Artigo

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS
CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DE TECNOLOGIA

DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA QUMICA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA
AVALIAO DO EFEITO DO INCULO E DO PERFIL DE

ALIMENTAO DO MOSTO NA PRODUO EM ESCALA
PILOTO E INDUSTRIAL DE ETANOL
CSAR AUGUSTO PORTO MARTINS
SO CARLOS SP - BRASIL
ABRIL DE 2009
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS
CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DE TECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA QUMICA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA
AVALIAO DO EFEITO DO INCULO E DO PERFIL DE

ALIMENTAO DO MOSTO NA PRODUO EM ESCALA
PILOTO E INDUSTRIAL DE ETANOL
CSAR AUGUSTO PORTO MARTINS
Orientador: Prof. Dr. Antonio Jos Gonalves da Cruz
Dissertao apresentada ao Programa de Ps-

Graduao em Engenharia Qumica da
Universidade Federal de So Carlos como parte
dos requisitos necessrios para a obteno do
ttulo de mestre em Engenharia Qumica, rea
de concentrao Pesquisa e Desenvolvimento de
Processos Qumicos
SO CARLOS SP - BRASIL
ABRIL DE 2009
Ficha catalogrfica elaborada pelo DePT da
Biblioteca Comunitria da UFSCar
Martins, Csar Augusto Porto.

M386ae Avaliao do efeito do inculo e do perfil de alimentao
do mosto na produo em escala piloto e industrial de etanol
/ Csar Augusto Porto Martins. -- So Carlos : UFSCar,
2009.
80 f.
Dissertao (Mestrado) -- Universidade Federal de So

Carlos, 2009.
1. Fermentao alcolica. 2. lcool. 3. Bioprocesso. 4.

Modelagem computacional e simulao. 5. Saccharomyces
cerevisiae. I. Ttulo.
CDD: 663.13 (20a)

MEMBROS DA BANCA EXAMINADORA DA DISSERTAAO DE MESTRADO DE
CESAR AUGUSTO PORTO MARTINS APRESENTADA AO PROGRAMA DE PS-
GRADUAO EM ENGENHARIA QU~MICADA UNIVERSIDADE FEDERAL DE
SAO CARLOS, EM 22 DE ABRIL DE 2009.
SANCA EXAMINADORA:
/'
.....-./L&
Prof. Dr. Antonio Jos ncalves da Cruz
Orientador, P P G - E Q ~ U F S C ~ ~
Profa. DP. Maria Lcia Gonsales da Costa Arajo

IQ-DQTAIUNESP- Araraquara
Prof Dr. Alberto Colli ~ a d i n bJnior

PPG-EWUFSCar
Este trabalho dedicado aos meus pais,
minha esposa e meus filhos pela
confiana depositada em mim, pelo
incentivo e apoio aos meus estudos.
AGRADECIMENTOS
A minha famlia, Pai, Me, Irmos e minha querida esposa, que sempre me
incentivaram e me apoiaram ao longo da realizao deste trabalho.
Ao meu orientador, Antonio Jos Gonalves da Cruz, que sempre me incentivou e
acreditou no meu potencial para realizar este trabalho, estando sempre disposio.
Aos meus professores do mestrado que foram fundamentais para a concluso
deste trabalho.
Ao meu amigo Raul pela amizade e estmulo.
A todos que direta ou indiretamente colaboraram para a elaborao deste trabalho.
Introduo 1
1. INTRODUO
O etanol (CH3CH2OH), tambm chamado lcool etlico, ou simplesmente lcool, pode
ser produzido por meio de duas vias. Na primeira via, denominada qumica ou petroqumica,
o etanol obtido a partir da hidratao do eteno. Na segunda, a via bioqumica, o etanol
(tambm denominado bioetanol) obtido a partir da fermentao de biomassa agrcola por
microrganismos. No Brasil, segundo maior produtor de etanol do mundo, a matria-prima
empregada a cana-de-acar. O maior produtor mundial, os Estados Unidos, produz o
etanol empregando o milho como matria-prima (dados referentes ao ano de 2008). O
bioetanol vem ganhando espao no cenrio mundial como um dos principais combustveis
obtidos a partir de fontes renovveis de energia.
No Brasil a quantidade de cana-de-acar processada pelas usinas na safra 2008/09 foi
de 563 milhes de toneladas. Esse valor foi 14,1% superior ao da safra anterior (2007/08).
Foram produzidos 31,4 milhes de toneladas de acar e 26,9 bilhes de litros de etanol. A
produo de etanol aumentou 19,9% em relao safra passada (UNICA, 2009). Quanto
rea plantada, esta foi estimada em 6,7 milhes de hectares na safra 2008/09, com um
aumento de 15,7% em relao rea ocupada na safra anterior (IBGE, 2009). So Paulo o
estado maior produtor de cana, com uma rea de 4,45 milhes ha disponveis para colheita.
Estes dados colocam o setor sucroalcooleiro como um dos mais importantes agronegcios
brasileiros.
No estado de So Paulo, o Centro de Tecnologia Canavieira (CTC) possui 176
unidades associadas (usinas de acar e lcool, destilarias, companhias energticas e
associaes de fornecedores de cana-de-acar) responsveis por 60% da cana produzida no
Brasil (CTC, 2009).
A Figura 1.1 apresenta um mapa com a distribuio do setor sucroenergtico no
Brasil. Observa-se que a produo de cana-de-acar concentra-se nas regies Centro-Sul e
Nordeste do Brasil. As reas assinaladas em vermelho na Figura 1.1 representam os locais
onde se concentram as plantaes e as unidades produtoras de acar, etanol e
bioeletricidade, segundo dados do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica (IBGE),
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) e do Centro de Tecnologia Canavieira
(CTC).
Introduo 2
Figura 1.1. Mapa ilustrativo da produo do setor sucroenergtico brasileiro

(UNICA, 2009).
A Figura 1.2 mostra dados da evoluo da quantidade de cana-de-acar processada

no Brasil. Observa-se nesta figura que a quantidade de cana processada manteve-se
praticamente constante entre as safras de 1990/91 at 1993/94. Da safra 1994/95 at a safra
1999/00 houve um pequeno aumento, com reduo na safra seguinte (2000/01). A partir desta
safra, os nmeros do setor iniciaram um forte aumento e comparando-se os valores da safra
2008/09 com aqueles da safra 2000/2001 observa-se um aumento de 91,5%.
Figura 1.2. Evoluo histrica da quantidade de cana-de-acar processada no Brasil

(UNICA, 2009).
Introduo 3
No Brasil, a maioria das usinas utiliza um processo industrial integrado, devido

produo concomitante de acar e lcool. Outro aspecto relevante que as unidades mais
modernas, que atualmente denominam-se unidades sucroenergticas, produzem tambm a
energia eltrica necessria para o prprio processamento e, em alguns casos, tem disponvel
para venda o excedente de energia gerado. Este fato torna o custo de produo do etanol
brasileiro menor que o do petrleo e do lcool a partir de outras matrias-primas como, por
exemplo, o milho nos Estados Unidos. Apesar de todo o potencial para a cogerao, que tem
se potencializado a partir do aumento da eficincia energtica das usinas atravs da instalao
de caldeiras que operam a altas presses em substituio das tradicionais caldeiras que
operam a 22 kgf/cm2 por modernas e mais eficientes que operam at 90 kgf/cm2.
A produo de energia eltrica apenas uma das alternativas para o uso do bagao.
Pesquisas vm sendo realizadas para transformar o excedente de bagao em lcool, por meio
da hidrlise da celulose, ou ainda, para o seu melhor aproveitamento pela indstria moveleira
e para a fabricao de rao animal.
Embora no Brasil a produo de etanol corresponda a um processo clssico e
estabelecido h ainda a necessidade de se implementar melhorias em diversos pontos do
mesmo. Ganhos de produo podem ser obtidos na etapa de fermentao. Por esta razo
encontram-se vrios estudos sobre o assunto na literatura (VASCONCELOS E VALDMAN,
1988; CARVALHO et al., 1990; VASCONCELOS, 1993, 1996(a, b), 1999; ANDRIETTA et
al. 2003;VASCONCELOS et al., 2004; PHISALAPHONG et al., 2006; BORGES, 2008). No
sentido de aprimorar os processos existentes, principalmente no que tange a implementao
de metodologias analticas e medidas em linha (on-line) de variveis de processo,
modificaes esto sendo implementadas com o objetivo de tornar o processo mais
automatizado.
As unidades produtoras de etanol buscam continuamente inserir melhorias em seus
processos. Assim o diferencial entre elas est no processo produtivo que garante a
competitividade no setor.
Dentre os tipos de processos fermentativos industriais utilizados pelas usinas
brasileiras destaca-se a fermentao por batelada com reciclo de clulas (clssico Melle-
Boinot). Alm deste, pode-se citar o processo contnuo e o processo semi-contnuo, com suas
derivaes como reutilizao de clulas ou ligao de dornas em srie e paralelo (AMORIM,
1996).
O boom na produo de etanol no Brasil ocorreu a partir da implantao do
Programa Nacional do lcool (Pro-lcool) no ano de 1975, uma iniciativa nacional em
Introduo 4
resposta crise do petrleo de 1973. Hoje o lcool utilizado em mistura com gasolina no
Brasil e em pases como, Estados Unidos, Unio Europia, Mxico, ndia, Argentina,
Colmbia e, mais recentemente, no Japo. Contudo, o uso exclusivo de lcool, em larga
escala, como combustvel est concentrado no Brasil. Vem contribuindo tambm para o
aumento no consumo de combustvel no Brasil a tecnologia dos carros bicombustveis.
No processo de produo de etanol em batelada a varivel tempo tem grande
influncia na produtividade em etanol do processo. Dessa forma, a velocidade de enchimento
da dorna tem um papel fundamental. A utilizao de vazes elevadas implicam em tempos de
enchimento menores, mas pode ocasionar formao excessiva de espuma, inibio da
produo de etanol pelo acmulo de substrato e conseqentemente, podem aumentar o tempo
do processo, reduzindo a produtividade em etanol. Por outro lado, vazes muito baixas
resultam em bateladas com maior durao, o que ocasiona menores produtividades em etanol.
Dentre os diversos aspectos relacionados com o processo de fermentao alcolica, a
modelagem cintica do processo fermentativo tem merecido especial ateno
(VASCONCELOS, 1987; CARVALHO et al., 1990; ATALA et al. 1998; RIVERA et al.,
2007; DAR, 2008; BORGES, 2008). Modelos cinticos clssicos considerando efeitos
inibitrios do substrato (acar), do produto (etanol) e das prprias clulas tm sido propostos
para simulao deste processo (LUONG, 1984). A busca por um modelo matemtico que
represente de forma mais fidedigna o processo pode ser til no que diz respeito a aplicao
em estudos para otimizao e controle. No entanto, tais modelos no tm representado
adequadamente o processo industrial de fermentao alcolica, no qual a dorna inicialmente
contendo o inculo (p de cuba), alimentada com uma vazo de mosto at seu
enchimento, seguindo a fermentao, em batelada, at o trmino do substrato.
O presente trabalho teve como objetivo principal avaliar a influncia da concentrao
do inculo e do perfil de alimentao do mosto na produo de etanol em escala piloto e
industrial. Os parmetros utilizados para essa comparao foram a produtividade em etanol e
o rendimento fermentativo (eficincia). Buscou-se encontrar condio sub-tima de operao
com o objetivo de maximizar a produtividade em etanol no processo.
A partir dos dados experimentais obtidos, foram avaliados dois modelos matemticos
propostos para descrever o processo de produo de etanol em escala piloto e industrial.
Reviso Bibliogrfica 5
2. REVISO BIBLIOGRFICA
Neste item sero apresentados os principais conceitos relacionados fermentao
alcolica, para melhor entendimento do trabalho realizado.
2.1. Fermentao: definindo o termo

O termo fermentar provm do latim vulgar fermentare, que por sua vez deriva do
verbo fervere, que em portugus significa ferver (LATdict, 2009). A origem provm da
caracterstica do mosto quando fermenta, ou seja, devido formao e ao desprendimento de
bolhas de dixido de carbono durante o processo. Pasteur definiu a fermentao como
respirao sem ar, devido ao carter anaerbio deste conjunto de reaes. Produtos
oriundos da fermentao como vinho, cerveja, po, so conhecidos desde a Antiguidade. A
causa da fermentao no era compreendida at o sculo XIX, quando um cientista francs de
nome Louis Pasteur, catedrtico de qumica da recm criada Faculdade de Cincias da
Universidade de Lille (Frana), iniciou seus estudos no tema (GOUVEIA-MATOS, 1997).
As leveduras e algumas bactrias so capazes de produzir etanol e dixido de carbono,
processo este denominado de fermentao alcolica. O Homem utiliza h milnios estes dois
produtos da fermentao (etanol e dixido de carbono) na fabricao de bebidas e po.
Os lactobacilos (bactrias presentes no leite) causam a fermentao lctica, tendo
como produto final o cido lctico. As acetobactrias realizam a fermentao actica, gerando
o cido actico (vinagre) (PELCZAR et al., 1996).
2.2. Fermentao Alcolica

De maneira simplificada, a estequiometria da fermentao alcolica pode ser
representada pela equao (2.1) utilizando como fonte de carbono a glicose (SHULER e
KARGI, 2002).
C6 H12O 6 microrgani
2 C 2 H 5OH + 2 CO 2
smo
+ energia (2.1)
Observa-se pela equao (2.1) que ocorre a formao de dois mols de etanol e dois
mols de dixido de carbono para cada mol de glicose convertido. O rendimento terico em
etanol a partir da glicose 0,511 getanol/gglicose.
Os principais microrganismos utilizados na produo de etanol so as leveduras,
sendo as do gnero Saccharomyces as mais utilizadas empregando como matria-prima
hexoses. Produzem etanol a partir de lactose e pentoses os microrganismos Kluyveromyces

fragilis e Candida sp. Algumas bactrias, como as do gnero Zymomonas apresentam
rendimentos que podem superar 95% do terico. As leveduras, contudo, vm sendo as mais
utilizadas para produo industrial de etanol (SHULER e KARGI, 2002).
2.2.1. Produo de Etanol pelas Leveduras

A levedura um organismo facultativo. Cresce na presena de oxignio e tambm na
sua ausncia, neste caso, o processo denominado fermentao.
A levedura realiza a fermentao de acares com o objetivo de obter energia qumica
para sua sobrevivncia, sendo o etanol apenas um subproduto deste processo (AMORIM,
1986).
A transformao do acar (glicose) em etanol (lcool etlico) e dixido de carbono
(CO2) envolve uma seqncia de reaes, catalisadas por enzimas, no interior da levedura.
O objetivo principal da levedura durante o metabolismo anaerbio da glicose gerar
energia (na forma de adenosina tri-fosfato, ATP). Esta energia utilizada internamente pela
clula para manter seu complexo maquinrio celular. O etanol e o dixido de carbono so
produtos de excreo, sem utilidade para a clula. O etanol, alm de outros subprodutos do
metabolismo, pode ser utilizado para gerar mais energia, porm apenas em condies
aerbias (AMORIM, 1986; LIDN, 1993; PELCZAR et al., 1997; SCHULER E KARGI,
2002).
Em termos energticos, o crescimento da levedura em aerobiose (na presena de
oxignio) mais eficiente na produo de energia (na forma de ATP) que seu crescimento em
anaerobiose, a fermentao. por este motivo que em condies aerbias ocorre grande
multiplicao das clulas (aumento da biomassa). Este o processo de produo de fermento,
onde o produto a prpria biomassa formada. As equaes (2.2) e (2.3) expressam
empiricamente a reao global da completa oxidao e fermentao alcolica de um acar
simples, a glicose.
C6O12O 6 + 6 O 2 6 CO 2 + 6 H 2O + 688 kcal (2.2)
C6O12O 6 2 C 2 H 5OH + 2 CO 2 + 54 kcal (2.3)

Observa-se que a completa oxidao da glicose obtm um rendimento energtico

mximo de 688 kcal, enquanto que na fermentao alcolica para a mesma quantidade de
acar obtm-se 54 kcal.
Durante a fermentao, na seqncia de reaes de produo de ATP, intrnsecas
formao de etanol, rotas metablicas alternativas aparecem para propiciar a formao de
materiais necessrios produo de biomassa (polissacardeos, protenas, cidos nuclicos,
etc), bem como para formao de outros produtos de interesse metablico, relacionados direta
ou indiretamente com a adaptao e sobrevivncia, os quais desviam esqueletos carbnicos
provenientes do acar, reduzindo a produo de etanol. Composto como o glicerol, os cidos
orgnicos (principalmente o succnico e o actico), que conjuntamente com a biomassa so
quantitativamente os principais subprodutos metabolicamente relacionados ao equilbrio do
redox celular em anaerobiose.
A fermentao alcolica um processo no oxidativo, ou seja, sem a participao de
oxignio molecular (O2). Portanto, para que o equilibro de redox celular seja mantido, todo o
NADH formado (em reaes de oxidao) deve ser consumido (em reaes de reduo), estas
acopladas produo de etanol e de glicerol.
O glicerol o composto secundrio formado em maior quantidade durante a
fermentao alcolica. Ele formado na mesma via de sntese do etanol, com um desvio,
competindo com este pela utilizao do poder redutor (NADH), motivo pelo qual sua
produo inversamente proporcional a do etanol, causando queda na eficincia
fermentativa.
A formao de glicerol funo do tipo de levedura, da presso osmtica do meio de
cultivo, da formao de cidos orgnicos (succnico e actico) e do crescimento da levedura.
A literatura reporta que concentraes de potssio maiores que
56.000 mg/L no meio de cultivo aumenta em dez vezes a formao de glicerol. AMORIM,
1986 relata que o aumento da concentrao do on potssio de 1.000 para 10.000 mg/L
aumentou significativamente a produo de glicerol.
2.2.2. Metabolismo da Glicose

A gliclise (do grego glikys, que significa doce, e lysis, que significa quebra) ou
mecanismo de Embden-Meyerhof-Parnas (EMP), algumas vezes chamado de via da hexose
difosfato, a via de degradao da glicose. Nesta via uma molcula de glicose (seis tomos
de carbono) quebrada em duas molculas de cido pirvico (trs tomos de carbono). Duas
molculas de ATP so consumidas no processo. Entretanto, quatro molculas de ATP so
formadas pela fosforilao em nvel de substrato. Assim, existe um saldo positivo de duas
molculas de ATP nesta via. Duas molculas de NADH2 so produzidas e devem ser
oxidadas a NAD de modo que a gliclise possa continuar a degradar outras molculas de
glicose (PELCZAR et al., 1997; NELSON e COX, 2002). A Figura 2.1 ilustra esta via.
Figura 2.1. Gliclise: via de degradao da glicose.

Adaptado de PELCZAR et al. (1997).
No que diz respeito fase de ativao, a glicose fosforilada por uma transferase
(hexoquinase) formando glicose-6-fosfato, sendo transformada, por uma isomerase em
frutose-6-fosfato. Sofre nova fosforilao, desta vez por outra transferase (fosfofrutoquinase),
formando frutose-1,6-difosfato. Uma liase separa-a depois em duas molculas de trs
carbonos: gliceraldedo-3-fosfato. No final desta fase foram consumidos dois ATP (NELSON
e COX, 2002).
Segue-se a fase de produo de energia. Por cada molcula, uma oxirredutase retira
dois hidrognios e fornece um fsforo ao composto formando 1,3 difosfoglicerato. Os
hidrognios so usados para reduzir o NAD (nicotinamida adenina dinucleotideo), dando
origem a NADH2. O difosfoglicerato perde um tomo de fsforo, fosforilando uma molcula
de ADP (adenosina difosfato) formando ATP, reao esta catalisada por uma transferase.
Uma ligase remove depois uma molcula de gua e outra transferase catalisa a formao de
outra molcula de ATP, formando-se o cido pirvico. Tem-se assim a formao de 4
molculas de ATP. O co-fator necessrio a algumas das enzimas aqui referenciadas o on
magnsio (NELSON e COX, 2002).
Os organismos vivos e, portanto, as leveduras, regeneram o NAD a partir do NADH2
por duas formas: pela fermentao e pela respirao.
A fermentao um processo independente do oxignio no qual o NADH2 que
produzido durante a gliclise ou outra via de degradao utilizado para reduzir um aceptor
orgnico de eltrons produzido pela prpria clula. Por exemplo, as leveduras crescem em
meio contendo glicose na ausncia de oxignio (fermentao alcolica), Figura 2.2. Aps a
produo de cido pirvico pela gliclise, as leveduras removem uma molcula de CO2 do
cido pirvico (pela ao da enzima descarboxilase) para formar o acetaldedo (equao 2.4).
O acetaldedo recebe dois prtons do NADH2 (reao catalisada pela enzima desidrogenase
alcolica) formando o etanol (equao 2.5). Este passo permite a regenerao do NAD para
ser novamente utilizado na gliclise. Os co-fatores para a fermentao alcolica so a
vitamina B1(tiamina) e o on zinco (II) (NELSON e COX, 2002).
Figura 2.2. Fermentao alcolica: NADH2 reduz o acetaldedo a etanol.

2 cido pirvico 2 acetaldedo + 2 CO 2 (2.4)
2 acetaldedo + 2 NADH 2 2 etanol + 2 NAD (2.5)
A fermentao um processo pouco eficiente na produo de energia, porque os

produtos finais ainda contm grande quantidade de energia qumica. No caso da produo de
etanol, produto final produzido pelas leveduras, esta molcula possui grande contedo
energtico, fato de ser um excelente combustvel e liberar grande quantidade de calor durante
a queima.
A respirao o processo de regenerao de NAD utilizando o NADH2 como doador
de eltrons para um sistema de transporte de eltrons. Se o oxignio o aceptor final de
eltrons do sistema de transporte de eltrons, o processo chamado respirao aerbia.
A respirao tem uma grande vantagem sobre a fermentao: no somente o NAD
regenerado, mas o sistema de transporte de eltrons produz uma fora promotiva que pode ser
dirigida para a sntese adicional de molculas de ATP. Quando as clulas de leveduras
crescem aerobicamente na presena de glicose, as molculas de NADH2 produzidas durante a
gliclise podem doar seus eltrons para o sistema de transporte de eltrons que tem o
oxignio como aceptor final de eltrons. Isso resulta no somente na regenerao do NAD,
mas tambm na gerao de uma fora promotiva, a qual pode conduzir a sntese de molculas
adicionais de ATP (Figura 2.3) (NELSON e COX, 2002).
Figura 2.3. Respirao aerbia onde o NADH2 atua como doador de eltrons para um
sistema de transporte de eltrons, que resulta na sntese de ATP.
A degradao da glicose por organismos aerbios normalmente no pra com a

produo do cido pirvico. Posteriormente a quebra inicia-se com a oxidao do cido
pirvico pelo NAD a acetil-CoA (um cido de dois carbonos, o cido actico, ligado co-
enzima A). Cada uma das duas molculas de NADH2 resultantes pode servir como doador de
eltrons para um sistema de transporte de eltrons, com conseqncia sntese de ATP.
Cada uma das duas molculas de acetil-CoA condensada com um cido de quatro
carbonos, o cido oxalactico, para formar um cido de seis carbonos, o cido ctrico. Este
o primeiro passo em uma seqncia de reaes conhecidas como ciclo do cido ctrico. Para
cada duas molculas de acetil-Co-A que entram no ciclo, acontecem os seguintes eventos:
1. Seis molculas de NADH2 so produzidas, as quais podem servir como doadores de

eltrons para um sistema de eltrons, com subseqente sntese de ATP;
2. Duas molculas de guanosina trifosfato (GTP) so geradas por fosforilao em nvel de
substrato. As duas molculas de GTP so energeticamente equivalentes a duas molculas de
ATP (equao 2.6);
2 GTP + 2 ADP 2 GDP + 2 ATP (2.6)

3. Duas molculas da co-enzima no estado reduzido chamada flavina adenina dinucleotdeo

(FAD) so produzidas. Cada FADH2 pode servir como doador de eltrons para um sistema de
transporte de eltrons, com subseqente sntese de dois ATPs.
No caso das leveduras respirando aerobicamente na presena de glicose, o total de

ATP produzido pela quebra completa de uma molcula de glicose de 38 molculas de
ATPs. Destes, 34 so formados quando NADH2 e FADH2 servem como doadores de eltrons
para o sistema de transporte de eltrons da clula (Figura 2.4). O restante formado pela
fosforilao em nvel de substrato durante a gliclise e o ciclo do cido ctrico (NELSON e
COX, 2002).
Figura 2.4. Produo de ATP pelas leveduras em crescimento aerbio na presena de

glicose. Adaptado de PELCZAR et al. (1997).
Quando as clulas de leveduras crescem anaerobicamente so produzidas pela

fermentao somente duas molculas de ATP para cada molcula de glicose. Depreende-se
que a respirao aerbia mais eficiente que a fermentao na extrao de energia qumica
da glicose.
Quando a levedura S. cerevisiae cultivada na presena de sacarose como fonte de
carbono, esta molcula convertida extracelularmente em glicose e frutose pela ao da
enzima invertase (-frutofuranosidase, E.C.3.2.1.26) excretada pela levedura (Figura 2.5).
Figura 2.5. Equao da reao da hidrlise da sacarose catalisada pela enzima invertase em
meio aquoso. A glicose e a frutose so acares redutores.
A glicose , ento, transportada para o interior da clula, provavelmente pelo

mecanismo da difuso facilitada, e a glicose intracelular imediatamente fosforilada
(seguindo a gliclise, vide Figura 2.1).
As principais rotas metablicas da levedura S. cerevisiae so mostradas
esquematicamente na Figura 2.6.
Figura 2.6. Rotas catablicas bsicas da levedura S. cerevisiae (LIDN, 1993).

Abreviaes utilizadas: G = glicose; G-6-P = glicose-6-fosfato; F-6-P = frutose-6-fosfato; F-1,6-P = frutose-1,6-
difosfato; DHAP = dihidrxiacetona fosfato; PPP = via da pentose fosfato; PEP = fosfoenolpiruvato; ciclo TCA
= ciclo do cido tricarboxlico; ETC cadeia de transporte de eltrons.
O glicerol um subproduto do processo de produo de etanol formado em maior

quantidade. Ele formado na mesma via de sntese do etanol, como um desvio, competindo
com este pela utilizao do poder redutor do NADH (LIDN, 1993).
A sua produo inversamente produo de etanol, o que causa uma queda na
eficincia do processo. A formao de glicerol funo do tipo de levedura, da presso
osmtica do meio de cultura, da formao de cidos orgnicos (succnico e actico) e do

crescimento da levedura (LIDN, 1993).
O glicerol considerado um agente osmorregulador, pois sua formao aumentada
em meios com baixa atividade de gua (alta presso osmtica), determinada pela presena de
solutos como acar e sais. BASSO et al. (1996) relatam que um aumento no teor do on
potssio de 100 para 10.000 mg/L aumentam significativamente a produo de glicerol.
Apontam que a literatura descreve aumentos da ordem de dez vezes na concentrao de
glicerol ocorreram quando a concentrao do on potssio foi de 56.000 mg/L.
A explicao bioqumica para formao do glicerol reside no fato de que sua
formao est acoplada manuteno do equilbrio redox intracelular (Figura 2.7). Como a
biossntese do glicerol utiliza o poder redutor do NADH, a produo do mesmo tem que ser
aumentada quando h excesso de NADH na clula. Isto ocorre quando h uma maior
produo de biomassa (crescimento) ou formao de cidos orgnicos (succnico e actico).
Figura 2.7. Esquema ilustrativo representando o glicerol como um agente redox durante o
metabolismo anaerbio da levedura S. cerevisiae (LIDN, 1993).
O catabolismo da glicose pela levedura Saccharomyces cerevisiae, com o objetivo de

produzir ATP, pode ocorrer pela via aerbia ou anaerbia. A via glicoltica comum as duas,
tendo como produto final o piruvato. Na ausncia de oxignio, ocorre a via anaerbia. Na
Figura 2.8 apresenta-se diagrama esquemtico do catabolismo da glicose (via aerbia e
anaerbia) em clulas da levedura S. cerevisiae.
Figura 2.8. Diagrama esquemtico do catabolismo da glicose em clulas da levedura S.

cerevisiae (VOLPE e RETTORI, 2000).
2.3. Processos Fermentativos

O processo de produo de etanol mais simples no Brasil o de produo de
aguardente com fermentao em batelada e sem recirculao do fermento. O mosto
(geralmente caldo de cana decantado e somente peneirado) adicionado dorna lentamente
sobre o fermento (chamado p-de-cuba) que ocupa um volume de 10 a 15% em relao ao
volume total final (AMORIM, 1996).
Para a produo de etanol, a maioria das usinas emprega o processo em batelada
com recirculao e tratamento de levedura (processo Melle-Boinot).
O processo em batelada mais seguro quando se tem problemas de manuteno e
de assepsia, pois ao final de cada batelada a dorna esvaziada e realiza-se a assepsia, antes de
iniciar nova fermentao.
O processo contnuo caracteriza-se por possuir uma alimentao contnua do mosto a
uma determinada vazo, sendo o volume de reao mantido constante pela retirada contnua
do caldo fermentado. Estes processos, quando bem operados, levam a uma maior
produtividade, porm com custos iniciais e de operao maiores, e exigindo sistemas de
controle mais sofisticados. A fermentao contnua um processo que requer maior
conhecimento do comportamento da levedura em relao ao ambiente de cultivo. Variveis
como pH, temperatura, concentraes de sacarose, etanol e clulas, alm da viabilidade

celular, exercem grande influncia na produtividade do sistema (ATALA et al., 2000).
FINGUERUT (2005) relata que nos processos de fermentao contnuos tm sido verificadas
mutaes nas clulas das leveduras, no s de comportamento fermentativo, como tambm
relacionado s suas caractersticas genticas.
Ao longo dos anos foram sendo selecionadas cepas com maior capacidade de
produo de etanol tais como PE-1 e PE-2 (isolada na Usina da Pedra, Serrana-SP), CAT-1
(isolada na Usina Virgolino de Oliveira, Catanduva-SP) e BG-1 (isolada na Usina Barra
Grande, Lenois Paulista-SP).
Atualmente as usinas brasileiras operam com rendimento (calculado com base em
subprodutos) na faixa de 90% (AMORIM et al., 2001). O teor alcolico atingido ao final do
processo encontra-se na faixa de 8,5 a 9,0 o GL (CTC, 2009).
2.4. O Etanol no Brasil

As mudanas climticas e as oscilaes no preo do petrleo ao longo dos anos
(Figura 2.9) tm aumentado o interesse mundial pela busca por fontes alternativas de energia.
O aumento na demanda por bioetanol, conseqncia da preocupao mundial em se reduzir
as emisses de gases causadores do efeito estufa e do aumento nos preos do petrleo, tem
incentivado a busca por meios de produo mais eficientes deste biocombustvel.
Figura 2.9. Evoluo histrica do preo do barril de petrleo.

Fonte: http://jccavalcanti.wordpress.com/2008/04/23/serie-historica-do-preco-do-barril-de-petroleo/
A preocupao mundial com o aquecimento global e o aumento no preo do petrleo

geram a expectativa de grande aumento na produo de bioetanol nos prximos anos. O
Brasil o maior produtor mundial de cana-de-acar, que a matria-prima mais eficiente

para produo de etanol atualmente, e o maior exportador e bioetanol, sendo que a produo
em larga escala deste combustvel j dura mais de 30 anos.
O bioetanol, produzido no Brasil a partir da cana-de-acar, considerado um dos
principais substitutos da gasolina, sendo empregado como combustvel na forma hidratada
(entre 92,6 a 93,8% INPM), no caso de motores movidos a lcool, ou na forma anidra
(mnimo de 99,3% INPM), em mistura gasolina. O Brasil um dos pases pioneiros na
utilizao do bioetanol como combustvel.
Historicamente, foi a partir dos anos 30, com incentivo do governo para produo de
lcool-motor, que o Brasil aumentou a produo de lcool anidro significativamente
(AMORIM, 2005). A partir dos anos 70, mais precisamente 1975, com o lanamento do
Programa Nacional do lcool (Pro-lcool), o setor industrial foi incentivado a incrementar a
produo de lcool anidro, motivado pelo aumento na proporo da mistura lcool anidro na
gasolina (AMORIM, 2005). A Tabela 2.1 apresenta a evoluo do percentual de mistura do
etanol anidro gasolina no Brasil.
Em 1979 o governo firmou o Protocolo de Intenes com a Associao dos
Fabricantes de Veculos Automotivos (Anfavea), onde as montadoras se comprometeram a
fabricarem veculos adaptados ao uso do lcool hidratado. O Pro-lcool tornou-se o maior
programa energtico do mundo, com a utilizao de combustvel lquido alternativo,
renovvel e menos poluente (AMORIM, 2005).
Tabela 2.1. Proporo da mistura de lcool anidro gasolina.

Ano Volume de lcool Volume de gasolina (L) Porcentagem de etanol na
(L) gasolina (%)
1979 0,14 0,86 14
1980 0,17 0,83 17
1981 0,12 0,88 12
1982 - 1986 0,20 0,80 20
1987 - 2002 0,22 0,78 22
2002 - 2007 0,24 0,76 24
2007-2009 0,25 0,75 25
Fonte: ANP (2009).
Analisando o histrico da produo de etanol no Brasil (Figura 2.10) observa-se que a

partir da safra 2000/01 houve um aumento na produo de etanol. Este aumento acentua-se a
partir da safra 2002/03 com o advento da tecnologia Flex-Fuel (motores capazes de utilizar a
mistura gasolina-lcool em qualquer proporo).
Produo de Etanol no Brasil (m^3)

30,000,000
25,000,000
20,000,000
Produo Etanol (m^3)
15,000,000
10,000,000
5,000,000
0
90/91 91/92 92/93 93/94 94/95 95/96 96/97 97/98 98/99 99/00 00/01 01/02 02/03 03/04 04/05 05/06 06/07 07/08 08/09
Safra
Figura 2.10. Evoluo histrica da produo de etanol (anidro e hidratado) no Brasil.

Fonte UNICA (2009).
2.5. Fatores que influenciam na Fermentao Alcolica
O principal microrganismo utilizado na fermentao alcolica, em escala industrial,
a levedura Saccharomyces cerevisiae. A espcie de levedura a ser escolhida para fermentao
varia em funo das caractersticas do mosto, operao com concentraes elevadas de
etanol. S. cerevisiae tem como caracterstica principal a fermentao de hexoses, crescimento
em pH na faixa de 3,0 a 5,0 (cido) o que minimiza problemas de contaminao durante o
processo (SCHULER e KARGI, 2002).
A levedura S. cerevisiae possui linhagens diferentes, quando isoladas de meios
diferentes, como vinho, cerveja ou mostos de destilarias. Cada linhagem tem suas
caractersticas prprias, desenvolvidas em funo das condies do meio, e que afetam
diretamente o rendimento do processo (AMORIM et al., 2001).
As leveduras so mesfilas e possuem temperaturas timas para a produo industrial
de etanol na faixa de 26 a 35C. O aumento da temperatura no meio fermentativo favorece a
contaminao bacteriana, alm de favorecer a toxidez da levedura pelo etanol (AMORIM et
al., 2001). O aumento da temperatura tambm ocasiona uma maior formao de espuma no
processo.
Outro microrganismo com grande potencial para produo de etanol a bactria

Zymomonas mobilis. Esta bactria tem algumas vantagens em relao a S. cerevisiae como:
boa tolerncia ao etanol, rendimentos prximos ao terico, elevada velocidade de consumo de
substrato e baixo crescimento celular (GUNASEKARAN e RAJ, 1990). Contudo, este
microrganismo muito sensvel (cultivo em pH prximo da neutralidade) e exige condies
estreis de mosto, o que dificulta sua aplicao industrial nas atuais usinas brasileiras.
Outro fator importante para o controle da fermentao alcolica o pH do meio de
cultivo. AMORIM (2001) relata que o pH ideal para fermentao alcolica encontra-se entre
4 a 5. Fermentaes conduzidas em meios mais cidos resultam em maiores rendimentos de
etanol, devido baixa produo de glicerol. Esta condio tambm auxilia no controle da
infeco, pois reduz o crescimento de bactrias contaminantes.
A contaminao bacteriana influencia de forma negativa a fermentao alcolica, uma
vez que a bactria compete com a levedura pelo mesmo substrato e gera subprodutos que so
inibidores do crescimento da levedura. As instalaes de usinas geralmente no so
projetadas para trabalhar com culturas puras, entretanto infeces crnicas devem ser
eliminadas, pois afetam o rendimento da produo de etanol (SKINNER e LEATHERS,
2004).
Sabe-se que as bactrias lcticas so as principais contaminantes do processo de
fermentao alcolica. A concentrao dos cidos lctico e actico medida periodicamente
para controle dos nveis de infeco. Testes com culturas puras de S. cerevisiae em presena
de cidos lcticos e acticos demonstram que as mesmas se estressam e produzem menos
etanol e biomassa (SKINNER e LEATHERS, 2004).
A contaminao bacteriana ocorre em diferentes tipos de substrato, como os
provenientes do milho, do trigo e da cana-de-acar, entre outros. Por esta razo, vrios
agentes qumicos e bioqumicos tm sido testados para combater estas bactrias, como
perxido de hidrognio, metabissulfito de potssio e antibiticos como a penicilina
(SKINNER e LEATHERS, 2004).
A floculao da levedura pode estar associada contaminao bacteriana, embora se
conhea outras causas para o incio da floculao, como, por exemplo, a contaminao por
bagacilho. Este fenmeno caracterizado pela aglutinao das clulas de levedura, formando
flocos os quais se separam rapidamente do meio de cultivo, ficando suspensos. H varias
opinies diferentes sobre as causas da floculao, uma delas est associada presena de
clcio no meio fermentativo. Outros pesquisadores acreditam ocorrer apenas ligaes entre os
grupos aninicos da parede celular das leveduras e ainda h observaes em relao a

protenas especficas, encontradas apenas em meio floculado (NAHVI et al., 2002).
Os nutrientes tambm tm papel importante na obteno de um bom rendimento
industrial para fermentao alcolica. O caldo de cana por sua natureza possui sais minerais,
entretanto suas quantidades variam em funo do solo, clima e perodo do ano. Desta forma,
torna-se necessrio suplementao adequada de alguns elementos para obteno de uma
fermentao satisfatria (VASCONCELOS, 1987). Normalmente os compostos adicionados
ao mosto so sulfatos de zinco, magnsio e mangans e difosfato de amnio.
O fsforo um suplemento essencial, pois favorece a ao das leveduras e aumenta
eficincia e produtividade do processo fermentativo. Outro elemento importante no
metabolismo da levedura o nitrognio. A forma como esse nutriente se encontra influencia
na melhor absoro do mesmo pela levedura. A forma amoniacal mais favorvel ao seu
aproveitamento (VASCONCELOS, 1987). Na ausncia desta forma, a levedura procura
outras fontes como aminocidos, que influenciam na formao de subprodutos, como alcois
isoamlico, amlico, proplico entre outros. Os nutrientes metlicos tambm apresentam
grande importncia no processo fermentativo, uma vez que so responsveis pelo bom
desempenho das reaes enzimticas (VASCONCELOS, 1987).
A formao de alcois superiores ocorre devido descarboxilao de cetocidos
intermedirios da biossntese de aminocidos, por isto favorecido pela falta de nitrognio
amoniacal. Os parmetros de fermentao tambm influenciam diretamente na formao
destes alcois, como temperatura, pH e composio do meio (GUTIERRES, 1993).
Muito se discute em relao a necessidade ou no de suplementao de nutrientes,
principalmente fsforo e nitrognio, alguns pesquisadores concluem que a adio benfica,
enquanto outros questionam o assunto. O fsforo, por exemplo, apresenta grande importncia
na fermentao, pois representa fonte de energia para o metabolismo celular. Entretanto, foi
verificado que o fsforo acelera a formao de alcois superiores, principalmente devido ao
efeito sinrgico, quando combinado ao nitrognio (SILVA et al., 2006).
Considerando que tanto os acares quanto o etanol exercem efeito de inibio sobre
o metabolismo da levedura, a alimentao do mosto s dornas tem influencia direta na
produtividade e na eficincia da fermentao. Este controle importante para que o processo
fermentativo no sofra interrupo ou tenha sua velocidade reduzida pelo acmulo excessivo
de substrato (sugar shock). Este problema geralmente controlado nas unidades industriais
atravs do controle da concentrao de acares redutores totais (ART) no meio de
fermentao (VASCONCELOS, 1991).
Com o advento do Pro-lcool, a produo brasileira de etanol teve um aumento de

aproximadamente 48 vezes a produo da safra 1975/1976 (VASCONCELOS, 1987;
NICA, 2009). Dessa forma, a varivel tempo de fermentao passou a ter grande
importncia e conseqentemente as velocidades de enchimento das dornas passaram a ter
papel fundamental para a produtividade do processo. Este fato est associado ao avano
tecnolgico no processo.
2.6. Processos Industriais de Fermentao Alcolica

No incio dos anos sessenta, o processo clssico de fermentao de cortes era muito
utilizado nas indstrias brasileiras. Este processo consistia em iniciar o enchimento de uma
dorna, onde previamente fora adicionado o fermento, com mosto e ao trmino transferir
metade de seu volume para outra dorna, iniciando a alimentao de mosto. E assim
sucessivamente (BORZANI et al., 1975). Com a implantao do processo Melle-Boinot no
Brasil, muitas usinas e destilarias iniciaram o processo de substituio do modelo de
produo de cortes. O processo Melle-Boinot (batelada alimentada com reciclo de clulas)
surgiu na Frana na dcada de trinta e se popularizou no Brasil no final da dcada de
sessenta. Este modelo de processo contribuiu para evoluo da fermentao alcolica, devido
as suas inmeras vantagens, como a menor reproduo celular e elevado rendimento em
etanol, eliminao dos contaminantes por centrifugao do meio fermentado, fermentao
mais pura com utilizao do tratamento cido e eliminao do preparo de cultura pura, devido
ao reciclo de fermento (ANDRIETTA, 1994).
O processo Melle-Boinot trouxe vrios benefcios fermentao alcolica, tais como,
o reaproveitamento do fermento, que antes era enviado para coluna de destilao, juntamente
com o vinho. Com isto o rendimento fermentativo aumento, pois menor quantidade de acar
era necessria para produzir um maior volume de lcool, uma vez que se reduziu a massa de
acar destinada produo de clulas. Entretanto, com o tempo, descobriram-se algumas
desvantagens do processo. A centrifugao no eliminava todos os microrganismos, como se
acreditava no incio, separando apenas as bactrias de menor tamanho, como cocos e
micrococos. Os bastonetes, de maior tamanho, chegavam at se concentrar no processo de
centrifugao. Com vantagens e desvantagens descobertas ao longo do tempo, o processo
Melle-Boinot , ainda, o mtodo mais usado at hoje pelas destilarias do Brasil (AMORIM,
2005).
Um processo qumico pode ser classificado com base no procedimento de entrada e
retirada de matria em: processo em batelada (descontnuo), semi-contnuo e contnuo. Em
uma fermentao descontinua, o substrato inicialmente carregado em um recipiente e, ao

termino do processo, o produto retirado do mesmo. Em uma fermentao continua, a
matria-prima adicionada com uma vazo constante e o meio fermentado retirado com a
mesma vazo de alimentao. No processo de fermentao semi-contnuo, o meio de cultura
adicionado ao longo do processo, sendo o produto retirado somente ao trmino (BORZANI,
2001).
O processo contnuo tem como caracterstica principal, a operao em regime
permanente. Este modelo pouco utilizado pelas usinas, pelo excessivo grau de controle
necessrio e pela necessidade de garantir a esterilidade do processo. Testes realizados em
escala piloto e semi-industrial mostram a possibilidade do cultivo de diversos produtos
atravs deste sistema e demonstram as vantagens em relao ao sistema descontinuo
(BORZANI, 2001).
A cana de acar a principal matria-prima para produo de lcool no Brasil.
composta por fibra e caldo (gua e slidos solveis totais). A Tabela 2.2 apresenta a
composio mdia da cana-de-acar (COPERSUCAR, 2009).
Tabela 2.2. Composio mdia da cana-de-acar

Composio Teor
gua 65 - 75
Acares 11 - 18
Fibras 8 - 14
Slidos solveis 12 - 23
A Tabela 2.3 apresenta os principais constituintes da cana-de-acar

(COPERSUCAR, 2009).
Tabela 2.3. Principais constituintes da cana-de-acar

Constituintes Slidos solveis (%)
Acares 75 a 93
Sacarose 70 a 91
Glicose 2a4
Frutose 2a4
Sais 3,0 a 5,0
De cidos inorgnicos 1,5 a 4,5
De cidos orgnicos 1,0 a 3,0
Protenas 0,5 a 0,6
Amido 0,001 a 0,05
Gomas 0,3 a 0,6
Ceras e graxas 0,05 a 0,15
Corantes 3a5
Geralmente, o caldo obtido na extrao para produo do etanol aquecido em torno

de 110C, com o objetivo de reduzir a carga microbiana do mesmo e em seguida segue para
decantao, em destilarias isoladas, pode-se evaporar o caldo para o preparo do mosto e
inicio da fermentao. J em destilarias, que so anexas a fabrica de acar, utiliza-se mel
proveniente da centrifugao do acar, que contm teor de acar acima de 65% para
preparo do mosto, juntamente com o caldo, tendo o brix ajustado para a faixa entre 19 a 23. O
mosto preparado para fermentao contm minerais e nutrientes orgnicos, suficientes para se
iniciar a fermentao (WHEALS, 1999). A Figura 2.11 ilustra um tpico fluxograma do
processo fermentativo.
Figura 2.11. Ilustrao de um fluxograma tpico do processo fermentativo.

No Brasil, 70% das usinas utilizam processo batelada. O processo contnuo tambm
usado em algumas usinas. Ambos os processos utilizam centrifugao para separar o creme
de levedura do vinho e reutilizao deste creme no processo. O creme, geralmente tratado
com cido sulfrico para reduzir a contaminao por bactria e correo do pH (WHEALS,
1999)
A utilizao de altas concentraes do inculo (8-17% em base mida) e temperaturas
na faixa de 33 a 35C contribuem para reduo do crescimento celular e aumento da
produo de lcool (10 a 12 oGL), gerando rendimento de etanol da ordem de 90 a 92%. O
curto tempo de fermentao (6 8 h) tem importncia dentro do processo fermentativo pois
uma das variveis que afeta, diretamente, a produtividade em etanol e ainda permite que a
levedura seja reciclada at 3 vezes por dia, durante 200 dias de safra. A contaminao
bacteriana pode ocorrer, mas ela controlada pelo uso de antibiticos. Algumas usinas
possuem avanadas tecnologias em controle e automao (WHEALS, 1999).
2.7. Cintica da Fermentao

Os processos bioqumicos so muito dinmicos quando comparados aos processos
qumicos, devido complexidade dos sistemas biolgicos.
O estudo matemtico da cintica microbiana tem como base duas fases (LEVEAU,
1985):
Abitica fase que corresponde ao meio ambiente, condies fsico-qumicas
imediatas das clulas e pode ser manipulvel, como a adio de nutrientes ao meio.
Bitica fase relacionada s propriedades genticas, bioqumicas e fisiolgicas do
microorganismo e no pode ser manipulada durante o processo de fermentao
(VASCONCELOS, 1987).
A fermentao alcolica um processo bastante conhecido, entretanto no existe um

modelo cintico nico que descreva adequadamente o processo de produo de etanol. Alm
do que, as condies para fermentao alcolica so muito mais severas do que o meio para
crescimento celular (BAILEY e OLLIS, 1986).
O estudo da cintica das fermentaes importante na determinao das velocidades
de transformaes que ocorrem durante a fermentao. possvel determinar os fatores que
influem nesta velocidade de transformao e correlacion-los por meio de equaes
matemticas. Uma vez descoberto os fatores que influenciam na velocidade de

transformao, temos uma ferramenta de otimizao de processo (COPERSUCAR, 1987).
Em uma fermentao ocorrem muitas transformaes ao mesmo tempo: clulas
crescem, se reproduzem e morrem, substancias diversas existentes no meio so consumidas
pelos microorganismos e produtos de metabolismo so lanados no meio (Figura 2.12). No
caso da fermentao alcolica, os principais fatores a se medir so: a variao da
concentrao de clulas com o tempo, a variao da concentrao de substrato (acares
fermentescveis) com o tempo e a variao da concentrao de etanol com o tempo. Outras
substncias como CO2 ou variao de nutrientes, podem ser medidas eventualmente
(SHULER e KARGI, 2002).
Figura 2.12. Variao das concentraes de substrato (S), clulas (X) e produto (P) com o
tempo em um processo descontnuo.
Considerando os parmetros:
S = Concentrao de substrato presente no meio em um instante t;
X = Concentrao dos microorganismos presentes no meio em um instante t;
P = Concentrao de produto presente no meio em um instante t.
A Figura 2.12 representa o comportamento de um processo fermentativo descontinuo,

onde enquanto ocorre consumo de substrato, ocorre tambm formao de produto e clula. A
partir da curva apresentada na Figura 2.12 possvel determinar as velocidades mdias de
transformaes em um perodo de tempo (equaes 2.1 a 2.3).
S ( So Sf )
rs = = (2.1)
t (tf to )
P ( Po Pf )
rp = = (2.2)
t (tf to )
X ( Xo Xf )
rx = = (2.3)
t (tf to )
Estas velocidades mdias de transformao do processo auxiliam no entendimento do

fenmeno e na determinao de equipamentos para tal, como tamanho do fermentador.
Em alguns casos de grande interesse a medio de velocidades instantneas no
processo fermentativo, para tal utiliza-se das relaes (equaes 2.4 a 2.6).
S g
rs = L h (2.4)
t
X g
rx = (2.5)
t L h
P g
rp = (2.6)
t L h
A cintica dos processos fermentativos pode ser classificada em funo da formao

do produto. Na fermentao alcolica, a formao do produto est diretamente relacionada ao
consumo de substrato. Existem outras fermentaes, onde a formao de produto est
indiretamente associada utilizao do substrato, como por exemplo, a produo de cido
ctrico. E ainda podemos citar as fermentaes onde a sntese do produto est aparentemente
no associada ao consumo do substrato, como a produo de penicilina (COPERSUCAR,
1987).
Os processos fermentativos podem ser classificados em funo da reao que ocorre
na transformao do substrato em produto. Os processos fermentativos so tipicamente
heterogneos, possui a fase lquida que corresponde ao meio de fermentao, a fase slida
que constituda pelos microorganismos e ainda existe a fase gasosa, representada pelo CO2
ou O2 contidos no meio. A classificao compreende, fermentao simples, onde o nutriente

transformado em produto em proporo constante, sem acumulo de intermedirios;
fermentao simultnea, onde os nutrientes so convertidos em produtos em proporo
varivel, sem acmulo de intermedirio; fermentaes consecutivas, onde os nutrientes so
convertidos em produto com acmulo de metablito intermedirio; e stepwise, onde os
nutrientes so convertidos em metablitos intermedirios e posteriormente convertidos em
produto (COPERSUCAR, 1987).
A fermentao simples pode ser de dois tipos, com ou sem crescimento de
microorganismo associado, como se observa nas Figuras 2.13 e 2.14, respectivamente.
Figura 2.13. Reao simples representativa do crescimento de Aerobacter cloacaer.
Figura 2.14. Reao simples representativa da converso de glicose em acido glicmico por
miclio de Aspergillus niger ressuspendido.
A cintica da fermentao alcolica um assinto de interesse dos centros de pesquisa

especializados, tendo em vista seu potencial industrial e econmico (LIMA e MARCONDE,
2002). O objetivo bsico do estudo da cintica de processos microbianos quantificar as
taxas de crescimento celular, de consumo de substrato, de formao de produtos e demais
parmetros relacionados (VIEGAS, 2003). A complexidade da descrio cintica que
requerida e apropriada depende das situaes fsicas e da aplicao pretendida. No
possvel a formulao de um modelo que inclua todas as caractersticas e detalhes celulares
(STREMEL, 2001). Os modelos cinticos normalmente usados em fermentaes podem ser
divididos em (BAILEY e OLLIS,1986):
No estruturados e no segregados, nos quais as clulas de microorganismos so
consideradas como soluto;
Estruturados e no segregados, onde as clulas so tratadas como seres individuais de
mltiplos componentes, porem com composio mdia semelhante;
No estruturados e segregados, onde as clulas so tratadas como seres individuais
distintos, porem descritos por um nico componente; e
Estruturados e segregados, onde as clulas de microorganismos so consideradas
como indivduos distintos e formados de mltiplos componentes.
O tipo de modelo mais encontrado na literatura para descrever a fermentao

alcolica do tipo no estruturado e no segregado. A equao mais simples e popular para
descrever o crescimento microbiano a equao de Monod, que considera a presena de
substrato como limitante para o crescimento (HAN e LEVENSPIEL, 1988). A cintica de
Monod est apresentada na Tabela 2.2, pela Eq. 2.10 e aplicvel somente quando no
ocorre a presena de produtos metablicos txicos (LUONG, 1985).
THATIPAMALA et al. (1992) verificaram na fermentao alcolica o rendimento de
biomassa com a levedura Saccharomyces cerevisiae diminuiu de 0,156 para 0,026 com o
aumento da concentrao de etanol de 0 a 107 g/l, indicando uma relao entre o rendimento
da biomassa e a inibio pelo produto. Estes autores propuseram um modelo para representar
a diminuio do coeficiente de rendimento clula-substrato (YX/S) com o aumento das
concentraes iniciais de etanol e de substrato e a diminuio da taxa de crescimento
especifico com o aumento da concentrao inicial de substrato. Foi considerado um modelo
especfico para a fase de adaptao (fase lag) e observaram experimentalmente que a inibio
pelo substrato afetou mais o rendimento em etanol do que a inibio pelo produto, por
provocar a diminuio da viabilidade celular. Observaram ainda que a fase lag aumentou com
o aumento da concentrao inicial de substrato.
A inibio do crescimento celular devido concentrao de etanol evidenciada
acima de 15g/l. A concentrao mxima de etanol permitida, acima da qual as clulas no
crescem, foi predita em 112g/l. A capacidade de produo de etanol em que as clulas so
completamente inibidas foi de 115 g/L de etanol (LUONG, 1985; FERREIRA, 1998). Alm
da inibio provocada pela presena de etanol, outro fator a ser avaliado a limitao
relacionada ao crescimento microbiano ao substrato ou mesmo a outras substancias presentes
no meio (HAN e LEVENSPIEL, 1988). A inibio pelo substrato desativa importantes
enzimas, alm de modificar o caminho metablico que vital para a sobrevivncia da
levedura. O efeito inibidor provocado pelo substrato na fermentao alcolica ocorre quando
a concentrao supera 150g/l (THATIPAMALA et al., 1992).
A fermentao alcolica tambm afetada pela temperatura do biorreator, onde o
rendimento alcolico maior em temperaturas mais baixas, 15C a 20C, porm apresentam
uma demora para obteno da populao mxima. Quando a temperatura no biorreator de
25C a 30C a taxa inicial de fermentao maior e a temperaturas superiores a 35C
decresce a viabilidade celular (TORIJA et al., 2003) e podem ocorrer perdas e
contaminaes. O intervalo de temperatura usual em indstrias de 31 a 33 C (AMORIM,
2005).
Um modelo para a produo de etanol a partir de uma mistura de glicose e maltose foi
proposto por LEE et al. (1995), que incluiu um termo representando o efeito de represso da
glicose no consumo de maltose. FERREIRA et al. (1998) estimaram os parmetros do
modelo cintico de Andrews, citado por LUONG (1987), considerando concentraes iniciais
de substrato na faixa de 5 a 190 g/l, por meio de experimentos num reator em batelada usando
Saccharomyces cerevisiae. BARBA et al. (2001) estimaram os parmetros do modelo de
crescimento para a fermentao de soro usando K. lactis por meio de experimentos em
batelada e batelada alimentada. Os dados experimentais de dois testes em batelada e os
pontos experimentais da fase batelada do teste em batelada alimentada foram
utilizados para a estimao dos parmetros. O modelo foi validado pelo experimento em
batelada alimentada.
TOSETTO (2002) analisou o comportamento cintico da cepa de levedura Y904 em
nove diferentes matrias-primas provenientes de unidades produtoras de acar e lcool.
Foram estudadas as cinticas de produo de etanol, clulas e de consumo de substrato, assim
como o desempenho da cepa em cada matria-prima com relao produtividade e
rendimento em etanol. Para a avaliao cintica, foram utilizados seis modelos do tipo no
estruturado. Os que mais se adequaram aos dados experimentais, com a utilizao de um
nico substrato e concentraes iniciais de sacarose entre 150 e 190 g/L, foram os modelos de
GHOSE e THYAGI (1979), com o parmetro n diferente de um, e o de JIN et al.
(apud TOSETTO, 2002). Em todos os ensaios realizados, observou-se que a velocidade
especfica de produo de etanol esteve vinculada velocidade especfica de crescimento
microbiano at determinada fase da fermentao. Aps esta fase, a diminuio da
velocidade de crescimento microbiano no causou a diminuio da velocidade especfica de
produo de etanol, mostrando que as mesmas no esto mais associadas.
VASCONCELOS et al. (1992) testaram dez modelos cinticos para o processo de
fermentao alcolica industrial em batelada alimentada, com vazo varivel de
alimentao e reciclo do microrganismo agente da fermentao (S. cerevisiae). Foram
realizados vinte e dois ensaios experimentais na destilaria anexa Usina Seresta AL,
utilizando mosto de caldo de cana-de-acar. O volume de operao dos fermentadores
foi de aproximadamente 145.000 litros. Os autores concluram que o modelo o qual
considerou a inibio pelo produto na forma parablica, foi o que apresentou os melhores
ajustes dos resultados experimentais.
Os resultados experimentais do processo simultneo de sacarificao e fermentao de
bagao a etanol usando uma cepa recombinante S. cerevisiae YPB-G foram avaliados por
KROUMOV et al. (2006) para desenvolver um modelo no estruturado de nvel bi-
hierrquico. O desenvolvimento do modelo incluiu uma aplicao da metodologia de anlise
da superfcie de resposta para avaliar os parmetros chave dos modelos cinticos e analisar a
taxa de sntese de enzimas amilolticas.
LAKANA et al. (2007) utilizaram sorgo suplementado com 0,5% de sulfato de
amnia da concentrao inicial de clulas e de acar como substrato para a produo de
etanol por S. cerevisiae TISTR 5048 pelo processo em batelada e em batelada alimentada. Os
autores verificaram que na fermentao em batelada quanto maiores as concentraes de
substrato, maiores as concentraes de produto, o rendimento Yps e o tempo de
fermentao, e que os parmetros cinticos so dependentes da concentrao inicial de
clulas e de acar. Para a fermentao em batelada alimentada, foi determinada a estratgia
tima de alimentao de substrato, e concluram que a quantidade de acares totais
consumida no final dos experimentos foi similar para os dois processos, enquanto a
concentrao mxima de etanol e o rendimento de etanol no processo em batelada
foram inferiores com relao ao processo em batelada alimentada. Entretanto a

produtividade foi menor no processo em batelada alimentada.
Embora o efeito de inibio pelo etanol seja considerado nos modelos do tipo Aiba,
estes modelos prevem que a concentrao de etanol pode tender a valores infinitos antes que
o crescimento celular seja completamente inibido, o que parece pouco razovel. Por outro
lado, quando a fermentao contnua de etanol operada a uma baixa taxa de diluio, e
especialmente no caso onde a concentrao de acar do meio baixa, a concentrao de
acar limitante pode no ser detectvel. Nestas condies, as taxas especficas para
crescimento celular e produo de etanol seriam nulas, o que tambm no correto, uma vez
que o meio com clulas e etanol na prtica continuamente produzido. Portanto, apesar
destes modelos serem amplamente citados na literatura desde que foram propostos, pouca
discusso tem sido feita quanto a estas inconsistncias estruturais. BAI et al. (2008)
discutem a carncia claramente demonstrada nos estudos publicados sobre o tema: as
equaes cinticas so restritas a faixas de validade muito estreitas e distantes das
encontradas no processo industrial; os parmetros cinticos estimados demonstram forte
correlao e no so estatisticamente tratados e poucos estudos tratam do efeito da
temperatura sobre estes modelos.
A Tabela 2.4 apresenta vrios modelos da cintica da fermentao alcolica
formulados por diversos autores considerando os efeitos inibitrios.
Tabela 2.4. Modelos matemticos existentes na literatura para a fermentao

alcolica (BORGES, 2008).
N
Referncia Modelo
Eq.
Sem inibio
2.7
(Monod)
2.8
Aiba et al., (1968)
2.9
2.10
Aiba et al., (1969)
Aiba et al., (1969) 2.11
Ghose e Thyagi,
2.12
(1979)
Levenspiel, (1980) 2.13
Hoppe e 2.14
Hansford, (1982);
apud Gdia et al.,
2.15
(1988)
Lee et al.,(1983) 2.16
Sevely et al.,
(1980); apud 2.17
Dourado, (1987)
Jin et al., (1981);
apud Dourado,
2.18
(1987)
Han e Levenspiel,
2.19
(1988)
Andrews e Noack
2.20
Webb 2.21
Yano et al 2.22
Teissier-type
2.23
Webb * * 2.24
2.25
Wayman e
Tseng, (1976)
2.26
Dagley e
2.27
Hinshelwood
Holzberg et
2.28
al.
Jerusalimskye
Neronova 2.29
Bazua e
Wilke,(1977) 2.30
Aboutboul et al., 2.31

(1988)
2.32
Thatipamala et 2.33
al., (1992)
2.34
Andrews, (1968)
2.35
Stepanova e
Romanovskii,
2.36
(1965)
Han e Levenspiel,
(1987); apud 2.37
Ferreira,(1998)
Aiba et al.,
(1968), acoplado
ao de Edwards, 2.38
(1987); apud
Ferreira, (1998)
2.39
Wang e Sheu ,
(2000)
2.40
Tosetto, (2002)
2.41
Andrietta et al.,
2.42
(2003)
*Onde a fora inica.
A multiplicidade de modelos cinticos que descrevem o crescimento microbiano
devido ao fato destes serem construdos para uma levedura especfica, em condies
experimentais pr-definidas (DOURADO et al., 1987).
Diversos fatores como a evaporao e perdas do processo, adio de solues de
cidos e bases para o controle do pH, adio de antiespumante, produo de substncias que
mudam o volume do meio, crescimento celular, entre outros, podem afetar
significativamente as vrias concentraes e, conseqentemente, os valores dos
parmetros calculados. O volume de biomassa no meio fermentativo, por exemplo,
pode apresentar efeitos sobre os valores dos rendimentos, eficincias, produtividades, taxas
de consumo e produo, calculados a partir das concentraes de substrato e de
produto medidas em experimentos. BORZANI (2003) prope correes que consideram tal
efeito nos processos em batelada.
Apesar dos vrios trabalhos que tratam da cintica de fermentao, pouca
influncia estes tiveram sobre o arranjo das plantas industriais instaladas no Brasil. No
entanto, o projeto rigoroso de uma planta de fermentao tem que passar, obrigatoriamente,
por uma modelagem detalhada do processo, pelo uso de modelos cinticos precisos que
possibilitam a obteno de condies timas de operao. Por outro lado, a manuteno
destas condies depender da escolha de uma estratgia de controle adequada que s
possvel conhecendo-se o comportamento do processo. Isto pode ser adequadamente
realizado pelo estudo prvio de modelagem da planta e simulao em computador
(ANDRIETTA, 1994).
Com base na reviso bibliogrfica e informaes industriais, foi levantado que:
9 O processo de fermentao em batelada alimentada apresenta menores riscos de
contaminao, maior flexibilidade de operao, e controle da concentrao de
substrato no fermentador (diminui os efeitos inibitrios desfavorveis produo de
etanol) quando comparado aos processos contnuo e batelada convencional;
9 As leveduras S. cerevisiae so microrganismos de alta eficincia fermentativa, sendo
que algumas cepas industriais, com caractersticas diferenciadas, so mais tolerantes
aos produtos da fermentao. Apesar de haver outros microrganismos que apresentam
alta eficincia fermentativa, a possibilidade de empreg-los em indstrias,
principalmente no Brasil, ainda muito pequena;
9 Considerando os modelos cinticos apresentados, o modelo de GHOSE e THYAGI
(1979) modificado por TOSETTO (2002), que considera inibies pelo substrato e
pelo produto, descreveu adequadamente as fermentaes conduzidas em algumas
indstrias brasileiras quando comparado a outros modelos apesar dos parmetros
no terem apresentado significado fsico.
Em virtude destes fatores, o processo de fermentao alcolica em batelada
alimentada pela levedura S. cerevisiae foi escolhido como objeto de estudo no presente
trabalho. O desempenho do processo em batelada alimentada devido variao do tempo de
enchimento e da concentrao de sacarose na alimentao foi avaliado por meio da
produo de etanol, do rendimento e da produtividade.
2.8. Consideraes Finais

A partir da reviso bibliogrfica realizada fica evidente a importncia de se realizar
um estudo da influncia do perfil de alimentao do mosto e da concentrao do inculo na
produtividade em etanol do processo.
Materiais e Mtodos 37
3. MATERIAIS E MTODOS
Este item descreve os principais materiais e metodologias de anlises empregadas
neste trabalho.
3.1. Testes Fermentativos

Os testes fermentativos tanto em escala industrial quanto em escala piloto foram
realizados em usina localizada no estado de So Paulo.
3.1.1. Testes Fermentativos: Dorna Industrial

A unidade de fermentao da usina composta por 15 dornas de 400 m3, com volume
til de trabalho de 360 m3 e seis pr-fermentadores de 60 m3. O processo de fermentao
realizado do tipo batelada alimentada, com reutilizao de fermento (processo Melle-
Boinot). O sistema de filtrao do vinho levedurado composto por cinco filtros tipo cesto,
pressurizados a 2,1 kgf/cm2 e por seis centrfugas industriais, sendo quatro com vazo de
operao de 80 m3/h e duas com vazo de 90 m3/h. O resfriamento do mosto realizado por
dois conjuntos de trocadores de calor a placas, sendo o primeiro composto por quatro
trocadores os quais so alimentados com gua bruta (gua proveniente da captao do rio)
e o segundo composto por trs trocadores que utilizam como fluido de resfriamento gua
proveniente da torre de resfriamento.
As dornas de fermentao possuem sistemas de resfriamento tipo serpentinas, com
exceo da dorna de nmero um, que possui sistema de resfriamento por trocador de calor a
placas.
As fermentaes so monitoradas e controladas por meio de sistema de automao,
onde so monitorados parmetros como a temperatura, o volume da dorna, a vazo de
alimentao de mosto, o pH e o brix. Por meio do sistema de aquisio de dados possvel
programar o enchimento da dorna pela manipulao da vazo de mosto. A Figura 3.1
apresenta um esquema ilustrativo do sistema de fermentao em escala industrial existente na
usina.
Figura 3.1. Diagrama ilustrativo do sistema de fermentao em escala industrial.

Obs: Nesta figura, o termo gua fraca refere-se soluo hidroalcolica obtida na sada da torre de
recuperao de etanol, com teor de lcool da ordem de 1 oGL.
3.1.2. Testes Fermentativos: Escala Piloto

No presente trabalho foi utilizada tambm uma unidade de fermentao em escala
piloto para a realizao de cultivos. A dorna de fermentao neste sistema tinha volume total
de 40 L (volume til 36 L) o que corresponde a uma escala 10.000 vezes menor que a
industrial. A dorna teste possui sistema de medida e monitoramento de pH e sistemas de
controle de temperatura, vazo de alimentao de mosto e de nvel. A Figura 3.2 apresenta
uma fotografia do sistema experimental utilizado nos cultivos em escala piloto.
Figura 3.2. Fotografia da unidade de fermentao experimental em escala piloto.

A Figura 3.3 apresenta a tela do sistema de superviso utilizado com a unidade piloto
de fermentao.
Figura 3.3. Esquema do sistema supervisrio para o controle da dorna piloto.
3.2. Metodologia Experimental

Foram realizados sessenta e seis cultivos em escala industrial e dezesseis cultivos em
escala piloto, nas safras 2007/08 e 2008/09. Estes ensaios foram realizados em diferentes
condies de alimentao de mosto e concentrao de inculo. O mosto foi alimentado com
vazo (F) variando numa forma linear com o tempo, de acordo com a equao (3.1).
F = F0 + k t (3.1)
onde: F0 a vazo inicial (m3/h para dorna industrial e L/h para dorna piloto)
k o coeficiente angular da reta (m3/h2 para dorna industrial e L/h2 para dorna piloto)
t o tempo (h)
Os inculos apresentaram volumes em torno de 1/3 do volume til da dorna (360 m3),
sendo os mesmos preparados variando-se a concentrao de levedo entre 2 a 15% (v/v - base
mida) e tendo pH entre 2,2 a 2,8, com o objetivo de minimizar a infeco do processo. O
controle de temperatura da dorna mantinha a mesma em valores inferiores a 35C, com set-
point ajustado em 32C.
Aps a adio do inculo, os cultivos tiveram incio com a alimentao do mosto
(fase semicontnua) at o enchimento da dorna. O processo prosseguia em batelada at o
completo consumo dos acares fermentescveis.
Ao longo dos ensaios foram obtidas informaes relativas concentrao
celular (em % v/v e em % m/m), concentrao de ART no mosto de alimentao (% m/m),
teor de etanol ( GL) e vazo de alimentao F (em m3/h, dorna industrial ou L/h, dorna
piloto). A Tabela 3.1 apresenta as condies dos ensaios industriais realizados. A Tabela 3.2
apresenta informaes sobre os ensaios realizados em escala piloto.
Tabela 3.1. Dados coletados dos testes em escala industrial.
Tempo Taxa
Cx(BU) massa celulas Cx(BU) final
Teste Inculo (%) oGLinicial fermentao F (m3/h) diluicao(D) oGLfinal
inicial (%) inicio (ton) (%)
(h) h1
Indus_2h_2 14,20 2,34 1,97 4,06 13,00 155,00 0,43 3,63 9,44
Indus_2h_2 14,54 2,40 2,02 3,66 16,00 155,00 0,43 4,68 9,90
Indus_4h_2 14,54 2,40 2,02 3,92 14,00 77,50 0,22 5,08 8,28
Indus_4h_2 14,60 2,41 2,03 3,66 12,00 77,50 0,22 5,10 7,84
Indus_2h_2 14,85 2,45 2,06 3,66 15,00 155,00 0,43 5,50 8,86
Indus_2h_2 15,38 2,54 2,14 3,92 13,00 155,00 0,43 4,15 10,29
Indus_4h_2 15,52 2,56 2,16 4,41 12,00 77,50 0,22 3,33 8,28
Indus_6h_2 18,00 2,97 2,50 4,76 13,00 51,50 0,14 4,62 8,56
Indus_4h_3 20,30 3,35 2,82 3,52 12,00 77,50 0,22 3,33 8,86
Indus_2h_3 21,10 3,48 2,93 3,78 12,00 155,00 0,43 5,26 9,58
Indus_4h_3 21,17 3,49 2,94 3,78 12,00 77,50 0,22 4,02 9,14
Indus_4h_3 21,30 3,51 2,96 3,52 11,50 77,50 0,22 5,26 10,38
Indus_2h_3 21,50 3,55 2,99 4,06 11,50 155,00 0,43 5,26 8,42
Indus_2h_3 21,60 3,56 3,00 3,78 11,50 155,00 0,43 5,11 8,42
Indus_4h_3 21,60 3,56 3,00 4,20 11,00 77,50 0,22 6,45 8,56
Indus_2h_3 21,70 3,58 3,01 3,66 13,00 155,00 0,43 4,90 10,48
Indus_6h_3 22,70 3,75 3,15 3,38 11,50 51,50 0,14 6,00 8,86
Indus_6h_3 23,07 3,81 3,20 3,66 12,00 51,50 0,14 3,84 8,28
Indus_2h_3 23,70 3,91 3,29 3,78 11,00 155,00 0,43 5,71 8,72
Indus_6h_3 20,50 4,06 3,42 3,10 9,00 3070 5,11 8,28
Indus_6h_3 26,10 4,31 3,63 3,38 10,50 51,50 0,14 5,71 8,72
Indus_6h_3 27,00 4,46 3,75 4,41 12,00 51,50 0,14 5,36 9,30
Indus_6h_5 29,80 5,90 4,97 4,34 12,00 3070 6,56 10,62
Indus_6h_5 30,50 6,04 5,08 5,04 15,00 3070 6,15 12,90
Indus_6h_6 39,10 7,74 6,52 6,30 12,00 3070 7,19 11,66
Indus_2h_6 48,70 8,04 6,76 6,14 7,50 155,00 0,43 10,78 9,30
Indus_2h_6 48,90 8,07 6,79 5,16 7,50 155,00 0,43 8,03 9,58
Indus_6h_6 49,20 8,12 6,83 6,42 9,00 51,50 0,14 8,09 10,02
Indus_4h_6 49,60 8,18 6,89 6,86 8,00 77,50 0,22 8,57 8,86
Indus_6h_6 49,80 8,22 6,92 8,86 9,50 51,50 0,14 8,14 9,88
Indus_2h_6 50,00 8,25 6,94 8,56 7,00 155,00 0,43 8,00 9,74
Indus_6h_7 43,20 8,55 7,20 6,00 11,00 3070 7,25 10,92
Indus_4h_7 51,85 8,56 7,20 6,56 7,50 77,50 0,22 7,84 9,58
Indus_6h_7 52,40 8,65 7,28 6,56 9,50 51,50 0,14 7,92 9,58
Indus_4h_7 53,13 8,77 7,38 8,86 8,00 77,50 0,22 8,09 9,88
Indus_2h_7 53,91 8,90 7,49 6,00 9,00 155,00 0,43 7,86 10,18
Indus_2h_8 62,00 10,23 8,61 8,42 7,00 155,00 0,43 10,07 10,32
Indus_2h_8 62,70 10,35 8,71 9,58 7,00 155,00 0,43 9,63 9,63
Indus_4h_8 63,30 10,44 8,79 7,98 8,00 77,50 0,22 9,90 10,76
Indusl_4h_8 63,46 10,47 8,81 8,28 6,50 77,50 0,22 10,32 10,32
Indus_6h_8 63,50 10,48 8,82 8,28 7,50 51,50 0,14 9,63 10,32
Indus_6h_8 63,60 10,49 8,83 7,14 8,50 51,50 0,14 10,63 10,62
Indus_5h_8 40,00 10,56 8,89 5,16 8,00 50,00 0,14 12,00 9,44
Indus_6h_9 69,80 11,52 9,69 9,14 8,00 51,50 0,14 11,75 10,18
Indus_6h_10 70,58 11,65 9,80 8,28 9,00 51,50 0,14 11,96 10,62
Indus_5h_10 30,00 11,88 10,00 5,04 9,00 50,00 0,14 10,70 9,58
Indus_5h_10 31,00 12,28 10,33 4,34 8,00 50,00 0,14 11,48 9,00
Indus_4h_10 31,33 12,41 10,44 5,44 7,00 5060 12,00 10,32
Indus_5h_10 31,43 12,45 10,48 5,16 8,00 50,00 0,14 10,60 9,14
Indus_5h_11 32,03 12,68 10,68 4,62 8,00 50,00 0,14 12,00 9,14
Indus_5h_11 32,66 12,93 10,89 5,04 7,00 50,00 0,14 12,12 9,58
Indus_4h_11 33,33 13,20 11,11 5,30 8,00 50,00 0,14 11,33 9,14
Indus_5h_11 33,33 13,20 11,12 5,16 8,00 50,00 0,14 13,07 9,44
Indus_5h_11 33,33 13,20 11,13 5,58 8,00 50,00 0,14 11,33 8,42
Indus_5h_11 34,46 13,65 11,49 4,76 8,00 50,00 0,14 12,00 9,14
Indus_5h_11 34,67 13,73 11,56 4,41 9,00 50,00 0,14 12,31 9,44
Indus_4h_11 34,67 13,73 11,56 5,04 8,00 50,00 0,14 13,33 8,72
Indus_4h_12 35,33 13,99 11,78 6,00 7,00 5060 12,00 10,18
Indus_4h_12 36,67 14,52 12,22 4,76 8,00 50,00 0,14 12,92 9,00
Indus_5h_12 37,24 14,75 12,41 4,34 8,00 50,00 0,14 12,70 9,14
Nos testes industriais o volume do P.F. (pr-fermentador) variou de 68,83 29,89 m3,
o Brix do mosto variou de 20,52 1,38 oBx e o ART do mosto variou de 17,88 1,16.
Tabela 3.2. Dados coletados dos testes em escala piloto.
Tempo Taxa
Cx(BU) massa celulas Tempo Cx(BU) final
Teste Inculo (%) oGLinicial fermentao F (m3/h) diluicao(D) oGLfinal
inicial (%) inicio (ton) alimentao (h) (%)
(h) h1
Pilot_ 2h_12,5 56,55 1,49 12,57 2,70 7,00 2,00 233,33 6,48 12,80 11,36
Pilot_2h_12,5 56,11 1,48 12,47 5,72 7,25 2,00 233,33 6,48 12,56 11,52
Pilot_2h_12,5 56,11 1,48 12,47 5,72 7,25 2,00 233,33 6,48 12,60 11,98
Pilot_2h_12,5 56,00 1,48 12,44 6,14 7,25 2,00 233,33 6,48 13,26 11,82
Pilot_2h_13 41,40 1,50 12,65 3,66 6,00 2,00 208,33 5,79 12,90 10,46
Pilot_2h_13 41,40 1,50 12,65 3,66 6,00 2,00 208,33 5,79 13,17 10,76
Pilot_2h_13 42,00 1,52 12,83 3,38 6,00 2,00 208,33 5,79 13,33 10,76
Pilot_2h_13 42,00 1,52 12,83 3,38 6,00 2,00 208,33 5,79 13,37 10,92
Pilot_ 2h_14 47,00 1,71 14,36 4,06 5,75 2,00 208,33 5,79 14,47 11,36
Pilot_2h_14 45,90 1,67 14,03 4,90 5,75 2,00 208,33 5,79 14,30 11,66
Pilot_2h_14 45,90 1,67 14,03 4,90 5,75 2,00 208,33 5,79 14,70 11,52
Fast 2h_14 45,98 1,67 14,05 4,90 5,75 2,00 208,33 5,79 15,00 11,36
Pilot_2h_15 49,35 1,79 15,08 4,76 5,15 2,00 208,33 5,79 15,99 11,36
Pilot_2h_15 49,35 1,79 15,08 4,76 5,15 2,00 208,33 5,79 15,97 11,52
Pilot_2h_15 49,54 1,80 15,14 4,90 4,80 2,00 208,33 5,79 15,71 11,22
Pilot_2h_15 49,54 1,80 15,14 4,90 4,80 2,00 208,33 5,79 16,13 11,22
Nos testes em escala piloto o volume do P.F. (pr-fermentador) variou de 10,25 1,30
m3, o brix do mosto variou de 26,05 0,15 oBx e o ART do mosto variou de 23,30 0,35.
3.3. Metodologia Analtica

3.3.1. Determinao da concentrao celular (Cx)
Durante os cultivos, a concentrao celular foi determinada como porcentagem em
base seca, Cxbs (% m/m), e em base mida, Cxbu (% v/v). Na determinao de Cxbs (% m/m)
foi utilizado o mtodo direto proposto por SINGH et al. (1994). Alquotas do caldo de massa
conhecida foram centrifugadas a 1.600g por 30 minutos a 5C. Descarta-se o sobrenadante e
o sedimento foiressuspendido em gua destilada e centrifugado novamente nas mesmas
condies. O sedimento final foi transferido para recipiente previamente seco e tarado, e a
massa seca obtida aps a secagem em estufa a 105C, resfriamento em dessecador e pesagem
at massa constante. A determinao foi feita em triplicata e a concentrao celular expressa
em porcentagem em base seca (% m/m).
A determinao da concentrao celular em base mida, Cxbu (% v/v), ou volume de
clulas compactadas (VCC) foi determinada de acordo com procedimento descrito por
KOSHIMIZU et al. (1982).
3.3.2. Determinao da concentrao de acares redutores totais (ART)

A concentrao de acares redutores totais (ART) foi determinada pelo mtodo de
LANE e EYNIN (1934) aps hidrlise dos acares na amostra do meio de cultivo com HCl
0,75 N a 65C por 40 minutos.
3.3.3. Determinao da Concentrao de Etanol

A concentrao de etanol presente nas amostras do creme de levedura e do vinho foi
determinada por meio da medida de densidade e expressas em GL (%v/v) de etanol a 20C,
aps destilao prvia de 25mL da amostra no microdestilador Kjeldhal adaptado para lcool.
A densidade do destilado foi medida utilizando-se densmetro Paar, modelo dma 45 e a
concentrao em GL foi obtida atravs de tabela de para converso de densidade em grau
alcolico.
3.4. Clculos dos Coeficientes de Rendimento

Nesse item so apresentadas as equaes para clculos do coeficiente de rendimento
de substrato (ART) a produto principal (etanol), YP/S, e o coeficiente de rendimento de
clulas a substrato (ART), YX/S. Os coeficientes de rendimento foram calculados com base
nos balanos materiais, utilizando informaes de variveis de processo como as
concentraes das espcies envolvidas nos balanos, a vazo de alimentao do mosto e os

volumes iniciais e finais dos cultivos.
3.4.1. Clculos do coeficiente do rendimento de substrato a etanol (YP/S) e do

rendimento (eficincia) em etanol (P)
O coeficiente de rendimento de substrato (ART) a produto (etanol) calculado pela
equao (3.1).
quantidade gerada de etanol EtOH gerado

YP/S = = (3.1)
quantidade consumida de ART ARTconsumido
O clculo da quantidade gerada de etanol (EtOHgerado) realizado pela equao (3.2).
EtOHgerado = EtOHacumulado = massaEtOH-final - massaEtOH-inicial (3.2)

EtOH
EtOH gerado = (GL F VFA GL I VIA ) (3.3)
100
onde:
EtOHgerado : quantidade de etanol gerada no processo (kg)
GLF : GL final ou no vinho (% v/v)
GLI : GL inicial ou no pr-fermentador (p de cuba) (% v/v)
VFA : volume final da fase aquosa ou volume da fase aquosa do vinho (m3)
VIA : volume inicial do p de cuba (m3)
EtOH : densidade do etanol a 20C (789,3 kg/m3)
Realizando-se o balano de massa para o ART, tem-se que:

ARTconsumido = ARTalimentado - ARTacumulado (3.5)
c
ARTacumulado = (ARTF VFA ARTI VIA ) (3.6)
100
ARTalimentado = F . CS . t
(3.7)
onde:
ARTacumulado: quantidade de ART acumulada na dorna durante o processo (kg);
ARTalimentado: quantidade de ART alimentado na dorna durante o processo (kg);
ARTF: concentrao de ART final ou concentrao de acares residuais totais
(ARRT) no vinho fermentado (% m/m);
ARTI : ART inicial ou concentrao de acares residuais totais (ARRT) no inculo
(p de cuba) (% m/m);
c : densidade mdia do caldo (1.080 kg/m3).
O clculo do rendimento (eficincia) em etanol (P) teve como base os balanos

materiais (equao 3.7).
YP/S
P = 100 (%) (3.8)
0,511
onde:
0,511: rendimento terico do processo
As concentraes das substncias solveis presentes no caldo, como o etanol e os

acares (ART) so quantificadas na fase aquosa do caldo. O sobrenadante ou volume da fase
aquosa compreende a parcela volumtrica do caldo isenta de clulas. Logo a massa desses
componentes devem ser calculadas pelos produtos das concentraes dessas substncias pelos
volumes das fases aquosas do caldo no incio (VIA) e no final (VFA) dos cultivos, que se
relacionam com o volume total inicial (VI) final (VF), pelas equaes (3.8) e (3.9)
(BORZANI, 2006).
Cx bs-I c
VIA = VI 1 (3.9)
x 100
Cx bs-F c
VFA = VF 1 (3.10)
x 100
onde:
Cxbs-I: Cxbs inicial ou Cxbs no p de cuba (% m/m)
Cxbs-F: Cxbs no vinho final (% m/m)
: contedo de massa seca na biomassa (0,30 kgms/kg)
x: densidade celular (1.100 kg/m3)

A quantidade de ART alimentada (ARTalimentado) proveniente da alimentao do

mosto, sendo que este alimentado com vazo varivel (equao 3.1). No caso da planta
piloto, a composio de mosto (e a concentrao de ART) fixa em virtude do preparo
antecipado do mosto, em outras palavras, prepara-se o mosto com a quantidade fixa de ART.
No entanto, durante a alimentao da dorna industrial ocorre uma pequena flutuao na %
(m/m) de ART na alimentao, em virtude do mosto alimentado ser composto pela mistura
contnua de melao com gua ou caldo ao longo dos cultivos. Para o presente trabalho
consideramos a quantidade de ART alimentada fixa durante toda a alimentao da dorna
industrial, pois somente coletou-se amostra do mosto, para anlise do ART, no incio da
alimentao de cada um dos testes industriais.
3.4.2. Clculo da Produtividade em Etanol (ProdP)

O clculo utilizado para a produtividade em etanol (ProdP) foi realizada pela equao
(3.11):
m P
Prd P =
VF t ferm (3.11)
3.4.3. Clculo da Produtividade em Clulas (ProdX)

O clculo utilizado para a produtividade em clulas (ProdX) foi realizado pela equao
(3.12).
m X
Prd X =
VF t ferm (3.12)
3.4.4. Clculo do coeficiente do rendimento de substrato a clulas (Yx/s)

Da mesma forma que o etanol (P), as clulas (X) tambm so geradas durante o
processo fermentativo. Logo, o clculo de YX/S segue um equacionamento similar que o
clculo de YP/S, sendo YX/S calculado para a dorna industrial e piloto pela equao (3.13).
(Cx bs-F VF Cx bs-I VI ) c

YX/S =
(F0 t alim ARTM M ) c (3.13)
Com base nas equaes apresentadas os valores precisos dos coeficientes de

rendimento nas escalas piloto e industrial, iro depender da preciso dos valores medidos das
concentraes das espcies envolvidas (metodologias analticas utilizadas), bem como dos
valores de vazo volumtrica (F) fornecida pelo sistema supervisrio.
3.5. Modelagem Matemtica do Processo Fermentativo

O processo industrial mais utilizado no Brasil para a produo de etanol em
batelada, na verdade, dividido em duas etapas. Na primeira etapa, o cultivo operado em
batelada alimentada. Parte-se de um inculo (p de cuba) o qual ocupa uma parte do
volume total da dorna, sendo o mosto alimentado vazo constante ou linear com o tempo
at completar o volume til da dorna. Aps esta fase, tem incio a segunda etapa (em
batelada) que varia em funo do tempo necessrio para o consumo total dos acares
fermentescveis presentes no meio de cultivo.
Neste trabalho foram ajustados parmetros de dois modelos para representar o
processo de produo de etanol.
3.5.1. Modelo 1
DAR (2008) em sua dissertao de mestrado props um modelo matemtico para
descrever o processo de produo de etanol em dorna piloto. Apresenta-se a descrio do
modelo:
Etapa de tratamento da levedura
No processo Melle-Boinot, aps o final da batelada, a levedura recuperada do

vinho fermentado e reciclada no processo aps tratamento. Durante a etapa de tratamento da
levedura, na presena de oxignio, as clulas provenientes da etapa de centrifugao da
batelada anterior, ditas do tipo 2 (X2) transformam-se em clulas do tipo 1 (X1), que no
crescem devido ausncia de substrato. As clulas do tipo 1 que formam o inculo ou p de
cuba permanecem, por um longo perodo durante a etapa de tratamento na ausncia de
substrato (ART), em estado de fome (starvation state), modificando seu estado
fisiolgico. A equao (3.14) representa a transformao de X2 em X1:
O
X 2
2 X1 + produtos de degradao (3.14)
onde:
X1 : clulas famlicas ou estado de fome;
X2 : clulas oriundas da centrifugao do vinho fermentado que consomem acar, crescem
e produzem etanol.
Etapa de produo de etanol em batelada alimentada

Quando se inicia a alimentao de mosto dorna na etapa inicial em batelada
alimentada, agora na presena de substrato, inicia-se novamente a transformao das clulas
do tipo 1 (X1) em clulas do tipo 2 (X2), segundo estequiometria apresentada pela equao
(3.15).
X1
X 2 (3.15)
O que se observa no incio desta etapa um rpido consumo de substrato com

simultnea produo de etanol sem, no entanto, se observar crescimento celular. Logo, a
hiptese considerada que as clulas do tipo 1 consomem substrato rapidamente para gerar
energia (ATP) e, por decorrncia do metabolismo de oxidao das hexoses na gliclise,
produzem etanol. No entanto, a energia produzida (ATP) nesse processo no utilizada para
o crescimento celular. Ela utilizada exclusivamente na reestruturao do maquinrio celular
ou numa nova mudana fisiolgica, considerada no modelo como uma transformao das
clulas do tipo 1 em clulas do tipo 2, que voltam a ter a capacidade de crescer e produzir
etanol simultaneamente medida que consomem o substrato.
A velocidade de transformao das clulas do tipo 1 em clulas do tipo 2, rt_X2,
representada pela equao (3.16).
k1 C m
rt _ X 2 = X1
= rt _ X1 (3.16)
k 2 + C X1
Na etapa de produo, pode ocorrer morte celular, representada pela equao (3.17).
k
X 2
d X 2 NV (3.17)
onde:
X2NV: representa clulas do tipo 2 no viveis.
A estequiometria e a cintica de produo de etanol relacionadas com as clulas do

tipo 1 esto representadas pelas equaes (3.18) e (3.19) e com as clulas do tipo 2, pelas
equaes (3.20) e (3.21).
X
S 1 p1 P (3.18)
rP1
= rS = k p C X1 (3.19)
p1
X
S
2 y1 X 2 + p 2 P (3.20)
rP2 rX 2 p 2
= = rX 2 = YP / X 2 rX 2 (3.21)
p2 y1 y1
De acordo com o modelo proposto, diferentemente das clulas do tipo 1, as clulas do

tipo 2 tm capacidade de crescer, logo consomem o substrato convertendo-o em etanol (P) e
em mais clulas do tipo 2 (X2) de acordo com a equao 3.22.
rX 2 = C X 2 (3.22)
Considerando a inibio do etanol no crescimento celular das clulas do tipo 2,

seguindo o modelo de LEVENSPIEL (1976), tem-se a equao (3.23).
n
CS C
rX 2 = max 1 P C X 2 (3.23)
K S + CS CP *
Aps apresentao das hipteses do modelo reacional e das equaes de reao, segue
a apresentao dos sistemas de equaes de balanos materiais que compem a modelagem
do processo.
As equaes do modelo matemtico para as etapas em batelada alimentada e batelada

so apresentadas.
Etapa em Batelada Alimentada

Balano de massa para as clulas:
dC X 1 k Cm F
= 1 X1 CX1 (3.24)
dt k2 + C X 1 V
dC X2 k1 C mX1 F
= + C X2 k d + C X2 (3.25)
dt k 2 + C X1 V
Balano de massa para o etanol:

dC p F
= p1 k p C X1 + YP/X2 C X2 CP (3.26)
dt V
Balano de massa para o substrato:

dC s F C X2
= (C Se C S ) k p C X1 (3.27)
dt V YX 2 / S
Balano de massa total:

dV M
= (F0 + k t ) (3.28)
dt c
Etapa em Batelada
Balano de massa para as clulas:
dC X1 k Cm
= 1 X1 k d C X1 (3.29)
dt k 2 + C X1
dC X2 k1 C mX1
= + ( - k d ) C X2 (3.30)
dt k 2 + C X1

dC p
= p1 k p C X1 + YP/X2 C X2 (3.31)
dt

dC s C X2
= k p C X1 (3.32)
dt YX 2 / S
No presente trabalho, o modelo apresentado foi ajustado a valores experimentais

obtidos nos cultivos nas escalas piloto e industrial sob diferentes condies de alimentao da
dorna.
3.5.2. Modelo 2
Com base no artigo publicado por ATALA et al. (1998), foi proposto o seguinte
modelo matemtico para o processo de produo de etanol.
Na etapa de produo, pode ocorrer morte celular, representada pela equao (3.33).
k
X V X NV
d _T
(3.33)
onde:
XV : representa clulas viveis
XNV: representa clulas no viveis
A formao do produto (etanol) ocorre de forma no associada (equao 3.34) e

associada (equao 3.35) ao crescimento celular.
S
XV
p1 P (3.34)
S
XV
y1 X V + p2 P (3.35)
onde:
S: representa o substrato (ART)
XV : representa as clulas viveis
P: representa o produto (etanol)
A velocidade de crescimento das clulas viveis foi calculada pela equao (3.36), a
velocidade de degradao das clulas viveis pela equao (3.37), a velocidade de formao
de produto pela equao (3.38) e a velocidade de consumo de substrato pela equao (3.39).
n m
CS C C
rX = max exp( K i CS ) 1 P 1 X_v C X_v (3.36)
K S + CS C Pmax C Xmax
rd = k d _ T exp (k d_P C P ) C X_v (3.37)
rP = YP/X rX + m P C X_v (3.38)
rX
rS = + m X C X_v (3.39)
YX/S
A velocidade mxima especfica de crescimento celular (max) foi calculada em

funo da temperatura do meio de cultivo, conforme a equao (3.40), a concentrao
mxima de inibio por etanol foi estimada pela equao (3.41), o coeficiente de rendimento
clula-substrato pela equao (3.42), o coeficiente de morte pelo etanol pela equao (3.43),
o coeficiente de morte pela temperatura pela equao (3.44) e o coeficiente de rendimento
produto-clula pela equao (3.45). As equaes dos parmetros cinticos (3.40 a 3.45) foram
obtidas de ATALA et al. (1998).
41,47 431,4
max = 1,57 exp 1,29 10 exp
4
(3.40)
T T
C P max = 0,4421 T 2 + 26,41 T 279,75 (3.41)
YX / S = 0,00547 T + 0,239 (3.42)
k dP = 0,00718 T 2 0,45 T + 7,43 (3.43)

41.947
k dT = 4 1013 exp (3.44)
1,987 (T + 273,15)
YP/X = 1,1667 T 27,467 (3.45)
Uma vez definida as hipteses do modelo reacional e das equaes das velocidades de
reao, segue a apresentao dos sistemas de equaes de balanos materiais que compem a
modelagem do processo.
As equaes do modelo matemtico para as etapas em batelada alimentada e batelada
so apresentadas.
Etapa em Batelada Alimentada

Balano de massa para as clulas viveis:
dC X_v F
= rx rd C X_v (3.46)
dt V
Balano de massa para as clulas no viveis:
dC X_nv F
= rX + rd C X_nv (3.47)
dt V
dC P F
= C P + rP (3.48)
dt V
dCS F
= (CS0 CS ) rS (3.49)
dt V
dV m
= F (3.50)
dt c
Etapa em Batelada
Balano de massa para as clulas viveis:
dC X_v
= rx rd (3.51)
dt
Balano de massa para as clulas no viveis:
dC X_nv
= rX + rd (3.52)
dt
dC P
= rP (3.53)
dt
dCS
= rS (3.54)
dt
dV
=0 (3.55)
dt
No presente trabalho, o modelo apresentado foi ajustado aos valores experimentais

obtidos nos cultivos nas escalas piloto e industrial sob diferentes condies de alimentao da
dorna.
3.6. Simulaes em Computador

As equaes diferenciais ordinrias resultantes dos balanos de massa dos modelos 1
e 2 foram resolvidas com auxlio de computador empregando mtodo numrico de integrao
Runge-Kutta-Gill (4 ordem e passo varivel) programado em Fortran (PRESS et al., 1986).
Os parmetros dos modelos foram ajustados como base ajuste visual (comparao
entre os valores experimentais e simulados pelo modelo).
Resultados e Discusses 56
4. RESULTADOS E DISCUSSES
4.1. Coeficientes de Rendimento (Eficincia de Fermentao)
Neste item so apresentados os resultados referentes ao rendimento (eficincia)
em etanol (P), produtividade em etanol (PrdP) e em clulas (PrdX) e os coeficientes de
rendimento clula-substrato (Yx/s) e produto-substrato (Yp/s), para os ensaios realizados
na planta piloto e na dorna industrial.
4.1.1. Planta Piloto

A Tabela 4.1 apresenta os resultados obtidos nos cultivos realizados em escala
piloto. Cabe salientar que todos os cultivos nesta escala foram realizados vazo
constante de alimentao de mosto, com concentrao de ART constante no mosto (em
cada ensaio). Ao longo dos experimentos foram analisadas as concentraes de ART,
clulas e etanol, sendo possvel, portanto, obter maior preciso na estimativa dos valores
de P , PrdP, PrdX, YX/S e YP/S de acordo com metodologia proposta no item 3 (Materiais
e Mtodos).
Os testes em escala piloto tiveram as seguintes variaes:
Parmetro Mdia Desvio Padro
Inculo (%) 13,61 1,07
o o
GL Inicial ( GL) 4,53 0,93
Tempo Alimentao (h) 2
o
Brix Mosto ( Bx) 26,05 0,15
ART Mosto 23,30 0,35
Os experimentos realizados na planta piloto (Fast_2h_12,5, Fast_2h_13,

Fast_2h_14 e Fast_2h_15) correspondem a quadruplicatas realizadas com perfil de
alimentao constante e por perodo fixo (mosto alimentado por duas horas), com
variaes nos valores de concentrao de inculo (CxI).
Tabela 4.1. Condies experimentais e resultados obtidos nos cultivos em escala piloto.
Tempo Produtividade Produtividade

Cx(BU) Cx(BU) final Rendimento
Teste fermentao Etanol de Clulas
inicial (%) (%) Etanol (%)
(h) (kg/m^3/h) (kg/m^3/h)
Pilot_ 2h_12,5 56,55 7,00 12,80 82,96 12,13 0,11

Pilot_2h_12,5 56,11 7,25 12,56 82,30 11,16 0,04
Pilot_2h_12,5 56,11 7,25 12,60 85,99 11,66 0,06
Pilot_2h_12,5 56,00 7,25 13,26 82,30 11,38 0,37
Pilot_2h_13 41,40 6,00 12,90 82,61 12,29 0,14
Pilot_2h_13 41,40 6,00 13,17 85,26 12,68 0,29
Pilot_2h_13 42,00 6,00 13,33 86,42 12,80 0,27
Pilot_2h_13 42,00 6,00 13,37 87,85 13,01 0,30
Pilot_ 2h_14 47,00 5,75 14,47 88,61 13,89 0,06
Pilot_2h_14 45,90 5,75 14,30 87,32 13,95 0,16
Pilot_2h_14 45,90 5,75 14,70 86,12 13,76 0,39
Fast 2h_14 45,98 5,75 15,00 88,05 13,54 0,55
Pilot_2h_15 49,35 5,15 15,99 89,05 15,18 0,58
Pilot_2h_15 49,35 5,15 15,97 90,48 15,43 0,57
Pilot_2h_15 49,54 4,80 15,71 86,09 15,99 0,39
Pilot_2h_15 49,54 4,80 16,13 86,09 15,99 0,68
Observa-se pelos resultados, dos testes em escala piloto, que o coeficiente de

rendimento de substrato a etanol (YP/S) apresentou valores que variam de 0,440 0,012,
dentro da faixa daqueles tradicionalmente esperados para o processo em questo (entre
78,1 e 90,5% do terico), o que indica que a metodologia proposta para o clculo de
YP/S com base nos conceitos de balanos de massa adequada. Quanto aos valores do
coeficiente de rendimento de substrato a clulas (YX/S), os mesmos apresentaram uma
variao com valores de 0,010 0,006, o que pode ser explicado pela alta sensibilidade
desse parmetro em relao s medidas de concentrao celular no incio (CxI) e no final
do cultivo (CxF). Como os valores de YX/S so pequenos e, pequenas flutuaes nos
valores de CxI e de CxF geram grandes variaes nos valores calculados de YX/S isso
pode explicar essa maior variao nos valores calculados de YX/S. Ainda, as precises
dos valores de CxI e de CxF tambm influenciam, no entanto em menor grau, na preciso
dos valores de YP/S, uma vez que os valores de CxI e de CxF so utilizados nos clculos
dos volumes das fases aquosas inicial e final (VIA e VFA). O grau alcolico final variou
de 11,30 0,39 oGL.
Observa-se que cultivos, quando realizados sob mesma vazo de alimentao (F)
e variando-se as concentraes de inculo obtiveram-se valores bastante prximos de
rendimentos (eficincia) fermentativos embora com valores de produtividade diferentes

o que vm a corroborar com o esperado, ou seja, altas concentraes de inculo
combinados com alta concentrao de ART trazem efeitos positivos no que diz respeito
a produtividade em etanol (Figura 4.1).
Testes em Escala Piloto

30,00 15,00
26,12 26,18 26,00
Tempo Alimentao (h) e Tempo de Fermentao

25,00 25,99
Produtividade Etanol (kg/m^^/h) /
20,00 10,00
Brix do Mosto (Bx)
7,29
15,00
5,75
6,00
10,00 5,00
4,98
5,00
2,00 2,00 2,00 2,00
0,00 0,00
12,51 12,74 14,12 15,11
Inculo (%)
Produtividade Etanol (kg/m^3/h) Tempo alimentao (h) Brix (mosto) Tempo Fermentao (h)
Figura 4.1. Produtividade em etanol em funo da concentrao de inculo em mostos

com alta concentrao de ART (26%).
Na Figura 4.1 observa-se uma reduo do tempo de fermentao com o aumento

da concentrao de inculo, mantendo os demais parmetros constantes.
A Tabela 4.2 mostra que os valores de rendimento (eficincia) fermentativo no
variam significativamente se considerarmos no clculo o volume ocupado pelas clulas,
conforme metodologia descrita por BORZANI (2006).
Tabela 4.2. Resultados de Rendimento de Etanol e Rendimento de Etanol

considerando o volume ocupado pelas clulas.
Rendimento
Etanol
Rendimento Volume Lquido Volume Lquido considerando
Teste
Etanol (%) Inicial (m^3) final (m^3) volume
ocupado pelas
clulas (%)
Pilot_ 2h_12,5 82,96 3,48 31,39 74,36
Pilot_2h_12,5 82,30 3,51 31,48 76,41
Pilot_2h_12,5 85,99 3,51 31,46 79,60
Pilot_2h_12,5 82,30 3,52 31,23 75,98
Pilot_2h_13 82,61 6,45 31,36 74,77
Pilot_2h_13 85,26 6,45 31,26 76,82
Pilot_2h_13 86,42 6,38 31,20 77,53
Pilot_2h_13 87,85 6,38 31,19 78,73
Pilot_ 2h_14 88,61 5,83 30,79 79,32
Pilot_2h_14 87,32 5,95 30,85 78,90
Pilot_2h_14 86,12 5,95 30,71 77,47
Fast 2h_14 88,05 5,94 30,60 78,98
Pilot_2h_15 89,05 5,57 30,24 79,17
Pilot_2h_15 90,48 5,57 30,25 80,40
Pilot_2h_15 86,09 5,55 30,34 77,05
Pilot_2h_15 86,09 5,55 30,19 76,63
A varincia do rendimento fermentativo, dentro dos dados apresentados na

Tabela 4.2, de 10,14 e no caso do rendimento fermentativo considerando o volume
ocupado pelas clulas a varincia de 9,70, ou seja, mostra que o rendimento
fermentativo no funo da concentrao do inculo.
O fato de utilizarmos a concentrao de ART do mosto constante nos ensaios
pilotos proporcionou maior preciso no clculo do volume total de ART alimentado e
conseqentemente maior preciso nos demais parmetros que sofrem a influncia da
concentrao do ART.
4.1.2. Planta Industrial

A Tabela 4.3 apresenta os principais resultados obtidos nos cultivos realizados
na dorna industrial sob diferentes condies experimentais. Os valores dos coeficientes
de rendimento e do rendimento (eficincia) fermentativo foram calculados de acordo
com metodologia proposta no item 3 (Materiais e Mtodos).
Os testes em escala industrial tiveram as seguintes variaes:
Parmetro Mdia Desvio Padro
Inculo (%) 6,72 3,43
o o
GL Inicial ( GL) 5,38 1,74
Tempo Alimentao (h) 4,25 1,50
o
Brix Mosto ( Bx) 20,52 1,38
ART Mosto 17,88 1,16
Os experimentos realizados na planta industrial, representam, conforme a Tabela

4.3, o Teste Industrial (Indus), o tempo de alimentao x h e o inculo y, como, por
exemplo, o teste Indus_2h_2 que representa um teste industrial realizado com tempo de
alimentao de 2 horas e inculo de 2% (CxI).
Tabela 4.3. Condies experimentais e resultados obtidos nos cultivos em escala

industrial.

Cx(BU) Volume PF Cx(BU) final Rendimento
Teste fermentao oGLfinal Etanol de Clulas
inicial (%) (m3) (%) Etanol (%)
(h) (kg/m^3/h) (kg/m^3/h)
Indus_2h_2 14,20 50,00 13,00 3,63 9,44 82,59 5,39 0,42

Indus_2h_2 14,54 50,00 16,00 4,68 9,90 87,63 4,63 0,55
Indus_4h_2 14,54 50,00 14,00 5,08 8,28 71,94 4,36 0,72
Indus_4h_2 14,60 50,00 12,00 5,10 7,84 73,09 4,82 0,84
Indus_2h_2 14,85 50,00 15,00 5,50 8,86 79,81 4,39 0,76
Indus_2h_2 15,38 50,00 13,00 4,15 10,29 93,13 5,92 0,51
Indus_4h_2 15,52 50,00 12,00 3,33 8,28 76,44 5,04 0,32
Indus_6h_2 18,00 50,00 13,00 4,62 8,56 77,04 4,80 0,54
Indus_4h_3 20,30 50,00 12,00 3,33 8,86 78,46 5,51 0,14
Indus_2h_3 21,10 50,00 12,00 5,26 9,58 78,29 5,96 0,64
Indus_4h_3 21,17 50,00 12,00 4,02 9,14 79,71 5,67 0,30
Indus_4h_3 21,30 50,00 11,50 5,26 10,38 97,21 6,79 0,66
Indus_2h_3 21,50 50,00 11,50 5,26 8,42 72,45 5,39 0,65
Indus_2h_3 21,60 50,00 11,50 5,11 8,42 76,77 5,42 0,61
Indus_4h_3 21,60 50,00 11,00 6,45 8,56 76,62 5,72 1,04
Indus_2h_3 21,70 50,00 13,00 4,90 10,48 93,62 6,05 0,48
Indus_6h_3 22,70 50,00 11,50 6,00 8,86 80,18 5,76 0,82
Indus_6h_3 23,07 50,00 12,00 3,84 8,28 76,33 5,11 0,17
Indus_2h_3 23,70 50,00 11,00 5,71 8,72 77,12 5,88 0,73
* Continua na prxima pgina.


(h) (kg/m^3/h) (kg/m^3/h)
Indus_6h_3 20,50 60,00 9,00 5,11 8,28 76,97 6,81 0,62

Indus_6h_3 26,10 50,00 10,50 5,71 8,72 81,23 6,20 0,66
Indus_6h_3 27,00 50,00 12,00 5,36 9,30 78,76 5,71 0,44
Indus_6h_5 29,80 60,00 12,00 6,56 10,62 89,02 6,51 0,44
Indus_6h_5 30,50 60,00 15,00 6,15 12,90 92,28 6,35 0,23
Indus_6h_6 39,10 60,00 12,00 7,19 11,66 105,01 6,98 0,19
Indus_2h_6 48,70 50,00 7,50 10,78 9,30 88,46 8,89 1,77
Indus_2h_6 48,90 50,00 7,50 8,03 9,58 85,29 9,33 0,54
Indus_6h_6 49,20 50,00 9,00 8,09 10,02 86,88 8,01 0,46
Indus_4h_6 49,60 50,00 8,00 8,57 8,86 78,97 7,80 0,69
Indus_6h_6 49,80 50,00 9,50 8,14 9,88 82,85 7,19 0,42
Indus_2h_6 50,00 50,00 7,00 8,00 9,74 83,25 9,64 0,50
Indus_6h_7 43,20 60,00 11,00 7,25 10,92 82,25 7,12 0,02
Indus_4h_7 51,85 50,00 7,50 7,84 9,58 83,18 9,12 0,28
Indus_6h_7 52,40 50,00 9,50 7,92 9,58 84,69 7,20 0,22
Indus_4h_7 53,13 50,00 8,00 8,09 9,88 80,48 8,53 0,29
Indus_2h_7 53,91 50,00 9,00 7,86 10,18 84,83 8,20 0,14
Indus_2h_8 62,00 50,00 7,00 10,07 10,32 88,77 10,32 0,69
Indus_2h_8 62,70 50,00 7,00 9,63 9,63 83,64 9,36 0,43
Indus_4h_8 63,30 50,00 8,00 9,90 10,76 88,08 9,52 0,46

(h) (kg/m^3/h) (kg/m^3/h)
Indusl_4h_8 63,46 50,00 6,50 10,32 10,32 90,55 11,14 0,76

Indus_6h_8 63,50 50,00 7,50 9,63 10,32 82,50 9,65 0,36
Indus_6h_8 63,60 50,00 8,50 10,63 10,62 92,54 8,94 0,70
Indus_5h_8 40,00 80,00 8,00 12,00 9,44 83,98 8,18 1,28
Indus_6h_9 69,80 50,00 8,00 11,75 10,18 83,66 8,79 0,85
Indus_6h_10 70,58 50,00 9,00 11,96 10,62 88,86 8,31 0,79
Indus_5h_10 30,00 120,00 9,00 10,70 9,58 93,02 6,93 0,26
Indus_5h_10 31,00 120,00 8,00 11,48 9,00 92,12 7,45 0,47
Indus_4h_10 31,33 120,00 7,00 12,00 10,32 87,36 9,59 0,73
Indus_5h_10 31,43 120,00 8,00 10,60 9,14 87,85 7,32 0,05
Indus_5h_11 32,03 120,00 8,00 12,00 9,14 92,11 7,50 0,55
Indus_5h_11 32,66 120,00 7,00 12,12 9,58 93,63 8,91 0,58
Indus_4h_11 33,33 120,00 8,00 11,33 9,14 87,54 7,27 0,09
Indus_5h_11 33,33 120,00 8,00 13,07 9,44 81,34 7,62 0,81
Indus_5h_11 33,33 120,00 8,00 11,33 8,42 75,58 6,47 0,09
Indus_5h_11 34,46 120,00 8,00 12,00 9,14 89,18 7,45 0,21
Indus_5h_11 34,67 120,00 9,00 12,31 9,44 95,41 6,99 0,28
Indus_4h_11 34,67 120,00 8,00 13,33 8,72 87,60 6,95 0,73
Indus_4h_12 35,33 120,00 7,00 12,00 10,18 83,45 9,22 0,11
Indus_4h_12 36,67 120,00 8,00 12,92 9,00 86,67 7,31 0,29
Indus_5h_12 37,24 120,00 8,00 12,70 9,14 92,51 7,59 0,12
Diferentemente dos experimentos realizados em escala piloto, na escala

industrial as vazes de alimentao de mosto variavam linearmente com tempo, e
tiveram tempos de alimentao diferentes: 2h, 4h, 5h e 6h. Ainda dentro de cada um dos
perfis de alimentao trabalhamos com concentrao de inculo variando de 2% a 11%.
As demais variveis mostradas na Tabela 4.3 foram calculadas de acordo com
metodologia proposta no item 3 (Materiais e Mtodos).
Para a determinao da concentrao celular (Cx), utilizou-se o mtodo de base
mida, visto que as usinas em geral utilizam este mtodo.
Para auxiliar na anlise dos resultados realizamos a mdia dos valores dos testes
separando nas seguintes faixas de concentrao de inculo:
9 Concentrao do inoculo entre 2% e 4% - v/v;
9 Concentrao do inoculo entre 11% e 14% - v/v.
A Tabela 4.4 apresenta os resultados mdios de acordo com as faixas de

concentrao de inculo apresentada.
Tabela 4.4. Resultados mdios dos ensaios fermentativos.
Tempo
Cx(BU) Volume PF
Teste Inculo (%) oGLinicial fermentao
inicial (%) (m3)
(h)
Mdias Inculo 2@4% 19,99 50,00 2,78 3,87 12,38

Mdia Inculo 5@7% 42,57 54,29 6,31 6,63 10,36
Mdia Inculo 7@9% 56,09 53,33 8,17 7,40 8,13
Mdia Inculo 9@11% 44,25 96,67 10,22 6,08 7,94
Mdia Inculo 11@14% 36,58 120,00 12,19 5,00 8,27
Tempo
Brix Cx(BU)
Teste alimentao ART Mosto oGLfinal
(mosto) final (%)
(h)
Mdias Inculo 2@4% 3,60 19,97 17,55 4,86 9,07

Mdia Inculo 5@7% 5,14 21,97 18,19 7,53 10,53
Mdia Inculo 7@9% 4,25 20,77 17,81 9,26 10,13
Mdia Inculo 9@11% 5,00 20,74 18,16 11,23 9,73
Mdia Inculo 11@14% 4,64 20,89 18,06 13,18 8,98
Produtividade Produtividade
Rendimento
Teste Etanol de Clulas Yx/s Yp/s
Etanol (%)
(kg/m^3/h) (g/m^3/h)
Mdias Inculo 2@4% 80,77 5,49 557,26 0,042 0,413

Mdia Inculo 5@7% 88,32 7,50 419,26 0,024 0,411
Mdia Inculo 7@9% 85,46 8,94 469,21 0,023 0,437
Mdia Inculo 9@11% 89,30 8,25 417,99 0,023 0,426
Mdia Inculo 11@14% 87,07 6,99 389,11 0,025 0,425
Para estudo comparativo dos ensaios fermentativos realizados em escala piloto e

industrial elaborou-se a Tabela 4.5 que mostra a mdia dos ensaios em escala piloto e
industrial.
Tabela 4.5. Resultados mdios dos ensaios fermentativos em escala piloto e industrial.
Tempo
Cx(BU) Volume PF
Teste Inculo (%) oGLinicial fermentao
inicial (%) (m3)
(h)
Mdias Inculo 2@4% 19,99 50,00 2,78 3,87 12,38

Mdia Inculo 5@7% 42,57 54,29 6,31 6,63 10,36
Mdia Inculo 7@9% 56,09 53,33 8,17 7,40 8,13
Mdia Inculo 9@11% 44,25 96,67 10,22 6,08 7,94
Mdia Inculo 11@14% 36,58 120,00 12,19 5,00 8,27
Pilot_ 2h_12,5 45,20 110,00 13,81 4,31 5,81
Pilot_2h_13 48,56 110,00 14,84 4,83 5,21
Pilot_ 2h_14 53,05 45,50 13,85 3,80 5,90
Pilot_2h_15 52,41 87,50 12,51 5,31 6,94
* Dados dos ensaios fermentativos em escala Piloto em Scale-up.
Tempo
Brix Cx(BU)
Teste alimentao ART Mosto oGLfinal
(mosto) final (%)
(h)
Mdias Inculo 2@4% 3,60 19,97 17,55 4,86 9,07

Mdia Inculo 5@7% 5,14 21,97 18,19 7,53 10,53
Mdia Inculo 7@9% 4,25 20,77 17,81 9,26 10,13
Mdia Inculo 9@11% 5,00 20,74 18,16 11,23 9,73
Mdia Inculo 11@14% 4,64 20,89 18,06 13,18 8,98
Pilot_ 2h_12,5 2,00 26,21 23,66 14,21 11,37
Pilot_2h_13 2,00 25,96 23,04 15,67 11,37
Pilot_ 2h_14 2,00 25,94 23,56 14,35 11,29
Pilot_2h_15 2,00 26,02 23,11 12,83 11,45
Produtividade Produtividade
Rendimento
Teste Etanol de Clulas Yx/s Yp/s
Etanol (%)
(kg/m^3/h) (g/m^3/h)
Mdias Inculo 2@4% 80,77 5,49 557,26 0,042 0,413

Mdia Inculo 5@7% 88,32 7,50 419,26 0,024 0,411
Mdia Inculo 7@9% 85,46 8,94 469,21 0,023 0,437
Mdia Inculo 9@11% 89,30 8,25 417,99 0,023 0,426
Mdia Inculo 11@14% 87,07 6,99 389,11 0,025 0,425
Pilot_ 2h_12,5 87,47 13,65 225,72 0,007 0,447
Pilot_2h_13 88,42 15,03 523,45 0,016 0,452
Pilot_ 2h_14 84,52 14,06 342,05 0,009 0,432
Pilot_2h_15 83,30 11,62 152,47 0,006 0,426
Os valores encontrados para YP/S foram, em alguns ensaios, semelhantes aos

valores encontrados nos cultivos em escala piloto, conforme podemos observar no
grfico apresentado na Figura 4.2.
Comparativo entre os Yp/S dos ensaios fermentativos em escala Piloto e

Industrial
0,4493
0,450
0,4472
0,440
0,4367 0,4371
0,4305
0,430
0,4263
0,4249
0,420
0,4127
0,4113
0,410
0,400
0,390
Yp/s
Mdias Inculo 2@4% Mdia Inculo 5@7% Mdia Inculo 7@9% Mdia Inculo 9@11% Mdia Inculo 11@14%
Fast 2h_12,5 Fast 2h_13 Fast 2h_14 Fast 2h_15
Figura 4.2. Valores mdios de YP/S calculados nos ensaios em escala piloto e industrial.
Os valores de YP/S obtidos nos diferentes ensaios estiveram entre 0,4113 e
0,4493, ou seja, entre 80,5 e 87,9% do valor terico. Os melhores rendimentos foram
obtidos para os ensaios realizados empregando perfil de alimentao de mosto de 2
horas e inculo com concentrao na faixa de 14 a 15 % base mida.
A Figura 4.3 apresenta o resultado comparativo entre a concentrao de inculo
utilizada e o tempo de fermentao nos diferentes perfis de alimentao.
Comparativo entre concentrao do inculo x tempo de fermentao nos

diferentes perfis de alimentao
12,00 12,00
10,00 10,00
Concentrao do Inculo (%)
8,00 8,00
Tempo de fermentao (h)
6,00 6,00
4,00 4,00
2,00 2,00
0,00 0,00
Mdia 2h Mdia 4h Mdia 5h Mdia 6h
Perfil de alimentao
Tempo fermentao (h) Inculo (%)
Figura 4.3. Comparao entre os perfis de alimentao e as mdias de resultados para a

concentrao do inculo e tempo de fermentao.
Pela Figura 4.3 observa-se que a concentrao do inculo exerce uma maior
influncia no tempo de fermentao. Vazes de alimentao altas combinadas com
concentraes baixas de inculo remetem a tempos de fermentao elevados. Por outro
lado, vazes lentas e concentraes de inculo baixas produzem tambm tempos de
fermentao elevada. O melhor resultado foi obtido quando se utilizou um perfil de
alimentao de 5 horas e inculo com concentrao em torno de 11,5 % em base mida.
A Figura 4.4 apresenta um grfico comparativo entre a produtividade e
rendimento (eficincia) em etanol para os diferentes perfis de alimentao de mosto
(tempo de alimentao).
Comparativo entre Produtividade Etanol x Rendimento Etanol para os

diferentes perfis de alimentao
12,00 88,00
11,25
87,52
87,00
10,00
Produtividade em Etanol (kg/m^^/h) e Inculo (%)
86,00
Rendimento em Etanol (%)

8,00
7,26 7,40 7,30
6,98 6,99
85,00
6,20 85,09
6,00
84,00
4,58 83,71 83,86
4,00
83,00
2,00
82,00
0,00 81,00
Mdia 2h Mdia 4h Mdia 5h Mdia 6h
Inculo (%) Produtividade Etanol (kg/m^3/h) Rendimento Etanol (%)
Figura 4.4. Grfico comparativo entre os perfis de alimentao e as mdias dos

resultados para a concentrao do inculo, produtividade em etanol e rendimento
(eficincia) fermentativo.
Observa-se pela Figura 4.4 que o melhor resultado em relao ao rendimento

(eficincia) em etanol foi obtido com o perfil de alimentao do mosto em 5 horas e
utilizando concentrao de inculo de 11,25% v/v (base mida). Por outro, lado, quando
se considera a produtividade em etanol observa-se pequena variao (6,98 a
7,4 kgetanol/m3/h) entre os diferentes perfis de alimentao do mosto e mesmo quando
alta concentrao de inculo foi utilizada. A partir dos ensaios realizados, nas condies
avaliadas, a condio sub-tima para a produo de etanol dada atravs da
alimentao do mosto em 5 horas empregando concentrao de inculo de 11,25% base
mida.
4.1.3. Comparao dos Resultados obtidos em Escala Piloto e Industrial
A Figura 4.5 apresenta uma compilao dos resultados do rendimento

(eficincia) e produtividade em etanol nos diferentes perfis de alimentao para os
ensaios realizados em escala piloto e industrial.
Comparativo entre os resultados de Rendimento Fermentativo e Produtividade em Etanol nos

diferentes perfis de alimentao Escala Piloto e Industrial
18,00 89,00
16,00 15,65
88,00
87,52
Produtividade em Etanol (kg/m^^/h) e Inculo (%)
87,52
87,93
14,00 13,78
87,00
12,69
Rendimento Fermentativo (%)

11,80
12,00
86,00
10,00
85,09 85,53
85,00
8,00
6,98 7,40 7,30 6,99
83,71 84,25 84,00
6,00 83,86
83,00
4,00
82,00
2,00
0,00 81,00
Mdia 2h Mdia 4h Mdia 5h Mdia 6h Fast 2h_12,5 Fast 2h_13 Fast 2h_14 Fast 2h_15
Perfil de Alimentao (h)
Produtividade Etanol (kg/m^3/h) Inculo (%) Rendimento Etanol (%)
Figura 4.5. Grfico comparativo entre os perfis de alimentao e as mdias dos

resultados para a concentrao do inculo, produtividade em etanol e rendimento
(eficincia) fermentativo para as escalas piloto e industrial.
A partir da anlise da Figura 4.5 depreende-se que os ensaios em escala piloto

(Pilot_2h_12,5 a Pilot_2_h_15) foram fortemente influenciados pela concentrao do
inculo, ou seja, concentraes maiores resultaram em rendimentos (eficincia) e
produtiva mais elevados. A de se observar que todos os testes realizados na escala piloto
utilizaram o mesmo perfil de alimentao (2 horas). Para os ensaios conduzidos na
dorna industrial (Mdia_2h a Mdia_6h), a condio sub-tima foi encontrada para os
ensaios realizados com o perfil de alimentao do mosto em 5 horas e utilizando
concentrao de inculo de 11,25% base mida (conforme j discutido anteriormente).
A anlise conjunta dos ensaios realizados em escala piloto e industrial sugerem
que novos testes industriais sejam realizados utilizando um perfil de alimentao do
mosto de 2 horas e concentrao inicial de inculo de 15% base mida. Este teste
servir para confirmar os resultados obtidos na escala piloto.
Os grficos das Figuras 4.6 e 4.7 apresentam o perfil da produtividade
especfica de etanol (ProdP/YP/S/CS) obtida nos testes realizados em escala piloto e
industrial, respectivamente. Ressalta-se que para os testes em escala piloto a
concentrao de substrato (CS) foi constante ao longo do tempo. J para os ensaios na

dorna industrial foi considerada a concentrao inicial de substrato no mosto (tempo
zero) como sendo constante ao longo do tempo (por falta de outra medida).
Prod/(Yps*Cs) Ensaios em escala piloto
1.80
1.60
1.40
1.20
Prod/(Yps*Cs) (h1)
1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0.00
12.57 12.47 12.47 12.44 12.65 12.65 12.83 12.83 14.36 14.03 14.03 14.05 15.08 15.08 15.14 15.14
Inculo
Prod/Yps/Cs Polinmio (Prod/Yps/Cs)
Figura 4.6. Grfico da produtividade especfica de etanol obtida nos testes realizados
em escala piloto.
Prod/(Yps*Cs) Ensaios na Dorna Industrial

1.40
1.20
1.00
Prod/(Yps*Cs) (h1)
0.80
0.60
0.40
0.20
0.00
1.97 2.02 2.06 2.16 2.82 2.94 2.99 3.00 3.15 3.29 3.63 6.76 6.83 6.94 7.38 8.61 8.79 8.83 9.69 10.3310.4810.8911.1211.4912.2212.4712.50
Inculo
Prod/Yps/Cs Polinmio (Prod/Yps/Cs)
Figura 4.7. Grfico da produtividade especfica de etanol obtida nos testes realizados
em escala industrial.
A partir dos resultados obtidos, observou-se um aumento na produtividade

especfica de etanol em funo da concentrao de inculo, para os ensaios em escala
piloto (Figura 4.6). Nos testes em escala industrial, a produtividade especfica de

etanol passou por um ponto de mximo na faixa de concentrao de inculo de 9% em
base mida (Figura 4.7). Contudo, quando se utilizou inculos com concentraes mais
elevadas (da mesma ordem de grandeza daqueles utilizados em escala piloto) obteve-se
um incremento na produtividade especfica em etanol. Este fato corrobora a necessidade
de se avaliar as condies estudas na escala piloto em escala industrial.
4.2. Modelagem Matemtica do Processo

Foram realizadas simulaes empregando o modelo 1 e o modelo 2 utilizando
dados experimentais obtidos na escala piloto e industrial.
4.2.1. Simulaes com o Modelo 1

A Tabela 4.6 apresenta os parmetros cinticos empregados nas simulaes
realizadas com o modelo 1.
Tabela 4.6. Parmetros empregados na simulao do modelo 1.

max (h-1) 0,341
KS (g/L) 3,04
YP/X1 (g/g) 0,437
KP (g/L) 1,21
KD (h-1) 0,0083
k1 () 2,17
k2 () 0,55
n (-) 1
Yx/s (g/g) *
Yp/s (g/g) *
* proveniente do balano de massa de cada teste.
A Figura 4.8 apresenta os resultados simulados pelo modelo 1 para ensaio

realizado com vazo de suplementao de mosto de 155 m3/h durante 2 horas e
concentrao inicial de ART no mosto de 17,26%. A concentrao inicial de inculo
empregada neste teste foi de 48,9% v/v (base mida). Observa-se um bom ajuste do
modelo aos dados experimentais. Os valores experimentais, de YX/S e YP/S, calculados
para este teste foram 0,08 e 0,42, respectivamente. Nesta simulao o valor empregado
para o coeficiente de rendimento Yp/s foi 0,41. Esta pequena alterao foi necessria
para que o valor final simulado da concentrao de etanol se ajustasse ao experimental.
50 400
45
350
40
300
Concentrao celular (bu)
35
250
30
Volume (m )
3
25 200
20 150
15
100
10
50
5
0 0
0 2 4 6 8 10 0 2 4 6 8 10
Tempo (horas) Tempo

X Axis(horas)
Title
(A) (B)
12 12
10 10
Concentrao de etanol ( GL)
o
8 8
ART (%)
6 6
4 4
2 2
0 0
0 2 4 6 8 10 0 2 4 6 8 10
Tempo (horas) Tempo (horas)
(C) (D)
Figura 4.8. Valores experimentais e simulados pelo modelo 1 para o teste
600_gpl_2h_02. (A) Concentrao celular (% base mida); (B) Volume da dorna; (C)
Concentrao de ART (%); (D) Concentrao de etanol (o GL).
A Figura 4.9 apresenta o resultado simulado pelo modelo 1 para ensaio realizado
com vazo de suplementao de mosto de 77,55 m3/h durante 4 horas (concentrao
inicial de ART no mosto 18,20%). A concentrao inicial de inculo empregada neste
teste foi de 48,9% (base mida). Observa-se um bom ajuste do modelo aos dados
experimentais. Os valores experimentais, de YX/S e YP/S, calculados para este teste
foram 0,11 e 0,43, respectivamente.
(B)
(A)
(C) (D)

concentrao inicial de ART no mosto 17,85%. A concentrao inicial de inculo
empregada neste teste foi de 14,2% v/v (base mida). Os valores experimentais, de YX/S
e YP/S, calculados para este teste foram 0,04 e 0,41, respectivamente. Na simulao o
valor do coeficiente Yx/s foi ajustado para 0,08. Mesmo assim, os valores simulados
para a concentrao celular e de substrato no se ajustaram aos dados experimentais.
Contudo, o modelo forneceu uma boa simulao para os valores da concentrao
celular. Este teste teve uma durao de 13 horas.
(A) (B)
(D)
(C)
4.2.2. Simulaes com o Modelo 2

Os mesmos experimentos foram utilizados para simulao empregando o
modelo 2. A Tabela 4.7 apresenta os valores dos parmetros empregados nas
simulaes.
Tabela 4.7. Parmetros empregados na simulao do modelo 2.

Ks (g/L) * 4,1
mx (h-1) 0,10
mp (h-1) * 0,1
*
n (-) 1
m (-) 1
*
Valores obtidos de ATALA et al. (1998)
Os demais parmetros do modelo foram determinados a partir das equaes

(3.40) a (3.45) em funo da temperatura mdia do teste realizado.
empregada neste teste foi de 48,9% v/v (base mida). A temperatura mdia medida no
interior da dorna ao longo do teste foi de 33 oC. Observa-se um bom ajuste do modelo
aos dados experimentais da concentrao celular e de ART ao longo da batelada.
Contudo, o modelo superestimou o valor da concentrao de etanol ao final do ensaio.
(A) (B)
(C) (D)

realizado com vazo de suplementao de mosto de 77,55 m3/h durante 4 horas e
interior da dorna ao longo do teste foi de 33 oC. Neste teste observa-se um bom ajuste
do modelo aos dados experimentais.
(A) (B)
(C) (D)

interior da dorna ao longo do teste foi de 34 oC. Neste teste o modelo no forneceu uma
boa simulao para os valores da concentrao celular, de substrato e superestimou a
concentrao de etanol ao final do processo. Contudo, o resultado pode ser considerado
satisfatrio, haja visto que o modelo foi capaz de apresentar a tendncia do processo.
(A) (B)
(C) (D)

5. CONCLUSES
A partir dos resultados obtidos atravs dos experimentos realizados na escala
industrial e piloto pode-se concluir que:
a. com o aumento da concentrao do inculo houve um incremento na produtividade
em etanol;
b. h um ponto timo para concentrao de inculo, concentrao de substrato (ART)
e produtividade em etanol;
c. diferentes set-ups para o processo fermentativo podem ser utilizados, a partir dos
resultados obtidos, com o objetivo de maximizar produo de etanol ou maximizar a
produo de clulas (levedura).
A partir dos resultados da combinao entre a escala industrial e a escala piloto

pode-se concluir que:
a. o aumento na concentrao do inculo resultou em aumento de produtividade em
etanol;
b. a concentrao do inculo e produtividade em etanol so diretamente proporcionais
(correlao positiva);
c. h possibilidade de se empregar set-ups da fermentao industrial utilizando
diferentes concentraes de inculo e diferentes concentraes de substrato (ART) com
o objetivo de maximizar produtividade em etanol e rendimento (eficincia) da
fermentao.
Os resultados da modelagem e simulao do processo indicaram que os dois

modelos matemticos foram capazes de representar, satisfatoriamente, o processo
(ajustaram-se aos dados experimentais) nas condies experimentais avaliadas. O
modelo 1 foi o que apresentou melhores resultados.
Em funo dos resultados, o modelo poderia ser utilizado para controle do
processo fermentativo.
Referncias Bibliogrficas 77
6. Referncias Bibliogrficas
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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS

CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DE TECNOLOGIA

AVALIAO DO EFEITO DO INCULO E DO PERFIL DE

CSAR AUGUSTO PORTO MARTINS

AVALIAO DO EFEITO DO INCULO E DO PERFIL DE

CSAR AUGUSTO PORTO MARTINS

Orientador: Prof. Dr. Antonio Jos Gonalves da Cruz

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-

Martins, Csar Augusto Porto.

Dissertao (Mestrado) -- Universidade Federal de So

1. Fermentao alcolica. 2. lcool. 3. Bioprocesso. 4.

CDD: 663.13 (20a)

Profa. DP. Maria Lcia Gonsales da Costa Arajo

Prof Dr. Alberto Colli ~ a d i n bJnior

Figura 1.1. Mapa ilustrativo da produo do setor sucroenergtico brasileiro

A Figura 1.2 mostra dados da evoluo da quantidade de cana-de-acar processada

Figura 1.2. Evoluo histrica da quantidade de cana-de-acar processada no Brasil

No Brasil, a maioria das usinas utiliza um processo industrial integrado, devido

2.1. Fermentao: definindo o termo

2.2. Fermentao Alcolica

hexoses. Produzem etanol a partir de lactose e pentoses os microrganismos Kluyveromyces

2.2.1. Produo de Etanol pelas Leveduras

C6O12O 6 + 6 O 2 6 CO 2 + 6 H 2O + 688 kcal (2.2)

C6O12O 6 2 C 2 H 5OH + 2 CO 2 + 54 kcal (2.3)

Observa-se que a completa oxidao da glicose obtm um rendimento energtico

2.2.2. Metabolismo da Glicose

Figura 2.1. Gliclise: via de degradao da glicose.

Figura 2.2. Fermentao alcolica: NADH2 reduz o acetaldedo a etanol.

2 cido pirvico 2 acetaldedo + 2 CO 2 (2.4)

2 acetaldedo + 2 NADH 2 2 etanol + 2 NAD (2.5)

A fermentao um processo pouco eficiente na produo de energia, porque os

A degradao da glicose por organismos aerbios normalmente no pra com a

1. Seis molculas de NADH2 so produzidas, as quais podem servir como doadores de

2 GTP + 2 ADP 2 GDP + 2 ATP (2.6)

3. Duas molculas da co-enzima no estado reduzido chamada flavina adenina dinucleotdeo

No caso das leveduras respirando aerobicamente na presena de glicose, o total de

Figura 2.4. Produo de ATP pelas leveduras em crescimento aerbio na presena de

Quando as clulas de leveduras crescem anaerobicamente so produzidas pela

A glicose , ento, transportada para o interior da clula, provavelmente pelo

Figura 2.6. Rotas catablicas bsicas da levedura S. cerevisiae (LIDN, 1993).

O glicerol um subproduto do processo de produo de etanol formado em maior

osmtica do meio de cultura, da formao de cidos orgnicos (succnico e actico) e do

O catabolismo da glicose pela levedura Saccharomyces cerevisiae, com o objetivo de

Figura 2.8. Diagrama esquemtico do catabolismo da glicose em clulas da levedura S.

2.3. Processos Fermentativos

como pH, temperatura, concentraes de sacarose, etanol e clulas, alm da viabilidade

2.4. O Etanol no Brasil

Figura 2.9. Evoluo histrica do preo do barril de petrleo.

A preocupao mundial com o aquecimento global e o aumento no preo do petrleo

Brasil o maior produtor mundial de cana-de-acar, que a matria-prima mais eficiente

Tabela 2.1. Proporo da mistura de lcool anidro gasolina.

Analisando o histrico da produo de etanol no Brasil (Figura 2.10) observa-se que a

Produo de Etanol no Brasil (m^3)

Figura 2.10. Evoluo histrica da produo de etanol (anidro e hidratado) no Brasil.

Outro microrganismo com grande potencial para produo de etanol a bactria

grupos aninicos da parede celular das leveduras e ainda h observaes em relao a

Com o advento do Pro-lcool, a produo brasileira de etanol teve um aumento de

2.6. Processos Industriais de Fermentao Alcolica

uma fermentao descontinua, o substrato inicialmente carregado em um recipiente e, ao

Tabela 2.2. Composio mdia da cana-de-acar

A Tabela 2.3 apresenta os principais constituintes da cana-de-acar

Tabela 2.3. Principais constituintes da cana-de-acar

Geralmente, o caldo obtido na extrao para produo do etanol aquecido em torno