PREINFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO DE BIOLOGIA

Práctica n° 05 DIVERSIDAD MICROBIANA

Edgar Mauricio Cardozo Vera, Ingrid Massiel Hernández VargasYudy Andrea
Leguizamo Cayachoa, Daniela Camacho González, Daniela Alejandra

Universidad Nacional Abierta y a Distancia. Escuela de Ciencias Básicas,

Tecnología e Ingeniería - ECBTI. Programa de Química. CEAD: ACACIAS -
YOPAL. LABORATORIO YOPAL- Colombia. Tutor de laboratorio: Fredy Sandoval

Fecha de CEAD de
entrega entrega
Grupo de Correo electrónico
Estudiante Correo electrónico estudiante Código
campus tutor campus
Edgar
CAED ejemplo23@unad.edu.
Mauricio ecardozo@corpoica.org.co 86069886
ACACIAS co
Cardozo Vera
Ingrid Massiel
CAED ejemplo25@unad.edu.
Hernandez Massyhernandez3@gmail.com 1118125481
YOPAL co
Vargas,
Andrea
CAED ejemplo36@unad.edu.
Leguizamo andreacayachoa@hotmail.com 1057582071
YOPAL co
Cayachoa
Daniela
danielacamachogonzalez@gm CAED ejemplo89@unad.edu.
Camacho 1007207049
ail.com CUBARA co
Gonzalez
Daniela Danielaalejandra71@hotmail.c CAED ejemplo89@unad.edu.
Alejandra om CUBARA co

1. OBJETIVOS

1.1. GENERAL

 Identifiar bacterias Gram positivas y Gran negativas

 Observar microorganismos de fermentación ácido láctico y fermentación alcohólica
apartir del yogurt.
 Observar microscópicamente mohos y levadura
 Reconocer en placas de cultivo diferentes tipos de microorganismos, de bacterias y
hongos
  Conocer y aplicar la técnica de tinción de Gram

1.2. ESPECÍFICOS

 Reconocer cada uno de los proceso que se lleva a cabo en el

laboratorio
 Capacidad de identificar las bacterias hongos y hongos

2. MARCO TEÓRICO
La tinción de Gram, también conocida como coloración de Gram, es una
técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios
microbiológicos de las bacterias. Fue diseñada por Christian Gram, un
científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram era conseguir una
prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias
para así poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba resultó todo un éxito y
pronto se convirtió en una técnica muy útil no solo para el estudio de las
bacterias, sino también para poder identificarlas rápidamente en una
infección y seleccionar el antibiótico más adecuado para tratarla.
La técnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de
cualquier origen (esputo, orina, pus, etcétera) que supuestamente contenga
bacterias no identificadas

Lactobacillu acidophilus se puede encontrar formando parte de la flora normal de

las mucosas corporales. Ésta especie es capaz de vivir en ambientes muy ácidos,
hecho que le hace responsable de las etapas finales de la fermentación ya que otros
BAL no pueden soportar estas condiciones. Respecto a su metabolismo produce
exclusivamente ácido láctico a partir de la lactosa.

Streptococcus thermofilus se encuentran en el aparato gastrointestinal humano y

puede soportar altas temperaturas, ésta característica es una ventaja para la
producción de yogur puesto que los procesos requieren llevar la leche a altas
temperaturas.

Lactobacillus bulgaricus fermenta la leche para producir acetaldehído provocando

una bajada del pH que coagula la leche mediante la desnaturalización de sus
proteínas y creando así el aroma característico de yogur. Estas bacterias crecen
mejor en ambientes ácidos. Son utilizadas para producir diferentes tipos de yogur.

 Levaduras: Son hongos unicelulares, redondos o elipsoides que se repoducen

por gemación o fisión binaria. La gemación es la protusión externa del
protoplasma materno formando un saliente (yema o gema), que va creciendo poco
a poco y, finalmente, se desprende cnvirtiéndose en un nuevo individuo. En alguno
casos permanecen unidas distintas gemas alrededor de la célula madre y, en otro,
la gema sigue creciendo a su vez porduciendo nuevos bortes y dando la imagen
de seudomicielio formado por blastoconidias. Una levadura también puede ser el
estadio morfológico en el cilo biol´gico de una espeie filamentosa; a este hecho se
 le denomina "dimorfismo" y al hongo "hongo dimórfico". También existe la
situación inversa: una levadura puede tener capacidad de producir hifas como
ocurre con Candida albicans.
 Mohos: Son hongos multicelulares. El elemento tubular que emerge se denomina
"hifa"; éste sigue creciendo y ramificándose, formando un conjunto entrelazado al
que se denomina "micelio" o thallus. Parte de las hifas se introducen en el sustrato
y forman el micelo vegetativo, las que se proyectan hacia el exterior constituyen el
micelo aéreo, que puede presentar microscópicamente un aspecto algodonoso,
velloso, mate, plegad, etc... Estas características fenotípicas sirven para una
aproximación taxonómica en la identificación. En el se producen los elemento de
propagación que pueden ser esporas, conidios, fragemento de micelio, etc. En
micología médica y microbiología a este conjunto visible sobre el medio de cultivo
se le denomina colonia

3. MATERIALES, REACTIVOS Y PROCEDIMIENTO

OBSERVACION
DE BACTERIAS

BACTERIAS DE LA GLADULA BUCAL

REPARAR LAMINA PARA OBJETOS

OBSERVACION
TOMAR LA MUETRA
DE BACTERIAS

COLOCAR SOBRE UNA LAMINA

POTAOBJETOS

SECADO

POR UNOS MINUTOS

POR SI SOLA
TOMAR LA MUESTRA

FIJAR EL FROTIS PASAR LENTAMENTE POR LA LLAMA

DEL MECHERO
 COLOCAR CON LA TINCION GRAM

1° EL OBJETO DE MENOR
OBSERVAR AUMENTO 2° COMERCIONN
EL OBJETO DE INMERCION

OBSERVACIONES

COLORACION
DE GRAM

CUBRIR CON CRISTAL VIOLETA LA MUESTRA DURANTE UN

MIN. LAVAR CON AGUA

DEJAR ACTUAR POR UN

CUBRIR CON LUGOL
MIN.LAVAR CON AGUA

ACTUAR POR 15seg

AGREGAR ALCOHOL LAVAR CON AGUA

DEJAR ACTUAR 30seg

ADICIONAR FUCSINA
LAVAR CON AGUA

OBSERVAR CON EL MICROSCOPIO.

LOCALIAZAR BACTERIAS CON EL OBJ MENOR COLOCAR UNA PEQUEÑA
AUMENTO. OBSERVAR OBJ 100X GOTA DE INMERCION

SEGÚN SU FORMA
CLACIFICAR LAS BACTERIAS
AGRUPACION Y TINCION

FIJAR EL FROTIS
 OBSERVACIONES

BACTERIA DE
YOGURT

COLOCAR GOTA DE AGUA DESTILADA

LAMINA PORTA OBJETOS

REPARAR LAMINA PARA OBJETOS

MEZCLAR GOTA DE
COLOCAR SOBRE UNA LAMINA YOGURT Y AGUA CON
POTAOBJETOS UNA ASA DE ARGOLLA

DEJAR SECAR LA LÁMINA PASAR 3 VCS POR LA

LLAMA DEL MECHERO

POR UNOS SEGUNDOS

CUBRIR LA PREPARACION PARA ELMINAR GRASA

CUBRIR CON AZUL DE

ESCURRIR Y DEJAR AL AIRE
METILEDNO 2MIN

IDENTIFICAR LAS
ENFOQUE CON MICROSCOPIO
BACTERIA
 OBSERVACIONES

OBSERVACIONES DE
HONGOS

AGREGUE 20 GOTAS A
UNA TAJADA DE PAN,
PREPARAR UNA SOLUCION
DEJAR MEDIA HORA AL
AZUCARADA
AIRE LIBRE

ALMACENAR EN
BOLSA PLASTICA LUGAR OSCURO
A 30°C OBSERVAR
DIARIAMENTE

APLICAR UNA SOLUCION AZUL DE

LACTOFENOL

TOCAR LA SUPERFIE CON CINTA

ADESCIVA TRANSPARENTE

PEGARA L CINTA SOBRE LA GOTA

DEL PORTA OBJETOS

OBSERVAR IDENTIFICAR EL
MICELIO HIFAS CUBRIR CONDEAZUL
OBJETIVO 10X DE
Y
METILEDNO
40X 2MIN
 OBSERVACIONES

OBSERVACION
DE LEVADURA

(LEVADURA DE
COLOCAR EVADURA EN UN TUBO DE PANADERIA , EN TUBO
ENSAYO DEBE CONTENER AGUA
AZUCARADA

INCUBAR 37°C DURANTE 15 MIN

COOCAR UNA GOTA EN EL

PORTAOBJETO

ADICIONAR 2 GOTAS DE AZUL

DE LACTOFENOL

ELIMINAR EL EXCESO DE
COLOCAR EN UNA LAMINILLA COLORATE CON PAPEL
ADSORVENTE

IDENTIFICAR LEVADURA
OBSERVAR MICROSCOPIO 10X Y POR SU FORMA OVALADA
40X

OBSERVACIONES
5. REFERENCIAS

https://microral.wikispaces.com/5.+Micolog%C3%ADa+general.
https://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram-
13399