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Gabriela Bed
Prof. Adj. Seccin Gentica
Facultad de Ciencias
Universidad de la Repblica
Introduccin
Figura 2
Desarrollo embrionario temprano.
a) Formacin de la mrula por segmentacin, y posteriormente de la blstula.
b) Invaginacin y aparicin de las tres hojas embrionarias.
Los cromosomas
A comienzos del siglo XX, con el desarrollo del microscopio y el conocimiento de
la estructura celular, comenz el estudio de unos cuerpos coloreados presentes
en la clula en divisin: los cromosomas. La sustancia fcilmente coloreable que
los compone, la cromatina, es el componente principal del ncleo de la clula, y
en el momento de la divisin celular se condensa y toma la forma con la que
conocemos a los cromosomas. Ya en 1905 se observ en un grupo de insectos,
la presencia entre los cromosomas, de dos de ellos (XX) en las hembras, en
tanto los machos tenan uno solo.
A partir de entonces se ha estudiado que en un gran nmero de vegetales y de
animales tanto invertebrados como vertebrados, existen diferencias en los
cromosomas (frecuentemente en un par cromosmico) entre los machos y las
hembras, lo que parece sugerir que la presencia o ausencia de algn
cromosoma va a determinar de alguna forma el sexo del individuo.
El cariotipo humano
Como sabemos, todo organismo pluricelular est compuesto por clulas, miles y
millones, segn la especie. Cada una de
estas clulas tiene un ncleo que contiene la
Figura 6
La Cromatina
A) Niveles de organizacin: el ADN se
organiza con protenas para formar una
estructura en cuentas de collar que a su
vez se enrolla para formar un solenoide
ms condensado. En el momento de la
divisin celular, ste se compacta aun
ms para dar los cromosomas.
B) Microfotografa electrnica en que se ve
coloreada la cromatina. Sealada con E la
eucromatina menos condensada, con H la
heterocromatina ms condensada.
Tomado de internet: A)
recursos.cnice.mec.es; B) La clula de Julio
Prez Mrquez,
www2.uah.es/biologia_celular/LaCelula
a lo largo del siglo XX demostr que esta informacin gentica est contenida en
las molculas de ADN. El ncleo celular contiene entonces mayoritariamente
ADN y protenas, constituyendo la cromatina (figura 6). La informacin gentica
es perfectamente conservada a lo largo de las divisiones celulares y esto es
gracias a una meticulosa replicacin del ADN y a un reparto equitativo del
material en las clulas hijas. Como parte de este proceso de divisin (llamado
mitosis), la cromatina se condensa y forma los cromosomas (cuerpos
coloreados). El nmero y forma de los cromosomas son propios de cada
especie y en su conjunto lo conocemos como cariotipo.
En la figura 7 observamos una representacin ordenada del cariotipo humano.
Para realizarla debemos obtener clulas que se estn dividiendo,
Figura 7
Cariotipo humano presentando ordenadamente los 22 pares de autosomas y los cromosomas
sexuales (sealados con una flecha roja). La tcnica de bandeo G facilita la identificacin de
los pares. a) cariotipo femenino. b) cariotipo masculino. Tomado de Klug&col., 2006.
22 autosomas y un
Figura 8
Esquema representando la formacin de gametos. La cromosoma X (es decir la
mujer forma gametos que llevan en todos los casos 22
autosomas y un cromosoma X. El varn forma
dotacin que denominamos
espermatozoides que llevan 22 autosomas. Pero haploide de n = 23
respecto a los cromosomas sexuales llevan o X o Y,
determinando el sexo del futuro beb. cromosomas), mientras que
los gametos masculinos, los espermatozoides, llevan 22 autosomas y un
cromosoma sexual que puede ser X o Y. Como vemos, en el momento de la
fecundacin el espermatozoide, portador de un gameto con X o con Y, define el
sexo del futuro nio.
La expresin gnica
De dnde han surgido las protenas que posee cada clula? Cuando las
condiciones estn dadas (por ejemplo, el cromosoma est descondensado, la
molcula de ADN est suficientemente expuesta) algunos de los genes
presentes a todo lo largo del cromosoma y en todos los cromosomas de esa
clula, podrn expresarse. Esto es: su secuencia de nucletidos se transcribe y
da lugar a un ARNm. Como vimos, este ARNm sale del ncleo y es captado por
la maquinaria de traduccin dando lugar a una cadena polipeptdica. Esta
cadena se puede plegar, modificar, e incluso unirse con otras para formar una
protena madura.
As por ejemplo, cuando decimos que en una clula precursora de glbulo
rojo se expresa el gen de globina, significa que ese tramo de ADN da lugar al
ARN mensajero de globina, y ste con ayuda de los ribosomas, es ledo
triplete tras triplete generando una cadena de 147 aminocidos: la cadena
polipeptdica de globina, la cual, unindose a otros componentes, constituir la
hemoglobina.
Pero. esto sucede en todas las clulas? No. La clula muscular no
precisa globina, la neurona tampoco. En estos tipos celulares el gen de globina
est presente pero no se expresa. No se transcribe ni se traduce. Est
apagado.
La regulacin de la expresin gnica
En este momento llegamos al concepto de que, si bien todas las clulas poseen
la misma informacin gentica, no todos los genes se expresan al mismo tiempo
y en la misma clula. Hay una regulacin de la expresin gnica. Existe distinto
tipo de seales que colaboran a que un gen sea molde para el proceso de
transcripcin.
En la figura 10 se muestra que la estructura del gen (que hemos definido
como la secuencia de ADN necesaria para la produccin de una protena)
incluye varias regiones que no van a ser transcriptas. Su funcin es justamente
colaborar a regular la expresin del gen, son secuencias reguladoras. Entre ellas
son fundamentales aquellas ubicadas ro arriba del sitio de inicio de la
denominadas
regin promotora o
Esencialmente, la
regulacin a nivel
del promotor
ocurre de la
siguiente forma
(fig.10): algunos
tramos pequeos
de esta secuencia
(de alrededor de
Figura 10
Secuencias implicadas en la regulacin de un gen eucariota.
A) Adicionalmente a la secuencia que dar lugar al ARN mensajero (secuencia codificante)
existen secuencias relacionadas con la regulacin de la expresin de ese gen. Algunas
distantes de la secuencia codificante se conocen como potenciadores. La secuencia
contigua en 5 al inicio de la transcripcin se denomina promotor y abarca
aproximadamente 200 pares de bases. Se seala en la figura que pueden identificarse
tramos cortos de de secuencias. Estos son reconocidos por protenas denominados
factores de transcripcin que son los que colaboran a que un gen se transcriba o no.
B) Se equematiza el mecanismo en cascada frecuente durante los procesos de desarrollo.
Un gen se expresa: da lugar a un ARNm (en rojo) y ste a una protena (violeta). Esta
protena tiene por funcin ser factor de transcripcin u otra protena reguladora, que se
dirije al promotor de otro gen para colaborar con la sealizacin para que ste ltimo se
exprese.
Modificado de: Lewin,2003 y Griffith&col., 2002.
15 nucletidos cada uno) son reconocidos por protenas se denominadas
genricamente factores de transcripcin, que se unen a ellos. La presencia de
estos factores de transcripcin sobre el promotor producen cambios tales que
promueven el inicio de la transcripcin, o aumentan su tasa si sta era baja.
Llegamos entonces a un concepto importante: los genes pueden
expresarse o no. Para sealar la expresin de un gen deben estar presentes
determinadas protenas que actan sobre las secuencias reguladoras del
mismo. Los genes que se expresan en una clula dada aseguran un repertorio
de protenas que es propio de esa clula. Como ya hemos dicho, muchas de
estas protenas son enzimas que habilitan determinadas reacciones qumicas y
definen el destino de esta clula y sus vecinas. Una enzima puede, por ejemplo,
ser responsable de la produccin de una hormona.
Hemos revisado algunos conceptos y ahora podemos regresar a la
pregunta que nos ocupa: qu tiene cada uno de los cromosomas sexuales para
contribuir al desarrollo diferencial de la gnada que hasta cierto momento es
bipotencial?
La presencia de SRY
Recientemente se ha determinado cul es el gen clave en esta regin, el cual a
menudo es denominado como SRY, o como el gen que codifica el factor
determinante testicular (TDF, abreviatura en ingls). Y, porqu este gen es tan
importante?, qu es lo que hace? Como todo gen, para hacer algo tiene que
expresarse. Este gen se expresa y como consecuencia se produce la protena,
que es el factor determinante testicular.
Y cul es la funcin de esta protena? Pues es una de estas protenas que
funciona como factor de transcripcin. Es decir que es capaz de reconocer y
unirse a los promotores de otros genes para promover su expresin. Como
vemos, esto funciona a modo de cascada. Durante el desarrollo embrionario
temprano este proceso es muy comn: se produce una protena que
especficamente activa algunos genes, que a su vez producen otras protenas,
de modo que va determinndose el repertorio de protenas de esas clulas,
diferente de las de otras (figura 10 B).
En nuestro caso el factor TDF es un detonador. En el embrin masculino,
comienza a aparecer esta protena y ella provoca la expresin de otros genes.
Esto no ocurre en el embrin femenino.
El producto del gen SRY inducira la proliferacin del epitelio celmico de las
crestas gonadales en los fetos de sexo masculino y la migracin de clulas
mesonfricas hacia la cresta gonadal, entre ellas, las clulas de Leydig.
Comienzan a formarse estructuras cordonales. La diferenciacin de las clulas
de Sertoli hace que a su vez comiencen a producir otras protenas especficas
que colaboran con la diferenciacin masculina.
Algunos datos que confirman la importancia de SRY
Una de las evidencias experimentales de la importancia de SRY proviene de los
casos descritos de translocacin de este fragmento del cromosoma Y. Una
translocacin consiste en que un tramo de un cromosoma se corte y se integre
en otro cromosoma. Una de las situaciones en que esto puede ocurrir es en el
momento en que los cromosomas se aparean durante la meiosis. En el caso de
los cromosomas sexuales X e Y, hemos dicho que ellos se unen por dos
regiones pseudoautosmicas (PAR, sigla en ingls) en los extremos
cromosmicos. Ya que la regin SRY est a tan solo 5 kilobases de una de las
PARs, ocurre con cierta frecuencia que esta regin se transloque al cromosoma
X (figura 12a). Una vez que los cromosomas se separan, se formarn gametos
masculinos que llevan o un cromosoma X o un Y.
En este caso particular, los gametos llevarn un cromosoma X con la
regin del gen SRY, y otros llevarn cromosoma Y carente de esta regin.
Despus de la fecundacin en que participa este gameto, el resultado es en el
primer caso, un individuo con XX pero que es varn y presenta genitales
masculinos (sndrome de Chapelle). En el segundo caso nacer una mujer con
cromosomas XY: dado que el cromosoma Y carece de la regin SRY no hay
Figura 12a
Translocacin cromosmica de un fragmento del cromosoma Y
al X durante el apareamiento de ambos cromosomas en la
meiosis. Dar lugar a gametos masculinos que llevan un
cromosoma Y carente de la regin SRY y otros que llevan un
cromosoma X con SRY. La figura muestra que una vez que se
forma un cigoto portador de un cromosoma X de la madre, se
formar un futuro embrin que posee en todas sus clulas una
dotacin XX pero lleva SRY, desarrollndose como un varn.
Modificado de Wilhelm&col 2007.
Figura 12b
Fotografa de un ratn
macho junto con un
ratn XX transgnico
al que se insert el gen
SRY. La expresin de
este gen determina la
formacin de genitales
masculinos
indistinguibles de las
de un ratn macho.
Tomado de Koopman
y col. 1991.
Figura 13
Esquema del cromosoma X tal como se presenta en el
informe del Proyecto Genoma Humano. El cromosoma se
esquematiza con las bandas descritas en base a la
tincin con bandeo, cada una de las cuales se identifica
con un nmero. Cada uno de los punto en el esquema de
la derecha representa un gen.
Figura 14
La expresin de DAX1
Tcnica de hibridacin in situ sobre embriones de
ratn de diferente edad (das de vida a la derecha de
cada foto). Utilizando una marca o sonda que detecta
la formacin de ARN mensajero por transcripcin del
gen DAX 1 y lo refleja con formacin de una coloracin
azul, puede observase que este gen de expresin
temprana, se trancribe en una fase en ambos sexos,
pero solo persiste en los individuos XX. Tomado de
Gilbert, 2006.
DAX1. Se expresa inicialmente en ambos sexos, persistiendo ms tarde solo en
el ovario. Est justamente vinculado con el desarrollo del ovario. En la figura 14,
que muestra el resultado de una tcnica por la cual un gen que se expresa
genera un pigmento de color azul, podemos ver cmo con el paso de los das el
producto del gen DAX1 se observa solo en las hembras.
Qu ocurre cuando se expresa el gen DAX1?. Se produce la protena DAX 1.
Nuevamente esta protena es de aquellas que, a nivel de los promotores de
otros genes, participan para regular su expresin. Es as que una vez que se
produzca, dependiendo de en qu cantidad se encuentre en la clula, contribuir
a expresar otros genes especficos y formar nuevas protenas. Como podemos
prever, el embrin masculino, XY tambin tiene en su cromosoma X el gen
DAX1. Y por otra parte, el embrin femenino tiene en cada clula un cromosoma
X inactivo, por lo que expresa una sola de sus copias de DAX 1. Dnde est la
diferencia? Se ha mostrado, como vemos en la figura 15a, que la presencia del
producto de DAX1 junto con SRY promueve la formacin de testculo, mientras
Figura 15
Accin de DAX1
15a Esquema que refleja la
importancia del balance de SRY y
DAX1 que depende no solo de la
presencia del gen y de su nmero
de copias, sino de su expresin.
La presencia de SRY, aun en
presencia de DAX1 en el
cromosoma X, determina el
desarrollo de un macho. La
presencia de DAX1 solo
encamina a la formacin de
ovario. Mientras que una doble
dosis de DAX1 logra contrarrestar
los efectos de SRY y alterar el
desarrollo gonadal.
Modificado de Gilbert, 2006.
15b Se esquematiza de qu
forma las protenas SRY o DAX 1
en la dosis en que se encuentren
regulan la expresin de otros
factores, tales como SF1. La
flecha indica estimulacin de la
expresin, mientras que el
smbolo l-- indica inihibicin.
Como vemos, SRY y DAX 1 son solo el inicio de una cascada que implica diferentes protenas
en el desarrollo de cada sexo.
que DAX 1 sin SRY promueve formacin de ovario. Observamos tambin que la
expresin de dos copias de DAX 1 junto con SRY no permite desarrollo de la
gnada, encontrndose ausente la produccin de testosterona y otras
hormonas.
La interaccin de los productos de estos genes de expresin temprana es
mucho ms compleja, y los genes involucrados son numerosos y definen una
red intrincada. La regulacin como vemos es muy fina, no es un todo o nada.
Depende de la cantidad de un determinado factor y depende, adems, de qu
otros factores estn presentes simultneamente, o depende en otros casos de
que otro factor est completamente ausente. Un complejo conjunto de
numerosas protenas, formadas en el momento justo y en la clula indicada
aseguran que se vayan formando otras nuevas y as se determine el destino de
las clulas.
Sera sumamente tedioso nombrar y describir otros genes que participan
en este proceso. Solo a modo de ejemplo observemos el esquema de la figura
15b. Aqu vemos cmo las protenas SRY y DAX 1 compiten por la regulacin
de otro factor (SF1), que a su vez regula a otro (Sox 9). ste ltimo contribuir a
la formacin del testculo. Sox 9 promover por ejemplo la produccin de una
hormona: la hormona antimulleriana. Como recordarn, durante el desarrollo de
las vas genitales masculinas existe una seal determinante que es la
destruccin del ducto de Muller, al tiempo que a partir del ducto de Wolff se
desarrollan las vas masculinas. SF1 colabora a su vez con la formacin de
testosterona en las clulas de Leydig. De manera que podemos comenzar a
visualizar que en presencia de protena SRY estimulando y si no hay suficente
DAX 1 para reprimir, la cascada se inclina hacia la formacin de Sox 9, SF1 y
muchos ms, de los que stos son tan solo ejemplos.
Este proceso complejo est parcialmente esquematizado en la figura 16.
El ejemplo particular de la determinacin gnica del sexo nos da una idea de la
manera en que ciertos genes pueden ir definiendo un fenotipo determinado.
Podemos adelantar del mismo modo que alteraciones en esos genes (las
mutaciones) pueden verse reflejadas en cambios en el fenotipo.
Figura 16
Diagrama del desarrollo alternativo de la gnada bipotencial. Su formacin a partir de la cresta
genital implica la expresin de numerosos genes entre los cuales SF1, Lim1.
Tras la formacin de la gnada, algunas de sus clulas comienzan la produccin de hormonas
- testosterona, dihidrotestosterona (DHT) y homona antimulleriana (AMH) en el varn;
estrgenos en la nia - que sealizan la maduracin de los rganos sexuales.
A nivel cromosmico
Las alteraciones en los cromosomas ocurren mayoritariamente durante la
formacin de los gametos. Muchas de ellas consisten en prdida (delecin) o
adicin de un fragmento de cromosoma, o translocacin de un tramo de un
cromosoma a otro. Tambin ocurren cambios en el momento de la separacin
de los cromosomas de un mismo par, pudiendo dar lugar a gametos que llevaron
los dos cromosomas de ese par o ninguno. Cuando este gameto alterado
participa en la fecundacin, se formar una clula huevo que recibe el
complemento de los 23 cromosomas del otro gameto. De todos modos, tendr
un cromosoma del par alterado, o tendr tres (trisoma) o un (monosoma)
cromosomas de un par.
Hemos visto, como ejemplos los sndromes de Klinefleter y Turner. El
primer caso son hombres con 2n = 47 (44 autosomas ms XXY) con una
incidencia aproximada en la poblacin de 1 en 500. Entre los 12 a 14 aos
tienen niveles bajos de hormona testosterona, y como consecuencia presentan
testculos poco desarrollados, azoospermia (ausencia de espermatozoides),
pene pequeo, y tejido mamario agrandado (ginecomastia). Tambin presentan
proporciones corporales anormales y generalmente estatura alta.
Las mujeres con sndrome de Turner, tiene un cariotipo de 2n = 45 (44
autosomas ms un solo X) ocurriendo en 1 de cada 2500 nias. Poseen un
aspecto infantil, baja estatura con anomalas de ojos y huesos, escaso desarrollo
de caracteres sexuales secundarios, y ausencia de menstruacin. No est aun
totalmente clarificada la base a nivel gnico de esta alteracin.
Hemos comentado tambin previamente, que la presencia de un
cromosoma X que debido a una translocacin tienen ahora el gen SRY da lugar
a un individuo con desarrollo masculino. Este ejemplo nos sirve para volver a
recordar que los cromosomas no son ms que el soporte de los genes, por lo
que las consecuencias de las alteraciones cromosmicas son debidas en gran
medida a la ganancia o prdida de genes que conllevan.
A nivel hormonal
Una vez que el aparato reproductor, especialmente la gnada, se ha formado,
las caractersticas sexuales fsicas, funcionales y comportamentales dependen
en gran medida de las
hormonas, y principalmente
aquellas que son formadas
en las propias gnadas. Pero
a su vez, como se ejemplifica
en la figura 17, podemos
visualizar la formacin de una
hormona, como el resultado
de una secuencia de
Figura 17
Diagrama de la sntesis interrelacionada de algunas hormonas. Cada flecha representa una
reaccin qumica y es catalizada por una enzima (dada su complejidad, se han omitido los
nombres de las enzimas, dejando como ejemplo solo el de aquella que transforma testosterona
en dihidrotestosterona. Las flechas punteadas indican que entre ambas molculas existen
molculas intermedias y reacciones enzimticas que daran mayor complejidad.
reacciones qumicas a partir de un precursor, siendo cada una de ellas
catalizada por una enzima. Esto sugiere que para que la hormona se produzca
es necesario que los genes que codifican para enzimas implicadas en su
sntesis estn: a) intactos (no tengan mutaciones que alteren el producto que
debe formarse) y b) sealizados de alguna forma por factores presentes que
aseguren su correcta expresin.
Del cuadro en que se representa la formacin de las hormonas
esteroideas podemos deducir que las vas en la produccin de varias de las
hormonas estn interconectadas. Detengmonos en el ejemplo de la
transformacin de testosterona en
dihidrotestosterona. Estas dos
hormonas masculinas son
responsables de la formacin de
los genitales externos y de los
caracteres secundarios
masculinos. Sin embargo la figura
18 muestra que cada una de estas
dos hormonas tiene a su cargo la
formacin de algunas de las
estructuras. La 5-alfa reductasa es
Figura 18
la enzima responsable de Desarrollo de los genitales masculinos,
distinguiendo con dos colores si dependen
transformar testosterona en
principalmente de la testosterona o de su
dihidrotestosterona. En los derivado la DHT.
Tomado de Gilbert, 2006.
individuos XY que tienen alterado
el gen que codifica esta enzima, los genitales externos estn feminizados, y los
testculos son funcionales pero estn internalizados (pseudohermaforditismo
masculino).
Consecuencias igualmente importantes pueden tener las alteraciones en
genes responsables de la produccin de un receptor hormonal, sin el cual
aunque la hormona est presente no logra cumplir su funcin en las clulas
blanco. As por ejemplo, el sndrome de feminizacin testicular, ocurre en
individuos que son XY pero tienen insensibilidad a los andrgenos. Poseen
genitales externos femeninos, caracteres sexuales secundarios femeninos, una
vagina corta y ausencia de tero y trompas. Si bien son XY, su apariencia es
totalmente femenina y suelen tomar conocimiento de esta alteracin cuando
consultan por esterilidad.