Raziel Teuhmar lvarez Rebollo

Carrera de Biologa
Facultad de estudios superiores
Iztacala
Dependencia: Facultad de estudios
superiores Iztacala

Unidad de Biomedicina, Laboratorio de

inmunidad innata

Dra. Miriam Rodrguez Sosa

Anlisis histopatolgico de cncer colorrectal en un modelo
murino
El cncer
Una de las enfermedades de mayor incidencia en la poblacin mundial es el cncer.
Este padecimiento se da a raz del crecimiento descontrolado de las clulas al
alterarse los mecanismos de divisin y muerte celular, lo que genera el desarrollo de
tumores o masas anormales, las cuales se pueden presentar en cualquier parte del
organismo, dando lugar a ms de 100 tipos de cncer que se denominan segn la
zona de desarrollo, por ejemplo: cncer de mama, cncer de colon, tumor cerebral,
etc.
Anatoma del colon
El colon y el recto forman parte del sistema digestivo del cuerpo humano cuya
funcin es extraer la energa que necesita nuestro organismo y formar la materia
fecal a partir de los alimentos ingeridos. El intestino delgado es mucho ms largo
que el grueso, mide alrededor de 4 metro, y tiene la funcin de seguir troceando los
alimentos y de absorber la mayora de los nutrientes de los alimentos. Por otra
parte, su dimetro, de unos cuatro centmetros, es inferior al del intestino grueso o
colon. El intestino delgado est fijado al abdomen a travs de la raz del mesenterio
(zona anatmica del abdomen) que le aporta los vasos necesarios para recibir la
sangre que le permite ejercer su funcin. El intestino delgado presenta mucha
movilidad que el intestino grueso, que es un rgano mucho ms fijo.
El colon es un tubo muscular que mide aproximadamente 120 centmetros y que
absorbe nutrientes y agua de los alimentos ingeridos. Una vez se forma la materia
fecal, sa se dirige al recto, que est constituido por los ltimos 16 centmetros del
intestino grueso, y pasar al ano. El canal anal es un tramo ubicado entre el recto y
el orificio del ano que mide aproximadamente 4 centmetros. El cncer de canal anal
es una entidad diferente en cuanto a las causas y tratamiento del cncer colorrectal.
El colon se divide en cuatro partes:
Colon ascendente: Se
inicia en parte donde
termina el intestino
delgado y se extiende
hasta el ngulo del
colon que est en
contacto con el hgado
Colon transverso: Es la
parte de colon que
comunica el ngulo
hpatico con el ngulo
esplnico del colon
 Colon descendente: Es la parte del colon localizada en el hemiabdomen
izquierdo
Colon sigmoide: Constituye la ltima parte del colon, y la que lo unir con el
recto. Una vez termina el colon sigmoide, el intestino se introduce en la
cavidad plvica. El colon sigmoide es la parte donde con ms frecuencia se
desarrollan los tumores del colon (Macarulla etal, 2011)
El intestino grueso no tiene vellosidades ni pliegues circulares. Al igual que el resto
del tracto digestivo, la pared del intestino grueso se puede dividir en 4 capas:
mucosa, submucosa, muscular y serosa. La mucosa est formada por un epitelio
simple cilndrico que forma numerosas glndulas mucosas tubulares denominadas
criptas de Lieberkhn. stas aparecen como invaginaciones de las superficie
epitelial. Una de las principales funciones del intestino grueso es la reabsorcin de
agua y electrolitos del proceso digestivo. Tambin secreta una gran cantidad de
moco que favorece el trnsito de los deshechos semislidos no digeridos. Las
clulas mucosas son ms abundantes en el epitelio del intestino grueso que en el
del intestino delgado. La proporcin entre clulas mucosas y clulas absorbentes,
denominadas enterocitos, cambia de 4 a 1 en las porciones ms prximas al
intestino delgado a 1:1 en las zonas ms prximas al ano. Las clulas epiteliales
se renuevan constantemente: nacen en la base de las criptas y van desplazndose
hacia la superficie del tubo digestivo donde mueren. Todo este proceso suele durar
unos 5 das.
La lmina propia es similar a la del resto del tubo digestivo con slo unas pocas
peculiaridades como la carencia de vasos linfticos o de una capa gruesa de
colgeno entre la membrana basal del epitelio y los vasos sanguneos prximos.
La muscular de la mucosa normalmente se organiza en dos capas de msculo liso
con distinta orientacin. En algunas zonas es delgada. La submucosa est
formada por tejido conectivo muy denso. Contiene vasos sanguneos de gran
calibre y algunas zonas con tejido adiposo. La capa muscular se organiza de
forma distinta. Existe una capa longitudinal de msculo liso que es ms delgada
que la capa circular. En humanos, sin embargo, la capa longitudinal se engruesa
en tres lugares concretos para formar bandas que se pueden observar a simple
vista. La serosa es una capa muy delgada de conectivo que en algunos puntos se
contina con el peritoneo (1).

El cncer colorrectal

El cncer colorrectal hace referencia a tumores malignos originados en el colon o el

recto. Los tumores colo-rectales son caractersticos de los pases desarrollados. Los
pases con mayor incidencia para este cncer son Norteamrica, Canad y Europa,
multiplicando algunos de ellos entre 10 y 15 veces los valores de los pases de baja
incidencia (frica y Asia, exceptuando Japn). en todo el mundo, los estudios de
incidencia y mortalidad han demostrado una tendencia ascendente en aquellos
pases donde las tasas eran inicialmente bajas, una estabilizacin en las que eran
inicialmente bajas, una estabilizacin en las que eran intermedias y una disminucin
gradual en las de alta incidencia. Destaca tambin que el cncer de colon aumenta
su frecuencia, distanciandose del de recto a medida que el riesgo de cncer
colorrectal aumenta. As mismo, hay una gran variabilidad en la incidencia del
cncer de colon entre diferentes pases, grupos emigrantes y religiosos, hecho que
no se da en el cncer de recto cuyas diferencias geogrficas de incidencia no son
tan grandes. Todo esto hace pensar en que los factores etiolgicos que actan en
las dos localizaciones pueden no ser
idnticos.
El cncer colorrectal se ha asociado a la
dieta, al sedentarismo y a la obesidad. El
consumo de grasa animal y carne
representan factores de riesgo, mientras
que el consumo de frutas, verdura fresca y
alimentos ricos en fibra son factores
protectores. Las dietas de tipo
mediterrneo representan una proteccin
relativa y los pases que se incorporan
progresivamente a los modelos alimentarios de los pases desarrollados ven como
las tasas de incidencia en este cncer aumentan. Por las mismas razones, las
poblaciones de emigrantes de pases no industrializados a pases desarrollados,
presentan un aumento de riesgo ya en la primera generacin de emigrantes con
relacin al riesgo de sus poblaciones de origen. La falta de ejercicio fsico tambin
se ha asociado con el aumentos de riesgo de cncer de colon pero no con el de
recto. Se estima que alrededor del 6% de los cnceres colorrectales son
hereditarios: 1% asociados a la polopiposis familiar colnica (PFC) y un 5%
asociados al cncer de colon no-polopsico (CCHNP), ambos de herencia
autosmica dominante. Por otro lado se ha estimado que aproximadamente entre un
10-30% de las neoplasias colorrectales presentan agregacin familiar. Tener
familiares de primer grado con cncer de colon aumenta el riesgo para el desarrollo
individual de este tumor de 1.5 a 3 veces. En familias en la que los casos son
mltiples, aparecen a edades jvenes y son multifocales, el riesgo puede llegar a
ser de 20 o 30 (Diaz etal, 2000)

Histologia

Una de las tcnicas utilizadas para realizar el diagnstico de cncer es el anlisis

histolgico, que tambin permite ver el grado de malignidad en los tumores.
La histologa es la rama de las ciencias anatmicas que se dedica al estudio de los
tejidos de los animales y las plantas. En sentido amplio, el trmino histologa se
utiliza como sinnimo de anatoma microscpica, dado que su objeto de estudio
comprende no solo la estructura microscpica de los tejidos , sino tambin la de
clula, los rganos y los sistemas que estos forman.
Debe entenderse que el organismo est compuesto por clulas , matriz extracelular
y una sustancia lquida, el lquido extracelular (o tisular), que impregna estos
componentes. El lquido extracelular, que procede del plasma de la sangre, lleva
nutrientes, oxgeno y molculas de sealizacin a las clulas del organismo. Por el
contrario, las molculas de sealizacin, los productos de desecho y el dixido de
carbono liberados por dichas clulas llegan a la sangre y a los vasos linfticos por
medio del lquido extracelular.
Se han desarrollado diversas tcnicas dirigidas a preparar tejidos para su estudio de
manera que se asemejen cercanamente a su estado in vitro. Las etapas que se
aplican reciben los nombres de fijacin, deshidratacin y aclarado, inclusin en un
medio adecuado, corte en finas secciones que permitan un estudio por
transiluminacin, montaje en una superficie que facilite el manejo y tincin, de tal
forma que sea posible diferenciar los distintos componentes que integran los tejidos
y las clulas
Fijacin:
La fijacin consiste en tratar el tejido con sustancias qumicas que no solo retrasan
las alteraciones del tejido despus de la muerte (o de su extraccin del organismo)
sino que adems mantienen su arquitectura normal. Los agentes de fijacin ms
habituales utilizados en microscopa ptica son el formol y el lquido de Bouin en
tampn neutro. Estas dos sustancias entrecruzan las protenas, con lo cual evitan
que se modifique su posicin y favorecen el mantenimiento de una imagen viva del
tejido.
Deshidratacin y aclarado:
Dado que una fraccin importante del tejido est compuesta por agua, para
eliminarla se emplea una gradacin de baos alcohlicos, primero alcohol al 50% y
despus, paso a paso hasta llegar a alcohol al 100%. A continuacin se trata el
tejido con xileno, un productos qumico miscible con el alcohol y con la parafina
fundida. Este proceso recibe el nombre de aclarado, dado que, en el xileno, el tejido
se vuelve transparente.
Inclusin:
Con el propsito de diferenciar entre s las clulas superpuestas de un tejido y la
matriz extracelular, se deben incluir los tejidos en un medio adecuado y despus
seccionarlos en cortes finos. En microscopa ptica, el medio de inclusin ms
habitual es la parafina. Se coloca el tejido en un recipiente apropiado de parafina
fundida hasta que quede totalmente infiltrado por esta sustancia cerosa. Cuando se
ha logrado suficiente infiltracin, el tejido se introduce en un pequeo recipiente,
cubierto con parafina fundida, y se deja endurecer hasta formar un bloque de
parafina que contiene dicho tejido
Corte:
Despus de recortar los bloques de tejidos para retirar el exceso de material de
inclusin, se montan para proceder a su corte. Esta tarea, en la cual se eliminan
cortes dinos del bloque, se lleva a cabo mediante un microtomo, una mquina
provista de una cuchilla y un brazo que avanza por el bloque de tejido en
incrementos uniformes predeterminados. En microscopia ptica, el grosor de corte
es de aproximadamente 5-10 m, y cada corte , o serie de cortes, se monta sobre
un portaobjetos de vidrio.
El corte puede realizarse as mismo en muestras congeladas en nitrgeno lquido o
en la barra de congelacin rpida de un criostato. Los cortes se montan con ayuda
de un medio de congelacin rpida y se seccionan a temperaturas inferiores a cero
con una cuchilla de acero previamente enfriada. Se colocan los cortes en
portaobjetos previamente enfriados, se deja que se calienten hasta temperatura
ambiente y se tien con colorantes especficos (o bien se tratan para realizar
estudios de histoqumica o inmunohistoqumica)

Montaje y tincin
Los cortes de parafina se montan en portaobjetos de vidrio y despus se tien con
colorantes hidrosolubles que permiten la diferenciacin de los diversos
componentes celulares. Los cortes empleados en microscopa ptica convencional,
una vez obtenidos con cuchillas de acero inoxidable se montan en portaobjetos de
vidrio recubiertos con material adhesivo. Dado que muchos constituyentes tisulares
poseen aproximadamente las mismas densidades pticas, es preciso teirlos para
facilitar su estudio por microscopa ptica. Esta tincin se lleva a cabo
principalmente con colorantes hidrosolubles. En consecuencia primero es necesario
retirar la parafina de los cortes montados, despus de lo cual se rehidrata y se tie
el tejido. Una vez realizada la tincin, se vuelve a deshidratar el corte de manera
que el cubreobjetos pueda fijarse de forma permanente mediante el empleo de un
medio de montaje adecuado. El cubreobjetos no solo protege el tejido de posibles
daos, sino que es necesario para ver el corte al microscopio. Aunque de han
desarrollado distintos tipos de colorantes para la visualizacin de los mltiples
componentes de las clulas y los tejidos, pueden agruparse en las tres clases
siguientes:
Colorantes que diferencian entre los componentes cidos y bsicos de la
clula
Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la
matriz extracelular
Sales metlicas que precipitan en los tejidos, para formar en ellos depsitos
metlicos.
Los colorantes utilizados habitualmente en histologa son la hematoxilina y la
eosina. La primera es una base que tie de azul preferentemente los componentes
cidos de la clula. Dado que los componentes ms cidos son el cido
desoxirribonucleico (ADN) y el cido ribonucleico, el ncleo y las regiones del
citoplasma ricas en ribosomas se tien de azul oscuro; se dice que estos
componentes son basfilos. La eosina, un cido, tie los componentes bsicos de la
clula de un color rosado. Debido a que muchos componentes del citoplasma tienen
un pH bsico, las regiones del citoplasma viran a un color rosa; estos elementos se
llaman acidfilos (Gartner, 2017) El tricrmico de Masson, al igual que otros
colorantes tricrmicos, es una tincin especial que permite visualizar claramente las
fibras de colgeno tipo I que forman fibras gruesas o haces, diseados para dar
resistencia; tambin evidencia, aunque en menor intensidad, las fibras reticulares.
Se emplean tres colorantes para diferenciar el ncleo celular, el citoplasma y las
fibras de colgeno.Primeramente, se tien las secciones con un tinte cido tal como
escarlata de Biebrich. Todos los elementos acidfilos del tejido tales como el
citoplasma, el msculo y el colgeno se unirn a los tintes cidos. Las secciones
entonces se tratan con cido fosfotngstico y/o fosfomolbdico. Ya que el citoplasma
es mucho menos permeable que el colgeno, los cidos fosfotngsticos y
fosfomolbdicos permiten que la escarlata de Biebrich difunda del colgeno pero no
del citoplasma. Los cidos fosfotngsticos y fosfomolbdicos tienen numerosos
grupos cidos que probablemente acten como medio de unin entre el colgeno y
el azul de la anilina, que es el tinte del colgeno. Probablemente, el pH de la
solucin fosfotngstico/fosfomolbdico tambin aumente la coloracin y ayude al
colgeno en la difusin o el retiro de los colorantes. En la preparacin de muestras
para estudio histolgico se usan otros muchos colorantes

Tincin Color y estructuras que tie

Hematoxilina/eosina Ncleo (morado) y citoplasma (rosa)

Tricrmico de Masson Citoplasmas (rojo), colgena y cartlago

(azul/verde)

Tricrmico de Gomori Fibras musculares (rojo)

Tricrmico de Gallego Msculo (amarillo) y colgena (verde)

Wright Clulas sanguneas (rojo, prpura, rosa)

Giemsa Clulas sanguneas y mdula sea

Van Gieson Msculo (amarillo) y colgena (rosa)

Kluver-Barrera (Luxol Fast Blue) Mielina (azul)

Da Fano Aparato de Golgi (caf)

Wilder Fibras reticulares (caf-negro)

 Reyes Colgena (verde) y elastina (rosa)

Carmin de Best Ncleo y glucgeno (rosa-rojo)

PAS Hidratos de carbono (magenta)

Feulgen DNA

Von Kossa Calcio (negro)

Rojo Congo Protena amiloide (rojo)

Nissl Retculo endoplasmtico rugoso

(morado)

Mucicarmn de Mayer Mucina (rojo)

Fontana-Masson Melanina (negri) y msculo (verde)

Metanamina de plata Membranas basales (negro)

Bensley/Cains Mitocondrias (rojo-prpura)

Sudn III y IV tien grasas

Shorr Citologa vaginal, en presencia de

queratina tie de naranja; si no, de verde

Papanicolau Citologa vaginal

Azul de tolouidina Grnulos de mastocitos (prpura)

Gram Bacterias

Ziehl Neelsen Microorganismos patgenos

(Lecuona etal, 2015)

Histopatologa

La histopatologa (del griego histos (tejido) y pathos (sufrimiento)) es la ciencia que

estudia las modificaciones patolgicas de los tejidos del cuerpo. Para lo cual utiliza
el examen microscpico de muestras obtenidas por biopsia u otros procedimientos.
Una vez se cuenta con el material a evaluar se indagan una serie de caractersticas,
como establecer el origen de la muestra, la determinacin de la existencia de lesin,
el tipo de lesin, el patrn histopatolgico, la extensin y gravedad de la lesin,
adems de caractersticas citolgicas. El patrn histopatolgico o la configuracin
microscpica de las clulas que conforman la lesin tiene un papel de especial
relevancia en la patologa tumoral o oncopatologa, debido que permite el estudio de
la forma de crecimiento de la neoplasia en el tejido afectado, lo cual es clave para el
diagnstico, pronstico y tratamiento. Para su establecimiento se debe realizar un
escrutinio cuidadoso de los cortes convencionales con el microscopio de luz, a bajo
poder, con el fin de encontrar las caractersticas microscpicas relevantes, el
tamao y la profundidad de la lesin, la relacin con el tejido adyacente y la
naturaleza de los bordes (Daz etal, 2012)

Objetivo
Describir las diferencias histolgicas en colon de ratones con cncer inducido

-Metodologa
Se sacrificaron los ratones en el da 68, cuando el cncer ya haba sido
establecido, se obtuvieron los colon y midi la distancia del ciego hasta el ano.
Posteriormente se lavaron y abrieron longitudinalmente los intestinos y se aplic
azul alcian para hacer evidente los tumores en la zona media y distal del intestino. .
Finalmente, se analiz la capacidad de contener el desarrollo tumoral mediante la
determinacin de la carga tumoral, la cual fue calculada como la sumatoria del
volumen de todos los tumores intestinales de un mismo ratn. Una vez obtenidos
los tejidos se dejaron en paraformaldehido al 4% durante 1 semana.
Posteriormente las muestras se colocan en el tren de deshidratacin que comienza
con sumergir las muestras en agua corriente durante 30 minutos y en agitacin,
alcohol 50% durante 30 min, alcohol al 60% durante 20 minutos, alcohol al 70%
durante 20 minutos, alcohol al 75% durante 20 minutos, alcohol al 80% durante 20
minutos, alcohol al 85% durante 20 minutos, alcohol al 90% durante 20 minutos,
alcohol al 96% durante 20 minutos, , alcohol absoluto durante 20 minutos (se repite
dos veces este paso). Se colocaron en alcohol amilico durante 20 min (dos veces)
y se colocaron en parafina 1 durante 24 horas, por ltimo se colocaron en parafina
2 durante 24 horas y se incluyeron. Los tejidos se cortaron con un microtomo a 5
m, se fijaron a los portaobjetos con un bao de flotacin y se retir la parafina en
un horno a 55C. Los cortes realizados se tieron con diferentes tcnicas, unos de
ellos se tieron con Hematoxilina & Eosina y los dems con tincin tricrmica de
Masson. Para la tincin con Hematoxilina & Eosina los portaobjetos con los tejidos
se sumergieron durante 5 minutos en Xilol, dicho paso se realiz dos veces.
Posteriormente se llev a cabo la deshidratacin de los tejidos, comenzando con
alcohol etlico absoluto durante 5 minutos, alcohol al 96% durante 5 minutos,
alcohol al 80% durante 5 minutos, y alcohol al 70% durante 5 minutos. Las
muestras se colocaron en Hematoxilina durante cinco minutos y medio,
posteriormente se sumergi en agua durante 10 segundos. A continuacin las
muestras se remojaron ligeramente en una solucin de alcohol etlico al 70% con
HCl al 1%. En seguida las muestras se enjuagaron con agua destilada. Se
sumergieron durante 15 segundos en agua amoniacal (H2O+1% NH3OH). Luego
las muestras se enjuagaron con agua destilada. Las muestras se sumergieron. Las
muestras se colocaron en Eosina durante 4 minutos, despus de esto se
enjuagaron en agua destilada y se lavaron con alcohol etlico al 96% a chorr.
Ulteriormente se coloc en alcohol absoluto durante 30 segundos y en xilol durante
5 minutos. Para finalizar las muestras se fijaron con Entellan.

Las muestras que se colocaron en tincin tricrmica de Masson los portaobjetos con
los tejidos se sumergieron en Xilol durante 5 minutos, dcho paso se repiti dos
veces. Posteriormente se llev a cabo la deshidratacin de los tejidos, comenzando
con alcohol etlico absoluto durante 5 minutos, alcohol al 96% durante 5 minutos,
alcohol al 80% durante 5 minutos, y alcohol al 70% durante 5 minutos. Las muestras
se sumergieron en agua destilada durante 5 minutos y posteriormente se colocaron
en solucin de Bowin durante 48 hrs. Pasado dicho tiempo se colocaron las
muestras en agua corriente durante 5 min, dicho paso se repiti dos veces. Las
muestras se colocaron en Hematoxilina de Weigert durante 2 mn y posteriormente
se colocaron en agua destilada durante 5 min. Luego se colocaron en Rojo escarlata
durante 3 min para colocarse ulteriormente en agua destilada durante 5 min. Se
colocaron en cido fosfomolbdico/fosfotngstico durante 3 minutos, luego en azul
anilina durante 4 minutos y en cido actico durante 2 minutos. Posteriormente se
comenz el proceso de deshidratacin de las muestras comenzando con alcohol
etlico 70% durante 30 segundos, alcohol al 80% durante 30 segundos, alcohol al
96% durante 30 segundos, y alcohol al absoluto durante 15 segundos. Se colocaron
en Xilol durante 5 minutos y por ltimo se colocaron los cubreobjetos y se fijaron con
Entellan.

Resultados
En la Fig.1 se muestra la disminucin
del largo del colon, se refleja la
prdida de la morfologa de las
criptas del intestino provocada por
los tumores; sin embargo slo se
observ el acortamiento significativo
del colon debido al cncer en los
ratones WT (Mif +/+).
Los 3 ratones utilizados para estandarizar el modelo de CCR desarrollaron en
promedio 12 tumores (Tabla 1), los cuales difirieron en tamao ya que en los
ratones WT CCR la mayora (66.7%) de los tumores eran menores a 1 mm de
dimetro, mientras que el 13.3 % super los 2 mm de dimetro (Fig.3 )
RATN WT (Mif +/+) # DE TUMORES
C57BL/6 CON CCR
1 10
2 11
3 15
PROMEDIO 12
En la Fig.5 se muestran los cortes longitudinales realizados de los ratones 1, 2, 4 y
5; Los ratones 1 y 2 eran ratones con cncer colorrectal (CCR) y los 4 y 5 eran
ratones control. A los cortes realizados se les hicieron dos tipos de tincin H&E y
tricrmica de Masson. Los cortes de los ratones 1, 2 teidos con H&E y Masson
presentan de manera evidente una mayor infiltracin en las criptas, adems
presentan un mayor crecimiento y deformacin de dichas estructuras
comparndolas con los controles, pues se observa que las criptas presentes en
dichos ratones tienen un mayor orden y menor infiltracin, adems de una
estructura ms definida. Sin embargo, dichas deformaciones e infiltraciones pueden
notarse de mejor manera en la Fig.6 pues en ella se muestran los cortes
transversales con las tinciones antes ocupadas en los tejidos de los ratones con
CCR 1, 2 y 3 que, comparndolos con los ratones control (4 y 5) no tienen
estructura definida y tienen mayor cantidad de infiltraciones
Discusin de resultados
Como se observa claramente en las fotografas de los cortes, se puede notar un
grado de infiltracin y deformacin de las criptas es mayor en los ratones con cncer
colorrectal que en los ratones control, esto especficamente tratndose de los
ratones de la cepa C57/BL6, pues en estudios realizados para probar la
susceptibilidad de diferentes cepas de ratones ante el azoximetano y el dextran
sulfato de sodio la incidencia de adenocarcinoma de colon fue del 50% con una
multiplicidad de 1,0 1,2 en el C57BL / 6N, demostrando que la susceptibilidad de
esta cepa de ratn es por mucho menor a la de la cepa ms conocida en esta rea
(Balb/c)(Rikako etal, 2005). Los cortes realizados al tejido del ratn 1 CCR
demuestran que ste present mayor displasia en sus criptas, esto puede deberse a
que present un volumen mayor en sus tumores, por otro lado los ratones 2CCR y
3CCR presentan menor grado de displasia, esto probablemente se debe al volumen
de los tumores.

Conclusiones
El grado de filtracin y deformacin de las criptas est relacionado con el
volumen de los tumores
Los ratones C57BL / 6N son poco sensibles a los compuestos usados

Referencias
Daz, P. J. ; Garcia, V. J. ; Marquez, J. J. ; Valencia, C. F. ; Patrones
histolgicos tumorales. UDES. Colombia. pp. 59
Daz, R. E. ; Garca, C. J. 2000. Oncologa clnica bsica. Arn. Espaa. pp.
41
Gartner, Leslie. 2017. Texto de histologa. 4a edicin. Elsevier. Espaa. pp. 1,
2
Lecuona, Miguel; Castell, Andres; Sampedro, Enrique; Acevedo, Sandra.
2015. Compendio de histologa mdica y biologa celular. Elsevier. Espaa.
pp.22
Macarulla. M. T. ; lez, F. E. ; Capdevilla, C. J. ; Tabernero, C. J. 2011.
Cncer de colon y recto. Amat. Espaa. pp.15-18
Rikako Suzuki, Hiroyuki Kohno, Shigeyuki Sugie, Hitoshi Nakagama, Takuji
Tanaka; Strain differences in the susceptibility to azoxymethane and dextran
sodium sulfate-induced colon carcinogenesis in mice. Carcinogenesis 2005;
27 (1): 162-169. doi: 10.1093/carcin/bgi205

(1) Informacin consultada el 1 de junio de 2017 en:

https://mmegias.webs.uvigo.es/2-organos-a/imagenes-grandes/digestivo-grue
so.php