UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUIMICA BASICA Y APLICADA

Ao de la consolidacin del Mar de Grau

DESPLAZAMIENTO DE BANDAS EN EL EXTRACTO

ETANLICO DE Vaccinium corymbosum L. ARNDANO

AUTORES:

CLARES YAURI, ESTELA

MANGO TREJOS, ALEXANDER

JAIR

PONTE CASTRO, ALEJANDRA

OLLERO CAMARENA, MICHAEL

TONY
ZAFRA SANCHO, KATHERINE
LIZBETH

ASESOR

Dra. Norma Carlos Casas

Lima Per
2017

1
 Agradecimiento

El presente trabajo de investigacin fue realizado en el

laboratorio de Qumica Analtica Instrumental bajo la
supervisin del Dra. Norma Carlos Casas a quien
expresamos nuestro ms profundo agradecimiento por
su paciencia y conocimiento.

Lugar de ejecucin

El presente trabajo de investigacin se realiz

en los laboratorios de Qumica Analtica del
Instituto de Ciencias Farmacuticas y
Recursos Naturales Juan de Dios Guevara,
tambin nombrar a la catedra de Qumica
Orgnica de la Facultad de Farmacia y
Bioqumica, Universidad Nacional Mayor de
San Marcos
2
 NDICE

RESUMEN ............................................................................................................................................ 4
ABSTRACT ............................................................................................................................................ 5
INTRODUCCIN ................................................................................................................................... 6
I.ANTECEDENTES ................................................................................................................................. 8
1.1.-JUSTIFICACIN......................................................................................................................... 8
1.2.-HIPTESIS Y VARIABLES .......................................................................................................... 9
1.2.1. Hiptesis ........................................................................................................................... 9
1.2.1. Variables ........................................................................................................................... 9
1.3.-OBJETIVOS ............................................................................................................................... 9
1.3.-POBLACION Y MUESTRA ....................................................................................................... 10
II.- ASPECTOS GENERALES: ................................................................................................................ 12
2.1. DESCRIPCIN DE LA MASHUA ............................................................................................... 12
2.2. ORIGEN DE LA MASHUA ........................................................................................................ 13
2.3. DISTRIBUCIN GEOGRAFICA ................................................................................................. 13
2.4. VARIEDADES DE LA MASHUA ................................................................................................ 14
2.5. COMPOSICIN QUMICA Y VALOR NUTRICIONAL DE LA MASHUA ..................................... 14
2.6. COMPUESTOS ANTIOXIDANTES ............................................................................................ 15
1.6.1.- VITAMINA C (CIDO ASCRBICO)(7) .............................................................................. 16
1.6.2. COMPUESTOS FENLICOS(8) ........................................................................................... 17
III.MATERIALES Y MTODOS.............................................................................................................. 22
3.1. ESPECIE DE ESTUDIO .............................................................................................................. 22
3.2. MUESTRA: .............................................................................................................................. 22
3.3.- LUGAR DE EJECUCIN .......................................................................................................... 22
3.4. MATERIALES........................................................................................................................... 22
3.5. MTODOS .............................................................................................................................. 23
3.5.1.- Determinacin de pH .................................................................................................... 23
3.5.2.- Titulacin potenciomtrica ........................................................................................... 23
IV.RESULTADOS: ................................................................................................................................ 25
4.1. Determinacin de pH............................................................................................................. 25
4.2. Titulacin potenciomtrica ................................................................................................... 25
DISCUSIN......................................................................................................................................... 28
CONCLUSIONES ................................................................................................................................. 29
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ......................................................................................................... 30

3
 RESUMEN

Para un buen funcionamiento del organismo es necesario incluir dentro de la dieta frutas y
hortalizas que ayudan a mejorar la salud y prevenir las enfermedades. Los antioxidantes,
compuestos qumicos que se encuentran dentro de ellos, nos ayudan a prevenir y disminuir los
procesos oxidativos que intervienen en numerosas patologas. Algunos compuestos fenlicos
son los responsables de este poder antioxidante los cuales estn contenidos en cantidades
representativas en los arndanos.

El arndano azul (Blueberry), ocupa los primeros lugares entre los alimentos vegetales tanto
en cantidad como en calidad de antioxidantes, por lo que se considera un alimento con
propiedades funcionales. Por lo anterior, el objetivo del trabajo es analizar la capacidad
antioxidante en esta fruta.

La capacidad antioxidante se analiz a travs del anlisis de los ensayos con el

espectrofotmetro UV-Vis para observar el desplazamiento de bandas basadas en la absorcin
de la luz y la estructura qumica de las antocianinas frente a algunos reactivos como el cido
brico, el acetato de sodio, el tricloruro de aluminio y el tricloruro de aluminio con cido
clorhdrico, en donde se pudo observar el desplazamiento bato crmico de cada una de las
muestras.

Palabras clave: Arndano azul, Fenoles, Antioxidantes.

4
 ABSTRACT

For a good functioning of the organism it is necessary to include within the diet fruits and
vegetables that help to improve the health and to prevent the illnesses. Antioxidants, chemical
compounds found within them, do not help prevent and reduce the oxidation processes
involved in the patterns. Some phenolic compounds are responsible for this antioxidant power
which are contained in representative amounts in blueberries.

The blueberry, occupies the first places between the vegetal foods in quantity as in quality of
antioxidants, reason why it is considered a food with functional properties. Therefore, the
objective of the work is to analyze the antioxidant capacity in this fruit.

The antioxidant capacity was analyzed through the analysis of the UV-Vis spectrophotometer
tests to observe the displacement of bands based on the absorption of light and the chemical
structure of the torches in front of some reagents such as boric acid, Sodium acetate, aluminum
trichloride and aluminum trichloride with hydrochloric acid, where it was possible to observe
the chromato bicarbonate displacement of each one of the samples.
.
Key words: Blueberry, Phenols, Antioxidants.

INTRODUCCIN
5
Existen numerosos estudios que demuestran que los vegetales y frutas son beneficiosos para
la salud y brindan proteccin contra numerosas enfermedades crnicas, las que incluyen
cncer, enfermedades cardio y cerebro vasculares, oculares, y enfermedades
neurodegenerativas.
Este efecto protector de frutas y vegetales en general, se ha atribuido a sus componentes
antioxidantes, entre los que se incluyen los carotenoides, las vitaminas C y E, y los
compuestos fenlicos, particularmente flavonoides y antocianinas (pigmentos naturales
presentes en los vegetales). Los antioxidantes intervienen en la proteccin de los lpidos,
protenas y cidos nucleicos contra el proceso oxidativo iniciado por radicales libres.
Debido a que los radicales libres desempean un importante papel en el desarrollo de
enfermedades, las dietas ricas en frutas y vegetales con altos contenidos de antioxidantes
pueden ser de importancia fundamental en retrasar los daos originados por los radicales
libres y ayudar en la prevencin de estas enfermedades.

El arndano, baya comestible con pulpa dulce y jugosa, es una de las fuentes ms ricas
de fitonutrientes antioxidantes.
Pertenece a la familia Ericaceae, gnero Vaccinium, constituido por cinco especies dentro
de las cuales el Vaccinium corymbosum L. es una de las de mayor importancia comercial.
El arndano se cultiva en todos los continentes siendo su centro de produccin los
Estados Unidos y Canad.
En nuestro pas, este fruto se conoce desde 1994 y su cultivo se extiende por todo el
territorio: desde El Bolsn en Ro Negro, pasando por Azul, Tandil o Mercedes, en Buenos
Aires; Gualeguaych, Concordia y Chajar en entre Ros; y Curuz Cuatia, en Corrientes;
hasta llegar a Famaill en Tucumn (INDEC).
El fruto del arndano contiene principalmente antocianinas, responsables de su
caracterstico color azul, y tambin menores cantidades de quercetina; cidos p-
hidroxibenzoico, protocateico y clorognico; y taninos condensados.

El fruto constituye una excelente fuente de vitamina C; de fibra diettica; de minerales como
manganeso, potasio, hierro y calcio; y presenta adems un bajo nivel de caloras lo que
lo convierte en un producto con variados e importantes beneficios para la nutricin y
salud, transformndose en un componente importante de una dieta sana.

6
CAPTULO
I

7
 I.ANTECEDENTES

1.1.-JUSTIFICACIN

La presente investigacin se enfocar en determinar la presencia de antocianinas en el

extracto etanlico acidificado de Vaccinium corymbosum L. (ARNDANO) mediante un
anlisis espectrofotomtrico obtenindose la longitud de onda ptima; as el presente trabajo
aporta al estudio cientfico sobre especmenes vegetales oriundos del Per, aplicando los
conocimientos terico- prcticos adquiridos en la catedra de qumica analtica instrumental,
de esta manera permite la difusin de la diversidad de nuestros recursos naturales as como la
importancia de la realizacin de este tipo de estudios para la comunidad cientfica.

8
1.2.-HIPTESIS Y VARIABLES

1.2.1. Hiptesis

Hiptesis alternativa (H1)

El extracto acuoso de Vaccinium corymbosum L contiene metabolitos secundarios de

tipo flavonoides (antocianina).

1.2.1. Variables

Variable dependiente

La tcnica espectrofotometrica

Variable independiente

Concentracin del extracto acuoso de Vaccinium corymbosum L

1.3.-OBJETIVOS

Objetivo general

Determinar la presencia de antocianinas en el extracto hidroalcohlico de

Vaccinium corymbosum L
Objetivos especficos

Obtener el metabolito secundario (antocianina) presente en el Vaccinium

corymbosum L mediante tcnicas de extraccin
Aislar el metabolito secundario (antocianina) mediante cromatografa en papel
Determinar la presencia de antocianinas mediante el uso de espectroscopia
ultravioleta-visible

9
1.3.-POBLACION Y MUESTRA

Poblacin

En el presente estudio se consider como poblacin a la familia Ericaceae, del gnero

Vaccinium, arbustos silvestres productores de bayas, dentro de las cules se
determin la presencia de antocianinas mediante el uso de espectroscopia
ultravioleta-visible

Muestra

50 g de Vaccinium corymbosum L arndano

11
CAPTULO
II

12
 II.- ASPECTOS GENERALES:

2.1. DESCRIPCIN DEL ARANDANO

Las races de los arndanos tienen un aspecto fibroso y se distribuyen superficialmente, lo que
las vuelve dependientes de una provisin constante de humedad. En condiciones naturales las
races estn asociadas con hongos micorrizas especficos, con los cuales mantienen una relacin
de mutuo beneficio (simbitica).
Entre las races y la parte area se encuentra la corona, que tiene la capacidad de emitir brotes.
La altura del arndano bajo no supera el medio (1/2) metro. En cambio, el arndano alto en
condiciones de cultivo puede alcanzar alturas de hasta 2,5 m. El arndano ojo de conejo crecera
an ms, pero es contenido mediante la poda.
Las yemas vegetativas, de las cuales se originan las hojas, y las yemas fructferas, que producen
las flores, se distribuyen en forma separada a lo largo de las ramas, a diferencia de otros frutales.
Las hojas son simples, de forma ovada a lanceolada, y caducas, es decir, las hojas se pierden
durante el receso invernal, adquiriendo una tonalidad rojiza en el otoo.
Las flores poseen corola blanca o rosada, reunindose en racimos.
El fruto es una baya casi esfrica, que dependiendo de la especie y cultivar, puede variar en
tamao de 0,7 a 1,5 cm de dimetro, y en color desde azul claro hasta negro. La epidermis del
fruto est cubierta por secreciones cerosas, que le dan una terminacin muy atractiva, como en
el caso de las ciruelas.

FIG 1. Arandanos

13
 2.2. ORIGEN DEL ARANDANO

Las variedades que existen en el Per son material gentico estadounidense, en su mayora
han llegado desde Chile a travs de viveros que se han instalado en el pas. Algunas de las
variedades que se han introducido son oNeil, Duke, Brigitta, Legacy, Misty y Biloxi; debido
a que el Per no ha firmado los protocolos de propiedad intelectual no se han podido ingresar
material gentico de ltima generacin como pueden ser las variedades Palmetto o Jewel.

Fig.2. Tabla Taxonomica del arandano

2.3. DISTRIBUCIN GEOGRAFICA

Presentan una amplia distribucin geogrfica; se encuentran en todos los continentes desde
las zonas templadas y fras (excepto en la Antrtida) hasta regiones neomontaosas tropicales,
donde alcanzan su mayor diversidad. Las que se encuentran presentes en el Neotrpico se
concentran en el noroeste de Sur Amrica (Colombia, Ecuador, Per y Venezuela),
especialmente en bosques montanos hmedos y fros ubicados entre los 1500 y 3000 m de
elevacin. Donde cerca del 50% de las especies neotropicales tienen hbitos de crecimiento
epifito y aproximadamente el 94% son endmicas

2.4. VARIEDADES DEL ARANDANO

De las 30 especies que constituyen el gnero Vaccinium slo un pequeo grupo de ellas tienen
importancia comercial.
Dentro del gnero Vaccinium, las especies ms conocidas y sus variedades son las siguientes,
agrupadas en los siguientes grupos segn sus caractersticas de crecimiento y requerimientos
agroclimticos:

Arbusto norteo o northern highbush (Vaccinium corymbosum septentrionalis) ,

Arbusto sureo o southern highbush (Vaccinium corymbosum meridionalis trtase de
un hbrido) ,
Ojo de conejo o rabbiteye (Vaccinium ashei) ,
14
 Arbusto bajo o lowbush (Vaccinium angustifolium),
Medio alto o half-highs (Vangustifolium X Vcorymbosum),
Arndano siempreverde o evergreen huckleberry (Vaccinium ovatum),
Arndano azul montano o mountain blueberry (Vaccinium membranaceum).
Agraz o mortio (Vaccinium meridionale Sw.), arbusto silvestre de reas fras norandinas
de Ecuador, Colombia, Venezuela.

2.5. COMPOSICIN QUMICA Y VALOR NUTRICIONAL DEL ARNDANO

Estas frutas son de bajo valor calrico por su escaso aporte de hidratos de carbono.
Son especialmente ricas en vitamina C (tienen cantidades mayores que algunos ctricos). La
vitamina C tiene accin antioxidante, al igual que los antocianos y carotenoides. Dicha
vitamina interviene en la formacin de colgeno, huesos y dientes, glbulos rojos y favorece
la absorcin del hierro de los alimentos y la resistencia a las infecciones. Tambin contienen
potasio, que es necesario para la transmisin y generacin del impulso nervioso, para la
actividad muscular normal e interviene en el equilibrio de agua dentro y fuera de la clula.
En general, las bayas silvestres son buena fuente de fibra; que mejora el trnsito intestinal, y
de hierro y calcio, taninos de accin astringente y de diversos cidos orgnicos. Sin embargo,
lo que en realidad caracteriza a estas frutas es su abundancia de pigmentos naturales
(antocianos y carotenoides) de accin antioxidante.
En la alimentacin humana, este tipo de frutas constituyen una de las fuentes ms importantes
de antocianos, que les confieren su color caracterstico y que vienen junto con los cidos
orgnicos, tales como el cido oxlico o el cido mlico, responsables tambin de su sabor.

15
 Fig 3 . Composicin nutricional del arndano (100g)

2.6. COMPUESTOS ANTIOXIDANTES

Los compuestos antioxidantes son esencialmente importantes para los seres vivos,
porque tienen la capacidad de proteger las clulas contra el dao oxidativo, evitando el
envejecimiento y muerte celular La accin antioxidante presente en plantas es
importante debido a que puede ayudar a las personas a combatir enfermedades
provocadas por una reaccin de radicales libres o especies reactivas del oxgeno,
nitrgeno o hierro. Los radicales libres son molculas con un electrn desapareado,
capaces de favorecer reacciones en cadena muy dainas para el organismo,
desencadenando un fenmeno conocido como estrs oxidativo

16
1.6.1. COMPUESTOS FENLICOS

a) FLAVONOIDES

Los flavonoides son pigmentos naturales presentes en las frutas y en los vegetales, protegen
al organismo del dao producido por agentes oxidantes, como los rayos ultravioletas. El
organismo humano no puede producir estas sustancias qumicas protectoras, por lo que deben
obtenerse mediante la alimentacin o en forma de suplementos. La actividad antioxidante de
los flavonoides resulta de una combinacin de sus excelentes propiedades, intervienen en
procesos de defensa ante los radicales libres y actan como captadores de estos radicales una
vez formados, por ello desempean un papel esencial en la proteccin frente a los fenmenos
de dao oxidativo. Los principales subgrupos de compuestos flavonoides son: flavonoles,
flavonas, flavanonas (dihidroflavonas), isoflavonas
B) ANTOCIANINAS

Las antocianinas son uno de los grupos ms importantes de pigmentos que pertenecen a la
clase de los compuestos fenlicos llamados flavonoides, estos pigmentos son responsables de
variadas tonalidades que van del rojo, naranja, violeta, prpura y azul. Las antocianinas estn
presentes en diferentes rganos de las plantas, tales como flores, frutas, tallos, hojas y races.
La principal fuente de antocianina son frutas rojas, principalmente bayas y uvas rojas,
cereales, (principalmente maz morado), vegetales y vino rojo entre las bebidas
Estos compuestos son colorantes naturales que han suscitado inters debido a su carcter no
txico y porque al ser hidrosolubles, se pueden utilizar como colorantes en productos
alimenticios. Adems, debido a sus propiedades antioxidantes, se pueden encontrar numerosas
publicaciones les atribuyen que propiedades beneficiosas para la salud, como la prevencin
de enfermedades cardiovasculares, neuronales, cncer y diabetes, entre otras.
Estos atributos de las antocianinas, colorantes y antioxidantes, resultan de inters a efectos de
estudiar metodologas de extraccin para poder utilizar posteriormente el producto en
aplicaciones tecnolgicas, especialmente como ingrediente en la industria alimentaria e
incorporarlo a alimentos y bebidas.
Para abordar este desafo es conveniente estudiar primero la estructura qumica de estos
compuestos y los distintos factores que pudieren afectar su estabilidad.

17
Figura 4. Estructura bsica y sustituyentes de las antocianinas.

FACTORES QUE AFECTAN SU ESTABILIDAD

Existen diversos factores que influyen en la estabilidad de las antocianinas. La estructura de

stas puede verse afectada en cualquier etapa de un proceso tecnolgico, como por ejemplo
un proceso de extraccin de antocianinas de un material vegetal, como as tambin durante
un tratamiento trmico o durante el almacenamiento de un producto que las contiene. A
continuacin se exponen los factores ms relevantes que afectan a la estabilidad de las
antocianinas.
a) pH
Las antocianinas pueden encontrarse en diferentes formas qumicas dependiendo del pH, es
decir que este factor influye en su estructura y por lo tanto en su estabilidad (Figura I.8). A
pH 1 predomina el catin flavilio que es de color rojo y es la forma ms estable de las
antocianinas (Figura I.8.A), a valores de pH entre 2 y 4 ocurre la prdida de un protn y
adicin de agua, encontrndose las antocianinas preferentemente bajo la formas quinodales
(Figura I.8.B. C y D) de color azul. A pH entre 5 y 6 se observan las especies pseudobase
carbinol, que es incolora (Figura I.8.E), y chalcona, de color amarillo (Figura I.8.F), ambas
bastante inestables. A pH superiores a 7 se produce la degradacin rpida de las antocianinas
por oxidacin con el aire. Esta reaccin se ve afectada, adems del pH, por la presencia de
sustituyentes presentes en el anillo B. A pH entre 4 y 6, pH caracterstico de las frutas y
21
hortalizas frescas o procesadas, se observa una mezcla en equilibrio de las formas catin
flavilio, bases quinodales y carbinol, como as tambin de la forma chalcona; Moldovan et
al., estudiaron la extraccin de antocianinas de frutillas en el rango de pH de 1.0 a 13.0 y
obtuvieron que la mejor extraccin fue al valor ms bajo de pH. En el estudio de cintica de
degradacin de antocianinas presentes en extractos de arndanos agrios (Viburnum opulus
L.) durante el almacenamiento a los pH 3 y 7, obtuvieron que la menor degradacin se
produjo con el valor ms bajo de pH.
Tambin Laleh investigaron sobre la influencia del pH en extractos de antocianinas de 4
especies de berberies, observando que cuanto ms bajo fue el pH menor fue el deterioro de
las antocianinas. De lo expuesto se puede sealar que la acidez tiene un efecto protector
sobre la estructura de las antocianinas, mientras que, cuanto ms elevado es el pH, aparecen
estructuras inestables que se degradan con rapidez. Es por esto que las aplicaciones de las
antocianinas en los sistemas alimenticios son preferentemente usadas en alimentos de acidez
intermedia para que predomine el catin flavilio.

Figura 5. Estructura de las antocianinas a diferentes valores de pH. Donden R1= H o glcido.
R2 y R3= H o metilo.

b) Temperatura
La temperatura es otro de los factores crticos que influyen en la degradacin de antocianinas.
Las conversiones estructurales de las antocianinas son reacciones endotrmicas. Resisten
bien procesos trmicos a altas temperaturas durante cortos periodos de tiempo. Por efecto
del calor (a temperaturas por encima de los 60C) se degradan segn una cintica de primer
orden. En general las caractersticas estructurales que conducen a una mayor estabilidad al
pH son las mismas que conducen a una mayor estabilidad trmica. Por lo tanto las
antocianinas altamente hidroxiladas son menos estables trmicamente que las metiladas,
glicosidadas o acetilada. Incrementos de temperatura provocan prdidas del azcar
glicosilante en la posicin 3 de la molcula y apertura de anillo, con la consecuente
produccin de chalconas incoloras. Investigaron la extraccin de antocianinas de maz
morado a temperaturas entre 25 y 90C. As, obtuvieron que el mayor rendimiento de
22
extraccin se produjo a temperaturas entre 75C y 90C, dependiendo de las dems
condiciones de extraccin. Fan et al. trabajaron en la optimizacin de las condiciones de
extraccin de antocianinas de batata morada donde el rango de temperatura ensayada fue
entre 40 y 80C, logrando la mejor extraccin a la ltima temperatura. En la extraccin de
antocianinas de grosellas negras Cacace y Mazza investigaron el efecto de la temperatura de
extraccin en el rango de 6 y 74C, obteniendo los mayores rendimientos a 30-35C. Laleh
obtuvieron extractos de antocianinas de 4 especies de berberies y lo almacenaron durante 84
das a temperaturas entre 5 y 35C, observando que el deterioro de las antocianinas aument
con el incremento de la temperatura. Tambin Devi et al. llegaron a la misma conclusin al
estudiar la estabilidad de antocianinas extradas de salvado de sorgo rojo y almacenadas en
botellas entre 0 y 70C.
Por otra parte, un estudio sobre la cintica de degradacin de antocianinas durante el
tratamiento trmico de jugo de arndanos, entre las temperaturas de 40 y 80C, seal que
sta fue de primer orden y que la degradacin fue mayor a valores ms altos de temperatura.
Wang y Xu estudiaron tambin la cintica de degradacin de antocianinas, en este caso en
jugo de mora, durante el tratamiento trmico y el almacenamiento y llegaron a la misma
conclusin que Pereira Kechinski et al. Hubo una prdida de antocianinas, tanto durante el
tratamiento trmico como durante el almacenamiento. Esta prdida sigui una cintica de
primer orden. Adems, la degradacin de antocianinas aument con el incremento de la
temperatura. Por su parte, los autores Moldovan et al. publicaron un estudio de cintica de
degradacin de antocianinas presentes en extractos de arndanos agrios (Viburnum opulus
L.) durante el almacenamiento a temperaturas entre 2 y 75C, sealando que la cintica de
degradacin fue de primer orden, siendo el deterioro de las antocianinas ms bajo a 2C.
De lo expuesto se puede decir que, en trminos generales, la bibliografa seala que las
temperaturas ms elevadas provocan un efecto adverso sobre la estructura de las
antocianinas, especialmente durante un tratamiento trmico o el almacenamiento. Sin
embargo, los mejores rendimientos de extraccin de antocianinas de un determinado
producto fueron a temperaturas altas.
Probablemente, este ltimo efecto se deba a la mayor transferencia de antocianinas desde la
matriz que lo contiene hacia el seno de la disolucin extractiva. Por lo tanto, en un proceso
de extraccin de antocianinas de arndano habra que buscar una temperatura de compromiso
que favoreciera el proceso de extraccin pero no perjudicara a la calidad del extracto.

c) Agua
El agua puede actuar como nuclefilo y atacar el catin flavilio en el C-2 formando la base
carbinol incolora segn el mecanismo que se explic en el apartado. Sin embargo, esta
degradacin puede variar, dependiendo de la concentracin de azcares o con el fenmeno
denominado copigmentacin. Cuando los azcares se encuentran a altas concentraciones, la
actividad de agua es baja, por lo que las molculas de agua tienen menores posibilidades de
atacar el catin flavilio para formar la base carbinol. Sin embargo, cuando los azcares estn
en bajas concentraciones la actividad de agua no se ve afectada, por lo que sus productos de
degradacin (hidroximetilfurfural y furfural) aceleran la degradacin de las antocianinas.
Dado que la molcula de agua interviene en reacciones que deterioran las antocianinas,
resulta conveniente su eliminacin para disminuir las probabilidades de ataque nucleoflico
23
al catin flavilio.

ESPECTROS DE FLAVONOIDES EN ESPECTROSCOPIA UV VIS

La variacin de estos rangos depende del modelo de hodroxilacin y del grado de sustitucin
de los hidroxilos: a) los cambios en la sustitucin del anillo A tienden a ser reflejados en la
banda ll de absorcin, mientras que alteraciones en las sustituciones de los anillos B y C
tienden a ser ms aparentes en la banda I; b) la oxigenacin adicional (especialmente
hodroxilacin, causa generalmente un desplazamiento batocrmico de la banda
correspondiente; c) la metilacin o glicosilacin , especialmente de 3,4, 5,7 OH, causa
desplazamiento hipsocrmico de las bandas, no siendo dependientes de la naturaleza del
azcar en el caso de los glicsidos; d) la acetilacin tiende a nulificar el efecto del grupo
OH fenlico en el espectro; e) en flavonas y flavonoles, la presencia de O-Hidroxilo en 3 y
4 generalmente se evidencia por un segundo pico (algunas veces un hombro) en la banda
ll.
El uso de los reactivos de desplazamiento proporciona informacin adicional , til en la
determinacin de la estructura de un flavonoide, as:
El Acetato de sodio causa significativamente ionizacin de nicamente del grupo
hidroxilo ms acido del flavonoide y es usado bsicamente para detectar la presencia
del grupo 7-hidroxilo libre;
El metxido de sodio, causa ionizacin de todos los grupos hidroxilos, la degradacin
del espectro con el tiempo es un buen indicador de la presencia de los grupos
sensibles a lcalis;
El cloruro de aluminio, forma complejos con grupos O-hidroxilo, y con grupos
hidroxil-cetona vecinos; en el primer caso el complejo formado es lbil ante la
presencia del cido de tal modo que ste desaparece con el agregado de HCl, no as
en el segundo caso en que el complejo formado es estable;

El cido brico- Acetato de sodio, forma complejos con los grupos O-dihidroxilo y es usado
para detectar su presencia.

Los flavonoides realizan desplazamientos batocrmicos e hipsocrmicos debido a diversos

reactivos de desplazamiento que son utilizados para elucidar las estructuras y el posible tipo
de flavonoide que est presente en las muestras

Metxido de sodio NaOMe

La adicin de metoxido de sodio, usualmente produce desplazamientos denominados

batocromicos en todas las bandas (BI y BII), causado por la rpida ionizacin de todos los
grupos hidroxilos, esto debido a que se presenta como una base muy fuerte, es por ello que
es difcil de correlacionar el espectro del flavonoide con el desplazamiento; sin embargo un
gran cambio en la Banda I (40-65nm) sin un decrecimiento de la intensidad nos manifiesta
la presencia de un 4-OH libre en flavonas y flavonoides, este grupo hidroxilo tambin se
puede evidenciar con el uso del reactivo de acetato de sodio; pero los flavonoides que carecen
de este grupo (3-OH); aun as presentan cambios batocrmicos en la banda I, pero con
decrecimiento de la intensidad del pico, que nos est indicando la presencia de un grupo 3-
24
OH libre en el anillo B.

Figura 6. Reaccin de desplazamiento del flavonoide con metoxido de sodio y acetato de

sodio.

Acetato de Sodio NaOAc

Este reactivo es una base ms dbil que el metoxido de sodio y como tal se ioniza tan solo a
los grupos hidroxilos ms cidos del ncleo flavonoide (3,7, 4 - OH) y es usado bsicamente
para detectar la presencia de un grupo 7 OH libre , producindose el efecto de
desplazamiento batocrmico de la banda II (5- 20 nm) , mientras que las ionizaciones de 3
y/o 4- OH afectan principalmente a la banda I , incluso si no hay grupos libre en 3- OH , la
banda I muestra un pronunciado hombro desplazado , similar cuando se usa NaOmE. Este
reactivo al igual que con el metoxido tiende a agrandarse durante el tiempo, pero en este caso
demora ms minutos y es ms lento que el NaOMe.

Reaccin del acetato de sodio- NaOAc

El acetato de sodio es una base dbil que se ioniza lentamente a los grupos OH libres de una
molcula, se puede apreciar en la banda II el desplazamiento batocrmico de 256 a 272 nm
(16 nm) que posiblemente puede identificar C7-OH en el anillo A, adems se observa un
desplazamiento batocrmico de la banda I de 372 a 380 nm (8 nm) esto posiblemente se deba
a la ionizacin de C4- OH del anillo B, la regeneracin de la molcula es ms lenta a
comparacin del metxido de sodio.

Acetato de sodio cido Brico NaOAc / H3BO3

En presencia de acetato de sodio, el cido brico se compleja con grupos O- hidroxilos en

todos los lugares del ncleo del flavonoide excepto en C-5, -6 producindose
desplazamientos batocrmicos en la banda I, dependiendo de la posicin de los grupos O- di
hidroxilos.
Las flavonas y flavonoides que contienen un anillo B con grupo O- di hidroxilos, muestran
un desplazamiento batocrmico de 12- 30 nm en la banda I en presencia de NaOAc / H3BO3.
Pero n el anillo B, si se presentaron grupos O- di hidroxilos (C- 6,7 y C-7,8) de los
flavonoides, son detectados por el efecto de NaOAc / H3BO3, en su espectro con
desplazamientos batocrmicos de 5-10 nm en la banda II, pudiendo ser un diagnstico de
flavona o flavonol con grupos de 6, 7 o 7,8 di hidroxilos.

25
Reaccin con cido Brico- NaOMe y NaOAc

El desplazamiento batocrmico de las bandas espectrales en medio alcalino (sea NaOMe y

NaOAc) el espectro nos permite identificar que hay desplazamiento batocrmico de la banda
I a 372 a 388 nm (16 nm) es posible que exista la formacin de complejos con orto hidroxilos
en las posiciones C3'- y C4'-OH en el anillo B , y en el caso de la banda I no presenta el
desplazamiento 256 nm pero si forma picos de absorcin de 280 nm y 292 nm posiblemente
sea debido a la descomposicin de la banda en el anillo A, no existiendo orto hidroxilos en
este anillo.

Fig.7. Complejo de flavonoide con os grupos oxidrilos vecinos, produce desplazamiento

con el tratamiento de acido borico acetato de sodio

Tricloruro de aluminio AlCl3 acido clorhdrico HCL

El espectro de AlCl3 muestra un desplazamiento batocromico de la banda II de 254 nm a

268 nm (14nm), mientras que la banda I muestra un desplazamiento batocromico de 334 nm
a 352 nm (18nm), interpretando estos desplazamientos como la formacin de complejos
entre algunos hidroxilos de los anillos aromticos de la estructura qumica investigada.
Luego de adicionar HCl al espectro de AlCl3, manifiesta que nos revela desplazamiento
batocromico de la banda II de 268 nm a 276 nm (8nm), posiblemente se deba a que la
reaccin con AlCl3 es lenta al reaccionar y complejar la molcula en el caso de la banda I,
se observa un desplazamiento hipsocromico de 352 nm a 336 m (16nm). De esto se puede
inferir que existe un C5-OH (banda II, anillo A) debido a que es un desplazamiento acido
estable por la presencia del complejo AlCl3, pero que es inestable en presencia de acidos,
posiblemente pueda deber a la presencia de un C3:C4-OH, esta reversibilidad de la banda I
tambin puede indicar que C3, esa ausente o glicosidado, por otro lado tambin se muestra
una inflexin a la longitud de onda de 400 nm aproximadamente, esto debido a que la
molcula tiende a descomponer con el paso del tiempo.

Reaccion con tricloruro de aluminio AlCl3 cido clorhdrico HCl

26
El espectro de quercetina estndar, presenta un desplazamiento batocromicos al reaccionar
con el AlCl3, la cual es mas evidente en la banda I que se desplaza de 372 nm a 452 nm (80
nm), mientras que la banda II se desplaza de 256 nm a 272 m (16 nm), posteriormente al
agregar HCl cc, la banda I empieza a volver a su estructura original realizando un
desplazamiento hipsocromico de 452 nm a 428 nm (24 nm), mientras que la banda II, su
desplazamiento es casi imperceptible de 272 a 268 nm (4 nm) , estos resultados podran
deberse a la posible presencia de un C5 OH libre (banda II, anillo A), por otro lado
observando la banda I, se postula que puede presentar un C3 Oh libre (anillo C y C4 OH
libre (anillo C, banda I) y un ortohidroxilo en el anillo B (posiblemente en C3 y C4 OH)

Fig.
8.Reaccion del flavonoide con cloruro de aluminio (III) seguido del tratamiento con acido
clorhdrico.

27
CAPTULO
III

28
III. MATERIALES Y MTODOS

3.1. ESPECIE DE ESTUDIO

Arandano Vaccinium corymbosum L

3.2. MUESTRA:

50 g de Vaccinium corymbosum L arandano del distrito de , departamento de , Per.

3.3.- LUGAR DE EJECUCIN

El presente trabajo de investigacin se realiz en los laboratorios de Qumica Analtica

del Instituto de Ciencias Farmacuticas y Recursos Naturales Juan de Dios Guevara,
tambin nombrar a la catedra de Qumica Orgnica de la Facultad de Farmacia y
Bioqumica, Universidad Nacional Mayor de San Marcos

3.4. MATERIALES:

3.4.1. Materiales, equipos, reactivos y soluciones

a) Materiales
Soporte universal
Matraces Erlenmeyer (100, 250 mL)
Micropipetas
Pipetas de vidrio (1, 2, 5, 10 mL)
Probetas de vidrio (50, 100, 250 mL)
Tubos de ensayo
Bagueta
Vasos de precipitados de vidrio (50, 100, 250 mL).
Gradilla de tubos de ensayo
Papel Watman
Capilares
Celdas de vidrio y de cuarzo
Papel filtro
Embudo
Frasco mbar
Papel indicador

b) Equipos
Balanza gramera (Acculab ALC 210.4)
Espectrofotometro
Cuba cromatografica

29
c) Reactivos

Agua destilada
AlCl3
Acetato de sodio
HCl
Acido Borico
Etanol 70
BAW (n- Butanol Acido Acetico glacial agua)

30
 3.5. MTODOS:

METODOLOGA PARA PREPARACIN DE UN EXTRACTO ETANLICO DE

ARNDANOS (Vaccinium corymbosum L)

Se procedi a pesar 50 gr de fruto entero de Vaccinium corymbosum L arandano en una

balanza gramera de marca.
Se prepar el etanol a 70 a partir de etanol puro de 96 diluido en agua destilada a volumen
conveniente. Se acidifica con 8 gotas de HCl fumante hasta alcanzar un pH 2.
Se mezcla los 50 gr del fruto con 100 ml del solvente preparado en un vaso precipitado, y se
somete a bao maria con una temperatura de 75 C por 1 hora.
Se deja enfriar para luego realizar un ultrafiltrado.

METODOLOGA PARA EL AISLAMIENTO DE ANTOCIANINAS EN Vaccinium

corymbosum L POR EL MTODO DE CROMATOGRAFA EN PAPEL
DESCENDENTE

Se procedi a sembrar la muestra en papel Wattman n 3 ( 15 x 52) en bandas aplicando la

muestra 50 veces.
Se prepar el sistema de solventes BAW (n Butanol Acido Actico glacial- Agua destilada
4:1:5) dejndolo reposar por 24 horas.
Se procedi a colocar el papel con las bandas previamente aplicadas a la cmara
cromatografica dejndolo reposar por 16 horas.
Se utiliz vapores de amonio para acentuar mas las corridas cromatografas, se revelo con Luz
Uv, observndose manchas correspondientes a flavonoides.
Para corroborar que estas manchas correspondan a antocianinas, se hizo una solucin
hidrometanolica con las bandas en papel obtenidas.
A 5 ml de la solucin, se agrego una sal de plomo, dando un precipitado azul soluble en cido
actico glacial, afirmndonos asi que es una antocianina.
Tambin se realizo la reaccin de Shinoda, para reconocer flavonoides.

METODOLOGA PARA DETERMINACIN DE ANTOCIANINAS EN

Vaccinium corymbosum L POR EL MTODO DE ANLISIS
ESPECTROFOTMETRO EN EL UV-VISIBLE

Preparacin de la solucin blanco

Se prepar 50 mL de solucin blanco utilizndose 7.5 mL de HCl 1 N, y enrasndolo con
alcohol de 96 en una fiola de 50 mL, el motivo principal es comprobar si existe absorbancia
alguna del solvente a cierta longitud de onda para considerarla como una interferencia en la
lectura y cambiar de sistema de solventes.

Determinacin por espectrofotometra UV- Visible

Se trabaj con un espectrofotmetro genesys 10s UV-Vis marca thermo scientific, se realiz
medicin de la lnea base utilizando la muestra en blanco colocada en una celda de cuarzo de
31
3.5 mL, y se coloc la muestra en otra cuba de cuarzo realizndose el barrido inicialmente con
intervalos de 2 nm, desde 200nm hasta 600nm.

Desplazamiento de bandas por espectrofotometra UV- visible

Se prepar 4 solventes para identificar antocianinas (AlCl3, Acetato de sodio, AlCl3- HCl y cido
Brico) en nuestro extracto etanlico de Vaccinium corymbosum L arandano diluyendo
cantidades convenientes hasta lograr una concentracin 1N.
Se procedi a separar la muestra en 4 tubos de ensayo; al primer tubo se le agrego 4 gotas de
AlCl 3 1N, al segundo Acetato de sodio 1N, al tercero AlCl3- HCl 1N y al ltimo cido
Brico 1N.
Se coloc cada muestra en una celda hacindose el barrido de 200nm a 600nm dndonos
desplazamientos distintivos a los picos caractersticos de la muestra problema.

Desplazamiento de bandas por espectrofotmetro UV-Visible con muestras

acidificadas

Se prepar etanol de 70 a un pH de 2 y a partir de el se prepar la muestra patrn y las

soluciones con los solventes anteriormente descritos.
Se realizo el barrido con un intervalo de 2nm, desde 250 nm hasta 650nm.

32
CAPTULO
IV

33
IV.RESULTADOS:

4.1. DETERMINACIN DE PH

Se pes 50 gr de Vaccinium corymbosum L en una balanza gramera, se prepar el

etanol a 70 y se acidifica con 8 gotas de HCl fumante hasta alcanzar un pH 2. (ver
fig. 7)

Se mezclan en un vaso precipitado, y se somete a bao mara a una temperatura de

75C, moviendo cada 5min con una bagueta por 1 hora, nuestra solucin cada vez se
volva ms coloreada. (ver fig. 7)

B C
Fig.9 A.-Pesado del fruto (50 gr.).
B.-Conversin de alcohol a pH 2 con HCl
C.- Colocacin de muestra en la solucin cida.

34
4.2 CROMATOGRAFA

Los flavonoides se separaron usando bandas en papel Wattman n 3 (15 x 52) aplicada
50 veces y usando el sistema de solventes BAW (n Butanol cido Actico glacial-
Agua destilada 4:1:5), y finalmente se coloc el papel con las bandas en la cmara
cromatogrfica por 17 horas. (ver fig. 8)

Se utiliz vapores de amonio para acentuar ms las corridas cromatografas, se revelo

con Luz UV, observndose manchas correspondientes a flavonoides y de las bandas
fluorescentes las cuales son relacionadas con la estructura de diferentes tipos de
flavonoides. (ver fig. 8)

Para corroborar que estas manchas correspondan a antocianinas, se hizo una solucin
hidrometanolica con las bandas en papel obtenidas, y a 5 ml de la solucin, se agreg
una sal de plomo, dando un precipitado azul soluble en cido actico glacial, lo cual nos
confirma la presencia de antocianina en la muestra, tambin se realiz la reaccin de
Shinoda, la cual tambin nos dio color amarillo- rojo que determina la presencia de
flavonas, confirmando la presencia de flavonoides. (ver fig. 8)

Fig.7 A.-Pesado del fruto (50 gr.).

B.-Conversin de alcohol a pH 2 con HCl
C.- Colocacin de muestra en la solucin cida.

A B

Fig.8 A.-Cromatografa en bandas.

B.-Revelado con luz UV.
C.- Reaccin con sol. Hidrometanolica.

C A

Fig.10 A.-Cromatografa en bandas.

B.-Revelado con luz UV.
C.- Reaccin con sol. Hidrometanolica.

35
4.3 REACCIN CON TRICLORURO DE ALUMINIO ALCL3 CIDO
CLORHDRICO HCL

El espectro presenta un desplazamiento batocrmicos al reaccionar con el AlCl3, la cual es ms

evidente en la banda I que se desplaza de 542 nm a 550 nm (8 nm), mientras que la banda II se
desplaza de 280 nm a 286 m (6 nm), posteriormente al agregar HCl cc, la banda I empieza a
volver a su estructura original realizando un desplazamiento hipsocromico de 550 nm a 542 nm
(8 nm), mientras que la banda II, su desplazamiento es casi imperceptible de 286 a 284 nm (2
nm) , estos resultados podran deberse a la posible presencia de un C5 OH libre (banda II,
anillo A), por otro lado observando la banda I, se postula que puede presentar un C3 Oh libre
(anillo C y C4 OH libre (anillo C, banda I) y un ortohidroxilo en el anillo B (posiblemente en
C3 y C4 OH)

Figura 11. La muestra con el reactivo de desplazamiento AlCl3.

36
 Figura 12. La muestra con el reactivo de desplazamiento AlCl3/HCl.

4.4 REACCIN DEL ACETATO DE SODIO- NAOAC

El acetato de sodio es una base dbil que se ioniza lentamente a los grupos OH libres de una
molcula, se puede apreciar en la banda II el desplazamiento batocromico de 280 a 288 nm (8
nm) que posiblemente puede identificar C7-OH en el anillo A, adems se observa un
desplazamiento batocrmico de la banda I de 542 a 564 nm (22 nm) esto posiblemente se
deba a la ionizacin de C4- OH del anillo B, la regeneracin de la molcula es ms lenta a
comparacin del metxido de sodio.

Figura 13. La muestra con el reactivo de desplazamiento Acetato de sodio.

37
4.5 REACCION CON CIDO BORICO

El espectro nos permite identificar que hay desplazamiento batocrmico de la banda I de 542
nm a 544 nm (2nm) es posible que exista la formacin de complejos con grupos
ortohidroxilos en las posiciones C3 y C4 OH en el anillo B, y en el caso de la bando II, no
muestra un desplazamiento posiblemente sea debido a la descomposicin de la banda en el
anillo A, no existiendo ortohidroxilos en este anillo.

Figura 14. La muestra con el reactivo de desplazamiento cido Brico.

Figura 15. La muestra con los reactivos de desplazamiento.

38
Banda II Banda I
MP
280nm 542nm
cido brico
280nm 544nm
Acetato de sodio
288nm 564nm
AlCl3
286nm 550nm
AlCl3/HCl
284nm 542nm

39
 DISCUSIN

Comparando con otros resultados, la extraccin de antocianinas es comnmente llevada a cabo

con metanol o etanol conteniendo una pequea cantidad de cido (15%, HCl 1M) con el
objetivo de obtener la forma del catin flavilio, el cual es estable en un medio altamente cido.
No hay diferencia significativa en lecturas de absorbancia o eficiencia de extraccin entre el
etanol y metanol. Es preferible usar etanol ya que es menos txico, particularmente en usos
alimenticios y ensayos clnicos. Adicionalmente, si los extractos contienen materiales lipdicos,
la adicin de un solvente orgnico tal como hexano al extracto puede eliminar algunas
sustancias que contenga dichos materiales. El cido puede causar hidrlisis parcial de las
fracciones acil en antocianinas aciladas, especialmente en aquellas con cidos dicarboxlicos
tales como cido malnico, por lo que el uso de cidos dbiles es deseable, tal como cido
tartrico o ctrico para mantener los sustituyentes dicarboxlicos intactos. El pH tambin ha
mostrado que tiene una influencia significante sobre el color de los extractos de antocianinas,
las lecturas de absorbancia y la recuperacin del extracto. A valores de pH ms bajos (pH < 2),
los extractos de trigo azul y morados exhibieron un cambio de color rojo a rojo oscuro despus
de la extraccin, mientras a pH ms alto (pH > 4), los extractos presentaron un color amarillo.
Comparando con otros trabajos, se compar la extraccin con dos disolventes (metanol al
0.01% HCl y mezcla cloroformo-acetona) en la determinacin de los espectros de absorcin
mediante el mtodo del pH-diferencial en las antocianinas extradas del fruto del cerezo dulce
(Prunus Avium) encontrndose que no hay alguna diferencia significativa en la determinacin
del pigmento monomrico de la antocianina calculada como cianidina-3-glucsido en el fruto
completo, la piel y pulpa, as tambin se midi en el extracto del fruto completo el porcentaje
del color polimrico como ndice de degradacin y formacin del complejo antocianina-tanino
en presentes en el fruto.

Respecto las propiedades espectrales son a menudo usadas para la caracterizacin de

antocianinas, especialmente para identificar el tipo de antocianina. El anlisis espectromtrico
UV es la tcnica usada comnmente para identificar y cuantificar antocianinas. Como se
describi anteriormente, el espectro de absorcin de las antocianinas depende del pH. La
absorcin mxima a 520-540 nm en la regin visible es la longitud de onda ms comn usada
en la medicin espectrofotomtrica de antocianinas. Qumicamente las antocianinas son
glucsidos de las antocianidinas, es decir, estn constituidas por una molcula de antocianidina,
que es la aglicona, a la que se le une un azcar por medio de un enlace -glucosdico. El color
de las antocianinas depende de varios factores intrnsecos, como son los sustituyentes qumicos
que contenga y la posicin de los mismos en el grupo flavilio; por ejemplo, si se aumentan los
hidroxilos del anillo fenlico se intensifica el color azul, mientras que la introduccin de
metoxilos provoca la formacin del color rojo. Las antocianinas son interesantes por dos
razones. La primera por su impacto sobre las caractersticas sensoriales de los alimentos, las
cuales pueden influenciar su comportamiento tecnolgico durante el procesamiento de
alimentos, y la segunda, por su implicacin en la salud humana.

Segn los resultados obtenidos, los 3 picos fueron 210, 275, 545 nm; que presentaron una
absorbancia de 2,755; 0,531 y 0,640; respectivamente. Estos tipos de antocianinas se
determinan de las dos bandas de absorcin que todas ellas dan, una regin UV (260-280 nm) y
otra en la regin visible (490-550 nm). En casos particulares las antocianinas pelargonidina
(520 nm), delfinina (546 nm) y sus variantes glicosdicas tendrn una absorbancia mxima de
40
10 a 15 nm menor. Las sustituciones glicosdicas aparecen con una absorbancia en 440 nm y la
presencia de sustituciones glicosdicas en otras posiciones como los glicsidos en la posicin 3
y 7, pueden definirse porque dan diferentes curvas espectrales. La presencia de acilaciones de
cido cinmico es revelada por una tercera banda de absorcin den el rango 320-360 nm y su
cociente con la mx da el nmero de acilaciones. Los colores y por tanto las formas espectrales
de las antocianinas tambin captan en presencia de iones hierro ya que pueden formar
complejos con los sustituyentes hidroxilo de las antocianinas. El acomplejamiento en la
posicin 3 tiene un efecto batocrmico. Los metales, como el hierro tambin pueden generar
un flujo de electrones sobre las antocianinas. Las antocianinas separadas son detectadas y
cuantificadas a 525 nm y la identificacin de antocianinas est basada en los tiempos de
retencin correspondientes y espectros ultravioleta visibles (UV-Vis) comparado con la de los
estndares autnticos puros tales como delfinidina-3-glucsido, delfinidina-3-rutinsido,
cianidina-3-glucsido, cianidina3galactsido, cianidina-3-rutinsido, peonidina-
3glucsido,petunidina-3-glucsido,pelargonidina -3-glucsido y cloruro de cianidina que estn
comercialmente disponibles. El contenido total de antocianinas es calculado en g/g usando
una curva estndar para cianidina-3-glucsido o delfinidina-3glucsido (las antocianinas ms
comunes en granos). Los espectros de absorcin UV-Vis de una antocianina puede proveer
informacin sobre la naturaleza de la antocianidina, modelo de glucocilacin y posiblemente
de acilacin. Las antocianinas tienen un rango de absorcin amplio al final del azul del espectro
visible con una absorcin mxima observada en las regiones de 500-535 nm. En adicin, la
electroforesis capilar (CE) ha sido usada para separar los compuestos inicos de antocianinas
por su carga.

CONCLUSIONES

Se verifico la presencia de antocianinas en el extracto etanlico acidificado del fruto de

Vaccinium corymbosum L por medio de la absorcin del extracto a diferentes longitudes
de onda.

Se obtuvo el extracto etanlico acidificado del fruto de Vaccinium corymbosum L por

medio del mtodo de maceracin.

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