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MARCUS VINCIUS CNDIDO

HEMATOLOGIA, BIOQUMICA SRICA E NUTRIO EM AVES:


CRACIDAE

Dissertao apresentada como requisito


parcial para obteno do grau de Mestre,
pelo programa de graduao em Cincias
Veterinrias do Departamento de Medicina
Veterinria, Setor de Cincias Agrrias, da
Universidade Federal do Paran UFPR

Orientadora: Profa. Dra. Elizabeth Santin

CURITIBA
2008
i

Cndido, Marcus Vincius


Ttulo / Marcus Vincius Cndido Curitiba, 2008.
Orientadora: Elizabeth Santin
Dissertao (Mestrado em Cincias Veterinrias) Setor de Cincias Agrrias, Universidade
Federal do Paran.
1 Aves: alimentao e raes. 2 Nutrio Animal. 3 Cracidae: alimentao e raes.
4 Hematologia. 5 Bioqumica
CDU 636.084/.085
CDD 636.0852
ii

Termo de aprovao
ii

minha esposa, por todo seu amor e dedicao.


minha me, minha grande professora e cientista.
Ao meu pai, filsofo, naturalista amador e guru pessoal.
iii

AGRADECIMENTOS

Aos colegas e professores do Programa de Ps-Graduao em Cincias Veterinrias da


UFPR, que contriburam muito para minha evoluo.
Secretria do Programa, Maria Jos Botelho Maeda, por sua ateno, sempre gentil
no encaminhamento dos procedimentos acadmicos.
professora Flvia Borges Saad, da Universidade Federal de Lavras, pelo apoio
oferecido junto empresa Vale Verde na pessoa de Paulo Machado, e a este pelo
fornecimento das raes Megazoo utilizadas no experimento.
empresa DMZ Produtos para Laboratrio Ltda. pelo fornecimento dos kits para
exames bioqumicos.
Aos amigos professores Geraldo Camilo Alberton, Fabiano Montiani-Ferreira, Ricardo
DOC Vilani e especialmente Rogrio Ribas Lange e amiga de profisso Elizabeth
Schmidt pela orientao e apoio oferecidos ao longo desta empreitada e de outras tambm.
professora Rosngela Locatelli Dittrich, por todos os ensinamentos na rea de
Patologia Clnica Veterinria e pelo apoio logstico nas dependncias do laboratrio no
Hospital Veterinrio da UFPR, onde realizamos os exames hematolgicos e bioqumicos.
A todos que auxiliaram nas coletas e precessamento de amostras, incluindo Bruna
Balbinotti, Paula Cristina Linder, Jos Carlos Roble Jr., Jorge Velastin e especialmente Lia
Fordiani Lenati Patrcio por seu auxlio e troca de idias durante os exames hematolgicos. A
Marina Bolzani Saad e Joelma Moura Alvarez pelo auxlio nas anlises estatsticas do
experimento.
Agradeo s minhas colegas de profisso e amigas Bruna Balbinotti e Dbora Castelo
Branco Collares Maia, ento participantes do Programa de Ps-Graduao Residncia em
Medicina Veterinria da UFPR, por segurarem as pontas no Zo e contriburem com suas
boas idias e excelente esprito para que este ltimo ano tenha sido to bom.
Ofereo um agradecimento muito especial minha professora orientadora, Dra.
Elizabeth Santin, por encontrar entre suas inmeras atribuies toda a disponibilidade em
orientar meus passos em direo a este objetivo, e pela compreenso com minhas dificuldades
e as limitaes logsticas e de tempo, relacionadas minha atividade profissional no
Zoolgico Pomerode. Serei sempre muito grato.
iv

minha irm, Louise Cristine Cndido da Silva, que me ajudou o tempo todo,
principalmente na fase experimental, participando integralmente desde a coleta de amostras
no zo, seu processamento no laboratrio e organizao dos dados produzidos, alm de
indescritveis habilidades de pombo-correio. Enfim, sem a qual este trabalho simplesmente
no existiria. Desejo ter um corao que seja a metade do seu e que a vida me d oportunidade
de retribuir altura, no por necessidade, mas por amor.
v

SUMRIO

LISTA DE TABELAS .............................................................................................................VI


LISTA DE SIGLAS, SMBOLOS E ABREVIATURAS ...................................................... VII
RESUMO .............................................................................................................................. VIII
ABSTRACT .............................................................................................................................IX
1 ALIMENTAO, HEMATOLOGIA E BIOQUMICA SANGUNEA EM AVES, COM
NFASE EM CRACDEOS - REVISO..................................................................................1
RESUMO ...................................................................................................................................1
ABSTRACT ...............................................................................................................................1
1.1 INTRODUO ....................................................................................................................2
1.2 CRACDEOS .......................................................................................................................3
1.3 ALIMENTAO E FISIOLOGIA DAS AVES..................................................................4
1.4 EXAMES LABORATORIAIS EM AVES ..........................................................................6
1.4.1 Hematologia ......................................................................................................................7
1.4.2 Bioqumica sangunea .....................................................................................................11
1.4.3 Causas de variao dos parmetros sanguneos em aves ................................................15
1.4.4 Interpretao clnica de perfis enzimticos combinados .................................................16
1.5 HEMATOLOGIA, BIOQUMICA E NUTRIO EM ESPCIES DIVERSAS.............17
1.6 CONSIDERAES FINAIS..............................................................................................19
REFERNCIAS .......................................................................................................................20
2 COMPARAO DE PARMETROS CLNICOS, HEMATOLGICOS E BIO-
QUMICOS SRICOS DE CRACDEOS EM CATIVEIRO, EXPOSTOS DIETA
CONVENCIONAL DE ZOOLGICO E UMA RAO COMERCIAL EXTRUSADA .....24
RESUMO .................................................................................................................................24
ABSTRACT .............................................................................................................................25
2.1 INTRODUO ..................................................................................................................26
2.2 MATERIAL E MTODOS ................................................................................................27
2.3 RESULTADOS E DISCUSSO ........................................................................................30
2.4 CONCLUSO ....................................................................................................................36
vi

LISTA DE TABELAS

TABELA 1 INFORMAES NUTRICIONAIS DA DIETA TRADICIONAL (T1) ...................... 28


TABELA 2 INFORMAES NUTRICIONAIS DA RAO MEGAZOO FM15 (T2).............. 28
TABELA 3 VARIAES PESO VIVO (PV), GLICEMIA, PROTENA PLASMTICA TOTAL
(PPT), VOLUME GLOBULAR (VG) E HEMOGLOBINA (HG) EM CRACDEOS
ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA (T2)............ 30
TABELA 4 VARIAES NAS CONTAGENS DE ERITRCITOS (RBC), LEUCCITOS (WBC)
E TROMBCITOS (Trb) A CADA 100 LEUCCITOS EM CRACDEOS ALIMENTADOS COM
A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA (T2).................................................... 32
TABELA 5 VARIAO NA CONTAGEM DIFERENCIAL DE 100 LEUCCITOS EM
CRACDEOS ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA
(T2)........................................................................................................................................................ 32
TABELA 6 VARIAES NA ALBUMINA (Alb), GLOBULINA (Glb), PROTENA (Prot),
CIDO RICO (AU), CLCIO (Ca) E FSFORO (P) NO SORO DE CRACDEOS
ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA (T2)............ 33
TABELA 7 VARIAES EM GAMAGLUTAMILTRANSFERASE (GGT), ASPARATO-
AMINOTRANSFERASE (AST), CREATINAFOSFOQUINASE (CPK), AMILASE (Aml) E
LIPASE SRICAS (Lip), EM CRACDEOS ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL
(T1) OU RAO EXTRUSADA (T2)................................................................................................. 35
vii

LISTA DE SIGLAS, SMBOLOS E ABREVIATURAS

ALT Alanina-aminotransferase
Alb Albumina
Aml Amilase
AST Aspartato-aminotransferase
AU cido rico
Ca Clcio
CHGM Concentrao de hemoglobina globular mdia
CPK Creatinafosfoquinase
DNA cido desoxirribonuclico
EDTA cido etileno diamino tetractico
FA Fosfatase alcalina
g Grama
g/dL Grama por decilitro
GDH Glutamato desidrogenase
GGT Gama-glutamiltransferase
Glb Globulinas
HG Concentrao de hemoglobina
ISIS International Species Information System
IUCN International Union for the Conservation of Nature and Natural Resources
LDH Desidrogenase lctica
Lip Lipase
mg/dL Miligrama por decilitro
mg/kg Miligrama por quilograma
mL Mililitro
mL Mililitros
NM Nfron tipo mamfero
NR Nfron tipo reptiliano
P Fsforo
pH Potencial hidrogeninico
PPT Protena plasmtica total
Ptn Protena srica
RBC Contagem total de eritrcitos
rRNA cido ribonuclico ribossmico
SC Santa Catarina
T1 Dieta tradicional de zoolgico
T2 Rao comercial extrusada
TFG Taxa de filtrao glomerular
Trb Contagem de trombcitos para 100 leuccitos
tRNA cido ribonuclico transportador
VG Volume globular
VGM Volume globular mdio
WBC Contagem total de leuccitos
XDH Xantina-desidrogenase
g/dL Micrograma por decilitro
m Micrmetro
viii

RESUMO

HEMATOLOGIA, BIOQUMICA SRICA E NUTRIO EM AVES: CRACIDAE

A famlia de aves Cracidae geralmente includa na Ordem Galliformes, mas tambm


foi proposta a ordem Craciformes. So consideradas verdadeiramente arborcolas, possuindo
quatro biotipos: Aracus, Jacus, Jacutingas e Mutuns. Cerca de um tero das espcies de
Cracidae eram consideradas ameaadas h 20 anos e atualmente todas as 50 espcies esto
listadas no Red Data Book da IUCN (2006) em diversas categorias, sendo uma das famlias de
aves mais ameaadas do mundo e a mais ameaada das Amricas. Felizmente os cracdeos
apresentam potencial de reproduo em cativeiro e tcnicas artificiais semelhantes s de
galiformes domsticos tm sido empregadas com xito.
A nutrio tradicionalmente fornecida em cativeiro ainda em grande parte emprica,
envolvendo uma grande variedade de itens passveis de sofrer seleo pelos animais,
causando efeitos nutricionais variveis, especialmente quando mantidos em grupos. Com o
intuito de melhor compreender as implicaes fisiolgicas da nutrio sobre estas aves em
cativeiro, foi desenvolvido este estudo composto de dois captulos. O primeiro captulo
apresenta uma reviso de literatura das tcnicas de estudo da bioqumica sangunea e
hematologia de aves, com nfase nos efeitos relacionados nutrio. Tambm so tratados
aspectos relevantes da evoluo e nutrio de aves, especialmente os Cracdeos. No captulo
seguinte apresentado um estudo experimental realizado em Cracdeos em cativeiro (Aburria
jacutinga, Penelope obscura and Penelope superciliaris), submetidos a duas diferentes dietas.
A dieta tradicionalmente empregada em zoolgicos, composta de rao comercial de frango,
frutas e vegetais, foi posteriormente convertida para uma rao comercial extrusada especfica
para galiformes silvestres.

Palavras-chaves: Aburria jacutinga, bioquimica srica, Cracidae, hematologia, nutrio,


Penelope obscura, Penelope superciliaris.
ix

ABSTRACT

HEMATOLOGY, SERUM BIOCHEMISTRY AND NUTRITION IN BIRDS:


CRACIDAE

The family of birds Cracidae is usually included in the Order Galliformes, but the
Order Craciformes has recently been proposed. It is a truly arboreal family which possesses
four biotypes: chacalacas, guans, piping guans and curassows. About one third of the cracid
species were considered threatened 20 years ago, presently all 50 species are listed in the
IUCNs Red Data Book (2006) under several categories. They are one of the most threatened
families of birds in the world and the most threatened in the Americas. Fortunately, cracids
have good potential for reproduction in captivity and artificial techniques similar to the ones
used in domestic Galliformes have been applied successfully.
The nutrition traditionally utilized in captivity is mostly empirical, involving a great
variety of items susceptible to selection by the animals, hence causing variable nutritional
effects, especially when the animals are kept in groups. A more thorough understanding of the
physiological implications of nutrition in captivity, this study was composed in two chapters.
The first chapter presents a review of the techniques for the study of blood biochemistry and
hematology in birds, with emphasis on nutrition-related effects. There are also relevant
aspects of bird nutrition and evolution, especially concerning Cracids. In the following
chapter an experimental study, performed in captive cracids (Aburria jacutinga, Penelope
obscura and Penelope superciliaris) fed two different diets, is presented. The diet
traditionally applied in zoos, composed of commercial chicken feed, fruits and vegetables was
converted to a specific extruded commercial feed for pheasants and wild Galliformes.

Keywords: Aburria jacutinga, Cracidae, hematology, nutrition, Penelope obscura, Penelope


superciliaris, serum biochemistry.
1

1 ALIMENTAO, HEMATOLOGIA E BIOQUMICA SANGUNEA EM AVES,


COM NFASE EM CRACDEOS - REVISO

Cndido, Marcus Vincius1, Santin, Elizabeth2


1
Zo Pomerode Fundao Hermann Weege, localizado em Pomerode SC
2
Departamento de Medicina Veterinria, UFPR, Curitiba PR

RESUMO

As aves constituem um grupo bastante heterogneo, possuindo diversas caractersticas


morfofisiolgicas de grande importncia do ponto de vista nutricional e diagnstico. A
primeira parte desta reviso trata da evoluo, conservao, alimentao e nutrio de aves,
especialmente cracdeos. A seguir so discutidos aspectos relevantes no laboratrio clnico,
desde a colheita da amostras sanguneas avaliao de resultados, incluindo exames
hematolgicos e bioqumicos. Na ltima parte so consideradas as causas de variao nestes
parmetros, considerando principalmente aspectos nutricionais.

Palavras-chaves: bioqumica sangunea, conservao, Cracidae, evoluo, hematologia,


nutrio.

ABSTRACT

Birds constitute a very heterogenous group, possessing several unique


morphophysiological features of great importance as far as nutrition and diagnostics are
concerned. The first part of this review deals with evolution, conservation, feeding and
nutrition in birds, especially cracids. Secondly, relevant aspects of avian blood chemistry and
hematology are discussed. Finally, sources of variation in such parameters are addressed, with
emphasis on nutritional aspects.

Keywords: Cracidae, conservation, nutrition, hematology, serum biochemistry, evolution


2

1.1 INTRODUO
As aves constituem um grupo bastante heterogneo, com diversas caractersticas
anatmicas e fisiolgicas diferenciadas de grande importncia do ponto de vista nutricional.
As aves no mastigam o alimento, em geral o bico serve apenas para apreender ou cortar,
permitindo a deglutio. H grande variabilidade dentre volumes, reas de mucosa e
comprimentos relativos dos segmentos do trato gastrintestinal e acordo com a dieta natural da
espcie e sua filogenia.
No que se refere especialmente famlia Cracidae, esta composta por aves de grande
porte e verdadeiramente arborcolas, tradicionalmente procuradas como caa. Todas as 50
espcies esto listadas no Red Data Book da IUCN (2006) em diversas categorias, sendo uma
das famlias de aves mais ameaadas do mundo e a mais ameaada das Amricas. Felizmente
os cracdeos apresentam potencial de reproduo em cativeiro em que tcnicas artificiais
semelhantes s de Galliformes domsticos tm sido empregadas com xito. Contudo, existe
pouco conhecimento sobre os parmetros hematolgicos e bioqumicos sanguneos destas
aves e qual sua resposta a diferentes fatores tais como nutrio, manejo, enfermidades etc.
De fato, muitos sinais clnicos de doenas em aves tendem a ser inespecficos,
portanto o diagnstico deve se apoiar em mtodos investigativos, como a hematologia,
bioqumica sangunea, diagnstico por imagem e anlise fecal. Os parmetros bioqumicos e
hematolgicos podem variar de acordo com a espcie, idade, sexo, dieta, sade, localizao
geogrfica e estado reprodutivo em questo. Apesar de muito menos numerosos que em
mamferos, os trabalhos de pesquisa envolvendo essas ferramentas diagnsticas em aves,
especialmente aves no-comerciais, vm originando publicaes de interesse tanto para quem
trabalha com clnica mdica como com pesquisa em vida livre. Nestes pacientes, existe uma
demanda crescente por mtodos no-invasivos, com aplicao prtica e implicaes ticas que
suplantam aquelas tradicionalmente enfrentadas com aves de produo.
Nesta reviso so abordados aspectos caractersticos da Familia Cracidae e porquanto
no existam trabalhos relativos aos parmetros sanguneos nestas espcies, sero evidenciados
trabalhos relativos a tais parmetros em outras espcies avirias, salientando a necessidade de
maior desenvolvimento de estudos especificos em cracdeos.
3

1.2 CRACDEOS
A famlia de aves Cracidae geralmente includa na Ordem Galliformes, mas tambm
foi proposta a ordem Craciformes (sub-ordens Craci e Megapodi), de acordo com diferenas
encontradas no DNA de genomas completos (SIBLEY et al., 1988). SIBLEY et al. (2000) ao
examinarem os genes de rRNA mitocondrial 12S, tRNA-Valina e rRNA16S, observaram que
os cracdeos se correlacionam com os Galliformes e em menor grau com anserifomes, porm
somente a conservao destas seqncias no permitiam propor definitivamente a diviso
Galloanserae como monofiltica. Mais recentemente foi comprovado ter sido este o ramo
mais basal e antigo a divergir na Infraclasse Neognathae, que inclui todas as aves modernas
exceto as ratitas (CHUBB, 2004).
Na famlia Cracidae, para a qual constam fsseis que remetem ao perodo tercerio
(Eoceno, 50 milhes de anos), so descritos quatro biotipos: Aracus, Jacus, Jacutingas e
Mutuns. So os nicos galiformes considerados verdadeiramente arborcolas. Possuem
pescoo e cauda longos, pernas altas e fortes e asas grandes, voando bem. Alcanam o peso
dos pais em menos de um ano de idade e possuem plumagem semelhante, com excees; h
dimorfismo sexual nos mutuns (Crax spp.) (SICK, 1997).
A jacupemba (Penelope superciliaris), espcie de ampla distribuio, ocorre ao sul do
rio Amazonas e no Paraguai e pesa cerca de 850g. O jacuau (P. obscura) ocorre no sudeste e
sul do Brasil e pesa cerca de 1200g. (SICK, 1997). A jacutinga (Pipile jacutinga), que j foi
bastante difundida e comum, encontra-se extinta em grande parte de sua regio de distribuio
original. Ocorre atualmente em reas limitadas do sul do Brasil, nordeste da Argentina e
sudeste do Paraguai, geralmente associada a palmitais, pesando de 1.100 a 1.400 g (DEL
HOYO et al., 2001). importante determinar se essas aves realmente dependem de frutos de
palmito (Euterpe edulis) para sobreviver em algumas reas (SO BERNARDO e CLAY,
2006), tanto do ponto de vista da nutrio em cativeiro como principalmente da conservao
in situ (GALETTI e ALEIXO, 1998).
Os cracdeos apresentam potencial de reproduo em cativeiro e essa atividade vem
sendo realizada pelo menos desde o incio do sculo XX (NOGUEIRA-NETO, 1973).
Galinhas domsticas chocas de tamanhos variados podem ser utilizadas como mes
substitutas desde a incubao. Para as espcies maiores, tambm so utilizadas peruas, pela
necessidade de virar os ovos grandes (TODD et al., 1992). A reproduo intergenrica
tambm vem sendo obtida em cativeiro, como, por exemplo, entre Crax fasciolata x Penelope
4

sp e Pipile(Aburria) pipile cumanensis x Ortalis canicollis. A produo de hbridos apia a


idia de parentesco prximo dos cracdeos entre si. Contudo, do ponto de vista da
conservao de espcies, isto no desejvel (SICK, 1984). Cerca de um tero das espcies
de Cracidae eram consideradas ameaadas h 20 anos (SICK, 1997). Alguns autores
consideraram 14 das 49 espcies como ameaadas h 10 anos (BENNET e OWENS, 1997),
atualmente todas as 50 espcies esto listadas no Red Data Book em diversas categorias
(IUCN, 2006), sendo uma das famlias de aves mais ameaadas do mundo e a mais ameaada
das Amricas (SO BERNARDO e CLAY, 2006).

1.3 ALIMENTAO E FISIOLOGIA DAS AVES


Os Galliformes em geral possuem englvio distensvel, moela musculosa e vescula
biliar, alm de ceco bem desenvolvido, que tende a ser maior nas espcies que consomem
naturalmente mais fibra vegetal, em que microorganismos (bactrias, protozorios) atuam
aumentando sua digestibilidade. Para a maior parte das espcies de faises, que possuem dieta
natural semelhante dos cracdeos, os nveis de protena devem ser superiores a 20 a 25% de
protena durate a fase de crescimento e reproduo e reduzida a menos de 20% para
manuteno. Obesidade, reduo da fertilidade e desequilbrios da flora intestinal so os
principais problemas relacionados dieta neste grupo de aves (FOWLER e MILLER, 2003).
Os cracdeos alimentam-se de frutos, folhas e brotos, alm de pequenos vertebrados e
invertebrados (moluscos, insetos). No esgravatam o solo procura de comida, mas podem
ser encontradas pedrinhas na moela de animais na natureza. Geralmente bebem em rios e
conseguem engolir gua sem levantar a cabea, como os pombos (SICK, 1997). O
frugivorismo apontado como uma dieta altamente adaptativa, e apesar das frutas serem
consideradas pobres em alguns nutrientes, podem de fato constituir alimento adequado, que as
aves compensam pelo aumento da ingesto, favorecida pela abundncia sazonal, com
qualidades particularmente importantes para suprir suas necessidades nutricionais. Os
compostos secundrios das plantas, em geral tidos como perigosos, podem acabar
estimulando o consumo e o prprio metabolismo das aves, porm estes mecanismos carecem
de esclarecimento (BARLEIN, 1996). Em cativeiro, uma dieta composta de rao de frango
com 16% de protena, frutos, folhosas, rao canina e casca de ostra foi utilizada com sucesso
em mutuns (TODD et al., 1992).
Geralmente uma rao comercial de boa qualidade deve prover as necessidades
nutricionais bsicas de maior parte das aves Galliformes, porm deve ser suplementada com
5

vegetais folhosos e outros, grama, insetos e larvas e sementes podem ser fornecidas conforme
a necessidade para diferentes espcies ou grupos etrios (FOWLER e MILLER, 2003).
A ingesto de alimento em quantidade adequada no suficiente para garantir o
desenvolvimento plenamente saudvel. Dos 22 aminocidos normalmente presentes nos
tecidos animais, 10 so essenciais para aves: leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina,
triptofano, isoleucina, valina, arginina e histidina. H tambm aminocidos essenciais
condicionais, como a glicina, necessria em dietas pobres em metionina ou arginina. A
desnutrio o quadro patolgico em que os alimentos efetivamente absorvidos pelo
organismo animal esto em discordncia quantitativa ou qualitativa com suas necessidades, de
acordo com o estado metablico e a espcie considerada. Diferentes rgos e tecidos podem
apresentar anormalidades decorrentes de carncia especfica, dependendo das necessidades de
nutrientes do tecido em questo. A funo imune tambm altamente dependente de nutrio
adequada. Quadros de desnutrio crnica comumente cursam com susceptibilidade
aumentada a infeces. A resposta teraputica pode ser deprimida tanto pela reduo da
atividade imune como do metabolismo em geral, especialmente heptico, alm da reduo na
capacidade de regenerao dos tecidos submetidos ao aporte inadequado de nutrientes
(RITCHIE et al., 1994).
O controle da massa corporal em longo prazo feito por meio de uma protena
denominada leptina, produzida pelos adipcitos em quantidades proporcionais ao seu grau de
preenchimento. A ligao aos receptores no hipotlamo, crtex adrenal e clulas beta
pancreticas promove a inibio do consumo de alimento e aumenta o consumo de energia
pelo organismo (NELSON e COX, 2002).
As aves carnvoras possuem maior potencial e maior concentrao de enzimas
hepticas para a gliconeognese que as granvoras. Ao se comparar os efeitos de jejum com e
sem adrenalectomia em frangos e abutres, observou-se que o jejum produz aumento na
incorporao de C14 de alanina na glicose sangunea, maior gliconeognese em cortes
hepticos e aumento da concentrao das enzimas gliconeognicas: glicose-6-fosfatase,
fosfoenolpiruvato-carboquinase, alanina-aminotransferase e aspartato-aminotransferase. Em
abutres em jejum a incorporao do carbono marcado e a gliconeognese em cortes hepticos
foi reduzida e no houve alterao nas enzimas, sendo a diferena atribuda dieta pobre em
carboidratos. Nos animais adrenalectomizados houve baixa sntese de glicose, reduzida
gliconeognese e atividade da glicose-6-fosfatase e aspartato aminotransferase apenas,
confirmando o papel da adrenal no controle da gliconeognese (VEIGA et al., 1978).
6

O metabolismo da glicose nas aves regulado pela insulina e pelo glucagon, este com
grande importncia nas granvoras, que apresentam abundncia de clulas alfa no pncreas e
uma menor proporo insulina:glucagon em relao aos mamferos e aves carnvoras
(LUMEIJ, 1997). Em um experimento incluindo jejum alimentar em pombos, por at quatro
dias no houve hipoglicemia, em vez disso uma hiperglicemia foi observada aps trs dias.
Constituintes que tiveram elevaes marcantes ps-prandialmente foram o cido rico e
cidos biliares. Foi encontrado um ritmo circadiano na glicemia de pombos, com valores
mximos no incio da fase luminosa (LUMEIJ, 1987).

1.4 EXAMES LABORATORIAIS EM AVES


A medicina de aves uma especialidade veterinria com demanda crescente, com o
desenvolvimento de tcnicas para abordar os pacientes individualmente, em contraste com o
diagnstico necroscpico realizado na avicultura comercial que suficiente para avaliar o
estado de sade do plantel. O interesse na conservao e os estudos realizados com aves
selvagens, incluindo as doentes ou feridas destinadas reabilitao, a importncia da malria
aviria causando perdas catastrficas em populaes selvagens de ilhas remotas e o papel dos
estudos em frangos para definir o funcionamento do sistema imune, com os linfcitos B so
fatos histricos que ilustram a relevncia desta rea de estudo (ZINKL, 1986). Os sinais
clnicos em aves so bastante inespecficos e o exame fsico fornece informao limitada. O
volume de sangue necessrio e o pouco conhecimento de hematologia e bioqumica j foram
obstculos, solucionados pela introduo de micro-mtodos. Atualmente os exames de sangue
constituem ferramenta indispensvel na medicina de aves (LUMEIJ, 1997).
H poucas publicaes sobre a hematologia de cracdeos. importante salientar que o
anticoagulante indicado para este grupo a heparina, pois com EDTA ocorre hemlise da
amostra (TODD et al., 1992). Quando se utiliza heparina, fundamental que os esfregaos
sanguneos sejam confeccionados no momento da colheita, para evitar alteraes na
morfologia das clulas (KRAFT, 1998; ZINKL, 1986).
As amostras de soro de aves so sujeitas a sofrer eventual geleificao relacionada
coagulao, impedindo sua utilizao para os testes. Para evitar este problema, sugere-se o
uso de tubos de coleta a vcuo preparados com heparina de ltio (HARR, 2002), produzindo
amostras de plasma. A heparina sdica pode invalidar alguns testes.
7

1.4.1 Hematologia
A hematologia diz respeito aos elementos celulares e suas alteraes e inclui a
avaliao quantitativa e qualitativa da srie vermelha e da srie branca. Em aves, todos os
elementos figurados so nucleados, o que inviabiliza a contagem automatizada pelo mtodo
de impedncia, utilizado em larga escala para mamferos (FUDGE, 1997, 2000). O mtodo de
NATT e HERRICK (1952) ainda bastante utilizado para contagem manual em aves. Um
mtodo de contagem independente de anticoagulantes a estimativa indireta baseada no
esfregao sanguneo. Uma vantagem das lminas a estabilidade da informao, permitindo
arquivar e comparar a incidncia e distribuio de leuccitos, potencialmente influenciada
pelo observador ou mtodo de diferenciao (RUSSO et al., 1986). Maior parte do
conhecimento foi originado no frango (Gallus gallus domesticus), originando generalidades
muito relevantes, porm pode ser esperada variao moderada a marcante em relao s
outras espcies, incluindo a morfologia e distribuio dos tipos celulares (ZINLK, 1986). O
mais importante que os exames sejam todos conduzidos sob uma metodologia padronizada,
permitindo comparaes entre os indivduos e ao longo dos intervalos entre coletas.
O hemograma em aves inclui a contagem total de eritrcitos e de leuccitos em
hemocitmetro de Neubauer, determinao do hematcrito pela tcnica do microhematcrito
e dosagem da concentrao de hemoglobina. A contagem diferencial de leuccitos realizada
em esfregaos sangneos corados com corante hematolgico de Romanowsky, Wright ou
Wright Leishman (ZINKL, 1986). O uso de um tampo em pH 5 na terceira fase da colorao
de Wright pode melhorar a visualizao (LEONARD, 1982). Na contagem devem ser
diferenciados os heterfilos, linfcitos, eosinfilos, moncitos e basfilos. No esfregao
podem ser observados hemoparasitos intra-eritrocitrios ou intra-leucocitrios ou
microfilrias, alm de alteraes txicas nos leuccitos e alteraes eritrocitrias relacionadas
anemia (presena de eritrcitos jovens e policromatofilia). Parasitas, como microfilrias e
tripanossomos so melhor observados nas bordas, em 40x (FUDGE, 2000). Os ndices
hematimtricos VGM (volume globular mdio) e CHGM (concentrao hemoglobina
globular mdia) so obtidos pelas frmulas de WINTROBE (1932).
O hemograma em aves inclui a contagem total de eritrcitos no hematocitmetro de
Neubauer, a determinao do hematcrito e a dosagem da concentrao de hemoglobina
(ZINKL, 1986). As principais alteraes esto relacionadas reduo da massa eritrocitria
ou concentrao de hemoglobina. Vrios esquemas so utilizados para classificar as anemias,
levando em conta as alteraes morfolgicas e quantitativas, e conduzindo o diagnstico da
8

origem, atravs de ndices eritrocitrios como volume globular mdio (VGM) e concentrao
de hemoglobina globular mdia (CHGM).
A anemia microctica hipocrmica caracterizada pela reduo de CHGM e VGM,
aumento da policromasia e pode haver aumento na anisocitose. Geralmente a origem a
deficincia de ferro, as causas subliminares podem ser deficincia nutricional, hemorragia
crnica, venopuno repetida ou parasitas hematfagos (FUDGE, 2000). A aflatoxicose em
frangos tambm pode causar anemia microctica hipocrmica (OLUWAFEMI e TAIWO,
2004). Clinicamente, as anemias podem ser consideradas regenerativas, quando h resposta da
medula ssea perda de sangue com a liberao de formas imaturas; ou arregenerativas, com
reduo da anisocitose, relacionada depresso hematopoiese relacionada a infeces,
neoplasias, caquexia e intoxicaes, sendo o tipo mais comum em aves. Anemias hemolticas,
especialmente as auto-imunes parecem ser raras em aves, entre as causas de hemlise citam-
se as toxicoses por chumbo e petrleo (FUDGE, 1997).
Na contagem diferencial realizada no leucograma, ao exame do esfregao sanguneo,
devem ser diferenciados os heterfilos, linfcitos, eosinfilos, moncitos e basfilos. Os
trombcitos geralmente so avaliados antes desta contagem. Estas pequenas clulas ovais,
nucleadas, podem apresentar-se ou no aderidas entre si. Em sua morfologia deve-se observar
que a vacuolizao ou aumento do citoplasma caracterizam reatividade. Os trombcitos
podem ser recrutados para atividade fagoctica de defesa e acredita-se que estas alteraes
estejam associadas a esta funo. Os trombcitos, apesar de serem menores e se corarem
menos intensamente, podem ser confundidos com pequenos linfcitos e reticulcitos
(eritrcitos imaturos, arredondados) (FUDGE, 2000). Os heterfilos so considerados
equivalentes aos neutrfilos dos mamferos, porm sendo citoquimicamente diferentes,
tambm se coram diversamente (TOPP e CARLSON, 1972). Os heterfilos so os
granulcitos mais abundantes, enquanto os eosinfilos tendem a ser normalmente incomuns
em muitas espcies. (ZINKL, 1986). As garas, rapinantes e aves aquticas so notveis
excees (FUDGE, 2000).
Altas contagens de basfilos podem ser resultantes da contagem errnea de heterfilos
txicos. Esfregaos de baixa qualidade tendem a destruir principalmente granulcitos,
resultando em contagens falsamente baixas e distorcer a imagem das clulas mononucleares,
dificultando a diferenciao entre moncitos e linfcitos. Algumas espcies de aves tendem a
ser normalmente linfocticas, com mais de 50% de linfcitos, como canrios e papagaios
Amazona spp. (FUDGE, 2000).
9

A leucocitose ocorre primariamente pelo aumento no nmero circulante de heterfilos,


relacionados inflamao ou estresse. Eles diferem citoquimicamente dos neutrfilos dos
mamferos por no possurem peroxidase nem fosfatase, porm suas propriedades fagocticas
so semelhantes e apresentam grnulos com enzimas lisossomais bactericidas (TOPP e
CARLSON, 1972).
A heterofilia a primeira alterao hematolgica durante a resposta inflamatria em
aves. Os bastonetes so incomuns e esto relacionados septicemia bacteriana, clamidiose
aguda grave, tuberculose e infeco fngica sistmica. O mesomielcito, caracterizado por
um ncleo excntrico indentado, mais imaturo, surge no hemograma em infeces que
ameaam a vida. Estas formas imaturas aparecem nos estgios iniciais da infeco, evoluindo
para uma heterofilia madura. Um desvio esquerda degenerativo, com maioria de formas
imaturas, aponta para mau prognstico (FUDGE, 2000).
A heterofilia tambm pode ser induzida pela liberao de hormnios adrenais
endgenos, assim como pela administrao de corticosterides por via oral ou injetvel. O
estresse fisiolgico, incluindo fome, frio, calor, dor, transporte e anestesia, causa heterofilia,
assim como outros eventos que induzam atividade adrenal como conflito entre os animais,
mudana de ambiente e conteno fsica. Estudos controlados em frangos sugerem que a
proporo entre heterfilos e linfcitos pode ser uma medida de estresse fisiolgico ainda
mais confivel que a corticosterona (LANDERS et al., 2007). O estresse por frio aumenta esta
proporo inicialmente, mas a proporo se inverte aps vrias horas. A restrio alimentar
resulta numa elevao gradual. O estresse severo agudo pode levar a uma breve heteropenia
seguida por heterofilia dentro de algumas horas (FUDGE, 2000).
Elevaes na contagem de linfcitos esto relacionadas estimulao imunitria,
incluindo viroses, porm hemogramas antemortem destes quadros apresentam padro
inconsistente, com heterofilia ou linfocitose. Esta variabilidade pode resultar de infeces
concomitantes (bacteriana, fngica, clamidiose), com a heterofilia representando a resposta a
outro agente. Linfcitos reativos podem ser vistos em viroses fatais, mas tambm em
pacientes que se recuperam ou clinicamente normais. Causas no-virais no esto bem
documentadas em aves (FUDGE, 2000).
Por outro lado, a reduo na contagem de linfcitos pode ocorrer em conjuno com
heterofilia por estresse, causada pela liberao de corticosterides endgenos (conteno,
transporte, fome, medo e excitao) (LANDERS et al., 2007). Algumas doenas virais,
especialmente causando danos bursa de Fabricius, podem contribuir para esta alterao.
10

Nos moncitos, os valores de referncia demonstram uma variabilidade considervel.


A possvel confuso com linfcitos leva a recomendar que cada laboratrio estabelea seus
critrios padronizados de identificao e valores de referncia. Mtodos de pesquisa com
corantes especiais podem auxiliar na diferenciao, assim como anlise de sangue citratado
em citometria de fluxo a laser, que aponta para contagens de moncitos mais altas que as de
microscopia, tanto em aves como em humanos, por exemplo. Uma possvel explicao para a
variao a tendncia deste tipo celular de se concentrar nas margens do esfregao. Elevaes
so causadas por inflamao e em menor grau resposta ao estresse, e ocorre quando aumenta
a demanda tecidual por macrfagos, sendo intensa em infeces como aspergilose,
tuberculose e clamidiose, ou em inflamaes granulomatosas (bacterianas ou fngicas) ou
histiocticas crnicas (dermatite bacteriana crnica) (FUDGE, 2000).
Os eosinfilos possuem grnulos de colorao varivel, mesmo em espcies prximas.
A variao se deve a diferenas na composio e morfologia dos grnulos e permite a
separao em trs grupos: 1) patos, gansos, cisnes; 2) bigus, garas, gaivotas; 3) pingim,
galo, pombo, papagaio (FUDGE, 2000). A estimulao antignica massiva pela injeo
intraperitoneal de soro eqino em galinhas produziu eosinofilia marcante (MAXWELL,
1980). No entanto, no parece existir relao direta com parasitismo, nem tampouco reaes
anafilticas. Existe uma tendncia elevao em aves parasitadas, mas uma alterao
inconsistente, tambm surgindo em pacientes que esto se recuperando de traumas teciduais,
incluindo automutilao, acidentes de vo, ataque de predadores, cirurgias (FUDGE, 2000).
Os valores de referncia para basfilos so em geral mais altos em aves que em
mamferos, sendo maiores em neonatos. No frango, existem dois basfilos para cada
eosinfilo (FUDGE, 2000). O basfilo na circulao e o mastcito tecidual esto classificados
como um nico tipo celular em aves, mas possuem diferenas ultra-estruturais, citoqumicas e
funcionais. Existem dois tipos citoqumicos de grnulos, um maior, basoflico, e um menor,
mais denso, sendo ambos bastante hidrossolveis; a fixao com metanol contribui para
danificar os grnulos. A desgranulao dos basfilos de aves no ocorre normalmente na
circulao, portanto consiste em artefato. Dentre as substncias presentes citam-se heparina,
histamina, quininas, substncia de reao lenta da anafilaxia e prostaglandinas. O ncleo
geralmente condensado e excntrico, ocasionalmente bilobado, o citoplasma incolor exceto
quando h dissoluo artefactual dos grnulos (MAXWELL e ROBERTSON, 1995).
Os basfilos tambm parecem participar da reao inflamatria inicial, sendo descritos
nos tecidos em reao a diferentes agentes qumicos e biolgicos. Eles parecem desempenhar
11

dupla funo: fagocitose e desgranulao de substncias farmacologicamente ativas.


Endotoxinas bacterianas exercem efeito quimiotxico sobre os basfilos, sem aparentemente
elevar os basfilos circulantes, assim como cargas parasitrias parecem no afetar as
contagens. Uma basofilia transitria comum em aves dentro de dois dia aps trauma
(automutilao, contuso, cirurgia, injees). Infeces respiratrias podem acompanhar
basofilia, especialmente notvel em psitacdeos com clamidiose ativa, porm menos
consistentemente com aerossaculite por caros (Sternostoma spp.) (FUDGE, 2000).

1.4.2 Bioqumica sangunea


A bioqumica sangunea uma ferramenta importantssima para avaliar o estado
fisiolgico de aves, incluindo aquelas expostas a diferentes efeitos ambientais relacionados
nutrio e oferta de alimento ou intoxicao e poluentes, como tem sido apontado em diversos
estudos (SCHMIDT et al., 2007; ARTACHO et al., 2007; NESKOVIC et al., 1998; WIK et
al., 1998; BOWERMANN et al., 2000; BAILEY et al. 1998, 1999). Conhecimentos bsicos
da fisiologia e anatomia das aves so importantes para selecionar os testes mais adequados e
interpretar corretamente os resultados. As diferenas em relao aos mamferos incluem o
perfil enzimtico das clulas nos diversos rgos, mecanismos de osmorregulao e
metablitos (HARR, 2002). Os testes so frequentemente agrupados de acordo com a funo
ou rgo que so capazes de avaliar, por exemplo, renal, heptica, muscular etc. A bioqumica
inclui testes para alguns metablitos, como cidos biliares, cido rico, amnia, enzimas
especficas e outras protenas. Os principais fatores que afetam as concentraes das protenas
totais nas aves so a idade, sazonalidade, condies de manejo e doenas (LUMEIJ, 1997). As
imunoglobulinas produzidas por linfcitos B e plasmcitos representam um componente
significativo na concentrao das protenas plasmticas totais (CAMPBELL, 2004). O teste
do biureto o mais recomendado para protenas totais, pois pode haver baixa correlao da
anlise refratomtrica em aves (LUMEIJ, 1997).
Para o estudo da funo renal importante destacar as diferenas anatomo-fisiolgicas
das aves que, ao contrrio dos mamferos, no possuem crtex, medula e pelve renal
macroscopicamente distintos. O rim das aves composto de dezenas a centenas de milhares
de lbulos microscpicos, consistindo em unidades funcionais compostas por crtex e cone
medular. Existem dois tipos de nefrons: um deles, muito semelhante ao dos mamferos (NM),
que tem a capacidade de gerar o gradiente osmtico no cone medular e o outro, denominado
reptiliano (NR), que se encontra totalmente na crtex do lbulo e no possui ala de Henle.
12

Os ductos coletores de ambos passam pelo cone medular e se juntam para formar um ramo do
ureter, que desemboca na cloaca. Numa ave hidratada, os ductos coletores so impermeveis
gua e produzida urina hipotnica (WIDEMAN, 1988). O rim irrigado pela artria renal,
cujo fluxo atravessa os glomrulos antes de atingir o seio cortical peritubular, e pelo sistema
porta renal, que traz sangue das pernas clon e medula espinhal, diretamente ao seio cortical
(portanto no filtrado pelo rim). O rim das aves elimina produtos nitrogenados e auxilia na
homeostase hidro-eletroltica do plasma, sendo o cido rico o principal produto, sintetizado
no fgado e em menor grau no rim a partir do metabolismo das purinas (geradas pelo
metabolismo do aspartato, glutamina e glicina) (STURKIE, 1986).
Do ponto de vista hormonal, as aves respondem ao estresse hdrico de forma similar
aos mamferos. No entanto, os mamferos procuram manter a taxa de filtrao glomerular
(TFG) constante, pois a filtrao necessria para eliminar os produtos nitrogenados. As aves
eliminam estes produtos por secreo, portanto a capacidade de eliminar o cido rico
fisiologicamente no comprometida pela diminuio da TFG. A determinao da TFG em
24h tambm oferece dificuldades prticas, envolvendo anestesia e canulao dos ureteres para
colheita de urina inalterada, inviabilizando o procedimento. Outra diferena que as aves
podem aumentar a osmolalidade do plasma em resposta privao hdrica, recuperando mais
gua a partir da filtrao glomerular nos NM. Alm disso, a urina pode refluir da cloaca para
o reto, possibilitando reabsoro de gua e sais (GOLDSTEIN e SKADHAUGE, 2000).
A creatinina, muito til para avaliar funo renal em mamferos, possui concentraes
plasmticas bastante baixas nas aves e diferentes nveis no demonstram correlao com
disfuno renal. O mesmo ocorre com a uria, porm aumentos de at 15 vezes foram
demonstrados em pombos privados de gua por quatro dias, portanto determinaes
consecutivas possuem maior utilidade que as isoladas. A ocorrncia de um efeito ps-prandial
significativo leva indicao de jejum de 24 horas para avaliao de uria ou cido rico,
especialmente em aves carnvoras (LUMEIJ, 1997). Estudos mais aprofundados podem
apontar como estes ou outros parmetros podem auxiliar na avaliao da funo renal de aves.
Em pintos experimentalmente alimentados com uma dieta essencialmente protica,
observou-se inicialmente uma significativa hipertrofia renal, e aumento na protena renal,
cido rico e da xantina-desidrogenase (XDH). Houve hipertrofia e aumento no cido rico
no tecido heptico, com aumentos de quatro vezes na XDH. Estas alteraes foram
transitrias e no refletiram na umidade dos tecidos. Posteriormente houve aumento da taxa
13

de eliminao de cido rico, apontando para uma adaptao tubular, sendo observada maior
eliminao do potssio pela urina (EVANS et al., 1971).
Em aves severamente desidratadas ou em choque, a tenso na artria renal se reduz e o
fluxo urinrio pode se reduzir at que a secreo de uratos se torne insuficiente e os nveis
plasmticos de cido rico podem aumentar (azotemia pr-renal) (LUMEIJ, 1997). A
urolitase uma complicao comum nestes casos, e tambm pode se originar no
desequilbrio de clcio e fsforo (10:1) e as concrees podem obstruir os ureteres (FUDGE,
2000). A hipovitaminose A pode causar metaplasia escamosa do epitlio uretral, da mesma
forma elevando os nveis de cido rico, que se deposita nos tecidos originando a gota rica.
O excesso de vitamina D causa mineralizao metasttica dos tecidos, especialmente do rim,
causando poliria e polidipsia, com inabilidade de concentrar urina, podendo ainda evoluir
para gota rica, de prognstico reservado (LUMEIJ, 1997). No entanto, nveis elevados de
cido rico esto relacionados a um maior ganho de peso e reduo do estresse oxidativo em
aves de corte. A adio de frutose dieta, especialmente a 10% de matria seca, promove os
melhores efeitos neste sentido, porm a taxa de converso da dieta permaneceu inalterada.
Com nveis de 10 a 15% de frutose, houve aumento significativo nos moncitos e reduo de
polimorfonucleares (SIMOYI e KLANDORF, 2003).
Em relao ao sistema digestrio, leses ao longo do tubo digestrio (tecidos moles e
msculo liso) causam elevao inespecfica, proporcional gravidade da leso, nas enzimas
creatinafosfoquinase (CPK), lactatodesidrogenase (LDH) e aspartato-aminotransferase (AST)
(FUDGE, 2000).
As disfunes pancreticas podem ser agrupadas em duas categorias: 1) pancreatite ou
necrose pancretica aguda e 2) pancreatite crnica, resultando em fibrose e insuficincia
excrina. Mais de 99% do pncreas funciona produzindo enzimas digestivas. A correlao
entre bipsia pancretica e a concentrao das enzimas amilase e lipase no sangue permitem
avaliar clinicamente este rgo. (LUMEIJ, 1997). Nveis sricos de amilase superiores a 1500
unidades internacionais por litro (UI/L) sugerem leso pancretica e a bipsia indicada para
obter informaes especficas (DONELEY, 2001). Algumas causas de doena pancretica em
aves exticas incluem intoxicao por zinco, causando elevao da amilase relacionada a
nveis plasmticos do metal de cinco a dez vezes superiores ao normal Entre as doenas
virais de aves domsticas, citam-se adenovrus, bronquite infecciosa e influenza. Nos
psitacdeos, o herpesvrus especfico (possvel causa de adenocarcinoma) e o paramixovrus
III podem causar pancreatite (FUDGE, 2000). Outras causas de pancreatite incluem
14

clamidiose (psitacdeos) e processos inflamatrios que se estendem a partir de outros rgos,


como peritonite por gema de ovo postura intra-abdominal (DONELEY, 2001).
A deteco qumica de leso heptica ativa possvel quando o padro correto de
enzimas plasmticas est elevado, representando extravasamento e dano hepatocelular,
porm, sem indicar a causa ou o grau de comprometimento da funo heptica. A CPK
abundante no msculo esqueltico e presente no msculo cardaco e liso, porm ausente no
fgado. A alanina-aminotransferase (ALT) est presente em diversos tecidos, a fosfatase
alcalina (FA) no est presente no fgado em quantidades relevantes. A LDH est presente em
diversos tecidos e a gama-glutamil transferase (GGT) tem atividade muito baixa no fgado das
aves. AST est presente em todos os msculos e no tecido heptico. As principais alteraes
histolgicas encontradas em aves ornamentais incluem infeco bacteriana ou por clamdia.
Lipidose e vacuolizao so as principais alteraes, mas pode ser difcil detect-las ou
diferenci-las de outros distrbios atravs de testes clnicos (FUDGE, 2000). Outra causa
clssica de leso hepatobiliar a aflatoxicose, causando leso heptica com reduo
significativa nas protenas totais, reduo da AST e aumento da GGT no soro. A
administrao de um extrato vegetal (Monodora myristica) aps a intoxicao experimental
com at 2g de aflatoxina B1, foi eficaz em reverter efeitos txicos e restaurar os nveis
normais de GGT, mas no de AST (OLUWAFEMI e TAIWO, 2004).
Uratos esverdeados ou amarelados podem estar presentes na urina de aves
hepatopatas. O principal pigmento biliar em aves a biliverdina, a bilirrubina normalmente
escassa e, portanto no tem interesse clnico. No entanto, a biliverdina no detectvel no
plasma de galinhas normais porque a captao heptica rpida (LUMEIJ, 1997). O teste de
cidos biliares plasmticos fornece a melhor medida de funo heptica, em humanos,
animais domsticos e aves, porque envolve os principais mecanismos hepticos (extrao,
conjugao e secreo) (FUDGE, 2000). Elevaes ps-prandiais foram detectadas na maior
parte das espcies de aves estudadas, portanto faz sentido realizar amostragem pr e ps-
prandial, tambm usado em ces e gatos, o mais recomendado (HARR, 2002). No entanto,
os testes isolados de cidos biliares fornecem informao til porque no existe uma grande
coincidncia dos nveis em aves normais com doentes, independente da alimentao, assim
como da presena ou ausncia de vescula biliar. Alm de detectar a funo deprimida em
pacientes normais ou doentes, o grau de elevao pode apontar para condio clnica e
prognstico. Elevaes moderadas a severas esto associadas com perda importante de tecido
e funo heptica incluindo hiperplasia de ductos biliares e fibrose heptica severa, com
15

prognstico reservado. Elevaes variveis podem estar associadas com fibrose, lipidose,
vacuolizao, colangite, proliferao de ductos biliares, clamidiose e micobacteriose. A
hemocromatose (doena de acmulo de ferro) resulta em leses difusas e dano celular, sem
elevaes consistentes em pssaros ou psitacdeos. Este teste pode fornecer avaliao
prognstica mais precisa e especfica que qualquer das enzimas plasmticas (FUDGE, 2000).

1.4.3 Causas de variao dos parmetros sanguneos em aves


Os valores sangneos podem ser influenciados pelo estado nutricional, sexo, idade,
habitat, estao do ano, estado reprodutivo, trauma, criao e estresse ambiental
(CAMPBELL e THRALL, 2004). A massa eritrocitria influenciada pela idade, sexo,
estado reprodutivo e fatores ambientais (HERBERT et al., 1989).
Os linfcitos so os leuccitos mais numerosos em frangos e perus domsticos
(BOUNOUS e STEADMAN, 2000), porm em faises-coleiras a contagens de heterfilos e
linfcitos foram bastante prximas. A influncia da idade e sexo sobre valores bioqumicos e
hematolgicos em faiso-coleira (Phasianus colchicus) foi avaliada em animais de 5 ou 52
semanas, observando-se as seguintes diferenas significativas: machos adultos tiveram
hematcrito significativamente maior e os animais jovens, menor. As fmeas adultas tiveram
maiores valores de basfilos, taxa heterfilo/linfcito e protena plasmtica. Os adultos
tiveram maiores valores de leuccitos totais, heterfilos, eosinfilos e moncitos (SCHMIDT
et al., 2007).
Em outro trabalho, CELDRN et al. (1993) coletaram sangue de aves aquticas
(garas, colhereiros, bis e frangos-dgua) e observaram algumas diferenas estatsticas entre
os grupos etrios e similaridades com outras espcies de aves correlatas. Os dados das equipes
coordenadas por FOURIE (1983) e LAVIN (1999) corroboram no sentido de as correlaes
serem mais freqentes que as discrepncias entre as espcies de aves.
No que se refere aos parmetros de bioqumica sangunea, a atividade da enzima nos
diferentes tecidos nem sempre est relacionada aos nveis plasmticos. Por exemplo, apesar
de a ALT ser altamente ativa no tecido heptico, elevaes plasmticas so incomuns em
doena hepatocelular bem documentada. Os produtos de leso e extravasamento celular renais
geralmente so eliminados pela urina (LUMEIJ, 1997).
A durao do dano ao rgo e a meia-vida de eliminao das enzimas afetam a
durao da elevao mensurvel. Artefatos como hemlise pode elevar sensivelmente a LDH,
mas afetam pouco a AST, ALT e CPK. Leses musculares (conteno, trauma, injeo)
16

geralmente elevam CPK e afetam pouco LDH, AST e ALT. Desta forma o perfil enzimtico
permite diferenciar elevaes devidas leso muscular, heptica ou artefatos (FUDGE, 2000).
A glutamato desidrogenase (GDH) a enzima mais especfica para leso heptica em
aves, mas sua sensibilidade baixa, pois est ligada mitocndria. O extravasamento
citoplasmtico no suficiente para elevar a GDH, sendo necessrio um dano mais severo,
como necrose extensa. A AST, alm de no ser especfica do fgado, pode estar normal apesar
de comprometimento da funo heptica. A GGT altamente especfica para o fgado de
aves, mas tambm apresenta baixa sensibilidade no sendo til para a avaliao heptica de
rotina (LUMEIJ, 1997).
Uma elevao enzimtica em particular pode apontar para um dano ou uma leso
ativa, mas estas elevaes no descrevem a funo heptica assim como um perfil normal no
garante que o fgado esteja funcionando normalmente. Fibrose ou lipidose heptica severas
podem originar pequeno extravasamento, originando resultados normais ou mesmo reduzidos
nos testes (FUDGE, 2000).
A intoxicao experimental sub-aguda de frangos por cipermetrina na dieta (150-600
ppm por 28 dias) causou elevao da AST e reduo da FA e reduo na contagem de
plaquetas, sem alterar colinesterase srica, ALT ou afetar outros parmetros testados,
incluindo ganho de peso, consumo de alimento, peso de rgos ou acmulo nos tecidos
(NESKOVIC et al., 1998).

1.4.4 Interpretao clnica de perfis enzimticos combinados


De acordo com FUDGE (2000), perfis enzimticos sricos combinados podem ser
interpretados como segue:
1. Elevaes moderadas de AST, LDH e CPK, na qual a AST persiste por mais tempo,
apontam geralmente para leso muscular ou cardaca.
2. Elevao de AST com LDH e CPK normais sugere leso muscular h mais de 2-4
dias ou provvel leso heptica. AST normal, com alta LDH e CPK moderada
sugerem leso muscular ou cardaca h menos de 24h. Repetindo amostra aps mais
24-48h, LDH poder estar normal, CPK e AST levemente aumentados.
3. LDH elevado, AST, CPK normais: impossvel definir origem, pode ser amostra
hemolisada.
4. AST e LDH elevados, CPK normal: provvel leso hepatocelular ativa.
17

5. AST, LDH e CPK normais: no h evidencia de leso muscular ou heptica atuais,


porem no possvel avaliar a funo heptica, apenas dizer que no h progresso da leso.

1.5 HEMATOLOGIA, BIOQUMICA E NUTRIO EM ESPCIES DIVERSAS


Existe relativamente pouco conhecimento derivado de estudos controlados envolvendo
hematologia e bioqumica sangunea com aves mantidas em condies ambientais
padronizadas, mesmo em espcies domsticas. Em pinguins-de-Galpagos (Sphenicus
mendiculus) de vida livre, constatou-se que as fmeas possuem quantidade significativamente
maior de eosinfilos, porm no houve diferena nos parmetros bioqumicos entre os sexos
(TRAVIS et al., 2006). J em emas-patagnicas (Pterocnemia pennata), as maiores diferenas
observadas foram em todos os parmetros eritrocitrios e o cobre, com valores
significativamente menores nos neonatos. No foram detectadas diferenas na bioqumica
srica entre os sexos, dentre os 124 neonatos, juvenis e adultos estudados (REISSIG et al.,
2002). Os valores bioqumicos de cido rico, gama-glutamiltransferase, protenas, albumina
e globulinas foram determinados em filhotes de faiso-coleira de cinco semanas, no havendo
diferena entre os sexos (SCHMIDT et al., 2007).
Em um estudo relacionado muda induzida em galinhas poedeiras, o grupo de
controle continuou a receber rao de postura e no entrou em muda, enquanto os outros dois
grupos foram alimentados com alfafa moda ou submetidos a jejum durante nove dias. Foram
realizados testes de glicose, clcio, magnsio, cido rico, protena e colesterol sricos e
corpos cetnicos, alm de leucograma. No houve diferena significativa em glicose e
protena entre os grupos ou dias, porm a concentrao de corpos cetnicos e colesterol foi
significativamente maior nos grupos em jejum e alimentados com alfafa, em relao ao
controle. Atribui-se este aumento do colesterol reabsoro de folculos no ovulados nos
animais em muda (LANDERS et al., 2007). Com efeito, a composio lipdica dos ovos de
diversas espcies de aves, incluindo Columbiformes, Craciformes, Galliformes,
Passeriformes, Anseriformes e Psitaciformes muito semelhante, possuindo de 61 - 72% de
triacilgliceris (dos quais ~80% fosfatidilcolina e ~15% fosfatidiletanolamina), com os cido
graxos variando de acordo com diferenas dietticas (CHRISTIE e MOORE, 1972). Quanto
ao clcio srico, observou-se reduo de 3 a 5 vezes ao oitavo dia, sem diferena entre os
grupos em muda, em relao s alimentadas com rao. A partir do quarto dia, houve
aumento dos heterfilos com reduo dos linfcitos em todos os grupos e os alimentados com
18

alfafa tiveram resposta celular intermediria. O autor ainda cita outras pesquisas com aumento
da taxa heterfilo: linfcito com estresse de jejum em poedeiras. (LANDERS et al., 2007).
A variabilidade apresentada pelo estudo de espcies selvagens aumenta a importncia
de uma anlise completa na avaliao da sade, apesar de esforos para aumentar a
reprodutibilidade dos dados, buscando controlar efeitos ambientais e individuais como idade,
sexo etc. (BOUNOUS et al., 2000).
Em um estudo de avaliao de duas dietas diferentes por parmetros sanguneos em
periquitos-australianos alimentados durante um ano com uma mistura de sementes com 1% de
suplemento vitamnico-mineral ou uma rao comercial de boa qualidade, mais cenouras, foi
realizado exame hematolgico e bioqumico trimestrais, incluindo os seguintes parmetros:
colesterol, triglicerdeos, cido rico, clcio, fsforo, protena total, albumina, AST, LDH e
glicose, todos mensurados automaticamente. O grupo alimentado com sementes teve valores
significativamente maiores para glicose, albumina, triglicerdeos, AST e cido rico, porm
ambos dentro dos valores de referncia normais, sem diferenas nos demais parmetros.
Houve perda de peso e um bito durante a fase de transio da dieta para rao, por anorexia.
No grupo alimentado com sementes houve cinco bitos: um com gota visceral e renal, um
com linfossarcoma e trs fmeas distcicas. O nvel de clcio das sementes era de cerca de um
dcimo da rao, mas o clcio total no plasma no foi diferente entre os grupos. Uma maior
transformao de produtos nitrogenados poderia predispor gota. (FISCHER et al., 2006).
Uma disfuno renal poderia acabar elevando as concentraes plasmticas de cido rico,
mas somente quando a funo cai abaixo de 30% de sua capacidade (LUMEIJ, 1997). As
dietas possuam nveis semelhantes de protena, mas a rao fornecia mais energia
metabolizvel. Estes pesquisadores sugerem que estas aves podem se beneficiar de uma dieta
formulada, porm pode ser necessrio oferecer uma quantidade superior recomendada
durante o perodo de adaptao, alm de monitorar cuidadosamente o consumo de alimento e
a condio dos animais (FISCHER et al., 2006).
19

1.6 CONSIDERAES FINAIS


A hematologia e a bioqumica sangunea em aves ainda apresentam mais desafios que
em mamferos, em que grande parte dos avanos partiu da clnica mdica em seres humanos,
com a necessidade de desenvolver mtodos indiretos e no-invasivos confiveis, levando a
um pronto diagnstico ante mortem. Talvez parte do atraso se deva ao manejo historicamente
adotado nas aves domsticas, destinadas produo em lotes, nos quais o diagnstico clnico
realizado de forma satisfatria por amostragem ou mesmo post mortem.
A mudana desta abordagem, envolvendo a popularizao de aves de estimao e a
conscincia da necessidade de conservao da biodiversidade, associada questo do bem-
estar animal, acabou gerando a demanda para o diagnstico individual, no-invasivo,
favorecendo assim o desenvolvimento desta rea no que tange s aves. Grandes progressos
tm sido feitos no sentido de aperfeioar e adequar as tcnicas a estes pacientes, aprofundando
e disponibilizando o conhecimento, seja em favor da produo de alimento ou da conservao
de espcies ameaadas, com sua evidente aplicabilidade para fins diagnsticos e de pesquisa
cientfica.
20

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24

2 COMPARAO DE PARMETROS CLNICOS, HEMATOLGICOS E


BIOQUMICOS SRICOS DE CRACDEOS EM CATIVEIRO, EXPOSTOS DIETA
CONVENCIONAL DE ZOOLGICO E UMA RAO COMERCIAL EXTRUSADA
Cndido, Marcus Vincius1, Silva, Louise C.C.2, Alvarez, Joelma M.2, Locattelli-Dittrich,
Rosngela2, Saad, Flvia B. 3, Santin, Elizabeth2
1
Zo Pomerode - Fundao Hermann Weege Pomerode, SC
2
Departamento de Medicina Veterinria - UFPR Curitiba, PR
3
Departamento de Zootecnia - UFLA Lavras, MG

RESUMO

As aves neotropicais da famlia Cracidae esto entre as mais ameaadas do planeta,


sendo tradicionalmente procuradas como caa. A conservao destas espcies inclui medidas
ex-situ. A nutrio um aspecto fundamental para a adequada sobrevivncia e reproduo em
cativeiro. Neste estudo, 29 animais pertencentes a trs espcies (Penelope obscura, P.
superciliaris e Aburria jacutinga) foram mensalmente submetidos a exame fsico e colheita
de sangue, antes e depois da converso diettica a uma rao comercial extrusada balanceada.
A dieta extrusada proporcionou diferenas significativas em vrios dos 24 parmetros
testados, incluindo o aumento na concentrao hemoglobina em todas as espcies estudadas.
Observou-se aumento na contagem de eritrcitos, volume globular e massa corporal em P.
obscura, com a concomitante reduo no desvio-padro nestes parmetros apontando para um
ganho na uniformidade deste plantel quando submetido dieta extrusada. As globulinas e
lipase tambm foram significativamente reduzidas em P. obscura. Aps a converso diettica,
a contagem de leuccitos foi menor e a de eosinfilos foi maior nas trs espcies, porm estas
diferenas foram significativas apenas em P. superciliaris. A glicemia em A. jacutinga foi
diferente das demais, mas no houve diferena estatstica entre as dietas para este parmetro.
Foi encontrada elevao significativa na concentrao srica de cido rico nas trs espcies
com rao extrusada. Ao se agrupar os dados das trs espcies foi verificado tambm
aumento significativo nos nveis de fsforo srico.

Palavras-chaves: bioqumica srica, comparao de dietas, conservao ex-situ, Cracidae,


hematologia, nutrio.
25

ABSTRACT

The family of wild neotropical birds Cracidae is regarded as one of the most
threatened in the world. They have traditionally suffered extensive hunting so ex-situ efforts
for their conservation are recommended. Nutrition is a fundamental aspect of husbandry,
which influences survival and reproduction in captivity. In this study, a total of 29 animals
within three species (Penelope obscura, P. superciliaris and Aburria jacutinga) were
submitted to monthly physical examination and blood sampling, before and after dietary
conversion into a nutritionally balanced, adequately supplemented, extruded feed found in the
market. The change in the diet produced significant differences in many of the 24 parameters
tested, including an increase in hemoglobin concentration for all species. Increases in
erithrocyte count, packed cell volume and body weight were observed in P. obscura, with a
concomitant decrease in the standard deviation for such parameters showing improved
uniformity. Globulins and lipase were also significantly reduced in P. obscura. Although
leucocyte count was lowered and eosinophils were increased in all three species after the
dietary conversion, these changes were only significant in P. superciliaris. Blood glucose in
A. jacutinga was different from the other species but no statistical difference was found
between the two diets for this parameter. A significant elevation in uric acid levels was also
found with the commercial feed in all three species. A significant elevation in serum
phosphorus was evident when the data from the three species were merged for each treatment.

Keywords: conservation ex-situ, Cracidae, diet comparison, hematology, nutrition, serum


biochemistry.
26

2.1 INTRODUO
A conservao de espcies animais nativas um problema de crescente importncia,
tendo em vista a magnificao do impacto das atividades humanas sobre os ambientes
naturais. A sociedade de consumo demanda recursos crescentes, obtidos s expensas da
devastao de novas reasrais. Soma-se a isto o crescimento demogrfico desenfreado,
alimentado por antigos e recentes avanos tecnolgicos na produo de alimentos e na
medicina, entre outros. Alm do desbravamento de novos territrios, que afeta indistintamente
todas as espcies de um ecossistema, seja pela destruio de nichos ou eliminao de fontes
naturais de alimento, problemas potencializados pelo uso de defensivos agrcolas e outras
formas de poluio etc., a humanidade tambm vem prejudicando seletivamente determinados
animais nativos. Espcies de interesse cinegtico, ou seja, procuradas como caa, tm sofrido
impacto considervel mesmo em reas razoavelmente preservadas.
Dentre as aves nativas do Brasil, a Famlia Cracidae, composta por espcies de aves de
bom porte e carne bastante apreciada, foram animais muito perseguidos e maior parte das
espcies sofreu extino local. Esto classificadas como Vulnerveis, Ameaadas,
Criticamente Ameaadas ou Extintas na Natureza, de acordo com critrios do corpo tcnico
da Species Survival Comission da International Union for the Conservation of Nature and
Natural Resources (IUCN, 2006).
Tendo em vista os fatores socioculturais que perpetuam o hbito da caa e a perda de
habitats, os esforos de conservao in-situ (na natureza) tendem a ser insuficientes para a
manuteno destas espcies. Medidas de conservao ex-situ, como a reproduo em
cativeiro, so altamente indicadas em casos como o dos cracdeos (SO BERNARDO e
CLAY, 2006).
Um pr-requisito bsico para a manuteno e reproduo em cativeiro uma nutrio
adequada, aliada a outras medidas sanitrias e de condies de manejo que propiciem bem-
estar suficiente para que os animais se acasalem e reproduzam. As tcnicas de incubao
artificial e criao de filhotes so semelhantes s de Galliformes domsticos, sendo ampla e
facilmente empregadas (TODD et al., 1992). Entre os Cracdeos mais conhecidos no Brasil
esto os mutuns (Crax sp.), jacus (Penelope sp.) e jacutingas (Aburria sp.) (SICK, 1997).
Com o objetivo de melhorar a compreenso da resposta metablica e clnica de
cracdeos de cativeiro, foi desenvolvido este experimento, onde foram comparados
parmetros de hematologia e bioqumica srica em animais inicialmente mantidos com uma
27

dieta tradicionalmente oferecida em zoolgico base de rao comercial para frango, frutas
e vegetais e posteriormente convertidos a uma rao comercial extrusada especfica.

2.2 MATERIAL E MTODOS


As aves da famlia Cracidae utilizadas neste estudo eram parte do plantel do Zo
Pomerode Fundao Hermann Weege, localizado em Pomerode SC, incluindo 12
jacupembas (Penelope superciliaris), das quais cinco machos e sete fmeas; oito jacus
(Penelope obscura), um macho, sete fmeas; nove jacutingas (Aburria jacutinga), quatro
machos e cinco fmeas, totalizando 29 animais adultos e sub-adultos nascidos em cativeiro,
com seis meses a dois anos de idade no incio do experimento.
Os animais foram identificados individualmente por anilhas, permitindo
acompanhamento de cada animal separadamente. Eles foram mantidos em grupos de at seis
indivduos, em recintos com piso de areia ou cimento e com poleiros de madeira, onde
permaneceram, desde no mnimo um ms antes do incio at a concluso do experimento.
Foram realizados exames coproparasitolgicos prvios e ento mensais, pelo mtodo
de flutuao em soluo saturada de sacarose (SHEATHER, 1923). A anlise foi feita em
microscpio ptico com o preparado das tcnicas entre lmina e lamnula, para a contagem e
diferenciao de ovos de nematdeos e oocistos de protozorios. Foram usadas amostras
frescas provenientes de cada recinto, tendo sido obtidos resultados negativos em todos os
testes.
Quanto dieta, as aves vinham sendo tradicionalmente alimentadas com uma mistura
de raes comerciais de frango ou postura, adicionada de frutas (mamo, banana etc.),
vegetais verdes picados (espinafre, repolho, couve, acelga ou outras folhosas, cebolinha,
pimento etc.) e milho em gro, ou seja: cerca de 400g de frutas frescas, 400g de rao, 160g
de verde picado e 40g de gros de milho por kg (T1), perfazendo as informaes nutricionais
apresentadas na Tabela 1. Na metade do experimento, todos os animais foram convertidos a
uma rao comercial extrusada para faises e galiformes silvestres: FM15, Megazoo
produzida pela Vale Verde, de Belo Horizonte MG (T2) cujas informaes nutricionais
esto apresentados na Tabela 2. Foram obtidos dados fsicos e amostras sanguneas em duas
ocasies antes e em duas depois da converso diettica.
28

TABELA 1 INFORMAES NUTRICIONAIS DA DIETA TRADICIONAL (T1)


Composio qumica Como fornecido (por kg) Corrigido p/ umidade = 12%
Energia metabolizvel(calc.) - 2830 kcal/kg
Umidade 545,48g 12 (%)
Protena bruta 61,28g 11,86 (%)
Extrato etreo 21,68g 4,2 (%)
Matria fibrosa 22,84g 4,42 (%)
Matria mineral 28,87g 5,59 (%)
Extrativos no-nitrogenados 319,84g 61,92 (%)
Clcio 6,75g 1,31 (%)
Fsforo 2,95g 0,57 (%)
O exame bromatolgico foi realizado com duas fraes: rao + milho (umidade =10,5%) e frutas + folhosas
(umidade = 89,15%), por razes operacionais. Realizou-se correo da umidade para 12% visando facilitar a
comparao com o produto comercial. A energia metabolizvel foi calculada para digestibilidade estimada em
85%.

TABELA 2 INFORMAES NUTRICIONAIS DA RAO MEGAZOO FM15 (T2)


Composio qumica Quantidade
Energia Metabolizvel (Mn.) 2850 kcal
Umidade (Mx.) 12,0%
Protena bruta (Mn.) 15,0%
Extrato etreo (Mn.) 3,0%
Matria fibrosa (Mx.) 5,0%
Matria mineral (Mx.) 6,5%
cido Linolico (Mn.) 1,5%
Clcio (Mx.) 1,1%
Fsforo (Mn.) 0,70%
Enriquecimento por kg de produto: cido flico (`5,0mg), cido pantotnico (25,00 mg), colina (1.800,00 mg),
cobre (150,00 mg), cobalto (0,1 mg), ferro (150,00 mg), iodo (1,00 mg), mangans (150,00 mg), vitamina A
(10000,00 UI), cianocobalamina - B12 (50,00 mcg), vitamina D (1.875,00 UI), vitamina E (50,00 UI), vitamina
K (3 mg), zinco (120,00 mg), niacina (100,00 mg), biotina (0,50 mg), piridoxina B6 (8,50 mg), tiamina B1
(5,00 mg), riboflavina B2 (15,00 mg), selnio (0,40 mg).

A coleta de amostras e dados fsicos foi realizada a intervalos de 23, 36 e 35 dias,


respectivamente. Aps a segunda colheita de sangue, ou a partir do 24 dia, a dieta foi
progressivamente convertida para o alimento extrusado ao longo de uma semana.
Em cada uma das quatro coletas de dados e amostras, os animais foram pesados
individualmente e examinados fisicamente, quanto ao estado geral e nvel de excitao
relacionado ao estresse de conteno (aptico, calmo, agitado, muito agitado). A venopuno
foi realizada mediante conteno fsica manual dos animais, preferencialmente na veia jugular
direita, em duas seringas de 3mL e agulha 25x7, uma das quais heparinizada. Uma gota de
sangue foi utilizada no ato da coleta para esfregao sanguneo, para contagem diferencial de
leuccitos e pesquisa de hemoparasitas, sendo seca ao ar, identificada com caneta indelvel e
29

guardada para posterior colorao. Outra gota do sangue fresco foi empregada para
mensurao da concentrao de glicose sangunea utilizando-se o kit Accu-Check (Roche).
O sangue foi acondicionado em tubos identificados individualmente, 2mL para hemograma
(amostra heparinizada) e 3mL em tubo seco posteriormente centifugado por 10min a
3000rpm. O soro foi acondicionado em microtubo identificado e resfriado imediatamente.
Aps o transporte ao laboratrio em caixa de isopor resfriada (dentro de cerca de trs
horas), uma alquota foi utilizada para quantificao da creatinafosfoquinase prevenindo-se a
degradao enzimtica. O restante do soro foi congelado para a realizao dos exames
bioqumicos citados mais adiante. O sangue heparinizado tambm foi processado no dia da
colheita, no mesmo Laboratrio de Patologia Clnica do Hospital Veterinrio da Universidade
Federal do Paran, em anlises hematolgicas conduzidas de acordo com JAIN (1986). As
contagens totais de eritrcitos (RBC) e leuccitos (WBC) foram realizadas manualmente em
hematocitmetros de Neubauer com sangue diludo em azul de toluidina a 0,01%. A
concentrao de hemoglobina (HG) foi medida pelo mtodo da cianometemoglobina. A
centrifugao em micro-hematcrito a 2500 rpm por 5 minutos foi usada para determinar o
volume globular (VG); uma gota do plasma obtido neste tubo foi empregada para determinar
a protena plasmtica total (PPT) por refratometria. A contagem diferencial de leuccitos foi
realizada utilizando-se a colorao de Wright, contando 100 leuccitos. Simultaneamente,
foram contados os trombcitos (Trb) vistos no transecto microscpico. Os parmetros
bioqumicos: cido rico (AU), aspartato-aminotransferase (AST), gamaglutamiltransferase
(GGT), creatinafosfoquinase (CPK), amilase (Aml), lipase (Lip), protena srica (Ptn),
albumina (Alb), globulinas (Glb), clcio (Ca) e fsforo inorgnico (P) foram determinados
utilizando-se kits comerciais (In Vitro Diagnstica S/A, Barbacena, MG).
Para a anlise estatstica, os dados foram inicialmente submetidos a anlise de
varincia (ANOVA), permitindo avaliar a significncia das diferenas. Visando a comparao
entre as mdias segundo as espcies, as dietas e sua interao, foi aplicado o teste de Tukey
(Statistix. Verso 1.0. Analytical software, 1996. Cary, NC, Estados Unidos) sobre cada um
dos parmetros pesquisados: RBC, VG, HG, PPT, WBC, heterfilos (Het), linfcitos (Lnf)
eosinfilos (Eos), moncitos (Mono), basfilos (Bas) e trombcitos (Trb) e ainda os dados de
massa corporal ou peso vivo (PV), glicemia (Gli), AU, Ca, P, Ptn, Alb, Glb, e as enzimas
AST, CPK, GGT, amilase e lipase.
30

2.3 RESULTADOS E DISCUSSO


Nas tabelas a seguir apresentam-se as mdias e os respectivos desvios-padres de cada
um dos parmetros avaliados, de acordo com a espcie e dieta fornecida.

TABELA 3 VARIAES EM MASSA CORPORAL (PV), GLICEMIA, PROTENA PLASMTICA


TOTAL (PPT), VOLUME GLOBULAR (VG) E HEMOGLOBINA (HG) EM
CRACDEOS ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO
EXTRUSADA (T2)
Espcie Dieta PV (g) Glicemia (g/dL) PPT (%) VG (%) HG (g/dL)
P. superciliaris T1 1004,684,25 c 241,6734,08 b 4,030,87 48,414,37 a 15,602,09c
P. superciliaris T2 982,7181,56 c 22849,27 b 4,460,52 45,583,06 ab 24,371,75 ab
P. obscura T1 1303,4226,99 b 260,6342,05 b 4,141,27 40,006,63 c 12,891,76 d
P. obscura T2 1424,793,98 a 248,844,52 b 3,991,31 44,195,31 b 24,933,67 a
A. jacutinga T1 1311,4172,43 ab 339,0780,09 a 4,190,94 39,803,05 c 14,183,69 cd
A. jacutinga T2 1378,1142,22 ab 316,9160,63 a 4,311,45 39,193,56 c 22,482,68 b
Letras diferentes na mesma coluna indicam mdias significativamente diferentes (p<0,05).

Neste estudo, observou-se um aumento significativo da massa corporal ou peso vivo


(PV) em P. obscura aps a converso diettica, com um coeficiente de variao menor no
segundo tratamento (17,4 versus 6,6%), apontando para um aumento na uniformidade do
plantel nesta espcie. Quanto glicemia, a espcie A. jacutinga foi diferente das outras duas,
no tendo sido, porm, observadas diferenas entre as dietas. Os valores mdios de protena
plasmtica total (PPT) foram prximos entre espcies e dietas e no se observou significncia
estatstica para este parmetro.
O volume globular aumentou significativamente em P. obscura, porm permaneceu
prximo daquele citado na literatura para uma outra espcie de cracdeo (Aburria pipile), em
que o hematcrito foi de 41,7 5,5, em animais sadios provenientes de sete instituies
zoolgicas diferentes, de acordo com o compndio do International Species Information
System (ISIS) (TEARE,2002). Isto indica que as elevaes encontradas no se relacionam a
hemoconcentrao ou desidratao, mesmo porque apesar da dieta T2 possuir teor de umidade
reduzido em relao dieta tradicional (T1), a gua foi sempre fornecida ad libitum.
A concentrao de hemoglobina (HG) aumentou significativamente em todas as
espcies, especialmente P. obscura, com HG 93% maior com a rao extrusada (T2), ou
quase o dobro da encontrada em T1, com menor disperso em torno da mdia, sendo esta uma
das diferenas mais evidentes, verificadas neste estudo. bastante provvel que este aumento
seja benfico e esteja relacionado a uma melhor disponibilidade de ferro sob T2 do que a
fornecida pela dieta tradicional, porm isto no pde ser confirmado neste estudo pela
determinao dos nveis deste mineral nas diferentes dietas nem no soro dos animais. Por
31

outro lado, o aumento verificado no volume globurar e na contagem total de eritrcitos em P.


obscura, associado ao aumento na concentrao de hemoglobina em todas as espcies
estudadas, sugere que os niveis de T2 so mais adequados a sade e manuteno destes
animais em cativeiro.
A realizao de bipsia heptica poderia esclarecer se estes nveis so de fato
adequados ou excessivos, caso em que poderia provocar um acmulo de ferro nos hepatcitos
(ORTEGA et al., 2005), a siderose heptica. Esta uma alterao patolgica conspcua em
outros grupos de aves arborcolas com dieta rica em frutos, a exemplo dos tucanos, que
absorvem o ferro com grande eficincia (CUBAS, 2007). Este problema j foi descrito
anteriormente em mutuns, no entanto a causa desta siderose heptica no foi confirmada
(TURNER, 1994). Comparando-se novamente os valores encontrados no presente estudo aos
dados fornecidos pelo ISIS para A. pipile, cuja HG foi de 12,6 0,4 (TEARE,2002),
verificamos que mesmo os encontrados sob T1 so ligeiramente maiores. provvel que os
espcimes de A. pipile acima estivessem recebendo a dieta tradicional, indicada nas principais
publicaes especializadas disponveis, composta de rao comercial para frangos, frutos e
folhas, grama, insetos, larvas etc. (FOWLER e MILLER, 2003). Uma dieta composta de rao
de frango com 16% de protena, frutos, folhosas, rao canina e casca de ostra tem sido
preconizada em mutuns (TODD et al., 1992). De fato, o plantel utilizado no presente estudo
apresentava historicamente bons ndices de sobrevivncia e reproduo em cativeiro com a
dieta tradicional (T1). Contudo, estudos buscando informaes especficas do estado
fisiolgico incluindo parmetros hematolgicos e bioqumicos, devem contribuir para
melhorar a compreenso dos mecanismos envolvidos. Neste caso, a alimentao com uma
rao extrusada, evitando a seleo dos itens pelos animais e conseqente desbalano de
nutrientes, permite o aperfeioamento do manejo nutricional, ao apontar as recomendaes
mais exatas e precisas para estes animais.
32

TABELA 4 VARIAES NAS CONTAGENS DE ERITRCITOS (RBC), LEUCCITOS (WBC) E


TROMBCITOS (Trb) A CADA 100 LEUCCITOS EM CRACDEOS ALIMENTADOS
COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA (T2)
Espcie Dieta RBC (103/L) WBC / L Trb : 100 leuccitos
P. superciliaris T1 2766354 a 132115931 abc 135,3346,01 a
P. superciliaris T2 2749250 a 9909 4219 c 103,6740,70 ab
P. obscura T1 2270483 c 164678823 ab 117,6375,02 ab
P. obscura T2 2664512 ab 117505927 bc 106,8174,69 ab
A. jacutinga T1 2375416 bc 186009303 a 79,1326,40 b
A. jacutinga T2 2332385 c 108754500 c 92,6362,00 ab
Letras diferentes na mesma coluna indicam mdias significativamente diferentes (p<0,05).

A contagem de eritrcitos tambm foi significativamente maior em P. obscura aps a


converso dieta extrusada, sugerindo uma nutrio mais adequada com a rao extrusada. A
contagem de leuccitos foi numericamente reduzida aps a converso diettica em todas as espcies
estudadas, sendo a reduo significativa apenas em A. jacutinga. Houve grande disperso em torno
da mdia para os trombcitos, com um coeficiente de variao (CV) relativamente alto (entre 34 e
67%).
TABELA 5 VARIAO NA CONTAGEM DIFERENCIAL DE 100 LEUCCITOS EM
CRACDEOS ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO
EXTRUSADA (T2)
Espcie Dieta Linfcitos Heterfilos Eosinfios Moncitos Basfilos
P. superciliaris T1 60,115,07 16,7511,84 6,55,21 b 11,924,97 ab 4,752,64 a
P. superciliaris T2 55,6710,55 16,678,16 15,57,06 a 8,793,89 bc 3,372,63 ab
P. obscura T1 59,5611,9 20,068,57 2,8 2,4 b 14,815,63 a 2,751,24 b
P. obscura T2 59,1211,27 19,758,67 6,313 3,59 b 11,814,45 ab 31,86 ab
A. jacutinga T1 62,3315,74 21,0713,08 3,8 3,78 b 10,334,42 bc 2,472,06 b
A. jacutinga T2 63,199 23,126,13 42,88 b 6,54,29 c 3,192,23 ab
Letras diferentes na mesma coluna indicam mdias significativamente diferentes (p<0,05).

Quanto contagem diferencial de leuccitos, houve pouca variao entre as dietas,


especialmente para os tipos celulares predominantes (linfcitos e heterfilos). Observou-se
uma elevao numrica dos eosinfilos aps a converso alimentar nas trs espcies. Este
incremento de eosinfilos foi significativo apenas em P. superciliaris, apesar do elevado CV
(80 e 45%, respectivamente antes e aps converso). Segundo FUDGE (2000), podem ocorrer
aumentos relacionados ao parasitismo, mas no h uma correlao consistente. No foram
encontrados ovos ou cistos de parasitas em fezes (evidncia de endoparasitas), nem tampouco
ectoparasitas fixos ao exame fsico ao longo do experimento, mas no se pode descartar a
possibilidade de uma maior estimulao do sistema imune por picadas de mosquitos na
segunda metade do experimento, conduzido de setembro a janeiro (primavera e vero), em
uma regio de clima subtropical mido mesotrmico. Por outro lado, em mamferos, a
33

intolerncia ou hipersensibilidade intestinal relacionada a novos antgenos provenientes da


dieta pode produzir graus variveis de eosinofilia (SCHERK, 2003).

TABELA 6 VARIAES NA ALBUMINA (Alb), GLOBULINA (Glb), PROTENA SRICA (Ptn),


CIDO RICO (AU), CLCIO (Ca) E FSFORO (P) NO SORO DE CRACDEOS
ALIMENTADOS COM A DIETA TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA (T2)
Espcie Dieta Alb (g/dL) Glb (g/dL) Ptn (g/dL) AU (g/dL) Ca (mg/dL) P (mg/dL)
P. superciliaris T1 1,590,24 bc 2,270,87 ab 3,860,92 ab 10,273,68 a 9,210,80 4,221,57
P. superciliaris T2 1,700,41 ab 1,890,70 ab 3,590,90 ab 17,979,79 b 10,801,10 5,51,58
P. obscura T1 2,010,54 ab 2,360,65 a 4,370,98 a 11,943,93 9,090,55 4,661,97
P. obscura T2 1,870,45 ab 1,680,84 b 3,561,20 b 19,0712,01 11,171,01 5,452,49
A. jacutinga T1 1,320,31 c 2,430,47 a 3,750,58 ab 11,701,69 9,520,23 4,580,7
A. jacutinga T2 1,310,49 c 2,020,68 ab 3,331,14 b 18,0211,87 11,271,17 6,091,49
Letras diferentes na mesma coluna indicam mdias significativamente diferentes (p<0,05).

Observou-se reduo significativa nas protenas totais e nas globulinas em P. obscura


aps a converso alimentar. As globulinas so classicamente divididas em trs grupos. As -
globulinas incluem glicoprotenas, hapto e macroglobulina, ceruloplasmina e transcortina; so
basicamente molculas de transporte (CAMPBELL, 2004). As -globulinas incluem
hemopexina, ferritina, fibrinognio, complemento e lipoprotenas, classificadas como
protenas de fase aguda na inflamao (HOCHLEITHNER, 1994). De acordo com
ROSENTHAL (2000), a principal protena plasmtica relacionada a processos inflamatrios
o fibrinognio, uma globulina que ausente no soro, devido ao processo de coagulao, o que
impossibilita a anlise da mesma. As -globulinas so compostas principalmente pelas
imunoglobulinas A, M, G e E, sintetizadas em resposta ao estmulo antignico (RATCLIFFE,
1996). Na presena de infeces, a relao albumina / globulina se altera, invertendo-se os
valores pelo incremento que ocorre nas imunoglobulinas (BACILA, 2003). A relao
albumina/globulina tem maior significado clnico, mesmo que a concentrao da protena
total se encontre dentro dos parmetros normais de referncia, pois essa relao pode estar
diminuda (LUMEIJ, 1997). Aves com redues importantes nas imunoglobulinas podem
estar sofrendo de imunodeficincia (KANEKO, 1997). Entretanto, para melhor compreenso
do mecanismo desta reduo em particular, seria interessante realizar eletroforese, permitindo
calcular as porcentagens de cada uma das fraes (imunoglobulinas, ferritina, complemento,
lipoprotenas etc.) (BUSH, 2004), para definir especificamente quais as globulinas
envolvidas, tendo em vista suas diversas funes, antes de tecer uma concluso.
A concentrao de cido rico comportou-se de forma bastante semelhante em cada
uma das espcies, elevando-se aps a converso para o alimento extrusado. Contudo, o
incremento foi significativo apenas em P.superciliaris (p=0,0235) e no nas outras duas
34

espcies (p=0,085 e p=0,165), de acordo com o teste de Fischer. Sabe-se que o rim das aves
auxilia na homeostase hidro-eletroltica do plasma eliminando produtos nitrogenados,
principalmente cido rico, sintetizado no fgado e em menor grau no rim, a partir do
metabolismo das purinas, oriundas do aspartato, glutamina e glicina (STURKIE, 1986).
Sendo o cido rico um subproduto do metabolismo de protenas, esta elevao indica que a
rao extrusada propiciou comparativamente maior disponibilidade de aminocidos e
consequentemente maior excreo de compostos nitrogenados. De fato, o nvel protico da
dieta T2 foi cerca de 26,5% mais elevado que de T1 ( Tabelas 1 e 2). O excesso de protenas
na dieta de aves pode causar sobrecarga renal, acarretando gota rica visceral ou articular e
constipao renal, especialmente se houver conjuno com frio, desidratao e nveis
elevados de clcio (RITCHIE et al., 1994). A propsito, FOWLER e MILLER (2003)
preconizam o fornecimento de uma dieta com nveis proteicos aproximados de 20% para
animais em manuteno e a dieta T1 fornecia 11,86 % e T2 15% de protena.
A metodologia empregada neste estudo no permite determinar o balano de
aminocidos fornecidos em cada uma das dietas (T1 vs T2). Comparando-se as mdias de
cido rico srico sob T1 e T2 nas trs espcies de cracdeo estudadas aos valores mdios
disponveis no ISIS (TEARE, 2002) para Aburria pipile (10,73 5,6g/dL), os valores de T2
so mais elevados. provvel que os espcimes de A. pipile supracitados naquele compndio
estivessem recebendo uma dieta tradicional como a descrita anteriormente (FOWLER e
MILLER, 2003). Os nveis elevados de cido rico esto relacionados a um maior ganho de
peso e reduo do estresse oxidativo em perus de corte, especialmente sob dietas
suplementadas com frutose (SIMOYI e KLANDORF, 2003). Isto sugere que a
complementao com alimentos ricos em frutose (como frutas frescas maduras) associados a
esta rao extrusada pode ser benfica.
Quanto ao parmetro fsforo, foi constatada diferena estatstica entre os tratamentos
somente quando se isolou a varivel dieta (p=0,0143). Com os dados das trs espcies
agrupados, os valores mdios foram respectivamente 4,4mg/dL sob a dieta T1 e 5,65 mg/dL
sob T2. Consideramos vlida esta abordagem pelo fato dos valores por espcie terem sido
numericamente muito prximos, no tendo havido diferena estatstica entre as espcies para
este parmetro bioqumico. Esta elevao nos nveis de fsforo (P) est relacionada s
variaes no fornecimento deste mineral nas diferentes dietas, j que a rao extrusada
fornecia 22,8% mais P que a rao tradicional.
35

TABELA 7 VARIAES EM GAMAGLUTAMILTRANSFERASE (GGT), ASPARATO-


AMINOTRANSFERASE (AST), CREATINAFOSFOQUINASE (CPK), AMILASE (Aml)
E LIPASE SRICAS (Lip), EM CRACDEOS ALIMENTADOS COM A DIETA
TRADICIONAL (T1) OU RAO EXTRUSADA (T2)
Espcie Dieta GGT (UI/L) AST (UI/L) CPK (UI/L) Aml (UI/L) Lip (UI/L)
P. superciliaris T1 11,9515,17 a 144,10137,45 ab 848,54266,20 bc 630,45323,24 a 31,9426,89 c
P. superciliaris T2 28,4418,62 b 131,4155,16 ab 730,79257,26 c 508,10324,67 a 37,0034,44 c
P. obscura T1 30,6331,46 168,9472,72 ab 1434,40597,55 a 74,9761,89 b 118,0241,45 a
P. obscura T2 21,1011,76 203,0459,06 a 1216,00356,43 ab 109,34143,31 b 86,0934,74 b
A. jacutinga T1 7,326,25 110,1389,60 b 1492,00751,05 a 117,0372,59 b 58,0734,20 c
A. jacutinga T2 19,637,56 141,3280,37 ab 1565,60538,03 a 218,22236,89 b 37,6729,57 c
Letras diferentes na mesma coluna indicam mdias significativamente diferentes (p<0,05).

A enzima GGT no variou de forma consistente entre os tratamentos nas espcies


estudadas: reduziu-se em P.obscura, enquanto nas outras duas espcies observou-se uma
elevao da atividade com a dieta T2. Apenas em P. superciliaris esta elevao foi
significativa sob Fischer (p=0,0059). A grande elevao na mdia de A jacutinga no foi
significativa (p=0,1221) possivelmente devido ao nmero de amostras mais reduzido. A
atividade da amilase no soro de P. superciliaris foi significativamente diferente das outras
duas espcies, mas a mudana na dieta no produziu efeitos significativos sobre este
parmetro em P. superciliaris. Por sua vez, a lipase srica ocorreu em nveis mais elevados
em P. obscura. Ocorreu uma reduo significativa na lipase de P. obscura aps a converso
diettica. Contudo, no se pode precisar o significado clnico das variaes encontradas na
atividade destas enzimas, porque no existem valores de referncia publicados anteriormente
para esas espcies. Alm disso, existem grandes diferenas nos nveis de enzimas mesmo
entre espcies prximas, verificadas inclusive nos dados do presente estudo, com diferenas
de at mais de trs vezes para a lpase, entre espcies pertencentes ao mesmo gnero:
Penelope superciliaris e P. obscura.
36

2.4 CONCLUSO
A dieta extrusada proporcionou aumento significativo na concentrao de
hemoglobina e no cido rico srico em todas as espcies. Tambm proporcionou aumento na
contagem de eritrcitos, volume globular e massa corporal em P. obscura, com a
concomitante reduo no desvio-padro nestes parmetros apontando para um ganho na
uniformidade deste plantel, quando submetido dieta extrusada. As globulinas e lipase
tambm foram significativamente reduzidas em P. obscura.
Aps a converso dieta extrusada, as mdias numricas da contagem total de
leuccitos foram mais baixas e as de eosinfilos foram superiores nas trs espcies, porm
estas diferenas foram significativas apenas em P. superciliaris.
Ao se agrupar os dados das trs espcies foi verificado tambm aumento significativo
nos nveis de fsforo srico, quando os animais foram submetidos a rao extrusada.
De acordo com estes resultados, conclui-se que, de maneira geral, o fornecimento da
dieta extrusada balanceada (T2) aos animais como nica fonte de alimento melhorou aspectos
clnicos e a uniformidade dos lotes de aves estudados.
37

REFERNCIAS

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