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REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

Implante de catgut para cicatrización de heridas inducidas


(Modelo de cicatrización en la rata) - Catgut implant for
induced wound healing (Model of healing in rats)

Molina Martínez, José L.: Unidad de Investigaciones Biomédicas.


Universidad de Ciencias Médicas de Villa Clara. “Dr. Serafín Ruiz de
Zarate Ruiz”. Carretera a Acueducto y Circunvalación. CP 50200. Santa
Clara. Villa Clara. Cuba. Teléf. 53-42-210299. E-mail:
josemm@ucm.vcl.sld.cu │ MSc. Vianka Momplet Pérez. Departamento
de Medicina Natural y Tradicional. Universidad de Ciencias Médicas de
Villa Clara. “Dr. Serafín Ruiz de Zarate Ruiz”. Carretera a Acueducto y
Circunvalación. CP 50200. Santa Clara. Villa Clara. Cuba. │MSc. Olga
Pérez Castillo. Departamento de Medicina Natural y Tradicional.
Universidad de Ciencias Médicas de Villa Clara. “Dr. Serafín Ruiz de
Zarate Ruiz”. Carretera a Acueducto y Circunvalación. CP 50200. Santa
Clara. Villa Clara. Cuba. │MSc. Maribel Castro Gutierrez. Policlínico
“Chiqui Gómez”. Santa Clara. Villa Clara. Cuba. │Dra. Omaida Julia
López Bernal. Hospital Infantil. José Luís Miranda. Avenida 26 de Julio
y 1ra. Reparto. Escambray Santa Clara Villa Clara. Cuba. │ Dra. María
Guadalupe Chamizo Cabrera. Hospital Infantil. José Luís Miranda.
Avenida 26 de Julio y 1ra. Reparto. Escambray Santa Clara Villa Clara.
Cuba. │ Dra. Norma E. Batista Hernández. Unidad de Investigaciones
Biomédicas. Universidad de Ciencias Médicas de Villa Clara. “Dr. Serafín
Ruiz de Zarate Ruiz”. Carretera a Acueducto y Circunvalación. CP 50200.
Santa Clara. Villa Clara. Cuba. │ Lic. Danay Heredia Ruíz. Unidad de
Investigaciones Biomédicas. Universidad de Ciencias Médicas de Villa
Clara. “Dr. Serafín Ruiz de Zarate Ruiz”. Carretera a Acueducto y
Circunvalación. CP 50200. Santa Clara. Villa Clara. Cuba. Nelva Pedraza
Acevedo. Policlínico José Ramón Leon Acosta. Santa Clara. Villa Clara.
Cuba

Unidad de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Ciencias


Médicas de Villa Clara, Cuba.

Resumen
Objetivo: Determinar la influencia de la implantación de catgut en el proceso
de cicatrización de heridas superficiales en ratas Sprague Dawlley. Métodos:
Se realizó investigación preclínica en ratas albinas hembras de 200-220
gramos de peso, línea Sprague Dawley. Se conformaron dos grupos de
animales: Grupo I (Control) y se les realizó una herida experimental por
animal sin recibir tratamiento (Implante de Catgut), Grupo II (Estudio), se les
practicó la herida y el tratamiento al unísono. Los animales se sacrificaron al
día 8 de realizada la herida y el tratamiento y se pesaron los animales de

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ambos grupos antes de comenzar y al final del estudio. Resultados: Se


determinó la cicatrización por observación macroscópica (retracción de la
herida medida diariamente y a la misma hora con un pie de rey) y se anotó el
resultado. Se compararon las medidas de retracción diaria de la herida entre
los animales de uno y otro grupo (Control y Estudio), calculándose también
con esta misma periodicidad las diferencias halladas entre la retracción de la
herida de los animales sin tratamiento y la retracción de la herida de los
animales con tratamiento acupuntural. Las diferencias histopatológicas
encontradas al comparar las biopsias de los animales de uno y otro grupo al
finalizar el estudio (Día 8) nos mostró la evolución del proceso de
cicatrización. Conclusiones: La implantación de catgut no influyó en el
proceso de cicatrización de heridas superficiales en ratas Sprage Dawlley.

Palabras claves: Herida experimental, implante, catgut, cicatrización,


acupuntura, medida, retracción herida, tratado, control.

Abstract
Objective: To determine the influence of catgut implantation in the healing
process of superficial wounds in Sprague Dawley rats. Methods: Sprague
Dawley rats (female albino rats, 200-220 grams), were used for a preclinical
research. Two groups of animals were formed: Group I (Control): An
experimental wound (Catgut Implantation) was performed to each animal
without receiving any treatment, Group II (Study group): These animals were
performed the wound and received the treatment at the same time. Animals
were sacrificed eight days after having received the treatment and the wound
was performed. Animals from both groups were weighed before beginning the
study and after finishing it. Results: Healing by macroscopic observation
(retraction of the wound which is measured daily and at the same hour with a
Vernier caliper) was determined and the results were scored. Daily
measurements of wound retraction from animals of both groups (Control and
Study) were compared. Also the differences found between the wound
retraction of the untreated animals and the wound retraction of animals with
acupuncture treatment, were determined. Histopathological differences found
when comparing biopsies from animals of both groups once the study was
ended (Day 8) let us to know the evolution of the healing process.
Conclusions: Catgut implantation did not influence on the healing process in
superficial wounds in Sprague Dawlley rats.

Keywords: experimental wound, implant, catgut, healing, acupuncture,


measurement, wound retraction, treated, control.

Introducción

La piel constituye una barrera protectora contra el medio externo, y ante


cualquier daño o lesión producida busca solución para ser reparada. El

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proceso cicatrización de heridas es parte de la biología continua entre el


estado patológico producido y la regulación de la diferenciación celular. La
formación de tejido nuevo depende de la dinámica celular del tejido celular
lesionado y circundante1 y atraviesa por diferentes pasos, siendo el proceso
central, la inflamación.2

En el proceso de cicatrización intervienen factores diversos y el éxito está


dado por el tipo y alcance de los daños, el estado general de salud y la
capacidad del tejido a reparar3. Los experimentos en cicatrización buscan
agentes que aceleren este proceso para mejorar opciones de tratamientos.
Se montó el modelo de cicatrización de herida de grosor total en la rata y se
utilizó la técnica acupuntural de implantación de catgut para estimular el
proceso regenerativo como método de tratamiento de la Medicina Tradicional
Asiática. La aplicación de la implantación de catgut en determinados
acupuntos, con acción regeneradora y estimulante del proceso de cicatrización
de heridas en animales de laboratorio sometidos a dehiscencia experimental,
constituyó el fundamento del proyecto.

Objetivo General:

Determinar la influencia de la implantación de catgut en el proceso de


cicatrización de heridas superficiales en ratas Sprague Dawlley.

Método

Se realizó un estudio de investigación experimental pre clínica en ratas albinas


hembras de 200-220 gramos de peso, línea Sprague Dawley (S. D.) en el
Laboratorio de Cirugía Experimental de la Unidad de Investigaciones
Biomédicas de la Universidad de Ciencias Médicas de Villa Clara Dr. Serafín
Ruiz de Zarate Ruiz desde enero 2013 a diciembre 2014.

Definición de la Población de Estudio: En la fase de investigación se utilizaron


18 ratas hembras SD formándose aleatoriamente dos grupos o lotes
experimentales, los cuales fueron alojados en cajas independientes bajo las
mismas condiciones. Se estableció:

 Grupo I (Grupo control conformado por 9 ratas): Herida sin tratamiento


de implante de catgut.

 Grupo II (Grupo estudio o tratado conformado por 9 ratas): Herida con


tratamiento de implante de catgut.

El Modelo cumplió con todos los requisitos de un Modelo Experimental en


Cirugía, sencillo, accesible y reproducible. Los animales fueron certificados con
un sistema único que permitió el Registro de los diferentes parámetros que se
evaluaron.

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En las tarjetas de cada una de las cajas donde se alojaron los animales, se
anotó: número de protocolo, número de la caja de alojamiento, Grupo I y
Grupo II respectivamente, número del animal, Sexo, Especie, Línea. Sólo un
ejemplar por jaula.

El peso individual de cada animal se plasmó en las hojas de Registro de Pesos


Corporales al inicio de la investigación (momento de la herida e implante del
catgut en los acupuntos correspondientes) y al finalizar el estudio (Día 8),
antes de ser sacrificadas. A los animales de ambos grupos se les provocó una
herida experimental con un biótomo de 9 mm previa anestesia (dosis única de
Ketamina 100 mg/Kg vía intraperitoneal) Previo al implante de catgut en el
acupunto se realizó desinfección del área con torunda y alcohol al 70 % Se
realizó de una vez, herida e implante, para evitar depresión de los animales y
desarrollar adecuada cicatrización. La herida no se practicó entre las
escápulas por la presencia del tejido adiposo pardo allí presente, sino a
continuación de la región dorso escapular donde la piel tuvo poco movimiento
con el traslado de la rata.

La higiene de la herida fue fundamental, el local, las jaulas y camas fue


desinfectado a fondo. Diariamente se chequeó el estado de las heridas y no
hubo infecciones que motivaron desechar ningún animal. Se aplicó
tratamiento con antibiótico en el agua de bebida, antes de producir las heridas
y durante la evolución de la cicatrización.

La técnica de acupuntura empleada en el estudio fue el implante de catgut


con trocar No 22 en los acupuntos: Quchi (IG-11), Tzun-San-Li, (E-36), B6
(Sanyinjiao), los cuales están indicados en:

 IG11: Infecciones, alergia, dermatitis, psoriasis.

 E36: Efecto defensivo y preventivo para aumentar las defensas,


inmunomodulador, anticuerpos, Igs, Hemostático, estimulante, acción
general, Inmunidad humoral, en general, capacidad fagocitaria,
Incremento de leucocitos

 B6: Inmunodefensivo, homeostático.

Se colocó el fragmento de hilo de sutura Catgut 3-0 dentro del trocar para
introducirlo en los puntos. Se puncionó de forma rápida y precisa, retirando el
trocar a medida que se introdujo el mandril.

La retracción de la herida se midió diariamente, a la misma hora con un pie de


rey y se anotó el resultado. Las muestras fueron sometidas a estudio
microscópico e histopatológico.

La investigación se basó en las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) y el


estricto cumplimiento de las medidas de Bioseguridad establecidas, según lo
regulado por los Procedimientos Normativos Operacionales y las Normas para

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la Cirugía en Animales de Experimentación; los ensayos se discutieron por los


especialistas.

La Histología se evaluó con: Parámetros considerados para la clasificación de


la evolución de la migración epitelial en la cicatrización de heridas abiertas en
ratas y aspectos para la clasificación de la Reconstitución Dérmica.

Análisis estadístico:

Los datos fueron vaciados en una base de datos confeccionada al efecto en el


programa SPSS versión 15.0, se resumieron en tablas y gráficos según
correspondió. En inicio se comprobó La normalidad de las variables
cuantitativas a través Del test de Shapiro-Wilk, y según el caso se utilizaron
pruebas paramétricas o no paramétricas, para muestras independientes.
Además se utilizó la correlación de Spearman. Se trabajó con una significación
del 95%.

Aspectos éticos.

La ejecución de la presente investigación jugó un papel destacado en el


campo de la bioética animal acorde con la DECLARACIÓN UNIVERSAL DE LOS
DERECHOS DEL ANIMAL realizado en la UNESCO en 19784, 5

Resultados:

En la Figura 1 al comparar las medias de peso inicial y final entre los grupos
(tratado y control) no se encontraron diferencias significativas (p=0.000)

Figura 1 : Comparación de medias de peso inicial y final entre grupos control


y tratado.

Fuente: Registro de datos primario.


t (peso inicial) = 5.699 p = 0.000 I.C diferencia de medias (14.767-33.699)
jt (peso final) = 4.460 p = 0.000 I.C diferencia de medias (10.143-28.523)

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Figura 2: Comparaciones entre grupos de los pesos y pesos relativos del bazo
y timo.

Fuente: Registro de datos primario.

No existieron diferencias significativas entre grupos según los pesos del bazo
(p=0.387), timo (p=0.190) y peso relativo del timo (p=0.297), (Figura 2) sin
embargo el peso relativo del bazo resultó ser significativamente menor en el
grupo control que en el grupo tratado (p=0.024).

Fuente: Registro de datos primarios.

La Figura 3 muestra la evolución de la cicatrización de la herida que fue


aumentando significativamente de manera general entre el inicio del estudio
hasta el cierre del mismo. A pesar de que el grupo tratado tuvo mayor
cicatrización al cuarto día, con respecto al grupo control, ambos tuvieron
diferencias significativas en el progreso de la curación (p=0.000) No

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existieron diferencias significativas entre grupos con respecto a la cicatrización


de la herida tanto en el día 4 (p=0.489) como en la medición al final del
estudio (p=0.605).

Figura 4: Correlación entre retracción de la herida día 8 y peso final.

Fuente: Registro de datos primarios.

La retracción de la herida al final del estudio mostró significativamente


(p=0.017) una correlación moderada y negativa con el peso final (Rho=-
0.554). Quiere decir que a medida que el peso del animal fue mayor, la
cicatrización disminuyó. Con el resto de las variables no hubo correlación
significativa (Figura 4).

Discusión:

En el modelo experimental de una sola herida no se aprecia disminución del


peso corporal en el animal, dado que la agresión quirúrgica es menor y los
animales no fueran sometidos a estrés, es signo de buen estatus de salud,
buenas prácticas de manejo de laboratorio y uso adecuado de medidas de
bioseguridad.6 Puede estar condicionado por la estimulación del punto E36,
que excita funciones de las glándulas suprarrenales, estimula el Sistema
Retículo endotelial, eleva la función de las inmunoglobulinas en plasma, es
capaz de aumentar la cantidad de péptidos opioides vinculados a los linfocitos7
y modular la respuesta de algunos órganos, tejidos y sangre de las ratas8.

El fenómeno de la cicatrización transcurre por varias etapas: hemostasia,


inflamación, proliferación, remodelación y maduración de la cicatriz9, 10
Estudios refieren que después de 3 o 4 días ocurre la proliferación de
fibroblastos que comienzan a migrar hacia la matriz provisional del coágulo 6,
11

Los resultados encontrados en la Fig-1, coinciden con esta referencia y


muestran que ambos grupos tuvieron un comportamiento similar en el

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proceso de cicatrización, lo que infiere que la implantación de catgut no


influyó directamente sobre este proceso. Sin embargo, el grupo tratado tuvo
mayor cicatrización al cuarto día, coincidiendo con los resultados de
Zhonqquo Zhen12, quien plantea que al cuarto día, el número de capilares fue
mayor en el grupo tratado con moxibustión (técnica afín a la acupuntura).

Al correlacionar la retracción de la herida al final del experimento con el peso


final del animal se encontró que a mayor peso del animal fue menor la
cicatrización. Coincide con lo referido por Minematsu T. sobre la obesidad
como factor de riesgo, que retarda la curación de lesiones cutáneas13, además
estudios en ratas han demostrado que en la obesidad hay una maduración
anormal de las fibras del colágeno, alteraciones en su densidad, baja
resistencia de la aponeurosis y defectos en la función de los fibroblastos. 14, 15

A pesar de que ambos grupos no se diferenciaron al final del experimento con


respecto a la cicatrización de la herida, fue significativamente mayor el peso
relativo del bazo, en el grupo estudio, también influenciado por la respuesta
inmunomoduladora de los acupuntos seleccionados para el tratamiento (E36
con acción directa sobre sistema inmunológico) 16, 17, 18

Los puntos del Meridiano Pulmón al ser estimulados se relacionan con


aumentos en nuestra fórmula blanca (linfocitos), alertan a las células CD 4T
para que detecten cualquier invasor, de manera que las células CD 8T
(macrófagos) puedan atacar y destruir al invasor; regulen la acción del cAMP
y cGMP, quienes son como el Yin y Yang, que deben mantenerse en cierto
nivel de equilibrio; cuando el cAMP aumenta se inhibe la respuesta inmune,
cuando el cGMP aumenta, se aumenta la respuesta inmune.19 Las
concentraciones séricas de anticuerpos, y de linfocitos T y B fueron medidas
en perros sensibilizados con vacuna antirrábica y por piquete de garrapata. La
Acupuntura en estos animales demostró un mayor aumento de linfocitos en
animales tratados por este método que en no tratados. Puntos como P5, P7,
IG4, IG11 junto a VG14 por ejemplo tienen una respuesta inmune fortalecida.
Igualmente puntos como H13, VB32 y R27 son usados para estabilizar la
respuesta inmune en enfermedades como Rinopneumonitis y Mieloecefalitis
Equina por Protozoarios19.

Conclusiones:

La implantación de catgut no influyó en el proceso de cicatrización de heridas


superficiales en ratas Sprage Dawlley.

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