MARIANNE

¿Qué es la tecnología del ADN recombinante?

ADN recombinante es una molécula que proviene de la unión artificial de dos fragmentos
de ADN. Por lo tanto, la tecnología de ADN recombinante es el conjunto de técnicas que
permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior manipulación e inserción en
otro diferente. De esta manera podemos hacer que un organismo (animal, vegetal,
bacteria, hongo) o un virus produzca una proteína que le sea totalmente extraña.

Estas técnicas se emplean normalmente para la producción de proteínas en gran escala, ya

que podemos hacer que una bacteria produzca una proteína humana y lograr una
superproducción, como en el caso de la insulina humana, que actualmente es producida por
bacterias en grandes recipientes de cultivo, denominados biorreactores. Como las bacterias
se multiplican muy rápidamente y pueden expresar grandes cantidades de proteínas, es
posible lograr una sobreproducción de la proteína deseada. A esto justamente se dedica la
biotecnología, es decir a la utilización de organismos vivos o de sus productos con fines
prácticos.

El desarrollo de la tecnología del ADN recombinante fue posible gracias a varias líneas de
investigación: 1) el conocimiento de las enzimas de restricción, 2) la replicación y
reparación de ADN, 3) la replicación de virus y plásmidos y 4) la síntesis química de
secuencias de nucleótidos.

Historia del ADN recombinante

La idea del ADN recombinante fue propuesta por primera vez por Peter Lobban, un estudiante
graduado del profesor Dale Kaiser en el Departamento de Bioquímica en la Escuela de Medicina de
la Universidad de Stanford.22 Las primeras publicaciones describiendo la exitosa producción y la
replicación intracelular del ADN recombinante aparecieron en 1972 y en 1973.23242526 La
Universidad Stanford aplicó para una patente de Estados Unidos para el ADN recombinante en
1974, enlistando a los inventores: Stanley N. Cohen y Herbert W. Boyer; la patente fue concedida
en 1980.27 La primera droga autorizada utilizando la tecnología de ADN recombinante fue la
insulina humana, desarrollada por Genentech y autorizada por Eli Lilly and Company.28

Expresión del ADN recombinante

Después del trasplante en el organismo huésped, el ADN foráneo contenido en la estructura del
ADN recombinante puede o no ser expresado. Significa que el ADN puede ser simplemente
replicado sin expresarse, o puede ser transcrito y traducido, causando que una proteína
recombinante sea producida. Generalmente, la expresión de un gen foráneo requiere que la
reestructura del gen incluya secuencias necesarias para producir una molécula de RNA mensajero
(ARNm) que pueda ser usada por el aparato de traducción del huésped (e.g. promotor, señal de
iniciación de traducción, y terminador transcriptional).6 Cambios específicos en el organismo
huésped pueden ser realizados para mejorar la expresión del gen ectópico. Además, se pueden
requerir cambios también en las secuencias de codificación, para optimizar la traducción, hacer la
proteína soluble, dirigir la proteína recombinante a su correcta localización celular o extracelular, y
estabilizar la proteína de la degradación.7

REBECA

Creación de ADN recombinante

La clonación molecular es un proceso de laboratorio usado para crear ADN recombinante.12

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Es uno de los dos métodos más utilizados, junto con la Reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), usada para dirigir la replicación de cualquier cadena de ADN específica
escogida por el experimentador. La diferencia fundamental entre ambos métodos, es que la
clonación molecular implica la replicación de ADN dentro de una célula viva, mientras que
PCR replica el ADN en el tubo de ensayo, sin células vivas.

La formación de ADN recombinante requiere un vector de clonación, una molécula de

ADN que se replica en una célula viva. Los vectores generalmente son derivados de
plásmidos o virus, y representan segmentos relativamente pequeños de ADN que contienen
señales genéticas necesarias para la replicación, así como elementos adicionales de
conveniencia para insertar ADN foráneo, identificando células que contienen ADN
recombinante y, cuándo y dónde sea apropiado, siendo capaz de expresar el ADN foráneo.
El tipo de vector que se utilizará para clonación molecular depende en la elección del
organismo huésped, el tamaño de ADN que será clonado y de la manera en la que el ADN
foráneo será expresado.5 Los segmentos de ADN pueden ser combinados usando una gran
variedad de métodos, como la restricción de clonación de enzima/ligasa o la Asamblea de
Gibson.

Procedimiento
El proceso de producción de un ADN recombinante comienza con la identificación desde un
organismo de una secuencia de ADN de interés con el fin de propagarlo en otro organismo que
carece de la secuencia y, por lo tanto, del producto protéico de esa secuencia de ADN. Así se
pueden producir cantidades ilimitadas de la proteína codificada por el susodicho gen. En
términos simples, el procedimiento consiste en:
-Localización de genes y sus funciones.
-Clonación del ADN, y su posterior almacenamiento en genotecas.
-Reacción en cadena de la polinerasa (PCR).
-Utilización de vectores de expresión.

Aplicaciones
sta técnica ha sido ampliamente utilizada en el campo de la medicina y ha permitido el
desarrollo de importantes avances terapéuticos como por ejemplo la producción de insulina
recombinante. Permite además la posibilidad de utilizar plantas y alimentos transgénicos, así
como microorganismos modificados genéticamente para producir fármacos u otros productos
de utilidad para el hombre, entre los que se pueden citar: la insulina humana, la hormona del
crecimiento, interferones, la obtención de nuevas vacunas o la clonación de animales. El uso de
ADN recombinantes puede también tener un impacto perjudicial que un uso inadecuado podría
provocar en el ser humano y en el propio planeta.Con el uso de ADN recombinante se ha
logrado obtener plantas transgénicas resistentes a insectos, hongos, bacterias y herbicidas, con
mejores características de calidad durante poscosecha y con alto contenido nutricional. También
ha permitido la clonación, expresión y producción mediante esta técnica de diversos antígenos,
por ejemplo, la vacuna contra la hepatitis B y la vacuna contra el virus del papiloma humano.

Los avances que se han producido en los últimos años han provocado una revolución respecto al
análisis de los genes humanos, no solo en relación al estudio del origen de las enfermedades y su
evolución en el tiempo, sino también en el campo del diagnóstico de la identidad individual, al
haber hallado en cada célula la huella genética de la persona para ello varias técnicas se han
destacado como la empleada por el proyecto genoma humano que ha causado gran controversia
¿Qué es la tecnología del ADN recombinante?
La tecnología de ADN recombinante es el conjunto de técnicas que permiten aislar un gen de un
organismo, para su posterior manipulación e inserción en otro diferente.