LIMPIEZA Y ASEPSIA EN UN LABORATORIO DE FITOPATOLOGA

I. Objetivo:
Que el estudiante tenga conocimiento de los procesos de desinfeccin y esterilizacin
comnmente utilizados en un Laboratorio de Fitopatologa y los aplique
adecuadamente al momento de realizar la prctica.
 II. Definiciones:
a) Asepsia: Conjunto de procedimientos que se llevan a cabo para la exclusin total
de microorganismos contaminantes (que desatan infecciones o enfermedades).

b) Limpieza: es el proceso mediante el cual se remueve, a travs de medios

mecnicos o fsicos el polvo, la grasa y otros contaminantes de las superficies,
equipos, materiales, personal, etc. Este proceso, junto con un adecuado proceso
de desinfeccin, es indispensable para controlar la presencia de los
microorganismos en el ambiente.
c) Higiene: se refiere a los cuidados, prcticas o tcnicas utilizados para la
conservacin de la salud y la prevencin de las enfermedades.
d) Esterilizacin: Proceso mediante el cual se destruye toda forma de vida
microbiana incluyendo sus formas de resistencia (esporas) que puedan existir en
la superficie de un objeto cualquiera. Un objeto estril (en sentido microbiolgico)
est libre de microorganismos vivos.

III. Mtodos de esterilizacin:

1. AGENTES FSICOS:

a. CALOR:
a.1. Calor hmedo:
Destruye a los microorganismos por coagulacin de las protenas. La presencia de agua
facilita el proceso de destruccin de los microorganismos.
Vapor a presin (autoclave):
El calor en forma de vapor saturado a presin proporciona temperaturas mayores que la
de ebullicin. La esterilizacin en autoclave emplea vapor saturado a
15 lbs. de presin cuya temperatura es de 121C, por 15 minutos contados a partir del
momento en que el material alcance los 121C.
USOS: Esterilizacin de material contaminado, medios de cultivo y lquidos
termoestables.
Limitaciones: No es efectivo en medios impermeables al agua, ni en materiales
sensibles al calor o a la humedad.
Pasteurizacin:
Utilizado en la eliminacin de microorganismos patgenos en productos lcteos, vinos,
cerveza y jugos.
a.2. Calor seco:
Deshidrata las clulas y destruye los microorganismos por oxidacin de sus
constituyentes.
 Aire caliente:
La esterilizacin se realiza en hornos, usualmente a 160-170C por un perodo de 2 a 4
horas.
USOS: Esterilizacin de materiales termoestables impermeables o que son daados por
la humedad y por lo tanto no pueden esterilizarse en autoclave. Ejemplo: grasas, vidrios,
metales, polvos, etc.
Limitaciones: Destruye materiales que no soportan temperaturas elevadas por largos
perodos.

Incineracin:
USOS: Destruccin de animales de laboratorio y otros materiales infectados a ser
desechados. Esterilizacin del asa de platino y el filamento en el laboratorio.
Limitaciones: Contaminacin ambiental.

b. RADIACIONES:
b.1. No ionizantes:
Radiacin ultravioleta:
Los cidos nucleicos y las protenas absorben la radiacin ultravioleta, esa absorcin
causa modificaciones qumicas, entre ellas, la formacin de dmeros de timina los cuales
ocasionan lecturas errneas del cdigo gentico, produciendo mutaciones que impiden
funciones vitales de los microorganismos, por lo tanto, stos mueren.
La longitud de onda ms efectiva para matar los microorganismos es 253,7 nm.
USOS: Desinfeccin de superficies y de aire.
Limitaciones: Escaso poder de penetracin, sus efectos pueden ser revertidos, puede
causar quemaduras en la piel y en los ojos.
Luz visible
Aunque no se puede considerar como un agente esterilizante, la luz visible, de suficiente
intensidad, puede causar dao celular y muerte. Hay dos mecanismos por los cuales la
luz visible mata a las clulas, uno de ellos requiere de oxgeno molecular y ambos
requieren de la presencia en la clula de foto sensibilizadores, los cuales son sustancias
que absorben luz. Cuando esas sustancias absorben luz son activadas y llevadas a un
nivel de mayor energa, en algunos casos retornan al estado normal emitiendo luz, pero
tambin puede ocurrir que le transfieran la energa a otro componente celular, esta
transferencia de energa ocasiona el dao en las clulas.