Cap.

12 Qumica Orgnica 2010 II _ UNALM

Aminocidos y
protenas
Duodcima prctica de Lab. Qumica Orgnica

Los ensayos que se realizaron en esta prctica son: reaccin de ninhidrina para identificar la
presencia de aminocidos libres, reaccin xantoproteica, prueba de Millon para identificar restos
fenlicos, prueba para aminocidos azufrados y la reaccin de Biuret.
 AMINOCIDOS Y PROTENAS

1. Introduccin

La protena, como su nombre indica, han sido consideradas durante muchos aos como el
componente primario de la materia viviente. Hasta mucho mas tarde no se reconoci la gran
importancia de los cidos nucleicos y han constituido materia de discusin a lo largo de las
ltimas dcadas. El principio bsico de la estructura de las protenas es bastante simple.
Consisten en largas cadenas de aminocidos enlazados unos a otro mediante enlace
pptidos. No obstante aparecen complicaciones:1) procedentes de la presencia de alrededor
de veinte tipos diferentes de radicales de aminocidos en las cadenas pptidas; 2)
procedentes de la larga longitud de estas cadenas.

En este informe se discuten algunas reacciones de coloracin: reaccin con ninhidrina,

reaccin xantoproteica, Prueba de Millon, Prueba para aminocidos azufrados y la reaccin
de Biuret. As tambin se realiza la desnaturalizacin de protenas. Y finalmente la
precipitacin de la albumina con iones.

2. Objetivo

Identificar a qu tipo de aminocido o protena pertenece la muestra problema.

Realizar las reacciones de coloracin: (reaccin ninhidrina, xantoproteica, de
Millon, para aminocidos azufrados y de Biuret).
Realizar la desnaturalizacin de la albumina.
Ensayar la precipitacin de protenas mediante cationes e iones.

3. Metodologa

A. Reaccin con Ninhidrina. (Presencia de aminocidos libres)

Materiales/Solventes:

Triptfano
Glicina
Cistena
Albumina
Tirosina
Muestra problema
Solucin de ninhidrina
 Procedimiento:

I. Para realizar el ensayo con ninhidrina, primero a 6 tubos de ensayo agregar

1 mL de: triptfano, glicina, cistena, albumina, tirosina y MP.
II. Agregar a cada uno de los tubos 3 gotas de la solucin de ninhidrina al
0,3%.
III. Calentar unos 3 minutos en b.m. y observar. Se considera positiva la reaccin
positiva si la solucin toma un color azul purpura.

Muestras a ensayar Color antes de la reaccin Cambio de coloracin

Triptfano Translcido Violeta
Glicina Translcido Azul purpura
Cistena Translcido Translcido
Albumina Blanco lechoso Purpura suave
Tirosina Translcido Translcido
MP Translcido Blanco plomizo

CONCLUSION: La cistena y la tirosina no presenta grupos amino libres. La albumina

si presenta aminocidos libres.
 E. Reaccin de Biuret (presencia de enlaces peptidicos)

Materiales/Solventes:

Albumina
Glicina
Muestra problema
Solucin de NaOH
Sulfato de cobre CuSO4

Procedimiento:
I. En cada uno de 3 tubos de ensayo agregar 1 mL de: glicina, albumina, y
MP.
II. Aadir 20 gotas de NaOH al 10%.
III. Luego adicionar 2 gotas de CuSO4. Observar el color que se forma.

Muestras a ensayar Color antes de la reaccin Cambio de coloracin

Glicina Translcido Celeste
Albumina Blanco lechoso Violeta
MP Translcido Violeta
CONCLUSION: Las protenas y pptidos que contienen por lo menos 3 unidades de
aminocidos dan coloracin violeta. La albumina y la MP dan una coloracin violeta, eso
evidencia que presentan ms de 3 aminocidos unidos con enlaces peptidicos.

G. Precipitacin de protenas mediante cationes.

Materiales/Solventes:
Agua
Albumina
Acido clorhdrico
Hidrxido de sodio
Solucin de CuSO4

Procedimiento:
I. Agregar a 6 tubos las siguientes soluciones:
a. 3 mL de H2O
b. 3 mL de albumina
c. 3 mL de H2O + 3 gotas de HCl
d. 3 mL de albumina + 3 gotas de HCl
e. 3 mL de H2O + 3 gotas de NaOH
f. 3 mL de albumina + 3 gotas de NaOH
II. Importante: observar que se formaron 3 parejas de tubos. Los ensayos sin
albumina son necesarios para observar si el efecto observado en los
tubos de prueba con albumina se debe a la precipitacin de la protena o
es el hidrxido metlico el que esta precipitando.
III. Adicionar 20 gotas de sulfato de cobre (CuCO4) al 10%.
IV. Hacer las comparaciones por parejas. Anotar los tubos donde se formo
precipitados.
 Tubo de prueba Formacin de p.p.
a No
b No
c No
d No
e Si
f Si
Reaccin
No hubo formacin de p.p.
pero si cambio de color.
Solo se evidencia un
cambio de color (celeste).
No hay formacin de p.p.
pero si hay cambio de color.
Cambia de color (azul
caribeo)
Hay precipitacin del agua
Se precipita la protena y
hay cambio de color.

CONCLUSIN: Los tubos a, c y me son aquellos tubos de comparacin y no presentan

albumina. El tubo a esta en medio neutro, el tubo c en medio cido y el tubo f en medio
alcalino. De lo experimentado en el tubo e y f hay formacin de precipitado. Entonces la
precipitacin de albumina mediante CuSO4 se da solo en medio bsico.

H. Precipitacin de protenas mediante aniones.

Materiales/Solventes:

Albumina
Acido clorhdrico
Hidrxido de sodio
Solucin de ferricianuro

Procedimiento:

I. Agregar a 3 tubos las siguientes soluciones:

a. 3 mL de albumina
b. 3 mL de albumina + 3 gotas de HCl
c. 3 mL de albumina + 3 gotas de NaOH

II. A todos los tubos adicionar 2 gotas de ferricianuro.

III. Agitar y observar el tubo que presenta precipitacin.

Tubo de prueba Formacin de p.p. Reaccin

a Si Cambio a un color amarillo
dbil.
b Si Presenta una coloracin
celeste verdoso suave
c No Color amarillo y dos fases.
CONCLUSIN: Los tubos a y b forman precipitado cuando reacciona el ferricianuro con la
albumina en medio neutro y en medio acido respectivamente. Cosa que no ocurre en
medio acido (albumina con HCl).

Bibliografa

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