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PRACTICAS DE LABORATORIO
DE INTRODUCCION A BIOQUIMICA
F.J.S.C. 1
INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
NORMAS DE SEGURIDAD
PROCEDIMIENTO:
Es requisito para entrar al laboratorio el llevar bata puesta, traer su juego de prcticas y haber
ledo con anticipacin la prctica que se va a desarrollar.
Es importante que llegue puntual al laboratorio, por que se le pasar lista y de no estar perder
la asistencia y el valor de la practica.
Evite las bromas y juegos en el laboratorio, as como estar comiendo dentro de laboratorio.
Evite estar platicando cosas ajenas a la prctica de laboratorio que va a desarrollar.
Cuando trabaje con equipos de vidrio, como tubos o termmetros, preste mucha atencin pues el
vidrio es frgil y se rompe fcilmente. Cuando se manejen compuestos qumicos peligrosos,
utilice anteojos de proteccin para cuidar los ojos contra accidentes debido a explosiones.
No toque nunca los compuestos qumicos con las manos a menos que se le autorice, para
manipular use esptulas, cucharillas, pinzas, etc.
No arroje al lavadero cerillos, papel filtro o slidos poco solubles.
Compruebe cuidadosamente los rtulos de los frascos de reactivos antes de usarlos y no
devuelva nunca a los frascos de origen los sobrantes de compuestos utilizados.
No pruebe o saboree un producto qumico o solucin, sin la autorizacin del profesor.
Para preparar una solucin acuosa de un cido (especialmente cido sulfrico), vierta siempre
lentamente el cido concentrado sobre el agua. Nunca vierta agua sobre cido, pues puede
producirse un accidente.
No inhale los vapores de alguna sustancia, si es necesario hacerlo ventile con la mano
suavemente hacia su nariz los vapores de la sustancia.
Si alguna sustancia qumica le salpica o cae en la piel o en los ojos, lvelos inmediatamente con
abundante agua y avise a su profesor.
Cuando se caliente una sustancia en el tubo de ensaye, dirija el extremo abierto del tubo hacia
un lugar que no pueda ocasionar dao a usted y a sus compaeros.
No site una llama cerca de un recipiente que contenga un material voltil o flamable.
Si hay un principio de incendio, acte con calma. Aplique el extinguidor y evite manifestaciones
alarmistas innecesarias.
Deje el tiempo suficiente para que se enfren los materiales de vidrios que se usaron.
Al final de la prctica limpie todos su material y entrguelo a la persona correspondiente y deje
limpia su mesa de trabajo.
Lvese las manos antes de salir del laboratorio.
Registre claramente todos los datos, observaciones, conclusiones y comentarios pertinentes.
Elabore el informe de la sesin de trabajo de laboratorio.
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
1.- IDENTIFICACIN DE LA GLUCOSA
El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una disolucin descubierta por
el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin de
azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, as como para detectar derivados
de esta tales como la sacarosa o la fructosa.
MATERIAL DE LABORATORIO.
Tubos de ensayo. Gradilla. Pipetas, Pinzas para tubo de ensayo, esptula, mechero de bunsen.
REACTIVOS QUMICOS
Solucin de Fehling A. Solucin de Fehling B. (o reactivo Benedict) Glucosa, Uva, Miel de
abeja.
PROCEDIMIENTO
1.- Disolver un poco de Glucosa en unos 3 ml de agua en un tubo de ensayo.
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2.- Aadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B (coger las soluciones con pipetas distintas).
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5.- Aadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B (coger las soluciones con pipetas distintas).
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
6.- Calienta el tubo de ensayo a la llama del mechero ( con cuidado).
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8.- Aadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B (coger las soluciones con pipetas distintas).
Elabore un dibujo.
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
2.- IDENTIFICACIN DE LA MOSACARIDOS
El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una disolucin descubierta
por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin
de azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, as como para detectar
derivados de esta tales como la sacarosa o la fructosa.
MATERIAL DE LABORATORIO.
Tubos de ensayo. Gradilla. Pipetas. Pinzas para tubo de ensayo. Esptula. Mechero de
laboratorio.
REACTIVOS QUMICOS
Solucin de Fehling A. Solucin de Fehling B. (o reactivo Benedict) .
PROCEDIMIENTO
Numere 4 tubos de ensayo y agregue muestras de glucosa, orina, edulcorante para los diabticos,
miel karo respectivamente.
Agregue 1.5 ml de agua destilada excepto al tubo N 2.
Agitar los tubos hasta homogenizara bien.
Aadir 2ml de reactivo Fehling A y B.
Colocar todos los tubos a bao maria (el cual debe estar a ebullicin) en un vaso de precipitados y
hervir 3 minutos.
Tubo 2 ________________________________________________________________
Tubo3 ________________________________________________________________
Tubo 4 ________________________________________________________________
Tubo 2 ____________________________
Tubo3 ____________________________
Tubo 4 ____________________________
Tubo 1 ____________________________
Tubo 2 ____________________________
Tubo3 _____________________________
Tubo 4 _____________________________
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
Qu significa que exista presencia de glucosa en la orina? _______________________
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Elabore un dibujo.
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
3.- IDENTIFICACIN DE LA SACAROSA
MATERIAL DE LABORATORIO:
Tubos de ensayo. Gradilla. Pipetas. Pinzas de madera. Probeta o matraz pequeo. Mechero de
laboratorio.
REACTIVOS QUMICOS
Solucin de Fehling A. Solucin de Fehling B. cido Clorhdrico.
PROCEDIMIENTO
1).- Pon 5 ml de agua en un tubo de ensayo y disuelve un poco del sobrecito de azcar. Realiza
la prueba de identificacin de glucosa ( debe salir negativa ).
2)- Pon 5 ml de agua en un tubo de ensayo y disuelve un poco de azcar del sobrecito. Aade 1
ml de cido Clorhdrico diluido al 10% y calienta el tubo a la llama del mechero durante unos tres
minutos. Deja enfriar el tubo y aade 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B; vuelve a calentar el
tubo y observa lo que ocurre.
Cual es la formula de la sacarosa? ________________________________________
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Qu enfermedades se pueden producir por el consumo excesivo de azcar?
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
4.- IDENTIFICACIN DEL ALMIDN
El lugol es una disolucin de yodo y yoduro potsico en agua . Es un detector especfico del
almidn con el que forma complejos coloreados de color azul oscuro .
MATERIAL BIOLGICO: Una patata cruda, arroz, garbanzos, etc. Almidn soluble.
REACTIVOS QUMICOS:
Solucin de LUGOL (Solucin acuosa de Yodo en Yoduro potsico); puede sustituirse por
Tintura de Yodo.
PROCEDIMIENTO:
Se corta en trocitos la patata una vez pelada y se tritura en el mortero, o bien, se raspa con algo
cortante (p.e. un cutex) su superficie sin piel. Se toma una parte pequea y se deposita en un tubo de
ensayo con agua, agitndola. Se aade solucin de Lugol (probar con varias disoluciones cada vez
ms diluidas), y si hay almidn se teir de color azul oscuro (dependiendo de lo diluido que est la
solucin de Lugol).
En un portaobjetos limpio, se pone un poco del contenido del mortero con unas gotas de agua.
Cubrir con un cubreobjetos y observar al Microscopio (dibujar lo que se ve). Hacer lo mismo, pero
aadiendo unas gotas de Lugol (probar con varias disoluciones).
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
5.- FIBRA DIETETICA
(Los alumnos se repartirn el material que tendan que traer al laboratorio y previamente
investigar las propiedades de cada uno)
La fibra alimentara cumplen la funcin de ser la parte estructural de las plantas y por tanto se
encuentran en todos los alimentos derivados de los productos vegetales como puede ser las
verduras, las frutas, los cereales y las legumbres. La mayora de las fibras son consideradas
qumicamente como polisacridos.
PROCEDIMIENTO:
Limpie se rea de trabajo antes y despus. Se lava perfectamente todo el material biolgico y se
desinfecta con desinfectante para verduras. Y conforme se van cortando se van agregando al
recipiente. Mientras van trabajando van comentando sus investigaciones previas de las propiedades
de cada uno.
Se parte la lechuga en trozos medianos. El tomate, la cebolla y el rbano en finas rodajas. El ajo se
pela y se pica muy finamente. Se pela la zanahoria, la papa, el betabel y pasan por el rayador. El
cilantro se pela y se pica muy finamente. El chile morn se le quitan las semillas y se parte en
rodajas. Se pica finamente el apio. Se agregan rodajas de aguacate y al final se le esparce el jugo de
dos limones. Agregue dos cucharadas de aceite de olivo.
Deguste, saboree, deleite e identifique los sabores note el equilibrio en la sensacin de sabores.
Todas las verduras tienen fibra diettica en mayor o menor cantidad y adems tienen otras
propiedades.
Tomate _______________________________________________________________
Lechuga _______________________________________________________________
Cebolla _______________________________________________________________
Zanahoria _____________________________________________________________
Papa _______________________________________________________________
Betabel _______________________________________________________________
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
Ajo _______________________________________________________________
Apio _______________________________________________________________
Rbanos ______________________________________________________________
Cilantro ______________________________________________________________
Aguacate _____________________________________________________________
Limones ______________________________________________________________
Cul es la razn por la que el organismo humano no puede procesar la la fibra (celulosa) ?
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Elabore los dibujos correspondientes
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
6.- LA AVENA (FIBRA SOLUBLE)
La avena presenta Carbohidratos que proporcionan energa; en concreto, los que posee la avena son
de lenta absorcin, por lo que ayudan a mantener niveles de glucosa estable y evitan la sensacin de
sueo que se presenta entre desayuno y comida, ocasionada porque el cerebro y msculos cuentan
con pocos azcares para realizar sus funciones (hipoglucemia). Tambin ayudan a soportar mejor la
fatiga que se genera al someterse a estrs. Posee vitaminas del complejo B.
Uno de sus beneficios de tomar avena es su alto contenido de cromo, pues este ayuda a estabilizar
los niveles de glucosa en la sangre. Adems sirve para proteger al organismo Ayuda disminuye el
nivel de colesterol en la sangre de modo que contribuye a evitar arteriosclerosis, el infarto y la
hipertensin, debido a que su cido linoleico y la fibra hace que el colesterol no pase al intestino.
PROCEDIMIENTO: Coloque en un embase limpio un litro de agua y agregue una taza de avena.
Agite, cierre y rejelo reposar en el refrigerador 24 horas Filtre y beber tres veces al dia. Una en
ayunas, antes de dormir y antes de dormir.
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Qu es el colesterol?
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7.- IDENTIFICACIN DE LPIDOS. REACCIN DE SAPONIFICACIN.
C H 2 O C O R 1 C H 2O H R 1C O O - N a
C H O C O R 2 + 3N aO H C H O H + R 2C O O - N a
C H 2
O C O R 3 C H 2O H R 3C O O - N a
S a le s s d ic a s d e
T r ig lic r id o G lic e r in a a c. g r aso s (J A B N )
PROCEDIMIENTO:
1. Aadir aceite (sin pipetearlo) a un tubo de ensayo, hasta una altura de aproximadamente 1 cm.
2. Aadir 2 ml de NaOH al 20% (p/v) en agua.
3. Agitar enrgicamente.
4. Calentar al bao Mara de 20 a 30 minutos y observar qu ocurre?
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Los lpidos son biomolculas orgnicas formadas bsicamente por carbono e hidrgeno y
generalmente tambin oxgeno; pero en porcentajes mucho ms bajos. Adems pueden contener
tambin fsforo, nitrgeno y azufre. Es un grupo de sustancias muy heterogneas entre las que se
encuentran las grasas, los aceites, las ceras y el colesterol, que slo tienen en comn estas dos
caractersticas: 1. Son insolubles en agua.
2. Son solubles en disolventes orgnicos, como ter, cloroformo, benceno, etc.
PROCEDIMIENTO:
2 Calienta un poco de mantequilla hasta que pase a estado liquido. Agrega un poco en un tubo de
ensayo y la misma cantidad de agua. Agtalo y djalo reposar.
Qu es lo que paso?
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5 - Ponemos ahora en un tubo de ensayo un poco de aceite con gasolina, agitamos y lo dejamos
reposar. Observa lo que sucede:
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6 - Ponemos ahora en un tubo de ensayo un poco de aceite y ter agitamos y lo dejamos reposar.
Observa lo que sucede:
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
8 - Ponemos ahora en un tubo de ensayo un poco de aceite y acetona agitamos y lo dejamos reposar.
Observa lo que sucede:
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
9.- RECONOCER LPIDOS CON LA COLORACIN DE SUDAN III
Los lpidos son un grupo de sustancias muy heterogneas entre las que se encuentran las grasas, los
aceites, las ceras y el colesterol.
Los lpidos dejan una mancha translcida sobre la superficie del papel, la cual no se va con la
accin del calor. Tambin a los lpidos colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante
Sudn III.
PROCEDIMIENTO:
Esto se realizo para comprobar si es verdad que el Sudan III puede reconocer a los Lpidos, ya que
la tinta roja colorea a todo tipo de sustancias, en cambio, el Sudan III solo colorea a los Lpidos.
Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que aparecer teido, mientras
que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite no estar teido.
Qu compuestos se tien con la tinta roja y cual con el Sudan III? Anote los resultados en una tabla .
Cul es la razn por la cual la leche es teida pos la solucin de Sudan III? _______________________
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Cul es la razn por la cual la clara de huevo no es teida pos la solucin de Sudan III?
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
Cul es la razn por la cual el azcar no es teida pos la solucin de Sudan III?
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Cul es la razn por la cual la manteca es teida pos la solucin de Sudan III?
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imgenes y portada)
INTRODUCCIN
LOS CARBOHIDRATOS
Son molculas orgnicas compuestas por carbono, hidrgeno y oxgeno. Son solubles en agua y se
clasifican de acuerdo a la cantidad de carbonos o por el grupo funcional que tienen. Su funcin es el
almacenamiento y consumo de energa. Se clasifican en:
1. Monosacridos. Estn formados por una sola molcula. Su forma qumica general es (CH2O)n,
donde n es cualquier nmero igual o mayor a 3 y menor que 7. Poseen siempre un grupo carbonilo en
uno de sus tomos de carbn y grupos hidroxilo en el resto, por lo que pueden considerarse
polialcoholes. Los monosacridos ms pequeos son los que poseen tres tomos de carbono, y son
llamados triosas, los de cuatro tetrosas, y as sucesivamente.
LOS LPIDOS
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
Son un conjunto de molculas orgnicas, casi todas son biomolculas. Estn compuestas principalmente
por carbono ehidrgeno y en menor medida oxgeno, tambin pueden
contener fsforo, azufre y nitrgeno.
Son insolubles en agua y solubles en disolventes orgnicos como la bencina, el alcohol, el benceno y
el cloroformo. Las funciones de los lpidos en los organismos son la de reserva energtica, la estructural y
la reguladora, tambin funcionan para el desarrollo de la Materia gris, el metabolismo y el crecimiento.
LAS PROTENAS
Las protenas son macromolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. Son
las biomolculas ms verstiles y ms diversas. Son necesarias para el crecimiento del organismo.
Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, como lo son:
Estructural (colgeno y queratina)
Reguladora (insulina y hormona del crecimiento),
Transportadora (hemoglobina),
Defensiva (anticuerpos),
Enzimtica (sacarasa y pepsina),
Contrctil (actina y miosina).
La informacin gentica determina qu protenas tiene una clula, un tejido y un organismo.
Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados los genes que las codifican.
Por lo tanto, son susceptibles a seales o factores externos. El conjunto de las protenas expresadas en
una circunstancia determinada es denominado proteoma.
OBJETIVOS DE APRENDIZAJE
Que el alumno:
Comprenda que carbohidratos, lpidos y protenas son molculas que constituyen a los sistemas
vivos y que participan en la alimentacin.
HIPTESIS: Creemos que las sustancias tomarn un color diferente con determinado reactivo lo cual nos
har darnos cuenta a qu grupo pertenece cada alimento. Tambin creemos que con esta prctica vamos
a tener una idea ms amplia de lo que debemos comer y en qu cantidad.
MATERIAL:
11 tubos de ensayo
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
1 parrilla
1 gradilla
1 probeta de 10 ml
Licor de Benedict
Sudn III
Aceite de oliva
Nueces
Solucin de grenetina
Solucin de almidn
Jugo de frutas
Clara de huevo.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Nota. Agregar hasta aproximadamente una cuarta parte del tubo de ensayo de solucin en los grupos experimentales.
1. Identificacin de carbohidratos
a) Monosacridos:
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
Grupo control o testigo (monosacridos). En un tubo de ensayo vierta 4 mililitros (ml) de solucin de glucosa o frustosa.
Agregar aproximadamente 15 gotas de licor de Benedict. Sostener el tubo de ensayo con una pinza y calentar en bao
Mara en contenido, hasta que adquiera un color naranja.
Grupos experimentales:
Con las mismas indicaciones identifique monosacridos en los siguientes alimentos y anote sus resultados.
Jugo de uva.
b) Polisacridos
Grupo control o testigo (Polisacridos). Vierta 4 ml de solucin de almidn a 1% en un tubo de ensayo. Agrguele 3
gotas de solucin de lugol, observe que la solucin de almidn cambia de coloracin, se transforma en color azul marino.
Grupos experimentales: Con las mismas indicaciones identifique polisacridos (almidn) en los siguientes productos y
anote sus resultados.
1. Identificacin de lpidos:
Grupo control o testigo: Adele 10 gotas de Sudn III a 2 ml de aceite de oliva en un tubo de ensayo. Agtelo
moderadamente y observe que la mezcla toma un color naranja.
Grupos experimentales: Con las mismas indicaciones identifique lpidos en los siguientes productos y anote sus
resultados.
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
1. Identificacin de protenas
Grupo control o testigo. Vierta 3 ml de grenetina a 1% en un tubo de ensayo. Adele 10 gotas de reactivo de Biuret.
Observe que la mezcla adquiere una coloracin lila.
Grupos experimentales: Con las mismas indicaciones identifique protenas en los siguientes productos y anote sus
resultados.
Leche
Tabla de resultados.
Clara de huevo no no s no
Jugo de uva no no no no
Nuez no no no s
Jugo de pia s no no no
Pltano no s no no
Queso de puerco no no no s
Leche no no s no
Los lpidos con Sudn III, las protenas con Biuret y los monosacridos con Benedict y los polisacridos con lugol.
1. Qu indica el cambio de color en el tubo de ensayo una vez que agregaste el reactivo?
Si con Benedict cambia a naranja significa que es monosacrido, si con Lugol cambia a azul marino significa que es
polisacrido, si con Sudn III cambia a naranja significa que es lpido, y si con Biuret cambia a lila significa que es
protena.
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
Identificamos el jugo de pia y el pltano. El jugo de pia fue un monosacridos y funciona como fuente principal de
energa y ayuda a constituir las molculas genticas. El pltano fue polisacrido y su funcin es de reserva energtica y
estructural.
Diabetes.
Identificamos nuez y queso de puerco. Su funcin como lo haba explicado anteriormente en la introduccin son la de
reserva enegtica, la estructural y la reguladora, tambin funcionan para el desarrollo de la materia gris, el metabolismo
y el crecimiento.
En la clara de huevo y en la leche. Tienen una gran diversidad de funciones como la estructural, reguladora,
transportadora, defensiva, enzimtica y contrctil.
Los dos son saturados porque ambos tienen todos sus carbonos hidrogenados, y empricamente porque son slidos a
temperatura ambiente.
CONCLUSIONES
En conclusin, en lo personal, aprend a identificar de forma qumica los carbohidratos, lpidos y protenas, en alimentos
que yo consumo a diario, y estudiando este tema aprend en qu ayuda cada grupo alimenticio a mi organismo, y supe
que alimentos son de cada grupo.
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Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es positiva o negativa?
Por qu?
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Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que
pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser
tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los
agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras
secundaria y terciaria.
PROCEDIMIENTO
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo (puede diluirse en
un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
2. Al tubo 1 calentar uno de los tubos al bao Mara,
3. Al tubo N2 agregar 2-3ml de HCl concentrado
4. Al tubo N3 agregar 2 o 3ml de alcohol etlico.
5. Al tubo N4 agregar 2 o 3ml de jugo de limn
6. Al tubo N5 agregar 2 o 3ml de agua.
7. Observar los resultados.
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La protena aislada de soya es la nica protena de origen vegetal que posee cualidades
equivalentes a la carne, los huevos o la leche, pero con mucho menos grasa. Su forma de harina
refinada posee un contenido proteico que sobrepasa el 90% de su valor seco, de la cual es eliminada
la mayor parte de grasas y carbohidratos. Estudios demuestran que consumida diariamente (mnimo
25g) puede ayudar a reducir los niveles de colesterol.
Para calcular su requisito especfico diario de la protena lo determinan con su peso corporal ideal,
entonces y lo calculen con sus requisitos especficos de la protena basada en su peso ideal.
En general se hay bibliografas manejan que el consumo diario debe ser 1gr de protena por kg del
peso corporal ideal.
Sedentarios 0.8
Resistencia 1.2-1.4
vegetarianos 0.9
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INTRODUCCIN A LA BIOQUIMICA
REACTIVOS QUMICOS: Hielo, agua
PROCEDIMIENTO: PREPARAR:
Coloque un poco de agua fra en la licuadora, agregue un pltano ( u otra fruta como fresas) y de 2
a 3 cucharadas de producto de soya y licue pro 2 o tres minutos. Apague la licuadora y agregue
hielo, tape y licue de 1 a 3 minutos, agregue 2 cucharadas de leche de soya espolvoreada y deje que
sigua licuando a punto de malteada. Pruebe la mezcla elaborada.
Observe la etiqueta del producto Qu otros nutrimentos contiene adems de la protena de soya?
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Existen algunos alumnos que van a la escuela sin tomar alimentos por muchas razones. Que
ventajas puede observar de consumir un suplemento que contenga protena de soya.
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