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AYACUCHO – 2015
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ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN……………………………………………….…………… 04
II. OBJETIVOS……………………………………………..…………………… 05
III. MARCO TEÓRICO…………………………………………..……………… 06
3.1 HEMATOLOGÍA……………..…………………………..………………….. 06
3.1.1 LA SANGRE…………………………………………………………………. 06
3.1.2 HEMATOPOYESIS……………………………………………….…………. 07
3.1.3 ERITROCITOS……………………………………………...…….…………. 08
3.1.4 HEMOGLOBINA……………………………………………..….………….. 09
3.2 MUESTREO…………………………………………….…………………… 10
3.2.1 TOMA DE MUESTRA DE SANGRE……………………………….……… 10
3.2.1.1 SITIOS DE PUNCION………….…………………………………………… 10
3.2.1.2 TRANSPORTE DE LA MUESTRA………………………………………… 11
3.2.1.3 MANEJO DE LA MUESTRA……………………………………………….. 12
3.2.1.4 CONSERVACION DE LA MUESTRA…………………...………………… 12
3.2.2 TOMA DE MUESTRA DE ORINA……………………….………………… 13
3.2.3 TOMA DE MUESTRAS DE HECES……………………………………...… 13
3.2.4 TOMA DE MUESTRAS DE PIEL………………………………………...… 14
3.2.4 TOMA DE MUESTRAS DE EXUDADO…………….…………………...… 14
3.3 PROCEDIMIENTOS REALIZADOS EN LABORATORIO………...……… 14
3.3.1 HEMATOCRITO……………………………………………...……...……… 14
3.3.2 HEMOGLOBINA……………………………………………...……...……… 16
3.4 BIOQUIMICA SANGUINEA……………………...………...……………… 19
3.4.1 PROTEINAS TOTALES…………………………………………..………… 19
IV. ACTIVIDADES REALIZADAS………………...…….……………...……… 23
V. CONCLUSIONES………………………………………………..…………… 50
VI. RECOMENDACIONES……………………………………………………… 51
VII. BIBLIOGRAFIA………………………………………………..……………. 52
VIII. ANEXOS……………………………………………………………...……… 53
I. INTRODUCCIÓN:
La patología clínica es una rama importante en la ciencia médica, abarca una amplia
gama de funciones del laboratorio y sus intereses van del diagnóstico hasta la
prevención de las enfermedades, puede marcar la diferencia entre concretar y diferir en
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II. OBJETIVOS:
Aprender a interpretar los resultados que son emitidos en las pruebas realizadas y dar
con la enfermedad (patología).
Así, las muestras de laboratorio deben tomarse, manejarse y enviarse de acuerdo con los
métodos establecidos; el laboratorio, entonces, cierra el ciclo al regresar un reporte de
las diversas pruebas.
3.1 HEMATOLOGIA:
Hemograma Hto. HB
1. Constantes corpusculares
2. Recuento de plaquetas
3. Velocidad de sedimentación
4. Tiempo de protrombina
6. Célula LE
7. Fibrinógeno
3.1.1 SANGRE: La sangre es el fluido principal del organismo, que mantiene la vida y
circula a través de las principales partes del cuerpo: El corazón, las arterias, las venas y
capilares sanguíneos.
Transporte de gases.
Transporte de nutrientes.
Transporte de hormonas.
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Transporte de Ac.
Agua Eritrocitos
Gases Leucocitos
Proteínas Neutrófilos
Lípidos Basófilos
3.1.2. HEMATOPOYESIS: Las células sanguíneas tienen una vida media finita, pero
en los animales sanos el número de células en circulación se mantiene en un nivel
constante. Pare seguirlo, las células que se hallan en circulación necesitan ser repuestas
constantemente, y ello se consigue mediante la producción y emisión de células desde
la medula ósea. Los centros de producción en la medula ósea se conocen como ligares
medulares. Cuando hay una mayor demanda, la producción puede realizarse fuera de la
medula en ligares como el bazo, el hígado y los ganglios linfáticos. La producción de
las células de la sangre, es un proceso complejo y sumamente regulado, todas las
células surgen a partir de una célula madre común, esta célula madre origina muchas
fases de células progenitoras, de ésta manera:
Figura Nº 01 Visión de la Hematopoyesis.
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PERROS GATOS
De 6.5 a 7 u de diámetro, uniformes circulares De 5.0 a 6.0 de diámetro.
Prominentes áreas pálidas en el centro. Mínimas áreas pálidas en el centro
VCM= 60 fl a 75 fl. VCM= 40 fl a 55 fl.
El sitio de punción debe estar limpio y libre de patógenos, esto incluye recortar el pelo,
lavarlo con jabón, detergente o solución yodada en dos veces y después realizar una
limpieza con alcohol.
PERRO Y GATO:
Es muy útil el servicio de un ayudante experto en el manejo de animales. Las venas cefálica
y safena son usadas comúnmente en el perro y algunas veces en el gato. Con una mano el
ayudante sujeta con suavidad la cabeza del animal y con la otra rodea por detrás, arriba del
codo extendiéndolo un poco. Con el pulgar y los otros dedos de esta mano se fija la piel
floja para sujetar el vaso firmemente. El operador inmoviliza el vaso con el pulgar e inserta
la aguja arriba de este punto.
De la vena yugular se toma comúnmente sangre en el gato y algunas veces en el perro; el
procedimiento es semejante al descrito para otras especies. La sangre arterial se obtiene de
la vena femoral, que es palpada en su fosa. Este procedimiento es probablemente más largo
y doloroso que la venipunción y se recomienda el uso de anestesia local.
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Para el transporte y conservación del suero se debe esperar la retracción del coagulo, lo mas
recomendado es esperar de 1-2 horas a temperatura ambiente, cuanto mas tiempo se deje
para que esta retracción tenga lugar, mayor concentración de suero se obtendrá, aunque la
cantidad de suero no será nunca mayor de un 40% del volumen original de sangre. Si la
muestra es enviada antes de 6 horas de haber sido tomada, ésta puede ser enviada a
temperatura ambiente dentro del mismo tubo, pero si el envío dura mas de 6 horas es
necesario que el suero sea separado del coagulo y si el suero dura mas de 24 horas antes de
ser enviado al laboratorio debe ser refrigerado (2-8ºC), esto con el fin de evitar alteraciones
en los diferentes metabolitos de la sangre a determinar y por lo tanto errores en los
resultados del laboratorio.
El anticoagulante de elección es el EDTA, por preservar mejor los elementos celulares por
6 horas. También se puede usar Heparina, oxalatos y citratos. El suero y el plasma no deben
ser conservados más de 6 horas en refrigeración sin ser separados de los demás
componentes sanguíneos, ya que esto trae como consecuencia alteración en los diferentes
metabólicos de la sangre y por lo tanto errores en los resultados del laboratorio.
• Desinfección de las zonas donde se va hacer la punción.
• Relación sangre - anticoagulante, es muy importante, la dosis es un miligramo del
anticoagulante por 1 ml de sangre.
• Mezclar la muestra sangre-anticoagulante por inversión más o menos 10 veces y
suavemente para evitar hemólisis.
• No causar punción traumática en el animal para evitar hemólisis
Las muestras de suero o plasma previamente separadas de las células, pueden conservarse a
temperatura ambiente (20-30°C) durante un día sin que se deterioren, en la parte refrigerada
de un frigorífico (4°C) durante 4 días; en el congelador (-15 a -20°C) durante una semana o
indefinidamente. Particularmente, debe evitarse hacer congelaciones y descongelaciones
repetidas para que las enzimas no pierdan su actividad inicial. Las muestras congeladas
deben descongelarse lentamente hasta la temperatura ambiente, y entonces las muestras
descongeladas se deben mezclar completamente por inversión.
En pequeñas especies (perros y gatos) debe ser enviada en un frasco para coprológico. La
muestra del recto del animal, si solo es posible tomarla del suelo, se debe tomar solo de la
parte superior aquella que no ha tenido contacto con el suelo.
Tomar muestra profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo, previamente
embebido en suero fisiológico estéril. Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2
horas). Se deberá consignar en el boleto de pedido si hay lesiones o costras a nivel nasal.
3.2.5.2. EXUDADO OTICO:
Primero limpiar posibles restos de pus o secreciones del conducto auditivo externo con
hisopo humedecido en suero fisiológico y descartar. Luego tomar muestra del oído indicado
o de ambos por separado frotando con nuevo hisopo contra las paredes.
Es un Test de laboratorio muy sencillo que permite conocer, después de unos minutos
de centrifugación, las proporciones respectivas del plasma y de los glóbulos rojos en
una muestra de sangre. Cuando el hematocrito es bajo (porcentaje débil de hematíes)
en relación con el plasma, se habla de anemia y de poliglobulia en el caso contrario.
Tiene, un papel importante en el control de la eficacia de la transfusión.
b) Materiales y Equipos.
Microcentrifuga.
Plastilina.
c) Procedimiento.
d). Resultados.
3. Se divide el 1er valor entre el 2do y se multiplica por 100 para expresarlo en
%.
1/10 x 1/20 x4
4/200
3.2.2 HEMOGLOBINA:
FUNCIONES DE LA HEMOGLOBINA
Transporte de 02 Y C02 (mayor afinada).
Presión oncótica.
Vasoconstricción y vasodilatacion.
METODO DE LA CIANOMETAGLOBINA
Al contactos con el reactivos de Dranki, la hemoglobina se oxida y se transforma en
metahemoglobina que posteriormente también por oxidación va generar la cianometa
hemoglobina que directamente proporcional a la concentración de la hemoglobina en la
sangre
MATERIALES
Sangre completo
Reactivos de drankin
Micropipeteador
Espectrofotometro
PROCEDIMIENTO
Blanco: 2,5mlde Drankin.
Patrón: 2,5ml de Drankin +10 de patrón.
FORMULA
(Absorbancia muestra/Absorbancia patrón) concentración patrón=Hb.g/dl
VALORES NORMALES
Canino:12-18g/dl
Felino:8-15g/dl
RECUENTO ERITROCITARIO:
Esta prueba consiste en la realización del recuento de células sanguíneas de la serie roja.
Las células sanguíneas de la serie roja tienen su origen en la médula ósea. Los cambios
en el recuento eritrocitario generalmente van asociados a cambios en los valores de
hemoglobina.
El recuento diferencial de la serie roja se utiliza para evaluar cualquier tipo de aumento o
disminución en el número de hematíes. Estos cambios deben valorarse junto con otras
magnitudes, como la hemoglobina y/o hematocrito.
a) Formula Leucocitaria.
b) Materiales y Equipos.
Cámara de Nuebauer
Pipeta para Leucocitos
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Reactivo de Turk
Microscopio Óptico
c) Procedimiento.
Con la pipeta para leucocitos se carga con la muestra hasta 0.5, y luego aspirar liquido
dilutor (reactivo de Turk) hasta la marca 11.
Se retira la manguera con la boquilla y se procede a agitar la pipeta, se deja reposar por
3min
Se prepara la cámara de neubauer con la lámina cubreobjetos, se coloca una gota del
preparado, en ambos lados de la cámara.
Se pone la cámara en el microscopio a un aumento de 10x.
Se cuentan los cuadros intercalando
Luego de contar, se suman los resultados y se multiplican por la constante 50.
El conteo nos indica que el numero de leucocitos esta en un rango normal
RECUENTO LEUCOCITARIO:
El recuento de leucocitos indica el número de leucocitos en una muestra de sangre. El
recuento proporciona una pista sobre la presencia de enfermedad. Los leucocitos se
producen en la médula ósea, protegen al organismo de las infecciones y colaboran en la
respuesta inmunológica.
Dado que los valores de referencia dependen de muchos factores, incluyendo la edad del
paciente, el sexo, las características de la población y el método utilizado, los resultados
numéricos de los análisis tienen diferentes interpretaciones en distintos laboratorios.
Un número elevado de leucocitos se denomina leucocitosis. Puede ser el resultado de
infecciones bacterianas, procesos inflamatorios, leucemia, trauma o stress.
Un número bajo de leucocitos se denomina leucopenia. Puede darse en diferentes
situaciones como quimioterapia, radioterapia, o enfermedades del sistema inmunitario.
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COAGULACION Y SEDIMENTACION:
Las plaquetas (trombocitos) son partículas o minúsculos fragmentos de células
producidas en la médula ósea (derivadas de los megacariocitos) que circulan por el
torrente sanguíneo. El llamado “recuento” de plaquetas es un análisis en el que se mide
la concentración de plaquetas en la sangre.
Los pacientes que sufren enfermedades de la médula ósea, como la leucemia u otros
tipos de cáncer de médula ósea, experimentan sangrados excesivos con frecuencia,
debido a la disminución significativa de la concentración de plaquetas en la sangre
(trombocitopenia). Pueden observarse concentraciones disminuidas de plaquetas en
pacientes que padecen sangrados de larga evolución (úlceras de estómago sangrantes) ya
que se reduce el aporte de plaquetas.
El hemograma es uno de los elementos diagnósticos básicos, recoge básicamente el
conteo de glóbulos rojos, blancos, plaquetas y el porcentaje de hematocrito. Los valores
referenciales se ven en el cuadro del Anexo 01.
El área de Bioquímica sanguínea tiene gran importancia en esta aplicación porque ofrece
información adicional al veterinario para realizar un diagnóstico más preciso que conducirá
al tratamiento específico, es decir, al tratamiento de la causa determinante de la
enfermedad, en lugar de un tratamiento exclusivamente de los síntomas de ésta.
elimina principalmente por los riñones, pero una porción de ella por la piel, sobre todo
en los animales que sudan.
La urea se aumenta en sangre por trastornos renales como la insuficiencia renal crónica
y aguda; por obstrucción de las vías urinarias; excesiva destrucción de proteínas como
en estados de fiebre, toxicidad o sepsis extensa. También se pueden aumentar los niveles
de urea por una hemoconcentración debida generalmente a graves vómitos o diarreas;
cuando existe alteración de la función cardiaca que reduce el flujo de sangre a través del
riñón se ve aumentada la concentración de urea en sangre.
3.4.1.2. CREATININA:
Al estudiar la excreción de creatinina, tiene valor el hecho de que los niveles séricos de
creatinina casi no son afectados por la creatinina exógena de los alimentos, por la edad,
el sexo, el ejercicio o la dieta. Por lo tanto los niveles elevados solamente se presentan
cuando se altera la función renal.
3.4.1.3. COLESTEROL:
Los niveles bajos de colesterol pueden indicar debilidad o mala absorción de grasa pero
son de muy rara incidencia. La determinación de colesterol total por el laboratorio es
supremamente útil en el hipotiroidismo y en la nefrosis, en la disfunción hepática y
diabetes mellitus se deben realizar otras pruebas más específicas.
3.4.1.4. GLUCOSA:
en todas las especies, excepto en el hombre, los primates inferiores y el perro dálmata, se
ha sugerido que su medición es una prueba sensible de función hepática.
La enzima se encuentra en el hialoplasma de todas las células y existe una relación lineal
entre la GPT hepática y el peso del animal. Siendo este el caso la determinación de GPT
es casi específica del hígado del perro y el gato, mientras que es de escaso o de ningún
valor en las enfermedades de bovinos y equinos. Se ha encontrada muy elevada en la
necrosis hepática.
Es una enzima muy estable y puede ser congelada con poca o ninguna pérdida de
actividad se halla gran cantidad en el hígado, riñón, mucosa intestinal y hueso. En la
mayoría de los animales, quizá con excepción del gato se elimina en su forma natural
por el hígado por lo tanto cualquier obstrucción al flujo de la bilis causa aumento de la
enzima en el suero. El problema es determinar la fuente de esta elevación cuando no es
patente la enfermedad hepática.
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3.4.1.9. BILIRRUBINA:
Obtenida los resultados se procede con la interpretación para así poder llegar un
buen diagnóstico y proceder a dar un tratamiento adecuado.
Se continua con los análisis de sangre y de orina, con nuevos casos que llegaban a
tratar inmediatamente caso de un animal que llego ala clínica con hemorragia se
hizo la erlichia salio positivo.
También se hizo el uso de los Kits, para la detección rápida de enfermedades como
Parvovirus y Distemper
TOMA DE MUESTRA
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Materiales
1. Tijeras
2. bisturí
3. algodón
4. gasa
5. solución yodada
6. Alcohol
7. Agujas
8. Jeringas
9. Vacutainer
10. tubos secos
11. tubos con anticoagulante (EDTA)
12. bolsas para descartar material contaminado.
Agujas Vacutainer
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La posición adecuada y sujeción efectiva del animal son esenciales para un muestreo con
éxito. Un poco de tiempo empleado haciendo amigos, ganando la confianza del animal,
son generalmente bien recompensados
No solo deben ser minimizados los trastornos físicos y psíquicos sobre bases
humanitarias, sino también porque la sangre tomada de un animal asustado,
adrenalizado, puede originar resultados equivocados en varios análisis, por ejemplo, la
glucosa y los ácidos grasos no esterificados. El sitio de punción debe estar limpio y libre
de patógenos, esto incluye recortar el pelo, lavarlo con jabón, detergente o solución
yodada en dos veces y después realizar una limpieza con alcohol. La asepsia debe
realizarse en sentido contrario al crecimiento del pelo del animal y en forma circular del
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centro hacia la periferia. Después de la punción el sitio debe dejarse seco, limpio y libre
de sangre ya que cualquier humedad o materia orgánica favorece las infecciones.
Imagen Nº 16: llenado capilar Imagen Nº 17: capilares sellado con plastilina
Hb Hto
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Este método fue el más frecuente realizado en el laboratorio, pero en casos poco dudosos,
se realizó por otra metodología, éste es el protocolo:
Fuente: de internet
Con objetivo 40X se encuentra a los eritrocitos contenidos en 80 cuadros pequeños,
uno central y cuatro extremos.
Fuente: internet
Si se considera que el retículo central tiene 400 cuadros, se realiza el siguiente
calculo:
En el microscopio con el objetivo de 10X, se cuentan los leucocitos presentes en los cuatro
cuadros grandes de los extremos.
Multiplicar por 50 el promedio de los leucocitos con la siguiente fórmula:
GB mm3 = N x 20 x 10
Dónde:
N = número de eritrocitos contados
20 = factor de dilución
10 = corrección por la altura de la cámara
4 = número de cuadros contados
e)Frotis Sanguíneo:
Colocar una gota de sangre en un porta objeto limpio y seco, con ayuda de otra lámina se
hace el extendido sanguíneo. El extendido debe secar por lo menos 10 minutos
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Imagen Nº 23: colocando una gota de sangre Imagen Nº 24: nombre en la lámina
Eosinófilo linfocito
Cantidad de neutrófilo
Para realizar los análisis laboratoriales se usa muestras de sangre, orina, heces,
raspados, secreciones.
También se hizo el uso de los Kits, para la detección rápida de enfermedades como
Parvovirus y Distemper dertemino leucemia felina.
El examen de orina es una prueba rutinaria y sencilla, determinando los siguientes
parámetros:
b) Examen químico:
Con el uso de una tira reactiva:
- pH. - Proteínas.
- Glóbulos rojos .- Nitritos.
- Urobilinógeno - Cetonas.
- Bilirrubina - Glucosa.
Colocar unas gotas de orina sobre la tira reactiva o tambien se puede poner la tira de ph
tubo de orina y leer los resultados
Imagen Nº28: Tira de ph en tubo
Imagen Nº 29: unas gotas de orina
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Interpretación del pH
Fuente:
Elaboración propia
RESULTADO VALOR REFERENCIA
DENSIDAD 1.O1O 1.015-1.030
Densidad esta baja puede ser problema en tubulo
renal (Insuficiencia renal)
c) Examen Microscópico:
Así mismo se centrifugó una pequeña cantidad de orina por 5 minutos a 1500 rpm, dejando
el sedimento en el tubo, y colocándolo en una lámina portaobjetos. Finalmente se llevó al
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También s Para realizar los análisis laboratoriales se usa muestras de sangre, orina, heces,
raspados, secreciones.
.
Fuente: Elaboración propia Fuente: Elaboración propia
Imagen Nº 39: Luego del raspado lamina de porta objeto Imagen Nº 40: Acaro causante
Demodex cani
c) PRUEBA DE DISPOSITIVOS:
También se hizo el uso de los Bits, para la d leucemia canina detección rápida de
enfermedades como Distemper y leucemia canina, Parvovirus
CASO CLÍNICO 01
Nombre : “TOBI”
Edad : 5 Meses
Sexo : Macho
Datos clínicos : Mucosas pálidas, Tº: 39.8, Secreción ocular purulenta, almohadillas plantares y
palmares ligeramente queratinizadas, no tiene vacunas.
Después de recolectar la muestra usando un hisopo, la muestra debe ser extraída y analizada
inmediatamente.
Si las muestras no son analizadas inmediatamente, deben ser refrigeradas de 2~8, para
almacenamiento mayor a 48 horas, congele la muestra a - 20 ℃ o menos.
Procedimiento de la prueba
Inserte el hisopo en el tubo de muestra que contiene 300µl de diluyente del ensayo.
En caso de muestras de suero o plasma, adicione 2-3 gotas de suero o plasma en el tubo de
muestra que contiene 300 µl de diluyente del ensayo usando el gotero.
Mezclar la muestra del hisopo con el diluyente del ensayo para extraer muy bien.
Retire el dispositivo de prueba de la bolsa de aluminio y ubíquelo sobre una superficie seca
y plana.
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Mucosa conjuntiva (Se obtiene tercer parpado del ojo.) luego se homogeniza la muestra
obtenida 10 segundos con el diluyente Contiene 300 µl.
Se pone 4 gotas de muestra luego se espera unos minutos luego se obtienes los resultados de
la prueba de 5-10 minutos procede hacer la lectura si es positivo dos línea y negativo es
una línea.
Imagen Nº55: Poniendo 4 gotas muestra Imagen Nº56: Prueba se espera 10 minutos
CASO CLÍNICO 02
Nombre : “NEGRITA”
Edad : 3Meses
Sexo : Macho
Datos clínicos : Mucosas pálidas, Tº: 37.8, Vomita, diarrea, inapetencia, decaída. No tiene
vacunas.
CASO CLÍNICO 03
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Edad : 5 Meses
Sexo : Macho
Datos clínicos : Mucosas pálidas, Tº: 37.8, animal no comia estaba deshidratado sin energía.
Imagen Nº 58: El animal esta flaco Imagen Nº 59: Kit rapido para leucemia
Imagen Nº 60: Poner una gota de sangre Imagen Nº 61: Se pone dos gotas de diluente.
V. CONCLUSIONES:
IV.- RECOMENDACIONES:
VII. BIBLIOGRAFIA.
Imagen Nº 69: Intoxicación por órgano fosforado Imagen Nº 70: Animal con parvovirus
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Imagen Nº 75: herida en el miembro Anterior izquierdo se aplica el Plus y luego se cubre
la herida con gasas.
Interpretación de resultados:
Hemograma:
En cuanto VCM: 74.5 fl.se encuentra elevado, CHCM:33.1gr./dl.se encuentra dentro del
valor normal.
Interpretación de resultados:
Hemograma:
Interpretación de resultados:
Hemograma:
Interpretación de resultados:
DENSIDAD 1037
Proteínas 5.5
pH 8.0
C. Cetonicos Negativo
Glucosa Positivo
Leucocitos Positivo
Nitritos Negativo
Hemoglobina Positivo
Resultado:
Proteína: 5.5
Densidad: 1037
Interpretación:
Insuficiencia Hepática secundaria.
Proceso Inflamatorio.
Presencia de sangre en orina debido a la trauma (accidente).
Interpretación de resultados: