1

CAPTULO 2

REVISIN BIBLIOGRFICA

2.1 Naranja

La naranja es la fruta que ms se produce en el mundo y la de mayor consumo per cpita

(FIRA, 2003). Proviene del sureste de Asia y pertenece al gnero Citrus de la familia de
las Rutceas (Rutaceae). De entre los diferentes tipos de naranja, las variedades de
naranja dulce (Citrus sinensis) son las ms importantes a nivel comercial.

2.1.1 Requerimientos Climticos y Edficos del Cultivo

La naranja es un cultivo de tipo perenne. Su produccin comercial se da en regiones de

clima tropical y subtropical, dentro del rea localizada entre los 23.5 y 40 de latitud
norte y sur (Davies y Albrigo, 1994). Los principales factores que influyen en su cultivo
son la temperatura, la humedad relativa, la luminosidad y el suelo. De estos elementos,
la temperatura durante el desarrollo del fruto es el que tiene mayor efecto en la calidad
de la naranja.

El rbol de naranjo presenta moderada resistencia al fro y requiere de temperaturas

clidas durante el verano para una maduracin correcta del fruto. En general, las
especies de ctricos pueden crecer y fructificar en un rango de 10 a 40 C de
temperatura, y en forma ptima de 24 a 32 C (Samaniego et al., 2004). En cultivos
donde se presentan temperaturas altas durante todo el ao, los niveles de clorofila en el
fruto del naranjo se conservan elevados, lo que origina que el color de la cscara
permanezca verde. En la medida en que la temperatura del aire y del suelo decrece por
debajo de los 15 C, la clorofila se degrada y aparecen los pigmentos amarillos, naranjas
o rojos, sto como consecuencia de la conversin de cloroplastos a cromoplastos. Por
 2

otra parte, en los casos en los que la cosecha de naranja es tarda, se puede presentar un
reverdecimiento del color naranja de la cscara motivado por la mayor permanencia del
fruto en el rbol. Esta reconversin de cromoplastos a cloroplastos la inducen las
temperaturas altas de la estacin y un nivel de humedad del suelo adecuado para la
sntesis de clorofila de la planta (Davies y Albrigo, 1994).

Los suelos destinados al cultivo de ctricos deben ser de textura liviana a media. El
cultivo en un suelo de textura pesada presenta un drenaje lento, lo que da lugar a la
proliferacin de enfermedades causadas por hongos y a un crecimiento lento de las
plantas. Los valores de pH en suelo de 5.5 a 6 se consideran ptimos para el desarrollo
del naranjo, si bien un rango de valores pH de 4 a 9 es aceptable (Molina, 2000).

La profundidad efectiva del suelo es la mayor profundidad a la que penetran las races de
los rboles, sin que encuentren obstculos fsicos que impidan su crecimiento y
desarrollo normal. En el cultivo del naranjo se aconseja el uso de suelos de 1.5 m a ms
de 2 m de profundidad efectiva (Samaniego et al., 2004).

La humedad ambiental tambin es un factor a considerar en el cultivo de la naranja. En

regiones con humedad ambiental alta, tales como Guaymas, Ciudad Obregn, Navojoa y
Culiacn, se producen frutos con cscara ms delgada y lisa, en tanto que en zonas con
valores de humedad relativa baja, como son Caborca, Hermosillo y Mexicali, se
obtienen frutos con cscara ms gruesa (Samaniego et al., 2004).

2.1.2 Situacin Nacional de la Naranja

La naranja es la fruta de mayor importancia econmica en Mxico, tanto por la

superficie que se destina para su cultivo, como por el volumen de la produccin y por el
consumo interno (Tabla 2.1) En el ao 2007, cerca del 30 % de la superficie cosechada
en el sector frutcola correspondi a este ctrico. De igual manera, el volumen de
produccin de naranja conform casi un 30 % de la produccin nacional de frutas.
3
 4

Tabla 2.1 Principales productos frutcolas en Mxico. Superficie sembrada, superficie

cosechada, produccin y consumo aparente. Ao 2007.

FRUTA SUPERFICIE PRODUCCINa CONSUMO

(miles de Ton) APARENTEb
(miles de Ton)
Sembradaa Cosechadaa
(Ha) (Ha)

Naranja 336,234 330,290 4,249 4,224

Pltano 82,090 75,651 1,965 1,923
Limn 151,267 144,004 1,923 1,490
Mango 179,210 170,549 1,643 1,413
Aguacate 117,312 110,377 1,143 845
Manzana 59,969 56,072 505 725
Pia 26,965 15,918 671 639
Meln 22,008 21,499 543 536
Mandarina 19,024 18,456 283 279
Uva 29,763 29,268 356 263
Durazno 45,584 41,733 192 213
Fresa 6,287 6,238 176 130
Nuez 77,582 57,509 79 79

Fuente: Elaboracin propia con base en datos de: a SIAP, 2009. Servicio de
Informacin Agroalimentaria y Pesquera. Anuario Estadstico de la
Produccin Agrcola. SAGARPA. www.siap.gob.mx; b INEGI, 2008. El
Sector Alimentario en Mxico. www.inegi.org.mx.
 5

Por su periodo de maduracin, las variedades de naranja se clasifican en: a) tempranas;

b) de media estacin; y c) tardas. En Mxico, la naranja de mayor produccin comercial
es la variedad Valencia, de maduracin tarda. nicamente un 5 % de la produccin
nacional corresponde a otros tipos, como la Navel y Hamlin, variedades de maduracin
temprana.

De acuerdo a datos oficiales reportados en el Anuario Estadstico de la Produccin

Agrcola (SIAP, 2009), en el ao 2007 la naranja Valencia se cultiv en 22 entidades de
la Repblica Mexicana. Los estados de Veracruz, Tamaulipas, San Luis Potos, Nuevo
Len, Yucatn y Sonora, contribuyeron con una produccin importante, superior a las
100,000 toneladas cada uno.

En el 2007, Veracruz destin 154,742 Ha al cultivo de naranja Valencia, lo que lo

posicion como el principal estado productor de la Repblica, tanto por superficie
sembrada como por produccin. Del total de su superficie, slo un 2.3 % cont con
sistema de riego, por lo que su produccin fue bsicamente de temporal (Tabla 2.2). A
nivel nacional, el porcentaje de superficie destinada al cultivo de naranja en la
modalidad de temporal fue de 73.6 %. Bajo este sistema se obtuvo un rendimiento
nacional promedio de 12.24 toneladas de producto por hectrea cosechada. Por su parte,
el 26.4 % de la superficie que se trabaj bajo el sistema de riego, present un
rendimiento medio de 15.29 Ton/Ha. En este aspecto destac el estado de Sonora, al
contar con una superficie de siembra de 6,546 Ha de naranja Valencia, toda bajo la
modalidad de riego, y lograr un rendimiento de 19.52 Ton/Ha, cifra por arriba del
promedio nacional.

2.1.3 Situacin Estatal de la Naranja

El estado de Sonora ocupa el quinto lugar en la produccin nacional de naranja, y el

primero en la produccin de naranja para exportacin. La actividad citrcola en la
entidad se centra principalmente en tres reas: 1) La Costa de Hermosillo; 2) El Valle
6
 7

Tabla 2.2 Principales estados productores de naranja Valencia. Superficie sembrada y

rendimiento. Ao 2007.

ESTADO SUPERFICIE SEMBRADA RENDIMIENTO

(Ton/Ha)

Temporal Riego Total

(Ha) (Ha) (Ha)

Veracruz 151,145.75 3,596.00 154,741.75 13.81

Tamaulipas 4,573.25 27,465.57 32,038.82 15.01
San Luis Potos 37,300.85 7,532.00 44,832.85 9.64
Nuevo Len 4,181.00 12,012.00 16,193.00 12.57
Yucatn 874.57 13,161.68 14,036.25 12.14
Sonora ------- 6,546.00 6,546.00 19.52
Puebla 8,523.00 60 8,583.00 9.99
Oaxaca 4,235.00 26 4,261.00 13.52
Hidalgo 4,842.00 ------- 4,842.00 9.93
Campeche 954.50 3,978.00 4,932.50 9.75
SUBTOTAL 216,629.92 74,377.25 291,007.17 13.06
Resto del Pas 2762.00 4219.37 6,981.37 11.84
TOTAL 219,391.92 78,596.62 297,988.54 13.04

Fuente: Elaboracin propia con base en datos de: SIAP, 2009. Servicio de Informacin
Agroalimentaria y Pesquera. Anuario Estadstico de la Produccin Agrcola.
SAGARPA. www.siap.gob.mx.
 8

del Yaqui; y 3) El Valle de Guaymas (Tabla 2.3). La Cuenca del Ro Sonora y El Valle
de Caborca son zonas de produccin de naranja a menor escala.

La mayora de los productores de ctricos en Sonora se encuentran organizados en tres

asociaciones de carcter econmico: la empresa Citrison, S.A. de C.V., que agrupa a los
productores de la Costa de Hermosillo; la empresa Citrcola del Yaqui, conformada por
los productores del Sur de Sonora; y la Asociacin Agrcola Local de Productores de
Ctricos de San Jos de Guaymas, A.C. (Molina, 2005). La naranja variedad Valencia es
el principal ctrico cultivado. De acuerdo a informacin dada en el Plan Rector Sistema
Producto Ctricos de la entidad, un 67 % de las hectreas plantadas corresponden a este
cultivo y un 26 % a naranja de otras variedades.

El mercado estatal se abastece de naranja local todo el ao, excepto en los meses de
septiembre a noviembre, en los que se adquiere adems fruta proveniente de Nuevo
Len, Jalisco y Tamaulipas. En el mbito internacional, el estado de Sonora contribuye
con el 65 % de las exportaciones nacionales de naranja. Su estatus fitosanitario, al ser
una zona libre de la mosca mexicana de la fruta, le permite ingresar su producto en el
mercado internacional sin tratamientos adicionales de fumigacin. Adems, las
condiciones climatolgicas propias del clima desrtico, confieren a la naranja de Sonora
una apariencia externa de mayor calidad que la hace competitiva en el mercado
internacional. Los productores de la Costa de Hermosillo son los principales
exportadores de naranja a nivel nacional.

2.1.4 Caractersticas de la naranja

Los frutos de los ctricos son bayas modificadas llamados hesperidios, que se
caracterizan por ser carnosos y tener semillas dispuestas en forma radial en su parte
central. En particular, la cscara de la naranja est formada por el exocarpo, capa externa
de color llamado flavedo, y por el mesocarpo, capa interna esponjosa de color blanco
conocida como albedo (Figura 2.1). El endocarpo es la parte comestible del fruto;
9
 10

Tabla 2.3 Superficie sembrada y produccin de naranja en el estado de Sonora.

Ao 2007.

DISTRITO SUPERFICIE SEMBRADA PRODUCCIN

(Ha) (Ton)

Caborca 268 2,283

Cajeme 1874 35,606
Guaymas 795 9,540
Hermosillo 6,245 125,000
Mazatn 4 20
Moctezuma 3 24
Navojoa 26 468
Total Estatal 9,215 172,941

Fuente: SIAP, 2009. Servicio de Informacin Agroalimentaria y Pesquera.

Anuario Estadstico de la Produccin Agrcola. SAGARPA.
www.siap.gob.mx.
 11

FLAV
VEDO

ALBE
EDO

ENDO
OCARPO

Figura 2.1 Zonas bsicas de la nnaranja: a) fllavedo; b) albedo; c) enddocarpo.

 13

corresponde a la porcin interior de los carpelos, los cuales son segmentos cerrados que
contienen vesculas con jugo y semillas (Davies y Albrigo, 1994). El nmero de gajos de
la naranja es igual o superior a siete. En su estado maduro, el fruto alcanza un dimetro
de 6 a 10 centmetros y un peso sin cscara de 150 a 200 gramos.

2.1.5 Composicin de la Naranja

En general, la naranja est conformada en una gran cantidad por agua, contiene niveles
moderados de protenas y es un alimento bajo en grasas (Tabla 2.4). Se le considera una
buena fuente de fibra y vitamina C. Los principales carbohidratos incluyen
monosacridos como la glucosa y fructosa; oligosacridos como la sucrosa; y
polisacridos como las pectinas (Davies y Albrigo, 1994). En la naranja se encuentran
tambin presentes pequeas cantidades de compuestos bioactivos, tales como terpenos,
cidos fenlicos y flavonoides, todos ellos compuestos orgnicos no nutrientes, con
reconocidas propiedades benficas para la salud humana.

La composicin de los frutos ctricos vara para cada zona o tipo de tejido. En la Tabla
2.4 se presenta la composicin nutricional de la cscara de naranja. El albedo de la
cscara es rico en celulosa, hemicelulosa, lignina, sustancias pcticas y compuestos
fenlicos (Ligor y Buszewski, 2003); por su parte, los constituyentes ms importantes
del flavedo son compuestos carotenoides y aceites (Cancalon, 1994).

El contenido total de carotenos es de 30 a 300 mg/kg de cscara de naranja fresca

(Flder Rivero, 2003), siendo la violaxantina el pigmento carotenoide ms abundante en
cscara de naranja dulce madura (Rodrigo et al., 2004). El aceite esencial contenido en
el flavedo vara en un rango de 0.5 a 3.0 kg/Ton de naranja. Est compuesto por terpenos
(>90 %), compuestos oxigenados y compuestos no voltiles. Los principales terpenos
presentes en el aceite de naranja son el limoneno y el -pineno y los principales
compuestos oxigenados son el linalol y el decanol (Daz et al., 2005). Tanto en el
flavedo como en el albedo de la cscara se encuentran presentes flavonoides (Tabla 2.5).
 14

Tabla 2.4 Composicin nutricional de naranja Valencia. Cantidad contenida en 100 g.

NUTRIENTE UNIDADES NARANJA NARANJA CSCARA

CON SIN DE
CSCARAa CSCARAa NARANJA
Proximal Componentes principales
Agua g 82.30 86.75 72.50
Energa kcal 63 47 97
Protenas g 1.3 0.94 1.50
Lpidos totales g 0.30 0.12 0.20
Cenizas g 0.60 0.44 0.80
Carbohidratosb g 15.50 11.75 25.00
Fibra total dietaria g 4.5 2.4 10.6
Azcares, total g ---- 9.35 ----
Minerales
Calcio mg 70 40 161
Hierro mg 0.80 0.10 0.80
Magnesio mg 14 10 22
Fsforo mg 22 14 21
Potasio mg 196 181 212
Sodio mg 2 0 3
Zinc mg 0.11 0.07 0.25
Cobre mg 0.057 0.045 0.092
Manganeso mg ---- 0.025 ----
Selenio mcg 0.7 0.5 1.0
Vitaminas
Vitamina C mg 71.0 53.2 136.0
Tiamina mg 0.100 0.087 0.120
Riboflavina mg 0.050 0.040 0.090
Niacina mg 0.500 0.282 0.900
cido Pantotnico mg 0.330 0.250 0.490
Vitamina B-6 mg 0.093 0.060 0.176
Folatos, total mcg 30 30 30
Colina, total mg ---- 8.4 ----
Vitamina A IU 250 225 420
Vitamina E mg ---- 0.18 0.25
Otros
Beta-caroteno mcg ---- 71 ----
Alfa-caroteno mcg ---- 11 ----
Beta-criptoxantina mcg ---- 116 ----
Luteina + zeaxantina mcg ---- 129 ----
a
Sin semillas. b Por diferencia.
Fuente: USDA, 2007. National Nutrient Database for Standard Reference, Release 20.
 15

Tabla 2.5 Concentracin de flavonoides en flavedo, albedo y cscara de naranja

variedad Valencia (mg por 100g de peso fresco).

FLAVONOIDE FLAVEDO ALBEDO CSCARAa

Flavanonas
Eriocitrina 8.2 3.6 5.9
Neoeriocitrina 0.0 0.0 0.0
Narirutina 13.3 118 66.5
Naringina 0.0 0.0 0.0
Hesperidina 495 2300 1410
Neohesperidina 0.0 0.0 0.0
Neoponcirina 10.1 73.0 42.1
Poncirina 0.0 0.0 0.0
Flavonas
Rutina 0.0 0.0 0.0
Isorroifolina 2.3 0.0 1.1
Roifolina 11.8 0.0 5.8
Diosmina 11.1 0.0 5.5
Neodiosmina 6.0 0.0 3.0
Flavonas Polimetoxiladas
Sinensetina 64.6 4.5 34.0
Nobiletina 33.7 3.1 18.1
Tangeretina 15.7 1.6 8.5
Heptametoxiflavona 4.1 0.0 2.0
a
Datos calculados a partir de los resultados experimentales de flavedo y
albedo.
Fuente: Nogata et al., 2006.
 16

2.2 Flavonoides

Los compuestos bioactivos son sustancias qumicas extradas de plantas, animales o

microorganismos, que causan un efecto biolgico en los organismos vivos. En las
plantas, estos compuestos son metabolitos secundarios producidos por ellas para su
defensa y supervivencia. La funcin principal que se les atribuye es la de proteccin de
la planta del ataque de herbvoros e infecciones microbianas o virales, aunque tambin
parecen participar como atrayentes de insectos polinizadores y como sustancias de
reserva energtica (Lpez, 1991).

Debido a la diversidad de sus actividades biolgicas, los compuestos bioactivos

vegetales tienen aplicacin en la industria farmacutica, alimenticia, cosmtica y
agrcola. Qumicamente se clasifican en tres grupos principales: i) terpenoides, ii)
compuestos fenlicos, entre los que se encuentran los flavonoides, y iii) alcaloides.

2.2.1 Aspectos Generales de los Flavonoides

Los flavonoides constituyen el subgrupo de compuestos fenlicos ms destacado. Son

compuestos de bajo peso molecular, solubles en agua, que se encuentran ampliamente
distribuidos en el reino vegetal (Rooprai et al., 2003). Generalmente estn presentes en
las plantas en forma de glicsidos, aunque tambin se les puede encontrar como
agliconas libres. La glicosilacin hace al flavonoide menos reactivo y ms soluble en
agua, lo que permite su almacenamiento en las vacuolas celulares (Robards y
Antolovich, 1997). En una misma planta se puede encontrar un aglicn flavonoide en
varias combinaciones glicosdicas (Valencia, 1995).

Los compuestos flavonoides comparten una estructura qumica comn (C6-C3-C6),

conformada por dos anillos aromticos (A y B), unidos entre s por tres tomos de
carbono que forman un anillo heterocclico oxigenado (C) (Manach et al., 2004). De
acuerdo con la sustitucin del anillo C, su estado de oxidacin, y la posicin del anillo
 17

B, los flavonoides se pueden clasificar en seis subclases principales: flavonoles,

flavonas, isoflavonas, flavanonas, antocianidinas y flavanoles. A su vez, dentro de estas
subclases se distinguen distintos compuestos. A la fecha se han aislado ms de cinco mil
flavonoides diferentes (Yao et al., 2004).

En las ltimas dcadas se ha incrementado el inters en los posibles efectos benficos a

la salud humana de los flavonoides, motivado principalmente por la actividad
antioxidante observada in vitro e in vivo de estos compuestos (Yao et al., 2004). Esta
propiedad antioxidante depende bsicamente de su capacidad de captacin de radicales
libres y de su actividad quelante de metales. Asimismo, estudios recientes han mostrado
que los flavonoides poseen actividades antiinflamatorias, antivirales, antiproliferativas y
anticarcinognicas, que les confieren un gran potencial teraputico (Rooprai et al., 2003,
Benavente-Garca et al., 1997). Benavente-Garca et al. (1997), reportaron tambin
propiedades antiagregantes, antiadhesivas y vasodilatadoras de estos compuestos.

2.2.2 Flavonoides Ctricos

Los flavonoides constituyen una clase muy importante de compuestos bioactivos en las
especies ctricas, en razn de sus propiedades biolgicas y de las cantidades
significativas que contienen. Entre las caractersticas que exhiben destacan sus
actividades anticncer y antiinflamatoria como dos de las principales reas de
investigacin biomdica (Manthey et al., 2001).

La concentracin ms alta de flavonoides en los frutos ctricos se presenta en la cscara

(1.7-2.0 % en peso seco) (Manthey y Grohmann, 1996). Los principales flavonoides
contenidos en la cscara de naranja dulce (Citrus sinensis) son las flavanonas
glicosiladas: hesperidina y narirutina, localizadas principalmente en el albedo; y las
flavonas polimetoxiladas: sinensetina, hexametil ter quercetagetina, nobiletina,
tetrametil escutellareina, 3,5,6,7,8,3,4-heptametoxiflavona y tangeretina, presentes en
el flavedo (Manthey, 2006; Del Ro et al., 2004) (Figura 2.2).
18
 19

F
FLAVANON
NAS GLICO
OSILADAS
S

R3 R4
esperidina
He OH OCH3
Na
arirutina H OH

FLAVONAS
S POLIMET
TOXILADAS
S

R1 R2 R3
Sinenseetina H H O 3
OCH
Hexametil ter queercetagetin
na OCH3 H O 3
OCH
Nobiletina H O 3
OCH O 3
OCH
Tetrametil escutellareina H H H
3,5,6,7,,8,3,4- O 3
OCH
Heptammetoxiflavonna OCH3 OCH3
O
Tangerretina H O 3
OCH H

F
Figura 2.2 Prrincipales flaavonoides prresentes en la
l cscara dee naranja Cittrus sinensis.
 20

La hesperidina es el flavonoide preponderante en la cscara y partes membranosas de la

naranja Citrus sinensis. La actividad biolgica reportada a la fecha de este flavonoide
incluye propiedades antioxidantes, antiinflamatorias, antihipertensivas, antimicrobianas,
hipolipidmicas, anticarcinognicas y vasodilatadoras (Etcheverry et al., 2008).

Estudios realizados con hesperidina como compuesto puro mostraron que la hesperidina
por si sola, o en combinacin con la flavona ctrica diosmina, es un efectivo inhibidor
del cncer oral, de esfago y de colon en roedores, y sugirieron su uso potencial en
humanos (Tanaka et al., 1998). Otras investigaciones hechas en roedores mostraron que
la administracin de jugos de ctricos redujo el cncer de colon en un 22 % (Miyagi et
al., 2000) y el cncer de pulmn en un 29 % (Kohno et al., 2001). En las dos
investigaciones, el efecto benfico de los jugos se atribuy a su alto contenido de
hesperidina.

En un estudio reciente hecho por Jung et al. (2006), se administr por separado un
suplemento de hesperidina y otro de naringina a ratones diabticos tipo 2. Los resultados
obtenidos sugieren que tanto la hesperidina como la naringina mejoran la hiperlipidemia
e hiperglicemia en animales con diabetes tipo 2, regulando el metabolismo de cidos
grasos y colesterol y afectando la expresin gnica de enzimas reguladoras de glucosa.

La hesperidina, suministrada junto con otros flavonoides, se usa en el tratamiento de

pacientes que presentan desrdenes vasculares, caractersticos de enfermedades como la
insuficiencia venosa crnica y hemorroides. En tales casos, acta reduciendo la
fragilidad y permeabilidad capilar (Garg et al., 2001).

Las flavonas polimetoxiladas son un grupo de flavonoides agliconas caracterstico de los

frutos ctricos, presentes principalmente en naranja y mandarina (Manthey et al., 2001).
Estos flavonoides son compuestos relativamente lipoflicos, escasamente solubles en
agua (Wang et al., 2008). Se encuentran en el flavedo de la cscara, asociados con las
glndulas de aceite (Widmer y Montanari, 1994). El contenido de flavonas
 21

polimetoxiladas reportado en aceites esenciales de cscara de naranja y mandarina es

200 a 500 veces mayor que el encontrado en los jugos de estos ctricos (Mouly et al.,
1999).

Las flavonas polimetoxiladas se encuentran en la cscara de los ctricos en

concentraciones mucho ms bajas que las flavanonas glicosiladas, sin embargo, han
suscitado un gran inters farmacolgico por su superior actividad biolgica (Del Ro et
al., 2004; Benavente-Garca, et al., 1997). La naturaleza lipoflica de los grupos
metoxilo les confiere una mayor permeabilidad a travs del intestino delgado y les
permite una rpida absorcin en el sistema circulatorio (Li et al., 2006).

Si bien muchos flavonoides han mostrado una fuerte actividad antitumor en

investigaciones realizadas en roedores y en lneas celulares humanas, las flavonas
polimetoxiladas han resultado ser inhibidores ms potentes del crecimiento de clulas
tumorales que los flavonoides hidroxilados. Las flavonas polimetoxiladas poseen,
adems, potentes actividades anti-invasivas y anti-metastsicas (Pan et al., 2002).

Manthey y Guthrie (2002), evaluaron las actividades antiproliferativas de distintas

subclases de flavonoides ctricos en seis lneas celulares cancergenas de humano: cncer
de pulmn, cncer de prstata, cncer de colon, melanoma, cncer de seno con receptor
de estrgeno positivo y cncer de seno con receptor de estrgeno negativo. El estudio
incluy flavonas polimetoxiladas naturales y sintticas, agliconas de flavonas
hidroxiladas, agliconas de flavanonas hidroxiladas, flavonas glicosiladas y flavanonas
glicosiladas. Los resultados mostraron que las flavonas polimetoxiladas naturales y
sintticas exhibieron las actividades antiproliferativas ms altas contra las seis lneas
celulares de cncer.

Las flavonas polimetoxiladas nobiletina y tangeretina, se consideran dos de los

flavonoides ms efectivos en la inhibicin de proliferacin de clulas cancergenas
humanas. Kandaswami et al. (1991), examinaron los efectos de quercetina, taxifolina
 22

(dihidroquercetina), nobiletina y tangeretina, en el crecimiento in vitro de clulas

humanas de carcinoma escamocelular. Los resultados obtenidos mostraron que la
nobiletina y tangeretina inhibieron el crecimiento canceroso, en tanto que la quercetina y
la taxifolina no presentaron una actividad de inhibicin significativa. La nobiletina y la
tangeretina han mostrado ser tambin inhibidores de la proliferacin celular en lneas de
clulas humanas de gliosarcoma, leucemia, melanoma, cncer colorrectal, carcinoma
gstrico y carcinoma de pulmn (Morley et al., 2007).

La produccin excesiva de xido ntrico en el organismo humano se ha relacionado con

condiciones fisiopatolgicas, tales como inflamacin, carcinognesis y aterosclerosis.
Choi et al. (2007), compararon las actividades inhibidoras de produccin de xido
ntrico de los flavonoides naringina, naringenina, hesperidina, hesperetina, rutina,
nobiletina y tangeretina, contenidos en extractos de cscara de veinte especies ctricas.
De los flavonoides evaluados, la nobiletina exhibi la actividad inhibidora de
produccin de xido ntrico ms potente. Lo anterior sugiere el uso de la nobiletina en el
tratamiento de enfermedades inflamatorias crnicas, resultantes de la sobreproduccin
de xido ntrico. Otras investigaciones publicadas (Wilcox et al., 2001; Kurowska y
Manthey, 2004), han reportado que los flavonoides ctricos tienen la capacidad de
reducir la produccin heptica de lipoprotenas que contienen colesterol, y de disminuir,
en consecuencia, los niveles de colesterol total en plasma, lo que podra reducir la
incidencia de enfermedades cardiovasculares. El estudio realizado por Kurowska y
Manthey (2004), evaluado en hamsters alimentados con dieta hipercolesterolmica,
indic que el efecto hipocolesterolmico in vivo de la formulacin de flavonas
polimetoxiladas conteniendo principalmente tangeretina, fue mayor que el mostrado por
las flavanonas glicosiladas hesperidina y naringina.

2.2.3 Patentes y Productos Comerciales Relacionados

Las patentes son una fuente relevante de informacin, indicativa de la capacidad de

transferencia a la industria de investigaciones cientficas novedosas, y de la posibilidad
 23

de explotacin comercial de las mismas. En el presente trabajo se anexan los resultados

obtenidos de una bsqueda de patentes y solicitudes de patente, concerniente a
aplicaciones biomdicas de los principales flavonoides presentes en la cscara de naranja
Citrus sinensis: hesperidina (Anexos A y B) y flavonas polimetoxiladas (Anexos C y D).

Las patentes citadas sealan el uso de hesperidina como ingrediente activo principal de
composiciones acuosas o tpicas, tiles en el tratamiento o prevencin del herpes (US
5,849,786), as como su inclusin en pasta de dientes o enjuague bucal, efectivos en el
tratamiento de la gingivitis (US 4,559,224), y en composiciones oftalmolgicas de
limpieza y desinfeccin de lentes de contacto (EP 0 883 408 B1).

La patente US 5,763,414 reivindica un mtodo inhibitorio de reductasa 3-hidroxi-3-

metiglutaril CoA (HMG-CoA), til para el tratamiento de hipercolesterolemia en
humanos, el cual consiste en la administracin de cantidades efectivas de hesperidina o
de su aglicona hesperetina. La inhibicin de reductasa HMG-CoA reduce la velocidad de
biosntesis de colesterol en el hgado.

Otra de las invenciones presenta el uso de hesperidina o de uno de sus derivados, como
ingrediente activo de una composicin nutricional y de una composicin farmacutica,
estimulantes de la formacin de huesos y/o inhibidoras de la resorcin sea (patente EP
1 536 806 B1 y solicitud de patente PCT/FR2003/002005). Por otra parte, la solicitud de
patente PCT/MX2008/000119 describe una composicin farmacutica compuesta por
una fraccin flavonoide purificada micronizada de diosmina y hesperidina, y por
dobesilato de calcio, tres agentes con actividad venotnica y vasoprotectora, como una
combinacin sinrgica til en el tratamiento de la insuficiencia crnica venosa y
enfermedades relacionadas.

La actividad anticncer de los extractos de cscara de naranja se ha sealado en la

patente US 7,201,928 B1, la cual reivindica composiciones y mtodos que inhiben el
crecimiento de clulas tumorales, aplicables en el tratamiento de cncer de colon en
 24

humanos. La invencin destaca a las flavonas polimetoxiladas tangeretina y nobiletina

como los principales componentes del extracto, pudiendo tambin incluirse en la
composicin otras flavonas polimetoxiladas.

En la patente US 6,251,400 B1 se describen mtodos con aplicacin en la prevencin y

tratamiento de enfermedades neoplsicas, aterosclerosis e hipercolesterolemia,
consistentes en la administracin de dosis efectivas de limonoides ctricos, solos o en
combinacin con flavonoides ctricos y tocotrienoles de aceite de palma. Los
flavonoides ctricos usados en la invencin son las flavonas polimetoxiladas nobiletina o
tangeretina.

Las citocinas son sustancias de tipo proteico o glucoproteico que forman parte del
sistema inmunolgico humano. La patente US 6,184,246 B1 est dirigida a proporcionar
un mtodo de inhibicin de produccin de citocinas, til en el tratamiento de desrdenes
tales como el factor de necrosis tumoral alfa, o de enfermedades tales como el cncer,
reumatismo crnico, colitis ulcerosa, todos ellos causados o caracterizados por una
excesiva o indeseable produccin de citocinas. El tratamiento consiste en la
administracin de una cantidad efectiva, inhibidora de produccin de citocinas, de una
flavona polimetoxilada ctrica.

De acuerdo a la solicitud de patente US 11/690,683, los flavonoides ctricos tambin

tienen aplicacin en el tratamiento de la obesidad, diabetes y sndrome metablico. Los
compuestos, particularmente flavonas polimetoxiladas suministradas como extracto de
cscara de naranja, actan reduciendo la actividad de la enzima 11Beta-HSD1. El
extracto de cscara de naranja debe incluir una o ms de las flavonas polimetoxiladas
nobiletina, tangeretina y sinensetina.

En las Tablas 2.6 y 2.7 se presentan productos comerciales farmacuticos que contienen
como ingrediente activo hesperidina y flavonas polimetoxiladas, respectivamente.
 25

Tabla 2.6 Productos comerciales que contienen hesperidina.

PRODUCTO COMPOSICIN COMPAA

(PRINCIPIO ACTIVO)

Daflon 500 mg Fraccin flavonoica purificada y Laboratorios Servier, S.L.

micronizada equivalente a 450 www.servier.com
mg de Diosmina y 50 mg de
Hesperidina.

Venodiol Por tableta: World Medicine Ltd.

Diosmina, 450 mg; Hesperidina, www.worldmedicine.ge
50 mg; cido ascrbico, 100 mg.

DiosVein Fuente de bioflavonoides Berg Imports LLC

derivados de naranja dulce. www.swansonvitamins.com
cai@bergimports.com
Por cpsula:
Diosmina (de DiosVein), 500
mg; Hesperidina (de cscara de
ctricos), 100 mg.

Best Vein Support Por cpsula vegetal: Doctors Best, Inc.

featuring Vitamina K2 (como MenaQ7), www.drbvitamins.com
DiosVein 25 mcg; DiosVein Diosmina
EP (mnimo 90%), 450 mg;
Extracto natural de naranja
(estandarizado a un mnimo de
97 % de hesperidina), 50 mg.

Vein Matrix Por dos cpsulas vegetales: New Vitality

Vitamina C (cido ascrbico), www.newvitality.com
100 mg; Extracto de castao de
Indias (estandarizado a 20 % de
Aescin), 500 mg; Diosmina, 450
mg; Rusco, 300 mg; Hesperidina
(de cscara de ctricos), 50 mg;
Extracto de hoja de Gotu Kola,
30 mg.
 26

Tabla 2.6 Productos comerciales que contienen hesperidina. (cont.)

PRODUCTO COMPOSICIN COMPAA

(PRINCIPIO ACTIVO)

FlavoPlex C Combinacin de vitamina C Interplexus, Inc.

con flavonoides puros y www.interplexus.com
extracto de semilla de uva.

Por 2 cpsulas:
Vitamina C (como ascorbato de
calcio), 420 mg; Calcio (como
ascorbato), 48 mg; Hesperidina,
300 mg; Hesperidina metil
chalcona, 200 mg; Extracto de
semilla de uva, 100 mg;
Extracto de cereza de invierno,
180 mg; Naringina, 100 mg.

Hist-O-Cal Por tableta: Nutri-West, Inc.

Vitamina A (como acetato), www.nutriwest.com
5,000 i.u.; cido pantotnico
(D-pantotenato de calcio), 50
mg; Calcio (como ascorbato),
59 mg; Complejo de
hesperidina, 50 mg; L-tirosina,
25 mg; Betana HCL, 30 mg;
Adrenal, 50 mg; Pulmn, 20
mg; Hgado, 20 mg; Timo, 10
mg; Fenogreco (semilla), 50
mg; Aloe vera (hoja), 10 mg.

Kal Bioflavonoid Cada tableta contiene: HerbsMD

Complex Concentrado de hesperidina (de www.herbsmd.com
limn [Citrus limonium],
naranja [Citrus sinensis],
toronja [Citrus paradisi]), 60
mg; Complejo de
bioflavonoides (de limn
[Citrus limonium], naranja
[Citrus sinensis], toronja
[Citrus paradisi]), 1000 mg.
 27

Tabla 2.6 Productos comerciales que contienen hesperidina. (cont.)

PRODUCTO COMPOSICIN COMPAA

(PRINCIPIO ACTIVO)

Kal C 1000 Vitamina C (como cido Nutraceutical Corporation

Complex ascrbico), 1000 mg; www.nutraceutical.com
Concentrado de rutina, 100 mg;
Rosa mosqueta, 100 mg;
Concentrado de hesperidina, 100
mg; Concentrado de
bioflavonoides, 500 mg.

Hesper C Por cpsula: Laboratorios Unidos, S.A.

Hesperidina, 360 mg; cido
ascrbico (vitamina C), 200 mg;
Rutsidos, 25 mg; Bisulfito
sdico menadioma (vitamina K),
2.5 mg.
www.cmp-trujillo.org.pe
laboratoriosunidos
@infonegocio.net.pe
 28

Tabla 2.7 Productos comerciales que contienen flavonas polimetoxiladas.

PRODUCTO COMPOSICIN COMPAA

(PRINCIPIO ACTIVO)

Citri-Z Extracto derivado de ctricos y Next Pharmaceuticals, Inc.

estandarizado a un contenido www.nextpharmaceuticals.com
no menor de 30 % de flavonas
polimetoxiladas.

Nexrelief Compuesto por Nexrutine Next Pharmaceuticals, Inc.

(extracto de la planta www.nextpharmaceuticals.com
Phellodendron) y Citri-Z
(extracto natural de ctricos con
al menos 30 % de flavonas
polimetoxiladas).

Por cpsula:
Nexrutine, 500 mg; Citri-Z,
50 mg.

Flavoxine Mezcla de extracto de corteza Next Pharmaceuticals, Inc.

de rbol (Phellodendron www.nextpharmaceuticals.com
amurense), y de extracto
estandarizado de flavonas
polimetoxiladas de cscara de
naranja (Citrus sinensis).

Por cpsula:
Flavoxine, 370 mg.

Citrofen Mezcla de extracto de corteza Next Pharmaceuticals, Inc.

de rbol (Phellodendron www.nextpharmaceuticals.com
amurense), y de extracto de
flavonas polimetoxiladas de
cscara de naranja Citrus
sinensis.

Por cpsula:
Citrofen, 370 mg.
 29

Tabla 2.7 Productos comerciales que contienen flavonas polimetoxiladas. (cont.)

PRODUCTO COMPOSICIN COMPAA

(PRINCIPIO ACTIVO)

CitruXine PMF Extracto de naranja Citrus Xymogen, Inc.

sinensis estandarizado a un www.xymogen.com
contenido no menor de 30 % de
flavonas polimetoxiladas.

Por cpsula:
CitruXine PMF (Citrus
extract), 400 mg.

Sytrinol Complejo de flavonas SourceOne Global Partners

polimetoxiladas ctricas www.source-1-global.com
(naranja y mandarina) y
tocotrienoles de fruta de palma
(Elaeis guineensis).

Por softgel:
Sytrinol, 150 mg.

Cardio Pro Frmula compuesta de Sytrinol, ProAdjuster LifeStyle

esteroles de planta y extracto de www.proadjusterlifestyle.com
granada.

Por dos cpsulas:

Esteroles de planta
(Fitoesteroles) (de soya), 400
mg; Sytrinol (extracto de
flavonas polimetoxiladas de
frutas ctricas y tocotrienoles de
fruta de palma), 150 mg;
Extracto estandarizado de
granada (fruta) (estandarizado a
40 % de cido elgico), 50 mg.

Cholestin Ingredientes activos: Pharmanex, Inc.

Tocotrienoles y flavonas www.pharmanex.com
polimetoxiladas de frutas
ctricas; geraniol; lpidos
marinos.
 30

Tabla 2.7 Productos comerciales que contienen flavonas polimetoxiladas. (cont.)

PRODUCTO COMPOSICIN COMPAA

(PRINCIPIO ACTIVO)

ArthroMax Por cuatro cpsulas: Life Extension

Sulfato de glucosamina myhealthonline.com
(derivado de crustceos), 1000
mg; N-acetil-D-glucosamina
(derivado de crustceos), 1000
mg; Metilsulfonilmetano
(MSM), 1000 mg; Mezcla de
extractos naturales de ctricos
conteniendo nobiletina y
tangeretina, y de fruta de palma,
300 mg; 5-Loxin
(estandarizado para un mnimo
de 30 % en base seca de cido
3-O-acetil-11-ceto--
boswelico), 75 mg.

Citricoma Combinacin de flavonas HP Ingredients

polimetoxiladas (extracto de www.hpingredients.com
cscara de naranja) y Eurycoma
Longifolia (extracto).

Por dos cpsulas:

Citricoma, 200 mg.
 31

2.3 Tcnicas de Extraccin de Flavonoides

La extraccin con solventes orgnicos ha sido la tcnica tradicionalmente usada para el

aislamiento de flavonoides de muestras vegetales. El mtodo se basa en la separacin
por difusin de los compuestos solubles, originalmente presentes en el tejido vegetal,
haciendo uso de un solvente orgnico (Escribano-Bailon y Santos Buelga, 2003). La
materia prima se puede usar fresca, congelada o seca, y debe ser macerada o molida
antes de su extraccin. Los solventes de extraccin de compuestos fenlicos ms usados
son el metanol, el etanol y las mezclas metanol o etanol-agua (Ziakov y Brandteterov,
2002). El tipo y volumen de solvente, as como el nmero de tratamientos repetitivos
dados a la muestra, son factores importantes a considerar para una extraccin eficiente
de flavonoides por este procedimiento.

Otra tcnica convencional aplicada en la recuperacin de flavonoides es la extraccin en

fase slida. En este mtodo, los compuestos qumicos de inters son retenidos en un
adsorbente slido, y posteriormente son recuperados por elucin con un disolvente
adecuado (Wells, 2003). La principal ventaja de esta tcnica es el requerimiento de
volmenes significativamente menores de solventes orgnicos. La extraccin en fase
slida se aplica a la recuperacin de compuestos de muestras lquidas.

Entre las nuevas tcnicas de extraccin de compuestos bioactivos de muestras slidas y

lquidas, se encuentra la extraccin con fluidos supercrticos. Esta tcnica es de reciente
aplicacin en la recuperacin de flavonoides y otros compuestos fenlicos. La operacin
de extraccin supercrtica de los compuestos se lleva a cabo en ausencia de luz y
oxgeno, lo que minimiza procesos de degradacin que se pueden presentar con las
tcnicas convencionales de extraccin, como son oxidaciones e isomerizaciones de los
compuestos (Escribano-Bailon y Santos Buelga, 2003); esto conduce a la obtencin de
extractos ms estables, de mayor calidad y con incrementada vida de anaquel. El
solvente ms comnmente usado en la extraccin supercrtica es el bixido de carbono,
llevado a condiciones de operacin superiores a las de su punto crtico (73.8 bar y 31.1
 32

C). La aplicacin de temperaturas moderadas de extraccin permite procesar materiales

de productos naturales, los cuales en su generalidad son trmicamente inestables, sin
alterar sus propiedades funcionales. Un fluido en estado supercrtico presenta una
densidad similar a la de los solventes lquidos, a la vez que posee una difusividad ms
alta y una viscosidad menor a ellos. Adems, a diferencia de un solvente lquido, un
fluido supercrtico puede ajustar su densidad, y de ah su poder disolvente (Wang y
Weller, 2006). Estas caractersticas propias de los fluidos supercrticos, permiten reducir
el tiempo de proceso y extraer de manera selectiva compuestos de inters.

La extraccin acelerada con disolventes es otra de las nuevas tcnicas desarrolladas en la

obtencin de compuestos fenlicos. Esta tcnica, llamada tambin extraccin
presurizada con disolvente y extraccin lquida presurizada, se aplica en la extraccin de
compuestos de muestras slidas y semislidas. En ella se usan temperaturas y presiones
elevadas, en el rango de 50 a 200 C y 10 a 15 MPa, respectivamente. Se le considera
una tcnica similar a la de extraccin con fluidos supercrticos, pero, a diferencia de esta
ltima, el solvente se mantiene por debajo de su punto crtico, en estado lquido. La alta
temperatura de operacin incrementa la difusividad del solvente y acelera la extraccin
de los compuestos (Wang y Weller, 2006).

2.4 Extraccin con Fluidos Supercrticos

Un fluido supercrtico es una sustancia que ha sido llevada a condiciones de presin y

temperatura superiores a su presin crtica (Pc) y temperatura crtica (Tc). En la Figura
2.3 se muestra el diagrama de fases de una sustancia pura. El punto crtico (Pc, Tc) es el
punto final de la curva de coexistencia gas-lquido, y representa la mxima presin y
temperatura en la que la fase gas (vapor) y la fase lquida de la sustancia estn en
equilibrio.

Un incremento simultneo de presin y temperatura en una mezcla lquido-vapor,

situada a lo largo de la curva donde coexisten en equilibrio el gas y el lquido, da lugar a
33
 34

Presin

FLUIDO
SUPERCRTICO

SLIDO LQUIDO

Pc
Punto
Crtico

Vapor GAS
Punto
Triple

Tc Temperatura

Figura 2.3 Diagrama de fases de una sustancia pura.

 35

dos efectos: la densidad de la fase vapor aumenta debido al incremento de presin, y la

densidad de la fase lquida disminuye a causa del incremento de temperatura.
Finalmente, en el punto crtico la densidad de la fase lquida llega a ser igual a la
densidad de la fase vapor y la distincin entre las fases desaparece (Clifford y Williams,
2000). En la regin supercrtica slo existe una fase: la de fluido supercrtico. En este
estado, una compresin isotrmica del fluido da lugar un incremento de su densidad,
pero no a la formacin de lquido por condensacin (Leitner, 2004). Un fluido
supercrtico es tambin llamado un gas denso.

En el estado supercrtico, un fluido adquiere propiedades nicas, intermedias entre las de

un gas y un lquido. Su densidad es similar a la de un lquido, su difusividad es ms alta
que la de un lquido, y su viscosidad es ms cercana a la de un gas (Tabla 2.8). Estas
caractersticas le confieren al fluido supercrtico importantes ventajas como solvente de
extraccin.

2.4.1 Propiedades de los Fluidos Supercrticos para la Extraccin

La extraccin supercrtica es un proceso de separacin basado en la transferencia de

masa entre una matriz slida, la cual contiene el soluto de inters, y un fluido
supercrtico, usado como solvente extractor. En la actualidad, esta tcnica es considerada
una importante alternativa a los procesos de extraccin con solventes orgnicos,
tradicionalmente usados en la obtencin de compuestos naturales. La densidad de los
fluidos supercrticos les confiere un poder solvente muy prximo al que tienen los
solventes lquidos, y sus propiedades de transporte, parecidas a las de los gases, resultan
mejores para la extraccin que las de los solventes lquidos: su coeficiente de difusin
ms alto les permite una penetracin ms fcil y rpida en la muestra, y su menor
viscosidad les posibilita un transporte ms rpido del soluto extrado (Clifford y
Williams, 2000). Adems, la baja tensin superficial de los fluidos supercrticos, inferior
a la de los lquidos, facilita su penetracin en los sustratos porosos de tejidos vegetales
(del Valle et al., 2004), favoreciendo tambin la transferencia de masa.
 36

Tabla 2.8 Propiedades fsicas y de transporte de gases, lquidos y fluidos supercrticos.

ESTADO DEL FLUIDO DENSIDAD DIFUSIVIDAD VISCOSIDAD

(g/cm3) (cm2/s) (g/cm.s)

Gas (0.62.0) x 10-3 0.10.4 (0.62.0) x 10-4

P = 1 atm, T = 15-30 C

Lquido
P = 1 atm, T = 15-30 C 0.6-1.6 (0.2-2.0) x 10-5 (0.2-3.0) x 10-2

Fluido Supercrtico
P = Pc, T Tc 0.2-0.5 0.7 x 10-3 (1-3) x 10-4
P = 4 Pc, T Tc 0.4-0.9 0.2 x 10-3 (3-9) x 10-4

Fuente: Brunner, 2005.

 37

El poder disolvente de un fluido supercrtico depende de su densidad, y en un proceso de

extraccin, sta puede ser manipulada en un rango relativamente amplio de valores,
sencillamente realizando pequeos cambios en la presin y temperatura de operacin
(Wang y Weller, 2006). Esto otorga a los fluidos supercrticos la posibilidad de ajustar
su poder disolvente, y permite a la tcnica supercrtica una extraccin selectiva de los
compuestos solubles de inters. Posteriormente, el fluido supercrtico puede ser separado
fcilmente del soluto extrado, disminuyendo su poder disolvente con una reduccin de
presin.

2.4.2 Proceso de Extraccin Supercrtica

La extraccin supercrtica de compuestos naturales a partir de sustratos vegetales

slidos, se lleva a cabo usualmente poniendo en contacto un lecho fijo de sustrato con un
flujo vertical continuo de solvente supercrtico. La fase slida consiste del soluto y del
residuo insoluble del sustrato, y la fase fluida es la solucin del soluto en el solvente.

La extraccin del soluto comprende las siguientes etapas (Daz-Reinoso et al., 2006):

1. Transporte del fluido supercrtico a la superficie externa de la matriz slida;

2. Penetracin y difusin del fluido supercrtico en la matriz slida;
3. Solubilizacin del soluto;
4. Transporte del soluto a travs de la matriz slida; y
5. Transporte del soluto de la superficie externa del slido a la solucin solvente
(transferencia de masa externa).

En el curso de la extraccin, diferentes tipos de compuestos naturalmente presentes en

los aceites vegetales de los sustratos pueden ser extrados simultneamente a diferentes
velocidades de extraccin. La velocidad de extraccin de los solutos depender de la
transferencia de masa externa, de la difusividad efectiva del soluto en el slido, de la
solubilidad del soluto en el solvente supercrtico y del enlace del soluto en la matriz
 38

slida (del Valle et al., 2005).

En general, el tratamiento dado al material vegetal, previo a la extraccin supercrtica,

comprende el secado y la reduccin de tamao de la materia prima. Si bien la humedad
en la extraccin de compuestos bioactivos polares puede actuar como cosolvente interno
y ayudar con ello a incrementar el rendimiento de la extraccin, la presencia de agua en
los sustratos vegetales tambin puede dificultar el contacto entre los compuestos
bioactivos de inters y el fluido supercrtico (King y France, 1992). Adems, una
humedad alta puede conducir a la formacin de hielo y obstruir el sistema. De acuerdo a
Eggers (1996), un contenido de humedad de hasta 12 % en el sustrato no afecta la
transferencia de masa en la extraccin supercrtica de aceites vegetales.

Por otra parte, la solubilidad operacional o solubilidad aparente del soluto en el fluido
supercrtico, est en funcin de la solubilidad del soluto en el fluido a la presin y
temperatura de extraccin (solubilidad termodinmica), y de cmo el soluto est ligado a
la matriz del slido (del Valle et al., 2005). Un proceso previo de molienda incrementa
el rea de contacto de las partculas slidas con el solvente supercrtico, a la vez que
libera el aceite de las paredes celulares fragmentadas, acercando la solubilidad
operacional al valor lmite de solubilidad termodinmica. En este caso, la velocidad de
extraccin del aceite libre, localizado en la superficie de las partculas fragmentadas del
sustrato vegetal previamente molido, es controlada por la resistencia externa a la
transferencia de masa, en tanto que la velocidad de extraccin del aceite ligado a la
matriz del slido, localizado en las porciones interiores de las partculas no daadas, o
parcialmente daadas con el pretratamiento, es controlada por la resistencia interna a la
transferencia de masa (del Valle y de la Fuente, 2006).

2.4.3 Modelacin de la Extraccin Supercrtica

En la extraccin supercrtica de lechos empacados de sustratos slidos, el solvente fluye

verticalmente a travs del lecho fijo formado por partculas slidas, y es saturado
 39

gradualmente con el soluto extrado (Figura 2.4). De esta manera se presenta una
transferencia de masa de la fase slida hacia la fase fluida (Brunner, 1994). Se han
desarrollado diferentes planteamientos de modelos matemticos para describir la
transferencia de masa en la extraccin supercrtica de sustratos vegetales slidos.
Algunos de ellos, como el de Naik et al. (1998), son modelos empricos que no
consideran las interacciones entre el soluto y la matriz slida y slo describen el
rendimiento en funcin del tiempo de extraccin (Esquivel et al., 1999). Para propsitos
de escalamiento y diseo de procesos comerciales, los modelos de extraccin
supercrtica ms adecuados son aquellos que se basan en ecuaciones diferenciales de
balance de masa planteadas para una seccin cilndrica delgada del lecho empacado (del
Valle et al., 2000).

Un modelo para extraccin de productos naturales desarrollado por Sovov (2005),

incluye el concepto de clulas vegetales intactas y clulas vegetales fragmentadas por el
pretratamiento de la muestra. El modelo se basa en las siguientes suposiciones: a) las
partculas de slido contienen clulas fragmentadas cerca de la superficie y clulas
intactas en el centro; b) el soluto fcilmente accesible de las clulas fragmentadas se
transfiere directamente a la fase fluida, en tanto que el soluto de las clulas intactas se
difunde primero a las clulas fragmentadas y posteriormente a la fase fluida; c) la
transferencia de masa de las clulas fragmentadas hacia el solvente, presenta un
coeficiente de transferencia de masa de la fase fluida algunos rdenes de magnitud
mayor, que el coeficiente de transferencia de masa relacionado con la difusin de las
clulas intactas a las clulas fragmentadas; d) las caractersticas del lecho de extraccin,
el espacio vaco y el rea superficial, no son afectados por la reduccin de masa del
slido ocurrida durante la extraccin, y la densidad del fluido no es afectada por el
soluto disuelto en el solvente.

El balance de masa por unidad de volumen del lecho de extraccin del modelo es
planteado para un flujo tapn. Se considera una ecuacin para el soluto en la fase fluida
(Ec. 2.1); otra ecuacin para la fase slida con clulas fragmentadas (Ec. 2.2); y una
 40

Solvente + extracto

Partcula de slido

Solvente

Figura 2.4 Representacin esquemtica de la extraccin supercrtica de sustratos vegetales.

 41

tercera para la fase slida con clulas intactas (Ec. 2.3):

y y
f +U = j f Ec. (2.1)
t h

x1
r s (1 ) = js j f Ec. (2.2)
t

x2
(1 r ) s (1 ) = js Ec. (2.3)
t

Donde: f es la densidad del solvente; s es la densidad del slido; y es la

concentracin en la fase fluida; x1 es la concentracin en las clulas fragmentadas; x2

es la concentracin en las clulas intactas; t es el tiempo de extraccin; h es la
coordenada axial; es la fraccin de espacio vaco; r es la eficiencia de la molienda
(fraccin de clulas fragmentadas); U es la velocidad interstitical del fluido; j f es el

flujo de las clulas fragmentadas hacia el solvente; js es el flujo de las clulas intactas
hacia las clulas fragmentadas.

Un modelo general de transferencia de masa para sustratos slidos descrito por del Valle
et al. (2005), considera la difusin en el slido (Ec. 2.4); el equilibro entre fases en la
superficie del slido (Ec. 2.5); y la conveccin en la fase fluida (Ec. 2.6):

c s De 2 c s
= 2 r Ec. (2.4)
t r r

c f = f (c s ) Ec. (2.5)
 42

2c f
c f
t
+U
c f
z
DL
z 2
=3
R
(
1 k f
cf cf ) Ec. (2.6)

El modelo est planteado para partculas de slido esfricas. En el, c s es la concentracin

del soluto en el slido, o adsorbido en el slido; c f es la concentracin del soluto en el

fluido supercrtico; c f es la concentracin del soluto en una pelcula de fluido

supercrtico que est en equilibrio con la superficie del slido; t es el tiempo de

extraccin; z es la posicin axial en el lecho empacado; De es el coeficiente de difusin
efectivo en el sustrato slido; DL es el coeficiente de dispersin axial del soluto; k f es

el coeficiente de transferencia de masa de la pelcula; r es la posicin radial en el interior

de la partcula; R es el radio de las partculas slidas esfricas; es la porosidad del
lecho empacado; U es la velocidad superficial del solvente.

Este modelo general puede simplificarse no incluyendo algunos mecanismos de

transferencia de masa que pudieran no tener efecto, o tener un efecto no significativo en
el proceso. del Valle y de la Fuente (2006), evaluaron el posible efecto de la dispersin
axial ( DL ) en una extraccin supercrtica industrial de aceites de semillas, a condiciones
de 40 C, 300 bar, y usando un recipiente de extraccin de 1 m3 con una relacin
longitud:dimetro de 4:1. En el estudio se concluy que la dispersin axial no afectara
la velocidad de transferencia de masa de la extraccin a nivel industrial.

Existen otros modelos de extraccin supercrtica publicados en la literatura cientfica,

cada uno adaptado para una descripcin diferente de proceso. En un sustrato vegetal, los
compuestos a extraer se encuentran en forma libre en la superficie del slido, adsorbidos
en la superficie exterior, localizados en el interior de los poros, o distribuidos en el
interior de las clulas vegetales. La seleccin del modelo a aplicar deber depender de la
localizacin original de los compuestos en el sustrato, as como del anlisis de los
resultados de rendimiento obtenidos experimentalmente (Reverchon, 1997).
 43

2.4.4 Propiedades del Bixido de Carbono Supercrtico

El bixido de carbono es el solvente ms usado en la extraccin supercrtica. Es inerte,

no es txico, no es inflamable, su costo es bajo y se encuentra fcilmente disponible en
alta pureza. Adems, su punto crtico (73.8 bar y 31.1 C) es relativamente bajo
comparado al de los otros solventes.

La molcula de bixido de carbono no tiene un momento bipolar neto, por lo que se le

considera no polar y un buen disolvente de compuestos no polares. No obstante, el
bixido de carbono presenta en su molcula un momento cuadrupolar importante que le
permite, a presiones altas, disolver en cierto grado sustancias ligeramente polares y
algunas polares.

En trminos generales, el poder solvente del bixido de carbono presenta el siguiente

comportamiento (Brunner, 2005; del Valle y Aguilera, 1999):

1. Disuelve compuestos no polares y ligeramente polares.

2. Su poder solvente con compuestos de bajo peso molecular es alto y disminuye con el
aumento del peso molecular y con la presencia de grupos polares.
3. Los compuestos orgnicos oxigenados de mediano peso molecular, compuestos
orgnicos no polares de bajo peso molecular y compuestos orgnicos polares de muy
bajo peso molecular son completamente solubles.
4. Los cidos grasos libres y sus glicridos presentan bajas solubilidades.
5. Los pigmentos son an menos solubles.
6. El agua, a temperaturas menores a 100 C, tiene una baja solubilidad (< 0.5 %
peso/peso) en bixido de carbono supercrtico.
7. Las protenas, polisacridos, azcares y sales minerales son insolubles.
8. A medida que la presin de extraccin se incrementa, el bixido de carbono
supercrtico es capaz de extraer compuestos menos voltiles, de mayor peso
molecular y/o mayor polaridad.
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Por su baja temperatura crtica, cercana a la ambiente, el bixido de carbono resulta el

solvente ms adecuado en la extraccin supercrtica de compuestos bioactivos
termolbiles. Sin embargo, los compuestos fenlicos y los alcaloides, por su carcter
polar, son poco solubles en bixido de carbono supercrtico (Wang y Weller, 2006). En
estos casos, la adicin de un cosolvente polar al fluido supercrtico podra incrementar la
densidad de la mezcla de fluidos (bixido de carbono-cosolvente), y contribuir a un
aumento en la solubilidad de los compuestos.

2.4.5 Uso de Cosolventes en la Extraccin con Fluidos Supercrticos

Un cosolvente es usualmente un solvente orgnico de volatilidad intermedia entre la del

fluido supercrtico y la del soluto que se desea extraer, que se adiciona al solvente
supercrtico con la finalidad de incrementar la solubilidad y extractabilidad de un
compuesto.

El incremento de solubilidad por la adicin de cosolvente se da principalmente por un

incremento en la densidad del solvente, y/o por la formacin de interacciones
intermoleculares especficas entre el soluto y el cosolvente. La presencia de las
interacciones soluto-cosolvente incrementan adems la selectividad de extraccin del
compuesto (Gl-stnda y Temelli, 2005).

En algunos casos, el cosolvente puede ser adsorbido en la superficie del sustrato; en

estas circunstancias el cosolvente acta previniendo la readsorcin del compuesto que
est siendo extrado (Williams et al., 2002).

El metanol y el etanol son los cosolventes ms frecuentemente usados en la extraccin

supercrtica de compuestos polares. Los dos tienen la capacidad de formar puentes de
hidrgeno e interacciones dipolo-dipolo con compuestos fenlicos (Murga et al., 2000);
sin embargo, por su baja toxicidad, el etanol representa una mejor opcin para la
extraccin de compuestos con actividad biolgica.
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