DETERMINACION DEL HEMATOCRITO Y HEMOGLOBINA

UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO

FACULTAD DE QUÍMICA Y FARMACIA
BIOQUÍMICA

INTRODUCCION

El hematocrito es el porcentaje del volumen total de la sangre compuesta por glóbulos

rojos (también llamados hematíes o eritrocitos).1Los valores medios varían entre el 40,3
y el 50,7 % en los hombres, y entre el 36,1 y el 44,3 % en las mujeres, debido a la
mayor musculatura y por ende mayor necesidad de oxígeno de los primeros. Estas cifras
pueden cambiar de acuerdo con diversos factores fisiológicos, como la edad y la
condición física del sujeto; también la altitud, la postura y el tabaquismo. Es una parte
integral del hemograma, junto con la medición de la hemoglobina, y el recuento
de leucocitos y plaquetas.

Se puede determinar por centrifugación de sangre en un tubo capilar a 10 000 rpm

durante cinco minutos. Esto separa la sangre en capas. El volumen de concentrado de
glóbulos rojos, dividido por el volumen total de la muestra de sangre da el PCV.
La hemoglobina es una hemoproteína de la sangre, de masa molecular de 64 000 g/mol,
de color rojo característico, que transporta el oxígeno, O2, desde los órganos
respiratorios hasta los tejidos, el dióxido de carbono, CO2, desde los tejidos hasta los

Laboratorio de Bioquímica.
pulmones que lo eliminan y también participa en la regulación de pH de la sangre, en
vertebrados y algunos invertebrados.
La hemoglobina es una proteína de estructura cuaternaria, que consta de cuatro
subunidades. Esta proteína forma parte de la familia de las hemoproteínas, ya que posee
1 grupo hemo en cada subunidad.

OBJETIVO GENERAL

 Realizar la prueba de hemoglobina utilizando el espectrofotómetro y del

hematocrito utilizando el macro y micro método, para así conocer la importancia
en el diagnóstico de enfermedades y la forma adecuada de su procedimiento.

OBJETIVO ESPECIFICO

 Analizar la hemoglobina y los hematocritos de cada estudiante

 Obtener el conocimiento de estos tipos de análisis para la determinación de los
hematocritos y hemoglobinas en la sangre.
 MATERIALES Y REACTIVOS

 REACTIVO:
- Alcohol antiséptico.
-solución patrón de hemoglobina.
- reactivo de trabajo para determinar hemoglobina (Brabkin)
 MATERIALES (por grupo): 2-Jeringas desechables, torniquete, tubo de ensayo para
colecta de sangre con tapa violeta, 2 tubos de ensayos medianos o grandes, pipetas
Pasteur plásticas, algodón, torniquete, pedazo de alambre delgado de aprox. 15 cm.
hemo centrífuga, espectrofotómetro., 1 gradilla.
 Otros materiales: 2 beaker de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO:

1- Extraer 3 ml. sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y
colocarla cuidadosamente en el tubo colector de sangre de tapa violeta conteniendo
EDTA, homogenizar.

2- Llenar homogéneamente 2 capilares, limpiar la superficie externa del capilar con

papel higiénico y sellar los capilares con plastilina blanca.

3- Homogenizar la sangre y alícuota por duplicado 10 microlitros (µL) de sangre total,

colocar en tubos de ensayos limpio y seco separadamente.

 Para la determinación del hematocrito:

1- Centrifugar los capilares en la hemo centrífuga manteniendo el equilibrio.

2- Medir la longitud del plasma y de los glóbulos rojos
3- Calcular el % del hematocrito
  Para la determinación de hemoglobina:

1- Alícuota de 10µL de la solución patrón de hemoglobina en un tubo de ensayo

limpio y seco.
2- Añadir a las alícuotas (10µL) de sangre total y patrón, 2,5 ml de reactivo de
trabajo, homogenizar bien y reposar por 5 minutos.
4- Leer absorbancia en todos los tubos a 540nm, calibrando el equipo con el blanco
reactivo (reactivo de color).
5- Calcular la concentración de hemoglobina en todas las muestras. Discuta todos los
resultados.

RESULTADOS

a. Para la determinación de hematocrito:

La sangre al momento de centrifugarla se logró notar la longitud total que está tiene,
teniendo en cuenta el plasma, glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas, con el fin
de hallar los hematocritos por la ecuación de

𝐿𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑜𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠

𝐻𝑒𝑚𝑎𝑡𝑜𝑐𝑟𝑖𝑡𝑜 = × 100%
𝐿𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒

La cual, se puede expresar como 3 veces hemoglobina en %. (Hematocrito= 3Hb)

Teniendo como punto de referencia los siguientes valores normales
Mujeres: 38% - 46%
Hombres: 42% - 54%
b. Determinación de hemoglobina:
La sangre se homogeneizo y se midió su absorbancia a 500 nm, para determinar la
hemoglobina del estudiante, con la ecuación de:
Hb: [concentración del patrón] x Absorción del patrón
Teniendo en cuenta los valores normales, de esta forma determinar cuál es el rango que
el estudiante posee su hemoglobina.
Mujeres: 12mg/dl – 15mg/dl
Hombres 16mg/dl – 18 mg/dl
[]
Fcurv = ∑ 𝐴
 n
Fcurv = 36.8

Paciente Sexo Absorción Hb (Mg/dL) Ht (%)

F 0.266 9.78 29.34
M 0.197 7.24 21.72
F 0.226 8.3 24.9
F 0.326 11.99 35.97
M 0.295 10.85 32.55
F 0.276 10.15 30.45
F 0.226 8.3 24.9

DISCUSION DE RESULTADOS
Teniendo en cuenta los valores estandar, el cual , se pudo analizar y observar tanto en
mujeres y hombres poseen la hemoglobina y hematocrito con valores bajo esto podria
ser el deficit del consumo de alimentos ricos en hierro, folato, vitamina B12 y vitamina
B6, alguna anemia o perdida de sangre (ya sea repentino o causas de problemas como
periodos menstraules, etc.). Estas causas hace que la hemoglobina tenga un valor bajo
que la normal , en los hematocritos se da por destrucción de los glóbulos rojos
(hemolisis), desnutricion, entre otros, en contrario cuando una persona lo tiene por
encima de lo estandar es porque tiene bajos niveles de oxígeno en la sangre (hipoxia),
presentes durante un largo período de tiempo y en hematocrito , poca agua en el
organismo (deshidratación), entre otros.
Es importante tener en cuenta estos resultados en la medida estandar normal, porque de
esta forma podemos evitar complicaciones que afecten nuestra salud.

CONCLUSION
Los objetivos de la practica fue realizado con éxito y es además importante obtener los
valores de hemoglobina y hematocrito ya que esto puede ayudarnos al diagnostico de
diferentes enfermedades y patologías, principalmente de anemia y la policitemia.
BIBLIOGRAFIA
 http://www.labechandi.com/index.php?option=com_content&view=article&id=84
18/03/2018 18:45pm

 Hematocrito, articulo web consultado el día 18/03/2018 en:

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003646.htm
 Causas por resultados bajos y altos de la hemoglobina y hematocrito por
Medline plus. https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003645.htm ultima
entrada: 19/03/2018 15:29pm
 https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003642.htm ultima entrada:
19/03/2018 15:45pm