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EXTRACCIN DEL ADN

I. INTRODUCCIN
El cido ribonucleico (ARN) y el cido desoxirribonucleico (ADN) son
macromolculas que intervienen en el almacenamiento y en la transferencia de la informacin
gentica. Son componentes fundamentales de la clula y constituyen, en conjunto, entre el 5 y
el 10% del peso seco.

Normalmente no se encuentran solos sino que se hallan formando nucleoprotenas, ya


que suelen unirse a determinados tipos de stas como las histonas. Hay 2 clases de protenas
de unin del ADN. Las histonas son la principal clase de protenas de unin al ADN
involucradas en mantener la estructura compacta de la cromatina. Hay 5 diferentes protenas
de histona identificadas como H1, H2A, H2B, H3 y H4.La otra clase de protenas de unin al
ADN es un diverso grupo de protenas llamadas simplemente, protenas no histonas. Esta
clase de protenas incluyen los distintos factores de transcripcin, polimerasas, receptores
hormonales y otras enzimas nucleares. En cualquier clula dada hay ms de 1000 diferentes
tipos de protenas no histonas unidas al ADN.

El ARN se localiza tanto en el citoplasma celular como en el ncleo, mitocondrias y


cloroplastos, mientras que el ADN se sita fundamentalmente en el ncleo de la clula, y
tambin cloroplastos y mitocondrias en pequeas cantidades. Poseen una importancia
manifiesta por el hecho de que ellos dirigen y llevan a cabo la sntesis de protenas y, por
tanto, de los enzimas necesarios para el funcionamiento celular. Por otra parte, el ADN es el
vehculo de la herencia, que se transmite de padres a hijos, de generacin en generacin.

El ADN es la molcula que guarda el cdigo gentico de todas las clulas. Sin importar
que el organismo sea multicelular, eucariota o procariota, incluyendo los virus y viroides,
todos tienen ADN o RNA como material hereditario y como vehculo de su cdigo gentico.

II. OBJETIVO:
- Examinar un extracto crudo de ADN de clulas animales y confirmar su
estructura fibrilar.

III.MATERIALES:

III.1 Material biolgico: Hgado de pollo, timo o gnadas de choros (El tejido debe
ser fresco y conservado en frio).
III.2 Materiales de laboratorio y reactivos:
* 2 tubos de ensayo grandes * Probetas
* 1 vaso de precipitado 250 ml * Solucin salina de NaCl al 0.15M/EDTA
* Embudo 0.1M, pH:8.
* Gasa * Dodecil-hidrogenio-sulfato sdico (SDS)
* 1 agitador de vidrio 10%
* 1 gradilla * NaCl 5M
* Mortero * Solucin cloroformo alcohol isoamlico
* Pipetas (24:1)
* Termmetros * Alcohol etlico 96 helado

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:


* Triturar - Homogenizar 2 g de la muestra biolgica (hgado de pollo) en una
licuadora o mortero en 10 mL de solucin salina de NaCl al 0.15M/EDTA 0.1M,
pH:8.
* Transferir el homogenizado anterior filtrado a una probeta de 100mL y aadir y
aadir 2mL del detergente annico Dodecil-hidrogenio-sulfato sdico (SDS) 10%.
Mezclar.
* Colocar en bao Maria a 60C por 5 min.
* Aadir 6mL de solucin de NaCl 5M. Mezclar.
* Aadir la Solucin cloroformo alcohol isoamlico (24:1) en un volumen igual a lo
obtenido en la etapa anterior. Agitar vigorosamente.
* Centrifugar a 2 500rpm por 10 min.
* Separar el sobrenadante con todo cuidado y colocarlo en una probeta de 10ml y
agregar 2 volmenes de alcohol 96 helado. El alcohol debe aadirse lentamente,
* Observar las hebras de ADN

V. RESULTADOS
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFA

IX. CUESTIONARIO
1. Qu rgano o tejido animal es apropiado para extraccin de ADN? Porque?
2. Con qu objetivo se utiliza la solucin ClNa/EDTA?
3. Qu finalidad tiene el uso de SDS y la solucin concentrada de NaCl?
4. Qu efecto causa la solucin de cloroformo/alcohol isoamlico y el uso de etanol frio
en la extraccin de ADN?

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