Reagor Ingeniería

El reactor es la fermentación corazón «fany o proceso de conversión de la enzima. ofbioreactors diseño es una tarea
compleja y, basándose en principios científicos y técnicos y muchas reglas ofthumb. Spcci]) ing aspecto deEl reactor y su
funcionamiento implica varias decisiones críticas.

preocupaciones de seguridad, la necesidad de pureza alta producto o

(I) configuración de reactor. Por ejemplo, si el reactor ser un
reglamen-
tanque agitado o un buque de propulsión de aire sin
agitación mecánica?
sizr reactor. Lo reactor de tamaño se requiere para alcanzar
la velocidad deseada de producción?
Las condiciones de procesamiento dentro del reactor.
¿Qué reacción condiciones tales como la temperatura, el
pH y la tensión de oxígeno dissolved- deben mantenerse
en el recipiente, y cómo se controlan estos parámetros?
¿Cómo se con-contami- ser evitado?
Turba de operación. Será el reactor puede operar por
lotes sabia o como un proceso de flujo continuo? Debe
sustrato ser alimentado intermitentemente? En caso de
que el reactor puede operar solo o en serie con los
demás?

Las decisiones tomadas en el diseño de reactores tienen un

impacto significativo enel rendimiento general del proceso, sin
embargo, no existen procedimientos de diseño Dard simples o
dares disponibles que especifican todos los aspectos de la
embarcación y su funcionamiento. ingeniería de reactores
reúne a gran parte del material que se explicaron en los
capítulos 7-12 de este libro. El conocimiento de la cinética de
la reacción es esencial para la comprensión de cómo funcionan
los reactores biológicos. También se requieren Otras áreas de
ingeniería de bioprocesos, tales como masa y energía saldos,
mezcla, transferencia de masa y de transferencia de calor.

13.1 Ingeniería reactor en perspectiva

Antes de empezar a diseñar un reactor, algunos objetivos
tienen que ser definidos. objetivos simples como 'producir 1 g
de monoclonal anti- cuerpo por día', o 'producir 10 000
toneladas de ácido amino por año', el punto de partida. Otros
objetivos son también Vant perti-; en los procesos industriales,
el producto debe hacerse con el menor coste posible para
maximizar las ventajas comerciales de la compañía. En
algunos casos, los objetivos económicos son anulados por las
consideraciones conservadores. El diseño final reactor
será un reflejo de todos estos requisitos del proceso y,
en la mayoría de los casos, representa una solución de
compromiso a las demandas conflictivas.
En esta sección, vamos a considerar las diversas
contribuciones al proceso de transformación costes para
los diferentes tipos de productos, y examinar la
importancia de la ingeniería de reactores para mejorar
el rendimiento general del proceso. Como se muestra
en la figura 13.1, el valor de los productos hechos por
bioprocesamiento cubre una amplia gama. Típicamente,
los productos con el valor más alto son los de

Figura 13.1 ofvalue gama de productos de

fermentación. (De PN Royce, 1993, Una discusión
de los desarrollos recientes en el seguimiento y
control de la fermentación desde una perspectiva
práctica. Crit. Rev. Biotechn «l. 13, I 17-149).

El precio por tonelada (US $) Producto

100,0 £ D, 000 - - Las proteínas de las células de mamíferos

cultura

Vitamina B12

Penicilina

Levadura de panadería

proteína unicelular

yo - Las aguas residuales tratadas

Ij ingeniería de 334
reactores

Figura 13.2 Las contribuciones al coste total de producción en el procesamiento biológico.

Costo total de producción

Investigació fermentación / Río abajo administración y

ny Reacción Tratamient Márketing
desarrollo o

materiale
s
Materias primas Operación Bitireactor
Lahnur
Ui il it ics (energía.
Lab <> Agua,
ur vapor. wartc di.sposal)
Ui ilities TENERGY,
agua,
Depreciación,

Depreciación, inxuran «e,

ecc.

total debido a la enorme

cultivo de células de mamífero, tales como proteínas terapéuticas
y anticuerpos monoclonales. En el extremo opuesto de la escala es
el tratamiento de residuos, donde el objetivo principal es
desembolso económico mínimo para el nivel deseado de pureza.
Para reducir el coste de cualquier bioproceso, primero es
necesario para identificar qué aspecto de ella es costo-
determinante. Desglose de los costes de producción varía de un
proceso a otro; sin embargo, un esquema general se muestra en la
Figura 1 3.2. Los siguientes componentes son importantes: (i) la
investigación y el desarrollo; (Ii) la fermentación o la etapa de
reacción; (Iii) tratamiento aguas abajo; y (iv) adminis- tración y
comercialización. En la mayoría de los bioprocesos, los gastos de
administración y comercialización es relativamente pequeña.
Productos para el que el coste de la reacción domina incluir
biomasa tales como productos de panadería, levadura y de
proteína unicelular, metabolitos catabólicos tales como el etanol y
el ácido láctico, y los productos de bioconversión como el jarabe
de maíz alto en fructosa y ácido 6-aminopenicilánico. productos
intracelulares como las proteínas tienen altos costos de
procesamiento corriente abajo en comparación con la reacción;
otros ejemplos de esta categoría son los antibióticos, vitaminas y
aminoácidos. Para los nuevos, productos biotecnológicos de alto
valor tales como proteínas y anticuerpos recombinantes, los
costos de procesamiento reales son sólo una pequeña parte del
Ij ingeniería de 335
lareactores
inversión necesaria para la investigación y el
desarrollo y aprobación reglamen- toria. Recibiendo el
producto en el mercado de forma rápida es la medida
más importante de ahorro de costes en estos casos; todos
los ahorros realizados mediante la mejora de la eficiencia
del reactor generalmente son triviales en comparación.
Sin embargo, para la mayoría de los productos de
fermentación, fuera de esta categoría de alto valor, los
costos de bioprocesamiento hacen una contribución
significativa al precio final.
Si la etapa de reacción domina la estructura de costes,
esto puede ser debido al alto costo de las materias primas
necesarias o el alto coste de funcionamiento del reactor.
La contribución relativa de estos factores depende del
proceso. Como un ejemplo, para pro- antibióticos de alto
valor Duce, el costo de los medios de comunicación 100
m' es US $ 25 000-100 000 [1]. En contraste, el coste de
la energía, es decir, la electricidad, para operar un
fermentador de 100 m' de tanque agitado
INCLUYENDO agitación, compresión de aire y agua de
refrigeración para una fermentación antibiótico 6-D es de
aproximadamente US $ 8000 [1, 2]. Es evidente,
entonces, los costos de energía para el funcionamiento
del reactor son mucho menos importantes que los costos
de la materia prima para el proceso de fermentación.
Para alto valor, los productos de bajo rendimiento tales
como antibióticos, vitaminas, enzimas y pigmentos, los
medios de comunicación representa el 60-90% de los
costes mentación fer- [1]. De bajo coste, los metabolitos
de alto rendimiento tales
Ij ingeniería de 336
reactores

Figura 13.3 Estrategias para el diseño biorreactor como una función de los factores de coste de determinación en el proceso.

COST-DETERMINAR FACTOR

Investigaci Materi biorreactor Procesamien

ón y as primas Operació to en bajada
desarrollo n

îmîse maximizar maximiza maximizar maximizar

Max sustrato r volumétrica la producto
velocida conversión. producto productividad para concentración de
d de rendimie reducir al mínimo el salir del reactor.
aumento nto. tamaño del reactor.
de
escala. Maximizar la Maximizar
Maximizar la concentració la
reproducibili n de productivi
dad o reactor catalizador. dad
operación. específica
Minimizar y
contaminació rendimient
n riesgo. o del
optimizar reactor condiciones mejora de cepas
producto.
optimización de
medios

concentración de producto que sale del recipiente; esto evita el

como etanol, ácido cítrico, la biomasa y el ácido láctico, los
gasto de recuperar el producto de solu- ciones diluidas. Cuando los
costos de las materias primas van desde 40% de los costes de
costos de reacción son significativos, el reactor debe
fermentación del ácido cítrico a aproximadamente 70% para el
etanol producido a partir de melaza [1, 3]. El resto de los
gastos de operación de biorreactores se compone
principalmente de los costos laborales y de servicios públicos.
Como se indica en la Figura 13.3, la identificación de la
estructura de costes de bioprocesos asistencias en la
definición de los objetivos para el diseño de reactor. Incluso
si la reacción en sí no es costo-determinación, los aspectos
de diseño del reactor todavía pueden ser importantes. Si el
costo de la investigación y el desarrollo es dominante, el
diseño del reactor se dirige hacia la necesidad de una rápida
ampliación; esto es más importante que maximizar la
conversión o reducir al mínimo los costos operat- ing. Para
los nuevos productos biotecnológicos destinados al uso
terapéutico, las directrices reguladoras requieren que todo el
esquema de producción será validado y garan- control de
procesos primer golpe de calidad y seguridad consistente;
reproducibilidad de la operación del reactor es por lo tanto
crítico. V / derecho de retención el costo de las materias
primas es significativo, lo que maximiza la conversión de
sustrato y el rendimiento de producto en el reactor tiene una
alta prioridad. Si el procesamiento aguas abajo es caro, el
reactor está diseñado y operado para maximizar la
Ij ingeniería de 337
ser tan pequeño como sea posible para reducir los
reactores
costos operativos y de capital. Para lograr la tasa de
producción total deseada utilizando un pequeño
recipiente, la productividad volumétrica del reactor
debe ser suficientemente alta (véase la Sección 11.1.3).
Como se indica en la Figura 13.3, la productividad
volumétrica depende de la concentración de catalizador
y su tasa específica de producción. Para lograr altas
tasas volumétricas, el reactor debe por lo tanto permitir
la actividad máxima del catalizador a la mayor
concentración práctico catalizador. Para las células
apretadas u orgánulos de células, el límite físico de la
concentración es del orden de 200 kg de peso en seco
m ° '; para las enzimas en solución, la concentración de
la mamá maxi- depende de la solubilidad de la enzima
en la mezcla de reacción. La medida en que estas
concentraciones limitantes pueden ser abordados
depende del funcionamiento del reactor. Por ejemplo,
si la mezcla o la transferencia de masa es inadecuada,
oxígeno o se producirá el hambre de nutrientes y la
densidad celular máxima alcanzada será baja.
Alternativamente, si los niveles de cizallamiento en el
reactor son demasiado altos,
se obtiene la máxima productividad específica
cuando el lyst cata- es capaz de altos niveles de
producción y condiciones en el reactor permitan la
mejor función catalítica posible. por
Ingeniería del Reactor
i3

metabolitos simples tales como etanol, butanol y ácido Figura 13.4Typical fermentador de tanque agitado para
acético que están vinculados a la producción de energía en la aerobio
célula, la maxi- rendimiento teórico mamá está limitada por cultura.
la termodinámica y principios estequiométricas descritas en
la Sección 4.6. En consecuencia, hay poco margen para
aumentar la producción Gas
Los títulos de estos materiales; reducción de los costes de "' Slirrer UNsello séptico
producción y ventaja co- mercial se basan principalmente en
mejoras en el funcionamiento del reactor que permiten que el FNAM
sistema para lograr cerca de la mamá rendimiento teórico
maxi-. Por el contrario, no es raro para los programas de interruptor
Cc> Oling
mejora de cepas y de los medios de optimización para mejorar agua
los rendimientos de antibióticos y enzimas en más de 100 Oflt automático
veces, en particular en las primeras etapas de desarrollo del
proceso. Por lo tanto, para estos productos, la identificación
de cepas de alto productividad ING y condiciones ambientales
óptimas es inicialmente más gratificante que mejora el diseño
del reactor y funciona- miento.

Barrie
13.2 Configuraciones de biorreactores
El tanque cilíndrico, ya sea agitado o sin agitación, es el
más reactor común en el procesamiento biológico. Sin
embargo, una amplia gama de configuraciones er ferment-
está en uso en diferentes industrias de bioprocesos.
Espada
biorreactores nuevos constantemente se están desarrollando plana
para aplicaciones especiales y nuevas formas de Enfriamiento turbina
agua
biocatalizador tales como plantas ytejido animal y células Aire
inmovilizadas y enzimas. entrada
Gran parte del desafío en el diseño de reactor se encuentra
en el suministro de una mezcla adecuada y la aireación de la
gran proporción de las fermentaciones que requieren
oxígeno; reactores para cultivo anaerobio son generalmente
de construcción muy simple y sin burbujeo o
agitación. En la siguiente discusión de las configuraciones de Normalmente, sólo el 70-80% del volumen de reactores agitados
biorreactores, se supondrá el funcionamiento aeróbico. se llena de líquido; esto permite que el espacio de cabeza adecuado
para disen- gagement de gotitas del gas de escape y para acomodar
cualquier espuma que puede desarrollarse. Si la formación de
13.2.1 tanque agitado espuma es un problema, un impulsor complementario llamado
Una solución agitada, biorreactor aireado convencional se interruptor de llanta puede af
muestra camente schemati- en la figura 13.4. El mezclado y la
dispersión de burbujas se consiguen mediante agitación
mecánica; esto requiere un relativamente alto de entrada de
energía por unidad de volumen. Los deflectores se utilizan en
reactores agitados para reducir vórtex. Una amplia variedad de
tamaños y formas del impulsor está disponible para producir
diferentes patrones de flujo dentro del recipiente; en
fermentadores de altura, la instalación de múltiples impulsores
mejora la mezcla. Las funciones de mezcla y de transferencia
de masa de reactores agitados se describen en detalle en los
capítulos7 y 9.
Ingeniería del Reactor
ser instalado como se muestra en la figura 13.4.
i3
Alternativamente, químicaagentes antiespumantes se
añaden al caldo; porque antiespumantesreducir la tasa
de transferencia de oxígeno (véase la Sección 9.6.3), se
prefiere generalmente meca- dispersión de espuma ical.
La relación de aspecto de calderas de agitación, es decir la
relación de altura a
de diámetro, se puede variar en un amplio intervalo. La
forma menos costosa de construir tiene una relación de
aspecto de aproximadamente I; Esta forma tiene el área de
superficie más pequeña y por lo tanto requiere la menor de
material para la construcción para un volumen dado. Sin
embargo, cuando se requiere aireación, la relación de
aspecto es por lo general aumentado. Esto proporciona
tiempos de contacto más largos entre el aumento de
burbujas y líquido y produce una mayor presión
hidrostática en el fondo del recipiente.
Como se muestra en la Figura 13.4, control de
temperatura y transferencia de calor en calderas de
agitación se puede lograr usando serpentines de
refrigeración internos. equipos de refrigeración alternativo
para biorreactores se ilustra en la figura 8. 1 (p. 165). Las
ventajas y desventajas relativas de los diferentes sistemas
de intercambio de calor se discuten en la Sección 8. 1.1.
fermentadores agitados se utilizan gratis- y immobi1ised-
Ij ingeniería de 337
reactores

alrededor de 3: 1 es común en la producción de levadura de

Figura 13.5 biorreactor con columna de burbujas.
panadería; para otras aplicaciones, torres con relaciones de altura a
diámetro de 6: 1 se han utilizado. Perforado

las reacciones enzimáticas, y para el cultivo de células en

suspensión ralizan y immobil-. Es necesario tener cuidado con
los catalizadores en forma de partículas que pueden ser
dañados o destruidos por el impulsor a altas velocidades.
Como dis- cussed en la Sección 7. 14, altos niveles de
cizallamiento también pueden dañar las células sensibles, en
particular en cultivo de células vegetales y animales.

13.2.2 columna de burbujas

Alternativas al reactor agitado incluyen vasos sin agitación
mecánica. En los reactores con columna de burbujas, la
aireación y el mezclado se consiguen mediante burbujeo de
gas; esto requiere menos energía que la agitación mecánica.
Columnas de burbujas se aplican industrialmente para la
producción de productos de panadería, levadura, cerveza y
vinagre, y para el tratamiento de aguas residuales.
Columnas de burbujas son estructuralmente muy simple.
Como se muestra en la Figura 13.5, que son vasos
generalmente cilíndricas con altura mayor que el doble del
diámetro. Aparte de un burbujeador para la entrada de aire
comprimido, columnas de burbujas típicamente no tienen
estructuras internas. Una relación de altura a diámetro de
Ij ingeniería de 337
placas horizontales a veces se instalan en UMNS
reactores
burbuja CDR altos para romper y redistribuir burbujas donde N es la altura de la columna de burbujas.
coalescentes. Ventajas de columnas de burbujas Como se discute en la Sección 9.6.1, los valores de
incluyen bajo costo de capital, la falta de partes coeficientes de transferencia de masa gas-líquido en reactores
móviles, y al calor satisfactoria y transferencia de masa dependen en gran medida de diámetro de la burbuja y
DESEMPEÑO. Como en recipientes de agitación, la retención de gas. En las columnas de burbujas que contienen
formación de espuma puede ser un problema que líquidos no viscosos, estas variables dependen únicamente de
requiere la dispersión mecánica o adición de la velocidad de flujo de gas. Sin embargo, como tamaños de
antiespumante al medio. burbuja exactas y de circulación de líquido
hidrodinámica con columna de burbujas y carac-
terísticas de transferencia de masa dependen
enteramente sobre el comportamiento de las burbujas
liberadas de la burbujeador. Diferentes regímenes de
flujo se producen dependiendo de la velocidad de gas
de flujo, el diseño del distribuidor de rociado, ter
columna diame- y medianas propiedades tales como la
viscosidad. Homogeneow] Iow se produce sólo en tasas
bajas de flujo de gas y cuando las burbujas que salen
del rociador están distribuidos uniformemente a través
de la sección transversal de la columna. En el flujo
homogéneo, todas las burbujas suben con la misma
velocidad ascendente y no hay retromezcla de la fase de
gas. líquido de mezcla en este régimen de flujo también
está limitado, derivadas exclusivamente de arrastre en
las estelas de las burbujas. En condiciones de
funcionamiento normales a velocidades de gas más
altas, grandes células de flujo circulatorio caóticas
desarrollan y heterogénea] Iow se produce como se
ilustra en la figura 13.6. En este régimen, burbujas y el
líquido tienden a subir hasta el centro de la columna,
mientras que un flujo descendente correspondiente de
líquido se produce cerca de las paredes. circulación de
líquido arrastra burbujas para que se produce algo de
retromezcla de gas.
tiempo de mezclado líquido en columnas de
burbujas depende del régimen de flujo. Para el flujo
heterogéneo, la siguiente ecuación se ha propuesto [4]
para la velocidad del líquido hacia arriba en el centro de
la columna de 0,1 <D <7,5 m y 0 <nos <0,4 ms ° '-

u L = 0,9 (g D UG)0”

donde u L es la velocidad lineal de líquido, g es

Tiempos de aceleración gravitacional, D es diámetro de
la columna, y nos es la velocidad superficial del gas.
uG es igual a la velocidad de flujo volumétrico de gas a
presión atmosféri- ca dividido por el área de sección
transversal del reactor.
A partir de esta ecuación, una expresión para, (véase la
Sección 7.9.4) el tiempo de mezcla r”puede obtenerse a
[5]:

re
(13.2)
Ij ingeniería de
reactores
Figura flujo 13.6Heterogeneous en una columna de
burbujas.
patrones son imposibles de predecir en columnas de burbujas,
una estimación precisa del coeficiente de transferencia de
masa se difhcult. La correlación siguien- tes se ha propuesto
para los medios de comunicación no viscoso en el flujo
heterogéneo [4, 5]:
(13.3)
jj8
donde Ln E es la volumétrico ciente coefh- de transferencia de
masa combinada y nosotros es la velocidad superficial del gas.
Eq. (13.3) es válida para burbujas con diámetro medio de
aproximadamente 6 mm, 0,08 m <D <
11.6 m, 0,3 m <n <21 m, y 0 <su <0,3 ms'. Si es menor
burbujas se producen en el rociador y el medio es no coalescente,
l Ln será mayor que el valor calculado usando la Ec. (13.3),
especialmente a valores bajos de Estados Unidos menos de
aproximadamente
10 ° 'MS °' (4].
13.2.3 Airlift Reactor
Como en columnas de burbujas, de mezcla en los reactores de
transporte aéreo es plished acompa- sin agitación mecánica.
reactores de puente aéreo se ofren elegidos para el cultivo de
células vegetales y animales y catalizadores inmovilizados
porque lwels de cizallamiento son significativamente más
bajos que en calderas de agitación.
Existen varios tipos de reactor de transporte aéreo están en
uso. Su rasgo distinguiendo en comparación con la columna
de burbujas es que los patrones de flujo de líquido están más
definidos debido a la sepa- ración física de las corrientes hasta
que fluye hacia abajo y fluida. Como se muestra en la figura
13.7. gas se desencadenó en sólo una parte de la sección
transversal del recipiente llamado el rirrr. Retención de gas y
la disminución de fluido causa la densidad del líquido en el
tubo ascendente a moverse hacia arriba. Gas desacopla en la
parte superior del recipiente dejando más pesado líquido sin
burbujas para recircular a través de la d0wnrotirr. Liquid
circula en reactores de puente aéreo como resultado de la
diferencia de densidad entre elevador y tubo de descenso.
La figura 13.7 ilustra los las configuraciones airlih más
común. En el int l-bucle vesseh de las figuras 13.7 (a) y 13.7
(b), el tubo de subida y tubo de descenso están separados por
un tubo bafiie interna o proyecto, el aire puede ser roció en o
bien el tubo de aspiración o el espacio anular. En el bucle
externo OC oufrr-drop puente aéreo de la figura 13.7 (c),
tubos verticales separadas están conectadas por secciones
horizontales cortas en la parte superior e inferior. Debido a
que el tubo de subida y tubo de descenso están más separados
en los vasos de bucle externo, la separación de gas es más
eficaz que en los dispositivos de bucle interno. Menos
burbujas se realizan en el tubo vertical de bajada, la dife-
rencia de densidad entre los fluidos en el tubo de subida y
tubo vertical de bajada es mayor, y la circulación de líquido
en el recipiente es más rápida. De acuerdo con ello, la mezcla
es generalmente mejor en bucle externo que los reactores de
bucle interno.
reactores de puente aéreo proporcionan generalmente una
mejor mezcla de columnas de burbujas, excepto a velocidades
líquido de baja cuando los patrones de flo- circulatorios
Ij ingeniería ade los mostrados en la figura 13.6 se
similares jj8
reactores
desarrollan. La configuración de puente aéreo confiere
un grado de estabilidad al flujo de líquido en
comparación con columnas de burbujas; por lo tanto,
las tasas de flujo de gas más altas se pueden utilizar sin
incurrir en problemas operativos, como el flujo de lodo
o la formación de aerosol. Varios correlaciones
empíricas han sido desarrollados para la velocidad del
líquido, el tiempo de circulación y
Ij ingeniería de
reactores

Figura 13.7 configuraciones de reactor de transporte aéreo.

de escape de escape Gasexhaust

de gas de gas

O o

oo 0
0

- bajante o Tubo
de
subid
a

Air Air Air

e e e
(un (se (d
) gu o)
nd
o)
tiempo de mezcla en airlih reactores; sin embargo, hay 6 L <0,32 'G 0.7
considerable discrepancia entre los resultados [6]. Ecuaciones (13.4)
derivadas de modelos hidrodinámicos también están
disponibles [6, 71; estos son por lo general
relativamente compleja y, debido a la velocidad del líquido y Ec. (13.3) para las columnas de burbujas, para el transporte aéreo de
retención de gas no son independientes, requieren solución bucle externo-:
numérica iterativo.
Retención de gas y velocidades de transferencia de masa
gas-líquido en el transporte aéreo de bucle, interna son
similares a los de columnas de burbujas [6]. Sin embargo, en
los dispositivos de bucle externo, casi completa gagement
disen- gas aumenta la velocidad del líquido y disminuye el
aire atraco [8, 9] de modo que las tasas de transferencia de
masa en idénticas dades veloc- gas son menores que en
columnas de burbujas [ 6]. Por lo tanto, en comparación con la
 Ij ingeniería
Varias otrasdecorrelaciones de transferencia de masa
reactores
empíricos han sido desarrollados para fluidos
newtonianos y no newtonianos en airlih reactores (6].
Rendimiento de los dispositivos de transporte aéreo
está influenciada significandy por los detalles de la
construcción de buques [6, 10, 11]. Por ejemplo, en el
transporte aéreo de bucle interno, el cambio de la
distancia entre el borde inferior del tubo de aspiración y
la base del reactor altera la caída de presión en esta región
y afecta a la velocidad del líquido y el gas atraco. La
profundidad de inmersión ofdraft-tubo desde la parte
superior del líquido influye también en la mezcla y las
características de transferencia de masa.
Ingeniería del Reactor i3 inmovilizados o de partículas. El reactor consiste en un tubo,
generalmente vertical, lleno de partículas de catalizador. Medio
puede ser alimentado ya sea en la parte superior o inferior de la
columna y forma una fase líquida continua entre las partículas. Los
daños debidos a la atrición de partículas es mínima en lechos
reactores de puente aéreo se han aplicado en la producción empaquetados en comparación con reactores agitados. reactores de
de proteína de la célula simple de aceite de metanol y gas; lecho de pic se han utilizado comercialmente con
también se utilizan para el cultivo celular vegetal y animal y
en el tratamiento de residuos municipales e industriales.
Grandes reactores de transporte aéreo con capacidades de
miles de metros cúbicos se han construido. airlifts-bucle
interno alta empotrable subterráneo se conocen como
profundas reactores de eje, - muy alta presión hidrostática en
la parte inferior de estos vasos mejora considerablemente la
transferencia de masa gas-líquido. La altura de los reactores de
transporte aéreo es típicamente de aproximadamente 10 veces
el diámetro; para sistemas profundas-eje de la relación de
altura a diámetro puede aumentarse hasta 100.

13.2.4 Reactores agitó y Aire-Driven:

Comparación de las características de
operación
Para fluidos de baja viscosidad, una mezcla adecuada y la
transferencia de masa se puede lograr en tanques agitados,
columnas de burbujas y los vasos de transporte aéreo. a
continuación, se requiere una gran fermentador (50 a -500 m
") para el cultivo de baja viscosidad, una columna de burbujas
es una opción atractiva porque es simple y barato de instalar y
operar. reactores agitados mecánicamente son poco prácticas a
volúmenes mayores que aproximadamente 500 m como la
potencia necesaria para conseguir una mezcla adecuada es
extremadamente alta (véase la Sección 7.11).
Si el cultivo tiene una alta viscosidad, el mezclado sufhcient y
la transferencia de masa no puede ser proporcionada por los
reactores accionados por aire. sels ves- agitados son más
adecuados para líquidos viscosos porque mayor poder puede ser
entrada por agitación mecánica. Sin embargo, las tasas de
transferencia de materia disminuyen rápidamente en recipientes
de agitación a viscosidades mayores de 50-100 cP [5].
La transferencia de calor puede ser una consideración
importante en la elección entre los reactores y se agitó
accionados por aire. La agitación mecánica genera mucho más
calor que el burbujeo de gas prensado com-. a continuación, el
calor de reacción es alta, tal como en la producción de proteína
unicelular a partir de metanol, la eliminación de calor agitador
de fricción puede ser un problema tan puede preferirse que
tors reacciones accionados por aire.
5tirred-tanque y buques de propulsión de aire representan
la gran mayoría de las configuraciones de biorreactores
utilizados para el cultivo aeróbico. Sin embargo, otras
configuraciones del reactor se pueden utilizar en procesos
cular par-.

13.2.5 Cama empacada

reactores de lecho de pic se utilizan con biocatalizadores
Figura 13.8 reactor de lecho empaquetado con reciclado
medio.

de escape
células inmovilizadas y enzimas para la producción de de gas
medio recirculado
aspartato y fumarato, la conversión de la penicilina en
ácido 6-aminopenicilánico, y la resolución de isómeros
OOO
de aminoácidos. O
O O Air
transferencia de masa entre el medio líquido y el OO
O e
catalizador sólido se facilita a altas tasas de flujo de
líquido a través del lecho; Para lograr esto, lechos de recipie
Cama O OO nte
relleno son a menudo operados con reciclaje de líquido empacada OO
OOOO agitad
como se muestra en la figura 13.8. Se evita que el de o
O
partículas OOO agitad Espato8
catalizador de leav- ing la columna por pantallas en la OO
de O or
O OO ••
salida de líquido. Las partículas deben ser catalizado OO O
relativamente incompresible y capaz de soportar su r OOO

propio peso en la columna sin deformar y ocluir el flujo

de líquido. medio de recirculación también debe estar
limpia y libre de escombros para evitar la obstrucción
de la cama. La aireación se logra generalmente en un
recipiente separado; si el aire se rocía directamente en
el lecho, burbuja coalescencia produce bolsas de gas y
canalizar el flujo o la mala distribución. lechos de
relleno no son adecuados para los procesos que
producen grandes cantidades de dióxido de carbono u
otros gases que puedan quedar atrapadas en el
embalaje.

13.2.6 lecho fluidizado

Cuando lechos de relleno son operados en modo de
flujo ascendente con perlas de catalizador de tamaño y
densidad adecuada, la cama se expande a altas tasas de
flujo de líquido debido al movimiento hacia arriba de
las partículas. Esta es la base para la operación de los
reactores de lecho fluidizado como se ilustra en la
figura 13.9. Debido a que las partículas en lechos
fluidizados están en constante movimiento,
canalización y la obstrucción de la cama se evitan y el
aire puede ser introducido directamente en la columna.
reactores de lecho fluidificado se utilizan en el
tratamiento de residuos con arena o material similar de
soporte poblaciones microbianas mixtas. También se
utilizan con la floculación de los organismos de
elaboración de la cerveza y para la producción de
vinagre.
Ingeniería del Reactor $
i3 §z

inspección de los contenidos del reactor. Las boquillas para el medio,

Figura 13.9 reactor de lecho fluidizado.
antiespumante, el ácido y la adición de álcali, tubos de aire de escape,
manómetro, y un disco de ruptura para

13.2.7 Chorrito Cama

El reactor de lecho percolador es otra variación del lecho
empaquetado. Como se ilustra en la figura 13.10, el líquido se
pulveriza sobre la parte superior deel embalaje y tricMes hacia
abajo a través del lecho en pequeña rivu- permite. El aire
puede ser introducido en la base; debido a que la fase líquida
no es continua a lo largo de la columna, aire y otros gases se
mueven con relativa facilidad alrededor de la empaquetadura.
reactores de lecho percolador se utilizan ampliamente para el
tratamiento aeróbico de aguas residuales.

13.3 Consideraciones prácticas para la

construcción del biorreactor
biorreactores industriales para la operación estéril se diseñan
generalmente como recipientes a presión de acero capaces de
soportar vacío total hasta la presión positiva sobre 3 atm a 150
- l80 ° C. Un agujero es RESPETA pro en buques grandes
para permitir la entrada de trabajadores en el tanque para su
limpieza y mantenimiento; en los buques más pequeños de la
parte superior es extraí- poder. placas cabezales planas se
utilizan comúnmente con fermentadores a escala de
laboratorio; para los buques más grandes de una construcción
abovedada es menos costoso. Grandes fermentadores están
equipadas con un verticalmente cal mirilla iluminada para la
Ingeniería del Reactor $
Figura
i3 13.10 reactor de lecho percolador. §z

de liberación de presión de emergencia, normalmente

se encuentra en la placa de la cabeza-. puertos laterales
para pH, temperatura y sensores de oxígeno disuelto
son un requisito mínimo; una salida para la muestra de
vapor-esterilizable también debe ser proporcionada. El
recipiente debe ser vaciado totalmente a través de una
boquilla de la cosecha situada en el punto más bajo del
reactor. Si el recipiente es agitado mecánicamente, se
ha instalado ya sea un láminas superior o agitador
inferior a entrar.

13.3.1 Operación aséptica

La mayoría de las fermentaciones fuera de la industria
de alimentos y bebidas se llevaron a cabo utilizando
cultivos puros y condiciones asépticas. Mantener la
libre reactor de organismos no deseados es
especialmente importante para los cultivos de
crecimiento lento que pueden ser rápidamente superada
por la contaminación. Fermentadores deben ser capaces
de funcionar de forma aséptica para un número de días,
a veces meses. Típicamente, 3-5% de las
fermentaciones en una planta industrial se pierden
debido a un fallo de procedimientos de esterilización.
Sin embargo, la frecuencia y causas de contaminación
varían considerablemente de un proceso a otro. Por
ejemplo, la naturaleza del producto en fermentaciones
de antibióticos proporciona una cierta protección contra
contami- nación; menos de 2% de las fermentaciones
de antibióticos a escala de producción se pierde a través
de la contaminación por microorga- nismos o fagos
[12]. A diferencia de,
reactores [13].
Ij ingeniería de
reactores
Figura 13.11 Válvula de pinza.
fermentadores industriales están diseñados para sterilisa-
ción de vapor lazo bajo presión. El recipiente debe tener un
número mínimo de estructuras internas, puertos, boquillas,
conexiones y otros accesorios para asegurar que el vapor llega
a todas las partes del equipo. Para la esterilización eficaz, todo
el aire en las conexiones de los vasos y de tubos debe ser
desplazado por vapor. El reactor debe estar libre de grietas y
áreas estancadas donde el líquido o sólidos pueden acumular;
uniones soldadas pulido se utilizan en rencia prefe- a otros
métodos de acoplamiento. Pequeñas grietas o huecos en las
articulaciones y finas fisuras en las soldaduras son un refugio
para los contaminantes microbianos y se evitan en la
construcción fermentador cuando sea posible. Después de la
esterilización, todo el medio de nutrientes y aire que entra en
el fermentador debe ser estéril. Tan pronto como se detiene el
flujo de vapor en el fermcnter,
Figura 13.12 válvula de diafragma de tipo Weir en (a) cierra y (b) las posiciones abiertas.
entrada de contaminantes transportados por el aire. Filtros que
impide el paso de microorganismos se ajustan a las líneas de
gases de escape; esto sirve para contener la cultura dentro del
fermentador y se asegura contra la contaminación debe haber
una caída en la presión de funcionamiento.
Flujo de líquidos hacia y desde el fermentador es
controlado usando válvulas. Debido a que las válvulas son un
punto de entrada potencial de contami- con-, su construcción
debe ser adecuado para la operación aséptica. diseños
comunes tales como válvulas de compuerta y globo simples
tienen una tendencia a tener fugas alrededor del vástago de la
válvula y Accu sólidos de caldo Mulate en el mecanismo de
cierre. Aunque se utilizan en la industria de la fermentación,
son inadecuados se requiere alto nivel de esterilidad IFA. Se
recomiendan válvulas de manguito y el diafragma, tales como
los que se muestran en las figuras 13.11 y 13.12 para la
construcción fermentador. Estos diseños hacen uso de
manguitos o diafragmas flexibles de modo que el mecanismo
de cierre está aislado de los contenidos de la tubería y no hay
espacios muertos en la estructura de válvula. Goma o
neopreno capaz de ciclos de esterilización ING repetido
withstand- se utiliza para moldear el cierre de la válvula; El
principal inconveniente es que estos componentes deben
comprobarse periódicamente el desgaste para evitar el fallo de
la válvula. Para minimizar los costes, válvulas de bola y
enchufe también se utilizan en fermentador de construc- ción.
Con reactores agitados, otro punto de entrada potencial para con-
contami- es donde el eje del agitador entra en el recipiente. La
brecha entre el eje del agitador que gira y el cuerpo
fermentador debe ser sellado; si el fermentador se hace
funcionar durante largos períodos, el desgaste en el sello se
abre el camino para contaminantes transportados por el aire.
Varios rypes de sello agitador se han desarrollado para
prevenir la contaminación. En grandes fermentadores, sellos
mecánicos se utilizan comúnmente [14].
Ij ingeniería de
reactores
Ingeniería del Reactor i3 la inoculación asep- tic y toma de muestras. Los inóculos para las
fermentaciones a gran escala se transfieren de los reactores más
pequeños; para evitar la contaminación durante esta operación, ambos
vasos se man- CONTENIDAS bajo presión de aire positiva. El más
simple aséptica
Figura 13.13 Tuberías y válvulas conexiones para la
transferencia aséptica de inóculo para un fermentador a gran
escala. (De A. Parker, 1958, esterilización de los equipos, el aire
y los medios de comunicación en:... IN 5teel, Ed, Ingeniería
Bioquímica, pp 97-121, Heywood, Londres)

Cª

En estos dispositivos, una parte del montaje es estacionaria

mientras che otro gira en el eje; las superficies mecanizadas
con precisión de los dos componentes se presionan entre sí por
medio de muelles o fuelles ING expand- y refrigerados y
lubricados con agua. Los sellos mecánicos con superficies de
rodadura de carburo de silicio se combina con carburo de sten
tung- a menudo se especifican para la aplicación fermentador.
sellos Agitador son especialmente críticos si el reactor está
diseñado con un agitador de entrar en la parte inferior; sellos
mecánicos dobles pueden ser instalados para evitar fugas de
fluido. En vasos más pequeños, duros magnéticos pueden ser
utilizados para eje agitador par che con el motor; con estos
dispositivos, el sha no perforar el cuerpo fermentador. Un
imán en una carcasa en el exterior del fermentador es
accionado por el motor del agitador; dentro, otro imán está
unido al extremo del eje del agitador y mantenido en su lugar
por cojinetes. Suficiente energía puede ser transmitida usando
duros magnéticos para agitar los recipientes hasta por lo
menos 800 litros de tamaño [15]. Sin embargo, la idoneidad de
las unidades magnéticas para caldos viscosos, especialmente
cuando se requieren altas velocidades de transferencia de
oxígeno, es limitada.

13.3.2 La inoculación del fermentador y Toma

de Muestras
Debe tenerse en cuenta en el diseño de los fermentadores para
 esterilización de la línea de muestra; esto evita que cualquier
contaminante que entraron mientras que D estaba abierto de viajar
hasta el fermentador. Válvula D se cierra entonces y re-abre la
válvula C.

transferir método es para presurizar el recipiente de

inóculo utilizando aire estéril; cultura entonces se sopla 13.3.3 materiales de construcción
de manera efectiva en el fermentador grande. Un Los fermentadores se construyen a partir de materiales que
ejemplo de las conexiones de las tuberías y válvulas pueden soportar ciclos de esterilización de vapor y repetidas
requeridas para este tipo de transferencia se muestra en operaciones de limpieza. Materiales conducir, comunicándose con
la figura 13.13. El fermentador y su tubería y el el medio de fermentación y el caldo también deben ser no reactivo
depósito de inóculo y su tuberías, incluidas las válvulas y no absorbente. Glass se utiliza para construir menters fer- hasta
de H e I se esterilizan por separado antes de añadir la aproximadamente 30 litros de capacidad. Las ventajas de vidrio
cultura al depósito de inóculo. Con las válvulas H e I son que es suave, no tóxico, resistente a la corrosión y
cerrados, el pequeño recipiente se unió al fermentador transparente para facilitar la inspección de contenido del
en las conexiones A y B. Debido a que estos conectores recipiente clie. Debido a que se requieren enuy puertos para el
estaban abiertas antes de ser unido, que deben ser medio, inóculo, el aire y los instrumentos tales como el pH
esterilizados antes de abrir el depósito de inóculo. Con
las válvulas D, H, I y C cerrada y A y B ligeramente
abierta, el vapor fluye a través de E, F y G y sangra
lentamente de A y B. Aher unos 20 minutos a la
esterilización por vapor, las válvulas E y G y los
conectores A y B esta cerrado; ruta che del tanque de
inóculo a fermentador es ahora estéril. Válvulas D y C
se abren para el flujo de aire estéril en el fermentador
para enfriar la línea bajo presión positiva. La válvula F
se cierra entonces, las válvulas H e I se abren y el aire
estéril se utiliza para forzar el contenido del tanque de
inóculo en el fermentador. La línea entre los vasos se
vacía de más líquido residual por soplado con aire
estéril. Válvulas D, C, H e I se cierran para aislar tanto
el Menter fer- y el depósito de inóculo vacío que ahora
puede ser desconectada en A y B. La línea entre los
vasos se vacía de más líquido residual por soplado con
aire estéril. Válvulas D, C, H e I se cierran para aislar
tanto el Menter fer- y el depósito de inóculo vacío que
ahora puede ser desconectada en A y B. La línea entre
los vasos se vacía de más líquido residual por soplado
con aire estéril. Válvulas D, C, H e I se cierran para
aislar tanto el Menter fer- y el depósito de inóculo vacío
que ahora puede ser desconectada en A y B.
puertos de muestreo están montados en fermentadores
para permitir la extracción de caldo para el análisis. Una
disposición para muestreo que preserva operación aséptica
se muestra en la figura 13.14. Inicialmente, las válvulas A
y D se cierran; válvulas B y C están abiertos para
mantener una barrera de vapor entre el reactor y el medio
ENTORNO exterior. Válvula C a continuación, se cierra,
la válvula B parcialmente cerrada y la válvula D
parcialmente abierta para permitir que el vapor y el
condensado a sangrar desde el puerto de muestreo D. Para
el muestreo, A se abre brevemente para enfriar el tubo y
llevar lejos cualquier condensado que diluir la muestra;
este caldo se descarta. Válvula B se cierra entonces y una
muestra recogida a través de D. Cuando el muestreo se
completa, la válvula A se cierra y B se abrió para re-
Ij ingeniería de
reactores

pequeña escala; caudal de gas está limitada porque el burbujeador

Figura 13.14 Tuberías y válvulas conexiones para un
plantea un alto resis- tencia a fluir. Las células que crecen a través de
simple orificio de muestreo fermentador.
los orificios finos y

El vapor y
el
condensad
o

y sensores de temperatura, vidrio fermentadores arco suelen estar

equipados con placas cabezales de acero inoxidable que
contienen muchos racores roscados.
La mayoría de los fermentadores entre pilotos y a gran
escala están hechos de acero inoxidable sion resistente a
corrosión, aunque acero suave con revestimiento de acero
inoxidable también se ha utilizado. los grados más baratas de
aceroacero puede ser utilizado para la camisa y otras
superficies aisladas a partir del caldo. El cobre y materiales
que contienen cobre se deben evitar en todas las partes del
fermentador en contacto el cultivo debido a su efecto tóxico
sobre las células. superficies de acero interiores se pulen hasta
un acabado brillante 'espejo' para facilitar la limpieza y
esterilización del reactor; soldaduras en el interior del
recipiente se muelen ras antes del pulido. El electropulido es
nerales pre- sobre pulido mecánico que deja pequeñas crestas
y surcos en el metal a acumular suciedad y microorganismos.

13.3.4 rociador de Diseño

El burbujeador, impulsor y deflectores Determinar la
efectividad de la mezcla y la transferencia de masa de oxígeno
en biorreactores agitados. Diseño de impulsores y deflectores
se discute en la Sección 7.9. Tres tipos de rociador se utilizan
comúnmente en biorreactores: por- ous, el orificio y la
boquilla. Porososp metal,
vidrio o cerámica se utilizan principalmente en aplicaciones a
Ij ingeniería de informado de los reactores de tanque agitado operados a
bloqueo
reactores del rociador también puede ser un problema.
velocidades de flujo de aire entre 0,5 y 1,0 vvm (vvm significa
rociadores de orificio, también conocidos como tubos
volumen de gas por volumen de líquido por minuto) que a
perforados, se construyen haciendo pequeños agujeros
partir de una concentración de alcohol de partida de 5%,
en la tubería que se forma después en un anillo o cruz
y coloca en la base del reactor; agujeros individuales
deben ser lo suficientemente grande como para 13.4 Supervisión y Control de Biorreactores
minimizar los bloqueos. rociadores de orificio se han
utilizado en una extensión limitada para la producción El ambiente dentro de biorreactores debería permitir la
de levadura y de proteína unicelular y en el tratamiento actividad catalítica óptima. Parámetros tales como la
de residuos. rociadores Neale se utilizan en muchos temperatura, pH,
fermentadores agitados del laboratorio a la pro-
ducción escala. Estos rociadores constan de un solo
tubo abierto o parcialmente cerrado proporcionar una
corriente de burbujas de aire; ventajas en comparación
con otros diseños de rociadores incluyen baja
resistencia al flujo de gas y pequeño riesgo de
obstrucción. Otros diseños del rociador también se han
desarrollado. En res eyectores-inyecciones-PhMe a su
vez, gas y el líquido se bombean simultáneamente a
través de una boquilla para producir pequeñas
burbujas; en los diseños de rociador-agitador
combinados para fermentadores más pequeños, un
agitador de eje hueco se utiliza para deliv- ery de aire.
Independientemente del diseño del burbujeador, es
conveniente prever para la limpieza en el lugar del
interior de la tubería.

13.3.5 Evaporación Controlar

cultivos aeróbicos se roció continuamente con el aire;
sin embargo, la mayoría de los componentes del aire
son inertes y salen directamente a través de la línea de
gas de escape. Si el aire de entrada al fermentador es
seco, el agua se separa continuamente del medio y sale
del sistema como vapor. Durante un período de días,
la pérdida de agua por evaporación puede ser
significativo. Este problema es más pronunciado en
los reactores accionados por aire, porque los caudales
de gas requeridos para una buena mezcla y la
transferencia de masa son generalmente más altos que
en reactores agitados.
Para combatir los problemas de evaporación, el
aire burbujea en menters fer- puede ser pre-
humidificados por burbujeo a través de columnas de
agua fuera del fermentador; aire húmedo que entra en
el Menter fer- tiene menos capacidad de evaporación
que el aire diy. Los fermentadores también están
equipados con condensadores refrigerados por agua
para volver al caldo de cualquier vapor transportadas
por el gas de salida. La evaporación puede ser un
problema particular cuando los productos o sustratos
son más volátiles que el agua. Por ejemplo, especies
de Acetobacter se utilizan para producir ácido acético
a partir de etanol en un proceso altamente aeróbico
que requiere grandes cantidades de aire. Se ha
Ij ingeniería de
reactores

concentración de oxígeno disuelto, velocidad de flujo medio, ción debe ser compatible con la tasa de cambio del ser capaces
velocidad de agitación y la velocidad de burbujeo tienen un variabilidad supervisado. Por ejemplo, en una fermentación
efecto significativo sobre la OUT- venir de la fermentación y típica, la escala de tiempo para el cambio en el pH y la tensión
las reacciones enzimáticas. Para proporcionar el ambiente de oxígeno disuelto es de varios minutos, mientras que la
deseado, las propiedades del sistema deben ser monitorizados escala de tiempo para el cambio en la fluorescencia de cultivo
y la acción de control adoptadas para rectificar cualquier es menor que 1 segundo. Para otras variables como la
desviación de los valores deseados. monitoreo y control de la concentración de biomasa, una hora o más puede pasar antes
fermentación es un área activa de investigación dirigida a de que ocurran cambios mensurables. La frecuencia y la
mejorar el rendimiento de los bioprocesos y el logro de velocidad de medición deben ser consistentes con estas escalas
funcionamiento uniforme y fiable fermentador. de tiempo. Idealmente, las mediciones deben realizarse in situ
Existen varios niveles de control de procesos en la y en línea, es decir en o cerca del reactor durante el
industria de la fermentación. El control manual es el más funcionamiento, por lo que el resultado es disponible para la
simple, lo que requiere un operador humano para manipular acción de control oportuna. Muchas variables importantes
dispositivos tales como bombas, motores y válvulas. El como la concentración de biomasa y la composición caldo
control automático de realimentación se utiliza para mantener actualmente no pueden medirse en línea debido a la falta de
pará- metros a valores especificados. Con el aumento de la apro- instrumentos comió. En lugar, muestras deben ser
aplicación de las computadoras en la industria de la removidos del reactor y se llevaron al laboratorio para el
fermentación, también hay margen para la implementación de análisis fuera de línea. Debido a las condiciones de
estrategias de control y optimización avanzadas basadas en fermentación pueden cambiar durante el análisis de labo-
modelos de fermentación. ratorio, acción de control sobre la base de la medición no es
tan eficaz. mediciones fuera de línea se utilizan en
mentaciones fer- industriales para análisis de biomasa,
13.4. 1 Fermentación Monitoring carbohidratos, proteínas, fosfato y las concentraciones de
Cualquier intento de comprender o controlar el estado de una lípidos, la actividad enzimática y la reología caldo. Las
la fermentación depende del conocimiento de las variables muestras se toman generalmente manualmente cada 4-8 h; los
críticas que afectan al proceso. Estos parámetros se pueden resultados están disponibles 2-24 h más tarde. Las muestras se
agrupar en tres categorıas: física, química y biológica. toman generalmente manualmente cada 4-8 h; los resultados
Ejemplos de variables de proceso de cada grupo se dan en la están disponibles 2-24 h más tarde. Las muestras se toman
Tabla 13.1. Muchas de las medidas físicas que figuran están generalmente manualmente cada 4-8 h; los resultados están
bien establecidos en la industria fer- mentación; otros se están disponibles 2-24 h más tarde.
desarrollando en la actualidad o son el foco de la investigación Los ejemplos de mediciones que se pueden hacer en línea
de nuevos instrumentos. en la industria son la temperatura, presión, pH, oxígeno
A pesar de la importancia del control de la fermentación, disuelto diez Sion, tasa, velocidad de agitación, el consumo de
instrumentos fiables industrialmente y sensores capaces de energía, nivel de espuma, peso caldo y composición del gas de
mediciones rápidas, precisas y directas no están disponibles fluir. Instrumentos para tomar estas medidas son relativamente
para muchas variables de proceso. Para un control efectivo de común; descripciones detalladas se pueden encontrar en otras
las fermentaciones en base a los datos medidos, el tiempo partes [17-19]. La disponibilidad de una medición en línea o
necesario para completar la medición su uso en el laboratorio no significa necesariamente que se
aplica en el procesamiento a escala comercial. Debido al coste
Tabla 13.1 Parámetros de medida o controlada en de la instalación y las consecuencias financieras de fallo del
biorreactores instrumento durante la fermentación, dispositivos La medición
utilizados en la industria debe cumplir con el rendimiento
estrictos

£ Velocidad del
Físico Químico
agitador nivel -oam
nivel de peso El consumo de energía del pH
líquido del caudal de gas caudal O2 disuelto CO disuelto 2 Potencial
reactor medio de cultivo de gas redox
Temperatura viscosidad atraco Salir composición del gas de conductividad
Presión composición Broth (sustrato, producto,
Ij ingeniería de
concentraciones
reactores Biológico
de iones, etc.)
con
cen
trac
ión
de
bio
ma
sa
co
mp
osi
ció
n
enz
imá
tica
con
cen
trac
ión
de
bio
ma
sa
(Tales
como
ADN,
ARN,
proteínas
, ATP /
ADP /
AMP,
los
niveles
de NAD
/
NADH)
vi
a
b
il
i
d
a
d
M
o
rf
o
l
o
g
ía
Ij ingeniería de
reactores

Figura 13.15 Principio de funcionamiento de los biosensores. (De EAH Hall, 1991, Biosensores, Prentice-Hall, Nueva Jersey).

Señal

transduct
or de
señal

biológicame
nte
sensibles
revestimie
nto
punta del biosensor

criterios. Estos incluyen: una precisión de l -2% analito

de la escala ilustra esquemáticamente en la figura 13.15, la dad específica- unión
incompatibles
completa, un funcionamiento fiable durante por lo menos 80% de moléculas biológicas particulares inmovilizado sobre la
del tiempo, bajas necesidades ANCE mainten-, capacidad de
esterilización de vapor, la calibración simple y rápido, y la
deriva máxima de menos de I -2% de escala completa [1].
sondas de pH esterilizables han demostrado ser fiable si a
tierra adecuada y se utilizan ampliamente en las
fermentaciones industriales; su baja tasa de fracaso es asistido
por la sustitución cada cuatro o cinco fermentaciones. Sin
embargo, una variedad de problemas se asocia- dos en el
entorno industrial con electrodos para el dióxido de carbono
disuelto, potencial redox y iones específicos; Por lo tanto,
estos instrumentos están confinados principalmente a
aplicaciones de laboratorio. La deriva y la interferencia de las
burbujas de aire son bien conocidas limitaciones con sondas de
oxígeno disuelto en fermentadores industriales; depósitos y
ensuciamiento microbiano de la membrana también reducen la
seguridad de medición. Incluso si los electrodos son
esterilizables por vapor, la vida de la sonda se puede reducir
de manera significativa por repetidos ciclos de esterilización.
Desarrollo de nuevas mediciones en línea para las variables
químicas y biológicas es un área desafiante de investigación en
ingeniería de bioprocesos. Una de las áreas objetivo es
biosensores [20, 21]. Hay muchos diseños diferentes
biosensores; sin embargo, en general, los biosensores
incorporan un elemento de detección biológica en estrecha
proximidad o integrados con un transductor de señal. Como se
Ij ingeniería de
sonda se utiliza para 'sentido' o reconocer las especies
reactores
objetivo en el caldo mentación fer-; en última
instancia, se genera una señal eléctrica después de la
interacción entre la detección de moléculas y analizar
es detectado por el transductor. También se están
desarrollando biosensores que utilizan células
inmovilizadas para reconocer componentes del caldo.
Los biosensores con la enzima, de anticuerpos y de
células de detección-elementos han sido probados para
una amplia gama de sustratos y productos, incluyendo
glucosa, sacarosa, etanol, ácido acético, amoníaco,
penicilina, urea, riboflavina, colesterol y aminoácidos.
Sin embargo, aunque varios biosensores son
comercialmente disponibles, que no se utilizan para el
seguimiento habitual de las fermentaciones a gran
escala debido a problemas insolubles con la robustez,
la esterilización, limitando su vida útil y la estabilidad
a largo plazo. En este punto, debido a la sensibilidad
de sus componentes biológicos, biosensores parecen
ser más adecuado para el diagnóstico médico y los
análisis ambientales que en aplicaciones de
bioprocesos situ. Sin embargo, los biosensores pueden
ser utilizados para el análisis rápido de muestras de
caldo retirados de fermentadores.
Otro enfoque para surements medi- químicas y
biológicas en línea y implica el uso de dispositivos de
muestreo automático vinculados a equipos de análisis
de alto rendimiento chroma- líquido tografía (HPLC),
análisis de imágenes, RMN, citometría de flujo o
fluorometiy. Para que estas técnicas funcionan, los
métodos deben estar disponibles para el muestreo
aséptico en línea y análisis sin obstrucción o
interferencia de burbujas de gas y sólidos celulares.
Ij ingeniería de
reactores

Desarrollo en esta área se ha centrado en el análisis inyrction
jlfrw (NZ4), una técnica de manipulación de muestras para la
eliminación de medio sin células del fermentador y la entrega
de un pulso de analizar a los dispositivos de medición situ m.
Hasta la fecha, la rutina de medición de línea situ del
parámetro de fermentación más fundamental, la concentración
de biomasa, no se ha logrado. Se han desarrollado varios
procedimientos basados en turbidez del cultivo, dispersión de
luz, fluorescencia, calorimetría, membranas piezoeléctricos, de
radiofrecuencia permitividad dieléctrica y la acústica; sin
embargo, no han demostrado ser suficientemente preciso y
fiable en condiciones industriales. Las burbujas de aire y
partículas de fondo interfieran fácilmente con las lecturas
ópticas, mientras que la relación entre la densidad de la
biomasa y ocre propiedades cul- tura tales como fluorescencia
se ve afectada por el pH, tensión de oxígeno disuelto y niveles
de sustrato [19]. Otros difi cultades se han encontrado en el
desarrollo de dispositivos automáticos de muestreo; el más
importante de ellos es el alto riesgo de contaminación y
obstrucción. Más detalles acerca de las técnicas de medición
en línea se pueden encontrar en otras partes [22, 23].
En una gran fábrica de fermentación, miles de diferente
variabilidad
Ables se puede monitorizar en cualquier momento dado. El
dispositivo tradicional para el registro de información en línea
proceso es el registrador de gráficos; Sin embargo, con el
aumento de la aplicación de las computadoras en la industria
de la fermentación, el registro de datos digital es generalizada.
Debido a la enorme cantidad de información obtenida del
monitoreo continuo de bioprocesos, un problema creciente en
la industria es la utilización y gestión tivo effec- de gigabytes
de datos.
13.4.2 Análisis de medición
Cualquier intento de analizar o no aplicar los resultados de la
monitorización de la fermentación debe tener en cuenta los
errores y resultados falsos o transitorios incorporados en los
datos. El ruido y la variabilidad son problemas particulares con
ciertas mediciones de fermentación; por ejemplo, sondas
utilizadas para pH y oxígeno disuelto mediciones están
expuestas a fluctuaciones rápidas y heterogeneidades en el
caldo de modo que el ruido puede afectar seriamente la
precisión de las lecturas de punto. Figura 13.16 muestra los
resultados típicos de medición de línea en sitio de la tasa de
dilución y dióxido de carbono

Figura 13.16 mediciones en línea de la tasa de dilución y el dióxido de carbono del gas de escape durante una fermentación
micelial industrial. (Desde GA Montague, AJ Morris y AC Ward, 1989, seguimiento y control de la fermentación:.... Una
perspectiva Biotechnol Genes Eng RRV 7, 147-188.).

0 3IXi

Tiempo
(h)
Ij ingeniería de
reactores
la evolución en un fermentador de producción a gran escala;
en muchos casos, la punta nalconditioning oz suavizado musa
llevarse a cabo para reducir el ruido en estos datos antes de
que se pueden aplicar para el proceso de con- trol o modelado.
La mayoría de los sistemas de adquisición de datos y de
registro modernos contienen instalaciones para el
acondicionamiento de señales. ruido pseudo-aleatorio no
deseado se puede filtrar a cabo usando circuitos de filtro
analógico o promediando valores por encima de mediciones
sucesivas. Como alternativa, las señales filtradas se pueden
digitalizar y algoritmos de filtrado aplicados utilizando
programas informáticos. deriva de medición no se puede
corregir utilizando circuitos electrónicos; los instrumentos
deben ser recalibrados periódicamente durante fermentaciones
largas para evitar la pérdida de precisión.
Los datos en bruto a veces se usan para calcular variables
derivadas que caracterizan el funcionamiento del fermentador.
Las variables derivadas más comunes son la tasa de absorción
de oxígeno, la velocidad de desprendimiento de dióxido de
carbono, el HQ cociente respiratorio, y el coeficiente de
transferencia de masa I • Ln. Como tasa de oxígeno-absorción
es
por lo general calculada de la diferencia entre dos cantidades
de magnitud similar (entrada de gas y los niveles de oxígeno
de salida; véase la Sección 9. 10.1), el ruido en esta variable
puede ser significativa [24] y afectar a la calidad de otras
variables dependientes como 1p <r y HQ.
13.4.3 Análisis de Fallos
Los fallos en el funcionamiento del reactor afectan el 15-20%
de fcrmentations [25]. mediciones de fermentación se pueden
utilizar para detectar fallos; por ejemplo, las señales de un
sensor de flujo se podrían utilizar para detectar bloqueos en un
tubo y activar una alarma en la sala de control de fábrica. Sin
embargo, normalmente, los propios sensores son los
componentes más propensos a fallar; tasas de fracaso de
algunos instrumentos de fermentación se enumeran en la
Tabla 13.2. El fallo de un sensor de fuerza
Tabla 13.2 Fiabilidad de los equipos de fermentación
(De SW Carleysmith, 1987, Monitoreo de bioprocesamiento, En.' ]'. R. Leigh, Ed,Modelado y control de la fermentación
Procesos, pp. 97-I 17, Peter Peregrines, Lond »Ni y PN Royce, 1993, A desarrollos discusión ofrecent en el seguimiento y
control de la fermentación de una perspectiva práctica, Crit. Rev. Biotechnol. 13, HZ-149)
Equipo Confiabili
dad
Probeta de temperatura
sonda de pH 98%
sonda de oxígeno disuelto A - 80%
ser detectado como un cambio inesperado o tasa de cambio en
su señal, o un cambio en las características de ruido. Varios
enfoques se pueden utilizar para reducir el impacto de los
fallos en fermentaciones a gran escala; estos incluyen la
comparación de las mediciones actuales con los valores
históricos, la comprobación cruzada entre las mediciones
independientes, utilizando múltiples y copias de seguridad de
sen- sores, y la redundancia de hardware en los sistemas
informáticos de construcción y fuentes de alimentación.
13.4.4 Modelado de procesos
En los enfoques modernos de control de la fermentación, se
requiere un modelo matemático razonablemente precisa del
entorno de la reacción y el reactor. El uso de modelos de
procesos, podemos progresar más allá del control ambiental
de biorreactores en el ámbito del control biológico directo.
Desarrollo de modelos de la fermentación es ayudado por la
información de las mediciones tomadas durante la operación
del proceso.
Los modelos son relaciones matemáticas entre las
variables. Tradicionalmente, los modelos se basan en
relaciones de una combinación of'theoreti- Cal' que
proporcionan la estructura del modelo, y las observaciones
experimentales que proporcionan los valores numéricos de
coefhcients. Para los procesos biológicos, especificando la
estructura del modelo puede ser difhcult debido a la
complejidad de procesos celulares y el gran número de fac-
tores ambientales que afectan cultivo celular. Por lo general,
los modelos de bioprocesos son muy simplistas
representaciones aproximadas deducidas de la observación
más que de leyes teóricas de la ciencia. Como un ejemplo, un
modelo matemático usado frecuentemente para el lote
mentación fer- consiste en la ecuación de Monod para el
crecimiento y una expresión para la velocidad de consumo de
sustrato como una función de la concentración de biomasa:
Tiempo medio entre fallos
(semanas)
150-200
9--48
9-20
Ij ingeniería de de masas
Espectrómetro 10-50
reactores
analizador de O2 paramagnético 24
infrarrojos CO 2 sistema de 52
análisis por ordenador
Ij ingeniería de
reactores

A menudo, los retrasos considerables participan en off-line

medición ción de variables importantes tales como
concentraciones de biomasa, sustrato y producto. Tales
(13.5)
retrasos hacen que el control eficaz de la difhcult reactor si la
-dix acción de control es dependiente del valor de estos
= + m x. parámetros, pero deben llevarse a cabo más rápidamente que
Dr Y el análisis fuera de línea permite. Un enfoque a este problema
es utilizar mediciones en línea disponibles en conjunción con
modelos matemáticos del proceso para estimar desconocido
variables. Los programas informáticos y los procedimientos
numéricos
Este modelo representa una combinación de las ecuaciones
(11.52), (11.60) y (11.72). La forma de las ecuaciones se
13.4.5 Estimación de Estado
determinó de la observación experimental de un gran número
de diferentes sistemas de cul- tura. En principio, una vez que Como se describe en la Sección 13.4.1, no es posible medir en línea
los valores de los parámetros p “, se han determinado P, K $, y todas las variables clave o estados de un proceso de fermentación.
md, podemos usar el modelo para estimar la concentración de
células x y la concentración de sustrato s como una función del
tiempo. Un problema común con los modelos de fermentación
es que los parámetros del modelo pueden ser difíciles de medir
o cambiar con el tiempo.
Ya hemos encontrado varias ecuaciones del modelo en este
book¡ ejemplos incluyen la cinética, el rendimiento y las
relaciones ANCE mainten- introducidas en el capítulo 11 y las
ecuaciones estequiométricas del capítulo 4 en relación con
masas de sustratos, biomasa y productos durante la reacción.
Otros modelos se obtuvieron en el capítulo 12 para las
reacciones heterogéneas; dependencia de parámetros de
cultivo tales como la concentración de células en condiciones
físicas en el biorreactor están representados en forma sencilla
por las ecuaciones de las Secciones 8.6.1 y 9.5.2. Los modelos
de proceso variar en forma, pero tienen la característica común
de que ellos predicen salidas de un conjunto de entradas.
Cuando se utilizan modelos para el control de la fermentación,
que se basan generalmente en masa y la energía del balance de
ecuaciones para el sistema.
Desarrollo de un modelo global que abarque todos los
aspectos clave de bioprocesos OFA particular y capaz de
predecir los efectos de una amplia gama de variables de
cultivo es un ejercicio exigente. modelos precisos aplicables a
una amplia gama de condiciones de proceso son raros. Como
muchos aspectos de la fermentación están mal sub puso de pie,
se difhcult para idear modelos matemáticos que cubren estas
áreas. Por ejemplo, la respuesta de las células a las variaciones
concentración de

espaciales en disuelto en oxígeno y los niveles de sustrato en

fermentadores, o el efecto de diseño del impulsor sobre el
biomasa

crecimiento microbiano y la productividad, no se incorpora

generalmente en modelos porque el sujeto se ha estudiado de
forma inadecuada. La evidencia de que todas las variables
importantes de fermentación aún no se han identificado es la
significativa variación de lote a lote que se produce en la
industria de la fermentación.
Ij ingeniería de
desarrollado
reactores para lograr esto son llamados
u observadores. El filtro de Kalman es un tipo bien
conocido de observador aplicable a ecuaciones proceso
lineal; sistemas no lineales puedenser tratado usando el
filtro extendedKalman [26]. El éxito de los filtros de
Kalman y otros observadores depende en gran medida
de laprecisión y robustez del modelo de proceso utilizado.
Varias técnicas para la estimación de estado son
disponible. Como un simple ejemplo, mediciones en línea
de dióxido de carbono en fermentador de gas de escape se
pueden aplicar con un modelo de proceso apropiado para
estimar la concentración de biomasa durante penicilina
fer- mentación [27]. Como se muestra en la figura 13.17,
los resultados fueron satisfactorios para 100-M *
fermentaciones fed-batch durante un período de más de 8
días. la estimación directa del Estado puede lograr
resultados razona- ble, siempre que el modelo de proceso
sigue siendo válido y el estimador es capaz de reducir el
ruido de medición. Sin embargo, si

Figura 13.17 Medido y estimado concentraciones

de biomasa en un gran escala la fermentación
discontinuo alimentado penicilina. (GA Desde
Montague, AJ Morris y JR Bush, 1988,
Consideraciones en el desarrollo esquema de control
para el control del proceso de fermentación. IEEE
Contr. Sys. Mag. 8, abril, 4M8).

020406080 100 120 140 160 180

200

Tiempo (h)
Ij ingeniería de
reactores
Figura 13.18 Componentes OFA bucle de control de retroalimentación.
grandes fluctuaciones se producen en condiciones de
funcionamiento o si las propiedades de células y los parámetros
del modelo cambian con el tiempo, el modelo puede llegar a ser
insuficiente y precisión de la estimación disminuirán. estimadores
adaptativos se utilizan para ajustar los parámetros del modelo
defectuosas como la fermentación procede a aliviar problemas
causados por error en las ecuaciones. mediciones fuera de línea
también se pueden incorporar en el procedimiento de estimación
a medida que estén disponibles para mejorar la exactitud y
fiabilidad de la predicción. Otra técnica consiste en sensores de
software 'genéricas' que utilizan modelos generalmente-
estructuradas en lugar de ecuaciones del modelo específicos para
el proceso de interés. Características del proceso son luego
'aprendieron' o se incorporan en la estructura del modelo como se
disponga de información de línea y fuera de línea de mediciones.
técnicas de masas de equilibrio son otro enfoque para la
estimación del estado. Como se describe en el Capítulo 4, la
biomasa puede ser ed realizan estimaciones de estequiometría
y otras mediciones de proceso utilizando balances elementales.
Este método es adecuado para la fermentación de medios
definidos, pero es difícil de aplicar con ingredientes complejos
medianas tales como melaza, hidrolizado de caseína, harina de
soja y licor de maíz que han indefinido com- posición
elemental. Otra desventaja es que la precisión de la estimación
de la biomasa a menudo depende de la medición de sustrato o
producto de concentración que debe realizarse fuera de línea.
13.4.6 Control de retroalimentación
Supongamos que deseamos mantener el pH en un biorreactor a
un valor constante contra una variedad de trastornos, por
ejemplo,
de la actividad metabólica. Uno de los esquemas de control más
simples es un bucle de control de realimentación convencional,
los elementos básicos de los cuales se muestra en la figura 13.18.
Un dispositivo de medición detecta el valor de la pH y envía la
señal a un controlador. En el controlador, el valor medido se
compara con el valor deseado conocido como el boief Arr. La
desviación entre los valores medidos y deseados es la rrror, que
se utiliza por el controlador para determinar qué acción debe ser
tomada para corregir el proceso. El controlador puede ser una
persona que supervisa las medidas de proceso y decide qué
hacer; más presagio el controlador es un automático electrónico,
neumático o equipodispositivo. El controlador produce una
señal que se transmiteal actuador, que ejecuta la acción de
control. En un sistema típico para el control de pH, un electrodo
serviría como el dispositivo urement medi- y una bomba
conectada a un depósito de ácido o álcali como el actuador. ---
simple en offcontrol es generalmente sufh-ciente para pH; Si el
pH medido cae por debajo del punto de ajuste, el controlador
cambia de la bomba que añade álcali a la Menter fer-. se
añade diez suficientemente alcalino y el pH volvió a el valor
establecido, la bomba se apaga. Las pequeñas desviaciones de la
del punto de ajuste son generalmente tolerados en en el control --
- off para evitar de conmutación y problemas debido al retardo de
medición rápida.
On - control de apagado se utiliza cuando el actuador es un
dispositivo en --- apagado, tal como una bomba de una sola
velocidad. Si la función del accionador cubre un rango continuo,
tal como una bomba de velocidad variable para el suministro de
agua o de una válvula de determinar la tasa de flujo de aire de
refrigeración, es común utilizar el control oz PID proporcional-
integral-derivado Con control PID, el acción de control está
determinado en proporción al error, la integral del error y la
derivada del error con respecto al tiempo. Las ponderaciones
Ij ingeniería
relativas de a estas funciones determinan la respuesta
dadas
reactores
de
Ij ingeniería de
reactores

el controlador y la 'fuerza' global de la acción de control. indicador del estado metabólico en este proceso; valores HQ
anteriores control PID se utiliza para determinar, por ejemplo, si el sobre 1 indican la formación de etanol. En velocidad de
la bomba de levadura panaderos industriales para el agua de refrigeración en los anillos de una producción fermentador, la
velocidad de alimentación de glucosa al cultivo se controla debe aumentarse en una cantidad pequeña o grande cuando un
cierto para mantener fiQvalues dentro del intervalo deseado.
aumento de la temperatura del reactor se detecta por encima del punto de ajuste.
El ajuste correcto de los controladores PID por lo general
proporciona exce- lente regulación de la variable medida. Sin
Control programado 13.4.8
embargo, mal
controladores sintonizados pueden desestabilizar un proceso y causa continu-Debido al carácter variable en el tiempo inherente
de lote y ous o fluctuaciones acentuadas en cultivo
fermentaciones por lotes conditions.fed, manteniendo una constantes Consideraciones de medio ambiente para ajustar
controladores PID están cubiertos En o valores constantes de variables metabólicas no es siempre los
textos Opti en el control de procesos, por ejemplo estrategia de control [29] .mal. Dependiendo del proceso, Cerrar
los cambios en el control de la fermentación requiere simultánea moni-variables tales como el pH y la temperatura a crítico
los tiempos pueden Toring y ajuste de muchos parámetros. En
lugar tasa de producción ofimprove y el rendimiento. La variación de la tasa de los controladores de alimentación
individuales para cada función, es cada vez com-es importante en las fermentaciones de levaduras discontinuos alimentados
panadería a mini- cosa corriente utilizar un único ordenador o
microprocesador formise el efecto Crabtree y maximizar la producción de biomasa. varios bucles de control de
retroalimentación. Los registros de ordenadortasa de medida-Feed también se manipula de E. coli fermentaciones
para reducir mentos de una serie de sensores en una secuencia de tiempo y síntesis generatesby-producto. En
fermentaciones secundario-metabolitos, señales electrónicas que pueden ser utilizados directa o indirectamente tasa de
crecimiento tospecific debe ser alto en el inicio de la cultura conducir varios actuadores. Aplicación de las
computadoras requiresbut, a altas densidades celulares, diferentes condiciones de se requieren digitalización de las
señales del sensor; despuéscrecimiento lento digital-analogueto y estimular producto formación. conversión similar de
la salida, el ordenador o microprocesadorSe necesitan canstrategies para optimizar proteína síntesis a partir de
proporcionar las mismas funciones PID como una convencional analoguerecombinant organismos. Expresión de
controlador producto recombinante. Si se utilizan ordenadores
para conducir el actuadordispositivos, es generalmente evitado en el inicio de la cultura porque el
crecimiento celular el sistema se dice que es bajo Jirecrdigfiofrozirrof (DDC) .is afectada negativamente; Sin embargo, más
tarde en el lote un inductor es
añadido para activar la síntesis de proteínas.
Para muchas bioprocesos, una secuencia de tiempo particular de
13.4.7 Control metabólico
pH, temperatura, tensión de oxígeno disuelto, velocidad de
indirecto alimentación y otra
Mantenimiento de los valores particulares de temperatura o el pH es más bien las variables se requiere para desarrollar la cul tura
de tal manera que el enfoque indirecto al biorreactor control; el objetivo más amplio se está maximizada la productividad. Un a
estrategia de control que puede acom- para optimizar el rendimiento del catalizador y maximizar modate produc- cambios en las
variables de fermentación de amplio alcance es ción del producto deseado. Ciertas variables derivadas tales como programado
contro [también conocido como la programación por lotes fermentador. la tasa de absorción de oxígeno y el cociente respiratorio
pueden ca1cu- En control programado, la política de control consiste sched- OFA lated de en línea mediciones de fermentación;
estas variables ule de funciones de control a ser implementadas en diversos momentos reflejan en cierta medida el estado
biológico de la cultura. Es posible durante el proceso.conditions.model de la sistema.
control metabólico indirecto se utiliza a menudo en fed-batch cul-
tura de levadura de panadería. Debido al efecto de Crabtree,
metabolismo de la levadura puede cambiar de respiratoria al
Aplicación 13.4.9 de la Inteligencia Artificial en el
modo fermentativa dependiendo de glucosa predominante y
Control Bioprocesi
con--oxígeno disuelto
centraciones. El rendimiento máximo de biomasa a partir de sustrato es de varios enfoques diferentes para el control de
bioprocesos se han logrado a concentraciones relativamente bajas de glucosa en la PRESION descrito en las secciones
 Ij ingeniería deSin embargo, la fermentación ENCE de oxígeno adecuado; metabolismo fermentativo se produce si los sistemas
precedentes.
reactores
son por multivariable naturaleza con no lineal y tiempo- la concentración de glucosa se eleva por encima de un cierto nivel,
incluso variando las propiedades, y estrategias de control convencionales puede aunque el oxígeno puede estar presente.
metabolismo fermentativo no ser totalmente satisfactoria. En el entorno industrial, adiciones se debe evitar por la producción de
biomasa debido a que el rendimiento de los problemas cionales son causadas por perturbaciones inesperadas que las células se
reduce a medida etanol y dióxido de carbono se forman como afectar la operación del proceso. La mayoría de bioprocesos no
pueden ser productos finales. El HQ cociente respiratorio es un cómodo descrito exactamente por un modelo matemático;
También se difhcult
Ij ingeniería de
reactores

formular generalizaciones de la experiencia ous previ-. Ofrecen la

para identificar de antemano los valores óptimos de
capacidad de aprender complejas relaciones no lineales entre las
metabólica o parámetros ambientales y funciones de respuesta
variables y por lo tanto pueden ser útiles en el desarrollo de modelos
del controlador. La flexibilidad de los programas informáticos
de procesos y para la estimación
es una ventaja significativa en situaciones complejas;
investigadores continúan avanzando en el desarrollo de
algoritmos óptimos, adaptativas y de ajuste automático para el
control de bioprocesos. Sin embargo, aunque estas técnicas
ofrecen mucho para mejorar el rendimiento del proceso, el
enfoque matical mathe- habitual puede no ser la mejor manera
de resolver los problemas de control de bioprocesos.
Un desarrollo relativamente reciente en la ingeniería de
control es la aplicación de técnicas de inteligencia artificial,
especialmente qstems mpert bused-knowkdge. El término
'sistema experto' generalmente se refiere a software de ordenador
que procesa linguistically- formulado 'conocimiento' sobre un
tema particular; este conocimiento está representado por reglas
simples. El paso más importante en la construcción de un sistema
experto útil es la extracción de reglas heurísticas o subjetivas
empíricas a partir de datos experimentales y los expertos
humanos. Puede hacerse uso de la cada vez mayor can- tidad de
los datos medidos de fermentación de los procesos industriales
para la síntesis de la amplia gama de normas requeridas para los
sistemas expertos. El conocimiento disponible se codifica
utilizando un ordenador como IF / A continuación, escriba reglas,
por ejemplo, ir la densidad celular es alta, entonces se recomienda
la dilución con agua estéril,de la evolución de dióxido de carbono
disminuye rápidamente y la concentración de azúcar gotas ANEI
el pH aumenta, ENTONCES caldo se aconseja chaleco har-.
Información sobre el progreso de las fermentaciones de alta
productividad también se almacena en la base de conocimientos.
Medida que se disponga de fermentaciones en curso datos
medidos, las técnicas de reconocimiento de patrones se aplican
para evaluar los resultados y, en conjunción con la base de
conocimientos y sus reglas, manejar una variedad de problemas
de funcionamiento o perturbaciones. El sistema experto también
puede 'aprender' nueva información sobre el comportamiento pro-
ceso mediante la actualización de su base de conocimientos. Para
maximizar el potencial de los sistemas expertos para la con- trol
inteligente de supervisión de los procesos de fermentación,
grandes y representativos bases de datos de información
microbiológica y el borde de ingeniería knowl- deben
establecerse para uso en la formulación de la regla y la
interpretación de los fenómenos de proceso. Los sistemas
expertos también se pueden utilizar para el diagnóstico de fallos,
la estimación no medibles propiedades mentación fer-, conciliar
los datos contradictorios y modelado asistido por ordenador del
metabolismo (30-33].
Otra área de la inteligencia artificial con aplicaciones en
control de la fermentación es la teoría de las redes neuronales.
Las redes neuronales son particularmente adecuados para la
extracción de informa- ción útil de los datos complejos e
inciertos, tales como mediciones de fermentación, y para
Ij ingeniería de Hasta ahora, en este capítulo hemos considerado la
parámetros
reactores de la fermentación desconocidos. Neural
configuración de los biorreactores y aspectos de su
gy tecnolo- red se basa en una analogía con el cerebro
fabricación y control. Otro factor importante que influye en el
en que la información se almacena en forma de
rendimiento del reactor es modo de funcionamiento. Hay tres
elementos conectados computacionales o pesos
modos principales de funcionamiento del reactor bio-: por
(sinapsis) entre las neuronas artificiales. La
lotes, por lotes alimentados y continua. Elección de la
comúnmente utilizada-estructura neural más com- es
estrategia de operación tiene un efecto significativo sobre la
la red de alimentación hacia adelante en el que las
conversión de sustrato, la concentración del producto, la
neuronas están dispuestos en capas; las señales
susceptibilidad a la nación contami- y fiabilidad del proceso.
entrantes en la capa de entrada son alimentados hacia
Características tales como sustrato final, el producto y
adelante a través de las conexiones de red a la capa de
concentraciones de biomasa y el tiempo requerido para la
salida. La topología de la red le proporciona potentes
conversión se pueden determinar para diferentes esquemas de
capacidades de procesamiento de datos. Para resolver
funcionamiento del reactor utilizando balances de masa. Para
un problema, una estructura de red se elige y ejemplos
un sistema de reacción general, podemos relacionar las tasas
de los conocimientos que se adquiridas se presentan a
de cambio de las masas de los componentes en el sistema para
la red que ajusta la fuerza tic synap- de sus
la velocidad de reacción usando la Ec. (6.5):
.connections neuronales de manera que, en efecto, el
conocimiento está integrado dentro de la estructura.
Cuando el conjunto de datos reales se presenta al
sistema, la red es capaz de predecir los resultados en di
base al conjunto de aprendizaje. Por ejemplo, la (6,5)
información sobre la tasa de flujo de alimentación y
donde la Sra masa del componente A en el recipiente, i es el
las concentraciones de sustrato y la biomasa como una
tiempo,, es la tasa de flujo de masa de A. entra en el reactor, el
función del tiempo se puede utilizar para desarrollar
flujo de masa Mq1s
una red neural para el análisis del comportamiento
tasa de A. dejando, Rc es la tasa de masa de generación de A.
transitorio de la fermentación continua que es capaz por reacción, y FIC es la tasa de masa de consumo de A. por
de predecir futuros cambios en las concentraciones de reacción. En esta sección se considera la aplicación de la
sustrato y de células [34 -36]. Aunque queda mucho ecuación. (6.5) a lote,
por hacer en esta área una cantidad considerable de
investigación, las redes neuronales son una
herramienta prometedora para el modelado, estimar y
predecir las características mentación fer-.
información sobre la tasa de flujo de alimentación y
las concentraciones de sustrato y la biomasa como una
función del tiempo se puede utilizar para desarrollar
una red neural para el análisis del comportamiento
transitorio de la fermentación continua que es capaz
de predecir futuros cambios en las concentraciones de
sustrato y de células [34-36] . Aunque queda mucho
por hacer en esta área una cantidad considerable de
investigación, las redes neuronales son una
herramienta prometedora para el modelado, estimar y
predecir las características mentación fer-.
información sobre la tasa de flujo de alimentación y
las concentraciones de sustrato y la biomasa como una
función del tiempo se puede utilizar para desarrollar
una red neural para el análisis del comportamiento
transitorio de la fermentación continua que es capaz
de predecir futuros cambios en las concentraciones de
sustrato y de células [34-36] . Aunque queda mucho
por hacer en esta área una cantidad considerable de
investigación, las redes neuronales son una
herramienta prometedora para el modelado, estimar y
predecir las características mentación fer-.

13.5 Operación del Reactor Ideal

Ij ingeniería de
reactores

reactores continuos para la conversión enzimática y la Figura 13.19 Diagrama de flujo para una enzima-reactor
fermentación de alimentación por lotes y. discontinuo agitado.

13.5.1 Operación por lotes de un reactor de

mezcla
Los procesos por lotes operan en sistemas cerrados; sustrato
se añade al comienzo del proceso y de los productos eliminado
sólo al final. reacciones aeróbicas no son operaciones por lotes
en el sentido más estricto; la baja solubilidad de oxígeno en
medios acuosos significa que debe ser suministrada de forma
continua mientras que el dióxido de carbono y otros gases
residuales se eliminan. Sin embargo, los reactores con ninguna
entrada u salida de líquido se clasifican como por lotes. Si no
hay fugas o evaporación del recipiente, el volumen de líquido
en los reactores por lotes puede considerarse constante.
La mayoría de los biorreactores comerciales son vasos
mixtos operados por lotes. El reactor de mezcla clásico es el
de depósito agitado; sin embargo reactores de mezcla también
pueden ser de columna de burbujas, puente aéreo u otra
configuración, siempre que las concentraciones de sustrato,
producto y catalizador dentro del recipiente son uniformes. El
coste de funcionamiento de un reactor discontinuo depende
del tiempo necesario para alcanzar la concentración del
producto deseado o nivel de conversión de sustrato; los costes
de explotación se reducen si la reacción se completa Quick-ly.
Por tanto, es útil ser capaz de predecir el tiempo necesario
para las reacciones por lotes.

La reacción enzimática 13. 5. 1. l

Vamos a aplicar la ecuación. (6.5) para el sustrato limitante en La integración de esta ecuación diferencial proporciona una
un reactor de enzima por lotes tal como la mostrada en la expresión para el tiempo de reacción por lotes. Suponiendo r
figura 13.19. si = Afp 0 porque no hay flujo de sustrato en o “, p y“K, Son constantes durante la reacción, las variables de
fuera del recipiente; masa de sustrato en el reactor, M, es igual separación:
a la concentración sustrato S multiplicado por el volumen de
líquido U Como sub-
Strate no se genera en la reacción, Rs - = 0. Tasa de FIC
consumo de sustrato es igual a la tasa volumétrica de reacción
r multiplicado por U, r está dada por la ec. (11,31). Por lo tanto,
la masa
equilibrar la ecuación. (6.5) es:

(13.9)

(13.7) y la integración con condición inicial s = sq en I = 0 da:

donde r “, p es la velocidad máxima de reacción de la enzima K

En
y“K , Es la constante de Michaelis. Debido a su constante en
“máx yo F "hombre
lotes res reacciones, podemos tomar fuera del diferencial y
cancelar
a través de la ecuación para dar:
Ij ingeniería de (13.10)
reactores
donde ip es el tiempo de reacción por lotes requerido para reducir
la concentración Strate sub- de a sf. El tiempo de lote requerida
para producir una cierta concentración de producto se puede
determinar
(13.8) de la ecuación. (13.10) y estequiométrica relaciones.
Ij ingeniería de
reactores

Ejemplo 13.1 de golf Tiempo para la conversión de la enzima lote

Una enzima se utiliza para producir un compuesto utilizado en la fabricación de loción de protección solar. r “, p para la en zima es de
2,5 mmol m °' s °;
“K , Es de 8,9 mM. La concentración inicial de sustrato es de 12 mM. Representar gráficamente el tiempo requerido para la reacción por lotes
como una función de sub-
Strate conversión.

Soluri n:
Por lo tanto - 12 mM. unidades de r “Conversión, p a mM h ° -
3600 s i m3
“v , = - 2,5 mmol Sra ' .
1h 1000
= 9 mmol 1 ° 'h °'
= 9 mm h °.
Los resultados de la aplicación de la ecuación. (13.10) se tabulan a continuación y se representan en la Figura 1. L3E 1.

la conversión de sustrato
(%) (MM) (H)
0 12.0 0.00
10 10.8 0.24
20 9.6 0.49
40 7.2 1.04
50 6.0 1.35
60 4.8 1.71
80 2.4 2.66
90 1.2 3.48
95 0.60 4.23
99 0.12 5.87

Figura 13El.1 tiempo de reacción por lotes como una función de conversión de sustrato para un reactor de enzima mixto.
tiempo de reacción por
lotes (h)

0 20 40 60 80 l
(O
conversión de sustrato (
'7o)

En las conversiones elevadas de sustrato, el tiempo requerido para alcanzar un aumento incremental en la conversión es mayor
que a conversiones bajas. En consecuencia, 'el beneficio obtenido de conversiones mayores que 80-90% debe sopesarse frente
a las significativamente mayores costos de tiempo de reacción y de funcionamiento del reactor involucrados.
 I3 Reactor de 3
Ingeniería $$

Como se discute en la Sección 11.5, las enzimas están sujetos

a deactiva- ción. Así, la concentración de enzima activa en el
reactor, y por lo tanto el valor de r “, p, pueden cambiar
(13.12)
durante la reacción. diez desactivación es significativa, la
variación de r “, p con el tiempo
se puede expresar usando la Ec. (11,44) de manera que la ec. (13.8) se convierte en : La integración de la ecuación. (13.12)
con la condición inicial s = sp en r = 0

-1 K '0'0 'F
'segundo = En 1 - éj En - +
(13.11) 're
(13.13)
donde r “, p es el valor de r“, p antes de que ocurra la desactivación
y lj es la constante de velocidad de desactivación de primer orden. Separatingwhere ib es el tiempo de reacción por
lotes y SF es las variables finales de sustrato da: concentración.

Ejemplo de tiempo de reacción 13,2 por lotes con la desactivación de la enzima

La enzima del Ejemplo 13. l desactiva con vida media 4,4 h. Comparar con la Figura 13E1.1 el tiempo de reacción por lotes
requerido para alcanzar 90% de conversión del sustrato.

p = 12 mM; r “, pq = 9 mM h ° '; N “, = 8,9 mM. s F = (0.1 así) = 1,2 mM. La constante de velocidad de desactivación se calcula a partir
de la
vida media de humedad relativa utilizando la Ec. (11.45):

En 2ln 2
yo re = = = 0. 158 h'.
th 4.4
h

Sustituyendo los valores en la Ec. (13.13)

da:
8.9 MM12 mM (12 - 1.2) mM
-1
yo In1 - 0,158 h ° ' En +
segu 0,158 h ° 9 mM h 1,2 mM 9 mM h ° '
ndo ' °'
=

= 5,0 h.

Con la desactivación de la enzima, el tiempo requerido para el 90% aumenta la conversión de 3,5 h a 5,0 h.

Para las reacciones con enzimas inmovilizadas, Eq. (13.8) obligadabeEq. (13.14) permite la evaluación de ib; sin
embargo, debido q T es un modificarse para tener en cuenta la transferencia de masaefectos: función desactivada, la
integración no es sencillo.

ds r “, p s
Cultivo de células 13.5.1.2

(13.14) Un análisis similar se puede aplicar a procesos de fermentación

para evaluar los tiempos de reacción. Vamos a ejecutar un
I3 Reactor de balance de masas en Células 3
Ingeniería $$
donde q T es el factor de eficacia total de la incorporación en un fermentador por lotes bien mezclada usando la Ec. (6,5) ¡un
Flow típico
internal y las limitaciones de transferencia de masa externa (véase la Sección Sheet para This systemetro yo s
espectáculonorte yonorte figur mi 13.20. METRO r - higo -- 0 12,5), i es la concentración de sustrato a granel, y r “, p y“K ,
Porque las células no fluyen dentro o fuera del recipiente. Masa de Células
son los parámetros cinéticos intrínsecas. En principio, la integraciónOFIN el reactor, METRO, es igual a la concentración de
células x multi-
Ij ingeniería de reactores
Figura 13.20 Diagrama de flujo para un fermentador
discontinuo agitado.
surcado por el volumen de líquido U La tasa de masa de fi
crecimiento celular; es igual a r U donde RE es la tasa
volumétrica de crecimiento. A partir de la ecuación. (11.52),
RG - yx donde y es la tasa de crecimiento específico. Si la
muerte celular tiene lugar en el reactor junto con el
crecimiento, FIC = rd T donde r¿ es la tasa volumétrica de la
muerte celular. A partir de la ecuación.
(11.85), rd se puede expresar utilizando la ecuación de primer
orden: rd
= Idx donde D es la constante de la muerte específica. Por lo
tanto, la ecuación. (6.5) para las células en un reactor discontinuo
es:
(13.15)
Por lo constante, la ecuación. (13.15) se convierte en:
Porque Y en cultivo discontinuo permanece aproximadamente
constante e igual a y “, p durante la mayor parte del período de
crecimiento (véase la Sección 11.7.3),
si d asimismo se mantiene constante, podemos integrar la
ecuación (13.16) directamente para encontrar la relación entre
el tiempo de lote y celular
concentración. Uso de la condición inicial que x = x en t - 0:
(13.17)
Si xf es la concentración final de biomasa después del tiempo de
cultivo por lotes
/ P, reordenamiento de la ecuación. (13.17) da:
1 LN-
IB =
*yo
(T3.18)
Si la tasa de muerte celular es insignificante en comparación
con el crecimiento, la ecuación << y “, p y las ecuaciones (1 J.
17) y (1 3.18) se reducen a:
(13.19)
y:
yo £
rg = En - “ .
Qmax “0
(13.20)
Por lo tanto, se puede calcular usando la ecuación. (13.18) o
la ec. (13.20) el tiempo requerido para alcanzar la densidad
celular x¿ partir de xc densidad celular. tiempo de cultivo por
lotes también puede estar relacionado al sustrato expresiones
de conversión y la concentración de producto usando para
las tasas de captación de sustrato y formación de producto
derivados en el capítulo 11.
Vamos a aplicar la ecuación. (6.5) toqthe sustrato limitante
del crecimiento en una fermentación por lotes. M - fig - = 0
porque sustrato no fluye en o fuera del reactor; la masa de
sustrato en la tor reac-, M, es igual a i -¿Dónde i es la
concentración de sustrato y U es
volumen de líquido. Sustrato no se genera; por lo tanto FIC = 0.
FIC es igual a RD U donde Rd es la tasa volumétrica de
captación de sustrato. Como se discutió en la Sección I 1.10, la
expresión para R3
depende de si el producto extracelular está formada por la cul-
tura y la relación entre la síntesis del producto y la generación de
energía en la célula. Si se forma el producto, pero no acoplado
directamente con el metabolismo de la energía, rd se da por la
ecuación. (11.76) y:
 do- rps V -
(13.16) (13.21)
Ingeniería del Reactor 357
i3

donde y es la de crecimiento específico tasa, es el verdadero

'0'f
rendimiento de biomasa a partir de sustrato, qp es la tasa rb = En 1 +
mv
específica de producto mación
ción, abr es el verdadero rendimiento del producto a partir del 1 0
sustrato y m $ es el coeficiente de mantenimiento. Por lo tanto,
(13.26)
de la ecuación. (6.5) la masa
ecuación de balance es:

Si, además, los requisitos de mantenimiento se pueden despreciar:

(13.22)
rb = En 1 +
'0
Por / z igual a p “, py Uconstant, podemos escribir la (13.27)
ecuación. (13.22)

Para obtener una expresión para el tiempo de cultivo por lotes

ds
Dr
(13.23)
Debido a que x es una función del tiempo, debemos sustituir una
expre- sión de x en la ecuación. (13.23) antes de que pueda ser
integrado. Suponiendo que la muerte celular es insignificante, x
está dada por la ecuación. (13,19). Por lo tanto:
en función de la concentración del producto, debemos aplicar
la ecuación. (6.5) para el producto. Una vez más, M; - Mg- 0;
masa de producto en el reactor, M, es igual a pV donde p es la
concentración de producto y U es ume en volumen de líquido.
Suponiendo producto no se consume, FIC = 0. VG es igual
a RD -¿Dónde RY es la tasa volumétrica de formación de producto.
De acuerdo con la Ec. (11.67), para todo tipo de producto ry - qyx
donde ir es la tasa específica de la formación de producto. Por lo tanto:

(13.28)

y, a partir de la ecuación. (6.5), la ecuación de

(13.24) balance de masas es:

Si todos los términos entre corchetes son constantes durante el d (p)

cultivo, la Ec. (13.24) puede ser integrado directamente con Dr (13.29)
condición inicial i = ip a i = 0 para obtener la siguiente
ecuación:
Si la muerte celular es insignificante x está dada por la
'0 5f ecuación. (13,19). Por lo tanto, para Uconstant, podemos
rs En = 1+
escribir la ecuación. (13.29) como:
e
g “0
u dp
n
d re yo ' PAG"
(13.25)
o (13.30)
energía; en estos casos la expresión para la tasa de consumo de
donde ib es el tiempo de cultivo discontinuo y si es la sustrato no contiene un término independiente para la síntesis de
concentración final de sustrato. producto (véanse las Secciones 11.10.1 y 11.10.2) y la Ec. (13.25) se
Para los productos acoplados indirectamente o no reduce a:
relacionados en absoluto con el metabolismo energético, la
evaluación de qp requiere un análisis adicional (ver Secciones
11.9.2 y 11.9.3). Sin embargo, la ecuación. (13.25) puede
simplificarse si no hay producto se forma o si la producción
está directamente relacionada con el metabolismo de la
Ingeniería del Reactor 358
i3 QP es constante, la ecuación. (13.30) puede ser
Si
integrado directamente con la condición inicial p = p
en i = 0 para obtener la siguiente ecuación ción para el
tiempo de cultivo por lotes como una función de la
concentración pf producto final:
(13.31)

El tiempo de cultivo discontinuo necesaria para conseguir una

determinada biomasa
Ij ingeniería de 358
reactores

la densidad se puede evaluar usando, por ejemplo. (13,18) o (13,20). Si la celda del metabolismo de mantenimiento. Para la
muerte celular insignificante y la muerte con- es despreciable, el tiempo requerido para un nivel particular de sub- constante qp,
el tiempo de proceso por lotes requerido para alcanzar una conversión Strate producto en particular se puede calcular utilizando
5q. (13,25), (13,26) o la concentración se puede encontrar Kom Eq. (13,31). Aplicación de (13.27) en función del tipo de
producto y thi importancia estas ecuaciones se ilustra en el Ejemplo 13.3.

Ejemplo 13.3 tiempo de cultivo por lotes

Zymomonas mobilis se utiliza para convertir la glucosa a etanol en un fermentador por lotes en condiciones anaeróbicas. El
rendimiento de biomasa a partir de sustrato es de 0,06 gg; PPX es 7,7 gg °'. El coefhcient mantenimiento es 2,2 gg ° 'h ° 1; la
tasa específica de for- mación del producto debido a mantenimiento es 1,1 h'. La tasa de crecimiento específico máximo de Z.
mobilis es de aproximadamente 0,3 h °'. 5 g de las bacterias se inoculan en 50 litros de medio que contenía 12 g 1 ° glucosa.
Determinar los tiempos de cultivo discontinuo requerido para:

(a) producir 10 g de la biomasa;

(b) alcanzar el 90% de conversión de sustrato; y
(c) producir 100 g de etanol.

Solución.
Y - 0.06 gramo gramo ' ; Fp = 7,7 gg 'i yqp = 0.3 h '; 2.2 gg ° 'h'; z> tp = 1,1 h '; X- '> O < = 0,1 g 1 '; • - 12 g 1'.
m-v
(a) Si 10 g de biomasa se produce por la reacción, la cantidad final de biomasa presente es (10 + 5) g = 15 g. Por lo tanto o F = 1
gramo"
= 0,3 g 1'. A partir de la ecuación. (13.20):

° gl L0.3 '
En = 3,7 h.
0,3 h ° '0,1 g l°

(b) Si el 90% del sustrato se convierte, sF = (0,1 i) = 1,2 g 1'. síntesis de etanol se acopla directamente con el metabolismo de la energía en
la célula; por lo tanto, de la ecuación. (13.26):

1 (12 - 1.2) g 1 yo
rsegu En 1 + = 5,7 h.
ndo 0,3 h ' 2.2 gg 'h'
= 0. lg 1 '
0.06 gg 0,3 h y
° o

(c) q se calcula usando la Ec. (11,70). En cultivo discontinuo con y = y “, p:

qp = 7,7 gg' '(0,3 h °') + 1,1 h ° = 3.4 h.

UNs noproducto está presente inicialmente, po = 0. La producción de 100 g de etanol corresponde a '00 5 0 {= 2 g 1 °' = pf. A partir de la
ecuación. (13.31):

0,3 h' 1
En 1 1 ° ') = 3,4 h.
'segundo-
0,3 h - + , h->) (
(0.. ,Carné de gram
identidad) o2
Ij ingeniería de
13.5.2 El tiempo
reactores
total para La reacción por lotes CycleFollowing la reacción de fermentación o enzima, ti 359 • • h.
es llevado a cosechar los contenidos del reactor y la hora

En el análisis anterior, rsegundo representa el tiempo requerido para el lote

célula o conversión enzimática. En la práctica, lote operationsthe siguiente lote. Para el cultivo de células, un tiempo de retraso
de la duración r se produce implicar largos períodos improductivos además a rb. después de la inoculación durante
el cual no hay crecimiento o producto mación
Ij ingeniería de
reactores
Figura 13.21 Preparación, lag, la reacción y tiempos de
cosecha en funcionamiento OFA fermentador por lotes.
ción se produce. Estos períodos de tiempo se ilustran por los
procesos de la fermentación en la figura 13.21. Por lo tanto, el
tiempo total de inactividad
gpre asociado con la operación del reactor por lotes es:
'Dn'hv +' p + '1
(13.32)
y el total de reacción por lotes tiempo rT es:
'W 'B + 'dn'
(13.33)
13.5.3 Operación de alimentación por
lotes de un reactor de mezcla
En la operación de alimentación discontinua, intermitente o
alimentación continua de
nutrientes se utiliza para complementar el contenido del
reactor y pro- control de vide sobre la concentración de
sustrato. Al comenzar con una solución relativamente diluida
de sustrato y la adición de más entos nutrición como el
producto de conversión, las altas tasas de crecimiento se
evitan. Esto es importante, por ejemplo, en las culturas donde
la demanda de oxígeno durante el crecimiento rápido es
demasiado alto para las capacidades de transferencia de masa
360
Figura 13.22 Diagrama de flujo para un fermentador discontinuo
alimentado se agitó.
cillin producción. El espacio debe ser permitido en reactores
discontinuos alimentados para la adición de medio fresco; en
algunos casos, una parte del caldo se retira antes de la
inyección de material adicional. La velocidad de flujo y el
momento de la alimentación a menudo se determinan
mediante el control de parámetros tales como el nivel de
oxígeno disuelto o composición del gas de escape. Como las
reacciones enzimáticas rara vez son car- ried a cabo como
operaciones discontinuas alimentadas, vamos a considerar los
reactores discontinuos alimentados por sólo fermentación.
El diagrama de flujo para un fermentador discontinuo
alimentado bien mezclada se muestra en la figura 13.22. La
tasa de flujo volumétrico de entrar alimentación es N; las
concentraciones de biomasa, sub- crecimiento limitante
del reactor. Alternativamente, alta sustrato concentraciones pueden
ser inhibidora o el interruptor en las vías metabólicas indeseables.
cultivo discontinuo alimentado se utiliza ampliamente en la
producción de levadura de panadería para superar la represión
catabólica y la demanda de control de oxígeno; también se utiliza
rutinariamente para peni-
Ij ingeniería
Stratmi unredeproducto yonorte This streametro 361
reactores mi X; , S y"pag respectivamente. Lo
Arkansas o
haremos assumeis constante. Debido a la entrada de la
alimentación, el
volumen de líquido U no es constante. Las ecuaciones
para fed-batch cul- tura se derivan mediante la
realización de balances de masa en estado no
estacionario.
La ecuación de balance de masas en estado no
estacionario para la masa total en un reactor de flujo se
deriva en el Capítulo 6:

O0

donde p es la densidad del contenido del reactor, su volumen

de líquido en
Reactor i3 Ingenieria
el reactor, N; y Nq son las tasas de flujo de entrada y de masas
de salida, y P; y pq son densidades de las corrientes de
entrada y salida, LY respective-. Para el reactor de
alimentación discontinua de la I-igura 13,22, Fp - 0 y
F. - N. Con las soluciones diluidas tales como los que a
menudo se utiliza en bio- procesamiento, podemos asumir p
es constante y que p, - p, - densidad puede entonces ser
tomado fuera del diferencial y cancelado a través de la
ecuación. Por lo tanto, la ecuación. (6.6) para la alimentación
por lotes fer-
mentación
es:
dT
di (13.34)
Un balance de masa similar basada en la ecuación. (6.5) se puede
realizar para las células. En fed-batch operación Mg - 0; M, es
igual a la tasa de flujo de alimentación F multiplicado por el xt
concentración de células en la alimentación. Como en la sección
13.5.1.2, la masa de células en el reactor, si, es igual a xYwhere x
es la concentración de células y su volumen líquido, rnte
de la biomasa de generación fido es igual a, r xU donde es la
tasa de crecimiento específico, y la tasa de muerte celular
Como es igual a £ QXU dónde
yo re es la constante de la muerte específica. La aplicación de
estos términos en
Eq. (6,5) da:
d limitante en nuestro reactor discontinuo Fe-. En este caso, I y R
(xf
Dr
(13.35)
Debido Min cultivo por lote alimentado es una función de
tiempo, no se puede cancelar a través Ej. (13,35). En su lugar,
tenemos que ampliar el diferencial usando la regla del producto
de la ecuación. (D.22) en el apéndice
D. Después de agrupar términos esta Da:
(13.36)
La aplicación de la ecuación. (13.34) a,
por ejemplo. (13.36):
Dividie
j6o
(13.38)
Definamos la tasa de dilución D con unas
dimensiones T ° ':
D-
(13.39)
En los sistemas de alimentación por lotes U aumenta con el
tiempo; Por lo tanto, si es constante, D disminuye a medida que
avanza la reacción. La aplicación de la ecuación. (13.39) a la
ecuación. (13.38):
(13.40)
Eq. (13.40) se puede simplificar para la mayoría de
aplicaciones. Por lo general, el material de alimentación es
estéril de modo que z, = 0. Si, además, la tasa de muerte
celular es despreciable en comparación con el crecimiento de
modo que Identificación del << y, Eq. (L 3,40) se convierte
en:
- = - RE).
di
Nos deja Ahora aplicar la ecuación. (6.5) para el sustrato
son cero; la tasa de flujo de masa del sustrato entra en el reactor
M; es igual a Fse. ofsubstratc masa en el reactor, si, es igual a la
concentración de i multiplicado por el volumen U Para las
fermentaciones productoras de producto no
acoplado directamente con el metabolismo de la energía, FIC está
dado por la Ec.
(13,21). Sustituyendo estos términos en la ecuación. (6,5) da:
(13.42)
donde es la tasa de crecimiento específico, es el verdadero
rendimiento de biomasa a partir de sustrato, qp es la tasa
específica de for- mación de producto, F $ es el verdadero
rendimiento del producto a partir del sustrato y md es el
coeficiente de mantenimiento. La ampliación del diferencial y las
ecuaciones se aplican (13.34) y (13.39) da:
ndo por la da:
reordenación mano
Reactor i3 Ingenieria j6o
di
(13.37) =D
(s; -
s) - (13.43)
re.

6xF Las ecuaciones (13.41) y (13.43) son ecuaciones diferenciales para

tasas de cambio de las concentraciones de células y sustrato en fed-
Dr "PAG
batch reac-
'
Ij ingeniería de j6z
reactores

tores. Debido a que D es una función del tiempo, la A pesar de que la concentración de células se mantiene
integración de estas ecuaciones ciones es más complicado que prácticamente inalterado con “d, - 0, ya que el volumen líquido
para los reactores por lotes. Sin embargo, podemos derivar aumenta con el tiempo en reactores discontinuos alimentados,
expresiones analíticas para fed-batchcultura si simplificamos la masa total de células también aumenta.
Considere la tasa de aumento de la biomasa total en el reactor
las ecuaciones (13.41) y (13.43). Aquí, vamos a examinar
la situación en la que el reactor se hace funcionar por primera “re dónde su igual a esquiar Usando los resultados de las
ecuaciones (13.34)
vez en
lotes hasta se consigue una alta densidad celular y el y (13.47) con re, - 0:
sustrato prácticamente agotado. Cuando se alcanza esta
condición, el funcionamiento discontinuo alimentado se
inicia con el caudal medio F. Como resultado, la - -X +V- -Y s F.
DrdI D di '
concentración de células x se mantiene constante alto y
r (13.49)
aproximadamente con- modo que “q, - 0. A partir de la Ec.
(13.41), si q = 0, p = D. Por lo tanto, sustituyendo p = D en
la expresión Monod de
Eq. (11.60): Eq. (13.49) ahora se puede integrar con la condición inicial A
= A en el inicio de flujo de líquido para dar:
yaps
D-
K$s
+ (13.44) (13.50)

El reordenamiento de la ecuación. (13.44) da una expresión

donde rj, es el tiempo de alimentación por lotes después del
para la concentración de sustrato en función de la tasa de
comienzo de ING Feed-. Eq. (13.50) indica que, para, i, y N
dilución:
biomasa constante, el total en fermentadores fed-batch
aumenta como una función lineal del tiempo.
En condiciones de alta densidad de la biomasa y casi com-
pleta agotamiento de sustrato, A-estado estacionario cuasi 1s
(13.45)
condición prev en discontinuos alimentados reactores donde q, =
0, re, - 0 y
Dejar Suponemos que la cultura no produce el producto, o, si re j, = 0. En el estado casi estacionario, las ecuaciones (13.47) y (13.45)
hay formación de producto, que está directamente relacionada puede ser
con la generación de energía. Si los requisitos de utilizado para calcular las concentraciones de biomasa y
mantenimiento también se pueden despreciar, Ec. (13.43) se sustrato en tors reacciones donde la muerte celular y los
puede simplificar a: requisitos de mantenimiento son despreciables y producto
está ausente o acoplado directamente con el metabolismo de
ds
- D (s -. S) - la energía. Eq. (13.48) permite el cálculo de la concentración
Dr de producto para los metabolitos acoplados directamente con
(13.46) la generación de energía en la célula. En el estado cuasi-
estacionario, la específica
En una alta densidad celular en el reactor, prácticamente todos tasa de crecimiento, u y velocidad de dilución Fql arco
sustrato enter- ingel recipiente se consume inmediatamente; Por
aproximadamente igual;
lo tanto, por lo que s << yd' j, - 0. Aplicando estas relaciones con
Y - D para la ecuación. por lo tanto, como Uincreases, la tasa de crecimiento
(13.46), obtenemos: disminuye. a continuación, la operación por lotes Fe- se utiliza
para la producción de biomasa, tales comolevadura de
panadero, es útil ser capaz de predecir la masa total de las
células en el reactor como una función del tiempo. Una
expresión para la biomasa total viene dada por la ecuación.
(13,50). Tenga en cuenta que bajo cuasi-estacionario
condiciones de estado, x, p mano son casi constanyt, būtu, re y
Ij ingeniería de
reactores (13.47)
Para la síntesis de producto directamente junto con olism
metab- energía, la ecuación. (13.47) nos permite derivar
una expresión aproximada para la concentración de
producto en los reactores de alimentación por lotes.
Suponiendo que la alimentación no contiene producto:
p - Yy 'yo
(13.48)
j6z
A están cambiando. Otros detalles de la operación de alimentación
por lotes son
propuesta por PIRT (37].
13.5.4 Operación continua de un Mixta
Reactor
Biorreactores son operados continuamente en algunas
industrias de bioprocesos, tales como elaboración de la
cerveza, producción de levadura y tratamiento de residuos de
panadería; conversiones enzimáticas también pueden llevarse
a cabo utilizando sistemas continuos. El diagrama de flujo
para un continuo
ij ingeniería de
reactores

constante mediante el establecimiento de la entrada y caudales de

Figura 13.23 Diagrama de flujo para un fermentador
salida iguales;
de tanque agitado continuo.

reactor se muestra en la figura 13.23. Si el recipiente está bien

mezclado, la corriente de producto tiene la misma composición
que el líquido en elreactor (véase la Sección 6.4). reactores
tanto, cuando continuasse utilizan con células o enzimas
suspendidos libremente, catalizador es continuamente
retirado de el recipiente en el producto corriente. Para las
enzimas que este es un serio defecto como catalizador no se
produce por la reacción; en el cultivo celular, el crecimiento
suministra células adicionales para reemplazar los expulsados.
reactores continuos se utilizan con enzimas libres sólo si la
enzima es barato y se puede añadir de forma continua para
mantener la con- centración de catalizador. Con enzimas más
costosas, la operación continua puede ser factible si la enzima
se inmoviliza y se retiene dentro del vaso. dicen-mezclados
reactores continuos se refieren a menudo utilizando la
abreviatura CSTR, es decir, continúa reactor de tanque
agitado. El término CSTF veces también se usa para denotar
continua fermentador de tanque agitado.
Diferentes estrategias de operación en estado
estacionario están disponibles para fermentadores continuos.
En un quimiostato el volumen de líquido se mantiene
ij ingeniería de es la constante de Michaelis. Para reacciones con enzima libre,
la tasa de dilución es por lo tanto constante y el estado
reactores suponemos que la enzima pierde en la corriente de producto se
de equilibrio se consigue por concentraciones en el
reemplaza continuamente
quimiostato de ajuste sí mismos a la velocidad de
alimentación. En un turbidostato, el volumen de líquido
se mantiene constante ajustando el caudal de salida
igual a la tasa de flujo de entrada; sin embargo, la tasa
de flujo de entrada se ajusta para mantener constante la
concentración de biomasa. Así, en un turbidostato la
velocidad de dilución se ajusta a su valor de estado
estacionario correspondiente a la concentración de
biomasa conjunto. Turbidostatos requieren sistemas de
supervisión y control más complejos que quimiostatos y
no se utilizan en gran escala. En consecuencia, nos
concentraremos aquí en la operación quimiostato.
parámetros de funcionamiento característicos para
tors reacciones continuas son la tasa de dilución D y el
promedio de tiempo de residencia r. Estos parámetros
están relacionados como sigue:

(L3. 51)

donde D se define por la ecuación. (13,39). En reactor

continuo oper- ación, la cantidad de material que puede
ser procesada durante un período determinado de tiempo
está representado por la velocidad de flujo, N. Por lo
tanto, para un caudal dado, el tamaño del reactor U y los
costos de capital y operativos asociados se reducen al
mínimo cuando T se hace tan pequeño como sea posible.
teoría reactor continuo nos permite determinar las
relaciones entre T (o D) y concentraciones de sustrato, de
productos y de células en estado estacionario en el reactor.
Esta teoría se basa en los balances de masa en estado de
equilibrio derivados de la ecuación. (6.5).

l3. 5.4. l de reacción de la enzima

Vamos a aplicar la ecuación. (6.5) para el sustrato
limitante en un reactor de enzima continuo operado en
estado estacionario. La tasa de flujo de masa del
sustrato entra en el reactor de, es igual a Ji¡; AFQ, la
tasa de flujo de masa del sustrato dejando, es N i. Como
sustrato no es gene-
ado por el reactor, FIC = 0. Tasa de FIC consumo de
sustrato es igual a la tasa volumétrica de reactionr
multiplicado por U, r
está dada por la ecuación. (11,31). El lado izquierdo de
la ecuación. (6.5) es cero porque el sistema está en
estado estacionario. Por lo tanto, el estado estacionario
ecuación sustrato de balance de masas para la reacción
enzima continua es:

- fs Fs -V - 0
'+ yo
(13.52)

RCEstmi r “, p es la velocidad máxima de reacción y“K,

Ij ingeniería de
reactores

de manera que se mantiene constante estado RPP y constante es achieved.For reacciones con enzimas inmovilizadas, Eq.
(13.53) debe dividiendo por IZand aplicación de la definición de dilutionbe modificado para tener en cuenta la
transferencia de masa efectos:
tasa de la ecuación. (13.39) da:
'Max' T
D (s; - s) =
“K, + s
D (s; - s) -
“K, + s (13.54)
(13.53)
donde p T es el factpr total de eficacia (véase la Sección 12.5),
s es Si r “, p, N“, y i; son conocidos, Eq. (13.53) se puede utilizar directamente la concentración mayor del sustrato, y r “ , p y N“,
son intrin- para calcular la velocidad de dilución requerida para conseguir un determinado parámetros cinéticos sic. 9T se puede
calcular para el nivel s constante de conversión del sustrato. producto de estado estacionario concentración usando la teoría de
las reacciones heterogéneas descritos en
ción continuación, puede evaluarse a partir stoichiometry.Chapter 12.

Ejemplo 13.4 reacción inmovilizado-enzima en un CSTR

tirosinasa de champiñón es inmovilizado en perlas esféricas de 2 mm para la conversión de la tirosina en DOPA en una columna
de burbujeo continuo, bien mezclada. La constante de Michaelis para la enzima inmovilizada es 2 gmol m 3. Una solución que
contiene 15 gmol m 3 tirosina se alimenta en el reactor; debido al alto costo del sustrato, la conversión deseada es 99%. El
reactor se carga con los granos a una densidad de 0,25 m' m ° *; toda la enzima es retenido dentro del reactor. El r intrínseca “, p
para el inmovilizado
enzima es 1,5 x 10 2 gmol s por m * perlas. La difusividad efectiva de tirosina en las perlas es de 7 x 10 ° 10 2 ';
externoefectos de transferencia de masa son insignificantes. Inmovilización estabiliza la enzima de manera que la desactivación
es mínima durante el período de funcionamiento. Determinar el volumen del reactor necesario para tratar 18 m' solución tirosi na
por día.

Solución.-
“K , - 2 gmol m -3. RPP = 1,5 x10 ° 2 gmol s ° m ° '; fi = 10 ° 3 m; Y A = 7X 10 ° 2 s ° '; s - 15 gmol m °'. la conversión de la
caudal de s ° ':
alimentación a
1d 1h
- 2,08 x 10 ° 4 m * s ° '
F - 18 m * d '. 24 3600 s
h

Para el 99% de conversión, la salida y por lo tanto la concentración interna sustrato s = (0,01 i;) = 0,15 gmol m °'. Como i
<< K““Podemos asumir de primer orden cinética (véase la Sección 11.3.3) con 1, = "== / x“, = 7,5 X l0 ° 3 s °'. El primer orden
módulo de Thiele para catalizadores esféricos se calcula de la Tabla 12.2:

R m 10 3 7,5 x 10 s-
1
i

frometro figurmi12.8 o en la Tabla 12.3, q; ; = 0.64. Como la resistencia de transferencia de masa externa es insignificante, ir = 1 y, a partir
de la Ec. (12.46), q =
0.64. Sustituyendo los valores en la Ec. (13.54) da:

(1,5 x 10 2 gmol s ° 'm ° *) (0,15 gmol m ° *)

re (L) - 0,15) gmol m ° = “'
2 m ° gmol + 0,15 gmol m ° 3

D - 4.51 x 10 ° s °'.

A partir de la ecuación. (13,5 I):

Ij ingenieríaN2.08
de x 10 4 m3 s ° '
= -=
reactores = 4,6 m
re 4.51 x 10 ° s ° 1
Ingeniería del Reactor
i3

13.5.4.2 regla Celular: url verdadero rendimiento del producto a partir del sustrato y mv
es el coeficiente de mantenimiento. En la Ec. (13.59) podemos
Consideremos el reactor de la figura 13.23 operado como un dividir a través de T, sub-
fermentador continuas con y aplicamos la ecuación. (6.5) para stitute la definición de velocidad de dilución de la ecuación.
los balances de masa en estado de equilibrio sobre la biomasa, (13.39) yreemplazar y con D de acuerdo con la Ec. (13,57).
el sustrato y el producto. Reordenamientoluego da la siguiente expresión para la célula
Para la biomasa, por ejemplo, en M¡. (6,5) es la tasa de en estado estacionario concentración X :
flujo de masa de las células que entran en el reactor; M, =
Fxyo. M es la tasa de flujo de masa de las células que salen de:, =
Nz. Los otros términos de la ecuación. (6.5) son los mismos que
en la Sección 13.5.1.2; VG = P xUwhere p es el crecimiento específica
tasa y BLa volumen de líquido del reactor; FIC * d • JZwhere id es
la constante de la muerte específica. En el estado estacionario, “S
el lado Leh de la ecuación. (6.5) es cero. Por lo tanto, la (13.60)
ecuación de estado estacionario de balance de masa para la
biomasa es: Eq. (13.60) puede simplificarse si no hay síntesis de productos
o si la producción está directamente relacionada con el
metabolismo de la energía:
(13.55)
D (s - s)
Por lo general, la corriente de alimentación en un cultivo
continuo es estéril de modo que D
, = 0. Si, además, la tasa de muerte celular es com- insignificante
recortado con el crecimiento, i re << y EG. (13.55) se
convierte en:
Si, además, los efectos de mantenimiento pueden ser
ignorados, Ec. (13.61) se convierte en:
(13.56)

Cancelación de x de ambos lados, dividiendo por JR, y aplicando

(13.62)
la definición de velocidad de dilución de la ecuación. (13.39) da:

y - D.
(13.57) Sustituyendo la ecuación i. (13.58) obtenemos una expresión para
la concentración de células en estado estacionario en un CSTR en
Al igual que en la deducción de la ecuación. (13.45), la términos de parámetros de sólo D y cinéticos y de rendimiento:
aplicación de la ecuación. (13,57) para la expresión Monod
de, por ejemplo. (11.60) da una ecuación para la
concentración en estado estacionario de limitar sustrato en
el reactor:
(13.63)
DK
>= ' .
yqp - D
(13.58)
donde Y es la tasa de crecimiento específico, Y es el verdadero
Apliquemos ahora Ej. (6.5) en estado estable a la Strate sub- rendimiento de biomasa a partir de sustrato, Up es la tasa específica
limitante. METRO; = -'st, Mg - Fs, ftp - 0 y FIC está dado por la de producto mación ción no directamente relacionado con el
Ec. (13,21). Por lo tanto:
metabolismo energético, YY es el

FSI - Fs - + mv xV - 0

(13.59)
Ingeniería del Reactor
Eq. (13.63)es válido en estado estacionario en
i3
ausencia de requisitos ANCE mainten- y cuando la
síntesis de productos está ausente o directamente
vinculado con el metabolismo de la energía.
También podemos aplicar la ecuación. (6.5) para
una massqbalance en estado estable en el producto de
fermentación. En este caso, M; - Fp y Mg - Fp.
fi G está dado por la Ec. (13,28); FIC = 0. Por lo tanto,
la ecuación. (6.5) se convierte en:

(13.64)

donde qp es la tasa específica de formación para todas

las clases de pro- ducto. Dividiendo por T,
sustituyendo la definición de
Ingeniería del Reactor
i3

Figura 13.24Steady-Estado donde x se reduce a cero se conoce como wnr6our, lavado de las
concentraciones de células y sustrato en función de la tasa de células se produce cuando la velocidad de eliminación de células
dilución en un quimiostato. curvas corresponden t o páginas = en la corriente de salida del reactor es mayor que la velocidad de
0.3 h °', K $ - 0,2 kg m 3, Y - generación por el crecimiento. Para sistemas con los requisitos de
0,5 kg kgand yo; = 20 kg metro 3 . mantenimiento insignificantes y, o bien la formación asociada de
energía o producto cero, la tasa de la dilución crítico Dj s en la
que la concentración de biomasa en estado estacionario
simplemente se hace cero puede estimarse mediante la sustitución x = 0
24 en

mo y-3
f 10

(kgra
Eq. (13.63) y despejando D:
20

concentración de sustrato en estado

dieciséis

12 (13.66)

Para la mayoría de los cultivos de células K $ << s; Por lo

tanto, D ““- p “, p. Para evitar el lavado de las células de la
estacionario, s

quimiostato, la tasa de la dilución que opera siempre debe ser

inferior a Dg. Cerca de lavado del sistema es muy sensible a
0.00.10.20.30.40.50.6 pequeños cambios en D que causan relativa- mente grandes
cambios en la arena s.
Diluñon rae, D (h *) La tasa de producción de biomasa en un CSTR es igual a
la velocidad a la que las células dejan t: él reactor: Fx. La
tasa de dilución de la ecuación. (13.39) y reordenando da una productividad volumétrica es por tanto igual a FX dividido
expre- sión para la concentración de producto en estado por
estacionario como una función de la concentración de biomasa
x: fx
Qq = -p - Dx
(13.67)

donde Q, es la tasa volumétrica de la producción de biomasa.

(13.65) Del mismo modo la tasa volumétrica de formación de
producto Qp es:

x en la ecuación. (13.65) se puede evaluar a partir de la Ec. fp

(13,60), (13,61) o (13,62). La naturaleza de qp depende del qr' - Dp.
tipo de producto formado (véase la Sección 11.9). (13.68)
Eq. (13.58) es una expresión explícita para el estado
estacionario sub-
concentración Strate en un quimiostato. El estado Cuando los requisitos de mantenimiento son formación
estacionario x concentración de biomasa se puede evaluar a
insignificante y producto ausentes o energía asociada, se
partir de la ecuación. (13,60), (13,61) o (13,62); la elección de
pueden sustituir en la ecuación. (13.67) la expresión para x de
la expresión de la biomasa depende de la importancia relativa
la ecuación. (13.63):
del metabolismo de mantenimiento y el tipo de producto, en
su caso, producida. Si se conoce QP, centración producto
KD
tración en el reactor puede ser evaluada a partir de la Ec. Q = D 'yo
(13,65). En el caso más sencillo cuando los productos están , «“, - D
ausentes o directamente ligado a los efectos de generación y (13.69)
mantenimiento de energía se puede despreciar, el
quimiostato está representado por las ecuaciones (13.58) y
(13,63). La forma de estas ecuaciones se muestra en la figura + 0, casi todo el sustrato se consume en estado estacionario de
13.24. A bajas velocidades de alimentación, es decir, D ---
modo que,dela Reactor
Ingeniería partir de la Ec. (13,62), x = s ¡.como D aumenta,
Si3aumenta lentamente al principio y luego más rápidamente a
medida que se aproxima a D ppp; correspondientemente, x
disminuye de modo que x --- r 0 como D - + y “, p. La condición
a alta velocidad de dilución
Esta relación entre Q y Dis muestra en la figura 13.25.
Tasa de producción de biomasa alcanza un afilado máximo a
la velocidad de dilución madre opti- para la biomasa
productividad D p ,; Por lo tanto, en re pag, el agua suciami *
dD- 0. Diferenciando la ecuación. (13,69) con respecto a D e
igualando a cero proporciona una expresión para
Ij ingeniería de reactores

Figura 13.25 El estado de equilibrio productividad de

biomasa volumétrica como una función de la tasa de dilución
en un quimiostato. Curva corresponde con p “, p = 0,5 h ° 1,
(13.70)
= 0,2 kg metro*, Y -
Operación de un quimiostato en Dep, da la tasa máxima de 0.5 kg kg 'Y así - 20 kg m ° 3.
producción de biomasa desde el reactor. Sin embargo, debido
Dpg es por lo general muy cerca de DQJ, puede que no sea

')
productividad de biomasa volumétrico, Q y 3(kgm
práctico para operar

h
a variaciones de velocidad de dilución en esta región puede
fluctuaciones en x y i y, a menos que la tasa de dilución
es controlada de manera muy precisa, de lavado puede ocurrir.
Excelente acuerdo entre quimiostato La teoría y los
resultados experimentales se ha encontrado para muchos sistemas
de cultivo. a continuación, se producen desviaciones, se deben
principalmente a la operación imperfecta del reactor. Por ejemplo,
si el recipiente no está bien mezclado, algunoslíquido hnve mayor
tiempo de residencia en el reactor que el resto y conccntrntions
no serán uniformes; bajo estas condiciones las ecuaciones
derivadas en la sección no se sostienen. Del mismo modo,
ifcellsse adhieren a superficies de vidrio o metal en el reactor y
producir crecimiento de la pared, el ingenio biomasa ser retenido tasa de dilución, D (h- ')
en el recipiente y el lavado no se producirá incluso a altas tasas de
dilución. Otras desviaciones se producen sila falta de tiempo se
permite para que el sistema alcance el estado estacionario.

Ejemplo 13.5 concentraciones en estado de equilibrio en un quimiostato

Los Plummer Mom / células IR del Ejemplo 13.3 se utilizan para el cultivo de quimiostato en un fermentador de 60 m *. La
alimentación contiene 12 gYO '
glucosa; K $ para la orgnnism es 0,2 g 1 °'.

(a) ese flujo se requiere tarifa para una concentración de sustrato de estado estacionario de 1,5 g 1 '?
(b) En la velocidad de flujo de (a), lo que es la densidad de las células?
(c) En la velocidad de flujo de (a), lo que la concentración de etanol se produce?

aaaa - 0.06 gg ° '; Fp = 7,7 gg ° '; ; U “, p = 0,3 h ° '; K $ - 0,2 g 1 '; Izin = 2,2 gg ° 'h yo = 12 g 1 ° '; U = 60 m *. del ejemplo
13.3, qp = 3,4 h'. A partir de la definición general de rendimiento en la Sección 11.6.1j sx '0,46 gg °'
Mrs rx
(A) i = 1,5 g 1 °'. A partir de la ecuación. (13.58):

y “, pi (0,3 h 1) (1,5 g 1 ° ')

D- = 0,26 h °'.
K$+s 0,2 ° g1 + 1,5 g 1 °'

A partir de la definición de la tasa de dilución Ec. (13.39):

F-- DV = (0,26 h °) (60 m) = 15,6 m * h 1.

(b) a continuación, síntesis de producto está acoplado con el metabolismo de la energía como para el etanol, x
se evalúa usando la Ec. (13,61). Por lo tanto:
Ingeniería del Reactor
i3

(0,26 h ° 1 ) (12 - 1.5) g 1

° = 0,42 g 1 °'
X-
0.26 h °
yo + 2,2 gg 'h °'
0.06 gg '

(c) Suponiendo etanol no está presente en la alimentación, p, = 0. concentración de producto en estado estacionario viene dada po r Ej.
(13.65):

(3,4 h ° ') (0,42 °

g1') = 5,5 g I

0.26 h °

Ejemplo de conversión de 13,6 Sustrato y la productividad de biomasa en un quimiostato

A 5 m fermentador se hace funcionar continuamente con la concentración de sustrato de alimentación de 20 kg m *. El
microorgnnism cultivada en el reactor tiene las siguientes características: y “, p = 0,45 h', Kg - 0,8 kg m *,Y- 0,55 kg kg °.

(a) que la tasa de flujo de alimentación se requiere para conseguir el 90% de conversión de sustrato?
(b) ¿Cómo afecta la productividad de biomasa en la conversión de sustrato 90% compara con el máximo posible?

Solución:
(a) Para% de conversión 90 sustrato, S - (0,1 s) - 2 kg ° M *. A partir de la ecuación. (13.58):

re = 0,32 h °'.

A partir de la ecuación. (13.39):

F-- DV = 0,32 h '(5 m) = 1,6 mh'.

(b) Suponiendo requiremenu mantenimiento y la formación de producto son insignificantes, a partir de la Ec. (13.69):

(0,8 kg m "!) (0,32 h-)

qx = 0,32 h °' 20 kg metro -
(0.43h- - 0,32 h- ')

= 3,17 kg ° * h °' m.

La máxima productividad de biomasa se produce en Dep, HICH se puede evaluar usando la Ec. (13.70):

0,8 kg m
0,36 h ° *.
o.83 + 20 kg -*

La máxima productividad de biomasa se determina a partir de la ecuación. (13.69) con D - Dpg:

(0,8 kg m "!) (0,36 h-!)

Qx, +> '• 6 h' 20 kg m 3-
(0.45h- - 0.36 h-!)
= s.s3 kg -3 h °.
Ingeniería
Por del la
lo tanto, Reactor
productividad de biomasa en la conversión de sustrato 90% es '7/ 3 x 100 = 95% del máximo teórico.
i3
I j Reactor de jd8
Ingeniería

Figura 13.26 Diagrama de flujo para un Menter fer--
continuo de tanque agitado con células inmovilizadas.
estado, la ecuación de balance de masas es similar a la
ecuación. (13.55), excepto que x, es cero para la alimentación
estéril y la muerte celular se supone que es despreciable.
Además, las células en suspensión como se producen por el
crecimiento de ambas poblaciones suspended- y de células
inmovilizado, la ecuación musr contiene dos términos de
generación en lugar de uno:

(13.71)

limitaciones Ifdifhisional afectan a la tasa de crecimiento de la

immobil- células ralizan, yx¡p deben ser reemplazados por
yx¡ qy “, donde qj es la factor de eficacia total definido en la
Sección 12.5. Dividiendo por la mano aplicando la definición
de velocidad de dilución de la ecuación. (13.39) da:

(13.72)

T
re =, «1 + ' "'

(13.73)
se pueden determinar usando los balances de masa.
Consideremos un balance de masas de células en suspensión. en
constante
13.5.5 Quimiostato Con células inmovilizadas
Considere la de tanque agitado de células inmovilizada Menter
fer- continuo mostrado en la figura 13.26. Las partículas
esféricas que contienen células se mantienen suspendidas y
bien mezcladas por el agitador. La concentración de células
inmovilizadas por unidad de volumen de líquido en el reactor
es x ““. Supongamos que x¡p es constante; esto se logra si
todas las partículas se retienen en el recipiente y todas las
células producidas por el crecimiento de células inmovilizada
se liberan en el medio. La concentración de células en
suspensión es x ,. Supondremos que las tasas de crecimiento
específicas intrínseca de las células en suspensión y
inmovilizados son las mismas e iguales a y. Las células
suspendidas se eliminan del reactor en la corriente de
producto; células inmovilizadas se retienen en el interior del
recipiente. Para simplificar, supongamos que los requisitos de
la muerte celular y de mantenimiento son insignificantes, la
alimentación del reactor es estéril,
El sistema mostrado en la figura 13.26 alcanza el estado
estacionario. Las relaciones entre las variables de
funcionamiento y las concentraciones en el interior del reactor
I j Reactor de jd8
Para xt “, = 0, la ecuación. (I 3.73) se reduce a la Ec. (13. 57) para
Ingeniería
un quimiostato
que contiene solamente células suspendidas: y = D.
La ecuación de balance de masas en estado estacionario
para limitar sub-
Strate se puede derivar de la ecuación. (6,5)con
; = Fs, Mi -
E y VGRAMO = 0. Ambas poblaciones de células
consumen sustrato; en el
ausencia de sustrato a productos y mantenimiento asociado
requisitos, tasa de FIC consumo de sustrato puede estar
relacionado
directamente a las tasas de crecimiento de células
inmovilizadas y suspendidos
usando la biomasa rendimiento coefhcient P Si
suponemos que el valor de F es el mismo para todas
las células, por analogía con la ecuación. (13.59) la
ecuación de balance de masas para la limitación de
sustrato es:

(13.74)

Dividiendo por U, aplicando la definición de velocidad

de dilución de la ecuación. (13.39) y reordenando se
obtiene:

D (s -. S) -

(13.75)
ij ingeniería de Y69
reactores

p2 > Pj. En algunas aplicaciones, el segundo CSTR se complementó con

Mediante la manipulación de las ecuaciones (13.73) y (13.75)
y sustituyendo la expresión Monod para p de la ecuación.
(11,60), se obtiene la siguiente relación entre la concentración
de sustrato en estado estacionario, la tasa de dilución y
concentración inmovilizado de células:
medio fresco que contiene nutrientes, inductores o
inhibidores para la formación óptima del producto.
ecuaciones de diseño para celulares y enzimáticos cascadas CSTR se
pueden derivar como una simple extensión de la teoría desarrollada
en la Sección 13.5.4; se aplican los mismos principios de equilibrio de
masas

(13.76)

La forma de la ecuación. (13,76) se muestra en la figura

13.27. Para un quimiostato con células suspendidas
solamente, es decir x¡p = 0, en constante
statmi re - y unre la tasa máxima dilución operativo D. R; 0,1
limitado por la tasa de crecimiento específico máxima de las
células.
A partir de la ecuación. (13,73), para cualquier x¡q> 0, D en
estado estacionario en el reactor de células inmovilizado es mayor
que p. En consecuencia, dilución tasa ción ya no está limitada por
la máxima tasa de crecimiento y, como se muestra en la figura
13.27, quimiostatos de células inmovilizadas pueden funcionar a
D considerablemente mayor que Dg j sin lavado. A una velocidad
de dilución dada, la presencia de células inmovilizadas también
mejora la conversión del sustrato y reduce la cantidad de sustrato
perdido en la corriente de producto. Sin embargo, las velocidades
de reacción con células inmovilizadas pueden reducirse des
significativas antly por los efectos de la transferencia de masa en
y alrededor de las partículas. Como se ilustra en la figura 13.27,
al mismo concen-
tración de células inmovilizadas, la conversión de sustrato a 9
T = 1,0
es mayor que a valores más bajos de qy cuando de
transferencia de masa limita- ciones son significativos.

13.5.6 quimiostato Cascade

La unión de dos o más CSTR en serie produce un proceso
multi-etapa en la que las condiciones tales como pH, Ature
tem- y la composición del medio se pueden variar en cada
reactor. Esto es ventajoso si las condiciones del reactor
necesarios para el crecimiento son diferentes de las para la
síntesis de producto, por ejemplo en produc- ción de proteínas
recombinantes y muchos metabolitos no directamente
relacionadas con el metabolismo de la energía. Una forma de
operar un RWO-etapa quimiostato cascada se muestra en la
figura 13.28; en este proceso la corriente de producto del
primer reactor se alimenta directamente en el segundo.
Sustrato abandona el primer reactor en concen-
trationorte así se convierte en el segundo tanque de modo que s2
<sj y
ij ingeniería de mayor flexibilidad de funcionamiento. Y69
Figura
reactores13.27Steady-Estado de conversión del sustrato
como una fun- Hay varias maneras por las cuales las células se pueden reciclar en
ción de la tasa de dilución con y sin células inmovilizadas.
Las curvas se calculan con los siguientes valores de
parámetros: p “, p = 0,1 h ° 'Kg - 10 ° * g 1 °', Y - 0.5
gg
8 x 10 ° * ° gl'.

80 z¡ “, = 0,1 g 1', 9 T - 1.0

conversión de sustrato (
“ Xy- 0,1 g 1'. sT - 0,3
60 INMOVILIZADAS-CELL
chemostat
40

'7o)
20 SUSPENDIDO-
CELL
CI-IEMOSTAT
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
tasa de dilución, D
(h *)

y el estado de equilibrio se asume en cada etapa del

reactor. Los detalles pueden encontrarse en otras
referencias [5, 37, 38]. En cascadas de fermentación,
las células que entran en los vasos segunda y
posteriores pueden ir a través de períodos de
crecimiento desequilibrado medida que se adaptan a las
nuevas condiciones ambientales en cada reactor. Por lo
tanto, el uso de modelos metabólicos no estructurados
simples tales, como los esbozada en este texto no
siempre dan resultados precisos. Sin embargo, se puede
demostrar que el tiempo de residencia total del reactor
requerido para lograr un grado dado de conversión de
sustrato es significativamente más pequeño con dos
CSTR en serie que si se utiliza un solo CSTR. En otras
palabras, el volumen total del reactor requerido se
reduce con dos tanques más pequeños en serie que con
un solo depósito de gran tamaño. Por lo general, sin
embargo,

13.5.7 Con quimiostato de reciclaje celular

La concentración de células en un solo quimiostato
se puede aumentar mediante el reciclaje de biomasa
a partir de la corriente de producto de vuelta al
reactor. Con más de catalizador presente en el
recipiente, se pueden lograr mayores tasas de
utilización Strate sub- y formación de producto. Con
reciclado celular, la velocidad de dilución crítico
para lavado también se incrementa permitiendo una
Ij ingeniería de reactores 37 °

Figura 13.28Flowsheet para una cascada de dos fermentadores de tanque agitado

continuo.

continuamente y el caldo gastado eliminado. Como se indica en la

procesos de fermentación. retroalimentación externa biomasa figura 13.30, las células en un reactor de perfusión son retenidos
se ilustra en la figura 13.29; En este esquema, un separador físicamente en el recipiente mediante un dispositivo mecánico tal
celular como una centrífuga o tanque de sedimentación se utiliza como un filtro.
para concentrar la biomasa leav- ing del reactor. Una parte del
concentrado es continuamente
reciclado de nuevo al CSTR con velocidad de flujo "" célula
ID R concen- tración x ,. Tales sistemas pueden ser operados
bajo estado estacionario
condiciones y se utilizan ampliamente en los residuos
biológicos trata- miento. Otra forma de lograr la regeneración
de la biomasa es cultivo de perfusión o contenedores internos
de retroalimentación. Este esquema de funcionamiento se
utiliza a menudo para el cultivo de células de mamífero y se
ilustra en la figura 13.30. El agotamiento de los nutrientes y la
acumulación de los productos inhibitorios limitar las
densidades de células de lote para muchas líneas de células
animales a aproximadamente 10' células ° ml'. La densidad
celular y por lo tanto la productividad volumétrica de estos
cultivos se pueden aumentar mediante la retención de biomasa
en el reactor mientras que el medio fresco se CON- añadió
rendimiento Liquid este modo se consigue sin
eliminación continua o dilución de las células de modo
que las concentraciones en exceso de 10 7 células ml °
'pueden ser obtenidos. Un problema común aso-ado
con los sistemas de perfusión es el bloqueo o el
cegamiento del filtro.
Con células en crecimiento, si toda la biomasa es
devuelto o retenido en el reactor, la concentración de
células se incrementará con no se alcanzarán tiempo y
estado estacionario. Por lo tanto, para la operación en
estado estacionario, cierta proporción de la biomasa
debe ser eliminado del sistema. reactores Chemostat
con reciclaje celular se pueden analizar utilizando las
mismas técnicas de equilibrio de masas aplicadas en
5ection 13.5.4 [37, 38]. Los resultados típicos para la
concentración de la biomasa y la productividad de
biomasa con y sin reciclado de células se muestran en
la figura 13.31. Con la regeneración celular, porque las
células reciclados son una fuente adicional de la
biomasa en el reactor, de lavado se produce en las tasas
de dilución mayor que la tasa máxima de crecimiento
específico. Si tz es la relación de reciclado:
1j Reactor de Ingeniería

Figura 13.29 Diagrama de flujo para un fermentador

de tanque agitado continuo con retroalimentación
biomasa externo.
(13.77)

y Q es el factor de concentración de biomasa:

(13.78)

la tasa de dilución crítica con ciclo celular se incrementa por un

factor de / (t + p - pp) con relación a la simple quimiostato. Figura
13.31 también muestra que la productividad de biomasa es mayor
en los sistemas de reciclado por el mismo factor.

13.5.8 Operación continua de un flujo pistón

Reactor
operación de flujo de pistón es una alternativa a la operación
de mezclado para los reactores continuos. No se produce la
mezcla en un reactor de flujo pistón ideal; líquido que entra en
el reactor pasa a través de como un 'tapón' discreto y no
interactúa con los elementos fluidos vecinos. Esto se logra a
tasas altas de flujo que minimizan la retromezcla y las
variaciones en la velocidad del líquido. El flujo de tapón se
Figura 13.30 Diagrama de flujo para un reactor de
consigue más fácilmente en la columna o reactores tubulares
perfusión continua con retroalimentación biomasa interna.
tal como la mostrada en la figura 13.32. reactores de flujo de
pistón pueden funcionar en flujo ascendente o
Ij ingeniería de reactores

Figura volumétrica arena concentración de biomasa
13.31Steady-estado biomasa productividad Q para un
quimiostato con y sin reciclado celular. Las curvas se
calculan con los siguientes valores de parámetros: p “, p =
0,5 h °, Kg - 0,01 g 1 ° 'Y - 0,5 gg °', i = 2 g 1 °', <x = 0,5,
§ = 2.0.
En la Ec. (6,5), M r es la tasa de flujo de masa del sustrato
entra en el sistema; por lo tanto, M, = Fsg donde su el flujo
volumétrico
tasa a través del reactor y s es la concentración de sustrato en z.
Del mismo modo, la tasa de flujo de masa de sustrato sale de la
sección, es Fs gg. Sustrato no se genera en la reacción;
por lo tanto, VG = 0. Tasa de FIC consumo de sustrato es igual a
la tasa volumétrica de reacción r multiplicado por el volumen de
la sección. r está dada por la ec. (11,31); el volumen sección
es igual a A Az donde A es el área de sección transversal del
reactor. En el estado estacionario, el lado izquierdo de
ejemplo. (6.5) es cero. Por lo tanto, la ecuación de balance de
masas es:

Ia (13.79)

donde r “, p es la velocidad máxima de reacción de la enzima

y Kg es la constante de Michaelis. Dividiendo por AISI y volver
0.00.20.40.60.8 1.0 1.2 a organizar da:
El grado de dilución,
re (h yo )

modo de flujo descendente o, en algunos casos,

Para desarrollar ecuaciones para un reactor de enzima de flujo de
horizontalmente. reactores tubulares de flujo de pistón se
pistón, hay que considerar una pequeña sección del reactor de la
conocen por la abreviatura PFTR.
longitud kz como se indica en la figura 13.32. Esta sección está
Líquido en un PFTR fluye a velocidad constante; de este
situado a una distancia z desde el punto de alimentación. Vamos a
modo todas las partes del líquido tienen tiempo de residencia
ejecutar un balance de masas en estado estacionario en Sustrato de
idéntico en el reactor. Como reacción en el producto de los
alrededor de la sección usando la Ec. (6.5).
vasos, los gradientes de concentración ofsub- Strate y el
producto se desarrollan en la dirección del flujo. En el
extremo de alimentación de la PFTR la concentración de
sustrato será alta y la baja concentración de producto debido
a que la mez- cla de reacción acaba de entrar en el recipiente;
en el extremo del tubo de la concentración de sustrato será
baja y el nivel de producto de alta. Considere la operación de
la PFTR muestra en la figura 13.32.
La velocidad de flujo volumétrico de líquido a través del vaso
es N; el
corriente de alimentación contiene el sustrato a una
concentración i ,. A la salida tor reac-, la concentración de
sustrato es sf. Esta concentración de salida puede estar
relacionada con las condiciones de entrada y tiempo de
residencia tor reac- utilizando técnicas de equilibrio de masas.
Consideremos en primer lugar la operación de flujo de pistón
para la reacción enzimática.

13.5.8. reacción I Enzyme

 (13.80)

El caudal volumétrico dividido por el reactor cruzada

área de la sección A es igual a la velocidad superficial
a través de la columna, u. Por lo tanto:

(13.81)

Para Aconstant parte, u también es constante. Eq. (13.81)

es válida para cualquier sección en el reactor de espesor
Como Para que sea válido en cualquier punto en el
reactor, hay que tener el límite como l sz --- + 0:

(13.82)

y aplicar la definición del diferencial de la ecuación. (D. 13) en

D Apéndice:

(13.83)
Ij ingeniería de 373
reactores

Figura 13.32 Diagrama de flujo para un reactor continuo
tubular de flujo de pistón.
Eq. (13,83) es una ecuación diferencial para el sustrato
gradiente de concentración a través de la longitud de un
reactor de flujo de pistón. Suponiendo u y los parámetros
cinéticos son constantes, la ecuación. (13.83) está listo para
la integración. La separación de variables y rejilla inte- con
condición de contorno i = s en z = 0 da una expresión para
la longitud del reactor I requerida para alcanzar una
concentración de let OUT- de SF:

Kg •yo esF
L-U ln - +
máx 'F máx
(13.84)

El tiempo de permanencia T para reactores continuos se define

en la ecuación. (13,51). Si dividimos T y F en la ecuación.
(13.51) por A, podemos expresar el tiempo de residencia para
reactores de flujo de pistón en términos de parámetros L y u:

(13.85)

Por lo tanto, la ecuación. (13.84) se puede escribir como:

(13.86)

Las ecuaciones (13.84) y (13.86) nos permiten calcular el

tiempo de la longitud del reactor y de residencia requerido para
lograr la conversión de sustrato a partir de i¡ concentración a ï
¿en velocidad de flujo u. La forma de la ecuación. (13,86) es
idéntica a la de la ecuación. (13,10) para los reactores por
lotes. Como en reactores por lotes, donde las concentraciones
de sustrato y de producto varían de forma continua durante el
período de reacción, las concentraciones en reactores de flujo
de pistón cambiar continuamente a medida que el material se
mueve de entrada a la salida. Por lo tanto, la operación de flujo
de pistón puede ser visto como una manera de simular cultivo
discontinuo en un sistema de flujo continuo.
operación de flujo de pistón es generalmente poco práctico
para las conversiones enzimáticas a menos que la enzima está
inmovilizada y retenida dentro del recipiente. Para reacciones
de enzima inmovilizada afectadas por la difusión, la Ec.
(13.83) debe ser modificado para tener en cuenta los efectos de
transferencia de masa:
Ij ingeniería de 374
reactores

(13.87)
Ij ingeniería de 375
reactores

where9 T es el factor total de eficacia que representa las
limitaciones de transferencia de masa internos y externos (véase
la Sección 12.5), s es la concentración mayor del sustrato, y r “, p
y“K, son intrin- parámetros cinéticos sic. Debido q T es una
función de i, no podemos
integrar la ecuación. (13.87) directamente como s varía con z
en plug-flujo
reactores.
operación de flujo de pistón con enzima inmovilizada es
más
propensos a ser abordado en reactores de lecho compacto tal
como la mostrada en la figura 13.8. Embalaje en la columna
puede causar retromezcla sustancial y dispersión axial de
líquido, interfiriendo así con flujo de pistón ideal. Sin
embargo, aplicabilidad ción de las ecuaciones desarrolladas en
esta sección puede dar resultados satisfactorios para el diseño
de reactores de lecho fijo de la enzima immobilised-.

Ejemplo reactor 13,7 Plug-flujo para enzimas inmovilizadas

lactasa inmovilizada se utiliza para la lactosa se hidrolizan en los residuos de productos lácteos en glucosa y galactosa. Enzima está
inmovilizada en partículas de resina y se envasa en la columna a 0,3 m. El factor de eficacia total para el sistema está cerca de la
unidad; “K, para la enzima inmovilizadaes 1,32 kg m *; r “, p es de 45 kg m 3 h'. La concentración de lactosa en la corriente de
alimentación es la conversión de sustrato ia 9,5 kg m ° 'dese requiere 98%. La columna se hace funcionar con flujo de pistón para
un total de 310 d por año.
(a) ¿A qué tasa de flujo debe ser operado el reactor?
(b) ¿Cuántas toneladas de glucosa se producen por año?

Solución:

(a) Para la conversión de sustrato 98%, i F = (0,02 i,) = 0,19 kg m'. Substitutin8 en la Ec. (13.86) da:

1,32 kg m 9,5 kg m ' (9,5 - 0. 19) kg m °'

t= En + = 0,32 h.
45 kg m 3 h ' 0. l9 kg m 45 kg mh '

A partir de la ecuación. (13.51):

V 0,5 m
=== 1.56
z0.32 h

(b) La tasa de conversión de lactosa es igual a la diferencia entre la entrada y la salida caudales másicos de lactosa:

F (s - yo F ) = 1,56 m 'h °' (9,3-0. 19) 3 = 14,5 kg h °'.

La conversión de este a una tasa anual basado en 310 d por años y un peso molecular para la lactosa de 342:

24 h 310
La lactosa convertida = 14,5 kg h
°. carné de identidad

= 315 kgmol yr ° '

La reacción enzimática es:

lactosa + H 2O -R glucosa + galactosa.

Por lo tanto, a partir de la estequiometría de reacción, 315 glucosa kgmol se producen por año. El peso molecular de la gluco sa
Ijesingeniería
180; porde
lo tanto: 376
reactores
Ij ingeniería de 377
reactores

180 kg1 tonelada

Glucosa producida = 315 kgmol yr ° '.
1 kgmol ' 1000 kg

= 56,7 tonelada yr °'.

discontinuos; por lo tanto el tiempo de permanencia requerido para la

Cultivo de células 13.5.8.2
conversión en un reactor de flujo de pistón es el mismo que en un
Análisis de los reactores de flujo de pistón para el cultivo celular recipiente de mezclado operado en lotes. También puede demostrarse
sigue el mismo procedimiento que para la reacción enzimática. Si teóricamente que como el número de etapas de un CSTR aumentos en
la tasa de crecimiento específico de la célula es constante e igual cascada, las características de conversión de la totalidad
a / z “, p todo el reactor y muerte celular puede despreciarse, las
ecuaciones para el tiempo de residencia en el reactor son
análogos a los derivados en la Sección 13.5.1.2 para la
fermentación por lotes, por ejemplo:

'F

(13.88)

donde T es el tiempo de residencia en el reactor se define en la

ecuación. (13,51), x, es la concentración de biomasa en la
entrada y x¿ es la concentración de biomasa en la salida. La
forma de la ecuación. (13,88) es identi- cal a la de Ej. (13,20)
para la reacción por lotes.
operación de flujo de pistón no es adecuado para el cultivo
de células adjuntas suspensiones a menos que se recicla la
biomasa o hay inoculación continua de la embarcación.
operación de flujo de pistón con reciclado celular se utiliza
para el tratamiento de aguas residuales a gran escala; SIN
EMBARGO aplicaciones son limitadas. reactores de flujo de
pistón son adecuados para reacciones de células inmovilizada
con catalizador embalado en un lecho fijo como se muestra en
la figura 13.8. Aún así, los problemas operativos tales como
los mencionados en la Sección 13.2.5 significan que PFTRs
rara vez se emplean para las fermentaciones industriales.

13.5.9 Comparación entre los modos

principales de
Operación del reactor
El rendimiento relativo de lotes, CSTR y reactores PFTR
puede considerarse desde un punto de vista teórico, en
términos de la conversión del sustrato y la concentración del
producto obtenido a partir de vasos del mismo tamaño.
Debido a que el volumen total del reactor no se utiliza
plenamente en todo momento durante el funcionamiento
discontinuo alimentado, es difícil de incluir este modo de
funcionamiento en una comparación general.
Como se indica en la Sección 13.5.8, las características
cinéticas de PFTRs son los mismos que los reactores
Ij ingeniería de 378
sistema
reactoresde aproximación las de un plug-flujo ideal o
reactor lote mixto. Esto se muestra esquemáticamente
en la figura 13.33. La curva de trazos lisa representa la
disminución progresiva de la concentración de sustrato
con el tiempo pasado en un PFTR o lote
reactor; concentrationorte y os reducirre de so unt ºmi Inlet to
sF unt el
salida. En un solo bien mezclada CSTR operado con la
misma
concentraciones de entrada y de salida, ya que las
condiciones en el recipiente son uniformes hay un
cambio de paso en la concentración de sustrato, tan
pronto como la alimentación entra en el reactor. En
una cade CAS- de CSTR, la concentración es uniforme
en cada reactor, pero hay una caída gradual en la
concentración entre cada etapa. Como se ilustra en la
figura 13.33, mayor será el número de unidades en una
cascada CSTR, más cerca el perfil de concentración se
aproxima plug-flujo o comportamiento por lotes.
Los beneficios asociados con los diseños de
reactores particulares o modos de funcionamiento
dependen de las características cinéticas de la reacción.
Para las reacciones de orden cero que no hay
diferencia entre solo lote, CSTR y reactores PFTR en
términos de tasa de conversión global. Sin embargo,
para la mayoría de las reacciones que incluyen de
primer orden y las conversiones de Michaelis-Menten,
la velocidad de reac- ción disminuye a medida que la
concentración de sustrato disminuye. La velocidad de
reacción es por lo tanto alto en el inicio del cultivo por
lotes o en la entrada de un reactor de flujo de pistón
debido a que el nivel de sustratoes mayor.
Posteriormente, la velocidad de reaccióncae
gradualmente a medida que el sustrato se consume. En
contraste, el sustrato de entrar en un CSTR se diluye
inmediatamente a la con- centración final o salida de
estado estacionario de modo que la velocidad de reacción
es comparativamente baja durante todo el reactor. Por
consiguiente, para de primer orden y las reacciones de
Michaelis-Menten, CSTR lograr conversiones sustrato
inferior y menores concentraciones de producto que los
reactores por lotes o PFTRs del mismo volumen. En la
práctica, procesa- miento por lotes es mucho más
preferido a los sistemas PFTR a causa de los problemas
de funcionamiento mencionadas en la Sección 13.2.5. Sin
embargo, como se discute en la Sección 13.5.2, el tiempo
total de operación por lotes depende de la duración del
tiempo de inactividad entre lotes, así como en el tiempo
de conversión real. Debido a la longitud Prob de tiempo
de inactividad varía considerablemente de un sistema a
otro, no puede- cuenta aquí de una manera general.
La comparación entre los reactores produce un
resultado diferente si la reacción es autocatalítica. El
catalizador se produce por la reacción en procesos de
fermentación; por lo tanto, la tasa volumétrica de reac-
Ij ingeniería de
reactores

mutantes más rápido crecimiento del cultivo puede estar dominada

Figura 13.33 cambios de concentración en PFTR, con el tiempo por las células revertientes. En contraste, los inóculos
solo CSTR y múltiples vasos CSTR. producidos recién se utilizan en fermentaciones discontinuas giv- ing
control más estrecho sobre las características genéticas de la cultura.

ción aumenta a medida que el producto de conversión debido

a la cantidad de catalizador se acumula. velocidad de reacción
volumétrica continúa aumentando hasta que la concentración
de sustrato es baja, entonces se disminuye debido al
agotamiento del substrato. En RHE comienzo de cultivo
discontinuo, la tasa de conversión de sustrato es generalmente
baja porque relativamente pocas células están presentes; se
necesita algún tiempo para que las células se acumulan y la
tasa de recoger. Sin embargo, en funciona- miento CSTR, el
sustrato entra en el recipiente es inmediatamente expuesto a
una concentración relativamente alta de la biomasa de modo
que la tasa de conver- sión también es alta. Tarifas fuera de
conversión n quimiostatos operado cerca de la O} 3tlfR UIR
tasa de dilución para la productividad de biomasa (véase la
Sección 13.5.4.2) a menudo son IG-20 veces mayor que en
PFTR o por lotes reactores. Esta ventaja tasa desaparece si la
concentración de sustrato en estado estacionario en che CSTR
es tan pequeña que, a pesar de los altos niveles de biomasa
presente, la tasa de conversión es inferior a la media en un lote
o dispositivo PFTR. Para la mayoría de las fermentaciones sin
embargo, CSTR ofrecen ventajas teóricas significativas sobre
otros modos de funcionamiento del reactor.
A pesar de los beneficios de productividad asociados con
CSTR, una abrumadora mayoría de las fermentaciones
comerciales se con- canalizado por lotes. Las razones se
encuentran con las ventajas prácticas asociadas con cultivo
discontinuo. Los procesos por lotes tienen un menor riesgo de
contaminación que los reactores de flujo continuo; equipo y de
control de fallos durante el funcionamiento continuo a largo
plazo también son problemas potenciales. La fermentación
continua es factible solamente cuando las células son
genéticamente estables; si cepas desarrolladas revierten a
Ij ingeniería de
reactores
El cultivo continuo no es adecuado para la producción
de Olites metab- normalmente formados cerca fase
estacionaria cuando la tasa de crecimiento del cultivo
es baja; como se mencionó anteriormente, la
productividad en un reactor discontinuo es probable
que sea mayor que en un CSTR bajo estas condi-
ciones. fermentaciones continuas deben funcionar
durante largos períodos a cosechar los beneficios de su
alta productividad. La producción puede ser mucho
más flexible con el procesamiento por lotes; por
ejemplo, diferentes productos, cada uno con UMES
pequeño mercado en volumen se pueden hacer en
diferentes lotes.

13.5.10 Evaluación de cinética y Rendimiento

Los parámetros en Chemostat Cultura
En un quimiostato de estado estacionario con pienso
estéril y la muerte celular insignificante, la tasa de
crecimiento específico y es igual a la tasa de dilución
D. Esta relación es útil para determinar los parámetros
cinéticos y de rendimiento en el cultivo celular. Si el
crecimiento puede ser modelado utilizando una
cinética de Monod, para la cultura quimiostato, Ec. (L
1,60) se convierte en:

(13.89)

en la que Y “, p es la tasa máxima de crecimiento

específico, K $ es la constante de sustrato y i es la
concentración de sustrato en estado estacionario en el
reactor. Eq. (13,89) es análoga matemáticamente para la
expresión de Michaelis-Menten para la cinética de
enzimas. Si i es ured medi- en diversas velocidades de
dilución, las técnicas descritas en la Sección 1.4 l para
determinar u “, p y Kg se pueden aplicar para evalua-
ción de y“, p y N. El reordenamiento de la ecuación.
(13.89) da las siguientes ecuaciones linealizados que se
pueden utilizar para Lineweaver-Burk, Eadie-Hofstee y
parcelas de Langmuir, respectivamente:

(13.90)

(13.91)

(13.92)
Ij ingeniería de 377
reactores

Por ejemplo, de acuerdo a, por ejemplo. (13.90), ppp y K $ se Figura 13.34Graphical determinación
puede determinar a partir de la pendiente y la intersección de una del coeficiente de mantenimiento m $ y verdadero
parcela de / D frente . Los comentarios hechos en las secciones biomasa yieldusing datos de quimiostato cultura.
11.4.2-11.4.4 sobre la distorsión del error experimental se aplican
también a las ecuaciones
(13.90) - (13.92).
operación quimiostato también es conveniente para
determinar los verdaderos rendimientos y coeficientes de
mantenimiento para los cultivos celulares. Una expresión
relacionada estos parámetros a la tasa de crecimiento
específico se da por la ecuación. (11,81). En la cultura
quimiostato con p = D, Eq. (11.81) se convierte en:

(13.93)

donde es el rendimiento de biomasa observada a partir de

sustrato, Y es el verdadero rendimiento de biomasa a partir de
sustrato y m $ es el coeficiente de Ance mainten-. Por lo tanto,
como se muestra en la figura 13.34, una parcela de '/ Yp frente
l lD da una línea recta con pendiente m $ e inter CEPT' / p. En
el recipiente; Alternativamente, el vapor se hace burbujear
un quimiostato con pienso estéril, se obtiene el rendimiento de
directamente en el
biomasa observada a partir de sustrato F como sigue:
medio, o el recipiente se calienta eléctricamente. Si se usa la
Y'x5-- _ inyección directa de vapor, la asignación se debe hacer para la
(13.94) dilución del medio de condensado que típicamente añade 10-
20% para el volumen de líquido; calidad del vapor también
debe ser suficientemente
donde x y s son las concentraciones de células y sustrato en
medio líquido se esteriliza más comúnmente en lote en el recipiente
estado estacionario, respectivamente, y i¡ es la concentración
donde se va a utilizar. El líquido se calienta a la temperatura de
de sustrato de entrada.
esterilización mediante la introducción de vapor en las bobinas o
chaqueta de
13.6 esterilización
fermentaciones comerciales normalmente requieren miles de
litros de medio líquido y millones de litros de aire. Para cesos
pro- operados con cultivos axénicos, estas materias primas
deben ser proporcionados libres de organismos contaminantes.
De todos los métodos disponibles para la esterilización
incluyendo química trata- miento, la exposición a la radiación
ultravioleta, gamma y la radiación de rayos X, la sonicación,
la filtración y calefacción, solamente los dos últimos se
utilizan en operaciones a gran escala. Aspectos del diseño
fermentador y cons- trucción para la operación aséptica fueron
considerados en las Secciones
13.3.1 y 13.3.2. Aquí, consideramos el diseño de sistemas de
esterilización para líquidos y gases.

13.6.1 Lotes de calor Esterilización de líquidos

 Ij ingeniería
alta de la contaminación del medio por iones
para evitar 377
reactores
metálicos o compuestos orgánicos. Un perfil de
temperatura-tiempo típico para el lote zación aséptica
al se muestra en la figura 13.35 (a). Dependiendo de la
velocidad de transferencia de calor del vapor o
elemento eléctrico, el aumento de la temperatura del
medio en grandes fermentadores puede tomar un
período de tiempo signifi- sig-. Una vez se alcanza la
temperatura de mantenimiento o la esterilización, la
temperatura se mantiene constante para una
período de tiempo rhd agua de refrigeración en las
bobinas o chaqueta del fermentador se usa entonces
para reducir la temperatura del medio a
el valor requerido.
Para el funcionamiento de los sistemas de
esterilización por lotes, debemos ser capaces de
estimar el tiempo de mantenimiento requerido para
lograr el nivel deseado de destrucción celular. Así
como destrucción de los organismos Nant minantes, la
esterilización por calor también destruye los nutrientes
en el medio. Para minimizar esta pérdida, tiempos de
mantenimiento a la temperatura más alta de
esterilización debe ser mantenido lo más corto posible.
La muerte celular se produce en todo momento durante
la esterilización por lotes, INCLUYENDO los
períodos de calentamiento y de enfriamiento. la
celebración
Phd tiempo se puede minimizar teniendo en la
destrucción de células cuenta durante estos períodos.
Denotemos el número de contaminantes
presentes en el medio en bruto Nq. Como se indica
en la figura 13.35 (b), durante la
Ij ingeniería de
reactores

Figura 13.35 (a) Variación de temperatura con Tasa de esterilización por calor se rige por las ecuaciones
el tiempo para la esterilización por lotes de medio líquido. de la muerte térmica descritos en la Sección 11.14. Desde Ej.
(B) Reducción del número de células viables durante la (11,86) para la cinética de muerte de primer orden, en un
esterilización por lotes. recipiente por lotes donde la muerte celular es el único
proceso que afecta al número de células viables:

norte

(13.95)
Temperatura (°

donde el número Nis células ofviable, i es el tiempo y la

identificación es la constante de muerte específica. Eq.
(13.95) se aplica a cada etapa del lote
ciclo de esterilización: calentamiento, mantenimiento y enfriamiento.
C)

Sin embargo,
porque la identificación es una fuerte función de la
temperatura, ción integración directa de la ecuación. (13.95)
es válida solamente cuando la temperatura es
Tiempo constante, es decir, durante el periodo de mantenimiento. El resultado
(h) es:

En - * d Phd
2
(13.96)

NORTE'
En
norte
Número de células

(13.97)
viables

donde doctorado es el tiempo de mantenimiento, Nj es el

número de células viables en el inicio de explotación y, en Ny
Hora es el número de células viables en
el extremo de sujeción. ID se evalúa como una función de la
temperatura usando la ecuación de Arrhenius:

yo re = A e Ere'' T
(11.46)
significa aceptamos la riesgo de que un lote en el año 1000 no lo hará
periodo de calentamiento este número se reduce a N o. Al final
del periodo de mantenimiento, el número de células es Nj, - el ser estéril al final del proceso. Si se conocen Ng y NF, podemos
determinar el tiempo de retención requerido para reducir el
número final afrer de enfriamiento es N f. Idealmente, Nf es cero; número
al final de la esterilización
ciclo que queremos tener ningún contaminante presente. Sin de las células de N a N2, considerando la cinética de la muerte
embargo, celular.
porque la esterilidad absoluta requeriría un tiempo de
esterilización infinitamente larga, es teóricamente imposible
de alcanzar. Normalmente, el nivel objetivo de la
contaminación se expresa como una célula fracción OFA, que
está relacionada con la pro6n6i / i (y de contaminación Por
ejemplo, podríamos apuntar a un valor de N de 10 ° 3;. Esto
Ij ingeniería de
donde A es el factor constante o frecuencia de Arrhenius, i re
reactores
es el
activación energía para la muerte de la célula térmica, fi es el
gas ideal
temperatura absoluta constante y corbata.
Para utilizar la ecuación. (13.97) debemos conocer
Nj y N2. Estas fibras No. de orden se determinan
teniendo en cuenta la medida de la muerte celular
durante el calentamiento y los períodos de enfriamiento
cuando la temperatura no es constante. Combinando
las ecuaciones (13.95) y (11.46) se obtiene:

-- - UN
Dr
(13.98)

La integración de la ecuación. (13.98) da para el período de

calentamiento:
Ij ingeniería de 379
reactores

Figura 13,36 perfiles tcmperaturwtime generalizadas para las etapas de calentamiento y enfriamiento de un ciclo de esterilización por
lotes. (De
FH Deindoerfer y AE Humphrey, 1959, Método analítico para calcular los tiempos de esterilización por calor. Appl.
Microbiano. 7, 25G-264).

Normalmente, la muerte celular por debajo de

y, para el período de
enfriamiento: En
y mientras que el calentamiento y el enfriamiento de grandes
o (13.100)
2 ,
norte F
donde r, es el tiempo al final de la calefacción, q es el tiempo
en el
extremo de sujeción y r F es el tiempo al final de enfriamiento.
Nos CAN integración no completa de estas ecuaciones hasta
que sepamos cómo la temperatura varía el tiempo witii
durante el calentamiento y el enfriamiento.
Como se indica en el Capítulo 6, los archivos pro de
temperatura de estado estacionario durante el calentamiento y
el enfriamiento pueden determinarse a partir de las
propiedades de transferencia de calor del sistema. La forma
general de las ecuaciones chese se muestra en la figura 13.36 y
aproximadamente l00 ° C es mínimo; cómo- nunca, cuando el
calentamiento y el enfriamiento son relativamente lentos, las
temperaturas se mantienen cerca del máximo durante períodos
considerables de tiempo y, como se indica en la figura 13.35
(b), los teléfonos fibras No. de orden pueden reducirse
significativamente fuera del período de retención. Por lo
general, los períodos de interrupción son del orden de minutos,
volúmenes de líquido tomar horas. los cálculos de diseño de
muestra para esterilización por lotes arco dado por Aiba,
Humphrey y Millis (40] y Richards [41].
Los procedimientos de diseño descritos en esta sección se
aplican a esterilización por lotes de medio cuando la
temperatura es uni-
en la Tabla 13.3. La aplicación de una expresión apropiada para el
estaño Ec. (13.99) de la Tabla 13.3 nos permite evaluar el número de
células NJ en el inicio del periodo de mantenimiento. Del mismo
modo, la sustitución de T en la ecuación. (13,100) para la
refrigeración da N2 al final del periodo de mantenimiento.
El uso de los valores resultantes para NJ y N2 en la ecuación. (13,97)
com- Pletes el cálculo en tiempo de espera.
 Ij ingeniería
formar de
a través del recipiente. Sin embargo, si el 379
reactores
líquido contiene partículas contaminantes en forma de
flóculos o gránulos, los gradientes de tem- peratura
pueden desarrollar. Debido a que la transferencia de
calor dentro de las partículas sólidas es más lento que
en el líquido, la temperatura en el centro del sólido será
menor que en el líquido por alguna proporción del
tiempo de esterilización. Como resultado, la muerte
celular en el interior de las partículas no es tan eficaz
como en el líquido. Longer se requieren tiempos de
mantenimiento para el tratamiento de sustratos en fase
sólida y los medios que contienen partículas.
Cuando la esterilización por calor se escala hasta
volúmenes mayores, se necesitan tiempos de
tratamiento er largo para lograr los mismos resultados
de esterilización en la misma temperatura de
mantenimiento. Para un medio prima dada, el número
inicial de organismos N es directamente proporcional
al volumen de líquido; por lo tanto, para obtener la
Ij ingeniería de j8o
reactores

Mesa 13.3 ecuaciones generales para la temperatura como una función del tiempo durante el calentamiento y los períodos
de enfriamiento de esterilización por lotes

(F'rom FH Deindoerfer y AE Humphrey, 1959, Procedimiento analítico para el cálculo de los tiempos de esterilización por calor .
Appl. Microbiol. Z, 25 es-2 (4)

método de transferencia de perfil de temperatura-tiempo

calor

Calefacción

T-T 1+
burbujeo directo con el
vapor
(hiperbólico)

calefacción eléctrica (lineal)

- UA
MC
La transferencia de calor desde el vapor T-T$ 1+ mi
isotérmico
(exponencial
)

Enfriamiento
La transferencia de calor al agua de
refrigeración no isotérmico
T0
+
T - T yo

(exponencial
)

= área superficial para la transferencia de calor;

= capacidad de calor específico de medio;
dopag = específicapacidad de calor c de agua de refrigeración;
h = Diferencia de entalpía específica entre el vapor y crudo medio;
= Masa inicial de medio;
= masa tasa de vapor de flujo;
= Caudal másico de enfriamiento agua;
Q = Tasa de calor transferir;
T = temperatura;
= temperatura del medio inicial;
= Temperatura de entrada de agua de refrigeración;
= la temperatura del vapor;
= Tiempo; y
T = Transferencia de calor global coeficiente.
Ingeniería del Reactor j8z
i3

Figura 13.37 equipo de esterilización continua: (a) inyección continua de vapor con enfriamiento flash; (B) de
transferencia de calor usando intercambiadores de calor.

mismo Np final de un mayor número de células debe ser por períodos más largos de tiempo, este problema se agrava
destruido. Escala-up también afecta a los perfiles de con el aumento de escala.
temperatura-tiempo para la calefacción y la refrigeración.
características de transferencia de calor dependen del equipo
utilizado; calentamiento y enfriamiento de volúmenes más
13.6.2 Continuoui esterilización de
grandes suelen tener más tiempo. temperaturas elevadas
calor de Líquidos
sufridas durante ing calor y el enfriamiento son perjudiciales la esterilización continua, en particular una alta temperatura, el
para vitaminas, proteínas y azúcares en soluciones de tiempo de exposición corto-proceso, puede reducir
nutrientes y reducen la calidad del medio [42]. Debido a que significativamente el daño
es necesario llevar a cabo grandes volúmenes de medio
Ij ingeniería de j8z
reactores

Figura 13.38Variation de temperatura con el tiempo en los stcrilisers continuas de la figura 13.37.

Particip 20 j Sosteniend i 20
ación sec 1 o 2-3 min i seg
2-3 min un
do

enfriamiento
rápido De
Tcmøœmm ('

La inyección de ' intercambio

vapor de calor
DO)

37 37
-

Hora Hora

(*) (se
gun
do)se pre-calienta con
vapor y medio. medio bruto
a ingredientes del medio, mientras que el logro de altos
niveles de células destrucción. Otras ventajas incluyen vapor
econo- mía y más fiable escalado mejoradas. La cantidad de
vapornecesaria para la esterilización continua es 2f -2596 thnt
md en procesos por lotes; el tiempo requerido también se reduce
significativamente debido a la calefacción y refrigeración son
prácticamente instantánea.
configurncions equipos típicos para continuo ción sterilisa-
se muestra en la figura 13.37. En la figura 13.37 (a), en
brutomedio que entra en el sistema es primero pre-HCAT <>
D por caliente, estéril en un intercambiador de calor del
medio; este requisito cconomiscs de vaporMents para la
calefacción y se enfría el medio estéril. El vapor se inyecta a
continuación direcdy en el medio a medida que fluye a través de
una tubería; la temperatura del líquido se eleva casi
instantáneamente a la temperatura de esterilización deseada. El
tiempo de exposición a esta tempera- tura depende de la longitud
de la tubería en la sección de retención del esterilizador. Después
de la esterilización, el medio se enfría instandy pasándolo a través
de una válvula de expansión en una cámara de
vacío;enfriamiento adicional tiene lugar en el
intercambiador de calor donde residía calor se utiliza para
medio entrante pre-calor. Figura 13.37 (b) muestra un esquema de
esterilización alternativo basado en el intercambio de calor entre
Ij ingeniería de j8z
reactores
caliente, medio estéril en un intercambiador de calor
chen presentada a la temperatura ilisation ster- por más de
intercambio de calor con vapor. lostemperatura
sterilisntion se mantiene en la sección de retención antes
de ser reducido a la temperatura de fermentación por
intercambio de calor con el medio de entrada. sistemas
de intercambio de calor estánmás caro de construir que
los dispositivos de inyección; ensuciamiento de las
superficies internas también reduce la eficacia de la
transferencia de calor entre las limpiezas. Por otro lado, una
desventaja aso- inyección de vapor wich ado es la dilución
del medio de condensación; la formación de espuma de
inyección directa STMM también puede causarproblemas
con el funcionamiento de enfriador instantáneo. Como
se indica enFigura 13.38, tasas de calefacción y
refrigeración en zación aséptica al continua son mucho más
rápida que en lote; en consecuencia, en el diseño de
steriliscrs continuas, las contribuciones a la muerte celular
lado OUT- del periodo de mantenimiento son generalmente
ignoradas'.
Una variable importante que afecta el rendimiento de
la continua esterilizadores es la naturaleza del flujo de
fluido en el sistema. Lo ideal sería que todos fluido que
entra en el equipo en un instante particular debe pasar el
mismo tiempo en los esteriliza y salir del sistema al
mismo tiempo; a no ser que esto ocurre no podemos
controlar completamente el tiempo pasado en el
esterilizador por todos los elementos del fluido. No se
debe mezclar
Ij ingeniería de reactores
Figura 13.39 distribuciones de velocidad para el flujo en
las tuberías. (A) En flujo de pistón, la velocidad del fluido es
la misma a través del diámetro de la tubería, como se indica
por las flechas de igual longitud. (B) En integración global
desarrollado flujo turbulento, la distribución de velocidad se
aproxima a la de flujo de pistón; sin embargo, hay una cierta
reducción de la velocidad de flujo en las paredes. (C) En el
flujo laminar, hay un aumento continuo de la velocidad de
con- de las paredes para el centro del tubo.
j8j
Figura 13.40Correlation para la determinación del
coeficiente de dispersión axial- en flujo de la tubería
turbulento. Mr es el número de Reynolds, D es el diámetro
del tubo, u es la velocidad del fluido lineal media, p es la
densidad del fluido, y es la viscosidad del fluido, y Y, es el
coeficiente de dispersión axial-. Los datos fueron medidos
utilizando fluidos individuales en: tubos (O) rectas; (P)
tuberías con curvas; (O) artificialmente- rugosa tubería; y (O)
tubo curvado. (De O. Levenspiel, 1958, mezclado
longitudinal de fluidos que fluyen en las tuberías circulares.
Ind. Eng. Chem. 50, 343-346.)
10 '
, Experimental
Teórico
0.1 ' ''"
103 y i l0
o W *
M
E
T
R fluido más cerca de la entrada de las
ocurrir en los tubos; si el
O
mezclas de tuberías con líquido por delante de él, hay un riesgo
de que los contaminantes se transferirán a la salida del
esterilizador. El tipo de flujo entuberías donde no hay ni mezcla
ni variación en la velocidad del fluido se llama enchufe] bajo
como ya se ha descrito en la Sección 13.5.8 para los reactores de
flujo de pistón. El flujo de tapón es un patrón de flujo ideales; en
reali- dad, elementos de fluido en las tuberías tienen una gama de
diferentes velocidades. Como se ilustra en la figura 13.39, el flujo
tiende a ser más rápida a través del centro del tubo de cerca de las
paredes. Sin embargo, el flujo de tapón se aborda en las tuberías
en números de Reynolds turbulentos (ver
Sección 7.2.2) por encima de aproximadamente 2 K 10 4; la operación
a altos números de Reynolds minimiza mezclador de fluidos y la
variación de velocidad.
Desviación del comportamiento de flujo de pistón se
caracteriza por el grado de txinf dispersión en el sistema, es
decir, el grado en que se produce la mezcla a lo largo de la
longitud o eje de la tubería. disper- sión axial es un factor
crítico que afecta el diseño de esterilizadores continuos. La
importancia relativa de dispersión axial y de flujo mayor en la
transferencia de material a través de la tubería está
representado por una variable adimensional llamado el
PRR / rr numbrr:
Reactor ij Ingenieria

uL Figura 13,41 destrucción térmica de contaminar organismos

como una función del número de Peclet Pr y número
(13.101) Damköhler Da. N, es el número de células viablesentrar en la
sección de sujeción del esterilizador; norte2 es el número
donde Nr es el número de Peclet, u es la media lineal células fluidof salir. (De S. Aiba, AE Humphrey y NF
velocidad, L es la longitud del tubo y y es la axial-dispersión Millis, 1965, Bioc6rmicnf Enginrrrinj (Academic Press, Nueva
coeficiente. FOT flujo de pistón perfecto, y, es cero y el señor es
infinitamente York).
grande; En la práctica, los números de Peclet entre 3 y 600 son
normalmente, un
California. El valor de Y para un sistema particular depende
del número y el tubo de geometría Reynolds; una correlación
10 ''
de la literatura de ingeniería para la evaluación y se muestra
en la figura %
1 (i O
13.40. Una vez que el número de Peclet se ha calculado a "'
partir de la ecuación. (13.101), el grado de destrucción de

..>
células en el esterilizador puede ser
relacionado con la muerte específica constante I D usando la
Figura 13.41. En la figura 13.41, N es el número de células
viables que entran en el
sistema, No es el número de células que salen, br es el número
de Peclet como se define por la ecuación. (13.101), y Da es
l0"
otro número adimensional llamado el número Damkiihler:

y
io"

10
(13.102) °" 204060801 (D120
140

o
donde id es constante la muerte específica, I es la longitud de la
tubería de retención y u es la velocidad del líquido lineal media. da - re
los
reducir el valor de norteil cuanto mayor es el nivel de célula de destrucción
“N
ción. Figura 13.4 l muestra que, en cualquier esterilización dado
temperatura que define el valor de I D y Da, el rendimiento del
esterilizador disminuye significativamente como el número de
Peclet
disminuye. cálculos de diseño para un esterilizador continuo se
ilustran en el Ejemplo 13.8.

Ejemplo 13.8 mantenimiento de la temperatura en un esterilizador continuo

Medio a una velocidad de flujo de 2 m * h ° 'se va a esterilizar por intercambio de calor con vapor en un esterilizador continuo.
El líquido contiene las esporas bacterianas a una concentración de 3 x 10 '' M *; la energía de activación y constante de
Arrhenius para la destrucción térmica de estos contaminantes son 283 kJ mol-g 'y 5,7 X 103 * h', respectivamente. Un riesgo de
contaminación de un organismo sobrevivir operación cada 60 días se considera aceptable. El tubo esterilizador tiene un
diámetro interior de 0,1 m; la longitud de la sección de retención es de 24 m. La densidad del medio es de 1.000 kg m ° * y la
viscosidad es de 3,6 kg m ° 1 h °'. ¿Qué temperatura de esterilización se requiere?

Solución:
El nivel deseado de destrucción celular se evaluó utilizando una base de 60 días. Haciendo caso omiso de cualquier muerte
celular en las secciones de calentamiento y enfriamiento, el número de células que entran en la sección de retención durante 60
d es:
24 h
 N a = 2 m3 h ° '(5 x 1 0' 2 3) . (60 d) = 1,44 x l0" .
1 re
N2, el número aceptable de células de arrendamiento financiero durante este período es 1. Por lo tanto:

'2 1
= 6,9 x 1o 17,
U1.44 X 101 '
 I3 Reactor de J8
Ingeniería Y

La velocidad lineal u en el esterilizador es igual a la velocidad de flujo volumétrico dividido por el área de sección transversal de la
tubería:

2 m * h-
u == 234,5 m h- !.
0,1 m
2

Para calcular Pr debemos determinar en primer lugar y, utilizando

la figura 13.40:
RE" pag (0,1 m) (254,6 mh ° ') (1000 kg
re - yo h
'° = 7 07 x 10
'3,6 kg m

Para abeto = 7,07 X 10' podemos determinar Jg partir de la figura 13.40 usando ya sea la curva experimental o teórica. Elijamos
elcurva experimental ya que esto da un ofJg valor más grande y un valor más pequeño de Mr; el diseño esterilizador tanto, será
más conservador.Por lo tanto, zU re - 0,65:

Ag = 0.65 (254.6 mh °) (0,1 m) = 16,6 m 2 h °'.

A partir de la ecuación. (13,101):

UI (254,6 metro h ° 1 ) )
= I8 3 £.
(24 A '16 .6
metro 2 h °

Utilizando la figura 13.41, que puede determinar el valor de i re para el nivel deseado de destrucción celular. Da correspondiente
anorteyo yo norte ,
6,9 x 10 ' 7 y Pr = 368 es aproximadamente 42. Por lo tanto:
u Hacer (254,6 m h) (42)
- 445,6 h '
re L 24 m

La temperatura de esterilización se puede evaluar después de la reordenación de la ecuación. (I 1,46). Dividiendo ambos lados
por una y tomando logaritmos naturales da:

UNre -F
) N- =
ART
Por lo tanto:

-
carné
de
T- identi
dad
R

$
E
d
n
yo re = 283 kJUgmol ° '= 283 x 10 * J gmol '; A - 5,7 x 10” h ° '; de la Tabla 2.5, che gas ideal constante fi ii
8,3144 JK °' Ngmol . Por lo
tanto:
 -283 x 10 * J ° gmol
qq de
I3 Reactor J8
T
Ingeniería 8.3144 JK °' gmol ° -8.4 K. Y
445,6 h
E °
n
Uso de la conversión entre K y ° C dada en la ecuación. (2.24), T = 125 ° C.
Ingeniería del Reactor
i3

veces mayor que las dimensiones de las bacterias y esporas a eliminar.

Calefacción y refrigeración en esterilizadores continuos son
Las partículas de aire transmitidas penetran la cama para distintas
tan rápida que en los cálculos de diseño que se consideran
profundidades antes de su paso a través del filtro es detenido; la
instantánea. Si bien la reducción deterioro de nutrientes, esta
profundidad del medio de filtro requerida para producir ofsufhcient
característica de la pro- ceso puede causar problemas si hay
aire
sólidos presentes en el medio. Durante el calentamiento, la
temperatura en el núcleo de las partículas sólidas se mantiene
más baja que en el medio. Debido a los tiempos de contacto
muy cortos en esterilizadores continuos En comparación con
los sistemas de lotes, hay un mayor riesgo de que las
partículas no se pueden esterilizar correctamente. Es
importante por lo tanto que el medio crudo se aclaró tanto
como sea posible antes de que entre un esterilizador continuo.

13.6.3 La esterilización de filtro de líquidos

A veces, los medios de fermentación o ingredientes
seleccionados se esterilizan por filtración en lugar de calor.
Por ejemplo, los medios que contengan componentes lábiles al
calor tales como enzimas y suero son fácilmente destruidos
por el calor y se deben esterilizar por otros medios.
Típicamente, las membranas utilizadas para la esterilización
de filtro de líquidos están hechos de ésteres de celulosa u otros
polímeros y tienen poros entre 0,2 y 24:45 de diámetro. Las
membranas mismos deben ser esterilizados antes de su uso,
por lo general por medio de vapor. Como medio se pasa a
través del filtro, las bacterias y otras partículas con
dimensiones mayores que el tamaño de poro se tamizan y
recoger en la superficie de la membrana. Los tamaños de poro
pequeños utilizados en la filtración de líquidos significa que
las membranas se bloquean fácilmente a menos que el medio
es pre-filtrada para eliminar cualquier partícula grande. Para
lograr altas velocidades de flujo,
la filtración de líquidos en general no es tan eficaz o fiable
como la esterilización por calor. Los virus y micoplasma son
capaces de pasar a través de filtros de membrana; también se
debe tener cuidado para evitar agujeros o desgarros en la
membrana. Por lo general, se incuba medio de filtro
esterilizado para un período de tiempo antes de su uso para
comprobar su esterilidad.

13.6.4 La esterilización de aire

El número de células microbianas en el aire es del orden 10'-104
m ° [40]. La filtración es el método más común para
esterilización de aire en bioprocesos de gran escala; la
esterilización por calor de los gases es económicamente poco
práctico. Los filtros de profundidad consistentes en camas
compactados o almohadillas de material fibroso tal como lana
de vidrio se han utilizado ampliamente en la industria de la
fermentación. Las distancias entre las fibras en filtros de
profundidad son típicamente 2-10 pM, aproximadamente 10
Ingeniería del Reactor estar familiarizado con una gama de configuraciones de
calidad
i3 depende de la velocidad de flujo de operación
biorreactores además del ron ifirrrd estándar,
y el nivel de entrada de contaminación. Las células se
incluyendo la columna bubbk-, puente aéreo,
recogieron en filtros de profundidad por una
envasados-cama,]-cama tuidised y truco: diseños k-
combinación de impacto, intercepción, efectos
cama;
electrostáticos, y, para partículas más pequeñas que
aproximadamente 13:00, la difusión a las fibras. Los entender los aspectos prácticos de la cons- trucción
filtros de profundidad no se desempeñan bien si hay biorreactor, en particular las destinadas a mantener
grandes fluctuaciones en el caudal o si el aire es las condiciones asépticas;
húmedo; condensación de líquido en el filtro estar familiarizado con las mediciones utilizadas en
incrementa la caída de presión, hace que la monitorittj fermentación (y los problemas asociados
canalización del flujo de gas, y proporciona una vía a la falta ofon- métodos de línea para parámetros de
para que los organismos crecen a través de la cama.
fermentación importantes;
Cada vez más, los filtros de profundidad están siendo
reemplazados por industrial
aplicaciones de filtros de cartucho de membrana.
Estos filtros utilizan membranas poliméricas de vapor-
esterilizable que actúan como filtros en NRR atrapar
contaminantes como en un tamiz. cartuchos de filtro
de membrana contienen típicamente un filtro de
pliegues, hidrófoba con pequeñas y de tamaño
uniforme poros 0,45 pM o menos de diámetro. La
naturaleza hidrofóbica de la superficie minimiza los
problemas con la humectación del filtro mientras la
configuración plegada permite una alta área de
filtración para ser embalado en un pequeño volumen
de cartucho. Pre-filtros incorporados en el cartucho o
aguas arriba reducir el ensuciamiento de la membrana
mediante la eliminación de las partículas grandes,
aceite, agua desplegable permite y de espuma a partir
del gas entrante.
Los filtros también se utilizan para esterilizar gases
efluentes dejando fer- menters. En esta aplicación,el
objetivo es evitar la liberación en la atmósfera de
cualquier microorganismo arrastradas en soles de
aero- en el espacio de cabeza del reactor. La
concentración de células en fermentador de gas de
escape es varias veces mayor que en el aire.La
contención es particularmente importante cuando los
organismos utilizado en la fermentación son
potencialmente perjudiciales para personal de la planta o
el medio ambiente; empresas que operan fermentaciones
con cepas patógenas o recombinantes son requeridos por
las autoridades reguladoras para evitar el escape de las
células.

13.7 Resumen del capítulo 13

Capítulo 13 contiene una variedad de información
cualitativa y cuantitativa sobre el diseño y operación
de biorreactores. Después de estudiar este capítulo,
usted debe:

(I) ser capaces de evaluar en términos generales el

efecto de la ingeniería de las reacciones en los
costos totales de producción en
bioprocesamiento;
Ij ingeniería de
reactores

(*) estar familiarizado con los métodos establecidos y

modernos a la 13.2 la producción de lotes de ácido aspártico
usando
ser capaz de predecir rimrs de reacción por lotes para enzima unida a las células
reacciones enzimáticas y las células;
ser capaz de predecir el rendimiento de los reactores de enzima aspartasa se utiliza industrialmente para la fabricación de
alimentación por lotes ácido aspártico, un componente de edulcorante bajo en calorías. El
operado bajo condiciones de estado estacionario cuasi; ácido fumárico y amoníaco se convierten en ácido aspártico de
ser capaz de predecir y comparar el rendimiento de acuerdo con la ecuación:
continúa reactores de tanque agitado y continúa plug-
flujo
FXdFtOYS'
saber cómo utilizar el estado de equilibrio
Chemostat de datos para determinar los parámetros
cinéticos y de rendimiento de las minas para el
cultivo celular; y
(X) saben cómo los sistemas continuos y discontinuos están
diseñados
para la esterilización por calor de medio líquido y los
métodos para la esterilización de filtro de los gases de
fermentación.

Problemas
13.1 Economía de la enzima de conversión
por lotes
Una enzima se utiliza para convertir sustrato en un pro- ducto
comercial en un reactor de lotes de 1600 litros. r “, p para la
enzima es
0,9 g 1 ° 'h °'; “K, Es 1,3 g 1 °'. La concentración de sustrato en
el inicio de la reacción es 3 gl ° '; de acuerdo con la stoichiometiy
de la reacción, la conversión de 1 g sustrato produce 1,2 g de
producto. El costo de operación del reactor que incluye la mano
de obra, mantenimiento, energía y otros servicios se estima en $
4800 por día. El costo de recuperar el producto depende del grado
de conversión del sustrato y la concentración resultante de
producto en la mezcla de reacción final. Para conversiones entre
70% y 100%, el coste del procesamiento aguas abajo se puede
aproximar usando la ecuación:

C = 155 - 0.33A

donde C es el costo en $ por kg de producto tratado y A es la

conversión de sustrato porcentaje. El precio de mercado del
producto es de $ 750 kg °'. Actualmente, el reactor de enzima
es operarse ivith conversión de sustrato 75%; sin embargo,
se propone aumentar esto a 90 ° Zo. Estimar el efecto que
esto tendrá en la economía del proceso.
Ij ingeniería de final concentración.
do 4 HQO 4 + NUEV A H A M P S H IR E S
reactores doj H 7 (b) operación de alimentación por lotes se lleva a cabo para
4N. 40 d. ¿Cuál es la masa final de células en el reactor?
(fumárico ácido) (ácido aspártico) (c) El fermentador está disponible 275 d por año con un tiempo
de inactividad entre las corridas de 24 h. La cantidad de
Bajo investigación es un proceso que utiliza aspartasa en biomasa célula vegetal que se produce anualmente?
intacta Bacillus cadaveris Células. En el rango de
sustrato de interés, laconversión puede ser descrito
usando la cinética de Michaelis-Menten con N “, 4,0 g 1
°'. La solución de sustrato contiene 15% (w / v) de
fumarato de amonio; enzima se añade en forma de
1yophil-células ralizan y la reacción se detuvo cuando
el 85% del sustrato Está convertido. A 32 ° C, r “, p para
la enzima es 5,9 g de 1 ° 'h °' y su vida media es de 10,5
d. A 37 ° C, r “, p aumenta a
8,5 g 1 ° h ', pero la vida media se reduce a 2,3 d.
(a) ¿Qué temperatura de funcionamiento recomendaría usted?
(b) El tiempo de inactividad promedio entre las
reacciones por lotes es de 28 h. A la temperatura
elegida en (a), se calcula el volumen de reactor
requerido para producir 5000 toneladas de ácido
aspártico por año.

13.3 Predicción de tiempo de cultivo por lotes

Una cepa de Escherichia coli ha sido diseñada
genéticamente para producir proteína humana. Un
cultivo discontinuo se inicia por inoculat- ing 12 g de
células en un fermentador con columna de burbujas
100 litros que contiene 10 g 1 'glucosa. La tasa de
crecimiento específica máxima de la cultura es de 0,9
h ° '; el rendimiento de biomasa a partir de glucosa es
0,575 gg °'.
(a) Estimar el tiempo requerido para alcanzar la fase
estacionaria.
(b) ¿Cuál será la densidad celular final si la
fermentación se detiene después de sólo el 70%
del sustrato se consume?

13.4 Fed-batch programación

Nicotiana células rn6nrum son cultivadas a alta
densidad para pro- ducción de goma de polisacárido.
El reactor utilizado es un tanque agitado, que contiene
inicialmente 100 litros medio. La tasa de crecimiento
específica máxima del cultivo es 0,18 ° d 'y el
rendimiento de biomasa a partir de sustrato es 0,5 gg °.
La concentración de sustrato de crecimiento limitantes
en el medio es 3% (w / v). los
reactor es inoculado con 1,5 g 1 1 células y operado en lotes
hasta que el sustrato es prácticamente agotado; flujo
de medio a continuación, se inicia a una velocidad de 4
1 d °'. la operación de alimentación por lotes se
produce en condiciones de estado estacionario cuasi.
(a) Estimar el tiempo de cultivo por lotes y biomasa
Ij ingeniería de J8
reactores 8

13.5 la producción de alimentación por lotes de

plato de queso 13.7 Lotes y continua producción de
cultura biomasa
Luctobacillus rzrN se propaga en condiciones esencialmente methyloi Pseudomonas: rophw se utiliza para producir tein pro- sola
anaerobias para proporcionar un cultivo iniciador para la célula a partir de metanol en un puente aéreo-ciclo de presión 1000 m *
fabricación de queso suizo. El cultivo produce ácido láctico como
un subproducto del metabolismo gy Ener-. El sistema tiene las
siguientes características:
Y - 0,23 kg kg '
K$- 0,15 kg m °
y “, p = 0,35 h°
md = 0,135 kg kg ° 'H ° '
Un fermentador de agitación se hace funcionar en el modo
discontinuo alimentado en estado estacionario cuasi con un
caudal de alimentación de 4 m3 h ° 'y la concentración Strate
alimentación sub- de 80 kg m 3. Después de 6 h, el volumen
de líquido es de 40 m'.
(a) fatwas el cultivo inicial ¿volumen?
(b) ¿Cuál es la concentración de sustrato en estado cuasi-
estacionario?
(c) es decir la concentración de células en estado cuasi-
estacionario?
(d) fatmass de las células se produce después de funciona-
miento 6 h fed-batch?

13.6 conversión enzimática continua en una

reactor de lecho fijo
Se está desarrollando un sistema para eliminar la urea de la
sangre de los pacientes con insuficiencia renal. Un prototipo de
reactor de lecho fijo está configurado con ureasa inmovilizada en
perlas de gel de 2 mm; solución de urea tamponada se recicla
rápidamente a través de la cama de modo que el sistema está bien
mezclado. La reacción de la ureasa es:

(NH2 ) 2CO + 3 HCO -R 2 NHS' + HCO3 + OH °.

“K , Para la ureasa inmovilizada es 0,54 g de 1 °. El volumen de

los granos en el reactor es de 250 cm', la cantidad total de la
ureasa es de 10 ° 4 g, y el número de rotación es 11 000 g NH 4'
(g
enzima) s °'. El difkisivity eficaz de ureasa en el gel es
7 x 10“ cm2 s ° '; efectos de transferencia de masa externos
son insignificantes. El reactor se hace funcionar de forma
continua con un volumen de líquido de 1 litro. La corriente de
alimentación contiene 0,42 g 1 'urea; la concentración de urea
deseada es de 0,02 gl °'. Haciendo caso omiso ción deactiva-
enzima, qué volumen de solución de urea puede ser tratada de
30 min?
Ij ingeniería de 0,16 kg kg ° 'h °' J8
fermentador. El rendimiento de biomasa a partir de sustrato es IR
reactores 0.85' 8
0,41 gg °, N es RS'
0,7 mg 1 °, y la tasa máxima de crecimiento específico Suponga que la síntesis de productos es insignificante en el
es 0,44 h °'. El medio contiene 4% (w / v) de metanol. primer reactor y el crecimiento es insignificante en el segundo
A conver- sión sustrato de 98% es deseable. El reactor reactor.
puede ser operado, ya sea en modo discontinuo o (a) Determinar las concentraciones de células y sustrato
continuo. Si se opera en lotes, un inóculo de 0,01% (w que entran en el segundo reactor.
/ v) se utiliza y el tiempo de inactividad entre lotes es
20 h. Si se opera de forma continua, se espera un
tiempo de inactividad de 25 días por año.
Prescindiendo de los requisitos de mantenimiento,
comparar la producción de biomasa al anual- de los
reactores continuos y discontinuos.

13.8 diseño del reactor de enzimas

inmovilizadas
6-Aminopenici1lanic ácido utilizado para producir Lins
penicil- semi-sintéticos se prepara mediante hidrólisis
enzimática de la penicilina fermentación derivado de G.
La penicilina acilasa inmovilizada en alginato está siendo
considerado para el proceso; las partículas de enzima
inmovilizada son lo suficientemente pequeños que los
efectos de transferencia de masa pueden ser ignorados.
La concentración ing arranque de la penicilina G es 10%
(w / v); debido al alto costo del sustrato, se requiere 99%
de conversión. En estas condiciones, la conversión
enzimática de penicifiin G se puede considerar una
reacción de primer orden. No se ha decidido si un lote,
CSTR o reactor de flujo de pistón sería el más adecuado.
Se espera que el tiempo de inactividad entre las
reacciones por lotes para ser 20 h. Para los reactores
discontinuos y CSTR, la constante de velocidad de
reacción es 0,8 X
10 4 s ° '; en el PFTR, la densidad de empaquetamiento de perlas
de enzima puede
ser hasta cuatro veces mayor que en los otros reactores.
Determinar el reactor más pequeño requerido para tratar
400 toneladas de penicilina G por año.

13.9 quimiostato de dos etapas para secundario

la producción de metabolitos
Un sistema de quimiostato RWO-etapa se utiliza para la
producción de metabolito secun- dario. El volumen de
cada reactor es de 0,5 m3; el caudal de alimentación es
de 50 1 h'. El crecimiento micelial se produce en el
primer reactor; el segundo reactor se utiliza para la
síntesis de producto. La concentración de sustrato en la
alimentación es de 10 g de 1 °. Los parámetros cinéticos
y de rendimiento para el organismo son:

N = 1,0 kg metro*
ypp = 0.12 h ° '
md = 0,025 kg kg ° h °'
Ingeniería del Reactor J8
i3 P

(b) Fatis el sustrato general ¿conversión? Determinar la tasa máxima de crecimiento específico, la
(c) ¿Cuál es la concentración final del producto? constante de sustrato Kg, el coeficiente de mantenimiento, y el
verdadero rendimiento másico bio- para este cultivo.

13.10 El análisis cinético de las

bacterias bioremediating usando un 13,12 esterilización continua
quimiostato
A 15-m 'quimiostato se hace funcionar con una tasa de
Una cepa de bacterias Ancylobacter capaces de crecer en dilución de 0,1 h °'. Un esterilizador continuo con inyección de
1,2-dicloroetano se aísla a partir de sedimentos en el río vapor y enfriamiento flash suministra esterilizado medio para
Rin. Las bacterias se van a utilizar para la biorremediación el fermentador. Medium en la sección de retención del
in situ de tierra contaminada con halógenos clorados. Los esterilizador se mantiene a 130 ° C. La concentración de
parámetros cinéticos para el organismo se determinan contaminantes en el medio prima es 10 * ° ml '; un riesgo de
utilizando la cultura quimiostato. Un fermentador de 1 litro contaminación aceptable es un organismo cada 3 meses. La
se utiliza con una alimentación de 1,2-dicloroetano a una
energía constante y la activación de Arrhenius
concentración de 100 pM. las concentraciones de sustrato
para la muerte térmica se estiman en 7,5 X 103 * h 'y
en estado estacionario se miden como una función de la
velocidad de flujo.
288,5 kJ gmol °', respectivamente. El diam- interior del tubo esterilizador
Tasa de La concentración de eter es de 12 cm. En l30 ° C la densidad del líquido es 1000 kg m 3 y
flujo sustrato la viscosidad es de 4 kg m ° 'h °'.
(Ml h °) (pm)
(a) Suponiendo flujo de pistón perfecto, determinar la
10 longitud de la sección de retención.
15 25.1 (b) Qué longitud se requiere si se toman los efectos de
20 39,8 dispersión axial en cuenta?
25 46,8 (c) Si el esterilizador se construye con una longitud como se
30 determina en
80.1 (a) y funcionar a 130 ° C según lo previsto, lo que será
50 100 la tasa de contaminación fermentador?

(a) Determinar y “, P y K $ para este organismo. referencias

(b) Determinar la velocidad de flujo máxima de
funcionamiento del tor reac-. 1. Royce, PN (1993) Una discusión de los acontecimientos
recientes en la supervisión y control de la fermentación
desde una perspectiva práctica. Crit. Rev. Biotechnol.
13.11 Cinético y los parámetros de rendimiento 13,) 17-149.
de una 2. Curran, JS, J. Smith y W. Holms (1989) de potencia
mutante auxotrófico Heat-y- en procesos de fermentación industriales. Appl.
Un Enterobacter aerogenes auxótrofo capaces de Energía34, 9-20.
sobreproducción de treonina se ha aislado. Los parámetros 3. Maiorella, BL, HW Blanch y CR Wilke (1984)
cinéticos y de rendimiento para este organismo se investigan La evaluación económica de los procesos de fermentación de
utilizando un quimiostato 2 litros con 10 g 1 ° glucosa 'en la etanol alternativos. Biotechnol. Bioeng. 26, 1003-1025.
alimentación. de células en estado estacionario y las 4. Heijnen, JJ y K. van't Riet (1984) transferencia de
concentraciones Strate sub se miden como una función de la masa, ING y de transferencia de calor clas fenómenos
velocidad de flujo. en reactores de columna de burbujas de baja
viscosidad. Chem. Eng.J. 28, B21-B42.
Nate flujo La concentración La concentración de 5. van't Riet, K. y J. Tramper (1991) Bioreactor básica
celular sustrato Diseño, Marcel Dekker, Nueva York.
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