Professional Documents
Culture Documents
ESCUELA PROFESIONAL DE
INGIENERIA AGRÓNOMA
BARRANCA – PERÚ
2017
EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL A PARTIR DE DIVERSAS PLANTAS
I. OBJETIVO
Su extracción se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las
cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula.
Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su
contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. Las
proteínas asociadas al ADN, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y
separadas de él por acción del detergente. Sólo queda extraer el ADN de esa mezcla con
alcohol isoamílico.
IV. PROCEDIMIENTO
Colocamos los siguientes ingredientes en una licuadora: 250 ml de agua destilada fría,
¾ de cucharita de sal de mesa, preferiblemente pura, 1 cucharadita de bicarbonato
sódico.
Luego cortamos en cuadritos la cebolla. Y colocamos en la licuadora para licuar junto a
los primeros ingredientes durante 30 s.
Luego procedimos a separar las partes más gruesas de las pequeñas con la gasa estéril,
colocándolo alrededor del embudo haciendo la función de ‘colador’.
Agregamos de 5 a 10 ml de ayudin líquido a la mezcla y revolver suavemente. Dejar
reposar 10min. Luego pasamos la mezcla al tubo de ensayo y llenar 1/3 del tubo.
Al cabo de unos minutos adicionamos una pizca del ablandador de carne y agitamos
suavemente para no romper el ADN
Añadimos con pipeta 10 ml de alcohol etílico 96% frío 0ºC. Lo escurrimos lentamente
el alcohol por la cara interna del tubo con cuidando de mantener el tubo inclinado
durante la adición del alcohol. Se formaran 3 fases: el alcohol quedará en la parte
superior, en la intermedia el ADN precipitado y en la inferior los restos de la solución.
V. RESULTADOS
VI. OBSERVACIONES
VII. DISCUSIÓN
VIII. CONCLUSIONES
IX. BIBLIOGRAFÍA
Lodish, H., Berk, A., Matsudaira, P., Kaiser, C. A., Krieger, M., Scott, M. P.,
Zipkursky, S. L. and Darnell, J. (2005). Biología celular y molecular. 5 Ed. Médica
Panamericana.
Mathews, C. K., van Holde, K. E. and Ahern, K. G. (2002). Bioquímica. 3 Ed.
Pearson Addison Wesley.