HEMATOLOGY

CHAP1:

HEMOGRAMME : numration des cellules du sang nombre par volume: n / L units : G - giga - 10^9
par ordre de quantit dcroissante
GR
GB
plaquettes

quantit dhmoglobine / vol de sang (normalement lhmoglobine, toxique pour lendothlium, est
quasi-exclusivement intra-rythrocytaire)

caractristiques des GR : paramtres rythrocytaires

Volume Globulaire Moyen VGM: Cest la moyenne des volumes de toutes les hmaties mesures

Teneur C* Moyenne en Hb TCMH : taux moyen dhmoglobine par hmatie

Concentration C* Moyenne en Hb CCMH

corpusculaire ou globulaire (= par cellule GR) :le taux moyen dhmoglobine dans le volume occup
par les globules rouges dans le sang

Cellules du sang :

1) globules rouges (ou rythrocytes) :

transport O 2 vers les tissus (et CO 2 vers les poumons)
cellule anucle
forme biconcave-->dformabilit
pleur centrale
contiennent lhmoglobine

Hb: hmoglobine
chane de globine (protine) molcule dhme (structure ttrapyrrolique + 1 atome de Fer) x 4

ontogense de la synthse des chanes de globine:

Alpha: constant gestational/postnatal
Beta: increases
Gamma: decreases

-cytosquelette / membrane (groupes sanguins rythrocytaires)

sang total : 160 g/L Hb (spectrophotomtrie) aprs lyse des GR

cytoplasme GR : 330 g/L (CCMH)

-->volume cytoplasme<<volume total

Hmatocrite (Ht) volume relatif de sang occup par les GR
hmatocrite = env. 50%
Ht : viscosit hmostase primaire

Hb : anmie (fonction oxyphorique du sang) VGM : qualit de lrythropose

Rh groups: Rh +/- --> antigne D

Rh factor" on the surface of red blood cells.
-->membrane & cytosquelette du GR

sphrocytose hrditaire: maladie gntique, caractrise par une anomalie des protines constituant la
membrane des globules rouges qui deviennent sphriques et fragiles, avec destruction intrasplnique,
entrainant une anmie hmolytique chronique, un subictre et une splnomgalie (rate).

L'elliptocytose est une affection hmatologique rare caractrise par des anomalies du cytosquelette
des hmaties qui prennent une forme d'ellipse. Il s'agit d'une maladie gntique transmission
autosomique dominante et rsulte d'une mutation des gnes de protines constituant le cytosquelette
des hmaties : alpha- ou bta-spectrines par exemple. Les manifestations sont trs disparates jusqu'
l'anmie hmolytique. Le diagnostic repose sur l'examen du frottis sanguin qui contient plus de 15 %
d'elliptocytes ou ovalocytes (hmaties en ellipse).

Spectrin is a cytoskeletal protein that lines the intracellular side of the plasma membrane in eukaryotic
cells, it plays an important role in maintenance of plasma membrane integrity and cytoskeletal structure
diminution du nombre de ttramres / dfaut dassociation des ttramres au niveau du complexe
jonctionnel --> elliptocytose

Schizocytes : fragmentation mcanique

Drpanocytes : anmie falciforme

Hmoglobinopathies (maladies monogniques les plus frquentes ) :

dfaut de synthse syndromes thalassmiques ( , )

hmoglobines anormales HbS, HbC, HbE

2) globules blancs (ou leucocytes):

dfenses contre les infections

granulocytes (ou polynuclaires)

neutrophiles: immunit inne , inflammation , destruction de certaines bactries
(osinophiles, basophiles)
monocytes(mononucles ) ( -> macrophages)
lymphocytes (mononucles ) : immunit adaptative
B --> plasmocytes
--> anticorps (immunoglobulines)
T : immunit cellulaire

La diapdse est le mcanisme par lequel un leucocyte s'insinue entre les cellules endothliales d'un
capillaire sanguin en rponse des signaux chimiques inflammatoires.

granulocyte neutrophile (polynuclaire): sont attirs sur les sites dinfection par chmotaxie -
chmotactisme , phagocytent les bactries et les dtruisent

Large reserves of neutrophils are stored in the bone marrow and are released when needed to fight
infection.

Neutrophils travel to and enter the infected tissue, where they engulf and kill bacteria. The neutrohils
die in the tissue and are engulfed and degraded by macrophages.

Detailed mechanism:

Bacterium is phagocytosed by neutrophiles

Phagosome fuses with azurophilic and specific granules

pH of phagosome rises, antimicrobial response is activated and bacterium is killed

pH of phagosome decreases, fusion with lysosome allows acid hydrolase to degrade the bacterium
completely

Neutrophil dies by apoptosis and is phagocytosed by macropage.

granulocyte osinophile (polynuclaire): Contrle des infections parasitaires (helminthes) , rle dans
lallergie
dficit: strodes

granulocyte basophile (polynuclaire): fonction : contrle des infections parasitaires (helminthes),

raction d hypersensibilit immdiate (allergie), dans les tissus = mastocyte

monocyte: Migration tissulaire et diffrentiation en macrophage-->phagocytose et destruction des

micro-organismes (y.c. mycobactries et champignons), des cellules recouvertes dAC ou de
complments, des cellules snescentes ou endommages ET prsentation des Ag au systme
immunitaire
lymphocytes : B : maturation en plasmocyte --> anticorps , T : destruction de cellules portant des Ag
trangers, rgule les lymphocytes B , NK : destruction de cellules portant des Ag trangers ou
tumoraux
lymphocytose (hyper): coqueluche, leucmie chronique lymphocytaire
lymphopnie (hypo): strodes, stress, HIV

Leucmie: cancer des cellules de la moelle osseuse

-->cellules anormales / clonales
-->morphologie ventuellement indistincte (leucmie lymphode chronique - LLC)
-->hiatus leucmique : absence de forme intermdiaire entre blaste et polynuclaire

La pancytopnie est un tat morbide dans lequel il y a rduction du nombre de globules

rouges et blancs, ainsi que du nombre de plaquettes.
-->mcanisme = insuffisance mdullaire

3) plaquettes (ou thrombocytes) :

dfense contre le saignement (= hmostase) , rle majeur dans lhmostase primaire

sang complet anticoagul aprs centrifugation:

-Plasma
-Buffy coat: couche leuco-plaquettaire
-Red cells

glycolyse: source dATP et de NADH et NADPH rduits

HEMOGRAMME : FACTEURS DE VARIATION: ge genre cycle nycthmral site de

prlvement ; posture tabagisme grossesse

PRINCIPAUX SYNDROMES

pancytopnie : mcanisme = insuffisance mdullaire (moelle)

cellules normales mdullaires, non normalement prsentes dans le sang :

- mylmie : moelle dans le sang -->prcurseurs des granuleux
- rythroblastose sanguine : Maladie o les rythroblastes (jeunes globules rouges, qui sont fabriqus
dans la moelle osseuse) se retrouvent dans le sang

production = hmatopose
moelle hmatopotique

Le rticulocyte est la cellule prcdant le stade d'rythrocyte dans l'rythropose

morphologie des rythroblastes --> rticulocyte

hyperleucocytose

Leucmie mylode aigu est un cancer de la ligne mylode des leucocytes. Elle se caractrise par un
envahissement mdullaire de cellules immatures d un blocage de maturation (hyatus leucemicus)
des globules blancs dans la moelle osseuse qui va tre responsable d'une insuffisance mdullaire

HEMOGRAMME
prlvement de sang
en gnral veineux priphrique
anticoagul
avec EDTA (bouchon violet)
ANEMIE:

- Anmie microcytaire : les rythrocytes sont plus petits qu lordinaire. Une perte de sang importante
ou une alimentation pauvre en fer sont les causes les plus frquentes. On parle aussi danmies
ferriprives.

-Anmie macrocytaire : les rythrocytes sont plus gros qu lordinaire. Les causes sont des carences
en vitamines B12 et/ou B9 dues un apport insuffisant ou une mauvaise absorption de celles-ci par
lintestin (anmie de Biermer). Il sagit dun dfaut de maturation des cellules sanguines prognitrices
dans la moelle osseuse.

METABOLISME DU FER

rserves : ferritine (hpatocytes, macrophages)

cycle ferm mais pertes obligatoires

absorption entrocytaire rgulation : transport basal

ferroportine
hepcidine
rythroferrone

Hepcidine : Petit peptide hormonal synthtis par le foie Inhibiteur de lexport de fer des entrocytes
(activation augmente si inflammation)

Transport dans le sang: transeferrine

division cellulaire = synthse dADN , besoin de B9 folate, B12

CELLULES NON PRESENTES DANS LE SANG:

-cellules diffrencies mdullaires

-cellules lymphodes : rien dautre que lymphocytes T > B - sans diffrence morphologique

-cellules souches hmatopotiques (CSH) : trop peu nombreuses, pas de caractristiques

morphologiques particulires
Immunit inne

action non-spcifique:

Dans les tissus sont prsents

1 - Des cellules dendritiques
2 - Des vaisseaux sanguins dans lesquels circulent
- Monocytes
- Cellules dendritiques
- Cellules NK
- Polynuclaires neutrophiles

Pathogne dans un tissu: recrutement rapide de monocytes et de polynuclaires neutrophiles

(chimiotactisme)

Premire tape: Phagocytose massive du pathogne par les polynuclaires neutrophiles

-Invasion rapide du site infectieux par des PNN
-Phagocytose du pathogne via des RECEPTEURS contre des molcules microbiennes= PAMPS
(Patogens Associated Molecular Patterns)

Toll Like Receptors (TLR)

Rcepteurs du Mannose
Scavenger receptors (SR)

-Rle de lopsonisation (aide la phagocytose ) : anticorps et complment

La phagocytose est destine DETRUIRE le pathogne : PROTEASES + pH acide + NADPH

oxydases (NOX2)
(phagosome + lysosome-->phagolysosomes-->exocytose)

Macrophages :

-Intervention plus modre, un peu plus tardive

-Destruction par phagocytose
-MAIS AUSSI gense de signaux biologiques
-REACTION INFLAMMATOIRE :
lvation temprature (IL-1, IL-6, TNF): Fivre, chaleur locale
Vasodilatation: Rougeur
Augmentation de la permabilit vasculaire: Oedme
Synthse de neuromdiateurs: Douleur

Synthse protines de linflammation , Chimiotactisme

--> Invasion leucocytaire massive , phagocytose massive

Cellules dendritiques :
Destruction par phagocytose (faible)
MAIS SURTOUT gense de signaux biologiques
MIGRATION VERS LES GANGLIONS LYMPHATIQUES DRAINANT (lymphe)
-->Initiation de la rponse LYMPHOCYTAIRE T
Limmunit inne, cest aussi lactivation du systme du complment:
-Ractions biochimiques en cascade
-3 voies: classique / alterne / lectines

Classique: interaction de C1q avec complexe antigne -anticorps-->C3 convertase-->anaphylatoxines

(C3a, C4a, C5a)--> activation de la raction inflammatoire

MBP (Lectine) : interaction de la proteine MBP avec les residus mannose sur la surface des antigne--
>C3 convertase-->C3b-->Opsonisation/ Activation de la formation du complexe d'attaque
membranaire/Amplification du complment par voie alterne

Alterne: Interaction de C3b avec la surface du pathogne-->C3 convertase-->C3b--> complexe

d'attaque membranaire (C5b) -->Lyse de l'agent pathogne

La C5-convertase a un rle similaire la C3-convertase:

Production dune puissante anaphyllatoxine: C5a: favorise inflammation

Production du fragment C5b qui initie la formation du complexe dattaque membranaire

C3b est ensuite cliv en C3c puis C3d

*Ac-Ag: Classique
* Structures molculaires microbiennes: Alterne
* Liaison lectines / sucres microbiens: Voie des lectines

Immunit spcifique

Antigne: une molcule dun pathogne reconnu spcifiquement par le systme immunitaire Les
antignes sont des motifs molculaires exprims par le pathogne: protines, sucres etc.

Les lymphocytes B et lymphocytes T reconnaissent spcifiquement les antignes pour dclencher une
rponse effectrice.

Un mme antigne peut contenir diffrentes signatures molculaires reconnues par des lymphocytes
diffrents: la signature molculaire est lEPITOPE

Les lymphocytes B et T reconnaissent lantigne diffremment et gnrent des fonctions effectrices

diffrentes
LYMPHOCYTES B ET PRODUCTION DANTICORPS

- Reconnaissent des antignes NATIFS (directement)

- Reconnaissent un pitope en tant que structure molculaire spatiale
- Leur but: reconnaitre spcifiquement un antigne par un rcepteur spcifique et dclencher une
production danticorps contre cet antigne
- Les anticorps ont pour rle de neutraliser les pathognes:
Aide la phagocytose
Activation du complment
Neutralisation de molcules du pathogne agressives

IMPORTANT
-Les IgM, IgG1 et IgG3 activent fortement le complment
-Les IgE sont impliqus dans la rponse antiparasitaire (mais aussi lhypersensibilit de type I ou
allergie)
-Les IgA sont actives dans les muqueuses

Action effectrice des anticorps :

-Virus/toxin neutralisation, complement activation, opsonization , ab- dependent cytotoxicty

Par un systme complexe et randomis de rarrangement de gnes, la moelle osseuse produit

naturellement un REPERTOIRE de jeunes lymphocytes B (= lymphocytes B nafs)

-Dune considrable diversit quand leur rgion variable (un lymphocyte= une spcificit pour un
pitope)
-Avec un anticorps exprim la membrane = BCR (B Cell Receptor)

-But: reconnatre nimporte quelle structure molculaire trangre = NON SOI

-Cette diversit considrable de BCR provient dun systme complexe de rarrangements alatoires de
gnes --> rarrangement VDJ

ducation des lymphocytes B pour llimination des cellules autoractives

Les jeunes lymphocytes B forment donc un rpertoire popur reconnaitre nimporte quelle structure
molculaire du non-soi
--> patrouilles de lymphocytes NAIFS

En labsence dantigne, les lymphocytes B patrouillent indfiniment entre le sang, la lymphe et les
organes lymphodes secondaires

Antigne tissulaire > Drainage lymphatique > Arrive de lantigne dans le ganglion lymphatique
drainant > adsorption par les Cellules Dendritiques Folliculaires
1)Diffrentiation en PLASMOCYTES IgM dans les cordes mdullaires --> Migration vers la moelle
osseuse et production dIgM

2)Retour vers les zones B pour Switch isotypique Diffrentiation en cellules mmoires
-->Cellules mmoires IgG Plasmocytes IgG (centre germinatif)

Durant le switch isotypique (IgM verse IgG), des mutations additionnelles des rgions constantes
apparaissent et distinguent les diffrentes cellules filles. Celles dont le BCR (IgG) est le plus affin
recevront des signaux de survie= MATURATION DAFFINITE

Viennent se surajouter des mutations ponctuelles frquentes lors de la duplication de lADN ( chaque
division du jeune lymphocyte naif) : augmentation du rpertoire de diversit
--> hypermutation somatique

Lymphocytes T:

- Reconnaissance dun antigne nonnatif = transform (processing)

- Lantigne est prsent sous forme dun PEPTIDE associ aux molcules HLA

- Besoin dune cellules prsentatrice dantignes (CPA) (souvent cellule dendritique)

Le TCR (T Cell Receptor) reconnait les antignes sous forme de peptides

Le peptide de lantigne doit tre associ aux molcules du Complexe Majeur dHistocompatibilit
(CMH) appartenant au systme HLA

1. La cellule dendritique capture lantigne dans le site dinflammation

2. Migre ensuite via la lymphe vers les zones T du ganglion lymphatique drainant
3. Effectue en mme temps le PROCESSING de lantigne = sa transformation sous forme de
peptide pour association aux molcules du CMH

Interaction avec les lymphocytes T spcifique du peptide antignique via le TCR dans les zones T du
ganglion -->Sensuit lactivation des lymphocytes T
Lymphocytes T CD4 Th1 Acquirent des signaux de domiciliation vers le
site inflammatoire

Sur site: activation des macrophages

Lymphocytes T CD4 Th2 Produisent des cytokines (IL-4, IL-5, IL-13)
facilitatrices de la production danticorps
Lymphocytes T CD4 Th17 Produisent des cytokines (IL-17) facilitatrices de
la raction inflammatoire
Lymphocytes T CD4 fh Activent les lymphocytes B pour

-Le switch isotypique IgM --> IgG

-La maturation daffinit
-La diffrentiation en cellules mmoires
Lymphocytes T CD8 Acquirent des signaux de domiciliation vers le
site inflammatoire

Sur site: lyse des cellules infectes par des

pathogne intracellulaires (virus)

Lactivation T nest efficace que si la cellule prsentatrice exprime AUSSI des molcules de co-
stimulation: CD40, CD80 (B7-1) , CD86 (B7-2)
Induit par les Toll Like Rceptors (TLRs)
Il faut un pathogne et des signaux microbiens pour rendre efficace la prsentation: distinction
SOI/NON-SOI

SYSTEMES

Familles dantignes rythrocytaires = SYSTEMES

Importance majeure: ABO

Trs importants en pratique transfusionnelle courante: Systme Rhsus / Systme Kell

SYSTME ABO

Les antignes du systme ABO sont prsents:

sur les hmaties
sur les cellules endotheliales (rein)

Majeurs en pratique transfusionnelle

Il existe 3 ANTIGENES (SUCRES): A, B, A1

O: absence de ces 3 antignes

Ces groupes sont dfinis par la prsence ou labsence des antignes sur les hmaties
Les antignes A et B sont le produits de 2 enzymes (transfrases) qui permettent un oligosaccharide
de se fixer sur le sucre H.

Antigne A1 -->Transferase A1 bien plus efficace que transferase A2

Nous sommes tous porteurs dans le plasma danticorps naturels ( la naissance) contre les antignes A
ou B que nous nexprimons pas

Ils proviennent de bactries intestinales porteuses de sucres qui ressemblent aux antignes A et B

Immunisation: IgM principalement, IgG faiblement (car sucres: pas/peu de rponse T CD4 fh)

Puis dltion des lymphocytes B naifs autoractifs (moelle)

Ne restent que les anticorps contre ce que lon a pas

Toujours confrontation entre un test srique (quels anticorps ?) et un test globulaire (quels sucres?) qui
doivent tre concordant

Deux dterminations sur deux prlvements diffrents sont obligatoires pour tout rendu de rsultat

En pratique, la positivit des raction est indique par une hmagglutination

Ractifs antiA ou B = IgM agglutinant (car pentamres)

Les anticorps naturels sont des IgM agglutinant

Test globulaire: Hmaties du patient + ractif anti A/B--> centrifugation--> POSITIF = agglutination/
NEGATIF = pas dagglutination

Test srique: Hmaties commerciales A/B + plasma patient--> centrifugation--> Anti-B

Ag A + prsence dantiB: le sujet est de groupe A

Discordances preuves srique et globulaires

Immunosuppression: disparition des anticorps naturels anti A ou B

Transfusions antrieures (sujet transfus avec des hmaties O)
Transplantation de cellules souches hmatopotiques (sujet A, greffon B)
Cancers: fabrication dune transferase A chez un sujet B

Existence de nombreux variants molculaires de lantigne A

Modifications quantitatives et qualitatives de lexpression des antignes A / A1 / B
> Pas dimpact clinique
> Impact analytique (tests perturbs)
Grossesse:

Les IgM naturels antiA ou B (pentamres) ne traversent pas le placenta .

Les IgG naturels antiA ou B peuvent tre sufisamment prsents et passer le placenta (rare) et causer
une anmie fetale pouvant tre dangereuse.

Transplantation dorganes ABOincompatible: REIN :

Les anticorps naturels anti A ou B sopposent la greffe rnale ABOincompatible Pour augmenter les
disponibilits en greffons, la transplantation incompatible est aujourdhui possible aprs limination
de ces anticorps naturels avant greffe:
Mdicaments immunosuppresseurs
Filtration plasmatique

SYSTME RHESUS

Antignes uniquement rythrocytaires

Nature entirement protique
Systme extrmement complexe 48 antignes actuellement dcrits...
2 gnes trs homologues et trs polymorphiques impliqus: RHD et RHCE

Pas danticorps naturels naturels (unlike ABO) : un individu ngatif na pas ltat naturel d
anticorps corespondant
Un antigne primordial : antigne RhD
4 autres antignes trs importants en pratique courante : C E c e

Trois conformations sont principalement prsentes chez les caucasiens

ce (r) DcE (R2) DCe (R1)

Un individu exprime deux de ces conformations: un allle maternel et un allle paternel

Variants molculaires de lantigne RhD:

-Variations sans consquences cliniques
-Variations avec consquences cliniques = patients considrer comme RhD NEGATIF

SYSTME KELL: polymorphisme dans le gne KEL

AUTRES SYSTMES: molcules peu polymorphiques
Cela concerne en fait des patients avec des antignes rares = des mutations rares de publics ou de privs
GROUPES SANGUINS RARES:
Risque: on ne trouve pas de produits compatibles dans les banques de sang
Groupes sanguins leucocytaires = systme HLA (Human Leucocyte Antigen)

Molcules impliques dans la prsentation de lantigne aux lymphocytes T par les cellules
dendritiques Molcules TRES POLYMORPHIQUES entre les individus

Enormment de variations

Concerne peu la transfusion: concentrs de plaquettes

Concerne surtout la transplantation dorganes et de cellules souches

Groupes sanguins plaquettaires = systme HPA (Human Platelet Antigen)

Concerne peu la transfusion: concentrs de plaquettes

Concerne surtour des femmes enceintes prsentant des antiHPA qui attaquent les plaquettes du foetus
(risque dhmorragie )

Groupes sanguins plasmatiques

Tout antigne circulant dans le plasma subissant des variations entre les individus

IgG
IgA
Chane lgre Kappa des anticorps
Inhibiteur San Fransisco Isf

Un sujet par exemple ISf transfus avec du plasma ISf+ pourra dvelopper des antiISf lorigine
deffets secondaires lors de prochaines transfusions

Un sujet par exemple sans IgA transfus avec du plasma avec IgA pourra dvelopper des antiIgA
lorigine deffets secondaires lors de prochaines transfusions

TRANSFUSIONS SANGUINES

Ce nest plus du sang total qui est transfus, mais des produits biologiques drivs du sang =
PRODUITS SANGUINS LABILES

Buffy coat: Plaquettes, Lymphocytes , Monocytes , Granulocytes

Un produit sanguin labile (PSL) est un produit usage thrapeutique issu d'un don de sang, destin
tre transfus chez un patient

Proviennent dun donneur unique (ou parfois un mlange de 45 donneurs), conservation limit car
produit biologique frais Attnuation du risque viral :

-Sang total (dsuet) (?)

-concentr rythrocytaire
-concentr plaquettaire
-plasma frais congel
-concentr granulocytaire
-greffons de cellules souches hmatopotiques
-lymphocytes du sang priphriques

Mdicaments Drivs du Sang

Drivs du plasma produits par des techniques industrielles de fractionnement Tous subissent une
inactivation virale
Conservation longue 2 5 ans
Albumine
Immunoglobulines
facteurs de coagulation

Concentrs rythrocytaires:

-suspension concentre drythrocytes dans une solution de conservation + du plasma rsiduel

-deleucocyt
-conservation 42 jours +4C

-Corriger les dficits en HEMOGLOBINE

-Affections hmatologiques induisant une anmie (chroniques, aigues)
-Corriger les dficits induits par hmorragie (accidents, chirurgie etc.)
-Elimination des hmoglobines anormales (HbS/drpanocytose)

Elimination systmatique des leucocytes via des FILTRES

rduire:
-Alloimmunisation antiHLA
-Ractions frissonshyperthermie
-Transmission transfusionnelle de virus intraleucocytaires (CMV, HTLV)

Production de concentrs rythrocytaires

Donneur-->Rduction leucocytaire -->Qualification biologique du DON -->centrifugation
-->Unit de plasma / Couche leucoplaquettaire / Unit de concentr rythrocytaire

Qualification biologique du DON:

-Dpistage des agents infectieux
-Formule sanguine, Hmoglobine, Constantes rythrocytaires
-Qualification immuno hmatologique du don
Qualification biologique du DON OK-->ETIQUETTAGE DU CONCENTRE ERYTHROCYTAIRE
-->EXPEDITION DU PRODUIT A LA BANQUE DE SANG -->CONTRLE DE LA
CONCORDANCE ENTRE LE GROUPE ABO INDIQUE SUR LETIQUETTE ET CELUI DU
PRODUIT -->MISE EN STOCK= BANQUE DE SANG -->DISTRIBUTION POUR UN PATIENT

LES CONCENTRES ERYTHROCYTAIRES PEUVENT SUBIR DES TRANSFORMATIONS

Irradiation par les rayonnements ionisants

Exposition de la poche une dose de 3500 rad

But : prvenir la survenue posttransfusionnelle dun maladie du greffon contre lhte (GVH)

Principales indications :
Greffe de cellules souches hmatopotiques / transplantations
immunosuppression profonde (pharmacologique ou pathologique)
transfusion chez le nouveaun ou in utero

-->Lymphocytes T rsiduels irradis

Prparations pdiatriques : Division aseptique dun concentr en plusieurs units par connexion strile
(1 poche dans 4 petites poches)

Rduction plasmatique : pour patient prsentant une hypersensibilit au plasma , lavages successifs par
centrifugation en solution saline / conservation

Concentrs plaquettaires

Suspension concentre de plaquettes dans une solution de conservation + du plasma rsiduel

Conservation 8 jours temprature ambiante sous agitation

Corriger les dficits qualitatifs / quantitatifs en PLAQUETTES: PRINCIPALEMENT LES

LEUCEMIES

Traitement de lhmorragie massive

-Produits prcieux
-Conservation courte: gestion du stock tendue
-Parfois ngociations (diffrer la transfusion?)
-Produit potentiellement DANGEREUX (contamination bactrienne car conservation temprature
ambiante)
-Immunisation antiHLA / HPA

Production: APHERESE (circulation extra-sanguine)/ Mlange de concentrs plaquettaires de 5 pers.

-->Rduction du risque infectieux par lamotosalen

Prparations pdiatriques: potentiellement dangereux (connexions striles)

Rduction plasmatique : pour patient prsentant une allergie au plasma, lavages successifs par
centrifugation en solution saline / conservation

Plasma frais congel

-plasma
-conservation 40C (2 ans)
-Corriger les hmorragies avec dficits en facteurs de coagulation
-Ce nest pas une solution de remplissage (Effets secondaires!)

-Gestion plus aise (conservation longue et sre)

-Produits physiquement FRAGILES ! (cassant)
-Suisse: les femmes sont contreindiques (anti HLA): vente lindustrie pour produire les
mdicaments drivs du sang

Rgles de compatibilit ABO pour la transfusion de concentrs rythrocytaires

Le risque li lincompatibilit, ce sont les anticorps naturels du receveur qui agglutinent et lysent les
hmaties du produit transfus

Lagglutination des hmaties transfuses cre des amats dangereux : bouchent les capillaires
sanguins

La lyse des hmaties transfuses relargue dans le plasma le contenu intra rythrocytaire:
Hmoglobine libre (dangereux, proinflammatoire)
Ion potassium K+: TRES DANGEREUX (problmes rnaux, cardiaques)

Erreur ABO-->Risque de MORT rapide ou retarde

Globules rouges
O: donneur universel
AB: receveur universel

Rgles de compatibilit ABO pour la transfusion de plasma

Ce sont les anticorps naturels anti ABO du produit (= du donneur) qui attaquent les hmaties du
receveur
GRAVE, voire mortel (mais un peu moins que pour les concentrs rythrocytaires)
O: receveur universel
AB: donneur universel
Rgles de compatibilit ABO pour la transfusion de plaquettes

Les plaquettes expriment peu dantignes ABO

Une incompatibilit ABO, via les anticorps naturels du receveur, va faiblement impacter lintgrit des
plaquettes transfuses Si possible ABOcompatible mais pas obligatoire

En pratique, on transfuse tous les jours des plaquettes ABOincompatibles .

Anticorps irrguliers

On ne se limite pas en transfusion comptabiliser les antignes ABO car il peut exister aussi chez le
receveur des anticorps nonnaturels, immuns, dits IRREGULIERS, qui peuvent tre dangereux

Sujet ngatif pour un antigne et expos cet antigne:

-Lors dune transfusion antrieure
-Lors dune grossesse (contact entre les hmaties foetales et le systme immunitaire de la mre au
moment de laccouchement)

Estil en soi dangereux de prsenter dans son plasma des anticorps irrguliers ?
NON
sauf si

On est transfus avec des hmaties porteuses de lantigne correspondant: risque dagglutination et
hmolyse des hmaties transfuses

Grossesse: les anticorps irrguliers peuvent parfois traverser le placenta et se fixer sur les hmaties
foetales porteuses de lantigne (les antiRhD, antiK sont trs dangereux pour le foetus sil exprime
ces antignes)

Danger des anticorps irrguliers pour la transfusion

> Imprvisible, inconstant

> Effets: de rien du tout la mort, de suite ou aprs une semaine
Principe: si anticorps irrgulier, ne pas transfuser A VIE des hmaties porteuses de lantigne
correspondant

Danger des anticorps irrguliers pour la grossesse

> Imprvisible, inconstant
> Effets: de rien du tout la mort in utero
> Les anti RhD, antiK, antic sont trs dangereux
Principe: si grossesse et RAI positive: Suivi chographique renforc pour rechercher une anmie
foetale

Avant une transfusion, on analyse chez le patient (si on a le temps)

Certains antignes rythrocytaires: toujours: ABO/Rhesus

La Recherche dAnticorps Irrguliers (RAI)

La Recherche dAnticorps Irrguliers au laboratoire = Test de Coombs indirect = test indirect

lantiglobuline

4 hmaties commerciales qui couvrent elles seules tous les antignes rythrocytaires dintrt
transfusionnel courant

Les antiglobulines sont des anticorps commerciaux et agglutinant = REACTIF DE COOMBS

Si au moins une des hmatiestest agglutinent, la RAI est POSITIVE

Si la recherche danticorps irrguliers est positive > Le Laboratoire procde ensuite une identification
de lantigne concern avec 11 hmaties commerciales au profil antignique connu

IMPORTANT:
Consignes transfusionnelles de base pour les concentrs rythrocytaires

-Compatibilit des antigne ABO systmatique= viter la mort

-Respect de lantigne RhD (les sujets ngatifs ne sont pas exposs lantigne)= prvenir la survenue
dun antiRhD rput trs dangereux

-Respect des antignes C c E e K uniquement pour les femmes en ge de procrer (<50 ans) pour
prvenir les risques obsttricaux

-Respect de lanticorps irrgulier si RAI positive ( vie)= viter les accidents transfusionnels

Si accident de la route, patient inconnu du laboratoire, extrme urgence

Transfuser des produits O RhD NEGATIF CEc+e+K et esprer que la RAI est ngative

Lorsque la RAI est POSITIVE, toujours faire en plus un test de compatibilit in vitro:

Hmatopose
Ensemble des phnomnes qui concourent la production (dans moelle osseuse hmatopotique) et au
remplacement continu et rgul des cellules sanguines

Cellule souche --> Prcurseur--> Diffrentiation terminale

mylopose --> cellules du sang lexclusion des lymphocytes

Sige de lhmatopose;
Avant naissance: tissu conjonctif embryonnaire (sac vitellin) , foie ftal , moelle osseuse
Postnatal: mdullaire
Prlvement de moelle osseuse : marrow

compartiments de lhmatopose:

-Toutes les cellules sanguines sont produites a partir d'une mme cellule indiffrencie:
la cellule souche TOTIPOTENTE

-Sous l'influence de facteurs stimulants une cellule souche totipotente va s'engager dans la
diffrenciation d'une LIGNEE CELLULAIRE

-La cellule souche pluripotentielle prolifre et se diffrencie en prcurseurs hmatopotiques de plus

en plus engages dans un lignage pour gnrer au final des cellules sanguines matures

4 compartiments;

cellules souches totipotentes:multipotentialit

dans la moelle osseuse, peu nombreuses, non identifiables, expriment le marqueur de surface CD34

Auto-renouvellement

Diffrenciation irrversible (signaux exognes)

Hmatopose: Equilibre entre la production de cellules souche par auto-renouvellement et la perte par
diffrenciation.

les progniteures: cellules souches qui se sont engages dans un lignage cellulaire

les prcurseurs: se divisent et maturent

les cellules matures: fonctionnelles qui passent dans le sang. (lymphocytes, plaquettes etc..)

La rgulation de lhmatopose:
Le stroma (fibroblastes, cellules pithliales, endothliales, adipocytes, macrophages) mdullaire
assure l'organisation gnrale de la moelle en niches hmatopotiques favorables aux cellules souches
pour leur maintien, leur engagement dans un lignage et leur progression dans leur diffrenciation.

La communication stroma/cellules hematopoietique en maturation: conatct direct, signaux solubles:

facteurs de croissances, cytokines, chimiokines

Les facteurs de croissance de promotion (IL) : capables d'agir sur les cellules souches totipotentes ,
augmentent le nombre de cellules souches en cycle cellulaire
Les facteurs de croissance multipotents: granulocyte-monocyte colony stimulating factor

Les facteurs de croissance restreints: EPO, IL-7

l'rythropotine (EPO) est le facteur de croissance majeur de l'rythropose mais aussi influences
hormonales : - hormones thyrodiennes - andrognes

La mgacaryocytopose est l'ensemble des mcanismes de diffrenciation cellulaire qui conduisent

la production des plaquettes sanguines.

Endomitosis is a variant of endoreduplication in which cells replicate their chromosomes during S

phase and enter, but prematurely terminate, mitosis. Instead of being divided into two new daughter
nuclei, the replicated chromosomes are retained within the original nucleus

Although anaphase is initiated, with separation of paired sister chromosomes and formation of the
cleavage furrow, prior to completion of cytokinesis the cleavage furrow regresses, resulting in a
tetraploid cell that re-enters G1.

Mdicaments pour augmenter la production de plaquettes:

-agonistes du rcepteur de la thromobopotine (TPO)
-mimtiques de la TPO

-->allogreffe CSH (Cellules Souches Hmatopotiques)

Conditionnement la greffe

Au mieux, le patient doit tre en rmission hmatologique de sa maladie (grce des ttt antrieurs de
chimio-/radio- et/ou immunothrapie)

Reoit une chimiothrapie intensive (myloablative) avec +/- irradiation corporelle totale (TBI)
Buts:
Eradiquer les ventuelles cellules tumorales rsiduelles
Dtruire la moelle du receveur (notamment son systme immunitaire pour viter un rejet de la
greffe allognique)

Traitements immunosuppresseurs pour viter le rejet de la greffe allognique et pour prvenir la

raction de rejet inverse (GvHD)

Prophylaxies anti-infectieuses (antibiotiques, antifongiques, antiviraux et anti-parasitaires)

CHAP: HEMOSTASE

Ensemble des phnomnes qui dfendent contre le saignement spontan

HEMOSTASE PRIMAIRE = INTERACTIONS PLAQUETTES - PAROI VASCULAIRE:

-arrt initial et provisoire du saignement

-adhrence au sous-endothlium / cisaillement lev (facteur Willebrand)
-agrgation plaquettaire (fibrinogne)

PLAQUETTES :

-les plus petits lments figurs du sang (env. 10 fL)

-anucles
-production : moelle hmatopotique
-rpartition : 1/3 dans la rate
-dure de vie : env. 10 jours

production des plaquettes - mgacaryocytes

Collagen activates thrombin

Thrombin: converts soluble fibrinogen into insoluble strands of fibrin

TXA2 is produced by activated platelets and has prothrombotic properties: it stimulates activation of
new platelets as well as increases platelet aggregation

-->scrtion granules

-->activits procoagulantes

-->agrgation

-->changement de forme

La fibrine polymrise = changement dtat physique du sang

prothrombine-->thrombine

Arachidonic acid (librs des phospholipides membranaires)-->endoproxydes-->TXA2

Aspirin rxn
HEMOSTASE PRIMAIRE : PATHOLOGIES HEMORRAGIPARES
thrombo(cyto)pnie : diminution du nombre de plaquettes dans le sang
thrombo(cyto)pathie altration de la fonction des thrombocytes
dficit en F. (von) Willebrand

Voie intrinseque (lente)

Voie extrinseque (rapide)

Les 2 tests fonctionels de l'hemostase

un test qui explore la voie endogene (intrinseque): test de quick
un test qui explore la voie exogene (extrinseque): test de cephaline active (TCA ou PTT)

coagulation:
XIIa-->XIa-->IXa + VIIa / facteur tissulaire -->Xa-->prothrombine-->thrombine

Prothrombinase: factor Xa, Va, prothrombin-->thrombin

-->production de fibrine, puis stabilisation du thrombus rouge par le facteur XIII.

Facteurs: II (thrombine), VII (voie endogene), X (voie exogene), IX (complexe prothrombinase)

Ces facteurs sont synthtiss dans les hepatocytes. La vitamine K aide la carboxylation de l'acide
glutamique de ces 4 facteurs => facteurs nuls aux points de vue fonctionnel car ils ne peuvent pas se
fixer aux phospholipides plaquettaires (avec Ca++).

Traitement anticoagulant: Antagonistes de la vitamine K

Lhparine est un mdicament anticoagulant, c'est une molcule qui fait partie des
glycosaminoglycanes (GAG).

AVK (ANTI-VITAMINES K)

-Effet indirect sur la synthse des facteurs dpendant de la vitamine K (rle majeur de la fonction
hpatique)
-Interaction cycle vitamine K
-Interactions multiples : absorption, transport, mtabolisme
-Large variation intra- et interindividuelle de leffet sous influence gntique et de lenvironnement
-Surveillance biologique ncessaire
-Adaptation de la posologie

Nouveaux ACO

-Effet direct sur la protase cible (Xa, IIa)

-Interactions limites (absorption, mtabolisme, limination)
-Faible variabilit et bonne prdictibilit
-Pas de surveillance biologique
-Posologie fixe
Activateur PAI-1: plasminogne -->plasmine
-->fibrinogne -->monomres de fibrine-->polymres -->liaisons covalentes

TRAITEMENTS ANTITHROMBOTIQUES

Hmostase primaire : inhibiteurs du fonctionnement plaquettaire

Coagulation : anticoagulants
Fibrinolyse : activateurs du plasminogne

Nomenclature des facteurs de coagulation

+glycoprotines plasmatiques diffrents groupes structuraux et fonctionnels

-prcurseurs denzymes
-acclrateurs de ractions enzymatiques chiffre accompagn du suffixe a : facteur activ

Pathologies constitutionnelles de lhmostase

Anomalie constitutionnelle ou acquise Hmostase primaire : Willebrand

Coagulation :
- hmophilie (hmorragipare)
- dficit en 1 facteur de la phase contact (non hmorragipare)

Rle du foie dans lhmostase : Synthtise la majorit des protines impliques de la coagulation et sa
rgulation

Synthtise la majorit des protines impliques dans la fibrinolyse et sa rgulation

Production de la thrombopotine (responsable de la production des plaquettes partir des
mgacaryocytes)