BIOREMEDIATION OF CONTAMINATED SOIL WITH PETROLEUM HYDROCARBONS

Autores

A. Salinas-Martnez*, G.R. Hernndez-Carbajal*, M. De los Santos-Crdoba*, J. Lpez-Miranda*,

N.O. Soto-Cruz*, H. Prez-Andrade** y H. Medrano-Roldn (*Instituto Tecnolgico de Durango,
**Minas LUISMIN S.A. de C.V., Durango)

summary

As a cause of great environmental deterioration caused by the development of some industrial

sectors such as mining and extraction, refining and transportation of petroleum processes is
essential applying techniques that reduce the concentration or toxicity of pollutants produced and /
or spilled in the above processes and at the same time are economically feasible. The soil pollution
by petroleum hydrocarbons is a common problem in the Mexican mining industry; in the case of
mines having over 15 years of operation it is estimated that, at least, there are about 500 m2 of soil
contaminated by each. To solve this problem a process of economic bioremediation using native
microorganisms through the use of bacterial and fungal consortia, to allow removal of hydrocarbons
from soil efficiently designed. Contaminated with petroleum hydrocarbons from a mine located in
the Sierra del Estado de Durango, floors were used as a model for the development of
bioremediation.

Keywords: soil pollution, hydrocarbons, petroleum bioremediation.

Issues

As a cause of great environmental deterioration caused by the development of some industrial

sectors such as mining and extraction, refining and transportation of petroleum processes is
essential applying techniques that reduce the concentration or toxicity of pollutants produced and /
or spilled in the above processes and at the same time are economically feasible. The soil pollution
by petroleum hydrocarbons is a common problem in the Mexican mining industry; in the case of
mines having over 15 years of operation it is estimated that, at least, there are about 500 m2 of soil
contaminated by each. Petrleos Mexicanos reported in 1991 that about 130.183 tons of petroleum
were spilled on national soil. Because of this situation, it is essential to develop technologies for the
application of techniques that reduce the concentration and / or toxicity of pollutants produced by
industry, and at the same time do not show high investment costs and maintenance. Remediation
of these soils in order to be eligible, according to the Official Mexican Standard is necessarily
required. To solve this problem a process of economic bioremediation using native microorganisms
through the use of bacterial and fungal consortia, to allow removal of hydrocarbons from soil
efficiently designed. Contaminated with petroleum hydrocarbons from a mine located in the Sierra
del Estado de Durango, floors were used as a model for the development of bioremediation.
Figure 1. Storage of hazardous waste are potential generators of contaminated soil in the mining
industry in Mexico.

users

Users of this project are mainly the mining industry in Mexico and particularly for this case type
company Minas Luismin SA de C.V. State of Durango.

Project

Soil is the most biologically diverse of the land and this is where a large number of functions among
which biomass production are performed, the control of the concentration, mobility and
bioavailability of most of the substances (including pollutants) on the surface of the earth.

The Environmental Protection Agency of the United States of America (US EPA), the Ministry of
Environment of Quebec in Canada, the Secretariat of Environment and Natural Resources in
Mexico as well as other environmental and health agencies worldwide have cataloged
hydrocarbons as pollutants and harmful compounds into the environment and human health.
Contamination of soil and water with petroleum hydrocarbons as a result of accidental spills or
inappropriate storage conditions are frequently reported. Petroleum hydrocarbons, at the global
level, have caused a severe contamination of soil and water bodies. It is common for mining soils
containing these compounds toxic to living organisms because they are mutagenic and
carcinogenic. Also oil pollution has a pronounced effect on the physical, chemical and
microbiological properties of soil and may prevent or slow the growth of vegetation on the
contaminated area. It is known that the degradation of organic materials in natural environments is
mediated mainly by microorganisms: Bacteria, fungi, yeasts and protozoans. Thus, the type of
microbial interaction is of vital importance in the degradation process of a compound, that is, in
most cases the microorganisms do not work alone, but in conjunction (microbial consortia). Among
the major genera of hydrocarbon-degrading bacteria are: Achromobacter, Acynetobacter,
Alcaligenes, Athrobacter, Bacillus, Flavobacterium, and Pseudomonas sp Neocardia, Micrococcus,
Sphingomonas and Enterobacteriaceae;. between fungi are Trichoderma, Mortierella sp.,
Aspergillus and Penicillium sp. The genus Candida is the most common yeast.
Based on the above, it was proposed to develop a process of bioremediation of soils. This involved
the use of the most important native microorganisms for degradation of oil hydrocarbons in soil
(mainly from leaks and / or spills in storage tanks, design faults, fractures and maintenance
activities teams company, etc.). Native strains in order to identify by morphological, physiological
and biochemical tests were isolated. Microorganisms were selected with a higher speed of growth
and the rate of degradation of petroleum hydrocarbons. The microorganisms selected were bacteria
and a fungus belonging to the genera Flavobacterium and Aspergillus, which were evaluated
individually and jointly, as a microbial consortium, capacity and rate of degradation of petroleum
hydrocarbons (oil quantification wastewater was conducted by the standard method recommended
by the Environmental Protection Agency, EPA). Bioremediation process for the technique called
"heap leaching" or ore from accumulated in a waterproof container through solid material aqueous
solutions are used. Particularly the process consisted in the use of cylindrical columns or shaped
containers pool where the contaminated soil is applied and subsequently poured thereon a
microbial suspension, so that while the suspension begins to seep through the column or the stack,
the ore is absorbed (metabolized) by said suspended microbial community that is later found.
Different mixtures of soil-sand for better operating conditions were tested.

Figure 2. Suspension microbial (microbial consortium) (left) and sink pilot bioremediation of
contaminated soils (r.) Scale.

The results showed abundant growth of microbial colonies in soil contaminated with hydrocarbons
which initially allowed the possibility of bioremediation display with native strains used by a process
of biodegradation of hydrocarbons. Biostimulation of native microbial consortium of contaminated
soil, achieves a 97.4% degradation of total petroleum hydrocarbons (PAH's) present in a period of
15 days using a recirculation rate of 200 mL / h. For the sink hydrocarbon biodegradation similar to
the maximum obtained degradation column values were achieved, but with a higher recirculation
rate (250 mL / h) (Fig. 3). Therefore, under the same conditions of flow of the microbial suspension,
indicate that the degradation of PAH's in the pool system is more effective and faster.
Figure 3. Degradation of total petroleum hydrocarbons (TPH, mg / kg) in soil bioremediation in the
stack at a flow rate of 250 mL / h of the microbial suspension in a 15 day period.

Socioeconomic Impact

Through the use of a native microbial system will withdraw or biodegrade in a treatment period of 15
days up to 98.5% of the oil content of oil contaminated soil from a mine located in the mountains of
Durango (used as a model). This achievement enables these soils and comply with NOM-138-
SEMARNAT / SS-2003 MAXIMUM PERMISSIBLE OIL IN SOIL AND MEXICAN OFFICIAL
STANDARD SPECIFICATIONS FOR CHARACTERIZATION AND REMEDIATION. In addition to
the successful recovery of the soil, the study of technical and economic feasibility indicates a
relatively low cost of $ 35 / tonne treated, which results in an effective bioremediation process,
replicable in other mining areas. The strains isolated and characterized represent a given capacity
to use diesel as sole carbon source considerable biological tool. The strains isolated and identified
as Flavobacterium sp. and Aspergillus sp part of institutional microbial collection and have a
potential competitive advantage compared to other microorganisms, because they can tolerate high
levels of toxicity of the main pollutants. The socioeconomic impact of the project is supported in the
bioremediation of soils and sustainability of mining in Mexico, which represents a considerable
number of jobs and economic importance in the country.

Tags: bioremediation, bioremediation, pollution, hydrocarbons, hydrocarbons, oil, oil, soil

contamination, soil
BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS DE PETRLEO

Autores

A. Salinas-Martnez*, G.R. Hernndez-Carbajal*, M. De los Santos-Crdoba*, J. Lpez-Miranda*,

N.O. Soto-Cruz*, H. Prez-Andrade** y H. Medrano-Roldn (*Instituto Tecnolgico de Durango,
**Minas LUISMIN S.A. de C.V., Durango)

Resumen

Como causa del gran deterioro ambiental ocasionado por el desarrollo de algunos procesos
industriales, tales como la minera y la extraccin, refinamiento y transporte del petrleo, es
imprescindible la aplicacin de tcnicas que disminuyan la concentracin o toxicidad de los
contaminantes producidos y/o derramados en los procesos antes mencionados y que al mismo
tiempo sean econmicamente aplicables. La contaminacin de los suelos por hidrocarburos del
petrleo es un problema comn en la industria minera mexicana; para el caso de las minas que
tengan ms de 15 aos de operacin se estima que, por lo menos, existen alrededor de 500 m2 de
suelo contaminado por cada una. Para resolver esta problemtica se dise un proceso de
biorremediacin econmico, que utiliza los microorganismos nativos a travs del uso de consorcios
bacterianos y fngicos, que permita la eliminacin de hidrocarburos del suelo de una manera
eficiente. Los suelos contaminados con hidrocarburos del petrleo de una mina localizada en la
Sierra del Estado de Durango, se han utilizado como modelo para el desarrollo del proceso de
biorremediacin.

Palabras clave: suelos, contaminacin, hidrocarburos, petrleo, biorremediacin.

Problemtica

Como causa del gran deterioro ambiental ocasionado por el desarrollo de algunos procesos
industriales, tales como la minera y la extraccin, refinamiento y transporte del petrleo, es
imprescindible la aplicacin de tcnicas que disminuyan la concentracin o toxicidad de los
contaminantes producidos y/o derramados en los procesos antes mencionados y que al mismo
tiempo sean econmicamente aplicables. La contaminacin de los suelos por hidrocarburos del
petrleo es un problema comn en la industria minera mexicana; para el caso de las minas que
tengan ms de 15 aos de operacin se estima que, por lo menos, existen alrededor de 500 m2 de
suelo contaminado por cada una. Petrleos Mexicanos report en 1991 que unas 130,183
toneladas de derivados del petrleo fueron derramadas en suelos nacionales. Debido a esta
situacin, es imprescindible el desarrollo de tecnologas para la aplicacin de tcnicas que
disminuyan la concentracin y/o toxicidad de los contaminantes producidos por la industria, y que
al mismo tiempo no presenten altos costos de inversin y mantenimiento. Se requiere
obligadamente la remediacin de estos suelos a fin de que sean aptos, de acuerdo a la Norma
Oficial Mexicana. Para resolver esta problemtica se dise un proceso de biorremediacin
econmico, que utiliza los microorganismos nativos a travs del uso de consorcios bacterianos y
fngicos, que permita la eliminacin de hidrocarburos del suelo de una manera eficiente. Los
suelos contaminados con hidrocarburos del petrleo de una mina localizada en la Sierra del Estado
de Durango, se han utilizado como modelo para el desarrollo del proceso de biorremediacin.

Figura 1. Los almacenes de residuos peligrosos son potenciales generadores de suelos

contaminados en las industrias mineras en Mxico.

Usuarios

Los usuarios de este proyecto son principalmente la industria minera de Mxico y particularmente
para este caso tipo la empresa Minas LUISMIN S.A. de C.V. del Estado de Durango.

Proyecto

El suelo es la parte biolgicamente ms diversa de la tierra y es ah donde se realizan un gran

nmero de funciones entre las que destacan la produccin de biomasa, la de control de la
concentracin, movilidad y biodisponibilidad de la mayor parte de las sustancias (incluyendo los
contaminantes) en la superficie de la tierra.

La agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos de Norte Amrica (US EPA), el
Ministerio del Ambiente de Quebec en Canad, la Secretara del Medio Ambiente y Recursos
Naturales en Mxico, as como otros organismos ambientales y de salud en el mundo, han
catalogado a los hidrocarburos como compuestos contaminantes y dainos al medio ambiente y la
salud humana. La contaminacin de suelo y agua con hidrocarburos del petrleo como resultado
de derrames accidentales o condiciones inapropiadas de almacenamiento son reportadas
frecuentemente. Los hidrocarburos derivados del petrleo, en el mbito mundial, han provocado
una severa contaminacin del suelo y de los cuerpos de agua. Es comn que los suelos mineros
contengan estos compuestos txicos para los seres vivos, ya que son mutagnicos y
carcinognicos. As mismo la contaminacin por hidrocarburos tiene un pronunciado efecto sobre
las propiedades fsicas, qumicas y microbiolgicas de un suelo, pudiendo impedir o retardar el
crecimiento de la vegetacin sobre el rea contaminada. Se conoce que la degradacin de
materiales orgnicos en ambientes naturales es mediada, principalmente, por microorganismos:
bacterias, hongos, levaduras y protozoarios. As, el tipo de interaccin microbiana es de vital
importancia en el proceso de degradacin de un compuesto, es decir, en la mayora de las
ocasiones los microorganismos no trabajan solos, sino en conjunto (consorcios microbianos). Entre
los principales gneros de bacterias degradadoras de hidrocarburos se
encuentran: Achromobacter, Acynetobacter, Alcaligenes, Athrobacter, Bacillus, Flavobacterium,
Neocardia y Pseudomonas sp., Micrococcus, Sphingomonas y Enterobacteriaceae; entre los
hongos estn Trichoderma, Mortierella sp., Aspergillus y Penicillium sp. El gnero Candida es el
ms comn entre las levaduras.

Con base en lo anterior, se propuso desarrollar un proceso de biorremediacin de suelos. Este

consisti en el uso de los microorganismos nativos ms importantes para la degradacin
hidrocarburos del petrleo presentes en el suelo (provenientes principalmente de fugas y/o
derrames en los tanques de almacenamiento, fallas de diseo, fracturas y actividades de
mantenimiento a los equipos de la empresa, entre otros). Se aislaron las cepas nativas con el
objeto de identificarlas mediante pruebas morfolgicas, fisiolgicas y bioqumicas. Se
seleccionaron los microorganismos con una mayor velocidad de crecimiento y velocidad de
degradacin de los hidrocarburos del petrleo. Los microorganismos seleccionados fueron una
bacteria y un hongo, pertenecen a los gneros Flavobacterium y Aspergillus, los cuales se
evaluaron de forma individual y en forma conjunta, como consorcio microbiano, en su capacidad y
velocidad de degradacin de hidrocarburos del petrleo (la cuantificacin de hidrocarburos
residuales se llev a cabo por el mtodo estndar recomendado por la Agencia de Proteccin
Ambiental, EPA). Para el proceso de biorremediacin se utiliz la tcnica denominada heap
leaching o extraccin de mineral a partir de material slido acumulado en un contenedor
impermeable a travs de soluciones acuosas. Particularmente el proceso consisti en el uso de
columnas cilndricas o contenedores en forma de pileta donde se verti el suelo contaminado y
posteriormente se aplic sobre l una suspensin microbiana, de tal manera que mientras la
suspensin comienza a filtrarse, a travs de la columna o de la pila, el mineral es absorbido
(metabolizado) por dicha comunidad microbiana en suspensin que es posteriormente recuperada.
Se probaron diferentes mezclas de suelo-arena para obtener mejores condiciones de operacin.
 Figura 2. Suspensin microbiana (consorcio microbiano) (izq) y pileta de bioremediacin escala
piloto de suelos contaminados (der.).

Los resultados mostraron el crecimiento abundante de colonias microbianas en el suelo

contaminado con hidrocarburos lo que inicialmente permiti visualizar la posibilidad de
biorremediacin con las cepas nativas utilizadas mediante un proceso de biodegradacin de
hidrocarburos. La bioestimulacin del consorcio microbiano nativo del suelo contaminado, logra un
97.4% de degradacin de los hidrocarburos totales del petrleo (HTP's) presentes, en un periodo
de 15 das al utilizar una velocidad de recirculacin de 200mL/h. En el caso de la pileta de
degradacin de hidrocarburos se lograron valores similares al mximo obtenido en la columna de
degradacin, pero con una mayor velocidad de recirculacin (250mL/h) (Fig. 3). Por lo anterior,
bajo condiciones iguales de flujo de la suspensin microbiana, indican que la degradacin de los
HTP's en el sistema de pileta es ms efectivo y rpido.

Figura 3. Degradacin de hidrocarburos totales del petrleo (HTP, mg/Kg) en suelos, en la pila de
bioremediacin, a un flujo de 250 mL/h de la suspensin microbiana, en un periodo de 15 das.
 Impacto Socioeconmico

A travs de la utilizacin de un sistema microbiano nativo se logr eliminar o biodegradar en un

periodo de tratamiento de 15 das hasta el 98.5% del contenido de hidrocarburos del petrleo de un
suelo contaminado de una mina localizada en la sierra del estado de Durango (utilizada como
modelo). Este logro permite que esos suelos cumplan ya con la NORMA OFICIAL MEXICANA
NOM-138-SEMARNAT/SS-2003, LMITES MXIMOS PERMISIBLES DE HIDROCARBUROS EN
SUELOS Y LAS ESPECIFICACIONES PARA SU CARACTERIZACIN Y REMEDIACIN.
Adems del xito en la recuperacin del suelo, el estudio de factibilidad tcnico-econmico indica
un costo relativamente bajo de 35 dlares/tonelada tratada, lo que da como resultado un efectivo
proceso de biorremediacin, replicable en otras zonas mineras del pas. Las cepas aisladas y
caracterizadas representan una herramienta biolgica considerable dada su capacidad de utilizar
diesel como nica fuente de carbono. Las cepas aisladas e identificadas como Flavobacterium sp.
Y Aspergillus sp forman parte de la coleccin microbiana institucional y tienen una potencial
ventaja competitiva, en comparacin a otros microorganismos, debido a que puede tolerar altos
niveles de toxicidad de los principales contaminantes. El impacto socioeconmico del proyecto est
sustentado en la biorremediacin de suelos y en la sustentabilidad de la actividad minera en
Mxico, que representa una considerable cantidad de empleos e importancia econmica en el pas.

Etiquetas: bioremediation, biorremediacin, contaminacin, hidrocarburos, hydrocarbons, oil, petrl

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