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Facultad de Ciencias Exactas

Fsicas y Naturales

Lic. PEDRO ELAS PATIO MARTNEZ


Lic. EDGAR ENRIQUE RAMREZ PARRA

Facultad de Ciencias Exactas Fsicas y Naturales


Universidad de Santander
Telfono (57) 6516500 Ext 253 Fax (57) 6516492

BUCARAMANGA
2006
Justificacin

Durante el proceso de formacin del estudiante de la UDES, los


conceptos tericos requieren ser corroborados mediante la
experimentacin los cuales muchos de ellos se privilegian al interior
de las prcticas de laboratorio. Para dichas prcticas el alumno debe
utilizar una serie de sustancias y/o soluciones de reactivos qumicos
los cuales son preparados por laboratoristas o docentes.

La preparaciones de las sustancias o soluciones de reactivos qumicos


requieren especial cuidado ya que no se trata de una simple mezcla
de sustancias; por el contrario hay que seguir unos parmetros para
cada sustancia teniendo en cuenta las cantidades, la forma de
prepararlos y cuidados bsicos.

El presente manual permitir a los laboratoristas o docentes tener


una gua para la preparacin de las diferentes soluciones utilizadas en
las practicas de la Facultad de Ciencias Exactas Fsicas y Naturales

Pedro Patio
CUIDADOS BASICOS Y NORMAS DE
BIOSEGURIDAD PERSONAL

La preparacin de las soluciones es un


Proceso que requiere todos los cuidados
bsicos posibles y el cumplimiento de
normas de Bioseguridad personal, ya que en
dicha preparacin se esta expuesto a qumicos que
son altamente txicos y nocivos para la salud humana

CUIDADOS BASICOS

Que la balanza donde se pesan las sustancias este debidamente


nivelada y calibrada.
Al terminar el pesaje de las sustancias la balanza debe quedar
completamente limpia.
La vidriera donde se preparan los soluciones debe estar
completamente limpia y en algunos casos estril.
Las soluciones que lo requieran deben almacenarse en frascos
oscuros para evitar procesos de oxidacin por accin de la luz.
Las soluciones deben codificarse, teniendo en cuenta: nombre,
concentracin, fecha de preparacin, fecha de vencimiento y
cdigo de riesgos.
Siempre se deben mezclar lentamente los cidos fuertes sobre el
agua.
La preparaciones de cidos fuertes o reactivos voltiles debe
hacerse en las campanas extractoras de gases.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD PERSONAL

Usar guantes desechables o guantes de nitrilo de acuerdo a la


preparacin que se realice
Utilizar bata, mascara artigases y gafas de seguridad, siempre que
se prepare una solucin.
No realizar preparaciones bajo condiciones anormales de salud
como: fiebre, problemas respiratorios, cefalea, mareos, etc.
En caso de inhalar alguna sustancia buscar la zona mas aireada de
la zona de preparacin de reactivos o fuera de esta y consultar un
mdico.

SOLUCIONES
AGUA DE BROMO

Pesar 4,17 gr. de bromo en 100 ml de agua destilada o agua de


bromo en tetracloruro de carbono.

Cuidados: solucin altamente txica para el organismo 1


Uso: Para determinacin de compuestos orgnicos

ACETO-ORCEINA

Pesar 2 gr de orceina, y adicionarle 60 ml de cido Actico Glacial


y 40 ml de Agua destilada, y someter a ebullicin por 2 minutos,
dejar enfriar y luego filtrar. Filtrar por lo menos cada 2 meses

Cuidados: Txicos 1y corrosivos


Uso: Para tincin de material nuclear (cromosomas)

ACETO CARMIN

Pesar 0,5 gr de carmn, adicionarle 45 ml de cido actico glacial


y completar con 55 ml de agua destilada

Uso: Para tincin de material nuclear (cromosomas)

Cuidados: Txicos 1 y corrosivos

ACIDO CLORHIDRICO 2.5 N

Medir 20.75 ml de HCl 37%, aforar a 100 ml con H2O destilada


Cuidados: Txicos 1 y corrosivo
Uso: En pruebas de divisin celular (mitosis)

ALCOHOL- CETONA
Medir 70 ml de Alcohol Etlico absoluto y completar a 100 ml de
solucin con Acetona pura

Cuidados: Comburente
Uso: Decolorante para la coloracin de Gram

ACIDO CLORHIDRICO 0.1 N

Medir 50 ml de agua destilada, adicionarle 0,83 ml de HCl 37% y


completar a 100 ml con agua destilada

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Para titulacin cidobase y pruebas cualitativas de pH.

ACIDO SULFURICO 1 M

Medir 49 ml de cido Sulfrico y aforar a 1000 ml con agua


destilada

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Para titulacin cidobase

ACIDO ACETICO 1 N

Medir 60.05 ml de cido actico 100% y aforar a 1000 ml con agua


destilada.

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Pruebas cualitativas de pH.


AZUL DE METILENO 1%

Pesar 1 gr. de azul de metileno y disolver en 100 ml de agua


destilada hasta obtener una solucin uniforme

Cuidados: Txicos 1
Uso : Para tincin de tejidos animales (epitelio bucal) y tejidos
vegetales, pruebas de difusin celular

ALCOHOL ACIDO 3%

Medir 97 ml de alcohol etlico absoluto, adicionarle con mucho


cuidado por las paredes del recipiente 3 ml de cido Clorhdrico al
37%

Cuidados: Comburente y corrosivos

Uso: Para coloracin de Microbiolgica

ACIDO OXALICO 1 N

Pesar 6,3 gr de cido oxlico y aforar a 100 ml con H2O destilada

Uso: Para titulacin de cido-base

ACIDO NITRICO 3M

Medir 50 ml de Agua Destilada, adicionarle 29.1 ml de cido ntrico al


65% luego completar a 100 ml con H2O destilada

Cuidados: Txicos y corrosivos

AZUL DE BROMOTIMOL

Pesar 0.1 gr. de azul de bromotimol y diluirlo en 100 ml de alcohol


etlico al 20 %

Uso: Indicador para titulacin cido-base


BARFOED

Medir 13.3 gr. de acetato de cobre en 200 ml de H2O, luego


adicionarle 1.8 ml de cido actico glacial

Cuidados: Txicos y corrosivos

Uso: Diferenciacin los Monosacridos reductores de los Disacridos


reductores

BIAL

Pesar 1.5 gr. de orcinol y disolverlo en 500 ml de HCl concentrado y


aadir 20 gotas de Fe Cl3 1%

Cuidados: Txico y corrosivo

Uso: Para identificar pentosas

BIURET

Pesar 3 gr. de CuSO4 .5H2O, adicionarle 9 gr. de tartrato de sodio y


potasio y disolver en 500 ml de NaOH 0.2 M; Aadir 5 gr. de KI y
completar a 1000 ml con NaOH .
(NaOH 0.2 M: 8 gramos de NaOH en 1 litro de agua)

Uso: Para determinacin de protenas(Enlace peptdico)

Cuidados: Txico y corrosivo

BENEDICT

Solucin A:
Pesar 173 gr. de Citrato de sodio, adicionarle 100 gr. de Na2CO3
completar a 800 ml de H2O destilada. Filtrar y completar hasta 850
ml de H2O.
Solucin B:
Pesar 17.3 gr de CuSO4 y disolverlo en 150 ml de agua destilada
Disolver suavemente la solucin B en la A agitando continuamente.

Uso: Para determinacin de carbohidratos reductores

Cuidados: Txico y corrosivo


BUFFER DE FOSFATOS

Solucin I:
Pesar 13.8 gr. De NaH2PO4 y disolverlo en 250 ml de H2O destilada
Solucin II:
Pesar 35.85 gr. De Na2HPO4 y disolverlo en 500 ml de H2O destilada

Mezclar 212.5 ml de solucin I + 37.5 de solucin II y aforar a 500


ml con H2O destilada

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Extraccin de DNA

BUFFER LISIS II

Medir 4.8 ml de EDTA Na 0.5 M pH 8.0 y adicionarle 0.438 gr NaCl


y aforar a 1000 ml con agua destilada

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Extraccin de DNA

BUFFER LISIS I

Pesar 103 gr. de sucrosa, adicionarle 10 ml de triton x100,


adicionarle 10 ml de Tris-HCl 10mM. pH 7.5 y 5 ml de MgCl2 1M
aforar a 1000ml con H2O destilada
destilada.
(Tris-HCl 10mM. PH 7.5)=0.15756 gr 100 ml s/n

Para 500ml (51.5 gr. Sucrosa, 5 ml triton x 100+ 5 ml tris + 2.5 ml


Mgcl2 1M).

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Extraccin de DNA


BFER DE EXTRACCIN

Mezclar las siguientes sustancias:


Tris HCl pH 8.0 100 mM, EDTA 50 Mm, NaCl 500 mM, B-
Mercaptoetanol 10 mM y SDS 1.3%.
Completar con agua destilada en baln aforado acorde a la cantidad
que se vaya a preparar, posteriormente autoclavar

Cuidados: Txicos 1 corrosivos

Uso: Extraccin de DNA

BFFER DE DILUCIN (TE)

Mezclar las siguientes sustancias:


Tris HCl pH 8.0 50 mM, EDTA 10 Mm

Completar con agua destilada en baln aforado acorde a la cantidad


que se vaya a preparar, posteriormente autoclavar

Cuidados: Txicos 1 corrosivos


Uso: Extraccin de DNA

BFFER TBE 5X

Mezclar las siguientes sustancias:


Pesar 54 gr. de Tris Base, adicionarle 20 ml de EDTA 0.5 M y 27,5
gr de cido Brico Completar con agua destilada en baln aforado a
la cantidad necesaria, posteriormente autoclavar

Cuidados: Txicos 1 corrosivos


Uso: Extraccin de DNA
BUFFER PARA ACTIVIDAD ENZIMATICA

Solucin A :
Fosfato cido de disodio (Na2HPO4 ) 0.2 M

Solucin B :
cido ctrico (C6H8O7. H2O) 0.1 M

BUFFER pH 5.0 (515 ml S/N A + 485 ml S/N B).


BUFFER pH 6.8 (772 ml S/N A + 227,5 ml S/N B)
BUFFER pH 8.0 (972,5 ml S/N A + 27.5 ml S/N B).

CLORURO DE SODIO 0.1 M

Pesar 5.85 gr. de NaCl y aforar a 1000 ml con H2O destilada

Uso: Para Fenmenos de membranas

DAMASHECK

Pesar 8 gr. de sucrosa, adicionarle 0.4 gr. de Citrato de sodio y 0.15


gr. de azul de cresilo. Completar a 100 ml de H2O destilada.
Adicionarle 3 gotas de formol 37 %

Uso: Para recuento de reticulocitos

|
DRABKIN

Pesar 0.05 gr de Cianuro de Potasio (KCN), adicionarle 1 gr. de


bicarbonato de sodio (NaHCO3) y 0.2 gr. de ferrocianuro de potasio
(K3Fe(CN)6)
Completar a 1000 ml con H2O destilada.

Uso: Para Recuento en Hematolgico

Cuidados: Txicos 1 corrosivos


2,4 DINITROFENILHIDRIZINA

Pesar 3 gr. de 2.4 dinitrofenilhidrizina y disolver en 15 ml de H2SO4


concentrado y disolver en 20 ml de agua destilada y 70 ml de Etanol
absoluto, decantar y utilizar el filtrado.

Uso: Indicador

Cuidados: Txicos 1

DISOLUCION DE FERROCIANURO

Pesar 1.65 gr. de K3(Fe(CN)6) recristalizado, adicionarle 10.6 gr.


carbonato de sodio anhdrido y aforar a 1000 ml de H2O destilada.
Guardar en frasco oscuro (duracin 2 meses) .

Uso: Indicador

Cuidados: Txicos 1
ETANOL 0.6 M

Medir 34.9 ml de alcohol etlico absoluto y completar a un 1 litro de


solucin con H2O destilada

Uso: Para Fenmenos de membrana.

ERLICH (PRUEBA)

cido sulfanilico 0.5 % en HCl 2% con solucin de NaNO3 0.5% y


Na2CO3

FOUCHER

25 gr. de tricloroacetico en 100 ml de H2O y 10 ml de cloruro frrico


al 10 %
FEHLING A

Pesar 34.6 gr. de CuSO4 .5 H2O (vitriolo azul) y disolverlo en 500 ml


de H2O destilada

Cuidados: Txicos 1
Uso: Se utiliza conjuntamente con el Fehling B para
determinacin de azucares reductores

FEHLING B

Pesar 173 gr. de tartrato de Na y K ( sal de Rochelle) se le aaden


62.5 gr. de NaOH y se lleva hasta 500 ml de H2O

Cuidados: Txicos 1 y corrosivo

Uso: Se utiliza conjuntamente con el Fehling A para determinacin


de azucares reductores

FENOLFTALEINA

Pesar 0.1 gr. de fenolftaleina y disolverlo en 100 ml de alcohol etlico


al 96 %

Uso: Indicador cido-Bsico

Cuidados: Txicos 1
GLUCOSA 0.1 M

Pesar 1.8 gr de glucosa y llevarlo a 100 ml de H2O destilada


Uso: Para Fenmenos de membrana.

GLICEROL 0.6 M

Medir 4.39 ml de glicerol y llevarlo a 100 ml de H2O destilada


Uso: Para Fenmenos de membrana.
HAYEN

2.5 gr. de sulfato de sodio


0.5 gr. de cloruro de sodio
0.25 gr. cloruro de mercurio
completar a 1000 ml de H2O

HIDROXIDO DE SODIO 1M

Pesar 4.0 gr. de NaOH y llevarlo a 100 ml de H2O destilada

Nota: La disolucin del NaOH en el agua se debe realizar en la


cmara extractora de gases

Uso: Diferentes usos, principalmente Titilacin cido-Bsico

Cuidados: Corrosivo

JUGO GASTRICO ARTIFICIAL

Medir 40 ml de cido Actico 0.1 N, adicionarle 15 ml de cido


Clorhdrico 0.1 N y aforar a 100 ml con agua destilada

Uso: Titilacin cido-Bsico

Cuidados: Corrosivo

LUCAS

Pesar 17 gr. de ZnCl2 y adicionarle 12 ml de HCl concentrado en


bao fro, agitar continuamente, prepararlo cada vez que se utilicen
y guardar en nevera.

Uso: Diferenciacin de alcoholes primarios, secundarios y terciarios

Cuidados: Txico 1 y corrosivo


LUGOL

Tejidos vegetales Parsitos


0.5 gr. de yodo 0.5 gr. de yodo
1 gr. de yoduro de potasio 1 gr. de yoduro de potasio
100 ml de agua destilada 300 ml de agua destilada

Uso: Colorante

Cuidados: Corrosivo

LIQUIDO DILUYENTE PARA ESPERMOGRAMA

Pesar 5 gr. de Bicarbonato de sodio y llevarlo a 100 ml de H2O


destilada y adicionarle 1 ml de Formol 37%

MILLON

Pesar 40 gr. de nitrato de mercurio, adicionarle 57 ml de HNO3


concentrado, luego se calienta y se lleva a 200 ml, se deja
sedimentar y se decanta (preparacin en cmara extractora ).

Cuidados: Corrosivo

MOLISCH

Pesar 50 gr. de naftol y llevarlo a 1000 ml de Etanol 95%


(estable 1 semana)

Uso: Para determinacin general de Azucares

Cuidados: Txico 1 y corrosivo


MEZCLA CROMICA (SULFOCROMICA)

Medir 500 ml de H2O destilada y adicionar lentamente 250 ml de


H2SO4 concentrado y agitar constantemente se deja enfriar se le
mezcla dicromato de potasio y finalmente s afora a 1000 ml con
H2O destilada.

Uso: Limpieza de material con restos carbnicos

Cuidados: Corrosivo

METIL NARANJA

Pesar 0.04 gr. de metil naranja y disolverlo en 100 ml de alcohol


etlico al 20 % o en 100 ml de H2O destilada

Uso: Indicador cido Bsico

Cuidados: Txico 1

NESSLER

Pesar 15 gr. de HgI2 en un vaso de precipitado, en otro vaso se


disuelven 10 gr. de KI en 20 ml de H2O.
Esta disolucin se vierte en el vaso con HgI2 , disolver muy bien con
agitacin.
En un matraz de 500 ml disolver 40 gr.de NaOH en 300 ml de H2O
Luego se le adiciona la otra solucin y se agita, al final decantar y
separar el exceso de sales de mercurio (precipitado amarillo)

Cuidados: Txico 1
NITRATO DE PLATA 0.1 N

Pesar 1,7 gr. de nitrato de plata y disolverlo en 100 ml de Agua


destilada.

Uso: Determinacin de cloruros (formacin de un precipitado blanco)

Cuidados: Txico 1 y corrosivo

NYLANDER

Pesar 2 gr. de nitrato dibsico de bismuto y adicionarle 4 gr. de


tartrato de Na Y K. Se disuelve 100 ml de NaOH al 10%. Se hierve
para disolucin completa de la sal , se enfra y se separa por
filtracin.

NINHIDRINA 0.2%

Pesar 0.2 gr. de Ninhidrina aforar a 100 ml con Etanol absoluto o


acetona

Uso: Determinacin del grupo amino de aminocidos y protenas

Cuidados: Txico 1 y corrosivo

NEGRO DE ERICROMO

Pesar 0.5 gr. de negro de ericromo y disolverlo en 100 ml de


alcohol etlico al 96 % (o triturarlo con solucin al 1 % de cloruro de
sodio)
Uso: Indicador

Cuidados: Txico 1
O-TOLUIDINA

Pesar 10 gr. de O-Toluidina y adicionarle 0.03 gr. de tiourea, luego


disolverlos hasta completar a 1000 ml con cido actico al 95 %

Cuidados: Txico 1
ROJO CONGO 5%
Pesar 5 gr. de rojo congo y disolverlo en 100 ml de H2O
destilada

Uso: Para reconocimiento de lpidos

Cuidados: Txicos 1
ROJO DE METILO

Pesar 0.1 gr. de rojo de metilo y completar a 100 ml de alcohol


etlico al 96 %

Uso: Indicador cido Bsico

Cuidados: Txico 1
REACTIVO DE SCHIFF

Pesar 2 gr. de fucsina bsica y disolverlo en 400 ml de H2O


hirviendo, enfriar a 50 C luego aadir 10 ml de HCl 2N, 4 gr. de
metasulfito de potasio, 1 gr. de carbn activado filtrar y adicionarle
10 ml de HCl 2N
Almacenar en frasco oscuro y en nevera

SELIVANOFF

Pesar 0,05 gr. de resorcina (resorcinol) y disolverlo en 100 ml de


cido Clorhdrico al 20%

Uso: Para reconocimiento de cetosas (fructosa)

Cuidados: Txicos 1 corrosivos


SOLUCION DE RINGER(Holfretter)

( S/N madre) A: Pesar 3,5 gr. de NaCl, adicionarle 0.05 de cloruro


de potasio y 0.2 gr. de bicarbonato de sodio en 1000 ml de H2O
destilada
Holfretter al 10 % una parte de A + 9 partes de H2O destilada
(1:9)

SOLUCION PATRON DE LIPIDOS

Pesar 1 gr. de cido esterico y disolver en 100 ml de cloroformo

Uso: Determinacin de lpidos

Cuidados: Txico 1 corrosivos

SOLUCION DE YODO DE RESERVA(0.1mol/l )

Pesar 3.6 gr. de KIO3 y 45 gr. de KI, disolverlo en 300 ml de H2O


destilada, aadir 9 ml de HCl 12M lentamente y llevar a 1000 ml de
solucin. Conservar a 4 C.

Uso: Determinacin de lpidos

Cuidados: Txicos

SOLUCION FIJADORA PERMANENTE DE PLACAS


MICROSCOPICAS

Proporcin 1: 3

1 ml de cido actico en 3 ml de alcohol etlico


SOLUCION DE Mn 20 ppm A PARTIR DE KMnO4

Pesar 0.05745 gr. de KmnO4 y disolverlo en 1000 ml de H2O


destilada

Uso: Elaboracin de curvas para espectrofotometra y calibracin del


espectrofotmetro

Cuidados: Txicos

SOLUCION 30 ppm DE K2Cr2O7 EN KOH 0.05 N

Pesar 2.8 gr. de KOH y 0.030 gr de dicromato de potasio (K2Cr2O7) y


llevarlo a 500 ml de solucin con agua destilada.

Uso: Elaboracin de curvas para espectrofotometra

Cuidados: Txico 1 corrosivos

SOLUCION DE Mn 50 ppm A PARTIR DE KMnO4

Pesar 71.8 mg de KMnO4 y llevar a 500 ml de solucin con H2O


destilada
Uso: Elaboracin de curvas para espectrofotometra

Cuidados: Txico 1

SACAROSA 0.1 M

3, 4 gr. de sacarosa y completar hasta 100 ml de solucin con H2O


destilada
Conservar en Nevera a 8 grados
SUDAN III 0.2%

Pesar 200 mg de sudan III en 100 ml de alcohol etlico al 70%, se


mezclan(calentando en bao de Mara a 90 grados centgrados) y se
dejan en reposo durante 24 horas.

Uso: Para coloracin de cutcula y gotas de grasa en clulas vegetales

Cuidados: Txico 1

SUDAN III

1 gr. de sudan en polvo +30 ml de cido actico y completar con 70


ml de H2O. (calentar para lograr una mejor disolucin)

Uso: Para determinacin de lpidos por solubilidad en muestras


biolgicas

Cuidados: Txico 1

SUSTRATO DE ALMIDON EN BUFFER pH 7

Pesar 13.3 gr. de Na2HPO4 y 4.3 gr. de cido benzoito, llevar a 250
ml de H2O destilada, calentar y aadir 0.2 gr. de almidn y 5 ml de
H2O destilada y completar a 500 ml con H2O destilada y conservar a
4 C.

SULFATO DE COBRE (CuSO4) 2000ppm

Pesar 2 gr. de CuSO4 y llevar 1000 ml de H2O destilada

Uso: Elaboracin de curvas para espectrofotometra

Cuidados: Txico 1
SULFATO 100 ppm

Pesar 0.1825 gr. de K2SO4 en un litro de H2O destilada

TIONINA

Pesar 0,1 gr. de tionina, adicionarle 10 ml de Etanol absoluto y


completar a 100 ml con H2O destilada.

Uso: Para coloracin de tejidos vegetales

Cuidados: Txico 1
TOLLENS

Solucin A: Preparar 50 ml nitrato de plata al 5 % en agua destilada


Solucin B: Preparar 20 ml de NaOH al 10%
Mezclar Solucin A y Solucin B, luego adicionarle amoniaco
concentrado hasta disolver el precipitado.
Guardar preferiblemente en frasco oscuro

Uso: Para formacin del espejo de plata

Cuidados: Txico 1 corrosivos

TURK

100 ml de cido actico al 3% + 3 gotas de azul de metileno

TIMOL AL 1 %

Pesar 1 gr. de timol y disolverlo en 100 ml de alcohol etlico absoluto

Uso: Indicador de pH

Cuidados: Txico 1
TIMOLFTALEINA

Pesar 0.1 gr. de tiomolftaleina en 100 ml de alcohol etlico al 50


%

TANRED

Solucin A: 18 gr. KI + 200 ml de H2O destilada.


Solucin B: 6.75 gr. de HgCl2 +200 ml de H2O destilada
La solucin B se disuelve sobre la A, agitar hasta que
desaparezca el naranja , completar con cido actico glacial
hasta 500 ml.

Cuidados: Txico 1
VIOLETA DE METILO

Pesar 0.1 gr. de violeta de metilo en 10 ml de alcohol etlico al 20 %

Uso: Indicador de pH

WRIGHT

Pesar 0.1 gr. de Colorante de Wright, pulverizarlo, adicionarle poco a


poco 60 ml de Metanol Analtico y homogenizarlo, dejarlo en
maduracin por lo menos ocho (8) das.
Filtrarlo cada dos meses

Uso: Colorante para identificacin de Clulas Sanguneas

Cuidados: Txico 1
Bibliografa

Merck, Merck KGaA, Reactivos y productos qumicos 2005-


2007. Frankfurter Strabe 250 64293 Darmstadt.GERMANY.

J.T.Baker.Catalog 2004-2005.Tyco Specialty Products.2003


Mallinckrodt Baker,Inc. Printed in USA.

Promega, Life Science Catalog-2004

Merck, Productos de Laboratorio para la prctica-Indicadores-


Sustancias patrn primario.

Patio, Pedro; Edgar Ramrez, Manuel de Preparacin de


Soluciones-Manual de Protocolos UDES 2002

Plumer, David; Introduccin a la Bioqumica Prctica. McGraw


Hill

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