamente potenciais ps-sinpticos excitatrios
em neurnios corticais de ratos, uma vez que antagonistas especficos
de receptores M4 bloqueiam a inibio da acetilcolina sobre esses
potenciais28. Eles ainda observaram que receptores M1 modulam
negativamente os potenciais ps-sinpticos inibitrios desses neu-
rnios. Dessa forma, a separao das aes da acetilcolina no crtex
cerebral, atravs da discriminao de seus subtipos de receptores,
favorece a interveno farmacolgica seletiva em alguns distrbios
neurolgicos que envolvem a neurotransmisso colinrgica.
Receptores M5: so os menos caracterizados quando comparados
com os demais subtipos. A sua localizao no SNC determinada
principalmente pela distribuio do seu RNAm. Algumas evidncias
demonstram a existncia de expresso endgena de receptores M5 em
clulas do melanoma humano A2058. Essas clulas so um modelo
de estudo em potencial para a sinalizao intracelular iniciada pelos
receptores M5, visto que sua estimulao produz tanto a liberao de
cido araquidnico quanto a inibio do acmulo de AMP-cclico
(AMPc) induzido por forscolina, um ativador de adenilciclase.
A linhagem de clulas da leucemia eosinoflica (EoL-1) outro sis-
tema celular que pode ser utilizado para o estudo dos receptores M5
endgenos. Nessas clulas, a expresso de RNAm para receptores M5
e M3 aumentada na presena de interferon, o que necessrio para
a diferenciao das clulas EoL-1 em macrfagos maturos29.
77
Regulao de receptores acoplados protena G
Atualmente, os trs mecanismos de regulao da resposta celular
induzida por ativao de receptores acoplados protena G so: i) a
dessensibilizao, ii) a internalizao ou sequestro de receptores, e
iii) a diminuio do nmero de receptores ou downregulation30.
Dessensibilizao
A dessensibilizao est diretamente relacionada com a diminuio
na gerao de segundos mensageiros induzida pela ativao do
receptor pelo agonista e tem como pr-requisitos: i) ativao pro-
longada do receptor por seu agonista, ii) fosforilao do receptor por
protenas cinases dependentes de receptores acoplados protena G
(GRKs) ou dependentes de segundos mensageiros como a PKA ou
PKC e iii) ligao ao receptor de uma classe de protenas citoslicas,
as arrestinas31. Na dessensibilizao, a diminuio da capacidade
responsiva do receptor ocupado pelo agonista pode ocorrer afetando
(dessensibilizao heterloga fosforilao dos receptores pelas
protenas cinases dependentes de segundos mensageiros) ou no
(dessensibilizao homloga ativao de GRKs) outros receptores
no estimulados e presentes na mesma clula32.
Internalizao e reciclagem
O processo de internalizao ou sequestro de receptores acoplados
protena G mais um nvel de regulao da atividade desses recepto-
res quando estimulados pelo agonista. Estudos utilizando o receptor
2-adrenrgico como modelo tm demonstrado que a exposio
ao agonista promove a translocao desses receptores da superfcie
celular para compartimentos intracelulares30. A internalizao de
receptores no s um mecanismo para a dessensibilizao, mas
tambm para sua ressensibilizao desses receptores30. A recuperao
da atividade de receptores se d principalmente por um processo de
reciclagem dos receptores previamente internalizados, que parece ser
constitutivo na maioria das clulas. Nessa reciclagem, os receptores
fosforilados pelas GRKs e internalizados em vesculas intracelulares
so defosforilados por fosfatases, que tm sua ao favorecida pela
diminuio do pH das vesculas. Os receptores so ento posterior-
mente reinseridos na membrana, onde se tornam aptos para um
novo ciclo de regulao30.
A internalizao de receptores acoplados protena G influi
diretamente na distribuio celular e subcelular desses receptores.
Essa distribuio pode ser determinada por quatro vias de trfego
intracelular. Geralmente, os receptores recm-sintetizados provenien-
tes do complexo de Golgi so direcionados para a superfcie celular.
Entretanto, alm de compor um estoque de reserva intracelular, os
receptores presentes nos endossomas podem ser reciclados para a
membrana plasmtica ou seguir para a fuso com lisossomas, onde
sero degradados. Nas clulas no estimuladas por agonistas, esse
trfego intracelular de receptores se apresenta relativamente lento,
sendo drasticamente acelerado na presena de agonistas.
A literatura descreve duas vias de internalizao de receptores
acoplados protena G mediada por: a) clatrina e b) cavolas. A via
mediada por clatrina tem sido a mais estudada, sendo comprovada
experimentalmente como responsvel pela internalizao de vrios
receptores, incluindo os receptores 2-adrenrgicos, muscarnicos
e de endotelina A33. Goodman et al.34 observaram que a ligao da
arrestina ao receptor fosforilado promove o recrutamento e a ligao
da protena clatrina a esse complexo (Figura 4), que se polimeriza,
promovendo o recobrimento da membrana e a formao de vesculas
intracelulares contendo complexos proteicos que incluem o receptor,
a arrestina e protenas cinases34. Recentemente, foi demonstrada que a
arrestina pode promover o recrutamento de enzimas tirosina-cinases
da famlia das Src e, consequentemente, induzir a formao do com-
plexo receptor acoplado protena G-tirosina-cinase Src. A ativao
da tirosina cinase Src essencial para a ativao de protenas cinases
ativadas por mitgenos (MAPKs). A internalizao de receptores
acoplados protena G induzida por seus agonistas especficos via
78 Ventura ALM, et al. / Rev Psiq Cln. 2010;37(2):66-72
Acetilcolina
Receptor
muscarnico
Figura 4. Regulao do receptor muscarnico acoplado protena G, res-
saltando os mecanismos de dessensibilizao (1), internalizao via clatrina
(2), ressensibilizao (3) e internalizao via cavolas (4).
clatrina aparentemente regula a resposta celular diante do estmulo
do agonista, promovendo uma segunda onda de sinalizao celular
envolvendo a ativao das MAPKs.
Recentemente, tem sido observada a correlao funcional en-
tre a internalizao e a transduo de sinal induzida por diversos
receptores de neurotransmissores, incluindo aqueles acoplados
protena G, em pequenas invaginaes vesiculares (50-100 nm)
da membrana plasmtica, denominadas cavolas (Figura 4). Essas
estruturas funcionam como subcompartimentos da membrana
celular especializados no trfego de protenas e em mecanismos de
transduo de sinal mediados por receptores.
Downregulation
Enquanto a dessensibilizao refere-se diminuio da atividade
dos receptores sem alterao do seu nmero total, a downregulation
implica a diminuio de receptores por meio da reduo da sntese,
da internalizao com degradao em lisossomos ou degradao no
lisossmica de receptores35.
Diferentes mecanismos podem induzir downregulation, incluin-
do a modulao da expresso gnica. Experimentos revelam que o
nmero de receptores presentes em uma clula pode ser regulado
por meio do nvel de expresso gnica, bem como o de biossntese
e de degradao destes. possvel observar ainda a diminuio dos
receptores M2 e M4 presente nos dendritos como tambm a diminui-
o de receptores M2 aderidos membrana, aps uma estimulao
neuronal colinrgica crnica, indicando que esses receptores foram
downregulados. A diminuio do RNAm de receptores M2 no ncleo
basal de Meynart e em neurnios estriatais de camundongo cujos
nveis de ACh so cronicamente elevados explica parcialmente a
perda dos receptores M4 dos dendritos35.
A downregulation pode resultar em um aumento da prote
lise de protenas G acopladas a receptores. Para os receptores
2-adrenrgicos, acredita-se que a protelise o mecanismo de
downregulation predominante35.
Doenas relacionadas ao sistema colinrgico
Doena de Alzheimer: a relao entre o sistema colinrgico e a demn-
cia do tipo Alzheimer tem sido explorada desde os anos 1980. Essa
uma doena neurodegenerativa de instalao insidiosa e progressiva.
Modificaes neuroqumicas primrias no sistema colinrgico tm
sido observadas em crebros de doentes de Alzheimer, sugerindo
uma disfuno colinrgica envolvida nas alteraes de memria,
aprendizagem, ateno e outros processos cognitivos comuns afeta-
dos nesses pacientes36. Alteraes tanto na quantidade de receptores
muscarnicos em diversas regies cerebrais quanto na sinalizao
intracelular induzida por esses receptores, como a presena de altas
concentraes de uma protena denominada inibidor endgeno de
baixo peso molecular (IEBP), j foram descritas. O IEBP proporciona
um antagonismo endgeno aos receptores colinrgicos muscarnicos
nesses pacientes que parece se relacionar s manifestaes clnicas
observadas nessa neuropatia degenerativa.
O tratamento da doena de Alzheimer requer intervenes far-
macolgicas visando sua fisiopatologia especfica e este inclui o uso de
agentes farmacolgicos que melhoram os sintomas especficos (como
iluses e distrbios do sono) e intervenes comportamentais que
possam melhorar os sintomas e as atividades dirias do paciente. Os
inibidores da AChE (tacrina e donepezil) que permitem um aumento
nos nveis cerebrais de acetilcolina37 e recentemente um antagonista
no competitivo de receptor de NMDA (memantina), o qual est
indicado para as formas moderadas a graves da doena, so os ni-
cos frmacos atualmente aprovados pelo FDA (U.S. Food and Drug
Administration) para o tratamento da doena de Alzheimer.
Estudos demonstram que a tacrina eficaz no apenas em me-
lhorar a cognio, mas tambm os distrbios neuropsiquitricos dos
pacientes como apatia e ansiedade. Por ser hepatotxica, necessita-se
de realizao de provas de funo heptica e ajustes da dose. O do-
nepezil apresenta menos efeitos colaterais e no exige monitorizao
bioqumica para disfuno heptica38.
Os efeitos colaterais desses medicamentos incluem nuseas,
vmitos, diarreia, bradicardia e tontura relacionados com a dose.
As contraindicaes ao tratamento com inibidores da colinesterase
incluem hepatopatia, alcoolismo, doena ulcerosa pptica, doena
pulmonar obstrutiva crnica e bradicardia. Tais agentes podem
estabilizar o estado do paciente por um perodo de meses.
Uma depresso leve a moderada comum nos estgios iniciais da
doena e pode responder medicao antidepressiva, como os inibi-
dores seletivos da recaptao da serotonina (ISRS) e antidepressivos
tricclicos com baixos efeitos colaterais anticolinrgicos (desipramina
e nortriptilina). As convulses generalizadas devem ser tratadas com
anticonvulsivantes apropriados, como fenitona ou carbamazepi-
na, enquanto a agitao pode ser tratada com fenotiazinas (como
tioridazina), haloperidol, risperidona e benzodiazepnicos (como
lorazepam). O haloperidol em baixas doses, a trazona, a buspirona,
o propranolol e a olanzapina podem ser os mais teis como tam-
bm os que apresentam menos efeitos colaterais38. As intervenes
comportamentais so essenciais no tratamento dos pacientes com
doena de Alzheimer. O controle do ambiente, com o propsito de
manter a casa do paciente segura e facilitar a locomoo interna,
pode ajud-lo.
Epilepsia: a epilepsia no lobo frontal resultado de uma mutao
da serina 248 por uma fenilalanina na subunidade 4 do domnio
transmembrana do receptor nicotnico, o que leva a uma reduo
da permeabilidade ao clcio, reduo na abertura do canal e rpida
dessensibilizao39. A concentrao de agonista capaz de induzir a
dessensibilizao desses receptores mutantes 3 mil vezes mais baixa.
Nos pacientes com epilepsia, a rpida dessensibilizao de RCN 7
aumenta enormemente. A mutao da leucina 250 pela threonina
em receptores 7 conhecidos por reduzir a dessensibilizao do canal
aumenta a sensibilidade apreenso induzida por nicotina em ratos,
o que sugere um papel importante da dessensibilizao do RCN 7
nos modelos de epilepsia.
A carbamazepina ou a fenitona so atualmente os frmacos de
escolha inicial para o tratamento das convulses parciais14, incluindo
as que apresentam generalizao secundria. O uso da fenitona
em longo prazo associa-se com efeitos estticos indesejveis como
hirsutismo, feies grosseiras e hipertrofia gengival. A carbamaze-
pina pode causar leucopenia, anemia aplsica ou hepatotoxicidade.
O cido valproico uma alternativa eficaz para alguns pacientes com
convulses parciais, especialmente com generalizao secundria e
raramente causa supresso reversvel da medula ssea e hepatoto-
xicidade. A lobectomia temporal ainda tem sido um tratamento de
escolha para os casos resistentes a frmacos.
 Ventura ALM, et al. / Rev Psiq Cln. 2010;37(2):66-72
Tabagismo: a nicotina presente no tabaco um agonista seletivo
de RCN e, assim como outras drogas capazes de causar dependn-
cia, est diretamente envolvida na liberao de dopamina na regio
mesolmbica. A tolerncia nicotina observada em fumantes, bem
como os sintomas de abstinncia, ocorre por dessensibilizao e
upregulation dos RCNs aps a exposio crnica. A nicotina chega
s sinapses neurais atravs da barreira hematoenceflica, alcanando
concentraes de 50-600 nM, que muito menor do que as concen-
traes fisiolgicas de ACh necessrias para gerar um potencial de
ao (1 mM). Entretanto, a nicotina persiste por no ser degradada
pela AChE e essa exposio prolongada pode promover dessensibi-
lizao aps ativao transiente40. O uso crnico da nicotina pode
resultar em um aumento do nmero de receptores associado a uma
desativao funcional, o que se sugere ser o mecanismo responsvel
pelos efeitos de dependncia nicotina40.
Trs medicamentos so aprovados pela Food and Drug Adminis-
tration para o tratamento do tabagismo: a nicotina, a bupropiona e a
vareniclina41. Alm desses, a nortriptilina e clonidina mostraram-se
mais eficientes do que placebo em ensaios clnicos controlados. H
cinco produtos para reposio de nicotina: goma de mascar, pastilhas
e comprimidos, sistemas adesivos transdrmicos, inalador e spray. Os
efeitos da goma de mascar so basicamente locais e incluem fadiga
mandibular, irritao da boca e da garganta, desconforto gstrico
e soluos. Os sistemas transdrmicos so aplicados pela manh
e removidos na manh seguinte ou ao deitar-se, dependendo do
produto. O spray nasal de nicotina pode causar irritao local do
nariz, o que comumente provoca sensao de queimao, espirros e
lacrimejamento no incio do tratamento, mas sobrevm tolerncia a
esses efeitos em um a dois dias. O inalador fornece nicotina garganta
e s vias areas superiores, de onde absorvida da mesma forma como
na goma de mascar, sendo comercializado como um dispositivo de
plstico em forma de cigarro, sendo usado sem restrio.
A bupropiona, tambm comercializada como antidepressivo,
pode ser associada ao uso do adesivo de nicotina. Os antidepressivos
so mais eficazes naqueles com antecedentes de sintomas de depres-
so41. No entanto, apesar de evidncias mostrarem a eficcia desses
medicamentos, a maioria dos pacientes no adere totalmente ao
tratamento e, portanto, novas opes teraputicas so necessrias.
O tartrato de vareniclina uma nova droga produzida a partir
de um alcaloide natural da planta Cytisus laburnum, a cistisina. Com
efeito de agonista parcial dos receptores nicotnicos neuronais 42,
a vareniclina foi desenvolvida especialmente para o tratamento do
tabagismo. Esse composto se liga com elevada afinidade e seletividade
aos nAChR 42, onde atua como agonista parcial, possuindo tanto
atividade de agonista, com eficcia intrnseca inferior da nicotina,
como atividade antagonista na presena da nicotina42.
Estudos eletrofisiolgicos e neuroqumicos demonstraram que
a vareniclina, quando se liga aos receptores nicotnicos neuronais
42 da acetilcolina, estimula a atividade mediada por estes, mas
a um nvel significativamente inferior ao da nicotina, uma vez que
esta compete por um mesmo stio de ligao no receptor nAChR
42, para o qual a vareniclina tem a maior afinidade. Assim, a
vareniclina pode efetivamente bloquear a capacidade da nicotina de
ativar completamente os receptores 42 e o sistema mesolmbico
dopaminrgico43.
A eficcia da vareniclina na cessao tabgica resulta da atividade
agonista parcial desta sobre os receptores nicotnicos 42, nos quais
a sua ligao produz um efeito suficiente para aliviar os sintomas de
abstinncia e dependncia (atividade agonista) e simultaneamente
resulta na reduo dos efeitos compensatrios e de reforo do tabaco,
pela preveno da ligao da nicotina aos receptores 42 (atividade
antagonista)43. Essa droga absorvida bem via oral, atingindo con-
centraes plasmticas em 2 a 4 horas. Sua vida mdia de 20 a 30
horas, sendo eliminada 80% na urina aps a metabolizao.
Esquizofrenia: O envolvimento dos RCNs na esquizofrenia foi
sugerido devido grande proporo de esquizofrnicos fumantes
(90%), em comparao com os 30% de fumantes na populao geral9.
Altos nveis de anticorpos anti-RCN foram encontrados em pacientes
com esquizofrenia, o que poderia contribuir para a reduo no nme-
79
ro de receptores observado. O uso de nicotina nesses pacientes pode
ser uma tentativa de compensar a reduo na neurotransmisso em
RCN e pode auxiliar os pacientes a compensar o dficit cognitivo e
os distrbios de ateno. O defeito est relacionado ao polimorfismo
no cromossomo 15, que lcus para a subunidade 7. Alm disso,
observada uma reduo da subunidade 7 no crtex frontal nesses
pacientes, o que refora sua importncia na esquizofrenia.
Apesar do envolvimento de receptores colinrgicos nessa doena,
os antipsicticos so considerados a base do tratamento agudo e de
manuteno da esquizofrenia. O bloqueio do receptor dopaminrgico
do sistema lmbico e dos ncleos da base parece ser um elemento
fundamental, uma vez que as potncias clnicas dos antipsicticos
tradicionais, como o haloperidol e a clorpromazina, acompanham
suas afinidades pelo receptor D2 de dopamina e, mesmo os agentes
mais novos, os chamados atpicos, em funo do menor espectro de
efeitos colaterais, exercem algum grau de bloqueio no receptor D2.
Contudo, a eficcia clnica dos neurolpticos atpicos pode envolver
o bloqueio dos receptores dopaminrgicos D1, D3 e D4, a atividade
1 e 2-noradrenrgica e/ou a alterao da relao entre a atividade
dos receptores 5HT2 e D244.
A farmacoterapia inicial da psicose deve comear com a admi-
nistrao de agentes antipsicticos atpicos, tais como a clozapina, a
risperidona, a olanzapina ou a quetiapina45. Contudo, o antipsictico
atpico padro a clozapina, um dibenzodiazepnico de potncia
maior em bloquear o receptor 5HT2 em relao ao D2, e uma afini-
dade muito mais alta pelo receptor D4 do que pelo D246. A principal
desvantagem desse medicamento o risco de discrasia sangunea,
o que requer monitorizao regular com hemograma completo.
A clozapina aumenta a atividade do gene precoce-imediato c-fos
no crtex pr-frontal, a regio neuroanatmica que tem a concen-
trao mais alta de receptores D4, sendo uma rea que se acredita
mediar as funes executivas especficas que so proeminentemente
prejudicadas na esquizofrenia. Esses agentes so mais eficazes no
tratamento dos sintomas psicticos negativos da esquizofrenia,
como apatia e anergia, e na melhora da funo cognitiva45, alm
de ser mais efetivos para o tratamento de pacientes refratrios.
Os antipsicticos podem causar uma ampla gama de efeitos colaterais,
incluindo letargia, ganho ponderal, hipotenso postural, priso de
ventre, boca seca, aumento de secreo de prolactina, prolongamento
do intervalo QTc no eletrocardiograma e discinesia tardia. O fator
limitante mais frequente da posologia dos agentes antipsicticos o
aparecimento de efeitos colaterais extrapiramidais, como distonia,
acatisia e parkinsonismo. O tratamento farmacolgico da esquizo-
frenia insuficiente, sendo necessrio um modelo de tratamento
envolvendo uma equipe multidisciplinar.
Consideraes finais
A importncia do sistema de neurotransmisso colinrgica tem
sido significativamente evidenciada, visto sua relao com algumas
doenas do SNC. As alteraes neuropsiquitricas que envolvem dis-
funes desse sistema podem ser observadas em quadros patolgicos
atualmente de considervel incidncia, como doena de Alzheimer.
Neste trabalho, procurou-se ressaltar o entendimento desse sistema
para permitir um tratamento mais especfico para doenas de sinto-
matologias to diversas, sendo ainda necessrias mais informaes
que orientem a gerao de medicamentos mais especficos para o
tratamento dessas patologias.
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