Lei de Lambert-Beer

Centro de Tecnologia | Departamento de Engenharia Txtil
A Lei de Lambert-Beer
Prof. Me Brenno Henrique Silva Felipe

Natal, Abril de 2017
Introduo
A espectrofotometria medida de absoro ou
transmisso de luz uma das mais valiosas
tcnicas analticas amplamente utilizadas em
laboratrios qumicos.
Por meio da espectrofotometria, componentes

desconhecidos de uma soluo podem ser
identificados por seus espectros caractersticos ao
ultravioleta, visvel, ou infravermelho.
UFRN Universidade Federal do Rio Grande do Norte | Prof. Me Brenno Henrique Silva Felipe
Introduo
Quando um feixe de luz monocromtica atravessa uma soluo com molculas
absorventes, parte da luz absorvida pela soluo e o restante transmitido.
A absoro de luz depende basicamente da concentrao das molculas

absorventes e da espessura da soluo caminho ptico.
i0 = Feixe de luz incidente
i = Feixe de luz transmitido
i0 i l = Espessura da soluo ou caminho ptico
Natureza da cor
A intensidade da cor de uma soluo proporcional concentrao das molculas
absorventes de luz.
Quanto mais concentrada for a soluo, maior ser a absoro de luz.
Por outro lado, a cor da soluo determinada pela cor da luz transmitida.
Natureza da cor
Se incide-se um feixe de luz com intensidade Po, aps passar pela amostra ele ter uma nova
intensidade P, menor do que Po, pois uma parte da luz foi absorvida.
A intensidade de P depender da:
Intensidade de Po;
Concentrao da amostra (C);
Dimetro do tubo (caminho tico-b);
incidente;
Composio qumica da amostra.
Natureza da cor
Para medir concentrao, os outros fatores no podem
variar e deve-se manter fixo:
Comprimento de onda para
Tipo de amostra.
Espessura de cubeta.
Intensidade de p.
Natureza da cor
Como P depende de Po, h que se garantir que Po sempre
igual nas diferentes medies.
Para escapar desse problema, mede-se a razo P/Po, e no

P sozinho.
Essa razo chamada de transmitncia (T), definida como:

=
0
Natureza da cor

=
0
Essa razo independe da intensidade isolada de P ou de
Po.
Utiliza-se tambm a porcentagem de transmitncia (%T),

onde %T = 100 T.
Os valores de T vo de 0 a 1, e a porcentagem de T vai

de 0 a 100.
Natureza da cor

=
0
A medida de Po feita com a cubeta contendo s
solvente, por exemplo.
Dessa forma, o decrscimo de transmitncia ser devido

nica e exclusivamente ao da substncia absorvente.
Natureza da cor
Uma soluo aparece como branca porque transmite luzes de todas as cores;
quando absorve luzes de todas as cores, a soluo preta.
A soluo verde quando absorve luz vermelha e transmite luz verde (amarelo +
azul), a qual denominada luz complementar.
Relao entre a cor da luz com a cor da luz complementar

Natureza da cor
Ao subtrair uma cor do branco,
temos a sua complementar.
Absoro de luz
A luz uma forma de radiao
eletromagntica que possui
caractersticas de onda e de partcula
(fton).
O movimento ondulatrio
caracterizado pelo comprimento de
onda (), o qual corresponde
distncia linear entre duas cristas,
medido em nanmetros (nm), que
corresponde a 10-9 m .
O contedo energtico da luz

inversamente proporcional ao
comprimento de onda, de tal forma
que a luz violeta de = 380 nm bem
mais energtica do que a luz vermelha
de = 700 nm.
Absoro de luz
A luz constituda de
partculas de energia
denominadas ftons, em
que o contedo energtico
est intimamente
relacionado com o
comprimento de onda.
A absoro de luz pela

matria envolve a
incorporao da energia
contida no fton estrutura
das molculas absorventes.
Absoro de luz
Quando isso acontece, as molculas
absorventes passam do estado
fundamental (estado energtico mais
baixo) para o estado excitado (estado
energtico mais alto).
Contudo, a durao do estado excitado

normalmente breve (a molcula retorna
ao estado fundamental aps
aproximadamente 10-8 segundos).
Geralmente, o retorno ao estado

fundamental libera energia na forma
de calor.
Absoro de luz
Quando o contedo
energtico do fton for maior
ou menor do que a
quantidade de energia
necessria para o composto
passar do estado
fundamental para o excitado,
o fenmeno de absoro no
ocorre.
Absoro de luz
Espectro de absorbncia:
Absoro de luz
Espectro de absorbncia:
LEI DE LAMBERT
"A intensidade da luz emitida decresce exponencialmente medida

que a espessura do meio absorvente aumenta aritmeticamente ".
Esta lei pode ser expressa pela seguinte equao:
I = Io . 10-x1
Onde:
I = Intensidade da luz transmitida

Io = Intensidade da luz incidente
x = constante denominada coeficiente de absoro e que depende do meio absorvente
empregado
1 = Espessura do meio absorvente
LEI DE BEER
" A intensidade de um feixe de luz monocromtico decresce

exponencialmente medida que a concentrao da substncia
absorvente aumenta aritmeticamente ".
I = Io . 10-kc
Onde:
I = Intensidade da luz transmitida

Io = Intensidade da luz incidente
k = Constante denominada coeficiente de absoro
c = Concentrao do meio absorvente
LEI DE LAMBERT-BEER
T= e-a . 1 . C
Onde:
T= Transmitncia
e = Logaritmo Natural de Euler
a= Constante
1= Espessura da soluo
c = Concentrao da soluo (cor)
Suponha-se um aparelho que
capaz de medir a
transmitncia de uma amostra
e que se
encontram disposio vrias
solues-padro da mesma
substncia.
Como a transmitncia deve

diminuir quando aumenta a
concentrao, o grfico obtido
ser da forma:
A relao experimental entre
transmitncia e concentrao
tem a forma de uma
exponencial inversa.
Para se ter o grfico de uma

reta, basta aplicar o
logaritmo.
Como os valores so menores

que 1, para no ter nmeros
negativos, aplica-se o
logaritmo do inverso (log
1/T).Ento:
Essa nova grandeza (log 1/T)
diretamente proporcional
concentrao e denominada
absorbncia (simbolizada por A).
Como se comporta a
absorbncia, se a concentrao
mantida constante e o
caminho tico (dimetro da
cubeta) b varia?
Experimentalmente se obtm o
grfico:
Logo, a absorbncia depende da concentrao e do caminho
tico.
Pode-se definir uma equao para a absorbncia levando em conta

essa dependncia:
A = absorbncia
= constante de absortividade molar (L/mol.cm)
b = caminho tico (cm)
C = Concentrao (mol/L)
Essa a Lei de Lambert-Beer, onde (psilon) a constante de proporcionalidade.
Para saber o significado dessa constante, constri-se o grfico A x (comprimento de

onda), mantendo todas as outras variveis (b, C, tipo de amostra) constantes.
Tomando uma substncia prpura, como o permanganato de potssio, sua intensidade

mxima de absoro no verde. O grfico da forma:
Plota-se o grfico A x C para os
comprimentos de onda 1, 2
e 3, nas mesmas condies
de anlise.
Coloca-se as 3 retas no
mesmo par de eixos.
V-se que 1 ter sempre uma

absorbncia maior que 2,
que ter absorbncia maior
que 3 (apesar de termos
1<2<3 em nanmetros).
Qual a melhor reta para anlise
quantitativa?
a que fornece a melhor sensibilidade.
Ou seja, a que melhor distingue entre

duas concentraes muito prximas e
que d maior sinal para amostras
diludas.
Claramente v-se que 1 atende a esses

requisitos.
1 o comprimento de onda de absoro

mxima para a substncia, simbolizada
como max.
Significado da constante
Se b e C so os mesmos para cada reta,
tem que ser diferente, para que o valor
de A se modifique.
uma constante que s depende da:
Amostra;
Solvente;
Comprimento de onda.
No depende do caminho tico ou da

concentrao.
chamada de absortividade molar, quando a concentrao expressa em mol/L
(seria a absorbncia por mol e por centmetro).
A unidade de L/mol.cm.
Quando a concentrao expressa em g/L, o smbolo se modifica, passa a ser a,

chamada de absortividade especfica (absorbncia por grama e por centmetro). A lei
de Lambert-Beer nesse caso ser escrita como:
A = abC
Onde a concentrao est expressa em g/L.
A unidade de a L/g.cm.
A Curva-de-calibrao
Abra o Excel e escolha uma planilha em branco.
Usando os dados coletados nas leituras no espectrofotmetro crie uma tabela com os valores
de concentrao esquerda e ABS (absorbncia) direita como no exemplo abaixo:
A Curva-de-calibrao
Clique na aba inserir;
A Curva-de-calibrao
Selecione na tabela somente os valores como na figura abaixo:
A Curva-de-calibrao
Selecione nos tipos de grficos Disperso:
A Curva-de-calibrao
Em Disperso selecionar a opo com linhas suaves e marcadores Comparar pares de
valores que representam uma funo. Tambm pode ser encontrado como Disperso f(x).
A Curva-de-calibrao
O grfico ser montado automaticamente. Aps isso v em Layout do grfico e clique nas
setas at encontrar um modelo fx. Clique nele.
A Curva-de-calibrao
O resultado ser esse. Aparecer a equao da reta.
Referncias
http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/index.html
https://littlebabsi.wordpress.com/2015/06/10/tutorial-como-usar-o-
espectrofotometro-e-como-criar-uma-curva-de-calibracao-abs-no-excel/

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Por meio da espectrofotometria, componentes

A absoro de luz depende basicamente da concentrao das molculas

i0 = Feixe de luz incidente

i = Feixe de luz transmitido

i0 i l = Espessura da soluo ou caminho ptico

Quanto mais concentrada for a soluo, maior ser a absoro de luz.

A intensidade de P depender da:

Concentrao da amostra (C);

Dimetro do tubo (caminho tico-b);

Composio qumica da amostra.

Comprimento de onda para

Para escapar desse problema, mede-se a razo P/Po, e no

Essa razo chamada de transmitncia (T), definida como:

Utiliza-se tambm a porcentagem de transmitncia (%T),

Os valores de T vo de 0 a 1, e a porcentagem de T vai

Dessa forma, o decrscimo de transmitncia ser devido

Relao entre a cor da luz com a cor da luz complementar

O contedo energtico da luz

A absoro de luz pela

Contudo, a durao do estado excitado

Geralmente, o retorno ao estado

"A intensidade da luz emitida decresce exponencialmente medida

Esta lei pode ser expressa pela seguinte equao:

I = Intensidade da luz transmitida

" A intensidade de um feixe de luz monocromtico decresce

I = Intensidade da luz transmitida

Esta lei pode ser expressa pela seguinte equao:

Como a transmitncia deve

Para se ter o grfico de uma

Como os valores so menores

Pode-se definir uma equao para a absorbncia levando em conta

Para saber o significado dessa constante, constri-se o grfico A x (comprimento de

Tomando uma substncia prpura, como o permanganato de potssio, sua intensidade

V-se que 1 ter sempre uma

Ou seja, a que melhor distingue entre

Claramente v-se que 1 atende a esses

1 o comprimento de onda de absoro

uma constante que s depende da:

No depende do caminho tico ou da

Quando a concentrao expressa em g/L, o smbolo se modifica, passa a ser a,

Onde a concentrao est expressa em g/L.

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