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Introducción
La Microbiología Industrial se ocupa de producción de bienes y servicios
con células microbianas. Por lo tanto la Microbiología Industrial representa
una parte, seguramente la más importante, de la Biotecnología. La
Ingeniería genética comprende una serie de técnicas que permiten obtener
un organismo recombinante, o sea portador de un gen extraño proveniente
de otras células, sean éstas microbianas, vegetales o animales.
Los microorganismos pueden ser considerados en términos generales con
dos criterios que son antagónicos. Uno corresponde a las actividades
útiles que tienen algunos para obtener bienes o servicios y otro
completamente distinto corresponden a los efectos perjudiciales que
ocasionan que están generalmente asociados a la producción de
enfermedades, tanto en el hombre como en los animales, y que también
se pueden extender al deterioro producido sobre alimentos y materiales
diversos.
La microbiología industrial está dedicada a la utilización comercial de
microorganismos e incluye procesos que tienen gran importancia
económica, ambiental y social; va encaminada a tres grandes áreas:
Servicios, como eliminación de residuos, producción de sustancias de
interés económico y análisis, en el desarrollo de biosensores. Es decir, la
Microbiología Industrial trata de utilizar microorganismos para que
produzcan compuestos o realicen funciones que sean útiles desde un
punto de vista aplicado. Comprende el cultivo de microorganismos para su
propia producción como alimento y para la producción y transformación de
fármacos, alimentos, disolventes orgánicos, etc.
Para poder utilizar microorganismos en procesos aplicados debemos
conocer los principios básicos del funcionamiento celular y del cultivo
controlado de microorganismos. Para cada producto o transformación
concreta será necesario, además, determinar qué microorganismo es el
más adecuado para llevarlo a cabo.
En Microbiología Industrial se utilizan los términos fermentación y
fermentaciones industriales, para caracterizar a los procesos o tecnologías
basados en el uso de microorganismos. El término "fermentación", que
deriva del latín fermentar (hervir), inicialmente reservado a la actividad
Microbiología Industrial 2
Objetivos:
Entender y comprender las definiciones y áreas de aplicación de la
microbiología industrial así como las fases y tipos de fermentaciones
industriales.
Marco Teórico
Historia:
La historia de la microbiología industrial es muy amplia; se desarrolla en
muchos escenarios y en las manos de grandes maestros de la
investigación. Es sorprendente conocer la forma en que los seres
humanos incursionaron en el mundo microscópico y como, a partir de ese
momento, el desarrollo de esta área de la microbiología crece a un ritmo
cada vez mayor.
Muchos investigadores han contribuido al desarrollo de la microbiología
industrial; sin embargo, el francés Louis Pasteur es considerado el más
exitoso, por sus relevantes aportes, principalmente, en el campo de los
alimentos y en el de la medicina (con el descubrimiento de los
microorganismos causantes de ciertas enfermedades y la forma de
controlarlos). Con base en las investigaciones de Pasteur, se estudiará la
historia de microbiología industrial.
En la antigüedad no se sabía de la existencia de los microorganismos sin
embargo el primer producto originado de estos fue la cerveza alrededor
del año 6000 a.C. en la civilización sumeria. En el año 4000 a.C. Los
egipcios utilizaron la levadura de la cerveza para esponjar el pan, por su
capacidad para producir dióxido de carbono (CO2). En el año 2000 a.C. se
origina el queso incluso es mencionado en el antiguo testamento. Para el
siglo XVI a.C. el hombre sabía elaborar y destilar bebidas alcohólicas. En
el año 1700 los avances del campo fueron lento pero significativos entre
ellos se puede citar la producción de yogur, vinagre y otros alimentos
fermentados, provenientes de la cultura oriental principalmente. En 1663
el biólogo holandés Antony Van Leeuwenhoek invento el microscopio y se
descubre gracias a esto la existencia de microorganismos.
Microbiología Industrial 3
Fermentación industrial:
Proceso realizado en un fermentador o biorreactor, mediante el cual
determinados sustratos que componen el medio de cultivo son
transformados por acción microbiana en metabolitos y biomasa.
La fermentación es un proceso de oxidación incompleto, siendo el
producto final un compuesto orgánico. Estos productos finales son los que
caracterizan los diversos tipos de fermentaciones.
Medios de Cultivo:
Los medios de cultivo usados para hacer crecer los microorganismos han
de tener todos los elementos necesarios en la forma y las proporciones
adecuadas para la síntesis de material celular y la producción de
metabolitos. En un laboratorio se pueden usar productos químicos, de
composición conocida, para la obtención de medios de cultivo, que son
medios sintéticos, pero en las fermentaciones industriales los medios han
de ser lo más baratos posibles. En microbiología industrial raramente se
usan medios óptimos, equilibrados o definidos, sino que en muchos casos
los medios usados están formados a partir de subproductos de otras
industrias. Serán medios muy variados en su composición, nunca óptimos
ni equilibrados, ni mucho menos definidos. Esto presenta una serie de
consecuencias sobre el desarrollo de los organismos y sobre el control de
la fermentación.
Un medio de cultivo óptimo y más o menos equilibrado es obligatorio
para conseguir la máxima producción. Es necesario por lo tanto
optimizar los medios industriales, lo que no es tarea fácil, teniendo
en cuenta los ingredientes de los que se parte, muy complejos y
variables. Los medios de cultivo industriales pueden optimizarse
usando métodos estadísticos, mediante programas diseñados con
ordenador. En caso de ser necesario pueden añadirse suplementos
de elementos críticos ausentes o insuficientes en el medio.
Prospección y mejora
En el momento de fabricar un producto o proporcionar un servicio, se ha de
encontrar un microorganismo que permita realizar este proceso. A excepción de
algunos productos de la industria alimentaria, donde se usan cepas silvestres,
en la mayoría de los casos, es necesario buscar microorganismos y después
mejorarlos. El protocolo clásico que se ha de seguir para realizar la mejora
deseada consta de 3 pasos: prospección, selección y mejora.
Características generales
Como resulta evidente, el principal factor implicado en el éxito o fracaso de un
proceso de fermentación es el microorganismo. Una cepa económicamente
rentable deberá cumplir una serie de atributos generales, independientemente
del proceso en que esté implicada.
Tiene que estar disponible en cultivo puro, libre de otros organismos.
Tiene que ser capaz de producir fácilmente células vegetativas y/o
esporas u otras unidades de propagación, para aumentar su valor.
Tiene que crecer vigorosamente una vez introducida en el fermentador,
ya que no todos los organismos crecen adecuadamente en volúmenes
grandes, y usar sustratos baratos.
Tiene que formar un producto conveniente, preferiblemente uno solo,
fácilmente recuperable y, si es posible, en ausencia de productos
colaterales tóxicos.
Tiene que producir la sustancia deseada en un tiempo corto, a ser posible
menor a 3 días.
Es mejor si tiene protección contra posibles contaminaciones, ya sea por
crecer a pH ácido, o a elevadas temperaturas,...
Tiene que ser modificable, mejorable mediante agentes mutagénicos,
pero ha de ser genéticamente estable en ausencia de éstos.
Tiene que ser fácilmente conservable en períodos largos de tiempo.
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Prospección
Los microorganismos pueden aislarse a partir de:
Colecciones tipo o similares. Las colecciones de cultivos actúan como
fuentes de cepas de referencia o como lugares de depósito de cultivos.
Los cultivos de interés industrial se conservan permanentemente. Los
cultivos de investigación acabados de descubrir se guardan hasta
descubrir aplicaciones futuras.
De la naturaleza. Si no se encuentra nada en las colecciones tipo, se
puede pasar a buscar en la naturaleza. Siempre es necesario buscar con
criterio. Para encontrar organismos poco corrientes, es necesario buscar
en nichos ecológicos poco corrientes. Las fuentes más comunes de los
microorganismos industriales son suelos, lodos, lagos y ríos.
La búsqueda de fuentes de microorganismos es tan solo un primer paso del
proceso de prospección. Al buscar se encuentran cepas salvajes, de las cuales
alguna puede tener interés, mientras que otras no lo tendrán. Una vez se tienen
algunas muestras, se han de seleccionar las que tengan interés. Se han de
realizar en primer lugar una serie de métodos de enriquecimiento para aislar los
microorganismos más infrecuentes y débiles, y potencialmente útiles. Se realiza
entonces un proceso de selección primaria, que es únicamente un test
cualitativo, para saber si cumple la función deseada. Generalmente se hace en
medio sólido.
Selección
Una vez realizada la prospección tendremos cientos de cepas, de las cuales solo
mantendremos unas decenas después de la selección primaria. La selección
primaria está diseñada para aislar organismos potencialmente interesantes. La
selección primara ideal debe cumplir una serie de requisitos.
Predictiva: Barata
Sensible: Adaptable a un número elevado de muestras
Rápida: Específica para las actividades deseadas
La selección primaria en placa permite detectar rápidamente microorganismos
potencialmente interesantes, pero tiene como limitación el hecho de que se hace
en medio sólido, mientras que para el crecimiento usaremos medio líquido.
Deberemos hacer por lo tanto una selección secundaria, donde se valorará la
producción deseada, a nivel cuantitativo. Generalmente se hace en medio
líquido, con las condiciones que habrá en el fermentador, para determinar la cepa
que producirá más, no la que producirá más rápido. También permitirá ver la que
crecerá mejor en el fermentador y la facilidad de separación del producto.
Mejora
Una vez tenemos el organismo que forma el producto de interés en elevada
cantidad, es necesario conseguir que sea capaz de producirlo a nivel industrial.
Se ha de incrementar la productividad de la cepa seleccionada, lo que puede
conseguirse de dos maneras:
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Esterilización
Para una buena rentabilidad, en virtualmente todos los procesos, será necesario
que en todas las etapas estén libres de contaminantes. También depende, no
obstante, del campo en que nos estemos moviendo.
En el campo medio ambiental, hablar de esterilización no tiene mucho sentido,
mientras que en el campo alimentario será esencial. Generalmente, la necesidad
de un proceso de esterilidad está en relación con el valor añadido del producto.
La probabilidad de que exista contaminación a lo largo del proceso depende de
las características del mismo. La probabilidad de que exista contaminación en
un cultivo mesófilo es mayor que en un cultivo termófilo. También será más
probable que exista contaminación en un medio con pH aproximado a 7, más
que a pH ácido. La probabilidad de que haya contaminación será mayor en los
que consuman mucho oxígeno, que en los que consuman menos.
Llegado a este punto hemos de plantear la optimización del proceso a nivel de
producción, sino a nivel de seguridad. Si se puede ajustar el pH hacia abajo,
mejor, que será más seguro.
El biorreactor:
Una vez tenemos el medio y conocemos la cinética de la fermentación,
necesitamos el contenedor donde se realizará la fermentación en sí.
El biorreactor es todo aquel recipiente donde tiene lugar un proceso
industrial hecho por microorganismos. Llegado el momento de decidir o
diseñar el fermentador a usar, se han de tener en cuenta unas
características:
Relaciones geométricas: Hasta los 3000 litros los fermentadores pueden
ser constituidos uniformemente, pero a partir de aquí las propiedades
físico químicas del fermentador varían a medida que aumenta el volumen.
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introducir sustrato fresco. Las células que quedan actúan como inóculos.
Aunque teóricamente es el régimen de trabajo ideal, presentan numerosos
inconvenientes técnicos. Estos inconvenientes son, entre otros, que sólo
podemos conocer el nivel de crecimiento del microorganismo, y ciertos
productos sólo se sintetizan en la fase estacionaria, por lo que no sabemos
cuándo se habrá alcanzado el nivel de producción deseado. Además, las
condiciones óptimas para el crecimiento y para la producción serán
diferentes, lo que complica aún más el proceso.
Tipos de biorreactores
De lecho fijo o empaquetado. Los microorganismos se encuentran en una
matriz empaquetada. Por lo general, la alimentación se produce de forma
vertical en sentido ascendente.
En columna de burbujas. El sustrato es el medio líquido en el que están
inmersas las células, aportándose éste por la parte inferior del reactor. Se
insufla gas comprimido por la parte inferior que, junto con una serie de
bucles externos, permite homogeneizar el interior del reactor, suprimiendo
posibles gradientes.
De lecho fluidizado. No son muy corrientes, dados su alto coste y
complejidad. El microorganismo permanece suspendido (debido a
burbujeo continuo, lo que no es fácil de conseguir) en el fermentador,
como consecuencia del sustrato líquido ascendente.
De lecho de goteo. Son los más tradicionales (similares a los de lecho
fijo). El sustrato se hace pasar lentamente por la matriz empaquetada que
contiene al microorganismo (un proceso semicontinuo, aunque permiten
trabajar también en discontinuo), lo que supone la consideración de un
tiempo de residencia en dicha matriz.
De enzimas o células inmovilizadas. Son los más interesantes y
novedosos. Los de enzimas presentan grandes ventajas, pero es difícil
aislar la enzima que nos interesa. Permiten reutilizar continuamente el
biocatalizador, disminuyendo los costes. Dicha inmovilización puede
efectuarse por medios físicos (adsorción, el más usado, o atrapamiento
mecánico en matriz o membrana) o químicos (enlaces covalentes).
Presentan el inconveniente de que, dado que las células pueden participar
en varios procesos fermentativos, aumenta la inestabilidad genética.
Tipos de fermentaciones:
Fermentaciones no alcohólicas:
Panadería (Fermentaciones por levaduras de panadería).
Vegetales (encurtidos en general).
Ensilado (Fermentación de forraje).
Fermentaciones alcohólicas:
Vino (Fermentación alcohólica).
Cerveza.
Sidra.
Destilados.
Vinagre (Transformación de alcohol en ácido acético por fermentación con
Acetobacter).
Fermentaciones cárnicas:
Embutidos crudos, curados (Salami, chorizo español, etc.)
Jamón serrano (Producto curado).
Productos de pescado fermentado (Fermentación en filetes de pescado
ahumado).
Fermentaciones lácticas:
Leches fermentadas en general.
Yogurt (fermentación de leche con microorganismos acidificantes: Lactobacillus).
Quesos (Fermentación con determinados cultivos bacterianos inoculados).
Bebidas lácticas alcohólicas (Kéfir).
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Sistemas de fermentación
Procesos discontinuos
Los cultivos discontinuos pueden considerarse como un sistema cerrado excepto
para la aireación, contiene una cantidad limitada de medio, en el que el inoculado
pasa a través de un número de fases, el sustrato se añade al comienzo de la
fermentación.
Procesos continuos
Las fermentaciones continuas pueden considerarse como un sistema abierto en
que el medio se va añadiendo continuamente al biorreactor y se va eliminando
simultáneamente igual volumen de medio fermentado.
TI UPSTREAM: Comprenden la selección y preparación del microorganismo, la
preparación del medio de cultivo y las condiciones de fermentaciones (cultivo).
DOWNSTREAM: Incluyen la del producto y el tratamiento de los residuos de la
fermentación, purificación.
Ejemplo:
En el proceso de fermentación del mosto de uva para producir vino podemos
distinguir:
Procesos Upstream: Selección y preparación de cepas de levadura,
tratamiento del mosto y acondicionamiento de las condiciones de fermentación.
Procesos Downstream: Tratamiento del vino para su clarificación y el de los
residuos del procesos.
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Conclusión
La Microbiología Industrial se ocupa fundamentalmente de las actividades
útiles de los microorganismos. La Microbiología Industrial puede definirse
diciendo que es la parte de la Microbiología que se ocupa de las
aplicaciones industriales de los microorganismos. Desde otro punto de
vista puede decirse también que los procesos de la Microbiología Industrial
constituyen aquellos procesos industriales catalíticos basados en el uso
de microorganismos. Con el notable impulso de la Biotecnología producido
en los últimos años y la inclusión y difusión de otros términos como
biotecnología de avanzada, biotecnología moderna, biotecnología de
punta, biotecnología recombinante o tecnología del DNA recombinante,
biotecnología e ingeniería genética, biotecnología y microbiología
industrial.
Un proceso de fermentación típico es esencialmente un proceso que se
lleva a cabo en un recipiente llamado fermentador o en general,
biorreactor, mediante el cual determinados sustratos que componen el
medio de cultivo son transforma dos por acción microbiana en metabolitos
y biomasa. El microorganismo va aumentando en su concentración en el
transcurso del proceso al mismo tiempo que el medio se va modificando y
se forman productos nuevos como consecuencia de las actividades
catabólicas y anabólicas. Los dos fenómenos crecimiento y formación de
producto, tienen lugar durante el desarrollo del proceso simultáneamente
o no según los casos.
El comportamiento de un microorganismo en crecimiento es el resultado
de la interacción que se produce entre el microorganismo y el medio
ambiente en el reactor, y que en rigor es el resultado de los llamaos
efectores intra y extra celulares. Los efectores internos están
representados por la dotación genética intrínseca del organismo
considerado y por sus mecanismos de regulación metabólica. Estos
últimos pueden ser modificados por alteraciones del medio ambiente o
más precisamente por los efectores externos mientras que la existencia de
un gen depende de la especie del microorganismo considerado.
La preparación de medios para el desarrollo de procesos de fermentación
es una etapa fundamental para asegurar la productividad de los mismos.
Los componentes de los medios constituyen los efectores externos de
naturaleza química que desempeñan un rol esencial en los procesos ya
que deben cumplir con los requerimientos del crecimiento y de formación
de productos y además suministrar energía para la síntesis de metabolitos
y para el mantenimiento celular.
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Referencias Bibliográficas
https://es.scribd.com/doc/53706906/Microbiologia-en-La-Industria
https://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa_industrial
http://www.academia.edu/10720387/LIBRO_DE_MICROBIOLOGIA_IND
USTRIAL
http://www.unavarra.es/genmic/metabolismo/05respiracion%20y%20ferm
entacion.htm
Hernández Alicia, Microbiología Industrial, Editorial UNED