penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.

com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

Azalistaa Amri

Let's Gone by Gone.. Go Ahead.. ^_^

penentuan kadar hb metode

sahli

Praktikum Biokimia: Penentuan

Kadar Hemoglobin (Hb)

i
6 Votes

LAPORAN PENENTUAN KADAR HB

Penanggung Jawab : Raaud Darajat

1. TUJUAN

1. Mengetahui kadar HB dengan metode sahli

2. Mengetahui kadar HB dengan metode fotometrik

1. PRINSIP

1. Hb diubah menjadi hematin asam kemudian warna yang terjadi

dibandingkan secara visual dengan standar pada hemometer.
2. Darah dicampur dengan larutan drabkin, ferysianida akan
mengoksidasi HB menjadi met HB akan berikatan dengan cyanide
menjadi cyan met.HB

1 dari 7 15/10/2017 23.34

penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

1. TINJAUAN PUSTAKA

Hemoglobin merupakan protein yang mengandung zat besi dan

memiliki anitas terhadap oksigen untuk mmebentuk oksihemaglobin
didalam eritrosit. Dari mekanisme tersebut dapat berlangsung proses
distribusi oksigen dari pulma menuju jaringan (Pearce, 1991). Pada
hemoglobin manusia dewasa normal (hemoglobin A), terdapat 2 jenis
rantai polipeptida yang dinamakan rantai dan rantai . Pada rantai
, masing-masing mengandung141 gugus asam amino, sedangkan
pada rantai masing-masing mengandung 146 rantai asam amino.
Sehingga hemoglobin A dinamai 22. Akan tetapi tidak semua
hemoglobin dalam darah dewasa normal merupakan hemoglobin A,
sekitar 2,5% hemoglobin merupakan hemoglobin A2, tempat rantai
diganti oleh rantai (22) (Hanong, 2001). Adanya hemoglobin
dalam darah ini menyebabkan eritrosit berwarna merah, karena
hemoglobin merupakan penyususn 30% dari total isi eritrosit
(Mutshler, 1991).Hemoglobin mempunyai berat molekul penyususn
64.450 dan merupakan suatu molekul yang dibentuk oleh 4 rantai
polipeptida, dimana pada tiap polipeptida melekat pada gugus
heme.Heme adalah suatu turunan porrin yang mengandung besi
(Fe).Polipeptida ini dinamai secara bersama sebagai bagian dari globin
dari molekul hemoglobin. Adapun fungsi dari hemoglobin ini sebagai
alat transportasi )2 serta membawa hasil akhir proses respirasi CO2.

Ada beberapa metode pemeriksaan hemoglobin.Diantara metode

pemeriksaan hemoglobin yang paling sering digunakan di
laboratorium dan yang paling sederhana adalah metode sahli, dan
yang lebih canggih adalah metode cyanmethemoglobin (Bachyar,
2002).

Prinsip metode sahli adalah hemoglobin dalam darah oleh HCl

menjadi hematin asam, kemudian warna yang terjadi dibandingkan
secara visual dengan standar dalam alat tersebut.Metode sahli kurang
naik karena tidak semua jenis HB dapat diubah menjadi asam hematin
seperti karboksi methemoglobin, sulfathemoglobin.

Metode cyanmethemoglobin

Hemoglobin diubah menjadi cyanmethemoglobin dalam larutan yang

berisi larutan kalium fersi anida dan kalium sianida. Absorbansi
larutan diukur pada panjang gelombang nm atau lter hijau. Larutan
drabkin yang dipakai pada cara ini mengubah menjadi
cyanmethemoglobin (L. Gandasebrata, 1984).

1. ALAT DAN BAHAN

Alat :

Hemoglobinometer sahli : standar hemoglobin dengan warna

pembanding

Tabung HB berskala

Aspirator

2 dari 7 15/10/2017 23.34

penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

Spatula pipet Pasteur

Pipet sahli volume 20 mm 3 (20 mikro liter = 0,02 ml)

Cyamethemoglobin : foto meter, tabung reaksi, pipet

Bahan :

Metode sahli : HCl 0,1 N, aquades

Metode cyanmeth : larutan probkin, darah

1. CARA KERJA

1. Metode cyanmethemoglobin

5 ml pereaksi probkin

+ 20 mikro l (0,02 ml) darah

Campur dengan cara memutar tabung

Diamkan 10 menit

Baca pada foto meter 546 nm F 36,8

2. Metode sahli

5 tetes HCl 0,1 sampai tanda merah

Masukkan 20 ml darah menggunakan pipet dan selang sahli

Diamkan 3 menit

+ aquades tetes demi tetes, hingga berwarna sesuai standar

Baca kadar HB dengan melihat volume dalam tabung reaksi sahli

1. HASIL PENGAMATAN

Hasil pemeriksaan kadar HB

Kel Metode sahli Keterangan Metode Keterangan

ompok kadar HB cyanmet
kadar HB

3 dari 7 15/10/2017 23.34

penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

1 13,92 Tidak 15,4 Normal

normal
2 9,54 14,09 Normal
Tidak
3 18 normal 15,77 Normal

4 16 Normal 12,88 Tidak

normal
5 10,6 Normal 12,61
Tidak
6 22 Normal 12,8 normal

7 18 Normal 10,7 Tidak

normal
8 16 Tidak 14,7
normal Tidak
9 16,8 15,4
normal
Normal
10 15,4 15,87 Normal
Normal
Normal
Normal
Normal

1. Table pengamatan

No Sampel Perlakuan Gambar/Hasil Keterangan

Praktikan
1. Pereaksi Ambil 5 ml Mengambil 5ml
probkin preaksi pereaksi
2. probkin probkin
Darah
Ambil 20 l Ambil darah
(0,02 ml) darah sebanyak 20 l
dengan
Campur mikropipet
dengan
memutar Tabung diputar
tabung supaya darah &
pereaksi
Diamkan 10 problin
tercampur
Baca pada
fotometer Diamkan
546 nm f 36,8 selama 10
menit

Dibaca pada
fotometer
panjang
gelombang 546
nm f 36,8
hasilnya 12,88

4 dari 7 15/10/2017 23.34

penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

1. Metode Sahli

No Sampel Perlakuan Hasil Keterangan

Perlakuan

1. HCl Masukkan 5 Aquades Masukkan 5 tetes

tetes HCl 0,1 N HCl 0,1 N
2. Darah (sampai tanda (sampai tanda
merah) merah)

Masukkan 20 ml Memasukkan
darah darah sebanyak
menggunakan 20 ml
pipet dan selang menggunakan
sahli pipet dan selang
sahli
Diamkan 3
menit Diamkan 3 menit

Ditambahkan Menambahkan
aquades tetes aquades tetes
demi tetes demi tetes
hingga warna hingga warna
sesuai standar sesuai standar

Baca kadar HB Dibaca kadar HB

dengan melihat dengan melihat
volume dalam volume dalam
tabung reaksi tabung reaksi
sahli sahli

1. PEMBAHASAN

Hemoglobin adalah molekul protein dalam sel darah merah yang

membawa oksigen dari paru-paru ke jaringan tubuh dan karbon
dioksida dari jaringan ke paru-paru.

Pada praktikum kali ini, digunakan 2 metode, metode

cyanmethomoglobin dan metode sahli.Metode cyanmethoglobin lebih
banyak digunakan dan merupakan metode rujukan.Dalam percobaan
ini kami menggunkan darah pria dewasa, dimana darah yang
diperlukan untuk percobaan sebanyak 20 mikro liter. Terlebih dahulu
ambil 5 ml pereaksi drobkin kemudian untuk percobaan sebanyak 20
mikro liter darah dengan cara memutar tabung reaksi, diamkan selama
10 menit lalu baca dengan fotometer, didapatkan hasil dari percobaan
kelompok kami mengukur kadar HB dnegan metode cyan
methemoglobin yakni 12,88 (tidak normal).

Selanjutnya metode sahli, metode sahli mengandalkan pembentukan

asam hematin yang kemudian diukur kadarnya dengan cara
membandingkan warna hasil pengenceran dengan warna standar.
Pada langkah-langkah cara kerja menggunakan metode sahli, 5 tetes
HCl 0,1 sampai tanda merah (tabung reaksi sahli), tambahkan 20 ml

5 dari 7 15/10/2017 23.34

penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

darah dengan cara mengambilnya menggunakan pipet hisap, diamkan

selama 3 menit, tambahkan lagi aquades tetes demi tetes hingga
berwarna sesuai standar. Penggunaan HCl dipraktikum ini, bertujuan
untuk meliliskan eritrosit sehingga Hb yang terdapat dalam eritrosit
dapat keluar dan bereaksi dnegan HCl membentuk asam hematin.
Dari hasil praktikum penentuan kadar HB menggunakan metode sahli,
kelompok kami mendapatkan hasil 16 (normal). Metode sahli
membutuhkan ketelitian visualisasi praktikan dalam mmebandingkan
warna yang diperoleh dari pengenceran dengan warna standar.

1. KESIMPULAN

Dalam pennetuan kadar HB, metode cyanmethemoglobin lebih

akurat dibandingkan metode sahli, disebabkan karena metode sahli
membutuhkan ketelitian visualisasi dalam mebandingkan warna yang
diperoleh, sedangkan metode cyanmethemoglobin keakuratan lebih
bagus, sehingga menjadi metode rujukan.

Kadar hemoglobin normal untuk pria adalah 14 18, sedangkan

kadar hemoglobin normal untuk wanita adalah 12 15.

Kadar hemoglobin yang tinggi disebabkan karena keadaan

hemokonsentrasi akibat dari dehidrasi, sedangkan kadar hemoglobin
rendah berkaitan dengan berbagai masalah klinis. Jumlah sel darah
merah dan kadar hemoglobin tidak selamanya meningkat atau
menurun secara bersamaan.

1. DAFTAR PUSTAKA

Ganong, W.F. 2001. Fisiologi Kedokteran. Jakarta: Penerbit Buku

Kedokteran EGC.

Pearce, C.E. 1991. Anatomi dan Fisiologi Untuk Paramedis. Jakarta: PT.
Gramedia Pustaka Utama.

Kee, L.J. 1997. Pengukuran Kadar

Hemoglobin.h p://widablog.blogspot.com/2011/11/pengukuran-kadar-
hemoglobin.html (h p://widablog.blogspot.com/2011/11/pengukuran-
kadar-hemoglobin.html)

Bachyar. 2002. Metode Pemeriksaan Hemoglobin.

h p://www.psychoplogymania.com/2012/o9/metode-pemeriksaan-
hemoglobin.html (h p://www.psychoplogymania.com/2012/o9
/metode-pemeriksaan-hemoglobin.html)

OKTOBER 14, 2013 AZZALISTA

CYANMETHEMOGLOBIN, HB DIUBAH MENJADI HEMATIN
ASAM, LAPORAN PENENTUAN KADAR HEMOGLOBIN,
PENENTUAN KADAR HB METODE FOTOMETRIK, PENENTUAN
KADAR HB METODE SAHLI TINGGALKAN
KOMENTAR

6 dari 7 15/10/2017 23.34

penentuan kadar hb metode sahli Azalistaa Amri https://imamri.wordpress.com/tag/penentuan-kadar-hb-metode-sahli/

BLOG DI WORDPRESS.COM.

7 dari 7 15/10/2017 23.34