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1. OBJETIVOS.

 Conocer los cuadrantes de la Cámara de Neubauer para el recuento de leucocitos.


 Explicar las Morfología y funciones de cada uno de los Leucocitos.
 Conocer el Mecanismo de Acción de la solución de Turck.
 Conocer el mecanismo de acción de las Tinciones para Leucocitos.
 Dominio de los valores de referencia.
2. CONCLUSIONES.
Se concluye que para el recuento de leucocitos solo se pueden observar en los cuadrantes superior izquierda y derecha y
inferior izquierda y derecha (1,2,3,4) con gran cantidad de luz adecuada y un objetivo de 10x.
Neutrofilos. De 3-5 lobulaciones, su vida es de 4-8 horas y su núcleo es fragmentado. su citoplasma rosado claro, a veces
vacuolado o con pequeños gránulos rosáceos y su función principal es fagocitar ya que son de segunda línea.
Eosinofilos. Presenta de 2-3 lobulaciones cromatina poco compacta en el citoplasma granulos muy acidofilos y a veces se
produce desgranulacion, su tamaño es aproximado de 15 micro metros y su función principal es antiparasitarios.
Basofilos. presenta gránulos con núcleo mas grueso (cubre todo el núcleo) sus gránulos son ácidos su tamaño
aproximado 15-18 micro metros su cromatina es poco compacta en el citoplasma sus gránulos son muy basofilos de color
azul violeta intenso su función es antialérgicos.
Linfocitos. Existe de tres tamaños (pequeño mediano y grande), no presenta granulaciones, células con cromatina
contiene condensadas, su tamaño aproximado es de 7-8 micro metros, puede tener granulaciones escasas, núcleo
redondo oval o ligeramente escotado, se tiñe de color violeta, su estructura compacta y su función principal es de
respuestas especificas.
Monocitos. Son células grandes mono nuclear en forma de (riñón o herradura), presenta vacuolas, su citoplasma basofilo,
tiene numerosas granulaciones pequeñas y distribuidas regularmente (no se ven con aumentos bajos), color violeta claro
no compacto, mide aproximadamente entre 15-20 micro metros y su función principal es fagocitar ya que son de primera
línea de defensa.
Es una solución acuosa de Ácido Acético AL 3%, con una cantidad de Azul de Metileno suficiente para dar un color Azul
pálido. La solución hipotónica de Ácido Acético destruye los eritrocitos. El colorante Azul de Metileno permite observar
mejor los glóbulos a los que tiñe ligeramente.
Esta solución tiene por objeto eliminar los hematíes por hemólisis y resaltar ligeramente el núcleo de los leucocitos. La
dilución de que habitualmente se realiza es de 1/20, empleándose normalmente 20 μL de sangre en 0,38 mL de líquido de
Turck.
La tinción de panóptico rápido es un método de tinción diferencial que permite la observación de las células
sanguíneas.
Debido a la interacción entre los colorantes se pueden diferenciar los núcleos y los gránulos de color violeta. Se trata
de una modificación de la tinción de Romanowsky, dando un procedimiento basado en inmersiones mucho más
rápido.
para su mecanismo de acción se debe seguir los siguientes pasos como alcohol por 2 minutos, eosina por 30
segundos, azul de metileno 20 segundos todo estos pasos se debe escurrir con papel toalla o papel filtrante y
posteriormente lavar con agua y dejar secar.
se pudo comprender que los dominios de valores de referencia son aproximados, ya que depende mucho de la altura en
la que la persona vive a nivel de La Paz los valores son diferentes a una persona que vive a nivel del Mar (a mayor altura
menor presión y a menor altura mayor presión)
3. PROCEDIMIENTO (FLUJOGRAMA)

A este adicionar 28 uL de muestra de Con ayuda de la micropipeta cargamos a la


RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS camara de neubauer en ambos reticulos
sangre anticoagulada

Llevamos este tubo al bortex durante


Extraer 2 ml de sangre y mezclar por llevamos la camara al microscopio y
aproximadamente 20 min. (o mas) a
inmercion fuertemente enfocamos
velocidad fuerte

Pipetear 2ml de solucion de TURCK e Sacamos del bortex y verificamos que la realizamos el recuento con el objetivo de 10X en
introducir a un tubo de hemolisis muestra se haya homogeneizado los cuatro cuadrantes correspondientes
el aceite tiene
TINCION antes de ver la placa le que estar entre
una vez ya seca la PANOPTICO añadimos una gota de
RECUENTO DIFERENCIAL la cola y el
muetra procedemos a RAPIDO aceite de inmercion cuerpo del
la tincion
extendido

con la misma muestra de Colocamos la muestra en una vez ya seca la enfocamos con
sangre con anticoagulante Dejamos secar el frotis alcohol por 1 min. y muestra llevamos el objetivo de
dejamos escurrir al microscopio inmercion

Con la ayuda de un capilar cuidando que se puedan Realizamos la


tomamos una gota de colocamos en eosina por dejamos secar en
diferenciar la cabeza, el identificacion y el
sangre 40 seg y dejamos escurrir forma vertical
cuerpo y la cola recuento de leuccitos

seguidamente
Depositamos una gota de con la ayuda de otro colocamos en azul y labamos en anotamos los
sangre a un porta objetos portaobjetos (nuevo) de metileno por 30 agua corriente resultados de las
hacemos el extendido seg. dos practicas
4. CALCULOS Y RESULTADOS.
(PACIENTE HOMBRE EDAD 26 AÑOS)
800 𝑢𝐿 + 28 𝑢𝐿 828 𝑢𝐿
𝐷𝐼𝐿𝑈𝐶𝐼𝑂𝑁 = = = 29.57 = 30
28 uL 28 𝑢𝐿
Una dilucion en 1/30
Volumen =0.1mm3
Como es 4 cuadrantes volumen =0.4mm3  Reticulo 1 se conto 54%
FACTOR DE DILUCION = Vol X DILUCION  Reticulo 2 se conto 58%
3
FD = 0,4mm X 30 Promedio es 56%
FD = 75
#CEL. =Fd*TOTAL GB
#Celulas GB =75*56
#celulas GB = 4200 celulas /mm3
4200celulas 1mm3 1m3 celulas
#celulas GB = ∗ −9 3 ∗ = 4200000000
mm3 10 m 1000 L L

𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
#𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝐺𝐵 = 4.2 ∗ 109
𝐿
Neutrofilos
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
4200 − − − − − −> 100 %
𝑚𝑚3
𝑥 − − − − − −> 63%
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑥 = 2646
𝑚𝑚3
Linfocitos
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
4200 − − − − − −> 100 %
𝑚𝑚3
𝑥 − − − − − −> 27%
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑥 = 1134
𝑚𝑚3
Monocitos
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
4200 − − − − − −> 100 %
𝑚𝑚3
𝑥 − − − − − −> 7%
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑥 = 294
𝑚𝑚3
Cayados
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
4200 − − − − − −> 100 %
𝑚𝑚3
𝑥 − − − − − −> 3%
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑥 = 126
𝑚𝑚3
𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
 La sumatoria de los valores ABSOLUTOS =2646+1134+294+126= #𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝐺𝐵 = 4200 3 𝑚𝑚

𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
#𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝐺𝐵 = 4.2 ∗ 109
𝐿
5. CUESTIONARIO.
5.1. Esquematice las etapas de maduración del neutrofilo, a partir de la Célula Madre Pluripotencial.

5.2. Explique el mecanismo de acción de la solución de TURCK


Esta solución tiene por objeto eliminar los hematíes por hemólisis y resaltar ligeramente el núcleo de los leucocitos. La dilución de
que habitualmente se realiza es de 1/20, empleándose normalmente 20 μL de sangre en 0,38 mL de líquido de Turck.
Es una solución acuosa de Ácido Acético AL 3%, con una cantidad de Azul de Metileno suficiente para dar un color Azul pálido. La
solución hipotónica de Ácido Acético destruye los eritrocitos. El colorante Azul de Metileno permite observar mejor los glóbulos a los
que tiñe ligeramente.
5.3. Describa la morfología de los leucocitos maduros. (N,E,B,L y M)
Neutrófilos.- Los neutrófilos defienden al organismo contra infecciones bacterianas o por hongos. Usualmente son los primeros en
responder a una infección microbiana; su actividad y muerte en gran número forman el pus. Tienen un núcleo multilobulado que
puede asemejar múltiples núcleos, de ahí se deriva el nombre leucocito polimorfonuclear. El citoplasma puede parecer transparente
debido a los gránulos que se tiñen color lila pálido. Los neutrófilos se encargan de fagocitar bacterias y están presentes en grandes
cantidades en el pus. Los neutrófilos son el tipo celular más encontrado en las fases tempranas de la inflamación aguda. Conforman
del 60 al 70% de los leucocitos totales en la sangre del ser humano. La vida media de un neutrófilo circulante es de aproximadamente
5.4 día.
Eosinófilos.- Los eosinófilos ante todo lidian con las infecciones parasitarias. También son las células inflamatorias predominantes
durante una reacción alérgica. Las causas más importantes de eosinofilia incluyen alergias como: asma, rinitis alérgica y urticaria; así
como infecciones parasitarias. En general, su núcleo es bi-lobulado. El citoplasma está lleno de gránulos que con tinción de eosina
asumen un color rosáceo-anaranjado característico.
Basófilos.- Los Basófilos son principalmente responsables de las respuestas alérgicas ya que liberan histamina
provocando vasodilatación. Su núcleo es bi- o tri-lobulado, pero es difícil de detectar ya que se oculta por el gran número de gránulos
gruesos estos gránulos son característicamente azules bajo la tinción.
Linfocitos.- Los linfocitos son más comunes en el sistema linfático que en el torrente sanguíneo. Se distinguen por un núcleo que se
tiñe fuertemente y cuya locación puede o no ser excéntrica y por tener poco citoplasma. Los linfocitos incluyen:
Células B que producen anticuerpos capaces de unir, bloquear y promover la destrucción de patógenos así como de activar
complemento.
Células T: poseen un receptor de células T alternativo. Se encuentran más comúnmente en tejidos que en sangre.
Célula Natural Killer: célula capaz de matar células del organismo, se puede llevar a cabo cuando células del organismo están
infectadas por un virus o son cancerosas.
Monocitos.- Los monocitos comparten la función de fagocitosis con los neutrófilos son más longevos y además, una función extra:
presentar partes de patógenos a linfocitos T para que éstos puedan ser reconocidos de nuevo y ser eliminados. Los monocitos
abandonan el torrente sanguíneo para convertirse en macrófagos de tejido, que se encargan de remover restos de células muertas y
de atacar microorganismos. A diferencia de los neutrófilos, los monocitos son capaces de reemplazar su contenido lisosomal y se cree
que su vida activa es mucho más larga. Su núcleo tiene forma de riñón y no tienen gránulos y contienen abundante citoplasma.
Leucocitos fijos
Algunos leucocitos migran a los tejidos del organismo para residir ahí permanentemente y no en la circulación sanguínea. A menudo,
estas células tienen nombres específicos dependiendo de en qué tejido se instalen; un ejemplo son los macrófagos fijos de hígado,
conocidos como células de Kupffer. Estas células siguen jugando un papel importante en el sistema inmune.
Cayado.- Es el granulocito en banda. Mide de 10m a 14m, núcleo condensado que puede presentar una ó dos constricciones, pero no
tiene puente de cromatina. El citoplasma presenta gránulos específicos e inespecíficos, membrana celular lisa, citoplasma de color
ligeramente rosado dependiendo de la coloración.
5.4. Explique el mecanismo de acción de 3 factores estimulantes, del proceso de la Leucopoyesis.
GM-CSF.- El factor estimulante de colonias de granulocitos y monocitos es la principal citoquina que regula la granulopoyesis, proceso
que permite la generación de neutrófilos por la presencia de gránulos con tinción característica con colorantes. Dentro de los
granulocitos la población mayoritaria son los neutrófilos, linaje celular esencial para el sistema inmune innato, cuya principal función
es el despliegue de una defensa multifacética para combatir los microbios a través de la liberación de proteasas y especies reactivas
del oxígeno
IL-1.- La interleuquina 1 es una citoquina inflamatoria clave, dado que ejerce importantes acciones en casi todos los órganos.
Además, activa rápidamente los mecanismos de inmunidad innata y es un estimulante potente de la hematopoyesis y del sistema
inmune adaptativo. También tiene una función muy amplia aunque algo más limitada.
Se trata de un potente inductor de la síntesis de interferón gamma que a la vez aumenta la actividad citolítica de los linfocitos
citotóxicos y de las células naturalmente asesinas. Además, regula el desarrollo y diferenciación de linfocitos T, habitualmente a un
patrón colaborador tipo 1. Probablemente participe en la fisiopatología de las enfermedades inflamatorias crónicas.
IL-6.- La interleuquina 6 es producida por diversos tipos celulares: monocitos, macrófagos, linfocitos T y B, etc. Los principales
estímulos para su síntesis y liberación son las infecciones por ciertos microorganismos, particularmente virus, bacterias, la acción de
otras citocinas, y el factor de crecimiento derivado de las plaquetas. La IL-6 y el TNF-α actúan sobre cascadas inflamatorias y sobre la
inmunidad innata. Su bloqueo inhibe cascadas inflamatorias y mecanismos de respuesta innata inespecíficos.
La IL-6 también actúa sobre la inmunidad adaptativa, donde resulta esencial para la diferenciación de los linfocitos Th17. Su bloqueo
inhibe la diferenciación celular Th17, células clave en la patología de la AR.
5.5. Hallar los valores absolutos del recuento diferencial que realizo en la practica.
VALOR ABSOLUTO
CAYADO 3
SEGMENTADOS 63
EOSINOFILOS 0
BASOFILOS 0
LINFOCITO 27
MONOCITO 7

6. BIBLIOGRAFIA.

fundamento de serie blanca. (internet).2014 (citado el 08/05/2018). Recuperado a partir de:


http://deliamm96cuadernopracticashema14.blogspot.com/2015/02/practica-calculo-de-los-indices.html
determinación de los valores de la serie leucocitos (globulos blancos). (internet).2016 (citado el 08/05/2018). Recuperado a
partir de: http://repositorio.umsa.bo/bitstream/handle/123456789/558/TN993.pdf?sequence=1&isAllowed=y
recuento de leucocitos. 2015 (citado el 08/05/2018). Recuperado a partir de: https://encolombia.com/medicina/revistas-
medicas/enfermeria/ve-101/enfermeria_admon_temas_libres1
manual de biometria hematica. Mexico 2017b (citado el 08/05/2018). Recuperado a partir de:
https://microinmuno.files.wordpress.com/2011/07/3-cc3a9lulas-sanguc3adneas.pdf
fundamento de la serie leucocitaria. (internet).2016. (citado el 08/05/2018). Recuperado a partir de:
https://encolombia.com/medicina/revistas-medicas/enfermeria/ve-101/enfermeria_admon_temas_libres1/

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