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INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

INGENIERIA EN SISTEMAS AMBIENTALES

PRACTICA 3

“DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE
POBLACIONES MICROBIANAS EN EL AIRE”
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL

EQUIPO NO. 3 Grupo: 5AM1

 Aparicio Almazán Brenda Guadalupe


 Vázquez Jiménez Mabel Jirivett

EQUIPO 1:

 Figueroa Casandra
 Miranda Patiño Astrid

PROFESOR(ES):
 M. en C. Gisela Boll Argüello
 M. en C. Claudia Paulina Dotor Vázquez
 Dra. Jane Castillo Vera

FECHA DE REALIZACIÓN: 22 de Febrero al 01 de Marzo del 2018

FECHA DE ENTREGA: 8 de Marzo del 2018


OBJETIVOS.

1. Cuantificar las bacterias mesofílicas aerobias, hongos filamentosos y microorganismos


coliformes presentes en el aire.
2. Medir las variables físicas para cada sitio de muestreo.
3. Correlacionar los resultados obtenidos.
4. Establecer un patrón temporal de distribución de los microorganismos de acuerdo a la
ubicación de los sitios de muestreo.

RESULTADOS.

En esta práctica se analizaron muestras de aire procedentes de las cascadas de Atlihuetzia en


Tlaxcala. El equipo 3 se ubicó en la estación 3 y el equipo 1 en la estación 1.

A 11 km de la capital tlaxcalteca, se ubica la "Cascada de Atlihuetzía", en el poblado del mismo


nombre, formada por el río Zahuapan que se precipita desde una altura de aproximadamente
30 m, formando en su caída una pequeña laguna, para después perderse entre la maleza.

Fig.1 Ubicación de la zona de muestreo para determinación cuantitativa de poblaciones microbianas en el aire. Cascadas de
Atlihuetzía.

Equipo 1 y 3 Laboratorio de Microbiología Ambiental Página 1


Se cultivaron muestras de aire con 3 diferentes tipos de agar (Caseina peptona almidon
extracto de levadura CPS-EL, Agar rosa de bengala ARB y Eosina azul de metileno EMB) a
dos diferentes alturas: 0 y 1.5m. Para la observación y cuantificación de bacterias mesofílicas
aerobias, hongos filamentosos y microorganismos coliformes.

Fig. 2 y 3. Cultivos inoculados para observación y cuantificación de bacterias mesofílicas aerobias (Agar CPS-EL, color beige transparente),
hongos filamentosos (Agar rosa de bengala, color rosa) y coliformes (Agar EMB, color guinda) presentes en el aire. Equipo 3.

Fig. 4 y 5. Colonias de Microorganismos coliformes en Agar EMB. De tipo E.Coli.


Equipo 3.

Fig. 8,9 y 10. Colonias de hongos filamentosos en


Agar rosa de bengala. Equipo 3.

Fig. 6 Y 7. Colonias de bacterias mesofílicas aerobias en Agar CPS-EL. Equipo 3.

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Fig.10. Cajas de Petri con agar caseína peptona almidón extracto
de levadura (CPS-EL), rosa de bengala (ARB) y eosina azul de
metileno (EMB). Equipo 2.

A continuación, se presentan los resultados obtenidos de la observación y cuantificación de


colonias en los cultivos antes mencionados para el grupo 5AM1.

CÁLCULOS

TABLA 1. Unidades formadoras de colonias (UFC)/5 min

Bacterias
Microorganismos Hongos
mesofílicas
ESTACION EQUIPO coliformes filamentosos
aerobias
(EMB) (ARB)
(CPS-EL)

0.0 m 1.5 m 0.0m 1.5 m 0.0 m 1.5 m

1 25 30.5 0 0 5.5 45
1
6 61 15 0 0 2.43 50

2 30 20 1 4 52 9
2
7 19 18 <1 <1 10 5

3 3 518 456 48 68 3 1.5

4 174 63.5 0.5 2.5 183 16.5


4
9 117 37 0 0 119 50.5

5 115 19 <1 <1 51 18.5


5
10 608 25 0 0 578 37.5

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Para calcular el área de exposición de la placa de medio de cultivo se utilizaron los siguientes
datos.

 El área de la placa de medio se calcula de la siguiente


manera:
D=8.6cm
𝑨 = 𝝅(𝒓𝟐 ) = (𝟑. 𝟏𝟒𝟏𝟔)𝒙 (𝟒. 𝟑𝟐 ) = 𝟓𝟖. 𝟎𝟖𝒄𝒎𝟐

Para obtener el numero promedio de Unidades Formadoras de Colonias de cada grupo


microbiano por metro cuadrado y tiempo (UFC/m2/1hora) se realizaron los siguientes calculos.

Ejemplo:

UFC por m2 en 5 min. NOTA

518 UFC 58.08 cm2 1 m2 = 10,000cm2

X 10,000 cm2 1 hora = 60 minutos

(10000𝑐𝑚2 𝑥518)
𝑋= = 𝟖𝟗𝟏𝟖𝟕. 𝟑𝟐𝟕𝟖 𝑼𝑭𝑪⁄𝒎𝟐 𝒆𝒏 𝟓 𝒎𝒊𝒏.
58.08𝑐𝑚2

UFC por m2 en 1 hora.

89,187.3278 UFC 5 min.

X 60 min.

(60 min. 𝑥 89187.3278)


𝑋= = 𝟏. 𝟎𝟕𝟎𝟐𝟒𝟕 𝒙 𝟏𝟎𝟔 𝑼𝑭𝑪⁄𝒎𝟐 /𝟏 𝒉𝒐𝒓𝒂
5 𝑚𝑖𝑛.

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A continuación, se presentan los resultados obtenidos de UFC/m 2/1hora en los cultivos antes
mencionados para el grupo 5AM1.

TABLA 2. Unidades formadoras de colonias (UFC)/m2/1 hora


Estación

Equipo

Bacterias Mesofílicas Aerobias Microorganismos


Hongos filamentosos (ARB)
(CPS-EL) Coliformes (EMB)

0m 1.5 m 0m 1.5 m 0m 1.5 m

1 5.10204x104 6.301 x 104 0 0 1.13636x104 9.29752x104


1
6 2.1433x103 3.09917x104 0 0 5.0206x103 1.033057x105

2 6.19834x104 4.13223x104 2.0661x103 8.2644x103 1.07438x105 1.8595x104


2
7 3.9256x104 3.7190x104 0 0 2.06611x104 1.03305X104

3 3 1.070247X106 9.421487X105 9.91735X104 1.40495X105 6.1983X103 3.0991X103

4 3.59504X105 1.311979X105 1.033X103 5.1652X103 3.78099X105 3.40909X104


4
9 2.41735X105 7.64462X104 0 0 2.45867X105 1.04338X105

5 2.376033X105 3.925 x 104 0 0 1.05371X105 3.82231X104


5 5.1652 x 104
10 1.256198X106 0 0 1.194214X106 7.74793x104

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En las siguientes grafica se muestran los UFC/m2/1 hora obtenidos para las bacterias
mesofílicas aerobias, microorganismos coliformes y hongos filamentosos calculadas en la
Tabla 2 vs Estacion de monitoreo.

Grafica 1. UFC/m2/hora. obtenido de cultivos de Bacterias mesofílicas aerobias a 0 y 1.5m vs Estación de monitoreo.

Grafica 2. UFC/m2/hora. obtenido de cultivos de microorganismos coliformes a 0 y 1.5m vs Estación de monitoreo.

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Grafica 3. UFC/m2/hora. obtenido de cultivos de hongos filamentosos a 0 y 1.5m por equipo estación de monitoreo.

A continuacion se muestran los resultados de las mediciones de las variables fisicas del aire
en los sitios de monitoreo del grupo 5AM1.

TABLA 3. Medición de las variables físicas del aire.

Estación Equipo Temperatura Velocidad del Dirección del


°C viento (𝒎⁄𝒔) viento

1 18 1.6-3.3 Oeste- Este


1
6 18 5.5-7.9 Oeste- Este

2 18 1.6-3.3 Sur-Norte
2
7 18 1.6-3.3 Sur-Norte
3 19 1.6-3.3 Oeste- Este
3
8 19 1.6-3.3 Oeste- Este
4 23 1.6-3.3 Sur-Norte
4
9 23 1.6-3.3 Sur-Norte
Noroeste-
5 20 5.5-7.9
5 Suroeste
Noroeste-
10 20 5.5-7.9
Suroeste

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En la siguiente grafica se muestra la temperatura vs estacion de monitoreo, para visualizar
como varia según la zona donde se evaluaron.

Equipo
25 23 23

20 20
20 19 19
18 18 18 18
Temperatura °C

15

10

0
1 6 2 7 3 8 4 9 5 10
EQUIPO

Equipo Linear (Equipo)

Grafica 4. Temperatura vs Equipo del grupo 5AM1

DISCUSIÓN.

La cascada de Atlihuetzia es conocida por poseer una caída de agua espectacular, sin
embargo, es una zona que tiene altos índices de contaminantes provenientes de la zona
industrial Xicohténcatl, así como las descargas, sin ningún tratamiento previo, de municipios
cercanos como es el caso de Tlaxco que desemboca en el río Zahuapan. El muestreo para la
cuantificación de bacterias mesofílicas aerobias, microorganismos coliformes y hongos
filamentos se llevó acabo en esta zona; al exponer las cajas Petri a la intemperie por cinco
minutos se logró el cultivo de los microorganismos esperados lo que nos muestra que la
atmosfera es de suma importancia como transportadora de organismos.

Se estudiaron estos tipos de microorganismos por sus características bioquímicas en común


e importancia relevante como indicadores de contaminación.

Para la estación 3 “La Cascada” la caída de agua era constante y rápida, esto hacía que el
agua que bajaba cayera en las rocas y dispersara el agua a considerables distancias. Debido
a esto se dejaba en menor tiempo las cajas de cultivo que en otras estaciones (1 min).

Podemos decir que esperábamos que las estaciones tuvieran un gran índice de contaminación
debido a que el agua parecía de procedencia residual.

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En la estación 2, en donde se encuentra el inicio de la cascada, se puede observar que tanto
a una distancia de 0.0m del suelo así como a una más elevada de1.5m la presencia de
Bacterias mesofílicas aerobias fue baja esto pudo haber sido consecuencia de la temperatura
en la que nos encontrábamos al tomar las muestras, ya que las Bacterias mesofílicas aerobias
son afines a temperaturas que van de los 25° a los 35°.

En contraste, con la estación 3 y la estación 5 las bacterias mesofílicas se encontraron en


abundancia ya que estos microorganismos se ven beneficiados por la temperatura que fue
mayor que los 20° y también por la velocidad del viento que en el caso del equipo 5 y 10 fueron
los que obtuvieron una velocidad mayor en el viento.

Los microrganismos coliformes fueron los que en general, todos los equipos obtuvimos un
promedio muy bajo a comparación con la estación 3 en el cual obtuvieron una cantidad grande
de colonias tanto a distancia de 0.0m como a una distancia de 1.5m, esta estación fue
beneficiados por la brisa ligera que ofrece la cascada, así como la temperatura.

Por otro lado los Hongos filamentosos estuvieron presentes en todas las muestras de los diez
equipos, este tipo de microorganismos se reproducen por la formación de esporas y se
caracterizan por presentar un crecimiento rápido a temperaturas de 25°C .El valor más alto fue
en la estación 5 del equipo 10, las esporas de los hongos son transportadas por el aire por lo
tanto en la estación 5 la velocidad de viento fue muy alta en comparación con el resto de los
equipos beneficiando la reproducción de hongos en esa zona.

En contraste la estaciones 2, 5 y 8 eran estaciones de muestreo donde la temperatura era


mayor, no había una cascada que proliferara el movimiento y transporte de microorganismos,
había un cuerpo pequeño de agua. Eran lugares con mucha vegetación y con altos pastizales
secos color paja muy expuesta a la luz solar.

La amplia variación de los sistemas (ecosistemas cálidos, fríos, templados, entre otros) refleja
la diversidad microbiana.

Las bacterias mesofílicas aerobias son microorganismos que viven en presencia de oxigeno
libre, se desarrollan a Temperaturas Mesófilas (25 a 35°C) y se reproducen en Aerobiosis. Por
esta razón en todas las estaciones 3, 4 y 5 hubo presencia alta de estas bacterias debido a la
temperatura optima para su desarrollo (19-20°C), a comparación de las estaciones 1 y dos
donde la temperatura registrada fue más baja (18°C).

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CONCLUSION.

 Es posible cuantificar poblaciones microbianas como las bacterias mesofílicas aerobias,


hongos filamentosos y microorganismos coliformes presentes en el aire cuando estos
son expuestos a un medio de cultivo favorable para su desarrollo.
 El ambiente aéreo no es un ecosistema, únicamente un medio de dispersión pasiva
para los microorganismos.
 Las variables temperatura, dirección y velocidad del viento determinan de forma directa
la cuantificación de microorganismos en el aire.
 El grupo microbiano más abundante es el de bacterias mesofílicas aerobias.

CUESTIONARIO.

1. ¿Por qué los cambios de temperatura son tan drásticos en el aire?

 Los cambios de temperatura varían dependiendo la altitud de la zona donde se mida la


misma, la distancia que tengan con respecto a un manto acuífero, el si hay o no árboles,
la posición del sol y la fluidez del viento, en algunas referencias marca que el cambio de
temperatura del aire cambia respecto a la altura que tenga del suelo de 0m a 1.25m ya
existirá un cambio gracias a que el sol calienta todo y dentro del todo está el aire y como
este es una mezcla de gases tienden moverse y hacer una dispersión del mismo debido
al aumento de su energía cinética y al haber más colisiones dentro de la mezcla de gases,
la cantidad de sol que tenga la zona de registro de la temperatura, la fluidez del aire, y la
humedad relativa que se encuentra sobre el mismo serán los factores que produzcan la
variación en los cambios de la temperatura.

2. ¿Qué nos indica la presencia de microorganismos en el aire?

 Época de reproducción: como es el caso de los hongos ya que son mas abundantes en
verano por que se tienen las condiciones apropiadas para su diseminación al igual las
bacterias en donde se encuentran en mayor abundancia en primavera u otoño.
 Otro factor que nos indica el numero de microorganismos es la contaminación por
acción del hombre en donde se tiene que hacer un conteo cualitativo y cuantitativo de
los organismos que se encuentran en el ambiente para determinar por cuanto y cuales
microrganismos se está presentando dicha contaminación.

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3. ¿Cómo explica que los hongos puedan desarrollarse en cualquiera de los medios
empleados en la práctica?

 Los hongos típicamente son aerobios y saprófitos, es decir, se alimentan de materia


orgánica en descomposición. Estos organismos son capaces de utilizar una amplia
variedad de sustancias orgánicas complejas como fuente de alimento y son mucho más
tolerantes a las condiciones ácidas que los demás microorganismos. A excepción de
las levaduras, cuya reproducción es por esporas sexuales o asexuales.

BIBLIOGRAFIA.

 R. Campbell, Ecología microbiana, Universidad de Bristol. Ed, Limusa. México 1987.

 Richard Bartha, Ecología Microbiana y Microambiental, Editorial Addison-Wesley


2001.consultado en : https://abtetsei.firebaseapp.com/7/Ecologia-Microbiana-Y-
Microbiologia-Ambiental.pdf

 Madigan, Martinko, Biología de los microorganismos Pearson 2009, Edición 12ª.


Consultado en: https://www.fiuxy.bz/threads/brock-biologia-de-los-microorganismos-
12-edicion.4058891/

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