Vrus de Interesse Cientfico Hepatite

Parte 2
Definio:
Hepatite Viral
Causas:
Bases Moleculares e Aplicaes Ingesto abusiva de lcool
Biotecnolgicas Infeces (bactrias, fungos e vrus)
Infestao por protozorios
Medicamentos e agentes qumicos txicos
Profa. Andra Mendona Gusmo Cunha
Auto-imune
Disciplina: Virologia Molecular
Biotecnologia ICS - UFBA

Hepatite Viral Sintomatologia

Definio Ictercia
Classificao pela OMS Febre
Vrus da hepatite A (HAV) Mal-estar geral
Vrus da hepatite B (HBV) Fadiga
Vrus da hepatite C (HCV) Artralgia e mialgia
Vrus da hepatite D (HDV) Desconforto gastrointestinal
Vrus da hepatite E (HEV) Hepatomegalia
Em estudo (F, G, TT e SEN) Hepatite no A-E Dor abdominal ao toque
Distribuio universal Colria
Acolia fecal

1
 Vrus da Hepatite C (HCV)

Profa. Andra Mendona Gusmo Cunha

HCV
HCV Taxonomia:
Famlia Flaviviridae
Descoberta: 1989 - Anlise molecular de Gnero Hepacivrus
macacos infectados experimentalmente. Genoma: RNA fs +
Cultivo em laboratrio Envelopado
Tamanho: 30-60 nm
Testes sorolgicos (1990)
6 Gentipos:
Controle em Bancos de Sangue (1991) Gentipos mais comuns 1, 2 e 3
No Brasil (1993) Gentipos raros 4, 5 e 6
Vacina Brasil (75% so gentipos tipo-1)
> 100 subtipos (1a, 1b, 1c..., 2a, 2b..., 3c, 3d...)
Vrios subtipos e variantes virais

2
 RVORE FILOGENTICA DIVERSIDADE DO HCV

Hepatology, vol 42 Nro 4

Oct 2005 Simmonds et al

Variantes Virais X Evoluo Clnica X Resposta Teraputica

Gentipos 1b X Virulncia X Evoluo Clnica X Resposta Teraputica.

Estrutura HCV HCV Genoma RNA fs +

P19 gP31 gP70
P7
!!

5 UTR 3 UTR
C E1 E2 NS2 NS3 NS4A NS4B NS5A NS5B
gP-31
gP-70

9.600 nt
UTR= Untranslated Region ou NCR = Non-coding Region (regies
conservadas).
P-19 -5UTR X Stio Interno Ribossomo X Replicao independente de CAP5
(CONTROLE DA TRADUO)
- P19 X Apoptose X Cronicidade X Esteatose
- E2: Domnios Hipervarveis 1 e 2 (HVR1 e HVR2) X Neutralizao

3
 Protenas No Estruturais Ciclo de Replicao
NS-2 = Protena transmembrana
NS-3: Complexo com NS-4, RNA-helicase.
NS-4A: !!!
NS-4BB: Co-fator da proteinase
NS-5A X Resistncia ao IF
NS-5B = RNA pol RNA dep.
Alta tx de erro, sem correo
5X103 stio por ano
Quaisispecies

Vias de Transmisso

Parenteral (Principal)
sexual (Baixo risco)
Vertical (?)
Outras vias
Grupos de risco

4
 Vias de Transmisso do HCV

UDI 60%
Sexual 15%

Transfuso 10%
(antes da triagem)

Outros* 5%
Indeterminado 10%
*Profissionais da sade; Nosocomial; Perinatal

Histria Natural de Hepatite C

Recuperao e Hepatite Crnica

eliminao do HCV RNA
( 10 a 20 anos ou +)

60%
=15%

Hepatite Aguda Infeco Persistente

=85%

NIH Consensus Statement, 2004

5
 Evoluo Clnica
HCV Fase Aguda

55%
Portadores
Crnicos

Qual o perodo de janela imunolgica?

Existe perodo de janela para deteco do genoma?

HCV Fase Crnica Diagnstico - HCV

Clnico:
Similar a infeco aguda por HAV e HBV
Sintomatologia inespecfica
Laboratorial:
Sorolgico anticorpos anti-HCV
Molecular- RT-PCR
Transaminases elevadas (TGO e TGP)
Tempo de coagulao
Albumina srica
1 de 100 mil transfuses pode resultar em transmisso do HCV.
Anatomia patolgica

6
 Hepatite Crnica - HCV
Indicaes: Anti-HCV
anti-HCV
Antecedente de drogas EV
HCV-RNA Transfuso antes de 1993 (Brasil)

Genotipagem Positivo Negativo Hemodilise

cicatriz Elevao persistente da ALT

viremia
sorolgica?
Acidente com perfurocortante
Bipsia
Crianas nascidas de mes HCV + (Raro)
heptica

Indicaes: HCV RNA Tratamento, Preveno e Controle

Tratamento ( Portaria 639 do MS):
Interferon-alfa ou Interferon Peguilado
Determinar viremia Ribavirina (anlogo da Guanosina)

Diagnstico precoce Inibidor de Protease (Boceprevir e Telaprevir)

Tratamento precoce X Tratamento tardio
Transmisso materno-fetal (Raro)
Resposta Teraputica X Gentipo viral
Diagnstico de infeco em Preveno e controle:
imunossuprimidos Evitar comportamento de alto risco.

Avaliar resposta teraputica No compartilhar seringas, agulhas, lminas, alicates e tesouras.

Normas de Biossegurana
No existe vacina Cura???

7
 Vrus da Hepatite B (HBV)

Revista poca, abril de 2006

VRUS DA HEPATITE B
HBV
Antgeno de superfcie
HBsAg
DNA
Famlia: Hepadnaviridae
Gnero:Hepadnavirus
Material Gentico: DNA fita dupla circular incompleto.
Tamanho:42 nm
Ag do Envelope: HBsAg DNA Polimerase
viral
Ag do Core: HBcAg, HBeAg
Nucleocapsdeo
Polimerase Viral HBcAg

Evoluo para fase crnica

Resistente a processos para inativao

8
 Genoma do HBV Partculas Virais - HBV
Partcula de Dane
Partculas Circulares
Partculas Tubulares

AgHBs: Protenas S + M + L
DR1 e DR2 X integrao e oncognese
ENHANCER-I X ativao viral X Oncogenese

Gentipos / Subtipos Gentipos do HBV

Elevada Diversidade Gentica

F
8 Gentipos: (A, B, C, D, E, F, G, H ) A, G D
A, B A vs. D
Subtipos: (ayw1, ayw2, ayw3, ayw4, adw2 , C, D, G D C
C B
adw4, adr) D D D
B B vs. C
Epidemiologia molecular E
F F
Associao com evoluo clnica H
A
A A, B, C, D
F

8 gentipos do HBV (baseado no genoma completo do HBV)

9
 Hepatite B
Vias de transmisso:
Sexual
Parenteral
Vertical/ perinatal

Grupos de Risco:
Prostitutas, Indivduos promscuos/ DST,
DNA pol RNA
presidirios, UDI
dependente
Hemoflicos
Profissionais da rea de sade
Retrotranscrio
reversa

Concentration of Hepatitis B Virus Geographic Distribution of Chronic HBV

in Various Body Fluids Infection

Low/Not
High Moderate Detectable

blood semen urine

serum vaginal fluid feces
wound exudates saliva sweat
tears
HBsAg Prevalence
breastmilk 8% - High
2-7% - Intermediate
<2% - Low

10
 Evoluo da Infeco pelo HBV X Idade Evoluo Clnica - HBV
100 100

Symptomatic Infection (%)

Chronic Infection (%)

80 80

60 60
Chronic Infection RN- 90%

40 40

20 20

Symptomatic Infection
0 0
Birth 1-6 months 7-12 months 1-4 years Older Children
and Adults
Age at Infection

Diagnstico Marcadores Virais

Diagnstico clnico: pouca relevncia.
Marcador Deteco Significado
Diagnstico Laboratorial:
HBsAg Soro Presena de vrus
Sorolgico:
Anti-HBs Soro Imunidade
Deteco de Ags e Acs especficos
Anti-HBc IgM Soro Infeco recente
Utilidade clnica
Anti-HBc IgG Soro Infeco passada/crnica
Bioqumico:
Enzimas hepticas (AST e ALT) HBcAg Hepatcito Presena de vrus

Atividade de Protrombina HBeAg Soro Replicao viral

Albumina srica Anti-HBe Soro Ausncia de replicao

Bilirrubina Deteco molecular
HBV-DNA Soro Replicao viral
Molecular: PCR Deteco e genotipagem.

11
 Hepatite B aguda - cura Hepatite B Crnica
Symptoms Acute Chronic
(6 months) (Years)
HBeAg anti-HBe HBeAg anti-HBe
HBsAg
Total anti-HBc
Total anti-HBc
Titer Titer

HBsAg IgM anti-HBc anti-HBs

IgM anti-HBc

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Years
Weeks after Exposure
Weeks after Exposure

Tratamento e Controle
Interferon-alfa
Ao antiviral e imunomoduladora.
Lamivudina, Adefovir, Entecavir, Tenofovir...
Anlogos de nucleosdeos
Ig anti-HBV pode ser administrada:
Viagens para zonas endmicas
Acidente: uma semana aps exposio + Vacinao
RN de me AgHBs+

12
 Preveno e Controle - HBV
Vacinao dos recm-nascidos
Vacinao de crianas e adolescentes
Vacinao dos adultos em grupos de risco
Usar preservativo
Evitar uso de drogas injetveis
Normas de Biossegurana
Testar as bolsas de sangue
Vrus da Hepatite D (HDV)
Vacinao - HBV
Vacina DNA recombinante (leveduras)
Esquema teraputico:
3 doses:
Recm-nascidos (0, 1 ms, 6-12 meses) Brasil (2001)
Crianas (inicial, 1 ms, 6-12 meses)
Adolescentes (inicial, 1 ms, 4-6 meses) Brasil (2002)
Adultos (inicial, 1 ms, 4-6 meses)
importante que todos os alunos e profissionais da rea
de sade sejam vacinados conta o Vrus da Hepatite B
HDV (Deltavrus)
Descoberta: Rizzeto, 1997
Descoberta do Ag Delta X HBV
Novo Vrus (Experimentos em primatas)
Deltavirus
Genoma RNA fs -, circular
nico vrus animal com esse tipo de genoma
RNA dobrado com 70% de bases pareadas (BASTO)
RNA viral: no codificante
RNA intracelular: codifica Ag Delta
Ag Delta: Protena S (Replicao) + Protena L (Montagem)
No codifica RNA pol RNA dep X No existe em Cel.
Animal X Qual o mecanismo!!!!
13
 HDV (Deltavrus)
Agente Subviral Viruside
Vrus Satlite - HBV (vrus Helper)
Apenas um Sorotipo
3 Gentipos: I, II, III Vrus da Hepatite A (HAV)
I e III X Virulncia
Quaisispecies.
Diagnstico:
Ac, Ag, Genoma
Vacinas!!!!

Vrus da Hepatite A (HAV) RESISTNCIA DO HAV A CONDIES

AMBIENTAIS
Famlia: Picornaviridae
Gnero:Hepatovirus Inativado
Resistente
Material Gentico:
RNA linear fs + Acidez estomacal Cloro: (1 mg/L - 30 min)

Capsdeo icosadrico, No envelopado Detergentes, solventes

Tamanho: 27-28 nm Formaldedo
Baixas temperaturas
Sorotipo nico (freezer)
Ebulio, autoclavao, radiao
7 Gentipos ultravioleta, microondas
Altas Temperaturas (60/1h)
Cultivado em laboratrio
Perodo de incubao: 15-45 dias (curto)

14
 Estrutura do HAV Ciclo de Replicao

Genoma dividido em 3 regies: 2 no codificantes e 1 codificante (regio central

do genoma) - Regio Codificante: P1, P2 e P3.
P1: clivagem gera prot. Estruturais (VP1, VP2 e VP3 e VP4.
P2:clivagem gera prot. No-estruturais (2A, 2B e 2C):.
P3:clivagem geral prot. No-estruturais (3A, 3B e 3C), alm da 3D (Vpg)

GEOGRAPHIC DISTRIBUTION OF Vias de transmisso

HEPATITIS A VIRUS INFECTION
Oral-fecal:
Ingesto de gua e alimentos contaminados;
Contato inter-pessoal (rea endmica- viajantes);
Higiene pessoal;
Ingesto de frutos do mar contaminados;
Sexo oral-anal
Acidente com perfurocortante e transfuso (?)

Perodo de incubao: 15- 45 dias

15
Concentrao do HAV em fluidos biolgicos Patognese do HAV
urina
Urina
Saliva
Soro
Saliva Fezes

Soro

Fezes

100 102 104 106 108 510

10

(Cpias virais/mL)

Evoluo Clnica HAV Diagnstico Clnico Laboratorial

Sintomatologia:
Ictercia, febre, mialgia, cefalia,
Histria Clnica:
Exames Laboratoriais:
Pesquisa de anticorpos (Elisa):
Anti-HAV IgM
Anti-HAV IgG
Dosagem das transaminases:
TGO (AST)
TGP (AAT)
Dosagem de Albumina srica
Teste de sangramento
PCR (fezes)

16
 Tratamento Preveno e Controle
Paliativo
Acompanhamento ambulatorial Medidas de higiene
Recomendaes: Lavar as mos, lavar os alimentos
Repouso at a melhora da ictercia gua potvel
Ingesto de lquidos, interromper uso de medicamentos Fervura da gua e de alimentos
hepatotxicos e lcool
Dieta hipocalrica Saneamento Bsico:
Controle de cura: Esgoto tratado
Normalizao das aminotransferases Fossas sanitrias
RT-PCR nas fezes Educao sanitria junto a comunidade
Presena de anti-HVA IgG.

Preveno e Controle
Vacina/ imunizao ativa :
- Indicao:
- Crianas a partir de 1 ano
- Hepatopatas crnicos suscetveis, transplantados. Vrus da Hepatite E (HEV)
- Pacientes portadores do HCV e HBV.
- Composio e administrao:
- Vrus inativado c/ formaldedo (estirpe RG-SB)
- 2 doses (6 meses-crianas/ 1 ms- adolescentes e adultos)
Ig humana anti-HAV:
- Situaes especiais

17
 Vrus da Hepatite E (HEV) Distribuio Geogrfica do HEV

Famlia: Caliciviridae
Genoma: RNA fs +
No-envelopado
Capsdeo icosadrico
Dimetro: 27 a 32 nm
Apenas um sorotipo
Perodo de incubao: 28-48 dias
Transmisso: Fecal-oral

Elevada prevalncia em vermelho

Aspectos clnicos - HEV Diagnstico - HEV

Perodo de incubao: 15-60 dias Clnico:
Formas agudas graves: Similar ao HAV
Laboratorial:
Gestantes (taxa de mort. 20-25 %)
Pesquisa de marcadores sorolgicos:
Hepatite fulminante (1%) IgG-Anti-HEV Infeco pregressa
IgM-Anti-HEV Fase aguda
No evolui para fase crnica.
Deteco Molecular:
Semelhante hepatite A. RT-PCR nas fezes

18
 Hepatite viral no A-E Riscos de transmisso aps
exposio percutnea
Ocasionadas por vrus no reconhecidos
pelo CITV
So raros Em fase de estudo HIV 0,3%
Espcies:
HFV Vrus da hepatite B at 40%
HGV
TTV Vrus da hepatite C 4 a 10%
SEN-V

19