TEMA 4.

- TRANSPORTE Y DISTRIBUCIN DE XENOBITICOS EN LOS

ORGANISMOS.
Una vez que el xenobitico (Xb) ha sido absorbido (piel, respiratorio, digestivo), se
transporta por todo el organismo hasta que alcanza su destino. Dentro de la sangre las sustancias
pueden ir incorporadas a las clulas, disueltas en el plasma, unidas a protenas plasmticas. El
destino de los Xb puede ser su sitio de accin, uno o varios almacenes de depsito o diversos
rganos para su biotransformacin. El entendimiento de la distribucin (localizacin y
concentracin) de un Xb es importante para predecir la respuesta toxicolgica.

Fluidos corporales entre los que se pueden distribuir las sustancias

% del peso del Volumen Propiedades fsico-

Compartimento cuerpo (L) qumicas Ejemplo

Plasma sanguneo 4 3 Masa molecular elevada

Dextranos,
heparina
Lquido intersticial 14-18 10-13 Masa molecular elevada

-Hidroflicos
Volumen Inulina, Br-
18-22 13-16 -Masa mol.> 200-300
extracelular
-(an)iones
Volumen 35-40 25-28 Lipoflicos
intracelular Masa mol. pequea
Volumen transcelular 1-3 0,7-2 Lipoflicos Etanol, D2O
(secreciones, LCE)
Volumen total 54-64 40-46

Una sustancia que no atraviesa la pared capilar, nicamente se distribuye en el plasma;

si atraviesa los capilares, pero no la membrana celular, se distribuye en el espacio extracelular, y
si atraviesa todas las membranas, se distribuye en todo el agua corporal (etanol).

PERFILES DE DISTRIBUCIN. Existen diferentes modelos que explican la

distribucin de los xenobiticos en el organismo:
Monocompartimental, en el que el Xb se distribuye rpidamente por todo el organismo.
Bicompartimental, el xenobitico se distribuye inicialmente en plasma y rganos muy
irrigados, alcanzando posteriormente el equilibrio con el resto del organismo.
Tricompartimental, semejante al anterior pero a continuacin se concentra en rganos
especficos.
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DISTRIBUCIN DE XENOBITICOS
1. Unin a protenas. Los Xb se pueden ligar reversiblemente a las protenas
plasmticas, por medio de distintos tipos de uniones: interacciones hidrfobas, puentes de
hidrgeno y fuerzas de van der Waals. La molcula de protena tiene un nmero limitado de
sitios donde se pueden ligar, tanto los xenobiticos, como los compuestos endgenos. As
que, un agente determinado tiene que competir con los dems compuestos (xenobiticos y/o
endgenos) por los sitios de unin disponibles. La unin reversible del compuesto a las
protenas impide la difusin simple pero no limita su transporte activo.

2. Transporte a tejidos especiales. El hgado y los riones cuentan con mecanismos

de transporte activo, por lo que pueden captar muy diversas sustancias para almacenarlas,
biotransformarlas y/o excretarlas.

3. Transporte a tejido graso. Los lpidos pasan fcilmente las membranas y se

almacenan por disolucin simple en las grasas neutras pudiendo dar lugar a grandes
acumulaciones, ya que las grasas representan entre el 20 y el 50% de la masa corporal. Esta
forma de acumulacin puede parecer benigna, sin embargo el compuesto depositado est
siempre en equilibrio con su forma libre en la sangre, haciendo que se incremente la
permanencia del compuesto en este fluido. Tambin existe el peligro de que se produzca un
elevacin sbita de la concentracin de la sustancia en la sangre cuando se tiene una rpida
movilizacin de grasa por inanicin, o por esfuerzos extenuantes y prolongados, etc.

4. Transporte hacia tejido seo. Ciertos iones, como los floruros, el plomo y el
estroncio, se intercambian en las interfaces entre los huesos y el fluido extracelular. El hueso
es almacn de depsito para el plomo y es el sitio de accin del floruro, donde produce
fluorosis sea.

5. Barreras de exclusin. Los compuestos se pueden acumular en un sitio, pero

tambin pueden ser excluidos de otros. La barrera hemato-enceflica protege al Sistema
Nervioso Central (SNC) de la exposicin a muchas sustancias qumicas. Lo mismo sucede
con la barrera placentaria que protege al feto y con la barrera testicular que protege a los
testculos. La barrera del SNC tiene tres mecanismos de exclusin: las clulas epiteliales de
los vasos capilares del SNC estn ntimamente unidas no dejando poros acuosos entre las
clulas. Esto impide la difusin de sustancias polares de bajo peso molecular. Los capilares
del SNC estn rodeados de clulas gliales (astrocitos) imponiendo una pelcula adicional que
cruzar. La concentracin de protenas en el lquido intersticial del SNC es la ms baja de
todo el organismo, haciendo que los lpidos no cuenten con transportadores intercelulares. La
proteccin que proporciona la barrera vara, de una regin del cerebro a otra, debido a las
diferencias en el suministro de sangre y en la permeabilidad de la barrera.
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 FACTORES QUE AFECTAN A LA DISTRIBUCION
La distribucin de compuestos depende, principalmente, de los siguientes factores:
1.- Las propiedades qumico-fsicas del compuesto (estructura, pKa, liposolubilidad, Pm).
2.- El flujo sanguneo.
3.- La afinidad del tejido por el compuesto.

1.- Influencia de la estructura del compuesto en el transporte y distribucin. De ella

depender la mayor o menor afinidad del compuesto por uno u otro rgano tejido. Como
ejemplo, en la siguiente tabla se dan las concentraciones relativas de diferentes derivados del
mercurio, en algunos rganos, a los 10 das de la inyeccin i.v.
Gl.rojos/
Sustancia Sangre Hgado Cerebro Msculo Riones
plasma

Hg0-
Vapor de Hg (inhalacin) 1,5-2 Hg0
2+
Hg
Sales-i de mercurio, Hg(NO3)2 2850 3960
(Soluble en H2O) 0,4 1 6,7 37
(Une SH de albmina y Hb) (Mt) (Mt)

Metilmercurio (al-Hg)
10 1 1,5 0,8 0,7 1,7
(liposoluble, GSH gl. rojo)

Org-Hg y alox-Hg 1 3600 4,7 83 2400

(liposoluble, degradable a i-Hg)

De forma general, se puede afirmar que el 90% de los compuestos orgnicos se transportan en
las clulas rojas. Un 50% del Hg inorgnico es vehiculizado por el plasma, unido a protenas.

2.- Flujo sanguneo. Los principios estudiados para la absorcin son aplicables a la
distribucin, salvo que en sta la concentracin depende del flujo sanguneo, la superficie de
absorcin dentro de los tejidos depende de la masa del tejido y el reparto depende de la razn
sangre/tejido. La presencia de protenas en plasma y tejidos hace ms complejo el sistema. En
muchas ocasiones el paso de un compuesto de la sangre a los tejidos es por simple difusin
(bajo un gradiente de concentracin), aunque tambin depende de la polaridad del compuesto.
rgano Hueso Cerebro T. adiposo Corazn Riones Hgado Msculo Piel
Veloc. de
perfusin 0.02 0.5 0.03 0.6 4 0.8 0.025 0.024
(mL/min/mL tej.)

Algunos tejidos tienen barreras anatmicas (ej. la barrera hematoenceflica).

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3.- La afinidad del tejido por el compuesto. Si la afinidad del tejido por el compuesto es
elevada, se acumular en tejidos pobremente perfundidos (graso) y llevar mucho tiempo cargar
o descargar estos tejidos. La avidez en la unin a protenas del tejido, junto con una relacin
flujo/masa baja, explica la formacin de depsitos.
Acumulacin de sustancias en tejidos tras la exposicin a dieldrin y plomo (niveles relativos
en sangre = 1) (ver tambin la tabla de los derivados del mercurio)
Sustancia Sangre Hgado Cerebro Riones Tej. adiposo Hueso
Dieldrin 1 26,3 3,32/4,93 ---- 158 ----
Plomo 1 1,7 1,1 6.6 ---- 77

INTERACCIONES DE LOS XENOBIOTICOS CON LAS PROTEINAS

Muchos compuestos, orgnicos e inorgnicos, de bajo Pm (mayoritariamente lipoflicos)
se unen reversiblemente a lipoprotenas, albminas (50%) y otras protenas plasmticas.
Xenobiticos acdicos suelen unirse a la albmina, mientras que los xenobiticos bsicos lo
suelen hacer a glicoprotenas con grupos alfa-cidos y lipoprotenas. Muchas sustancias
endgenas (esteroides, vitaminas y metales inicos) se unen a globulinas.
La unin se realiza mediante enlace con grupos funcionales, especialmente sulfhidrilos,
amino, fosfatos, carboxilato, imidazol e hidrxido. Las interacciones inicas, hidrofbicas,
puentes de hidrgeno y fuerzas de Van der Waals estn implicadas en tales uniones. La unin
covalente suele ocurrir en una proporcin mnima y no es importante en la posterior distribucin
de txicos al no estar libre para ejercer su accin.

R
C=O Puentes de hidrgeno
O- CH2OH
+
NH3 CH2OH
O O
Interacciones H C-R
Interacciones R
inicas +Hg R O
hidrofbicas Fuerzas de Van de Waals
O-
R
C=O

Factores que influyen en la unin:

- La naturaleza qumica del sitio de unin (determina las caractersticas de la unin).
- El ambiente de la protena
- La estructura tridimensional del sitio de unin
- La localizacin general en el conjunto global de la protena

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 - Cooperatividad y efectos alostricos.
Mtodos de estudio. Es importante determinar el grado de especificidad de la unin, nmero de
molculas de ligando unidas a la protena y nmero de sitios de unin existentes en la protena.

K1
La unin de Xb a protenas (P) es una unin reversible: [Xb] + [P] [Xb-P]
K2
Se trata como un equilibrio qumico, por lo que se puede aplicar la ley de accin de masas:
[Xb-P] 1
Ka = --------------- = -------
[Xb] [P] Kd

La concentracin total de sitios de unin, Pt, es igual a [P] + [Xb-P], de donde [P] = Pt - [Xb-P]
Haciendo clculos se deduce la ecuacin de la curva de unin:
([P] + [Xb-P]) x Xb Bmax x F
[Xb-P] = --------------------------- o B = --------------- [1]
Kd + Xb Kd + F
donde:
B = concentracin de Xb unido a la protena ([Xb-P])
Bmax = concentracin total de sitios de unin ([P] + [Xb-P])
F = concentracin de Xb libre ([Xb])
Cuando el Xb est unido en un 50% (B/Bmax = 1/2): Kd = F.

De la ecuacin [1] se pueden obtener distintas representaciones, entre las que destacan:
1. Dobles recprocos : 1/B = 1/Bmax + Kd/Bmax x 1/F
Permite calcular la kd y la influencia de otros compuestos sobre la unin del ligando a la
protena.

EJEMPLOS:
Unin de lipoprotenas de Unin del DDT a
suero de rata a: protenas sricas humanas
12

10 Corte: Eje Y = 1/Bmax

1/B

Eje X = -1/Kd
30
8 Lipoproteinas
Dieldrina 8
Paration
1/B x 107
1/B

6 o -globulina
20 Pendiente
6 = Kd/Bmax
-albmina
4
4
10 1/Bmax = 0,65 2 Transferrina
Bmax = 1,5 2
0 DDT
-0,2 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
0
0 1/F
0 2 4 6 8 10 12
0 1 2
- 1/Kd = - 0,058 ; Kd = 17,2
1/F x 108 1/F x 108

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2. Representacin de Scatchard. B/F = Bmax/Kd - 1/Kd x B
Permite conocer la existencia de diferentes tipos de unin y calcular las distintas ka o kd
y el n de sitios de unin (B). La unin especfica presenta alta Ka y bajo B, y la inespecfica
(generalmente con compuestos no polares) presenta baja Ka y elevado B.

1 RECEPTOR 2 RECEPTORES
0,10
B/F

B/F
Interseccin: Bmax/Kd 6
0,08

Pendiente: -Ka = - 1/Kd

0,06 4

0,04
Interseccin: Bmax 2
0,02

0,00 0
0 1 2 0 5 10 15
B B

Curvas de desplazamiento. El empleo de radioligandos ha permitido analizar el fenmeno de

inhibicin o competencia que se establece cuando dos ligandos presentan afinidad por el mismo
sitio de unin en protenas. Esta unin competitiva puede tener importantes consecuencias
cuando uno de los ligandos potencialmente txico tiene muy alta afinidad por el receptor. A
continuacin se muestra un ejemplo de unin competitiva entre fenilbutazona (antiinflamatorio)
y warfarina (anticoagulante) por la albmina humana.

Fenilbutazona + Warfarina
6

5
Moles de Fenilbutazona

Fenilbutazona
Moles de albmina/

0
-1 0 1 2 3

1/Fenilbutazona libre x 10-5

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RECEPTORES CELULARES
Llamamos receptor (Rc) a cualquier molcula que se une a un ligando para iniciar un
cambio en la funcin celular. Los Rc pueden situarse en la membrana plasmtica, con el sitio
de unin al ligando hacia el exterior celular (receptor de acetilcolina, insulina), o en el interior
de la clula (receptores de hormonas esteroideas).

Sitios de unin a acetilcolina

Poro Espacio
acuoso extracelular

Bicapa
lipdica
Citoplasma

MODELO DEL RECEPTOR DE

ACETILCOLINA
RECEPTOR DE HORMONAS ESTEROIDEAS

Unin de hormonas a receptores

El proceso normal en la unin hormona-receptor ocurre de la siguiente manera:
1. Las hormonas (por ejemplo, los estrgenos), viajan por la sangre unidos a protenas
(lipoprotenas), y entran en las clulas buscando su receptor.
2. Una vez dentro de la clula, la hormona se une al receptor y forma el complejo hormona-
receptor.
3. La unin activa el receptor, que inicia diferentes procesos celulares. Acta sobre genes
especficos causando cambios celulares que conducen a determinadas respuestas.

Disruptores endocrinos:
En muchos casos, los xenobiticos se unen a receptores especficos de hormonas y
pueden mimitizar la accin de stas dentro de las clulas, interfiriendo su accin (disrupcin
hormonal).
Si un Xb se une al receptor hormonal dentro de la clula, puede provocar una
respuesta normal de la hormona, una respuesta anormal, o no producir respuesta al bloquear
el sitio de unin del receptor y evitar la unin de la hormona.

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 Ello puede tener importancia cuando se trata de hormonas que juegan importantes
papeles en el organismo humano, como son los estrgenos, hormonas tiroideas, etc. As, o,p-
DDT, algunos PCBs y muchos fitoestrgenos, se unen a Rc de estrgenos.
Estudios ambientales y epidemiolgicos apoyan el incremento de anomalas
reproductivas y de algunos cnceres como consecuencia de la introduccin de determinados
qumicos sintticos a partir de 1940, como son ciertos PCBs y dioxinas, algunos pesticidas, y
estirenos y fenoles alquilados, encontrados en algunos detergentes y plsticos.

CH3 OH OH Cl
Cl
Cl
Cl

HO Cl
HO
17-estradiol dietilestilbestrol c,p'-DDT

Se ha comprobado el efecto de elevadas concentraciones de PCBs y DDT en la

reproduccin de peces (Grandes Lagos), panteras (Florida), humanos, etc.

Otros modos de accin:

Otros disruptores endocrinos envan mensajes celulares a travs de diferentes
protenas que, indirectamente, activan genes y alteran el crecimiento y la divisin celular. Ej.
El beta-hexaclorociclohexano (beta-HCH) produca respuestas estrognicas (divisin y
crecimiento celular) a niveles encontrados en el tejido de cncer de pecho. Este compuesto no
se une al Rc de estrgenos , pero activa la transcripcin de ADN produciendo la respuesta
estrognica.
El p,p-DDT, a niveles menores que los encontrados en el tejido graso del pecho,
evitaba el Rc de estrgenos y estimulaba una compleja mezcla de protenas de sealizacin
celular (Rc de factores de crecimiento) conduciendo a la divisin celular (alimentando el
tumor). Sin embargo, el p,p-DDT puede tambin unir el Rc de andrgenos e inhibir la unin
de stos. De este modo, el mismo compuesto puede influir en el sistema endocrino de
diferentes formas.
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 El mecanismo bioqumico de la toxicidad por PCDD y PCBs, a traves del receptor
de hidrocarburos arilo (Ah) se estudia con detalle en el tema 15.

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