Hampir semua data yang disajikan pada bagian berikut berasal
dari penelitian dengan bryostatin 1. Namun, biologi dasar
semua bryostatins pada dasarnya sama; Mereka hanya berbeda dalam potensi dalam sistem yang diberikan.
Bryostatin 1 memamerkan beberapa kegiatan biologis yang
sangat menarik sejak awal. Awalnya, ini menunjukkan aktivitas yang cukup bervariasi pada arus saat itu. Tes in vivo yang digunakan Di NCI, yang menggunakan garis leukimia murine P388 dan L1210 pada tikus normal.
Ada variabilitas yang sangat signifikan dalam hasil dari batch
ke batch, namun pada akhirnya, menggunakan material yang terisolasi Dari Bugula neritina yang dikumpulkan di Teluk California dan dari pecahan pecahan dari tempat pengumpulan lainnya, Pettit dkk. Mampu mempublikasikan struktur dan beberapa aktivitas biologis bryostatin 1 pada tahun 1982.
Selama proses biologis awal fraksi bryostatin oleh NCI
Menyadari bahwa respon terhadap sel P388, L1210, dan KB menirukan tanggapan yang ditunjukkan oleh ekstrak Dari tanaman keluarga Euphorbiaceae dan Thymelaceae. Kemungkinan mengisolasi seperti phorbollike Struktur dari Bugula tampak jauh, bagaimanapun, karena tidak pernah ada laporan tentang struktur jenis phorbol atau daphnane yang diisolasi dari organisme laut.
Selama 20 tahun terakhir, bryostatin 1 telah menunjukkan
aktivitas biologis yang sangat beragam, termasuk stimulasi imun, diferensiasi sel yang berubah, dan peningkatan sitotoksisitas agen lainnya. Percobaan awal oleh kelompok Blumberg di NCI dan kolaborator mereka di tahun-tahun berikutnya menunjukkan bahwa aktivitas antikanker bryostatin mungkin didasarkan pada interaksinya. Dengan, dan modulasi berikutnya, protein kinase C isozim (PKCs) dalam sel.
Kinase PKC memindahkan kelompok fosfat terminal dari
adenosin trifosfat setelah mengikat diacylglycerol dan, seringkali, fosfatidil serin ke isozim PKC. Sebagai hasil dari interaksi ini, PKC sering terkonsentrasi pada permukaan sitosolik membran sel dan aktif pada konsentrasi fisiologis ion kalsium yang rendah, sehingga memodulasi kaskade inositol trifosfat (IP3) di dalam sel.
PKC dapat diklasifikasikan menjadi tiga kelompok utama:
konvensional dimana tidak ada ikatan dengan phorbol yang diketahui. Dua kelompok pertama memiliki domain peraturan dan katalitik, dan domain peraturan pada khususnya memiliki dua domain kaya sistein yang dikenal sebagai CRD1 dan CRD2. Dengan menggunakan penelitian pengikatan- perpindahan, ditunjukkan bahwa bryostatins, phorbol ester (PE), dan diasilgliserol (DAG) semuanya bersaing untuk situs pengikatan atau situs PKC yang sama, dan melalui studi pemodelan yang sesuai, model farmakope awal untuk DAG dan PE berhasil dilakukan. terapan Untuk parameter mengikat bryostatin dan aktivator PKC lainnya, yang kemudian menyebabkan turunan analog sederhana dari bryostatins oleh kelompok Wender (lihat berikut). Tempat pengikatan utama di bryostatins termasuk C1, C19 Dan atom oksigen C26 (untuk Kenyamanan, semua komentar selanjutnya tentang analog kimia akan menggunakan bryostatin 1 angka).
Hal ini dibuktikan dengan menggunakan bryostatins yang
dimodifikasi secara kimia dan dengan mengikuti afinitas pengikatannya dengan isoform PKC (lihat tabel 1 dalam Mutter and Wills untuk hubungan yang saling mengikat 7, Namun meskipun ada penelitian dengan agen ini dan senyawa terkait lainnya yang mengikuti respons sel, tidak ada penjelasan lengkap mengapa tanggapan biologis antara bryostatin dan PE berbeda Muncul sampai saat ini. Bila efek spesifik dari bryostatin 1 pada PKC dalam garis sel dipelajari secara rinci, ditemukan bahwa walaupun bryostatin menurunkan PKC, ekspresi PKC tidak secara langsung. Terpengaruh Dari kedua studi sinar-x dari phorbol 13-asetat yang terikat pada murine PKC- dan struktur solusi resonansi magnetik nuklir dari PKC- Konstruksi CRD2, ditentukan bahwa ester phorbol duduk di alur polar yang ada di ujung CRD.
Selain itu, pengikatan "penggerak" semacam itu tampaknya tidak
menimbulkan perubahan konformasi yang signifikan dalam domain pengikatan. Dengan demikian, "penggerak" itu berada di atas permukaan kutub bagian dalam dari alur, menciptakan permukaan hidrofobik yang terus-menerus sekitar sepertiga protein kompleks. Peningkatan hidrofobisitas dari kompleks ester-ester-phorbol PKC ini mungkin mendorong penyisipannya ke dalam membran plasma, di mana ia kemudian dapat melakukan pensinyalan yang terkait dengan tumorigenesis, 17 dan kemungkinan bahwa ketika bryostatin 1 mengikat CRD dari PKC, perubahan yang serupa Terjadi, meski beda spesifik Bisa terjadi dengan PKC yang berbeda.
Jadi, dengan PKC- di mana tampaknya ada "efek stabilisasi" yang
mencegah penyisipan ke dalam membran dan kemudian degradasi berikutnya melalui jalur proteaseome ubiquitin, itu adalah Mungkin perubahan konformasi berbeda dari pada yang terjadi dengan PKC- dan PKC- di mana mereka mengalami down-regulation melalui jalur degradasi. Untuk rincian lebih lanjut mengenai rute potensial degradasi PKC di mana-mana, pembaca harus berkonsultasi dengan Skema 2 dalam tinjauan oleh Hale et al. Bukti lebih lanjut untuk situs pengikat / tumpang tindih yang spesifik diberikan dalam terbitan baru-baru ini dari kelompok Hale, di mana mereka mendemonstrasikan, menggunakan teknik resonansi magnetik nuklir solusi yang bryostatin 1 (atau, lebih tepatnya, analog dengan fitur struktural spesifik), tumpang tindih dengan ikatannya. Situs dengan phorbol 13-asetat dan phorbol-12,13- dibutyrate di lokasi CRD2 PKC- manusia. Tinjauan baru-baru ini tentang interaksi obat PKC sebagai terapi antitumor potensial harus dikonsultasikan untuk informasi lebih lanjut tentang PKC sendiri dan senyawa lain yang mungkin berfungsi melalui jalur ini.
Selain data tentang interaksi dengan PKC, sejumlah
besar bukti telah terakumulasi yang menunjukkan bahwa bryostatin 1 dan, dengan kesimpulan, senyawa sejenis lainnya, tapi mungkin bukan kelas 20-deoksi sebagai bryostatin 13, dapat berfungsi sebagai Imunostimulan yang sangat manjur. . Dengan demikian, sel T dan neutrofil teraktivasi secara in vitro dan in vivo 20-23 dan dalam uji klinis, telah ditunjukkan untuk meningkatkan tingkat sirkulasi faktor nekrosis tumor (TNF- ) yang biasanya diproduksi oleh tubuh berikut Imunostimulasi. Secara vitrostudies dengan makrofag murine Line, ANA-1, pengobatan dengan bryostatin 1 secara signifikan meningkatkan ekspresi TNF-MRNA Dan juga menunjukkan sinergi dengan interferon- Dalam produksi nitrit dan ekspresi selanjutnya dari gen sintetase nitrat oksida yang dapat diinduksi. Gen ini mengkatalisis Produksi In vivo NO dari L-arginine, dan NO diketahui menghasilkan efek tumoricidal yang kuat pada makrofag murine, Mungkin melalui induksi dari kaskade apoptosis. Dengan demikian, bryostatins mungkin mengerahkan Beberapa efeknya melalui jalur imunomodulasi.
Sebaliknya, bryostatin 13, 20-deoksi-bryostatin, tidak
merangsang pembentukan koloni pada sel progenitor sumsum tulang, sedangkan bryostatins 1, 3, 8, dan 9 melakukannya. Selain itu, bryostatin 13 diklaim lebih manjur sebagai agen antitumor daripada empat lainnya. Dengan demikian, mungkin ada komponen imunostimulasi dalam aktivitas antitumor dari bryostatins C-O-asil yang tidak ada dalam kelas 20- deoksi.
Laporan baru-baru ini oleh Battle and Frank telah
menunjukkan bahwa satu mekanisme potensial diferensiasi bryostatin 1-mediated pada sel CLL manusia adalah aktivasi transduser sinyal dan aktivator transkripsi (STAT). Jadi, dalam sel yang diambil dari pasien uji klinis, bryostatin 1 muncul untuk mengaktifkan STAT1 secara PKC-dependent dengan menginduksi loop autokrin IFN-loop; Hal ini menyebabkan aktivasi jalur sinyal JAK-STAT1 dan diferensiasi akhir sel.
Ada juga laporan yang menyiratkan bahwa bryostatin 1,
dalam kondisi tertentu, mungkin memiliki beberapa kemampuan merangsang tumor, meskipun ini merupakan ekstrapolasi dari studi garis sel. Dalam studi di mana ditunjukkan bahwa bryostatin 1 dapat secara selektif menargetkan isozim PKC-II pada baris k562 (human eritroleukemia) dan HL60 (human promyelocytic), pengobatan tersebut menyebabkan translokasi membran dan fosforilasi Lamin B pada lokasi spesifik pada protein lamin. Translokasi / fosforilasi semacam itu menyebabkan pemecahan selubung nuklir selama mitosis, dan di sel-sel ini, efek semacam itu tampaknya terkait dengan peningkatan proliferasi. Dengan demikian, perawatan mungkin harus dilakukan. Diambil dalam memilih pasien untuk pengobatan bryostatin (lihat bagian selanjutnya pada uji klinis).