MORFOLOGIA Y FISIOLOGIA DE LEUCOCITOS

Recuento manual de leucocitos.

Método manual de recuento celular
Dilución de la sangre
Muestreo de la sangre diluida en un volumen
Recuento de células en ese volumen
Para el recuento de leucos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas, que
corresponden a los campos 1, 3,7 y 9.

Para su dilución, se hace lo mismo que para los hematíes pero empleando la pipeta de
blancos, de modo que la solución que obtenemos es de 1/20. Se utiliza como diluyente el
líquido de Turk. El líquido de Turk es hipotónico de modo que se destruyen los hematíes y
así no entorpecen en el recuento.

El líquido de Turk consta de ácido acético glaciar 2ml, violeta de genciana disolución de
1% 1ml y agua destilada en cantidad suficiente para 1000ml. Deberá filtrarse a menudo
para evitar levaduras y hongos.

En un principio es un poco difícil distinguir los leucocitos de los restos de membranas de

los hematíes hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son más
refringentes (más brillantes) al moverlo con el microscopio que los restos de hematíes. Se
debe observar la presencia de la membrana citoplasmática y de la membrana nuclear (a
veces más) como líneas finas y brillantes. Esto se observa fácilmente moviendo el
microscopio hacia delante y hacia atrás

PROCEDIMIENTO
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica
punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA
2. Colocar el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta

3. Llenar la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar
una dilución de 1/20. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre
se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente
4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de Turk)
y absorber hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.

5. Se tapan ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y se coloca en un

rotador automático o se hace rotar manualmente de 2-3 minutos

6. Montar la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca.
7. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota
pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene
exactamente.

8. Dejar 3 minutos que los leucocitos se sedimenten

9. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. y contar en los
4 cuadrados angulares.
10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera
las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se
consideran los que estén en los límites inferior y derecho.
OBSERVACIONES

Cámara de Neubauer, 40x

Enfocando uno de los cuadros laterales, se aprecian claramente los 16 cuadros pequeños donde
se tienen que contar los leucocitos que hay en ellos. Se debe de tener cuidado de no confundir los
restos de eritrocitos hemolizados con los leucocitos, que deben de aparecer como puntos purpuras
o negros, como los que están a las 9.
RESULTADOS
Los recuentos de leucocitos, al igual que los eritrocitos, se expresan como
concentraciones, que en este caso serían número de células por unidad de volumen de
sangre, que es 1mm3
Después de contar los glóbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total
de ellos y con dicha cantidad de hace el siguiente cálculo:
N° de leucocitos x mm3 = altura x dilución x área
N° de leucocitos x mm3 = 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000
N° de leucocitos x mm3 = 4/200 = 1/50
 N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50

En el análisis hecho, los resultados de la cuenta de células quedaron así por casilla:

El número de leucocitos fue de 176, que al multiplicarse por 50 daba como

resultado 8800/mm3, lo que indica un índice normal, supera el mínimo y no esta fuera
del rango ya que es un hombre de 23 años.

VALORES DE REFERENCIA
(Millones de células/mm3)
Hombres y Mujeres:………………………………..5 000-10 000

CONCLUSIÓN
Los leucocitos son las células sanguíneas que dentro del organismo participan
desarrollando diferentes funciones como son: fagocitosis, defensa inmunológica
específica o inespecífica.
Existen dos grandes tipos de estos glóbulos:
Polimorfonucleares:
 Basófilos
 Eosinófilos
 Neutrófilos
Mononucleares:
 Linfocitos (células T y células B)
 Monocitos
El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangre
completa. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el
diagnóstico de enfermedades.
Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:
 Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor o cicatrización
anormal).
 Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso sistémico).
 Enfermedad del hígado o el bazo.
 Radioterapia o exposición a la radiación.
Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:
Frotis de leucocitos

Cuenta de leucocitos
Numero de leucocitos que se encuentra en un milímetro cúbico (un mililitro) de
sangre. Se expresa en miles de células/mililitro (“n” x 103/mm3), o de manera menos
frecuente, (“n” x 109/l).
Los leucocitos se distinguen de los eritrocitos por su gran tamaño, también porque
estos tienen núcleo, mitocondrias y otros organelos. Se van a encontrar en menor
cantidad que los eritrocitos, 7000 por mililitro cúbico en comparación de 4 a 5
millones de eritrocitos por mililitro. En un hombre promedio hay 75 mil millones de
leucocitos en total.
Una cuenta normal de leucocitos no descarta la posibilidad de una enfermedad.

 En el recién nacido de 10 a 26 mil/mm3

 A los 3 meses de 6 a 18 mil/mm3
 Al año de vida de 8 a 16 mil/mm3
 Entre los 3 y 5 años de 10 a 14 mil/mm3
 De los 5 a los 15 años de 5,5 a 12 mil/mm3
 En el adulto de 4,5 a 10 mil/mm3

Fórmula diferencial
También llamada “Recuento Diferencial” y es la proporción (tanto por ciento) de
cada tipo de leucocito.
Es la cantidad de cada uno de los tipos o población de leucocitos.
a) Granulocitos:

• Neutrófilos. • Eosinófilos. • Basófilos.

b) No granulocitos o agranulocitos:

• Monocitos. • Linfocitos.

Los granulocitos son llamados así porque al teñirlos presentan gránulos coloreados en
su citoplasma.

Puede obtenerse mediante aparatos automatizados y se expresará de la misma forma

que la cuenta de leucocitos. También se pueden observar 100 leucocitos en un frotis
mediante microscopía, en cuyo caso se obtiene un valor porcentual o relativo. Si hay
anormalidades en la cuenta de leucocitos y sólo se tiene un reporte relativo de la
cuenta diferencial, es necesario obtener un valor absoluto, ya que los valores
porcentuales, cuando la cuenta de leucocitos está aumentada o disminuida, pueden
ocasionar confusión e inducir al error. Esto ayudará para el diagnóstico de
enfermedades infecciosas, inflamatorias, procesos neoplásicos, leucemia, entre otros.
Revisión del frotis
Se hace un frotis sanguíneo.
Método longitudinal: En una lanceta estéril se hace una punción en el pulpejo del
dedo (meñique), se coloca una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.
Se coloca otro portaobjetos delante de la gota de sangre hasta que este toco con su
borde la gota de sangre, se desliza sobre toda la superficie del otro portaobjetos
donde se había colocado la sangre de manera que se obtenga una fina capa de sangre,
que sería el frotis.
Método Transversal: Sobre la gota se deja caer un segundo portaobjetos de tal manera
que la sangre se extendiera en forma rápida y uniforme. En el momento en que la
sangre deje de extenderse, se desliza paralelamente el portaobjetos superior con un
movimiento constante.

Posteriormente se agrego las sustancias para la tinción, con Wright. Usando Wrigth se
agregaro y se dejaro actuar por 3 minutos. Desapues se le mezclo con agua destilada
y se dejo secar la muestra y se aérea en forma de abanico.
En primer lugar se inspecciono la extensión sanguínea para seleccionar la región con
la mejor distribución de leucocitos. Los leucocitos se identificaron fácilmente por la
presencia de su núcleo teñido de morado.

No Granulocitos:
Linfocitos Núcleo redondeado que ocupa casi todo el glóbulo.

Monocitos Poco frecuentes

Granulocitos:
Neutrófilos Más abundantes. Granulaciones pequeñas y teñidas de azul pálido

Basófilos Menos abundantes. Granulaciones grandes y teñidas de color azul

Eosinófilos Poco abundantes. Granulaciones teñidas de rojo

REFERENCIAS
 Bramblia, Eduardo. Et al. Red de Revistas Científicas de América Latina, El Caribe, España y Portugal.
Bioquímica, Vol. 28, núm. 3, Julio-Septiembre 2003, pp. 4-12, México.
http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57611572002
 García, Flora. Et al. Utilidad de la Biometría Hemática en la Práctica Clínica. Leucocitos (Segunda parte).
Rev Sanid Milit México 2012. http://www.medigraphic.com/pdfs/sanmil/sm-2012/sm121g.pdf
 Mateo, Rafael. Análisis Clínicos de Rutina. Capítulo 8 La Cuenta de Leucocitos. México, 21 de Julio del
2006. http://www.mailxmail.com/curso-analisis-clinicos-rutina/cuenta-leucocitos
 UNAM, Facultad de Medicina. Biología Celular e Histología Médica, Unidad Temática 2. Departamento
de Biología Celular y Tisular. Curso 2011-2012. México.
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/Doc/Valores_normales-BH.pdf