UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA

MINISTERIO DE EDUCACIÓN NACIONAL

NIT:891.190.346-1

BIOLOGÍA GENERAL
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PRACTICAS DE LABORATORIO: INTERCAMBIO DE MATERIA ENTRE LA
CÉLULA Y EL MEDIO: ÓSMOSIS Y DIÁLISIS

1. INTRODUCCIÓN

2. OBJETIVOS
- Discutir cómo la pared celular afecta el comportamiento osmótico de la célula.
- Determinar el efecto de los factores ambientales sobre la permeabilidad
celular.
- Comprobar los fenómenos de diálisis en una membrana animal.

3. MATERIALES
- Biólogicos: Elodea sp, remolacha congelada y remolacha al medio ambiente
(Beta vulgaris), vejiga de cerdo, res, o membrana de hígado, cebolla de bulbo
(Allium cepa sp).
- Reactivos: Solución salina y de sacarosa 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 y 0.5M., AgNO 3
0.2M, lugol, Mezcla de solución de almidón y de sal al 10%, HNO3 6M., agua
destilada.
- Equipos: microscopio, nevera, plancha de calentamiento o baño serológico.
- Otros: soporte universal, llave para embudo, beaker de 250ml, embudo, pipeta,
portaobjetos, laminillas, 5 tubos de ensayo, gradilla, pinzas para tubo de
ensayo, mechero, gotero, termómetro, bisturí o cuchillas de afeitar, bandas de
caucho, papel celofán (medio pliego).

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4. METODOLOGÍA

4.1 MONTAJE PARA DIÁLISIS (VER FIG. 1)

En el interior de un embudo de vidrio, asegure la vejiga, según sea el caso con las
bandas de caucho, vierta una mezcla de solución de almidón y sal al 10%. Evite
los escapes de la solución a través de la membrana. Luego introduzca el embudo
en un vaso de precipitado con agua destilada y asegure el tubo del embudo al
soporte universal con la llave. A la media hora tome dos muestras de 2 ml. del
líquido externo a la membrana y páselos a dos tubos de ensayo para detectar la
presencia de almidón y sal. Para la detección de la sal agregue 1ml de HNO3 a
uno de los tubos de ensayo y se hierve el contenido por 2 min. Y una vez frío se
agregan 3 ó 4 gotas de AgNO3 0.2M. Un precipitado blanco es prueba positiva de
la presencia de iones cloruro. Para la detección del almidón, agregue unas gotas
de lugol en el segundo tubo. La presencia de una coloración azul-violeta es prueba
positiva para almidones.

Membrana

Sln. almidón y NaCl

Agua destilada

Fig. 1. Montaje para diálisis

- Efecto de los factores ambientales sobre la permeabilidad celular

Corte varios trozos de remolacha de aproximadamente 1 cm 3, lávelos en un vaso

con agua para remover el pigmento hasta que deje de salir pigmento y proceda de
la siguiente manera:

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 Tubo #1: coloque 3 o 4 bloques de remolacha, adicione 2 ml. De agua

destilada hasta cubrirlos por completo y caliéntelo controlando la temperatura
con un termómetro hasta el momento hasta que comience a salir pigmento
 Tubo #2: coloque igual cantidad de remolacha pero congelada y cúbralo con
agua destilada.
 Tubo #3: deje los bloques de remolacha en 2 ml de agua destilada al medio
ambiente.

Después de 10 min. Registre los cambios producidos en cada tubo y analice que
efecto produce el calentamiento y la congelación sobre la membrana de la
remolacha.

- Comportamiento de la célula a diferentes concentraciones de soluto

Sobre la lámina portaobjetos, en el lado izquierdo, coloque una gota de solución

de sacarosa al 0.1M y sobre ésta una hoja de elodea o cebolla. Luego cubra el
montaje con una laminilla. Al lado derecho de la misma lámina coloque una gota
de agua de la llave y otra hoja de elodea de tamaño semejante a la utilizada en el
tratamiento anterior (control). No permita que se sequen los montajes. Observe al
microscopio 20 células preferiblemente las ubicadas en el ápice de la hoja,
determine si se presenta plasmolisis, registre los cambios y anote el tiempo
transcurrido entre el montaje de la preparación y la iniciación de la plasmolisis.
Recuerde que se considera que una solución determinada concentración produce
plasmólisis cuando el 50% de las células están plasmolizadas. Compare con el
montaje control. Repita el procedimiento con las soluciones restantes de sacarosa.
De igual manera repita el procedimiento anterior con solución de NaCl (sal).
Intercambie los datos obtenidos con los de sus compañeros. Tabule la información
obtenida e indique las concentraciones hiposmótica, hiperosmótica e isosmótica.
Determine finalmente la concentración osmótica donde el 50% de las células están
plasmolizadas y calcule la presión osmótica.

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Indique con una flecha la dirección del movimiento del agua entre una solución
hipotónica e hipertónica separadas por una membrana como la de la elodea o la
cebolla

Sln. hipotónica Sln. hipertónica

5. CUESTIONARIO
- Entre la pared y la membrana de una célula plasmolizada que sustancia
observa?
- Indique algunos procesos biológicos en plantas y animales relacionados con el
fenómeno de ósmosis.
- Explique por qué las heladas afectan los cultivos y con cual proceso de los
vistos en la práctica está relacionado?
- A que se refiere el término presión de turgencia y que función desempeña las
vacuolas centrales en dicho proceso?
- Compare el proceso de difusión simple con el de transporte activo.
- Explique las bases para la preservación de los alimentos con sal o azúcar.

6. BIBLIOGRAFÍA
- BARROW, G. 1970. Química Física para las ciencias de la vida. Editorial
Reverté. Bogotá. D.C.
- BERNSTEIN, R. & BERNSTEIN, S. 1998. Biología. McGraw Hill. 10ª. Edición.
- CURTIS, H. 1992. Biología. Ed. Médica panamericana S.A. México, 1256 pp
- MANUAL DE LABORATORIO. Curso “Biología Celular”. Universidad Nacional
de Colombia. Sede Bogotá. 2001.

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