SEPARACIN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIA SOBRE

PAPEL
Sotto, A., maya, G.,
Estudiante de ingeniera de alimentos, programa de ingenieras.
Universidad de la amazonia.

RESUMEN
Por medio de la practica realizada en los laboratorios de la universidad de la
amazonia denominada separacin de pigmentos vegetales; con el mtodo de la
cromatografa a de papel se logr identificar que las hojas de espinaca al igual que
otras plantas contiene clorofila a, clorofila - b, carotenos y xantofilas las cuales
son los componentes encargados de la fotosntesis, puestos que los carotenos son
el transporte de la luz a la clorofila y los xantofilas para transformacin de la misma
en energa denominada como la fotosntesis.

Palabras claves: pigmentos vegetales, clorofila, clula vegetal, cromatografa de

papel, carotenos, xantofilas.

INTRODUCCIN

En las clulas vegetales, hay unos orgnulos llamados cloroplastos que poseen
distintos pigmentos fotosintticos con colores diferentes; clorofila-a (verde intenso),
clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en
diferentes proporciones. [1] Cuando se observa una hoja, el pigmento clorofila es
usualmente el nico pigmento que parece estar presente, de hecho, la clorofila es
solamente uno de varios tipos de pigmentos presentes en las hojas y uno de tantos
pigmentos que estn involucrados en el proceso de fotosntesis. Una vez removidos
de la hoja, los pigmentos fotosintticos pueden ser separados uno de otro e
identificados mediante cromatografa. [2]

La cromatografa es un mtodo usado principalmente para la separacin de los

componentes de una muestra en la cual los componentes son distribuidos entre dos
fases una de las cuales es estacionario, mientras que la otra es mvil, la fase
estacionaria puede ser slido o lquido soportado en un slido o en un gel (matriz),
la fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna extendida en una
capa, distribuida como una pelcula, la cromatografa en papel tiene como soporte
un papel de celulosa y es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar
anlisis cualitativos ya que pese a no ser una tcnica muy potente no requiere de
ningn tipo de equipamiento. [3] la cromatografa de papel se clasifica en
descendente al cual se trata de una caja saturada de vapor de agua, atravesada
por una cajetn semicilndrico lleno con el solvente orgnico. En l se deposita, como
muestra la figura el papel con la banda de muestra justo al salir el papel del cajetn.
Para sujetar el papel introducimos una varilla a lo largo de la caja. El solvente
comenzar ascendiendo por el papel por capilaridad y continuar bajando al salir
de la cajetilla, pasando por la zona de muestra y arrastrndola, consiguindose as
la separacin. [4] Encontramos tambin la forma
ascendente e l solvente se encuentra en la parte inferior de la cubeta y asciende por
el papel haciendo que se separe la muestra. La resolucin de la cromatografa en
papel descentente es mayor. [5] Para separar y obtener estos pigmentos se puede
utilizar la cromatografa que es una tcnica que permite la separacin de las
sustancias de una mezcla, de tal manera que al introducir una tira de papel poroso
en esa mezcla el disolvente arrastra con distinta velocidad a los pigmentos segn la
solubilidad que tengan, permitiendo identificarlos perfectamente segn su color.
Aparecern, por tanto, varias bandas de diferentes colores, que poseern diferente
grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolucin. [6]

MATERIALES

Los materiales a utilizados para la prctica constan de:

Equipos:
Balanza, hornilla elctrica

Vidriera:
Matraz
Embudo
Un tubo graduado fondo plano
Con tapn de corcho
Capilares
Material:
Mortero manual
Gradilla

Otros:
papel de filtro Whatman # 1
una tachuela
tijeras

Biolgicos:
Hojas de espinaca.

Reactivos:
alcohol etlico al 96%
ter de petrleo
benceno

METODOLOGA

Se trituro 10 g. de hojas de espinaca con 50 cm 3 de alcohol al 96% y se calent

suavemente en una hornilla. Cuando las hojas se decoloraron y el alcohol adquiri
un color verde intenso, se dej enfriar y se filtr el extracto a travs del papel filtro,
utilizando el embudo y un matraz donde se deposite el filtrado.

Se recort una tira de papel filtro como se indico en la figura 1. Se coloc con el
capilar una gota del extracto alcohlico y se dej secar, se realiz este mismo
procedimiento por dos veces ms. Luego se procedi a llenar el fondo del tubo
con una solucin de 9 partes de ter de petrleo y una parte de benceno (aprox. 3
a 1 ml). Y se Introdujo la tira de papel cargada con el extracto, teniendo en cuenta
de evitar que el solvente alcanzara el extracto, y se sostuvo la tira con la tachuela,
y se tap el tubo y se observ.
RESULTADO
ANLISIS DE RESULTADOS

Por medio de la macerada de las hojas de espica se inicia un rompimiento del tejido
vegetal, con la adicin del alcohol etlico al 96% se realiza una extraccin de los
distintos componentes que se encuentran contenidos en las clulas vegetales de la
espinaca. Por medio de la impregnacin del papel con la solucin se adsorbi una
parte de estos compuestos.

Por medio de la evaporacin ascendente se muestra la distribucin de los colores

tales como verde oliva, verde intenso, amarrillo y por ultimo color naranja intenso.

CONCLUSIN

Por medio de la prctica se logr identificar que la espinaca contiene distintos tipos
de clorofila denominadas como (a) y (b), observadas por medio de la coloracin
que se distingui en el papel. Segn (Aguilera., 2012) que la clorofila-a tiene la
caracterstica del (verde intenso), clorofila-b del (verde oliva).

De igual manera se observ la coloracin amarrillo tenue y naranja. Lo que indica

que el amarrillo es representado y/o caracterstico de las xantofilas y el naranja por
los carotenos.

Los carotenos son los encargados del transporte de la luz a la clorofila el cual son
los encargados de la transformacin de la luz en energa y/o encargados de la
fotosntesis con la ayuda de las xantofilas.

BIBLIOGRAFA

[1] [3] Aguilera, F., (2012).Cromatografa de pigmentos vegetales. En lnea.

http://www.apccc.es/arch_apccc/fichas2012/lasvinas/lasvinas_cromatografiapvege
tales.pdf. Visitada el 4 / 11/2016.
[2] [6] Velastegui, R., (2014).
Separacin de pigmentos vegetales mediante cromatografa en papel. En lnea.
https://es.scribd.com/doc/45304864/Separacion-de-Pigmentos-Vegetales-
Mediante-Cromatografia-en-Papel. Visitada el 4 / 11/2016.
[4] Bermdez, G., (2001). Cromatografa en papel. En lnea.
http://www.elergonomista.com/tecnicas/cp.htm. Visitada el 4 / 11/2016.
[5] Quiroz, T., (2007). Tcnicas Cromatogrficos, Introduccin a los mtodos de
separacin. En lnea.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf. Visitada el
4 / 11/2016.