UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONA PERUANA

FACULTAD DE FARMACIA Y
BIOQUMICA

DETERMINACIN DE LOS COMPUESTOS QUMICOS CONSTITUYENTES

DEL ACEITE ESENCIAL DE RIZOMA DE Cyperus articulatus (piri-piri de
vbora) POR CROMATOGRAFA DE GASES - ESPECTROMETRA DE MASAS
(HRGC-MS). IQUITOS 2014.

TESIS
PARA OBTAR EL TITULO PROFESIONAL DE:
QUMICO FARMACETICO

PRESENTADO POR:

Bach. ARMAS RENGIFO, ROGER DANTE

Bach. RETEGUI TUESTA, DEIVI

ASESOR:
Ing. Cleto Jara Herrera

CO-ASESOR:
Ing. Julio Arce Hidalgo

IQUITOS PER
2014
1
 Determinacin de los compuestos qumicos constituyentes del aceite esencial de
rizoma de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) por cromatografa de gases-
espectrometra de masas (HRGC-MS). Iquitos 2014.
Bach. Armas Rengifo, Dante Roger; Bach. Retegui Tuesta, Deivi

RESUMEN
De los rizomas de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) sometidos a extraccin con
ter de petrleo (30 60 BP) se ha obtenido aceite esencial (concreta) que fue
analizado en un cromatgrafo de gases de alta resolucin acoplado a un espectrmetro
de masas (HRGC-MS) y se encontr 77 componentes de los cuales 62 son
sesquiterpenoides (80.52%) y 15 monoterpenoides (19.48%)
Sin dejar de citar tres esqueletos irregulares el C13H20O (0.87%), el C14H26O2 (0.877%)
y el C14H22O (1.05%), respectivamente; que estn ms cercanos a los sesquiterpenos
que a los monoterpenos.
El componente ms abundante es un sesquiterpenoide cuya frmula es C 15H22O2; se
encuentra en un 2.0%; tambin estn presentes otros dos sesquiterpenoides
significativos: culmorina, que representa el 1.89%, y corimbolona, el 1.88%.
Los monoterpenos ms abundantes son: Un componente desconocido de frmula
C10H10O2 y 12 componentes conocidos: carvona (0.78%), Cis-carveol (0.76%),
verbenona (0.757%), mirtenal (0.747%) mirtenol (0.746%), - terpineol (0.745%),
timol (0.74%), 6,6-dimetil-2-metilen-biciclo-[2,2,1]3-heptanona (0.71%), 2-metilen-
6,6-dimetil-biciclo-[3,2,0] 3-heptanol (0.70%), -canfolenal (0.67%), -pineno
(0.54%) y -pineno (0.49%).
Por la mayor presencia de sesquiterpenoides, el aceite esencial tiene mayor aptitud
como fijador de aromas.El carcter que imprime el olor sui generis al aceite esencial
es debido a los 15 monoterpenos que conforman el coctel de olores.
Palabras claves: Cyperus articulatus (piri-piri de vbora), aceite esencial,
Cromatografo de alta resolucin acoplado a un espectrmetro de gases (HRGC-MS),
componentes mono - sesquiterpenos.

2
 Determination of the chemical constitutive compounds of the essential oil from
Rizoms of Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) for Gas Chromatography-Mass
Spectrometry (HRGC-MS). Iquitos 2014.

Bach. Armas Rengifo, Dante Roger; Bach. Retegui Tuesta, Deivi

ABSTRACT

In short, of the Rizoms from Cyperus articulatus (piri-piri de vbora),is submitted to

extraction with petroleum ter (30 60 BP) is got an essential oil (concrete) which it
wast analized in a High Resolution Gas Cromatography- Mass spectrometry (HRGC-
MS) and it found 77 compounds which 62 are sesquiterpens (80.52%) and 15
monoterpens(19.48%).

Beside this, there are three irregular skeletors; the C13H20O (0.87%), the C14H22O2
(1.05%), the C14H26O2 (0.877%) and they are nearest the sesquiterpens than the
monoterperns.

The compound is more increase than others is called sesquiterpenoides whose

formula is C15 H22 O2, it finds a 2.0% and it has two others significative
sesquiterpens.

They are : the culmarina is a 1.89%, and the corimbolona is a 1.88%, in the
monoterpens compound are : a compound unknowns whose formula is C 10H10O2 and
12 compounds know; they are: carvona (0.78%), Cis-carveol (0.76%), verbenona
(0.757%), mirtenal (0.747%), mirtenol (0.746%), - terpineol (0.745%), timol
(0.74%), 6,6 dimetil-2 metilen-biciclo [2,2,1]-3-heptanona (0.71%), 2-metilen-6,6-
dimetil-biciclo[3,2,0] 3-heptanol (0.70%), -confelenol (0.67%), -pineno (0.54%) y
-pineno (0.49%).

Finally the sesquiterpens have presence major so the essential oil get also a major
aptitude as ficed of the fragances or perfums.

The mean character sui generis of the fragances to essential oil because its 15
monoterpens than conform a coctel of fragrance.

Key words: Cyperus articulatus (piri-piri de vbora), chemical constitutive

compounds, essential oil, High resolution Gas Chromatoraphy-Mass
Spectrometry.

3
 DEDICATORIA
ROGER D. ARMAS RENGIFO
A Dios por darme sabidura y Fortaleza para
afrontar los problemas y obstculos que se
presentan en la vida y as mantenerme firme en
mis ideales.
A mis padres Eliseo y Flor por ensearme los
valores de la vida, por ser la base de mi
formacin como persona de bien, con principios,
metas y anhelos de superacin y por todo lo que
me dieron en la vida.
A mi hija Roco y al que estar por venir por
ser el motivo de seguir luchando y dar cada
da ms de m, y por ser la fuente de mi
felicidad.
A mis hermanos por ensearme el verdadero
sentimiento de compaerismo y Amistad y por
ejemplos en mi vida y todas las personas que
estuvieron conmigo en los momentos difciles
y a los que hoy comparten conmigo mi
felicidad.
DEIVI REATEGUI TUESTA
A DIOS quin supo guiarme por el buen
camino, darme fuerzas para seguir adelante y
no desmayar en los problemas que se
presentaban, ensendome a encarar las
adversidades sin perder nunca la dignidad ni
desfallecer en el intento.
A mi familia por su apoyo incondicional y
estar conmigo en las buenas y en las malas; y
en especial a mis padres Luis y Estefania por
hacer de mi un hombre de bien.
4
5
 AGRADECIMIENTO

1. Al Ing. Julio Arce Hidalgo y al Ing. Cleto Jara Herrera por motivarnos a realizar
este proyecto de investigacin e ilustrarnos en el rea del que trata esta tesis y
brindarnos sus conocimientos. Para ellos nuestra sincera consideracin y muestra
de respeto y agradecimiento.

2. A la facultad de Farmacia y Bioqumica, y a nuestros maestros que nos

impartieron sus conocimientos para formarnos como excelentes profesionales.

3. Y a todas aquellas personas que nos brindaron su apoyo para hacer posible el
desarrollo de esta tesis.

6
 INDICE DE CONTENIDO

ACTA DE SUSTENTACION
RESUMEN
DEDICATORIAS
AGRADECIMIENTOS
CAPTULO I
1.1.- INTRODUCCION 13
1.2.-FORMULACION DEL PROBLEMA 16
1.3.-OBJETIVOS 17
1.3.1.-GENERAL 17
1.3.2.-ESPECIFICOS 17
CAPITULO II
2.1.- MARCO TEORICO 20
2.1.1.-ANTECEDENTENTES 20
2.1.2.- RESEA HISTORICA 22
2.1.3.- ESTUDIO DE LA PLANTA 26
2.1.3.1.- NOMBRE VULGARES 26
2.1.3.2.- NOMBRE CIENTIFICO 26
2.1.3.3.- CLASIFICACION BOTANICA 27
2.1.3.4.- ORIGEN Y DISTRIBUCION GEOGRAFICA 27
2.1.3.4.1.- DISTRIBUCIN Y ECOLOGIA 27
2.1.3.5.- USOS EN MEDICINA TRADICIONAL 28
2.1.3.6.- COMPONENTES QUIMICOS EN CYPERACEAS 28
2.1.3.7.- ACTIVIDAD FARMACOLOGICA 29
2.1.4.- ACEITE ESENCIAL 29
2.1.4.1.-ORIGEN DE LOS ACEITES ESENCIALES 30
2.1.4.2.- ESTRUCTURA QUIMICA 31
2.1.4.3.- PROPIEDADES DE LOS ACEITES ESENCIALES 32
2.1.4.3.1.- PROPIEDADES FISICOQUIMICAS 32
2.1.4.3.2.- QUIMIORECEPCION MOLECULAR DEL OLOR DE LOS ACEITES
ESENCIALES 32
2.1.4.3.3- PROPIEDADES DEL OLOR 34
2.1.4.4.-APLICACIONES DE LOS ACEITES ESENCIALES 35
2.1.4.5.- PRECAUCIONES 36

7
 2.1.4.6.- CONSERVACION 36
2.1.4.7.- ACEITES ESENCIALES DE CYPERACEAS 37
2.1.4.8.- BIOGNESIS DE LOS ACEITES DE LA FAMILIA CYPERACEA 37
2.1.4.8.1.- BIOGENESIS DE MONOTERPENOS 37
2.1.4.8.2.- BIOGNESIS DE LOS SESQUITERPENOS 41
2.1.4.9.- TERMINOLOGA UTILIZADA SEGN EL MODO PARA OBTENER UN ACEITE
ESENCIAL 42
2.1.5.- CROMATOGRAFIA DE GASES 43
2.1.6.- ESPECTROMETRIA DE MASAS 43
2.1.7.- CROMATGRAFO DE GASES-ESPECTRMETRO DE MASAS (GC-MS) 45
2.1.7.1.- DESCRIPCIN 45
2.1.8.- METODOS DE OBTENCIN DE LOS ACEITES ESENCIALES 46
2.1.8.1.-OBTENCIN DE ACEITES ESENCIALES POR ARRASTRE DE VAPOR
DE AGUA 46
2.1.8.2.- EXTRACCIN POR EXPRESIN O ESTRUJADO DEL PERICARPIO 47
2.1.8.3.- OBTENCIN DEL ACEITE ESENCIAL POR FERMENTACIN SEGUIDA POR
DESTILACIN 48
2.1.8.4.- OBTENCIN DE ACEITES ESENCIALES, CONCRETAS Y RESINOIDES 48
2.1.8.4.1.- CON SOLVENTES 48
2.1.8.4.2.- OBTENCIN CON GASES LICUADOS O FLUIDOS SUPERCRTICOS 49
2.1.8.4.3.- OBTENCIN USANDO ACEITES Y GRASAS 49
2.1.8.5.- PLANTEAMIENTO DEL MTODO PARA EL AISLAMIENTO DEL ACEITE
ESENCIAL DE RIZOMA DE Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) 50
2.1.9.- METODOS DE IDENTIFICACIN DE LOS COMPONENTES PRESENTES
EN LOS ACEITES ESENCIALES 51

2.1.9.1.- POR CROMATOGRAFA DE CAPA FINA (en ingls THIN LAYER

CHROMATOGRAPHY O TLC) 51
2.1.9.2.- CROMATOGRAFA HPLC (HIGH PERFOMANCE LIQUID
CHROMATHOGRAPHY) = CROMATOGRAFA LIQUIDA DE ALTA PRESION 54

2.1.9.3. POR CROMATOGRAFA DE GASES DE ALTA RESOLUCIN ACOPLADO

CON UN ESPECTMETRO DE MASA (HRGC-MS) 54

8
 2.1.9.4.-ELECCIN DEL MTODO PARA EL ANLISIS DE LOS COMPONENTES
DEL ACEITE ESENCIAL DE RIZOMA DE Cyperus articulatus (PIRI-PIRI DE
VBORA) 56
2.2.- VARIABLES OPERACIONALES 57
2.2.1.- VARIABLE 57
2.2.1.1.- VARIABLE INDEPENDIENTE 57
2.2.1.2.- VARIABLE DEPENDIENTE 57
2.2.2- OPERACIONALIZACION DE VARIABLES 58
2.2.2.1.- VARIABLE INDEPENDIENTE 58
2.2.2.2- VARIABLE DEPENDIENTE 59

2.3.- HIPOTESIS 60

CAPITULO III
3.1.- METODOLOGA 62
3.1.1.- TIPO DE INVESTIGACION 62
3.1.2.- DISEO EXPERIMENTAL DE LA INVESTIGACIN 64

3.2.- POBLACIN Y MUESTRA 65

3.2.1.- POBLACIN 65
3.2.2.- MUESTRA 65
3.2.2.1.- CRITERIOS DE INCLUSIN 65
3.2.2.2.- CRITERIOS DE EXCLUSIN 65

3.3.- PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTAL: ETAPAS 66

3.3.1.- RECOLECCIN DE MATERIAL VEGETAL 66
3.3.2.- PROCESAMIENTO EN EL LABORATORIO 66
3.3.2.1.- LAVADO 66
3.3.2.2.- SECADO SOBRE PAPEL SECANTE PARA ELIMINAR EL
EXCESO DE HUMEDAD 66
3.3.2.3.- MOLIENDA 66
3.3.2.4.- EXTRACCIN 66
3.3.2.5.- DESTILACIN 66
3.3.2.6.- SECADO 67
3.3.2.7.- FILTRADO 67

9
 3.3.2.8.- DETERMINACIN DE LA DENSIDAD 67
3.3.2.9.-EVALUACIN DEL RENDIMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL 68

3.4.- EQUIPOS, METODOS Y REACTIVOS UTILIZADOS 69

3.4.1.- INSTRUMENTOS Y EQUIPOS 69

3.4.2.- MATERIAL DE VIDRIO 69

3.4.3.- MATERIAL DE PLSTICO 69

3.4.4.- MATERIAL DE METAL 69

3.4.5.- MATERIAL DE FILTRACIN 70

3.4.6.- REACTIVOS 70

3.5.- EVALUACIN DE LA ESTRUCTURA DE CADA COMPONENTE 71

3.5.1.- DENSIDAD DEL ACEITE ESENCIAL 71

3.5.2.- EN EL CROMATOGRAFO DE GASES DE ALTA RESOLUCIN

ACOPLADO A UN ESPECTRMETRO DE MASAS (HRGC-MS) 71

CAPTULO IV

4.1.- RESULTADOS 73

4.1.1.- RESULTADO DE LA DENSIDAD Y DEL PORCENTAJE DE

RENDIMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL 73
4.1.2.-RESULTADO DE LAS PRUEBAS CROMATOGRFICAS 73

4.2.- DISCUSIONES 78

4.3.- CONCLUSIONES 79

4.4.- RECOMENDACIONES 80

4.5.- REFERENCIA BIBLIOGRAFICA 81

10
 INDICE DE FIGURAS

FIGURA. N 01.- ESTRUCTURA DEL ISOPRENO 30

FIGURA. N 02.- RUTA DE FORMACIN DE LOS MONOTERPENOS POR LA

RUTA DEL CIDO MEVALNICO 38

FIGURA. N 03.- RUTA DE FORMACIN DE LOS SESQUITERPENOS: RUTA

GERANIL PIROFOSFATO E ISOPENTANIL PIROFOSFATO 41

FIGURA. N 04.- OBTENCIN DEL ISOTIOCIANATO DE ALILO FERMENTACIN

SEGUIDA POR DESTILACIN 48

FIGURA. N 05.- FRAGMENTOS DE LA MOLCULA DE GERANIOL CUANDO

PASA POR UN ESPECTRMETRO DE MASA 55

FIGURA. N 06.- FICHA DE IDENTIFICACION DE LA ESPECIE VEGETAL 85

FIGURA. N 07.- DIAGRAMA DE BLOQUE DEL PROCESO 86

FIGURA. N 08.- SUPERFICIE DE TERRENO DONDE CRECE ESPONTNEAMENTE

LA PLANTA DE ESTUDIO CYPERUS ARTICULATUS 87

FIGURA. N 09.- RIZOMAS DE CYPERU ARTICULATUS DESPUS DE HABER

SIDO LAVADO 88

FIGURA. N 10.- CYPERUS ARTICULATUS RECOLECTADO PARA LA

IDENTIFICACIN BOTANICA 89

FIGURA. N 11.- MOLIENDO LOS RIZOMAS DE CYPERUS ARTICULATUS 90

FIGURA. N 12.- AGREGANDO ALCOHOL A LA MUESTRA MOLIDA 90

FIGURA. N 13.- AGREGANDO EL TER DE PETRLEO A LA MUESTRA 91

FIGURA. N 14.- VISTA DE LAS DOS FASE ; FASE SUPERIOR ETERICA, FASE INFERIOR
MEZCLA ALCOHO AGUA 91

FIGURA. N 15.- SEPARACION LA FASE ETERICA DE LA ALCOHLICA ACUOSA 92

FIGURA. N 16.- SEPARACION DE SULFATO DE SODIO ANHIDRO DEL. ACEITE

ESENCIAL 92

FIGURA. N17.- PREPARANDO EL PICNOMETRO PARA SU SER PESADO VACO 93

11
FIGURA.N18.- SECANDO EL ACITE ESENCIAL QUE SE DERRAMO AL MOMENTO DE
LLENAR CON ESTE EL PICNO METRO 93

FIGURA.N19.- PESANDO EL PICNMETRO MAS EL ACEITE ESENCIAL 94

FIGURA. N 20.- CROMATOGRAMA GC-MS DEL ACEITE ESENCIAL DE PIRI-PIRI(SPP) 95

FIGURA. N21.- INFORME DE RESULTADOS SOBRE LA COMPOSICIN QUMICA DE

RIZOMA DE CYPERUS ARTICULATUS POR CROMATOGRAFIA SE GASES
ACOPLADA A ESPECTROMETRI DE MASA (UNIVERSIDAD PERUANA
CAYETANO HEREDIA) 97

INDICE DE TABLAS

TABLA N01.- IDENTIFICACIN DE MONOTERPENOS SOBRE PLACAS DE

CROMATOGRAFA DE CAPA FINA 53

TABLA N 02.- COMPUESTOS DEL ACEITE ESENCIAL DE CYPERUS ARTICULATUS

AL 100% DE SU COMPOSICIN TOTAL. 74

12
Captulo I

13
 1.1.-INTRODUCCION

Los aceites esenciales por ser sustancias capaces de producir en general una impresin
agradable en el sentido del olfato constituyen la materia prima bsica para la
elaboracin de perfumes, artculos de tocador, productos farmacuticos y actualmente
para ser utilizados en aromaterapia una nueva prctica mdica para curar ciertas
enfermedades aplicando olores que actan en el hipotlamo y en el sistema lmbico
(7).
En el mundo de la industria perfumstica son conocidas especies vegetales tales como:
Ambretta, anglica, estragn, albahaca, laurel, bergamota, alcaravea, apio, calamus,
canfor, chamomilla, salvia, clavo de olor, blsamo de copaiba, culantro, eneldo,
eucalipto, geranio, jengibre, hinojo, hierbabuena, jazmn del Cabo, lavanda, limn,
mandarina, majarona, patchouli, rosa, naranja, vainilla, menta, romero, (4)(17).
En la actualidad el desarrollo de la industria perfumstica moderna sigue los mismos
pasos que la industria farmacutica: invierte grandes cantidades de dinero en afn de
descubrir nuevas materias primas, luego de aislar el aceite esencial por destilacin y
determinar sus componentes por HRGC-MS, cuando se identifican nuevas molculas
se busca sintetizarlo o imitar el nuevo componente, algo que no siempre es posible
lograrlo pues a veces es una imitacin de los centros activos de la estructura
precursora que tratan de imitar al componente natural, aunque difcilmente lo
consiguen dada la complejidad de la estructura molecular. El propsito de sintetizar la
nueva molcula es debido a que la materia prima de la que se obtuvo existe en
cantidad limitadsima, la planta no tiene mucha biomasa y no existe materia prima
suficiente para obtener el aceite esencial en la cantidad deseada, capaz de satisfacer la
demanda industrial insatisfecha. La bsqueda de un nuevo olor constituye un triunfo
porque no es fcil obtener un olor impactante que tenga capacidad de fijacin para
aglutinar y condensar todo el conjunto de olores para darle carcter, intensidad y
persistencia a todo perfume, propiedades que caracterizan a un aroma de calidad y
potencia.

14
En la Amazona peruana existen especies vegetales que no han sido estudiadas por la
industria perfumstica, por eso no estn consideradas entre las plantas mundialmente
conocidas, catalogadas y que ya tienen precios de oferta; sin embargo Cyperus
articulatus a pesar de que muestra olores exticos desconocidos no es una planta que
tenga importancia para la industria perfumistica mundial.

Esta es la razn por la que se eligi Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) para el
presente estudio, porque teniendo las condiciones para poder ser considerada por la
industria perfumistica es una planta marginal, ms bien considerada como una mala
hierba (maleza).

El rizoma del Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) posee varios aromas que le dan
las caractersticas fsicas distintivas de su carcter, persistencia e intensidad que
confieren a su contenido distincin y clase, por poseer estructuras qumicas
precursoras nuevas que le imprimen su olor sui-gneris.

Por eso nuestro trabajo de investigacin estuvo orientado en buscar el mtodo ms

adecuado para aislar los compuestos qumicos aromticos. Se ha obviado el mtodo
comn de destilacin por arrastre de vapor, el mtodo de expresin y se ha optado por
aislarlo en forma de concreta usando el mtodo de particin de fases para lo cual se ha
llevado a molienda fina los rizomas y luego saturarlos con alcohol se ha extrado con
ter de petrleo del medio acuoso, varias extracciones con ter de petrleo nos ha
permitido agotar el aceite esencial contenida en la fase acuosa, finalmente se reunieron
los extractos etricos, se destil, se quit el exceso de agua con hidrxido de sodio
anhidro, se filtr y se obtuvo el aceite esencial en forma de concreta libre de
impurezas, para determinar los componentes que conforman este aceite esencial se ha
realizado un anlisis utilizando cromatografa de gases de alta resolucin que tiene
como detector un espectrmetro de masas (HRGC - MS) que constituye el mtodo
ms moderno y de alta confiabilidad, que permiti determinar 81 componentes del que

15
se excluye el diterpeno C23H32O por que no es un componente aromtico adems se ha
logrado conocer conocer 62 sequiterpenos y 15 monoterpenos la mayor presencia de
sesquiterpenos permite afirmar que el aceite esencial tiene excelentes propiedades
como fijador de olores, y los 15 monoterpenos son los que le dan las propiedades
fsicas de carcter, intensidad y persistencia.
Lo que debemos sealar es que en la Amazona an existen materias primas que
ofrecen nuevos aromas, y que tienen alta capacidad de reproductibilidad y que al
cultivrseles se dispondra de gran cantidad de biomasa; resultara importante
promocionar el cultivo de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora), que crece en
comunidades vegetales con suma facilidad en forma natural a nueve meses de su
sembro y se podra cosechar los rizomas para obtener el aceite esencial. Lo que
permitira la creacin de una nueva industria de aceites esenciales que podra surgir en
la Amazona si se incentiva su cultivo a escala industrial y se abre las condiciones para
la apertura de una demanda permanente.

De otro lado, esta investigacin permitir dar a conocer a la medicina alternativa como
la aromaterapia, nuevos olores capaces de influir en la conducta humana cuando
influencian en el sistema lmbico permitiendo la curacin del paciente.

16
 1.2- FORMULACIN DEL PROBLEMA.

Es posible la determinacin de los compuestos qumicos constituyentes del aceite

esencial de rizoma de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) por cromatografa de
gases - espectrometra de masas?

17
 1.3.- OBJETIVOS

1.3.1.-OBJETIVO GENERAL:

Determinar los compuestos qumicos constituyentes del aceite esencial de rizoma

de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) por cromatografa de gases y
espectrometra de masas. Iquitos, 2014.

1.3.2.- OBJETIVOS ESPECFICOS:

Aislar el aceite esencial de rizoma de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora).

Determinar los compuestos qumicos constituyentes del aceite esencial de

rizoma de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) por cromatografa de gases -
espectrometra de masas, usando el equipo HRGC-MS (HIGH RESOLUTION
GAS CHROMATOGRAPHY- MASS SPECTROMETRY).

18
Capitulo II

19
 2.1.- MARCO TERICO.
2.1.1.- ANTECEDENTES.

Masada Y. (1968). En su libro Analysis of essential oil by gas chromotography and

mass spectrometry no reporta ningn estudio con plantas de la familia Cyperaceae
(13).

Trease - Evans (1991). En su libro Farmacognosia seala que es necesaria una

mayor investigacin qumica de la familia Cyperaceae y cita otras fuentes
bibliogrficas donde da cuenta de , la existencia de compuestos tales como esencias
(aceites esenciales), taninos, cidos fenlicos, flavonoides y sesquisterpenoides, dentro
de estos ltimos pueden encontrarse componentes de aceites esenciales (22),
sealando por separado a los compuestos sesquiterpenoidales ya que muchos de ellos
son componentes de aceites esenciales que actan como fijadores del olor por ser
menos voltiles debido a que tienen una baja presin de vapor.

El Banco de Napralert. Natural Products Alert (2005)no reporta estudios de esta

planta en la amazonia peruana; si lo hubiera, fueran diferentes a la de los quimiotipos
de Brasil por efectos de la variacin inter-especfica (clima, geografa ), pero es
probable que varios de los componentes presentes en el estudio realizado en Brazil
estn tambin presentes en el aceite esencial del Cyperus articulatus de la amazona
peruana porque tienen caracteres, los mismos principios biogenticos similares , lo que
varan son los quimiotipos que aparecen como mecanismos adaptativos, es decir que
una misma planta en otro lugar elabora otras sustancias como respuesta a las
agresiones del medio: tipo de suelo, nutriente, plagas, etc.

20
Zoghbi Md GB et al (2006). En un artculo publicado en Journal of Essential Oil
Research bajo el ttulo Yield and chemical composition of the stems and rizomes of
Cyperus articulatus L cultivade in the Estado of Par Brazil, seala haber encontrado
en un aceite esencial de esta planta obtenida por destilacin por arrastre de vapor y
analizada por G C. y GC-MS, que el aceite esencial tiene los componentes siguientes:
-pineno (0.7 a 12%), mustakona (7.3 a 14.5%) y cariofileno xido (4.6 a 28.5%)
(26). No se conocen otros componentes del aceite esencial de Cyperus articulatus L.

21
2.1.2.- RESEA HISTRICA.

En el periodo comprendido entre los 4000 y 2000 aos a. c. concentraciones de tribus

formaron las grandes civilizaciones de Egipto y Mesopotamia (entre el rio Tigris y el
Eufrates, actualmente conocido como Iraq. En el valle de Huang Ho en china y en la
India de Mohenjo Daro y Harappo respectivamente, estas civilizaciones ya conocan el
vidrio, el alcohol y los aromas de las plantas.

El descubrimiento del vidrio por los mesopotamios y los egipcios, permiti envasar el
alcohol para difuminar el aroma, que permitieron el desarrollo de la perfumera que se
elaboraba a partir de los aceites voltiles que se obtenan de las plantas odorferas.
Confucio proclamaba que tanto el incienso como el perfume enmascaraban los malos
olores; hierbas, especias y flores fueron usadas para ahuyentar los espritus malignos
(17).
En Mesopotamia se utilizaban maderas fragantes para construir los templos y el fino
aroma de las esencias de cedro, mirto y clamo fueron ofrecidos en la plegaria a los
dioses (17).
El descubrimiento, explotacin y uso de los materiales utilizados para obtener
fragancias tuvo connotaciones religiosas.
La palabra perfume deriva del latn par fumm que significa por o a travs del
humor , tan igual que la prctica de quemar incienso durante las oraciones para
transportar a los cielos el alma para la contemplacin de los dioses.(17).
Por aquel entonces los perfumes solamente lo usaban el gran sacerdote y una gran
audiencia aunque todava muy selecta de faraones, emperadores, conquistadores y
monarcas acompaados de sus cortesanos y alquimistas; eran aquellas pocas en el
que el perfume se cubra bajo un manto hedonstico y espiritual.
Es en el siglo XX los avances de la qumica y la revolucin industrial, hace que el
perfume trascienda al resto de la humanidad y se popularice.

22
Las grandes religiones como el Islam, el budismo, el hinduismo, el shintoismo y
zoroastrismo, emplearan fragancias para afirmar la fe; de este modo la religin ha sido
la principal promotora en el fenmeno del incremento del uso del perfume a travs de
los siglos (17)
El uso de las fragancias se desarroll dentro de cuatro grandes centros de cultura:
China, India, Egipto y Mesopotamia, y ms tarde fue extendindose hacia las
sociedades sofisticadas de Grecia, Palestina, Roma, Persia y Arabia.
Los seis perodos del hombre aromtico en la cultura occidental empieza cuando los
cruzados traen a su retorno de oriente tres regalos mgicos. Durante el periodo
oscurantista; la gente de Europa no tena la costumbre de asearse adecuadamente y
olan mal. Los cruzados traan de oriente aromas delicados, alcohol destilado y vasos
refinados que fueron las manifestaciones fsicas de miles de aos de investigacin
alqumica.
Tanto el olor agradable como el solvente para propagarlo y una botella para
conservarlo constituan el regalo de los dioses, fueron aceptados con alegra en el
occidente medieval y su uso dio lugar a seis nuevos conceptos: Caballerosidad,
Alquimia, Descubrimiento, Revolucin, Imperio y Moda, con el que empieza el
progreso de Europa (17).
En aquel tiempo se desarrollaron las clsicas tcnicas de destilacin por arrastre de
vapor, de expresin, maceracin y enfluorage, para obtener los aceites esenciales;
actualmente, se les asla usando solventes orgnicos y el mtodo de fluidos
supercrticos (4).
A pesar de que los cruzados parecan ser los impecables enemigos del Islam, sin
embargo ellos admiraron buen nmero de las cosas propias de los musulmanes y traan
para los castillos hmedos y sombros de Europa, especies, utensilios para comer,
vasos de vidrio y fragancias, de suerte que se comenz a emplear perfumes en las
cortes. Naci tambin una prctica que se difundi y se hizo comn entre los
normandos: esparcir flores y regalos sobre el piso de los castillos y de las iglesias para
mantener el aire fragante y aceptable.

23
Pero la revolucin perfumstica apareci cuando se desarroll profesionalmente la
nueva industria perfumstica en 1708. Charles Lilly, un perfumero de Londres
introduce fragancias para ser absorbidas por la nariz, las que consistan de flores de
naranja, almizcle, civetona, violeta y mbar; mientras que en 1711, William Bayley
abri una perfumera con el nombre de Ye olde civet cat.
Dos famosas fragancias, la poudre de marchale (el polvo del mariscal (1670) y Eau de
Cologne (agua de colonia) (1710), crecieron en popularidad.
Napolen Bonaparte amaba los aromas, dicen que usaba sesenta botellas de agua de
colonia al mes; Josefina su esposa usaba una mezcla de olores y era pegada al aceite
de almizcle (17).
En 1865, S. Piesse en su libro: Odours, Fragancies and cosmestics desarrolla la
teora que relaciona los olores especficos con las notas en la escala musical y
establece una categora del espectro de los olores.
En 1890 Atkinson public el primer libro sobre tecnologa del perfume, esencialmente
relacionadas con las extracciones alcohlicas a partir de la concreta o aislndolos por
remocin criognica de grasas.
En 1861 la perfumera comienza a ser investigada en profundidad Guerlain crea el Eau
Imperiale (agua imperial), influenciado por la esposa de Napolen III; al final del siglo
se lleg a descubrir que esta fragancia era a base del nerol, la rosa, el geranio, el
sndalo, el almizcle y una cumarina sinttica (17).
En 1879 La Yardley export diferentes variedades de jabones olorosos a los EE.UU.,
mientras la compaa britnica Fragance Crown export 49 fragancias diferentes a 47
pases; de este modo empieza la masificacin de los perfumes en el mundo.
En 1882 se producen fragancias como Fougere Royale (Helecho Real), y en 1889 el
Jicky.
El Fougere Royale usaba una cumarina sinttica y el Jicky, ctricos (limn, bergamota
y mandarina), adems de toques de rosa, jazmn, vetiver, patchouli, cumarina,
benzona, civetona, mbar y vainilla.

24
La era de la moda empez en los primeros 20 aos del siglo XX, se desarroll un
grupo de finas fragancias como: violette Purper, (1907), Lorigan (1905), Lheure blue
(1912) y
English Lavander (1913) (17).

Actualmente se sintetizan olores naturales para incrementar el desarrollo de la

industria pefumistica como la incorporacin de las sustancias sintticas en la
perfumera, que recibi un espaldarazo en 1921 con la introduccin del famoso
perfume Chanel N 5 fabricado a partir de un aldehdo aliftico sinttico (2- metil-
undecanol) y en 1975 con la sntesis de jasmona y de metil-dihidro-jasmonato por
Stetter y Kuhlmann (17).

25
2.1.3.- ESTUDIO DE LA PLANTA

2.1.3.1- NOMBRES VULGARES: Pir pir, Pir-pir de vbora.

2.1.3.2- NOMBRE CIENTFICO: Cyperus articulatus L

.
Es una hierba rizomatosa con tallo usualmente redondo en la seccin transversal,
flores unisexuales, de inflorescencias arregladas como pequeas espigas, flores muy
poco vistosas con cubierta floral rudimentaria de 6 estambres; fruto seco con una sola
semilla.
Polen usualmente uniporato (una sola abertura en relacin a otras que tienen muchas
aberturas), en pseudomonadas (generalmente no tienen granos de polen simples
individuales sino formado por varios grano de polen con 3 microsporas degeneradas
y forman parte de la pared del polen), ovario spero con placentacin basal, un
vulo, 3 estilos elongados, con prdida de nectarias, siempre asociado con
persistentes cerdas en el perianto.
En el gnero Cyperus existen 600 especies, siendo los ms conocidos el C. papyrus
del que los egipcios fabricaban papel, C. rotundus, mala hierba para la agricultura, C.
esculentus del que se beneficia sus tubrculos ricos en aceites esenciales y azcar
(2); tambin, el C. articulatus, que tiene un olor dulce perfumado, parece un junco,
tiene tubrculos con aceites aromticos y es comn en lugares hmedos de los
trpicos de ambos hemisferios.

26
2.1.3.3.- CLASIFICACIN BOTNICA.
La clasificacin de esta planta se ha realizado en el Herbarium Amazonense de la
UNAP, por comparacin de exsicatas. La muestra responde a la siguiente
identificacin:

REINO : Plantae
DIVISIN : Magnoliophyta
CLASE : Liliopsidae
ORDEN : Cyperales
FAMILIA : Cyperaceae
GNERO : Cyperus
ESPECIE : Cyperus articulatus L

2.1.3.4.- ORIGEN Y DISTRIBUCIN GEOGRFICA.

Es una planta originaria de la Amazona. Es cosmopolita y se encuentra en Per,
Colombia Brasil, Guyana Francesa, as como en otras partes del mundo como
Filipina y china.

2.1.3.4.1.- DISTRIBUCIN Y ECOLOGA

Ampliamente distribuido en el mundo en sitios arcillosos pero preferentemente en
sitios arenosos. Aunque los rizomas son suaves, su desarrollo es menor en sitios
hmedos porque se pudren cuando son sometidos a exceso de humedad.
En el Per crece en la Selva Alta y con profusin en Selva Baja donde forma
comunidades vegetales actuando alelopticamente contra cultivos agrcolas por lo
que es considerado como mala hierba. Sharman Rashmi et al (2007) ha demostrado
que el extracto metanlico de esta produce inhibicin y crecimiento de semillas y
plantones de tomates (19).
Existen 600 gneros de Cyperus (9), muchos de ellos sin estudios previos desde el
punto de vista qumico y perfumstico.

27
2.1.3.5.-USOS EN MEDICINA TRADICIONAL

En la Amazona Peruana los nativos utilizan el extracto acuoso de los rizomas de

Cyperus articulatus para el control de la natalidad, para el tratamiento de mordedura
de serpientes venenosas, contra el clico de gases (6).
Los Secoyas maceran los rizomas con agua para la fiebre y para calmar el dolor de
cabeza; tambin se le asigna propiedades abortivas.
Con los rizomas de piri-piri de vbora hervidas se prepara un extracto acuoso que se
mezcla con vino dulce, beben las mujeres para evitar las secuelas de la menopausia y
para equilibrar las disfunciones hormonales.
En la carie dental los rizomas machacados se usan para calmar el dolor de la
dentadura afectada (18)

2.1.3.6.- COMPONENTES QUMICOS PRESENTES EN CYPERACEAS.

Sonwa MH Y Konie W.A (2001) han aislado como componentes menores del aceite
esencial de Cyperus rotundus, 3 nuevos hidrocarburos sesquisterpenoides - (-)
Isorotundeno, - (-), Cypera 2,4 (14)- dieno y (-) nor-rotundeno adems de una
cetona + (-) Cyperadieno (20).
Nossar Mahmonel I Abdel Razik Ayman F, Amel Khrisy, Damidar Abdel Azis M,
Bystron Amy and Mabry Tons (2002) ha se aisl una benzoquinona de la
inflorescencia del Cyperus alopecuraidae denominado alopecuquinona , tambin
aislaron los flavonoides conocidos como: Vicenina 2, Orientina, Diosmetina,
Quercetina 3,3dimetil ter y 3, 4dimetil ter (21). Pero las Cyperaceas en general
tienen rizomas aromticos y de ellos se pueden aislar sus aceites esenciales.
Trease Evans seala que en la familia Cyperaceae se han encontrado aceites
esenciales, taninos, cidos fenlicos y flavonoides (22).

28
 2.1.3.7.- ACTIVIDAD FARMACOLGICA
Bum E NGO Rakotonirina A, Rakotonirina S. V and Herling P (2003), demostraron
que el extracto acuoso de los rizomas de Cyperus articulatus, reduce
espontneamente las descargas epileptiformes y las despolarizaciones inducidas por
NMDA del ingls (nucleotid mono adenin difosfate acid) (22).
Segn Uddin SJ, Mandal K Shilpi S.A, Rahman M.T, (2006), el extracto metanlico
de los rizomas dado oralmente a dosis de 250 y 500 mg/Kg de peso corporal, muestra
significativa actividad antidiarreica en diarrea inducida por aceite de castor en ratas.
Tam C.U, Yang T.Q, Shang Q.W, y Gaui J, Lisp, han identificado copaeno,
Cypereno , sileneno , -Ciperona y -Ciperona (23).

2.1.4.- ACEITES ESENCIALES

Los aceites esenciales son mezclas de varias sustancias qumicas biosintetizadas por
las plantas, que dan el aroma caracterstico a algunas flores, rboles, frutos, hierbas,
especias, semillas y a ciertos extractos de origen animal (almizcle, civeta, mbar gris).
Se trata de productos qumicos intensamente aromticos, no grasos, voltiles por
naturaleza y poco densos. Son insolubles en agua y solubles en alcohol, grasas, ceras y
aceites vegetales. Se oxidan por exposicin al aire. Por lo general la gran mayora de
los aceites esenciales son de naturaleza terpenoide: monoterpenos y sesquiterpenos
que se sintetizan por la va del cido mevalnico, pero los hay tambin de naturaleza
fenlica que se biosintetizan a partir del cido shikmico.

Un solo aceite esencial puede estar compuesto por muchas sustancias qumicas, por
ejemplo: un estudio realizado por Masada en su libro Analysis of Essential Oil by gas
Chromatography and Mass Spectrometry el Jasminum officinale (jasmin) muestra que
contiene una serie de componentes principalmente acetato de bencilo, acetato de
linalil, linalol y como compuestos menores nerol, nerolidol, terpineol, alcohol
benclico, benzaldehdo, cresol, eugenol, jasmona, y jasmolona (13).

29
El nombre de aceite esencial o esencia para denominar a los productos generalmente
olorosos, aromas que producen una impresin agradable al sentido del olfato, es
actualmente inapropiado ya que bajo esta definicin solo se agrupa a las sustancias
obtenidas por arrastre con vapor de agua o por expresin del pericarpio fresco de
ciertos ctricos (3).
En la actualidad resulta ms amplio hablar de aceites voltiles para englobar tambin
las esencias concretas o resinoides, usando solventes de extraccin (ter de petrleo,
acetato de etilo, etc.), o aquellos en que los aceites voltiles son extrados con gases
licuados (CO2, butano, propano), conocido tambin como el mtodo de los fluidos
supercrticos, pero adems otros mtodos antiguos pero de gran utilidad como el de
enflourage que aprovecha la solubilidad de los aceites voltiles en las grasas y aceites.

2.1.4.1.- ORIGEN DE LOS ACEITES ESENCIALES.

Las plantas elaboran los aceites esenciales como mecanismo de defensa al fin de
protegerse de las enfermedades, repeler insectos depredadores o atraer insectos
benficos que contribuyen a la polinizacin.

Los aceites esenciales estn presentes en Asterceas, Lamiceas, Rubiceas,

Verbenceas, Oleceas, Umbelferas, Mirtceas, Miristicceas, Rutceas, Piperceas,
Zingiberceas Arceas, Poaceas, etc.,

Estn presentes en diferentes partes de los rganos vegetales: flores (como en el

caso de la lavanda, el jazmn y la rosa); en todo el rbol (como sucede con el
eucalipto); en las hojas

(citronela); en la madera (sndalo); en la raz (vetiver); en los exhudados de resinas

(incienso, mirra y benju); en la cscara de frutos ( limn, naranja y bergamota).

Dentro de los tejidos vegetativos, se encuentran en clulas esfricas o diferentes

cavidades o canales en el parnquima, y cuando dan el olor a las flores, se encuentran
en las glndulas odorferas, de las que son liberadas.
30
2.1.4.2- ESTRUCTURA QUMICA.

El compuesto precursor de los aceites esenciales se cree que es el isopreno cuya

estructura molecular constituye la unidad qumica de los terpenoides. Estn formados
principalmente por terpenoides voltiles, formados por unidades de isopreno unidas
en estructuras de 10 carbonos (monoterpenoides) y 15 carbonos (sesquiterpenoides).

IS0PRENO

Fig. n 01

Cada aceite esencial est compuesto por varias molculas qumicos diferentes,
clasificados como aldehdos, fenoles, xidos, steres, cetonas, alcoholes y terpenos.
Tambin puede haber muchos compuestos an por identificar.

2.1.4.3.- PROPIEDADES DE LOS ACEITES ESENCIALES.

Todos los aceites esenciales son antispticos, pero cada uno tiene sus virtudes
especficas; por ejemplo, pueden ser analgsicos, fungicidas, diurticos,
expectorantes, etc. La reunin de componentes de cada aceite esencial tambin acta
conjuntamente para darle a la esencia una caracterstica dominante. Puede ser
digestivo (como la manzanilla), refrescante (como el pomelo), estimulante (como el
romero) o analgsico (como el clavo).

En el organismo, los aceites esenciales pueden actuar de modo farmacolgico,

fisiolgico y psicolgico. Habitualmente producen efectos sobre diversos rganos
(especialmente los rganos de los sentidos) y sobre diversas funciones del sistema
nervioso. Tambin son utilizados en otras plantas para alejar a los insectos
herbvoros.
31
2.1.4.3.1.- PROPIEDADES FISICOQUMICAS.
Los aceites esenciales son lquidos voltiles a temperatura ambiente; esto se debe a la
diferencia de presin de vapor, pues cuanto mayor es la presin de vapor de una
sustancia ste es ms voltil (11).
Poseen olores intensos y caractersticos segn los compuestos aromticos que
poseen.
La densidad es inferior al agua (0.7 a 0.8), a excepcin de la esencia de sasafrs
(safrol) y el clavo de olor (eugenol) que superan la densidad del agua
Todos poseen poder rotatorio e ndice de refraccin elevado y la mayora de ellos son
pticamente activos.
Son solubles en alcohol y otros disolventes orgnicos; muy pocos solubles en agua.
Son arrastrables por el vapor de agua en sistema de destilacin por arrastre de vapor.
La mayora de los aceites esenciales son hidrocarburos de cadena abierta alicclicos.
Tambin los hay monocclicos, bicclicos, tricclicos de naturaleza monoterpenoide y
los hay aciclicos, biciclicos, tricclicos y tetraciclicos de naturaleza sesquiterpenoide.
Est tambin constituido por alcoholes, aldehdos y fenoles (16).
Suelen oxidarse cuando se almacenan, desarrollando un olor y sabor desagradable.

32
2.1.4.3.2.- QUIMIORECEPCIN O RECEPCIN MOLECULAR DEL OLOR
DE LOS ACEITES ESENCIALES.

En la recepcin de los olores por los rganos de los sentidos participan clulas
receptoras y sistemas de clulas especficas para el rgano olfativo, las clulas
receptoras del olfato tienen unas antenas cuyas membranas plasmticas estn
formadas de protenas especficas para el tipo de recepcin dada (21).
Las antenas constan de microbilios, estereocilios (diferenciacin de los microbilios)
prpados, flagelos y otros. En esta formacin entran a tallar las protenas fibrilares.
Corrientemente los flagelos estn construidos segn el principio 9.2 + 2, es decir 9
pares de fibrilas por la periferia y un par en el centro; en otros casos el aparato
estructural de las antenas est representado por la frmula 9.2 + 0 (25).
La recepcin olfativa tiene un significado importantsimo para una serie de
organismos vertebrados e invertebrados. Para los insectos su lenguaje son los olores
que segregan, sustancias especiales conocidos como feromonas, que sirven para la
sealizacin, indicadores de seales de alarma y como indicadores del camino a los
sitios donde puedan encontrar productos alimenticios. Por ejemplo, las mariposas
utilizan las feromonas como atractantes sexuales principio descubierto por Fabre
(25).
La bombicola es el atractante sexual de los gusanos de seda (Bombyx mori). La
sensibilidad de las mariposas hacia la bombicola es muy grande para excitar al
macho y es suficiente 1018 g/cm3 de disolvente, es decir 2500 molculas.
La alta sensibilidad de los receptores indica que el olor se transporta a travs de las
molculas, la concentracin umbral de las sustancias olorosas percibida por el ser
humano alcanza 4x10 -7 mg/litro para el escatol, 4.4x10-8 mg/litro para el etil-
mercaptano y 5x10-9 mg/litro para el trimetil-butil-toluol (25).
Las sustancias olorosas tienen la caracterstica de ser suficientemente voltiles,
disolverse en el agua y tambin en los lpidos.

33
Las clulas receptoras se hallan en medio acuoso mucoso; las sustancias olorosas
penetran a travs de la membrana (25); un mismo olor activa un gran nmero de
receptores (12).
Moncrief en 1951 supuso que la recepcin del olor est basada en la correspondencia
estrica entre la estructura de la molcula de la sustancia olorosa y la estructura de
una determinada cavidad en la clula receptora. Partiendo de esta idea, John Amoore
en 1962 estableci 7 olores primarios (25).
1.- alcanforado, porque tiene la estructura del alcanfor;
2.- almizclado, porque tiene la estructura de una pentadeca-acetona;
3.- floral (olor del fenil-metil-etil-carbinol);
4.- a menta (mentol);
5.- etreo, cuando huele a dicloroetileno;
6.- acre fuerte, cuando huele a cido frmico; y,
7.- ptrido, cuando huele a butil-mercaptano.
La comparacin de las sustancias que poseen estos olores, demostr que el olor se
determina no por la composicin qumica, sino por la forma y medida de las
molculas constituyentes (estructura estereoqumica) (25).

Las sustancias electrofilicas con molculas pequeas tienen olor acre (HCOOH, SO 2,
Cl2); las sustancias nucleofilicas tienen olor ptrido (H2S).
Surgen olores complejos si se colocan distintos grupos de una misma sustancia en
cavidades de tipos diferentes.
La teora de Amoore permiti realizar la sntesis dirigida de muchas sustancias
olorosas.

34
En la actualidad se habla de un sentido electrnico del olor dado a que mucha gente
tiene algunos vacos en su capacidad olfativa, afeccin conocida como anosmia
especfica. Los aromas detectados inicialmente comienzan a desmejorar; por esta
razn se han construido aparatos conocidos como narices electrnicas que en
realidad son sensores qumicos acoplados a un sistema de inteligencia artificial. El
instrumente corrientemente detecta la mayora de vapores, olores y no olores
incluyendo vapor de agua, para los que manifiesta una alta sensibilidad (17)
El olor depende en mucho de los receptores olfativos al que se une la sustancia
olorosa (17).

2.1.4.3.3.- PROPIEDADES DEL OLOR.

El olor tiene 3 propiedades:

1. carcter.- el componente que impone el olor caracterstico a cada aceite esencial;

2. intensidad.- cuan fuerte se perciben las molculas que se esparcen en el medio;
3. persistencia.- cuanta duracin tiene cuando se propaga en el medio.

Estas 3 propiedades son subjetivas y pueden solamente ser medidos usando sensores
(17).

Es evidente que el proceso de reconocimiento est basado en las propiedades fsicas

y qumicas de las sustancias olorosas y que el olor solamente existe cuando el
cerebro hace una interpretacin sobre un patrn de seales de los nervios olfatorios.

35
2.1.4.4.-APLICACINES DE LOS ACEITES ESENCIALES.

El uso principal de los aceites esenciales es en la industria perfumstica. Los fenoles y

terpenos de los aceites esenciales, los fabrican las plantas para defenderse de los
animales herbvoros. Actan como mensajeros qumicos. Los aceites esenciales se
mezclan con los naturales de la piel reforzando la nota de fondo, motivo por el cual
cada piel le confiere a un mismo perfume un aroma particular y diferente.

El clima tambin influye: en el mes clido o hmedo se evaporan con ms facilidad,

por lo que se acentan las de fondo, motivo por el cual las fragancias son ms intensas
en verano. En contacto con la epidermis, los perfumes sufren alteraciones a partir de
los 30 minutos.

Tambin ha sido tradicionalmente utilizados en botnica sistemtica para establecer

parentescos entre plantas, al principio en forma indirecta (utilizando el olor como
carcter), luego en su forma qumica.

Tambin se les utiliza como conservadores para alimentos, especialmente crnicos.

Por las propiedades insecticidas y acaricidas que poseen algunos aceites, se usan con
fines de controlar algunas plagas de manera ecolgica.

Otro uso es en la terapia alternativa denominada aromaterapia. Por ejemplo, el aceite

de lavanda se usa para las heridas y quemaduras, y el aceite de jazmn se utiliza como
relajante muscular.

36
2.1.4.5.- PRECAUCIONES.

Es importante sealar que la mayor parte de los aceites esenciales no pueden aplicarse
en su estado puro directamente sobre la piel, ya que siendo altamente concentrados
pueden quemar la piel. Antes de aplicarlos es necesario diluirlos en otros aceites
conocidos como aceites bases, o en agua.

Preferentemente los aceites esenciales no deben de ser ingeridos.

No deben entrar en contacto con los ojos, en caso de hacerlo debe lavarse con
abundante agua, evitando frotarse con las manos.

Deben usarse con moderacin en mujeres embarazadas y nios.

No debe confundirse los aceites esenciales con los aceites sintticos, que son muy
inferior a los aceites esenciales y si son aplicados en la piel causan quemaduras y
alergias.

2.1.4.6.- CONSERVACIN.

Los aceites esenciales siempre deben estar protegidos de la luz y mantenerse en

botellas de vidrio hermticamente cerradas, de preferencia botellas de color azul, ya
que este color es especfico para los aceites esenciales.

Los aceites esenciales no deben confundirse con los esencias florales, como las flores
de Bach. Las esencias florales no tienen olor, pues el proceso de extraccin es muy
distinto. El aceite esencial es muy aromtico.

37
2.1.4.7.- ACEITES ESENCIALES DE CYPERACEAS.

Judd, Campbell, Kellogg y Stevens sealan que Cyperus Longus (galingale) y Cyperus
articulatus son usados en perfumera para obtener aromas dulces, pero no seala cual
es la composicin de estos aceites esenciales (10).

Sonwa M.M y Konig W.A 2001, sealan haber encontrado 3 constituyentes menores
de aceite esenciales en Cyperus rotundus: - (-) Iso-rotundona, (-) Cypera2,4 (15)-
dieno, (-) Norrotundeno (20).
El estudio realizados por estos autores nos permite encontrar la ruta biogentica para
sealar que los aceites esenciales de las Cyperaceas son de naturaleza terpenoidal
monoterpenos y tambin sequiterpenos sealadas por los citados autores.

2.1.4.8.-BIOGNESIS DE LOS ACEITES ESENCIALES DE LA FAMILIA

CYPERACEAE.

Los quimiotipos presentes en el aceite esencial de rizoma de Cyperus articulatus

(piri piri de vbora), generalmente son de naturaleza terpenoide (monoterpenos y
sequisterpenos) de acuerdo con lo sealado en 2.1.4.7
Segn lo anterior, se ha establecido la clasificacin siguiente:

2.1.4.8.1.- BIOGNESIS DE MONOTERPENOS.

La formacin de los compuestos monoterpnicos de los aceites esenciales se

explica por la ruta del cido mevalnico, precursor biogentico de los terpenoides.
(22)
El cido mevalnico se forma a partir de la acetil-CoA
El esquema de formacin es el siguiente: (ver figura n 02)

38
 O

2 CH3CSCoA
Acetil Coenzima A

CH3COCH2COSCoA
Acetoacetil-CoA

CH3COSCoA
Acetil-Coenzima A

CH2 COOH

HO CH3

CH2COSCoA
hidroximetilglutaril-CoA

NADPH

CH2COOH O 3 H
NADPH
HO CH3 5 1 OH Siguiente
2 pgina
HO 4 OH H
CH2CHO
-hidroxi-metilglutarilaldehdo cido mevalnico
1,3,5 trihidroxi-3-metil-pentanoico

39
O H
OH

HO H
OH

cido mevalnico

ATP

O H O H
ATP
OP O P P
HO H HO H
OH OH
Fosfato mevalonato Pirofosfato mevalonato

ATP

O H
OP P
HO H
OP
Pirofosfato fosfomevalonato

O P P

3 Isopentenil pirofosfato

OP P
3, 3, dimetil-alil- pirofosfato

Siguiente pgina 40
 OP P
3, 3- dimetil-alil- pirofosfato

OPP
Pirofosfato de Isopentanilo
Monoterpenos
O PP
Geranil pirofosfato C10

Acclicos: Bicclicos:
Geranil -careno
Nerol -pineno, etc.
Mireeno Monocclicos:
, Limoneno
Mentol
Terpinol
Lenol, etc.

Fig.0 2: Ruta de formacin de los Monoterpenos por la ruta del cido mevalnico:

41
 2.1.4.8.2.- BIOGNESIS DE SESQUITERPENOS

Los sesquiterpenos, estructuras C15, parten del geranil pirofosfato (C10) que
reacciona con el pirofosfato de isopentenilo (C5) para dar lugar al pirofosfato de
farnesilo (C15) desde el cual se originan los sesquiterpenos: Acclicos,
monocclicos, y bicclicos.

OPP OP P

OP P
C10 C5 C15
Pirofosfato de geranil Pirofosfato de isopentenilo Pirofosfato de farnesilo

Sesquiterpenos Sesquiterpenos
acclicos: Tricclicos:
farnesol, Sesquiterpenos Sesquiterpenos
Ciperano,
nerolidol, etc. monocclicos: bicclicos:
Cedrol, etc.
-bisaboleno cadineno,
-selineno,
Cariofileno.

Fig. N03: Ruta de formacin de los Sesquiterpenos: ruta geranil pirofosfato e isopentanil
pirofosfato

42
2.1.4.9.-TERMINOLOGA UTILIZADA SEGN EL MODO PARA OBTENER
UN ACEITE ESENCIAL.

Como complemento de la gran industria perfumstica se usa unas series de trminos

que a continuacin se indican:

a) Esencia absoluta. Es la extraccin del aroma de una planta con alcohol a bajas
temperaturas a partir de la esencia concreta (17).

b) Concreta o Esencia concreta. Es el extracto voltil del material de la planta usando

hidrocarburos (17).

c) Resinoides. Son los que se obtienen de sustancias voltiles vegetales desecadas

por extraccin con ayuda de disolventes, resinas, goma-resinas y blsamos (17).

d) Especias.- Son drogas de origen vegetal, aromticas o picantes, destinadas a

mejorar el sabor del alimento: pimienta, jengibre, etc. (17).

e) Aroma.- Es un concepto ms amplio que aceite esencial ya que se aplica a todo

principio oloroso que emana de sustancias naturales o que se desarrolla por un
proceso fsico, qumico o enzimtico (17).

f) Resinas. Son productos ms o menos slidos, amorfos y de naturaleza qumica

compleja; son insolubles en agua y generalmente insolubles en ter de petrleo,
pero se disuelve ms o menos completamente en alcohol, cloroformo, y ter.
Qumicamente son muestras complejas de cidos resnicos, alcoholes, resnicos
(fenoles), fenoles resnicos, resino-tanoles, steres inertes denominadas resinas
(17).

g) leo Resinas. Son resinas asociadas con esencias: aceite de copaiba, trementina
de Canad (22).

h) leo-Goma-Resinas. Esencias asociadas con gomas y resinas (22).

i) .Blsamo. Cuando contiene elevada proporcin de cidos balsmicos aromticos,

cido benzoico y cinmico, cido ferlico, etc. Se obtienen por incisin de los
rboles. Ejemplo: Blsamo del Per (22).

43
2.1.5.- CROMATOGRAFA DE GASES.

La cromatografa gaseosa es una tcnica de separacin y anlisis de mezclas de

sustancias voltiles, basado en la distribucin de los componentes de una mezcla entre
dos fases inmiscibles, una fija y otra mvil. En cromatografa gaseosa, la fase mvil es
un gas que fluye a travs de una columna que contiene a la fase fija.

En cromatografa de gases la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una

columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil que es
un gas inerte, y a diferencia de la mayora de los tipos de cromatografa, la fase mvil
no interacciona con las molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el
analito a travs de la columna.

La cromatografa de gases se emplea cuando los componentes de la mezcla problema

son voltiles o semivoltiles y trmicamente estables a temperaturas que oxcilan entre
350 a 400C. A menudo la cromatografa de gases se emplea para confirmar la
presencia o ausencia de un compuesto en una muestra determinada.

2.1.6.- ESPECTROMETRA DE MASAS.

La espectrometra de masas es una tcnica analtica de gran potencial que nos permite
elucidar estructuras qumicas. La tcnica se basa en la medicin de la relacin
masa/carga de especies moleculares. Las determinaciones requieren de la generacin
de especies cargadas elctricamente, lo cual se logra por diferentes metodologas
como pueden ser el impacto electrnico, el bombardeo de tomos rpidos y la
generacin de iones enlazados. La medicin de la relacin masa/carga nos permite
tambin saber el peso molecular exacto de la molcula. Es de gran ayuda para la
industria farmacutica, cosmetolgica y alimentaria.

44
La espectrometra de masas es una tcnica microanaltica usada para identificar
compuestos desconocidos, cuantificar compuestos conocidos y para elucidar la
estructura y propiedades qumicas de las molculas. Requiere cantidades pequeas de
muestra y obtiene informacin caracterstica como el peso y la estructura del analito.

En la espectrometra de masas la muestra es ionizada (y por tanto destruida) usando

diversos procedimientos. De todos ellos el ms utilizado es la tcnica denominada de
Impacto Electrnico consistente en el bombardeo de la muestra (previamente
vaporizada mediante el uso de alto vaco y una fuente de calor) con una corriente de
electrones a alta velocidad.
Mediante este proceso, la sustancia pierde algunos electrones y se fragmenta dando
diferentes iones, radicales y molculas neutras. Los iones (molculas o fragmentos
cargados) son entonces conducidos mediante un acelerador de iones a un tubo
analizador curvado sobre el que existe un fuerte campo magntico, y conducidos a un
colector/analizador sobre el que se recogen los impactos de dichos iones en funcin de
la relacin carga/masa de los mismos.
La espectrometra de masas proporciona informacin acerca de la:

Composicin elemental de las muestras: por medio de la espectrometra de

masas atmico.
Composicin de las molculas inorgnicas, orgnicas y biolgicas.

Composicin cualitativa y cuantitativa de mezclas complejas.

Estructura y composicin de superficies slidas.

Relaciones isotpicas de tomos en las muestras.

45
2.1.7.- CROMATGRAFO DE GASES-ESPECTRMETRO DE MASAS (GC-
MS)

Es un instrumento que consiste de un cromatografo de gases de alta resolucin que

tiene como detector un espectrmetro de masas, que reemplaza a un detector ya sea de
ionizacin de llama, de conductividad trmica etc, que son incapaces de poder
identificar los componentes de un aceite esencial separados por el cromatografo de
gases. Mientras el cromatografo de gases separa los componentes del aceite esencial,
el espectrmetro de masas identifica cada componente.

2.1.7.1.- DESCRIPCIN

El cromatgrafo de gases registra el tiempo de retencin de cada uno de

componentes; mientras el espectrometro de masas fragmenta la molcula y determina
su peso molecular (ion padre).

En la memoria de la computadora se halla un programa MALDI (Matrix, Adsorption,

Laser, Description, Ionization); que indentifica cada componente separado que se
halla en la materia, de este modo la indentificacin es automtica y no requiere de un
espectrmetro de resonancia magnetica nuclear de protones y de carbono-13. Esta es
la ventaja de los aceites esenciales como sustancias voltiles.

El uso de la cromatografa de gases acoplada a un espectrometro de masas sirve para

elucidar cada uno de los componentes del aceite esencial; con alta confiabilidad y
eficiencia.

46
2.1.8- MTODOS DE OBTENCIN DE LOS ACEITES ESENCIALES.

Los mtodos conocidos son los siguientes:

a) Destilacin por arrastre de vapor

b) Por expresin o estrujado, caso del pericarpio fresco de ctricos y de plantas que
contienen aceites esenciales en el fruto.
c) Por fermentacin enzimtica seguida de destilacin, caso de la obtencin de
miristicina de Myristica fragans (4)
d) Por separacin de concretas y resinoides, que se extraen con:

disolventes de baja polaridad: ter de petrleo

gases licuados o fluidos supercrticos; anhdrido carbnico, propano, butano.
aceites y grasas en frio o caliente (mtodo de enflourage) (4)

2.1.8.1.- OBTENCIN DE ACEITES ESENCIALES POR ARRASTRE DE

VAPOR DE AGUA.

La mayor parte de aceites esenciales se obtiene por este mtodo muy econmico.
Dependiendo de las caractersticas de la materia prima se prepara la parte vegetal ya
sea hierbas, flores, hojas, semillas, madera, etc.
La materia prima segn su naturaleza puede ser molida, deshojada (caso de las flores
y hojas) o marchitadas para que se abran las clulas oleferas y se garantice su
extraccin.
Luego se carga el destilador, se agrega agua 7 partes mayor que el peso de la materia
prima (7: 1 V/P), se incorpora el refrigerante pico de cigea y se somete a
calentamiento en el alambique hasta el punto de ebullicin del agua: los aceites
voltiles son arrastrados por el vapor de agua que asciende por la columna vertical,

47
luego pasa a la parte angular de la columna donde se halla el refrigerante que enfra
el vapor y lo licua y sigue su recorrido hasta llegar a la zona colectora de la columna
vertical donde se separa por decantacin al abrir la llave; primero se separa el agua y
luego el aceite esencial en vaso florentino.
El aceite esencial con trazas de agua se seca con sulfato de sodio anhidro (4), se filtra
y se obtiene la concreta.

2.1.8.2.-EXTRACCIN POR EXPRESIN O ESTRUJADO DEL

PERICARPIO.

Es aplicable a los aceites esenciales que existen en gotitas en clulas del pericarpio.
Este procedimiento se utiliza para el aislamiento del aceite esencial contenido en
ciertas Rutceas como Citrus sp (naranja, mandarina, limn, bergamota), tambin en
frutas de Xylopia sp.
Al escarificar los pericarpios las cavidades secretoras se rompen, el aceite esencial se
desprende y se recoge manual o mecnicamente.
Existen diferentes variantes en la aplicacin de este mtodo, tales como:

a) Rallado de las pieles en corrientes de agua y consiguiente separacin del aceite

esencial de la fase acuosa por centrifugacin.
b) Aplastamiento de las frutas enteras entre 2 rodillos metlicos, seguido de
separacin de los desechos slidos; separacin del aceite esencial de los zumos
por centrifugacin o por decantacin: una fraccin del aceite esencial se obtiene
de los residuos slidos por arrastre de vapor aunque no es un aceite de buena
calidad.
c) Por expresin de las frutos partidos previamente privados del zumo. Este mtodo
sigue luego los pasos sealados en a y b

48
2.1.8.3- OBTENCIN DEL ACEITE ESENCIAL POR FERMENTACIN
SEGUIDA POR DESTILACIN.
Con este mtodo se aslan los aceites esenciales en algunas plantas como
Miristicceas y Umbelferas en las que se forman por hidrlisis enzimtica de los
glicsidos que acompaan a la fraccin de aceite esencial, caso de la esencia de
mostaza, gaulteria, almendras amargas y otras.
Por ejemplo, las semillas de mostaza que contienen el glicsido sinigrina, primero
son privados del cido graso que contienen, mediante presin; despus del prensado,
la torta obtenida es triturada durante 2 horas en agua a 700 C. Con este procedimiento
se desdobla la sinigrina por accin del fermento albuminoideo mirosina, en glucosa,
bisulfato potsico y aceite de mostaza (isotiocianato de alilo) segn la reaccin
siguiente:

Enzimas
C10H16NS2KO9 + 2H2O C3H5NSC + C6H12O6 + KHSO4
Sinigrina Isotiocianato de alilo

Figura. N04.- El Isotiocianato de alilo se destila a 152.44C, pero se hace a presin

reducida o se asla en ter.

2.1.8.4.- OBTENCIN DE ACEITES ESENCIALES, CONCRETAS Y

RESINOIDES.
2.1.8.4.1- CON SOLVENTES.
En este caso se divide el material vegetal fresco, marchito o semidesecado; si son
races o rizomas deben triturarse, si son tallos llevarse a viruta.
Se puede extraer con ter dietlico, ter de petrleo, segn el poder del disolvente,
estabilidad trmica de los constituyentes, poder de penetracin en las paredes
celulares, facilidad de recuperacin, seguridad en su manipulacin; los solventes
deben tener baja toxicidad y si son inflamables no se debe extraer por
calentamiento, sino usar resistencias elctricas selladas para evitar cualquier
explosin (4).

49
2.1.8.4.2.- OBTENCIN CON GASES LICUADOS O FLUIDOS
SUPERCRTICOS.

Se utiliza butano o propano a presiones de 6 atmsferas para el butano y 15 para el

propano. Cuando se descomprime suele extraerse el aceite esencial, la concreta o el
resinoide. Caso particular pero de mayor importancia es el uso de CO 2 que se
vuelve lquido al estado supercrtico, solo que para este caso las instalaciones
resultan costosas, pero es un procedimiento que puede ofrecer ciertas ventajas tales
como: inocuidad, no hay peligro de inflamabilidad del solvente, su manipulacin se
hace a baja temperatura, de fcil recuperacin del solvente (4)

2.1.8.4.3.- OBTENCIN USANDO ACEITES Y GRASAS.

Este mtodo aprovecha la liposolubilidad de los componentes de los aceites

esenciales.
La tcnica se conoce como enflorado (enflourage), A las flores se les quita sus
ptalos, se esparce sobre grasa fra durante 1 a 3 das sobre placas de vidrio que
interiormente, llevan unas mallas de alambre fino para que cuando se separe la
grasa de las flores no se pierda mucha grasa.
Para esto el chasis metlico se mueve con una mquina agitadora con la cual se
separa fcilmente la pomada en la que se halla embebido el aroma de las flores (4).
Una variante consiste en pasar una corriente de aire caliente sobre las flores y
cuando est cargado de principios voltiles ponerlo en una dispersin de grasa
fundida En todos los casos la esencia adquirida pasa a esencia absoluta que se
extrae por repetido lavados de la fase grasa con alcohol.

50
2.1.8.5.- PLANTEAMIENTO DEL MTODO PARA EL AISLAMIENTO DEL
ACEITE ESENCIAL DE RIZOMA DE Cyperus articulatus (piri-piri de
vbora).
En el presente trabajo de investigacin para el aislamiento del aceite esencial de
rizoma de Cyperus articulatus, se ha utilizado la conjugacin de dos mtodos: el
mtodo de expresin o estrujado y el mtodo de utilizacin de solventes para obtener
el aceite esencial en forma de concreta.
El procedimiento consiste primero en la molienda de los rizomas frescos.
En un baln de 2 litros de capacidad se coloca 953.04 gramos de rizoma de Cyperus
articulatus molido hasta granulometra fina en molino de disco, se agregan 300 ml de
etanol 96 GL para saturar la muestra agitndola convenientemente, luego se agregan
500 ml de ter de petrleo, se agita vigorosamente por espacio de 1 hora se deja en
reposo y se separan las dos fases formadas pasando por una malla 100 ASTM, se
deposita la fase ter de petrleo ms la fase alcohlica en una pera de decantacin.
Se vuelven a agitar ambas fases para que el aceite esencial pase a la fase etrea; esta
agitacin se hace durante dos horas.
Se abre la llave de la pera y se descarga la fase acuosa. El extracto etreo ocupa la
parte superior de la pera, se descarga y se destila, luego se seca con sulfato de sodio
anhidro para eliminar el remanente de agua, se filtra y en el filtrado se obtiene el aceite
esencial en forma de concreta.

El aceite esencial obtenido s llama aceite concreto o concreta por haberse obtenido
mediante un solvente.
Tambin es posible aislar por arrastre de vapor de agua, pero el rendimiento es bajo y
el tiempo de extraccin dura ms de 4 horas y no arrastra los componentes pocos
polares. Del aceite esencial obtenido como concreta es al que se analizar sus
componentes por HRGC-MS.

51
2.1.9.- METODOS DE IDENTIFICACIN DE LOS COMPONENTES
PRESENTES EN LOS ACEITES ESENCIALES.

Hay varios mtodos cromatogrfica tales como: cromatografa de papel utilizando

papel Whatman de diferente graduacin, cromatografa de columna utilizando slica-
gel, y otros adsorbentes, cromatografa de intercambio inico utilizando zeolitas e
intercambiadores sintticos, cromatografa de filtracin en gel utilizando SEPHADEX
de diferente graduacin, etc. De todos estos mtodos, los que se utilizan para la
determinacin de un aceite esencial, son los siguientes:

Cromatografa de capa fina que es un mtodo clsico que ya est entrando en

desuso para este propsito;
Cromatografa de gases que en su versin ms moderna est referida a la
cromatografa HPLC (del ingls HIGH PERFOMANCE LIQUID
CHROMATHOGRAPHY) que quiere decir cromatografa liquida de alta
presin.
Cromatografa HRGC-MS.

De las citadas tcnicas se ha elegido el HRGC-MS porque permite detectar los

componentes de un aceite esencial a concentraciones nfimas.

2.1.9.1.- POR CROMATOGRAFA DE CAPA FINA (en ingls THIN LAYER

CHROMATOGRAPHY o TLC)

Clsicamente se utilizaba cromatografa de capa fina (TLC) con placas de slica-gel

usando como solvente de resolucin benceno: CHCl3 (1:1) y benceno: acetato de
etilo (19: 1). Cuando los terpenos contienen oxgeno (ejemplo: carveno), la capa de
slica-gel no tiene que ser activada pues la humedad presente ayuda a la separacin
de los componentes oxigenados del aceite esencial.

52
 Cuando el aceite esencial contiene terpenos con radicales alcohlicos es mejor
separar sobre placas impregnadas con parafina en 70% de metanol. Otras
modificaciones para separar terpenos de doble enlace en TLC consiste en esparcir
sobre la placa de slica-gel nitrato de plata acuoso al 2.5% y se corre sobre la mezcla
de CHCl3: acetato de etilo: n- propanol (45: 45: 45).
El mtodo general de deteccin incluye rociado con KMnO4 0.2%, cloruro de
antimonio 5% en cloroformo, H2SO4 concentrado vainillina H2SO4. El ltimo
reactivo es preparado en forma fresca aadiendo 8 ml de etanol con 0.5 g de
vainillina en cido sulfrico concentrado. Las placas son calentadas despus del
rociado del reactivo entre 100 y 105C hasta que desarrolle completamente un
color. Los componentes cromofricos ms selectivos son capaces de detectar
terpenoides con dobles enlaces (vapor de bromo) y aquellos que contienen grupos
cetnicos como carveno son detectados con 2.4 - dinitrofenilhidrazina. Las
respuestas de algunas de los terpenos comunes se registran el tabla 2. (20)

53
Tabla N01.- Identificacin de monoterpenos sobre placas de cromatografa de capa fina
(tomado de Harborme J.B. Phytochemical Methodes).
Respuesta a la prueba
Terpenos UV Con 2,4 Con
Con Bromo DNPH H2SO4
Limoneno - + - Color
Marrn
-Pineno - + - Color
Marrn
Pulegona + + + Color
Amarillo
Geraniol - + - Color
Purpura
Carvona + + + Color
Rosado
-cimeno + - - -
-terpineol - + - Color
Verde
1,8-cineol - - - Color
Eucaliptol Verde
DNPH: dinitrofenilhidracina.

54
2.1.9.2.- CROMATOGRAFA HPLC (del ingls HIGH PERFOMANCE
LIQUID CHROMATHOGRAPHY) QUE QUIERE DECIR
CROMATOGRAFA LIQUIDA DE ALTA PRESION

Utiliza instrumental muy distinto con ventajas significativas. En este mtodo se usan
columnas de dimetro muy reducido, por ejemplo 2 mm, rellenas de materiales
especiales pulverulentos, cuyas partculas tienen un tamao de 30 40 um y, en
ocasiones 10 um. Este tipo de columna es muy eficaz, pero ofrece una gran
resistencia al flujo de la fase mvil, sea una gran cada de presin.

2.1.9.3.- POR CROMATOGRAFA DE GASES DE ALTA RESOLUCIN

ACOPLADO CON UN ESPECTMETRO DE MASA (HRGC-MS).

Este equipo de alta sensibilidad es una modificacin al clsico mtodo de

cromatografa gas-lquido.
Este equipo consta de lo siguiente:
- Una fuente de gas transportador, el gas inerte helio cuya velocidad de salida de
gas es de 20 cm/seg;
- Un controlador de flujo y regulador de presin;
- Un sistema de introduccin de muestra que puede ser de inyeccin o con vlvula
automtica (5);
- Una columna capilar DB-5ms de 60 metros de largo enrollado con un dimetro de
250 micrmetros y espesor de capa de 0.25 micrometros.
- Un termostato que eleva la temperatura a 325C
La rampa de temperatura programada es de 100C durante 7 minutos, luego
aumentando 20C/minuto hasta los 180C, y posteriormente a 1C/minutos hasta
llegar a los 280C. El sistema de deteccin de los aparatos modernos de
cromatografa gas-lquido es un espectrmetro de masas que va acoplado al equipo
de cromatografa y que determina el paso molecular de cada una de los componentes

55
 del aceite esencial porque tiene en su memoria maldi ( Matrix absorption Laser
dsorprion ionization = Matrix de absorcin desorcin y ionizacin) todos los
componentes de los aceites esenciales actualmente estudiados y de los que se ha
dilucidado sus estructuras, lo que permite adems reconocer los fragmentos de cada
molcula que se rompe durante el anlisis.
La espectrometra de masa es un anlisis destructivo que tiende a romper la molcula
separada por cromatografa en fragmentos propiciada por la energa de un haz de
electrones equivalentes a 70 electrn-voltios, se produce una remocin de un electrn
simple de la molcula en fase gaseosa por parte de un electrn que sale del haz de
electrones.
El espectro de masa es una representacin de las masas, de los fragmentos cargados
positivamente incluyendo el ion padre o ion molecular. El pico padre que aparece en
el espectro es el que tiene nmero de masa ms alto, por ejemplo el pico padre del
geraniol es M+ - 154. En el espectro de masa del geraniol se observa un pico cuyo
fragmento de masa es 31 que corresponde al CH2OH+, un pico de masa 69 que
corresponde a un fragmento C5H9+ y un fragmento 41 m/c que corresponde a un
C3H5+ (25).

H H
CH2OH H + +
+ e- CH2OH+ H
H H
pm 31 + C C
H H
C H H
H H H H

C5H8+ pm 42
Geraniol C2H4+
pm 68 pm 28

Figura.N05: Fragmentos de la molcula de geraniol cuando pasa por un

espectrmetro de masa (Tomedo Masada Y).
56
2.1.9.4.- ELECCIN DEL MTODO PARA EL ANLISIS DE LOS
COMPONENTES DEL ACEITE ESENCIAL DE RIZOMA DE
Cyperus articulatus (PIRI-PIRI DE VBORA).

El mtodo elegido es el de cromatografa gas-lquido de alta resolucin acoplada a un

detector de espectrometra de masas (HRGC-Ms). En esta matriz se determinan los
componentes que posee el aceite esencial.

La muestra aislada se envi a la Unidad de Investigacin en Productos Naturales

laboratorio 209 de la Facultad de Ciencias y Filosofa de la Universidad Peruana
Cayetano Heredia de Lima se remiti una remite con una clave para que la
Universidad Peruana Cayetano Heredia no se apropie de los resultados logrados-.
El resultado del anlisis recibido va correo electrnico nos sirvi para elucidar los
resultados.

57
 2.2.- VARIABLES OPERACIONALES.
2.2.1.- VARIABLE
2.2.1.1.- Variable independiente.
Aceite esencial del rizoma de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora)

2.2.1.2.- Variable dependiente

Determinacin de los componentes del aceite esencial de rizoma de Cyperus

articulatus (piri-piri de vbora) por cromatografa de gases-espectrometra de
masas (HRGC-Ms).

58
 2.2.2.- OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES.
2.2.2.1.- Variable independiente.

Variable Definicin conceptual Indicador Definicin operacional Escala y tipo ndice

independiente de variable

Aceite esencial Cyperus articulatus Aroma del Los rizomas frescos sern triturados Sustancia Olor
de rizomas de (piri-piri de vbora) es una planta aceite en molino de disco y luego extrados lquida aromtico
Cyperus nativa de la Amazona de la familia esencial. vigorosamente en una mezcla liposoluble peculiar.
articulatus Cyperaceae que crece en terrenos alcohol-agua y ter de petrleo. de baja Rendimiento
(piri-piri de ericeos de preferencia en Se separa la fase lquida pasando por densidad. del aceite
vbora) herbazales, el rizoma contiene una malla 100 ASTM; el lquido se esencial.
aceite esencial de caractersticas lleva a una pera de decantacin, se
peculiares por lo cual es importante agita y se deja en reposo. Se separa
aislarlo, usando mtodos una fase acuosa y otra fase etrea; la
combinados de molienda fina y fase etrea se destila y luego se
separacin por particin d fases con agrega sulfato de sodio anhidro para
solventes con ter de petrleo y quitar el exceso de agua; se filtra y se
alcohol donde en la particin queda obtiene el aceite esencial en forma de
en la fase eterica. concreta.

59
 2.2.2.2.- Variable dependiente.

Variable Escala y tipo

dependiente Definicin conceptual Indicador Definicin operacional de variable ndice

Constituyentes del Los constituyentes del aceite Cromatograma Una muestra del aceite esencial Tiempo de Componentes
aceite esencial de esencial de rizoma de Cyperus y espectro de de 5 microlitros se inyecta al retencin (TR), del aceite
rizoma de Cyperus articulatus aislado, se masa cromatgrafo de gases que se pico molecular esencial.
articulatus determinarn utilizando combinada. encuentra incorporado a un padre (peso Rendimiento
determinado por cromatografa de gases de alta espectrmetro de masas. La molecular del de cada
cromatografa de resolucin acoplado a un muestra es separada en sus componente), componente
gases - espectrometro de masas (HRCG- componentes en la columna fragmentos en del aceite
espectrometra de MS), lo que nos permitir conocer cromatogrfica y analizada por que se divide esencial.
masas HRCG-MS. cuales le conceden las propiedades el espectrmetro de masas. El cada
requeridas por la industria cromatograma indica el tiempo componente.
perfumstica como: carcter, de retencin de cada
intensidad y persistencia que le componente separado, mientras
suelen dar un olor sui-generis al el espectro de masas da lectura
aceite esencial, propiedad que del peso molecular de cada
constituye su caracterstica componente aislado y de qu
distintiva. sustancia se trata.

60
2.3.- HIPTESIS.

Es posible determinacin los compuestos qumicos constituyentes del aceite esencial de

rizoma de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora) por cromatografa de gases-
espectrometra de masas. Iquitos, 2014.

61
Capitulo III

62
3.1.- METODOLOGA.

3.1.1.-Tipo de investigacin.

A travs de procedimientos innovativos se desarroll un mtodo de aislamiento del

aceite esencial (variable independiente) acorde con las caractersticas de la materia
prima (rizoma).
El mtodo utilizado para aislar el aceite esencial es prescriptivo (seala los pasos a
seguir) porque a decir de Barriga Carlos (1) orientando el accionar del investigador de
un modo ordenado hasta la obtencin del aceite esencial: las prescripciones se
objetivizan en forma de reglas.

En el presente trabajo el rizoma se llevar a molienda fina en molino de disco. La

sustancia molida se extraer con ter de petrleo previa adicin de alcohol luego se
separa el ter de petrleo y se llevar a destilacin para recuperar el ter de petrleo y
dejar libre el aceite esencial en forma de concreta.
Este aceite esencial por su biognesis posee componentes de naturaleza terpenoide de
los que no se sabe cuntos y cules son; por eso es importante que sea llevado a un
analizador automtico conocido como cromatgrafo de gases de alta resolucin que
tiene acoplado a su sistema un espectrmetro de masas, equipo que se conoce como
High resolution gas chromatography - Mass espectrometry (HRGC - MS).
Una vez separados los componentes el equipo registra el tiempo de retencin (Tr) de
cada una de ellos e integra el rea de cada componente para determinar el porcentaje de
abundancia; seguidamente cada componente pasa por un detector de espectrometra de
masas que determinar el pico padre (peso molecular de cada componente, lo cual
permitir afirmar de qu componentes se trata y cules son sus denominaciones
qumicas (variable dependiente).
En este tipo de anlisis los marcadores autnticos o patrones de cada componente lo
posee el equipo en su memoria, por lo que lo identifica automticamente.

63
Como solvente se us ter de petrleo para separar los componentes del aceite esencial
porque poseen baja polaridad.
S destil el solvente para separarlo del aceite esencial, luego se
Sec el extracto etreo con sulfato de sodio anhidro para obtener el aceite esencial libre
de agua, se inyecto 5 mililitros del aceite esencial en el cromatografo de gases de alta
resolucin acoplado a un espectrmetro de masas, para determinar cules son los
constituyentes y en qu cantidades se encuentran en el aceite esencial.

los constituyente que se halla en mayor porcentaje le da el olor intenso que caracterza
el aroma del aceite esencial.
La determinacin de los componentes es un mtodo algortmico porque el equipo
utiliza un programa computarizado en cuya memoria se hallan registrados los
componentes terpenoides y fenlicos de todos los componentes aromticos aislados de
los aceites esenciales estudiados hasta la actualidad, lo que permite identificarlos con
suma facilidad por comparacin del componente aislado, con el componente patrn
que se halla en la memoria del equipo.
La lectura del espectro permite elucidar cada componente presente en la muestra del
aceite esencial.

64
3.1.2. DISEO EXPERIMENTAL DE LA INVESTIGACIN.

1. Recoleccin de la materia prima: Rizomas de Cyperus articulatus

2. Clasificacin botnica: Herbarium Amazonense UNAP.
3. Lavado y depilado: Eliminacin de tierra y raicillas del rizoma
4. Secado al aire para eliminacin del exceso de humedad
5. Molienda: En molino de Disco
6. Extraccin por particin de fase.
Agregar alcohol a la masa molida hasta obtener una masa saturada, aadir ter de
petrleo; las preparaciones son: 953.04 g de materia prima, 300 ml de alcohol y 500
ml de ter de petrleo.
7. Agitacin constante por 5 horas para que el aceite esencial que se encuentra en las
clulas rizomticas oleferas pase a la fase etrea.
8. Separacin de la fase etrea.
9. Destilacin de la fase etrea para separar el ter de petrleo y dejar libre al aceite
esencial.
10. Secar el aceite esencial con sulfato de sodio anhidro.
11. Filtrar para separar el sulfato de sodio embebido en agua. El filtrado es el aceite
esencial (concreta).
12. Anlisis de los componentes del aceite esencial por cromatografa de gases de alta
resolucin acoplado a un espectrmetro de masas que acta como detector para
determinar cada componente aislado.
13. Elucidacin de cada componente por lectura del cromatograma y del conjunto de
componentes que identifica el espectrmetro de masas.

65
3.2.- POBLACIN Y MUESTRA.

3.2.1. POBLACIN.

Est constituida por una comunidad vegetal de piri-piri de vbora, que crece con mala
hierba (maleza), en una rea de Ha ubicada en el Km 4 de la carretera IQUITOS -
NAUTA.

3.2.2. MUESTRA.

Est constituida por 2 Kg de rizomas frescos de Cyperus articulatus (Piri-piri de

vbora) recolectado en el Km 4 de la carretera IQUITOS NAUTA y que una vez
lavado, seleccionado y depilado los rizomas se a 1700 g.

3.2.2.1. CRITERIOS DE INCLUSIN.

Rizomas de 9 meses de crecimiento.
Rizomas intactos y no maltratados
Rizomas sanos y sin contaminacin microbiana.

3.2.2.2. CRITERIOS DE EXCLUSIN.

Rizomas con menos de 9 meses de crecimiento.
Rizomas maltratados o descompuestos.
Rizomas contaminados con microorganismos.

66
3.3.- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
ETAPAS:

3.3.1.- RECOLECCIN DE MATERIAL VEGETAL:

La recoleccin del material vegetal se realiz en el Km 4 de la carretera Iquitos-Nauta,

con 2 propsitos:

a) Su identificacin botnica en el Herbarium Amazonense de la UNAP. Se tom

una planta completa con rizoma, tallo e inflorescencia y fue autenticado por el
curador Ingeniero Juan Ruz Macedo.

b) Como material de estudio se recolect 2 Kg de rizomas.

3.3.2.- PROCESAMIENTO EN EL LABORATORIO:

3.3.2.1.- Lavado y depilado.

3.3.2.2.- Secado sobre papel secante para eliminar el exceso de humedad. Se

obtuvo rizomas con un 15% menos de humedad; por lo tanto el material
recolectado se redujo a 1700g de rizoma.

3.3.2.3.- Molienda. Se muelen 1700 g de rizomas en molino de discos; y se obtuvo

953.04 g de rizomas molido con el cual se trabaj.

3.3.2.4.- Extraccin.- Los 953.04 g de rizomas molidos se introducen en un baln de

2 litros con tapa esmerilada, se saturan con alcohol etlico y se agrega ter
de petrleo; se macer por 5 horas agitando fuertemente a intervalos de
tiempo para que el aceite esencial se separe en la fase etrea. Luego se
separa la fase etrea sobrenadante de la fase alcohlica-acuoso.

3.3.2.5.- Destilacin. Se destila, el ter de petrleo en rota vapor Buchi R 3000,

quedando en el baln la fraccin de aceite esencial.

67
3.3.2.6.- Secado. Al aceite esencial obtenido se le agrega sulfato de sodio anhidro
para quitar la humedad.
3.3.2.7.- Filtrado. Se filtra la mezcla de aceite esencial-sulfato de sodio anhidro. El
sulfato de sodio anhidro queda retenido en el papel de filtro. El filtrado es
el aceite esencial puro; que se deposita en frascos oscuros color caramelo.
3.3.2.8.- Determinacin de la densidad:
Para determinar la densidad del aceite esencial, se utiliz el picnmetro;
primero se lav el picnmetro y se sec en la estufa a 105C; se pes en
balanza analtica. Luego se llena el picnmetro con el aceite esencial, se
limpi el aceite esencial que se derram al colocar la tapa y luego se pesa.
El picnmetro ms adecuado es el de Weld con tubuladura lateral.

CLCULOS:
Para calcular la masa del aceite esencial
1) Peso del picnmetro = 30.762g
2) Peso del picnmetro con el aceite esencial = 54.58 g
3) Peso del picnmetro con aceite esencial - peso del picnmetro = masa del aceite
esencial.
54.58 g 30.762 g = 23.82 g
Para medir el volumen se us una probeta graduada:
V = 24.5cm3
Clculo de la densidad del aceite esencial:

m = 23.82 g
v = 24.5cm3
m
d =
v
23.82g
d =
24.5 cm3
d = 0.972g/cm3 (densidad de aceite esencial).
68
 3.3.2.9.- Evaluacin del rendimiento del aceite esencial:

- Peso de la muestra usada = 953.04 g

- Densidad del aceite esencial = 0.972 g / cm3
- Peso del aceite esencial = 23.82g
peso del aceite esencial
- % de rendimiento = x 100
peso de la muestra usada

23.82
- % de rendimiento = x 100
953.04 g
- % de rendimiento = 2.49 %

69
3.4.- EQUIPOS, METODOS Y REACTIVOS UTILIZADOS.

3.4.1.- INSTRUMENTOS Y EQUIPOS:

Equipo Soxhlet
Molino de disco
Estufa MENMERT
Balanza analtica
Rota vapor BUCHI
Cromatgrafo de gases de alta resolucin-espectrmetro de gases acoplado
(HGRGC-MS) Universidad Peruana Cayetano Heredia Lima.

3.4.2. MATERIAL DE VIDRIO:

Pera de decantacin
Baln de 2 L de capacidad, con tapa esmerilada
Vaso de precipitado de 50 cm3, 100 cm3 y 500 cm3
Desecador de vidrio
Embudo
Luna de reloj.

3.4.3 MATERIAL DE PLSTICO:

Frascos de 20 cm3

3.4.4 MATERIAL DE METAL:

Soporte universal
Esptula
Pinzas

70
3.4.5.- MATERIAL DE FILTRACIN:

papel de filtrado
algodn

3.4.6. REACTIVOS:

Alcohol etlico
ter de petrleo
Sulfato de sodio anhidro

71
3.5.- EVALUACIN DE LA ESTRUCTURA DE CADA COMPONENTE.

3.5.1.- Densidad del aceite esencial. La densidad del aceite esencial por el mtodo
picnomtrico arroj un valor de 0.972 g/cm3
Es un indicador que en su composicin los componentes de naturaleza
terpenoidal estn presentes, porque si la densidad fuera mayor de 1, nos
indicara presencia de compuestos fenlicos.

3.5.2. En el Cromatografo de gases de alta resolucin acoplado a un

espectrmetro de masas (HRGC-MS)
Este anlisis de la muestra se realiz en la Universidad Peruana Cayetano
Heredia de Lima que cuenta con este equipo de ltima generacin.
5 microlitros de muestra disuelta en cloroformo se inyecta al equipo y ste dio
la siguiente informacin:
Cromatograma que seala abundancia de cada componente y tiempo de
retencin. El detector que es un espectrmetro de masas, indentifica la
sustancia; determina el in padre, su fragmentacin y recomposicin Mc
Lafferty.
.

72
Capitulo IV

73
 4.1.-RESULTADOS

4.1.1.-RESULTADO DE LA DENSIDAD Y DEL PORCENTAJE DE

RENDIMIENTO DEL ACEITE ESENCIAL.

1. Densidad del aceite esencial : x

Volumen del aceite esencial = 24.5 cm3
Peso del aceite esencial = 23.82 g
Densidad = peso = 23.82/24.53 = 0.972g/cm3
Volumen

2. Rendimiento del aceite esencial aislado de rizomas de Cyperus articulatus

Peso del aceite esencial aislado = 23.82 g
Peso de la muestra utilizada = 953.04 g
23.82g
Porcentaje de rendimiento = x 100 = 2.49%
953.04g
Olor: Sui generis

Color del aceite esencial: amarillento plido

Consistencia: viscosa

4.1.2.-RESULTADO DE LAS PRUEBAS CROMATOGRFICAS

En el aceite esencial de Cyperus articulatus (piri-piri de vibora) en forma de concreta

sometido a anlisis por cromatografa de gases de alta resolucin acoplado a un
espectrmetro de masas (HRGC-MS), se detectaron 81 compuestos en el 100% de la
composicin total como se puede observar en el Cuadro. N2 y el Cromatograma
(figura. N20 del anexo); que consigna los compuestos aislados siguiente.

74
 Tabla. N 02.- Compuestos del aceite esencial de Cyperus articulatus al 100% de su
composicin total.

% en la muestra
Compuesto Nombre del Compuesto (NIST08.L)
(reas relativas) (minutos)
Nmero
1 Pineno 0.49 0.15
2 Pineno 0.54 0.13
3 10 16 () 0.66 0.27
4 Canfolenal 0.67 0.12
5 10 16 () 0.69 3.07
6 2-metilen-6, 6-dimetil-biciclo[3.2.0]3-heptanol 0.70 0.07
7 6, 6-dimetil-2-metilen-biciclo[2.2.1]3heptanona 0.71 0.56
8 Timol 0.74 0.3
9 Terpineol 0.745 0.17
10 Mirtenol 0.746 0.94
11 Mirtenal 0.747 0.84
12 Verbenona 0.757 1.59
13 cis-Carveol 0.76 0.26
14 Carvona 0.78 0.12
15 10 10 2 () 0.80 0.18
16 13 20 () 0.87 0.16
17 14 26 2 () 0.877 0.11
18 15 22 () 0.91 0.14
19 Copaeno 0.917 3.22
20 -Elemeno (-Elemene) 0.92 0.14
21 15 22 () 0.95 0.77
22 Cipereno 0.958 4.31
23 4-tetradeceno 0.99 0.1
24 15 24 () 1.02 1.71
25 14 22 () 1.05 0.15

75
26 -muuroleno 1.057 0.54
27 -cadineno 1.080 0.3
28 Elemeno 1.084 0.3
29 Calameneno 1.090 0.38
30 15 24 () 1.12 1.08
31 15 24 () 1.13 0.51
32 23 32 () 1.139 0.29
33 15 24 () 1.14 0.24
34 15 24 () 1.16 0.85
35 15 24 () 1.168 1.98

36 15 24 () 1.18 4.42
37 15 24 () 1.186 1.35
38 xido de cariofileno 1.19 4.06
39 15 24 () 1.20 0.53
40 15 24 2 () 1.21 0.4
41 1,7-dimetil-4-(1-metiletil)-Spiro[4.5] 6-decen-8- 1.22 0.22
ona
42 Germacreno D 1.24 2.25
43 6-isopropenil-4,8--dimetil-1,2,3,5,6,7,8,8- 1.25 0.32
octahidro-2-naftalenol
44 8-oxo-9H-Cicloisolongifoleno 1.26 1.33
(8-oxo-9H-Cycloiisolongifoleno)
45 -guaieno 1.32 1.78
46 15 24 2 () 1.328 0.97
47 15 24 () 1.33 0.4
48 Dimetilnaftaleno 1.34 0.96
49 15 22 () 1.347 11.66
50 15 22 2 () 1.39 1.57
51 (1,7,7,7.)-1,1,4,5,6,7,7,7-octahidro- 1.40 3.38
1,1,7,7-tetrametil-,2H-Ciclopropa[]2-
naftalenona

76
52 15 22 () 1.41 7.62
53 4-metilen-1-metil-2-(2-metil-1-propen-1-il)-1- 1.42 0.41
vinil-cicloheptano
54 15 24 2 () 1.43 1.62
55 Epxido de isoaromadendreno 1.44 0.24
(Isoaromadendrene epoxide)
56 15 24 () 1.45 1.21
57 15 24 2 () 1.47 1.85
58 Etil ster del cido 3-(4-metoxifenil)-2- 1.49 0.27
propanoico
59 Neocloveno 1.5 0.35
60 4-metilen-1-metil-2-(2-metil-1-propen-1-il)-1- 1.51 0.58
vinil-cicloheptano
61 15 24 3 () 1.52 0.38
62 3,5,6,7,8,8-hexahidro-4,8-dimetil-6-(1- 1.53 1.2
metiletenil)-2(1H) naftalenona
63 Eremofileno 1.54 0.31
64 Patchulalano (Patchulane) 1.55 0.44
65 15 24 () 1.56 0.88
66 xido de aloaromadendreno 1.57 0.47
67 trans-hexahidro-3-metil- Indanona 1.58 0.52
68 15 24 2 () 1.59 0.59
69 Leadano (Leadane) 1.61 0.93
70 15 22 2 () 1.62 2.29
71 Isoborneol 1.63 1.76
72 15 22 2 () 1.66 0.6
73 15 24 () 1.67 0.47
74 15 26 2 () 1.70 0.19
75 15 26 3 () 1.71 0.66
76 15 24 () 1.67 1.21
77 15 26 3 () 1.72 0.62

77
 78 15 24 2 () 1.77 2.4

79 Corimbolona (Corymbolone) 1.88 7.46

80 Culmorina (Culmorin) 1.89 0.3
81 15 22 2 () 2.00 0.5

Si interpretamos el cuadro N 2 los compuestos ms representativos son los siguientes:

Un sesquiterpeno desconocido de formula C15H22O2, con 2.0% de abundancia; y dos
sequisterpenos conocidos: culmorina 1.89% y corimbolona 1.88%.
De los 15 monoterpenos, 3 son desconocidos: el C10H16O con una abundancia de
0.66%, el C10H16O con una abundancia de 0.69% y el C10H10O2 con una abundancia
de 0.80%.
Tambin se observan 62 componentes de naturaleza sequisterpenoidal, de los cuales
32 son desconocidos y 30 conocidos. Sin dejar de citar tres esqueletos irregulares el
C13H20O (0.87%), el C14H26O2 (0.877%) y el C14H22O (1.05%), respectivamente;
que estn ms cercanos a los sesquiterpenos que a los monoterpenos.
Un diterpeno desconocido de estructura C23H32O, fue arrastrado por el ter de
petrleo y por la alta resolucin del cromatografo de gas.

Los rendimientos de los 80 componentes del aceite esencial (concreta) de Cyperus

articulatus van del 0.5% correspondiente al -pineno, al 2% que corresponde a un
compuesto sesquiterpenoide desconocido C15H22O2; esto quiere decir que en 23.82 g de
aceite esencial obtenido, 0.1191 g corresponden al -pineno y 0.4764 g al compuesto
desconocido C15H220.
Los otros 2 componentes sesquiterpenoides representativos, culmorina 1.89% y
corimbolona 1.88%, sobre la base de 23.82 g de aceite esencial corresponden a 0.4502 g
y 0.4478 g, respectivamente.
Los menos significativos pueden observarse con facilidad en el cuadro 2.

78
 4.2.- DISCUSIN

Zoghbi Md GB et al obtuvo por destilacin por arrastre de vapor de agua el aceite

esencial de una muestra de Cyperus articulatus procedente de Belen do Para Brasil, y
analizando por cromatografa de gases y espectrometra de masas encontr los
componentes siguientes: -pineno (0.7 a 12%), mustakona (7.3 a 14.5%) y cariofileno
xido (4.6 a 28.5%) (26). No encontr otros constituyentes como los que encontramos
en el aceite esencial aislado de una muestra que crece en la Amazonia baja de la regin
Loreto.
En el presente trabajo de investigacin se encontr 80 compuestos utilizando ter de
petrleo (de 30-60 BP), esto quiere decir que los solventes apolares arrastran mayor
cantidad de constituyentes mono y sesquiterpenoidales, en consecuencia es un mtodo
ms eficiente para aislar el aceite esencial Cyperus articulatus ( piri-piri de vbora).

79
 4.2.- CONCLUSIONES

1. Del aceite esencial (concreta) de Cyperus articulatus (piri-piri de vbora), se

identific 77 componentes terpenoidales y de los cuales 80.52% de constituyentes
son sesquiterpenoidales y 19.48% de componentes monoterpenoides.

2. Entre los monoterpenoides encontrados, los de mayor proporcin fueron: un

monoterpeno desconocido de frmula C10H10O2 y 12 compuestos conocidos:
carvona (0.78%), Cis-carveol (0.76%), mirtenal (0.747%), verbenona (0.757%),
mirtenol (0.746%), - terpineol (0.745%), timol (0.74%), 6,6-dimetil-2-metilen-
biciclo- (2,2,1) 3-heptanona (0.71%), 2-metilen-6,6-dimetil-biciclo-(3,2,0) 3-
heptanol (0.70%), -canfelenol (0.67%), -pineno (0.54%) y -pineno (0.49%)

3. Entre los sesquiterpenos, los de mayor proporcin fueron: un sesquiterpenoide

desconocido cuya frmula es C15H22O2 que se encuentra en un 2,0% de
abundancia; otros dos sesquiterpenoides significativos son: culmorina, que
representa el 1.89%, de abundancia y corimbolona, el 1.88% de abundancia.

4. Los resultados obtenidos muestran que es posible determinar los compuestos

qumicos constituyentes del aceite esencial de rizoma de Cyperus articulatus (piri-
piri de vbora) por cromatografa de gases - espectrometra de masas (HRGC-MS),
con una significativa eficiencia lo que confirma la hiptesis planteada.

80
 4.4.-RECOMENDACIONES

1. Considerar su utilidad como suministrador de aceite esencial para la industria

perfumstica.
2. Realizar otros estudios del rizoma para determinar la presencia de otros
componentes qumicos diferentes a su aceite esencial, para complementar el
conocimiento de las propiedades farmacolgicas de esta planta en estudio, como su
probable actividad oxitcica.

81
 4.5.- REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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84
ANEXOS

85
Figura N. 06. FICHA DE IDENTIFICACION DE LA ESPECIE VEGETAL

86
 Fig. N 07. DIAGRAMA DE BLOQUE DEL PROCESO

Materia prima Lavado Depilado Secado

Clasificacin
botnica

ter de petrleo
Etanol

Separacin Separacin Extraccin Molienda

fase
acuosa Materia Prima.P +
Aceite esencial
+ fase acuosa
Afrecho

.P + aceite
esencial

E.P DESTILACIN
N

Aceite esencial
hmedo

MgSO4. HRCG - MS
anhidro

MgSO4 FILTRADO
anhidro
Cromatograma Espectrograma

Filtrado (aceite esencial puro)

Elucidado de los compuestos
aceite esencial
87
Foto. N08.- superficie de terreno donde crece espontneamente la planta de estudio Cyperus
articulatus.

88
Figura. N09.- Rizomas de Cyperu articulatus despus de haber sido lavado.

89
Figura. N10.- Cyperus articulatus recolectado para la identificacin botnica

90
Figura. N11.- Moliendo los rizomas de Cyperus articulatus

Figura. N12.- agregando alcohol a la muestra molida

91
Figura. N13.- agregando el ter de petrleo a la muestra

Figura. N14.- vista de las dos fase ; fase superior eterica, fase inferior mezcla alcoho agua.

92
Figura. N15.- separando la fase eterica de la alcohlica acuosa.

Figura. N16.- Separando el sulfato de sodio anhidro del aceite esencial.

93
Figura. N17 preparando el picnometro para ser pesado vaco

Figura. N 18 secando el aceite esencial que se derramo al momento de llenar con este el picno
metro
94
Figura. N19 pesando el picnmetro ms el aceite esencial

95
Figura. N. 20 Cromatograma GC-MS del aceite esencial de piri-piri (SPP).

96
Condiciones Cromatogrficas

Column: DB-5ms, 325 C: 60 m x 250 m x

0.25 m

Rampa de Temperatura: 100 C por 7 min, 20 C/min hasta 180 C, 1 C/min hasta
240 y
finalmente 20 C/min hasta 280 C

Tiempo de corrida: 73 min

Inyeccin: 5 l

Split: 10:1

Gas portador: He, 20.443 cm/sec

Detector: Espectrmetro de Masa

Muerstra: se diluy 5 l de muestra en 1 ml de

diclorometano

97
Figura. N21 Informe de resultados sobre la Composicin qumica de rizoma de Cyperus
articulatus por Cromatografia se Gases acoplada a Espectrometria de masas
(Universidad Peruana por Cayetano Heredia)

98