PRACTICA DE ESTERILIZACION

Adrin Botello Rincn

Cod: 1090495266

Eider Quintana Puentes

Cod: 1099662627

Angelly Milleth Manrique Gmez

Cod: 98052351138
Angela Parra Gonzlez
Cod:

Candelaria Madrid
Microbiloga

Universidad de pamplona
Facultad de ciencias agrarias
Medicina veterinaria
Microbiologa
Pamplona 2017
 INTRODUCCION
En un anlisis microbiolgico es importante identificar en forma precisa el microorganismo
involucrado, siendo entonces indispensable un resultado veraz por parte del laboratorio.
Generalmente se debe obtener un cultivo y evitar la contaminacin de origen ambiental. Es
necesario descartar o eliminar falsos positivos causados por esta clase de microbiana. Para
realizar un excelente prctica es fundamental comprender los principios bsicos de la
esterilizacin.
La destruccin completa de todos los microorganismos presentes sobre cualquier material o
dentro de l es indispensable en todos los procedimientos analticos, as como la preparacin
de medios de cultivo y otros materiales.
 OBJETIVOS

Aplicar algunos mtodos utilizados para la esterilizacin de medios de cultivo,

materiales y accesorios utilizados en el laboratorio de microbiologa.
Enumerar los diferentes mtodos que existen para realizar los procedimientos de
esterilizar usados en microbiologa.
Preparar el material para estilizar y hacer uso de la autoclave para el procedimiento
de esterilizacin.
 MARCO TEORICO
La esterilizacin es una eliminacin o muerte de todos los microorganismos que contienen
un objetivo o sustancia, por lo general se acondicionan de tal forma que no puedan
contaminarse nuevamente, existen varios mtodos de esterilizacin: los agentes fsicos (calor
seco, calor hmedo, radiacin) y agentes qumicos (cloro y compuestos clorados, aldehdos,
oxido etileno, compuestos fenlicos y cidos).
El agente ms utilizado es el calor ya sea hmedo o seco, el calor seco consiste en la
desnaturalizacin de protenas, efectos txicos por desecacin de la clula, alcanzando
niveles elevados de soluto. El horno de aire caliente es el equipo ms utilizado para los
laboratorios para poder esterilizar por calor seco, se requiere mayor temperatura y tiempo de
exposicin que los mtodos e calor hmedo, la temperatura vara entre 120 y 180
requiriendo distintos tiempos de exposicin ya sea a 140 por lo que se necesita 5 horas y en
160 a 180 y se requiere por lo menos dos horas. VENTAJAS: no es corrosivo para metales
e instrumentos, permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas y sustancias
viscosas no voltiles. DESVENTAJAS: l requiere mayor tiempo de exposicin respecto al
calor hmedo, debido a la baja penetracin del calor. En la parte de incineracin se utiliza
para destruir el material descartable contaminado. Ejemplo: horno de incineracin en el aire
hospitalario.
La accin directa de la llama hace referencia a que se lleva al rojo vivo el material de metal
como asas, lancetas etc
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas estos efectos se deben
por dos razones: -son producidas por reacciones que eliminan agua, por lo que la reacciones
inversas podran daar la clula para causar generacin de productos txicos. el vapor del
agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevada que la del aire.
VENTAJA: rpido calentamiento y penetracin. DESVENTAJA: es corrosivo sobre ciertos
instrumentos metlicos.
La autoclave es un equipo utilizado en los laboratorios para estilizar cultivos y soluciones
que no formen emulsiones con el agua y no se desnaturalice a temperaturas mayores a 100
Las radiaciones dependen: del tipo de radiacin, el tiempo de exposicin y la dosis de
radiacin. Las radiaciones no ionizantes se refieren a la luz ultravioleta la cual se utiliza para
reducir la poblacin microbiana del aire de los laboratorios. La luz ultravioleta afecta a las
molculas de ADN de los microrganismos debido a la formacin de dmeros adyacente.
Las radiaciones ionizantes son las que producen radicales libres, ya que altera las bases de
los cidos nucleicos y tiene gran penetrabilidad y se utiliza para esterilizar materiales
termolbiles como jeringas.
La filtracin se utiliza para tcnica de filtracin la cual consiste en pasar las soluciones a
filtros con poros de dimetros a escalas de micras, reteniendo por tamao los
microorganismos, por medio de este se obtiene los productos solubles como toxinas,
antgenos y antibiticos
 TERMINOS DESCONOCIDOS

INTRAMOLECULAR: Es un proceso o caracterstica limitado al interior de la

estructura de una nica molcula; una propiedad o fenmeno limitado a la extensin de una
sola molcula, dentro de la propia molcula.

VIABILIDAD: Se refiere al estudio preliminar que se hace al modelo celular que se

emplear en un experimento para determinar si las clulas estn vivas y en qu porcentaje lo
estn, antes de utilizarlas en un experimento.

DESECACION: La desecacin al aire (sin vaco) mata a las clulas vegetativas

bacterianas, pero no a las endosporas. La sensibilidad a la desecacin vara de una especie a
otra.
Ejemplos:
1. Mycobacterium tuberculosis (el bacilo tuberculoso) es muy resistente al aire (en
ausencia de luz), de ah que pueda aguantar varios meses a partir de los esputos de enfermos.
2. En cambio, el vibrin colrico (Vibrio cholerae) muere expuesto al aire al cabo de
slo dos horas.

VOLATILES: Es el trmino que caracteriza a los lquidos que se volatilizan

rpidamente al estar en recipientes destapados y se reduce a gas o vapor. Una sustancia voltil
es un producto que tiene propiedad de evaporarse en temperatura ambiente, pasa finalmente
del estado lquido a gaseoso en contacto con el aire, como es el caso del alcohol, acetona,
gasolina, entre otras. Las sustancias voltiles puedes producir efectos negativos a la salud,
como: intoxicacin y efectos adversos sobre el sistema nervioso.
 MATERIALES

Cajas de Petri
Tubos de ensayo
Pipetas
Erlenmeyer
Papel kraft
Autoclave
Horno de aire caliente
Cinta de enmascarar
Gasa
Algodn
Asa bacteriolgica
Mechero de bunsen
Hisopos
Estufa elctrica
baja lenguas
REACTIVOS
No aplica
 RESULTADOS
CENTRO DE PREPARACION DE MEDIOS

Al ingresar al centro de preparacin de medios lo primero que encontramos es el rea de

material estril en donde se encuentran 2 neveras las cuales recepcionan las listas para
preparar el material, Este sitio es el encargado de preparar el material para todos los
laboratorios de microbiologa, bacteriologa y las otras facultades que requieren de
microorganismos, Luego nos dirigimos al rea de servido de medios, la cual es un rea estril
que se mantiene con luz ultravioleta durante toda la noche para la esterilidad de los diferentes
medios de cultivo, despus nos dirigimos al rea donde se encuentra un auto clave industrial
que consta de 2 canastas y tambin encontramos un auto clave automtica y un filtro que
tiene como funcin la preparacin del agua destilada que ser suministrada a los diferentes
laboratorios para su respectivo uso, continuamos con nuestro recorrido hacia el rea de pesaje
de medios de cultivo, en donde tambin encontramos diferentes reactivos y sustancias
qumicas las cuales se utilizan para la preparacin de estos diferentes medios, ms adelante
del recorrido observamos el rea de preparacin donde encontramos un auto clave pequea
para realizar algunas preparaciones pequeas y una estufa para hervir los diferentes medios
de cultivo antes de realizar la preparacin en dichas auto claves y para finalizar el recorrido
por el centro de preparacin vamos hacia el rea de inactivacin de microorganismos, pero
para poder realizar este ltimo procedimiento se utiliza un auto clave industrial para ser
llevada hacia el respectivo lavado en donde se desechan todo el contenido que tenga las cajas,
o los tubos para ser lavado con jabn , una vez realizado este procedimiento pasamos a volver
a lavar los diferentes instrumentos pero con hipoclorito en donde se tiene en remojo y se
lavan nuevamente para dirigirlos a escurrir, ya estando lavados y secados los diferentes
instrumentos van a ser dirigidos al rea de esterilizacin. Y es donde se da por finalizado
todo el recorrido del centro de preparacin de medios.
 IMGENES

NEVERAS AUTOCLAVE PEQUEA Y ESFUTA

AREA DE LAVADO HORNOS

 ANALISIS

Antes de comenzar la Se us primero una Se entreg el material,

prctica, limpiamos y solucin jabonosa, seguidamente se explic la
desinfectamos el rea de seguidamente se manera de empacarlo
trabajo desinfecto con hipoclorito

Se llevaron los Se procedi a empacar y Se recort el papel para

materiales a la autoclave sellar de forma correcta el envolver el material de
(calor hmedo) 5 tubos, material (en el caso de los acuerdo a las necesidades.
1 Erlenmeyer, y 3 cajas tubos se les aadi algodn
de Petri, los cuales se en la boquilla).
pusieron a una
temperatura de 121c por
15 minutos

Se llevaron 8 pipetas, 3
tubos de ensayo con un
tapn de algodn y
envueltos en una bolsa, 1
vaso de precipitado de
100ml y 10 cajas de
Petri al horno (calor
seco) a una temperatura
de 120c por
aproximadamente 5
horas
 ANEXOS

1 Que es esterilizacin?

Es el proceso por el cual se obtiene productos libres de microorganismos viables, este proceso
debe ser diseado, validado y llevado a cabo de modo de asegurar que es capaz de eliminar
la carga microbiana del producto.

2 Dibuje una autoclave con sus partes y describa su funcin

Recipiente de presin metlico de paredes gruesas con un cierre hermtico que permite
trabajar a alta presin para realizar una reaccin industrial, una coccin o una esterilizacin
con vapor de agua.

3 Qu medidas podra tomar usted para verificar la efectividad de esterilizacin por

autoclave?

Tener un amplio conocimiento sobre los microorganismos para saber la temperatura y

mtodos eficientes para la esterilizacin, adems de conocer el medio por el que se va a llevar
el proceso de autoclave.

4 Que es liofilizacin?

Proceso en el que se congela el producto y posteriormente se introduce en una cmara de

vaco para realizar la separacin de agua por sublimacin.

5 Qu es sonicacion?
Proceso de convertir una seal elctrica en una vibracin fsica que puede ser dirigida hacia
una sustancia, son equipos vitales de laboratorio y se utilizan para muchos propsitos

6 Qu otros procesos fsicos permiten disminuir la carga microbiana?

Flameado, incineracin, hornos Pasteur, autoclave y radiacin.

7 Qu otro tipos de rayos a diferentes longitudes de onda se emplean para esterilizacin?

Radiaciones ionizantes, rayos gama, rayos X, radiacin no ionizante.

 BIBLIOGRAFIA
Organizacin panamericana de la salud, (2008). Manual de esterilizacin para centros
de salud. Recuperado de http://www1.paho.org/PAHO-USAID/dmdocuments/AMR-
Manual_Esterilizacion_Centros_Salud_2008.pdf
Universidad nacional de Colombia, (2012) , Manual de bioseguridad y esterilizacin,
facultad de odontologa, sede Bogot, recuperado de
http://www.laboratorios.bogota.unal.edu.co/userfiles/files/manual_bioseguridad%20
y20&esterilizacion_abril_2013.pdf
CDC, (2008), Guideline for disinfection and sterilization in healthcare facilities,
recuperado de http://www.cdc.gov/hicpac/pdf/guidelines/disinfection_nov_2008.pdf
 CONCLUSIONES

Se pudo concluir que existen dos mtodos de esterilizacin para materiales de vidrio
los cuales son: el horno (calor seco) y la autoclave (calor hmedo).

Se aprendi a empacar el material para esterilizarlo en el horno o en la autoclave

Se conoci que la temperatura respectiva para la autoclave es de 121c y su

duracin puede ser de 15 minutos; en el horno su temperatura es de 120c y su
duracin puede ser de 5 horas.