CULTIVO MICROBIANO

Estudiantes:

Angela D. Calfuanco Cid.

Jonatan Canihuan Llanao.

Docente:

Dr. Patricia E. Oliveira Martins.

Curso:

ICQ1103-Microbiologa Industrial.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 RESUMEN

El presente informe data del estudio terico de un cultivo de microorganismos, principalmente de

los hongos detallando su vida y morfologa a partir de las caractersticas macroscpicas.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 INTRODUCCIN

En el suelo alrededor de los 20 cm sobre la superficie del mismo se encuentra la mayor actividad de
seres vivos entre los que se encuentran los microorganismos. Estos se suelen encontrar como
microcolonias entre la materia orgnica (humus) y las partculas de la fraccin mineral. Este
ambiente heterogneo microbiano se compone principalmente por bacterias, actinomicetos,
hongos, algas, virus y protozoarios.

Como todo ser vivo los microorganismos cumplen funciones esenciales. Las algas utilizan la
fotosntesis (fijacin del carbono), las cianobacterias son las encargadas de la fijacin de nitrgeno.
De los productos que se general igual existen en mayor parte organismos que necesitan consumir
la fraccin mineral y orgnica como fuentes de nutrientes y energa.

Otros estn especializados en degradar la materia orgnica desechada de plantas y animales, dando
substancias simples, inorgnicas, que pueden ser devueltas a la atmsfera o arrastradas con las
aguas de drenaje o ser incorporadas al complejo arcilla-humus. Para obtener un buen resultado en
los suelos es necesario conocer su habitad y los hbitos alimenticios de sus huspedes para tener
un desarrollo favorable de los organismos.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

La colecta de hongos filamentosos se realiz de manera delicada, precisa e inocua en su mayora,
por ello se siguieron una serie de pasos y cuidados antes, durante y despus de la colecta, usando
los siguientes materiales ya esterilizados para ser utilizados en el campo de muestreo:

Materiales:

Pinzas.
Guantes.
Alcohol.
Papel adhesivo.
Frascos estriles.
Placas con medio MYSA/ANT.
Lpiz.

Para el desarrollo y crecimiento microbiano en un ambiente propicio se utiliz el medio MYSA agar
que es un medio heterogneo de polisacridos obtenido de la pared celular de varias especies de
algas y este medio de cultivo principalmente contena:

Figura 1: Composicin del medio MYSA agar.

Fuente: Patagonian Yeast

Se utiliz guantes esterilizados en todo momentos durante el procedimiento de la colecta que se

ubic en las orillas de la laguna artificial del recinto de la Universidad Catlica de Temuco ya que
esta presentaba una gran diversidad de vida y condiciones ptimas para el desarrollo de los
microorganismos.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 Figura 2: Orilla laguna campus San Juan Pablo II

Fuente: Propia.

Luego de que se obtuvieron las muestras desde el lugar sealado, se procedi a rotular los datos de
la localizacin anexada en la hoja Registro de Colecta al final de este informe.

La etapa de colecta continu con la ubicacin de las muestras en los laboratorios del recinto
universitario para que estas estuvieran en un ambiente a una temperatura de 25C para un
crecimiento prspero, ahora se puede crear una hiptesis del crecimiento bacteriano al decir que
se esperan obtener un crecimiento de microorganismos filamentosos, de micelios que son un
cumulo de hifas, ya que el prctico se encontraba basado en la observacin a dichos organismos
como tal.

La composicin de la gelatina, agar, o cultivo microbiano aliment al hongo o actinomicetos de

acuerdo a su especializacin ya que uno se encargaba de los polisacridos con difcil catabolizacin
como lo son la celulosa, hemicelulosa y lignina, y el otro se encargaba de aquellos polisacridos de
fcil catlisis como por ejemplo el almidn.

Se recordaron algunas citas para aclarecer el concepto de crecimiento propicio microbiano

basndose en el pensamiento de bilogos destacados.

Segn Wild (1992) explica que Un suelo naturalmente frtil es aqul en el que los organismos
edficos van liberando nutrientes inorgnicos, a partir de las reservas orgnicas, con velocidad
suficiente para mantener un crecimiento rpido de las plantas. La actividad biolgica de los suelos
es la resultante de las funciones fisiolgicas de los organismos y proporciona a las plantas superiores
un medio ambiente adecuado para su desarrollo. Pero la exigencia de los microorganismos edficos
en energa, elementos nutritivos, agua, temperaturas adecuadas y ausencia de condiciones nocivas
es similar a la de las plantas cultivadas (p.-)

Adems de:

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

Los hongos pueden representar el 70% de la poblacin microbiana y constituyen el segundo de los
dos grandes grupos de microorganismos del suelo. (Wild,1992,p-).

La cantidad de humus en el suelo depende de muchos factores, tales como la incorporacin de

nuevos restos orgnicos al suelo y su velocidad de oxidacin qumica y biolgica, la velocidad de
descomposicin de la materia orgnica existente ya en el suelo, la textura del suelo, la aireacin,
humedad y los factores climticos. (Jhonstom, 1991, p-)

Se recopilaron las ideas de estas importantes personas, pero an quedaban ciertas interrogantes
como Qu factores condicionan el crecimiento microbiano?, Qu tipo de microorganismo se
podra dar en estas condiciones y cul sera especficamente?

Se da por sabido que los microorganismos ms pequeos, as como las grandes se desarrollan bajo
factores extrnsecos e intrnsecos que regularan su tasa de proliferacin. Dentro de los factores
extrnsecos encontramos los factores ambientales, la temperatura, la disponibilidad de oxgeno y
otros gases ms, as como tambin la humedad relativa y por ltimo la presencia de otros
organismos.

Ya sabemos que hay una brecha de temperaturas donde los microorganismos pueden vivir y
reproducirse en plenitud y ms all de esta brecha prcticamente ninguno lo puede hacer, por ello
las temperaturas de almacenamiento deben ser ptimas y deben encontrarse dentro de un rango
que sea favorable para el tipo de clula que se quiera obtener y esto limitar de igual manera la
actividad microbiana que se quiera registrar.

A continuacin se puede visualizar en la Figura x la influencia de la temperatura en el interior de la

clula, de tal manera que puede afectar en su completo funcionamiento.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 Figura 3: Influencia de la temperatura en el interior de las clulas.

Pero bajo qu temperatura (factor de carcter extrnseco) se debera trabajar? Pues respondiendo
a la pregunta el cultivo microbiano se trabaj a 25C de temperatura para la obtencin de hongos
ya que si se hubiese variado la temperatura (y la aireacin o humedad relativa) este podra haber
sido desplazado o habitado en conjunto con otro tipo de organismo.

En la tabla siguiente se pueden apreciar las temperaturas ptimas de proliferacin para algunos
gneros de microorganismos:

Gnero Temperatura de Temperatura ptima Breve caracterstica

existencia de proliferacin.
Termfilos Sobre los 45C Entre los 55 a 65 C Microorganismos de
vida libre.

Mesfilos Entre los 20 a 45C Entre los 30-40C Incluye

microorganismos
patgenos y
comensales del
hombre y animales
de sangre caliente y
algunos de vida libre.

Psictrofos Bajo los 7C Entre los 20-30C Microorganismos de

vida libre.

Tabla 1: Temperaturas de existencia y ptimas para los distintos gneros de microorganismos.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

Por tantos se dedujo que los hongos y las levaduras tienden a ser menos termoflicos que las
bacterias ya que los hongos, como se puede apreciar en la Tabla 1 crecen a temperaturas de
refrigeracin por tanto los hongos que se encontraron en el cultivo microbiano eran del tipo
Psictrofos. Otro factor extrnseco es la presencia o ms bien disponibilidad de aire ya que este
clasificara a los tipos de microorganismo en un medio con diferentes concentraciones:

Tipo de microorganismo Oxgeno atmosfrico y otros gases.

Aerbicos Requieren oxgeno libre.
Anaerbicos En ausencia de oxgeno pueden prosperar.
Facultativos En ausencia y presencia de oxgeno.

Tabla 2: Tipos de microorganismos.

Por ltimo la humedad relativa ptima de los hongos es de 85-90% y este factor vara con la
temperatura.

Los factores intrnsecos son aquellos que afectan el crecimiento microbiano y son:

Actividad acuosa.
pH.
Potencial RedOx.
Contenido de nutrientes.
Sustancias inhibidoras.
Estructuras biolgicas.

Pero como el prctico slo tena un plazo de 6 das para la observacin especficamente del cultivo
no se podan verificar estos factores para haber logrado un estudio ms detallado de este.

Con la pequea introduccin que se dio a conocer sobre las posibles condiciones dentro de la placa
de cultivo se procede a tipificar y observar:

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

El cultivo microbiano se llev a cabo en los laboratorios del recinto como ya habamos dicho, dentro
de las estufas de laboratorios, que son aquellos equipos que aportan calor al cultivo y propician su
crecimiento.

Figura 4: Secadora de laboratorio.

Fuente: Google chrome.

Pero antes anteriormente a este procedimiento se recogieron datos de ubicacin y localizacin

mediante la aplicacin Altimeter/GPS donde se tom una captura de dicho tiempo exacto:

Figura 5: Datos fsicos del lugar de colecta.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 Tabla de colecta:

FOTOGRAFA/DIBUJO FECHA OBSERVACIN

El primer da no hubo avistamiento
Martes 21 de macroscpico de los
Noviembre. microorganismos ya que estos
fueron ubicados en el secador de
laboratorios y abandonados para su
posterior proliferacin a una
temperatura de 25C.
Luego de 24 horas no se puede
Mircoles 22 apreciar a simple vista el crecimiento
de Noviembre. de los microorganismos
Imagen extrada de google
Chrome por efectos de
prdida de la foto.

Pasadas las 40 horas (1,6 das) se

Jueves 23 de apreci de mejor manera el cultivo
Noviembre. microbiano y se pens que
microscpicamente estaba
ocurriendo esto en la jalea.
Imagen tomada de un cultivo
microbiano de internet y editada con
ayuda del programa de M.Word.
Formacin de esporas y comienza a
Viernes 24 de tomar color la jalea.
Noviembre.

Aqu se pudo apreciar la formacin

Lunes 27 de de tubos filamentosos y la formacin
Noviembre. de un color amarillento de la jalea
que denota la formacin de colonias.

Esta imagen esta fue tomada un da

Martes 28 de antes de la fecha y se aprecia una
Noviembre. fractura en la jalea que contiene los
nutrientes, debido (posiblemente)
por las altas temperaturas (ptimas)
que seco ms rpidamente a la
muestra. Otra razn puedo haber
sido el consumo de la humedad.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

Se obtuvo un registro de los das donde se pudo apreciar y comprobar la proliferacin de la
formacin de fibras blanquecinas procedente de las hifas.

Se esperaba encontrar hongos o actinomicetos (bacterias) en el Petri, pero eludiendo el pH de

trabajo y los antibiticos presentes se quiso profundizar en mayor manera y clasificar de manera
ms detallada, por ejemplo los actinomicetos son un grupo heterogneo de bacterias filamentosas
parecidas superficialmente a los hongos, ya que presentan un micelo ramificado que forma hifas
(morfologa), un tipo de reproduccin y crecimiento en medios de cultivo slidos y lquidos similares
adems de ser los ms abundantes en dichas superficies abarcando el 64% de la biomasa
bacteriana, estos procariontes son sensibles a algunos antibiticos como la penincilina ya que la
pared bacteriana contiene peptidoglucano (base de la diferencia con los hongos filamentosos
eucariontes, hongo en forma de rayo de sol), peptidoglicano o murena que es un copolmero muy
resistente que protege a las bacterias de una ruptura osmtica en ambientes acuticos.

Figura 6: Estructura molecular del pptidoglicano.

Fuente: Wikipedia.

Estas bacterias del tipo Gram positivas englobadas dentro del grupo de los Esquizomicetos son seres
aerobios estrictos que crecen a la temperatura trabajada (25C) y a un pH alcalino del orden 9
(sabiendo que la placa de cultivo estaba en condiciones de un pH bsico de 6,8).

Para caracterizar de mejor manera a las bacterias Gram positiva con respecto a las Gram negativa
se adjunta una comparacin en la Figura 7:

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 Figura 7: Estructura compleja de la pared celular de Eubacterias.

Fuente: Google Chrome.

Se aprecia que la estructura molecular del peptidoglucano es levemente distinta en las Gram, pero
en ambos casos se encuentra formada por cadenas lineales de polisacridos formadas por residuos,
(N-acetilglucosamina y N-acetilmurnico) uno de estos unido a un tetrapptido (segmento de 4
aminocidos) que se encuentra conectado por puentes de pentaglicina, generndose as una
estructura rgida que rodea perimetralmente la clula caracterizando al peptidoglicano como una
molcula macro.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 Figura 8: Uniones, enlaces y puentes del pptidoglicano.

Fuente: Google Chrome.

Como ya se mencion anteriormente la accin de antibiticos como la penincilina (as como la

cefalosporina) impiden la sntesis de esta macromolcula y por tanto de la pared bacteriana
fijndonos de manera ms detallada se dedujo que la gelatina de la placa Petri contiene
Clorotetraciclina (Crorotetraciclina) al 0,5 % en p/v que es un antibitico de la familia de las
tetraciclinas y fue la primera en ser descubierta en la poca de 1945, pero porqu nos referimos a
este frmaco ahora? Pues nos referimos a l ya que su importancia radica en la manera que acta
sobre los microorganismos patgenos y queriendo tambin destacar que no todos los
actinomicetos son patgenos.

Segn datos extrados del artculo Metabolitos secundarios de importancia farmacutica

producidos por actinomicetos que se refiere a aquellos microorganismos que son productores de
frmacos , especficamente de cepas aisladas de Streptomyces, como productores de compuestos
inhibidores, con excepcin de la penincilina, la cefalosporina y otros menores, del crecimiento de
bacterias patgenas (especialmente de las Gram positivas).

Los antibiticos se agrupan en familiar y se distinguen por poseer una estructura similar
compartiendo el mismo mecanismo de accin microbiano.

Figura 9: Antibitico producido por actinomicetos de acuerdo a su estructura qumica.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

Este compuesto acta inhibiendo la sntesis de protenas a nivel ribosomal, actuando sobre la
subunidad 30S, a nivel clnico actan las oxitetraciclinas y las tetraciclinas (producidas por
Streptomyces rimosus y S. aureofaciens)

Por tanto se corrigi la seleccin del microorganismo proliferante en el cultivo, sabiendo que su
estructura como tal sera inhibida al estar formada bsicamente por cadenas lineales de pptidos y
sabiendo adems que estas necesitan proliferar en un ambiente con un pH de 9 y con una humedad
relativa superior a la de los hongos.

Finalmente descartando a los actinomicetos, el hongo filamentoso eucarionte que se produjo en el

cultivo microbiano presentaba ramificaciones de rayos de sol de mayor dimetro que las
producidas por una bacteria y la presencia de esporas; estos hongos pertenecen al Reino FUNGI y
carecen de clorofila son pluricelulares y unicelulares (levaduras), tpicamente inmviles y poseen
una nutricin hetertrofa con reproduccin asexuada y sexuada dependiendo de su tipo.

El hongo filamentoso est formado por una serie de ramas tubulares llamados hifas como se haba
mencionado en las observaciones, y desde ah forman el micelio unindose por el tronco central, se
reproducen por la formacin de esporas que son unos pigmentos que le otorgan el color al hongo.
Su crecimiento es rpido y poseen reservorios naturales en las plantas, animales y vegetales
muertos, adems de crecer a una temperatura de 25-30C presentar resistencia al medio ambiente.

La observacin que se realiz prcticamente durante una semana pudo confirmar lo descrito por
esta familia de hongos filamentosos caracterizando la colonia o micelo que habitaba en el Petri,
pero como slo requera observacin no se pudo confirmar si pertenecan al tipo vegetativo o
reproductivo, gracias a sus caractersticas morfolgicas se pude apreciar su velocidad de
crecimiento que va desde 1 a 3 semanas y su aspecto fue un tanto difuso ya que no se pude
esclarecer si perteneca al tipo algodonosas (Mucor, Rhyzopus, Trichophytonrubrus, Alternaria),
lanosas (Microsporumcanis), pulvurentas (T,mentagrophytes, M.gypseum) o ceras ( T.shoeleinii),
pero s se descartaron a las vellosas y aterciopeladas ya que requeran una humedad relativa mayor
a la presentada.

Se clasifico en tono beige o amarillento (Aspergillus) y se present la difusin de los pigmentos que
es caracterstico de ellos que se observaba al reverso de la colonia.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

 CONCLUSIN

Finalmente se puede concluir que el crecimiento de un cultivo microbiano se realiza durante un

perodo breve de tiempo y va de la mano con las condiciones extrnsecas e intrnsecas con las que
se trabaje la placa Petri y puede datar de una serie de caractersticas al investigador que le pueden
ser de un uso favorable dependiendo de la investigacin que se quiera llevar, adems de destacar
que el hongo clasificado pertenece al menos del 5 % de los conocidos en el mundo por lo que es
posiblemente que se trate de uno fuera conocido de su rango si es que este se hubiese trabajo de
manera concisa y precisa.

Destacar tambin que el estudio de los microorganismos ha ayudado al desarrollo de la vida humana
en el rea de la salud ya que estos participan en la produccin de diferentes frmacos que inhiben
como tal sus funciones y dotando al ser humano de una capacidad ms favorable que ellos mismos
(bacterias, hongos y levaduras), por tanto podramos sumarlos, al igual que los mrtires de cuatro
patas, las ratas en los laboratorios.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.

REFERENCIA

https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-microbiologia/indice/influencia-del-
medio-ambiente/temperatura

https://es.slideshare.net/angelica0071/actinomicetos-39073002

Curso biomolecular:

http://www.ehu.eus/biomoleculas/hc/sugar35b.htm (Imagen Gram positiva)

Julca-Otiniano, Alberto, Meneses-Florin, Liliana, Blas-Sevillano, Ral, & Bello-Amez, Segundo.

(2006). LA MATERIA ORGNICA, IMPORTANCIA Y EXPERIENCIA DE SU USO EN LA
AGRICULTURA. Idesia (Arica), 24(1), 49-61.

Actinomicetos:

https://biotecnologia.fundaciontelefonica.com/2010/06/18/los-actinomicetos-como-fuente-de-
productos-de-interes-biotecnologico/

Artculo: Metabolitos secundarios de importancia farmacutica producidos por actinomicetos (

Zahaed Evangelista-Martnez* y Anglica Moreno-Enrquez).

MICROORGANISMOS DEL SUELO Y BIOFERTILIZACION.

Crops for Better Soil Life 10 ENV ES 471 Apuntes elaborados por: Asociacin Vida Sana.

ANNIMO, 1988. Manual de fertilidad de suelos. Potash & Phosphate Institute. Georgia. USA, 85
p.

07 de Diciembre del 2017, Temuco.