CRESCIMENTO MICROBIANO

CRESCIMENTO MICROBIANO:

Aumento do número de células e não das dimensões

celulares.

Crescimento Microbiano = associado ao

crescimento de uma população de células
(uma célula dará origem a duas ao fim de
um certo tempo, tempo de geração ou de
duplicação.)
Crescimento Microbiano

 1. Fatores necessários ao crescimento

 - Fatores Físicos ( temperatura, pH, pressão osmótica)
 - Fatores Químicos (nutrientes, água, O2 etc.)

 2. Meio de Cultura
 - Meio Complexo
 - Meio Definido

 3. Medidas do crescimento
 - Quantificação Direta (nº. de colônias viáveis ou não)
 - Quantificação Indireta (turbidez, peso seco etc.)
FATORES NECESSÁRIOS AO CRESCIMENTO

- FATORES FÍSICOS:
temperatura
pH
pressão osmótica (concentração salina)

- FATORES QUÍMICOS:
água
fontes de carbono e nitrogênio
minerais
oxigênio
fatores orgânicos
FATORES FÍSICOS

1. TEMPERATURA:

Modula o crescimento microbiano

- Temperatura mínima de crescimento:

< temperatura onde a espécie é capaz de crescer

- Temperatura ótima de crescimento:

- Temperatura máxima de crescimento:

> temperatura, onde ainda é possível o crescimento
Figura 1. Taxa de crescimento vs. temperatura
FATORES FÍSICOS

1. TEMPERATURA:

Os micro-organismos são classificados em 3 grupos:

- Psicrófilos: crescem em baixas temperaturas (-10 a 15 °C)

- Mesófilos: crescem em temperaturas moderadas (10 a 50 °C)

- Termófilos: crescem em altas temperaturas (40 a 70 °C)

Termófilos extremos (68 a 110 °C)
 Termófilos extremos

Figura 2. Curva de crescimento característica de diferentes micro-organimos

Área de Alimentos
Psicrófilos: temperatura ótima: 15 °C
encontrados em oceanos e regiões da Ártica
micro-organismos ambientais

Psicrotróficos: temperatura ótima: 20 a 30 °C

crescem em temperatura de refrigeradores (4 °C)
encontrados em alimentos estragados

Mesófilos: temperatura ótima: 25 a 40 °C (mais encontrados)

corpo de animais (temperatura da pele)
bactérias patogênicas: temp. ótima 37 °C
degradam alimentos e são patogênicos

Termófilos: temperatura ótima: 50 a 60 °C

ambiente de águas termais (***não crescem em temp.
< 45 °C)
material estocado (altas temp.)= compostagem
FATORES FÍSICOS

2. pH:

- refere-se a acidez ou a alcalinidade de uma solução;

- maioria dos micro-organismos cresce melhor perto da
neutralidade (pH 6,5 – 7,5);
- poucas bactérias são capazes de crescer em pH ácido (como
pH 4,0)
Bactérias: faixa entre pH 7,0
Exceções:

- Bactérias acidófilas: alto grau de tolerância à acidez (Thiobacillus de

0,5 a 6,0 com ótimo entre 2 e 3,5)
- Bactérias alcalifílicas: (Bacillus e Archaea) (pH 10 – 11).

Fungos - tendem a ser mais acidófilos que as bactérias (pH <5).

Figura 3. Distribuição de alguns micro-organismos de acordo com o pH
(Adaptado de Madigan et al., Brock Biology of Microorganisms, 2003)
FATORES FÍSICOS

3. PRESSÃO OSMÓTICA:

Os micro-organismos transportam/metabolizam nutrientes

solubilizados em água (conteúdo celular 80 – 90 % de água)

Pressão osmótica: retira a H2O dentro da célula

Reação Hipertônica: perda de H2O do meio intracelular para o

extracelular, através da membrana plasmática (meio com
concentração de sais).

Plasmólise: diminuição da membrana plasmática da célula devido a

perda de H2O por osmose.
Não Halófilos: não necessitam de sal e
não toleram a presença no meio.
Halotolerantes: não necessitam de sal
mas toleram a presença no meio.
Halófilos: necessitam de sal em uma
concentração moderada
Halófilos extremos: necessitam de sal
em altas concentrações.

Figura 4. Taxa de crescimento de alguns micro-organimos vs. a concentração de sal.

 Área de Alimentos
-adição de sais: plasmólise
preservação de alimentos (peixe salgado, mel e leite)
Alta concentração de sal ou açúcar

Halofílicos Extremos (ou obrigatórios): necessitam de altas concentrações

de sais para o crescimento
Halofílicos Facultativos: mais abundantes
não exigem altas concentrações de sais

-Adição de ágar:
normalmente 1,5% para solidificar o meio
> concentração = inibição de alguns micro-organismos
> concentração de sal = pressão osmótica
FATORES QUÍMICOS

1. ÁGUA:

- Essencial para os micro-organismos

- Disponibilidade variável no ambiente

Ambiente com < concentração de água:

desenvolvem mecanismos para obter água através do aumento

da concentração de solutos internos seja pelo bombeamento de
íons para o interior celular ou pela síntese de solutos orgânicos
(açúcares, álcoois ou aminoácidos).
FATORES QUÍMICOS

2. FONTES DE CARBONO, NITROGÊNIO, ENXOFRE E

FÓSFORO:

a) CARBONO:

essencial para a síntese de todos os compostos orgânicos

necessários para a viabilidade celular (elemento estrutural
básico para os seres vivos)

organismos quimio-heterotróficos: obtém C a partir de materiais

orgânicos como proteínas, carboidratos e lipídeos.

organismos quimio-autotróficos
C a partir de CO2
organismos fotoautotróficos
Classificação metabólica dos seres vivos
b) NITROGÊNIO, ENXOFRE E FÓSFORO:

- N, S: síntese de proteínas
- N, P: síntese de DNA e RNA, ATP

Peso seco de uma célula bacteriana: 14 % N, 4 % S, P

NITROGÊNIO

- utilizado para sintetizar os grupos aminos presentes nos

aminoácidos.
Obtenção de N:
- Decomposição de materiais orgânicos (proteínas, aminoácidos)
- Amônia (NH4 +)
- Nitrato (NO3-)
Bactérias Fixadoras de Nitrogênio

Fixação de N: algumas bactérias são capazes de utilizar N gasoso

diretamente da atmosfera.

micro-organismos do solo (ex. bactérias dos gêneros Rhizobium e

Bradyrhizobium) utilizam este processo para obtenção de N, tanto
para elas como para as plantas que convivem simbioticamente
(algumas leguminosas – soja, feijão).

Cultivo de leguminosas: > fertilidade do solo sem a necessidade de

implementação de fertilizantes químicos
b) NITROGÊNIO, ENXOFRE E FÓSFORO:

ENXOFRE

- utilizado na síntese de aminoácidos contendo S e de vitaminas

(tiamina e biotina).

Fontes naturais de S:

íon sulfato (SO4-2), sulfito de hidrogênio, aminoácidos

FÓSFORO

- essencial para a síntese dos ácidos nucléicos e para os

fosfolipídeos componentes da membrana celular.

Fontes naturais de P:

íon fosfato (PO4-3), DNA, RNA, ATP

c) POTÁSSIO, MAGNÉSIO E CÁLCIO:

- também são elementos essenciais para os micro-organismos

- frequentemente encontrados como co-fatores para as reações

enzimáticas.

d) ELEMENTOS TRAÇOS:

- FERRO, COBRE, MOLIBDÊNIO, ZINCO

- utilizados como co-fatores essenciais para atividade de

algumas enzimas

utilizar água destilada para meio de cultura – contém todos os

elementos traços
FATORES QUÍMICOS

3. OXIGÊNIO:

- extremamente importante no desenvolvimento microbiano

- organismos classificados em:

1. AERÓBIOS
- Estritos (obrigados): necessitam O2
- Facultativos: não necessitam O2 mas crescem melhor na sua presença
- Microaerófilo: necessitam O2 mas em níveis menores

2. ANAERÓBIOS
- Aerotolerantes: não necessitam O2 mas crescem melhor na sua ausência
- Estritos (obrigados): não toleram O2 (letal)
 AERÓBIO ANAERÓBIO AERÓBIO MICRO ANAERÓBIO
ESTRITOS ESTRITO FACULTATIVO AERÓFILO AEROTOLERANTES

Catalase e a
superóxido
dismutase
reduzem
para H2O os
compostos
tóxicos.

alta [O2] sem O2 alta e baixa baixa [O2] alta e baixa

[O2] [O2]
catalase ausência:
SOD catalase catalase SOD
SOD SOD

Figura 5. Efeito do oxigênio sobre o crescimento de vários tipos de bactérias.

SISTEMAS PARA O CULTIVO ANAERÓBIO
CRESCIMENTO DAS CULTURAS MICROBIANAS

- DIVISÃO:

- FISSÃO BINÁRIA
- BROTAMENTO

- TEMPO DE GERAÇÃO:

- FASES DE CRESCIMENTO:

- FASE lag
- FASE log OU EXPONENCIAL
- FASE ESTACIONÁRIA
- FASE DE MORTE CELULAR
CRESCIMENTO DAS CULTURAS MICROBIANAS

DIVISÃO:

o aumento do número de indivíduos e não do tamanho celular.

1. BROTAMENTO: < nº de bactérias (forma um broto que quando

atinge o tamanho da célula parental se separa)

2. FISSÃO BINÁRIA:

(1) alongamento da célula e a replicação do DNA cromossomal;

(2) início da invaginação da parede celular e da membrana
plasmática;
(3) em um determinado momento, as duas seções da parede
celular de encontram;
(4) produção de duas células individuais idênticas à célula mãe.
Fissão Binária

Figura 6. Fissão binária bacteriana.

CRESCIMENTO DAS CULTURAS MICROBIANAS

TEMPO DE GERAÇÃO:

é o tempo necessário para uma célula se dividir (e sua

população dobrar de tamanho).

- tempo varia de acordo com o organismo;

- modulada por condições ambientais (nutricionais, temperatura
etc);
FASES DE CRESCIMENTO

CURVA DE CRESCIMENTO:

demonstra o crescimento das células durante um período de

tempo.

curva de crescimento obtida pela contagem da população em

intervalos de tempo após um inóculo de um número pequeno de
bactérias em meio de cultura.
FASE lag: pouca ou ausência de divisão celular (fase de adaptação) - ≥ 1 hora
(estado de latência, com intensa atividade metabólica)
FASE log: início do processo de divisão (período de crescimento ou aumento
logarítmo)
(reprodução celular extremamente ativa, sensíveis as mudanças ambientais - *
EFEITO DE ANTIBIÓTICOS)
FASE ESTACIONÁRIA: velocidade de crescimento diminui
nº de células vivas = nº de células mortas
FASE DE MORTE CELULAR: nº de células mortas excede o de células novas.

Figura 7
Figura 7. Curva de crescimento bacteriano mostrando as 4 fases típicas.