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UNIVERSIDAD DE CARABOBO

FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
TRABAJO ESPECIAL DE GRADO

PROPUESTA PARA EL APROVECHAMIENTO DEL MANGO


(Mangifera indica L.) COMO FUENTE PARA PRODUCIR
ÁCIDO POLILÁCTICO (PLA)

Tutor académico: Autores:


Prof. Ms. Jhonny Medina SÁNCHEZ, Dayeris
SANDOVAL, Oriana

Naguanagua, Junio del 2017


UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
TRABAJO ESPECIAL DE GRADO

PROPUESTA PARA EL APROVECHAMIENTO DEL MANGO


(Mangifera indica L.) COMO FUENTE PARA PRODUCIR
ÁCIDO POLILÁCTICO (PLA)

Trabajo Especial de Grado presentado ante la ilustre Universidad de Carabobo para optar al
título de Ingeniero Químico

Tutor académico: Autores:


Prof. Ms. C. Jhonny Medina Sánchez, Dayeris C.I. Nº. 17.892.048
Sandoval, Oriana C.I. Nº. 18.362.588

Naguanagua, Junio del 2017


UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
TRABAJO ESPECIAL DE GRADO

CONSTANCIA DE APROBACIÓN

Los abajo firmante miembros del jurado designado para estudiar el Trabajo Especial de Grado titulado

“EVALUACIÓN DEL COMPORTAMIENTO MECÁNICO Y TÉRMICO DE MEZCLAS DE

ÁCIDO POLILÁCTICO (PLA) Y POLIESTIRENO (PS).” realizado por los bachilleres: Dayeris

Karitza Sánchez Bandez, titular de la cedula de identidad número 17.892.048 y Oriana Josefina

Sandoval Cardenas, titular de la cedula de identidad número 18.362.588, hacemos constar que hemos

revisado y aprobado dicho trabajo y que no nos hacemos responsable de su contenido, pero lo

encontramos correcto en su forma y presentación.

_________________________
Prof. Jhonny Medina
Tutor/ Presidente

_________________________ _________________________
Prof. XXXXXXXX Prof. XXXXXXXX
Jurado Jurado

Valencia, XX de junio de 2017.

vi
AGRADECIMIENTOS

A Dios y a la Virgen, por darnos fuerzas para superar obstáculos y dificultades a lo largo de la carrera y
así lograr alcanzar nuestra meta soñada.

A nuestros Padres por todo el amor, la confianza y el apoyo que me han brindado, mostrándome el camino
correcto y acompañándome en cada etapa de mi vida.

A Lic. Vincenzo Storaci y a todos aquellos que hicieron posible el proceso de fermentación y estudio de
los microorganismos, a nuestro tutor, Lic. Jhonny Medina y colaboradora Lic. Belén Pariaguán, quien con
su apoyo constante, preocupación y conocimientos facilitados, pudimos desarrollar este proyecto, como
también a las personas que integran el grato ambiente del Laboratorio de Docencia IV (biotecnología)en la
facultad de Facyty al Centro de Investigación Química (CIQ) en la facultad de Ingeniería en donde nos
brindaron todo el apoyo posible

A nuestros Novios, por el apoyo de haber sido nuestros compañeros en gran parte de este camino, gracias
por estar siempre con nosotras.

También deseamos brindar un agradecimiento a aquellas personas que han estado a nuestro lado
apoyándonos incondicionalmente durante todas nuestras vidas.

A la Universidad de Carabobo y Facultad de Ingeniería, por instruirnos y ser nuestro centro de formación
académica.

No podemos dejar de mencionar y agradecer a quienes hemos ido encontrando en este largo camino,
aprendiendo de cada uno, entregando la mejor de sus voluntades para el logro de nuestros propósitos y
permitir que seamos una mejor persona, nuestros amigos.

Y a quien me ha dado la confianza de creer que todo es posible si se desea intensamente.

SANCHEZ, Dayeris y SANDOVAL, Oriana

vii
DEDICATORIA

Primeramente a Dios, Jesús de Nazareno y la Virgen del Socorro por darme salud, sabiduría,
paciencia y la fuerza necesaria para seguir adelante frente a las adversidades.
Dedico buena parte de esta tesis a esas personas especiales y muy cercanas a mí, que si no
“hubieran estado en corazón y alma”, venciendo la barrera de la distancia, no me hubiera sido posible
llegar a superar muchos de los obstáculos encontrados, más allá del plano profesional y académico, para
llevar a feliz término esta etapa.
A ti Mamá que siempre has estado conmigo, acompañándome y guiándome como sólo una madre
sabe hacerlo, por tus constantes enseñanzas y apoyo y comprensión, porque gracias a tu ejemplo avanzo
cada día. Muchas gracias por que durante todo ese tiempo sé que siempre estuviste ahí cada mañana cada
noche esperando saber de mí, por darme aliento y esperezas de que si se podía. Te amo por ser el pilar de
la familia que somos….
A ti papá gracias porque siempre me apoyas, me aconsejas, me comprendes, me estimulas, y
porque al igual que mi mamá estuviste día con día aguardando para saber de mí en cualquiera que fuera el
momento del día, porque me has enseñado que la fuerza no viene de la capacidad corporal, sino de una
férrea voluntad. Y, por todo loque nos brindas con todo tu amor a la familia para nuestra tranquilidad y
bienestar. Mil gracias por fortalecernos como familia…
A mi novio, por apoyarme tanto e impulsarme constantemente, aún sabiendo que para ello
tendríamos que poner distancias mientras esto duraba.
A cada uno de mis hermanos, por acompañarme a la distancia y por escucharme siempre, llenos
de sentimientos y respeto, porque al igual que ustedes siempre los llevo en el pensamiento constante,
porque en esta nueva etapa nos seguimos fortaleciendo sin saberlo las razones por la que cada uno sigue
siendo parte de “mi razón de ser”…
A mis amados sobrinos, por alegrarme los días cuando estaba presionada en la carrera, porque
además ustedes pequeñitos son lo más sagrado que tengo en mi vida.
A ese ser especial que aunque ya no están conmigo lo llevare siempre en mi corazón ya que fue mi
compañero de apoyo, crecimiento y aventuras durante muchos años de mi vida.
A mi familia Sánchez y Bandez porque han seguido mis logros.
“En definitiva “A MI PEQUEÑA GRAN FAMILIA”, creciendo y creciendo…
… a la cual amo y respeto en estos momentos con unos sentimientos nunca vividos, me sigue permitiendo
darme cuenta aún más queTODOS USTEDES, son factores importantes esenciales, por ende, de lo que
he”SIDO, SOY y SERÉ”
Siempre estaré ahí para todos ustedes,
SANCHEZ, Dayeris

viii
DEDICATORIA

Primeramente a Dios por darme salud, sabiduría, mucha paciencia y la fuerza necesaria para
seguir adelante frente a las adversidades.
A mi mama, porque sin sus palabras de apoyo, el cariño, amor y paciencia en todo momento
jamás habría llegado a finalizar lo que un día fue tan inalcanzable para mí, si ella no hubiese estado a mi
lado diciéndome que siguiera siempre adelante a pesar de todo.
A mis hermanas a las que siempre estuvieron confiando en lo que yo hacía, y dándome un infinito
apoyo moral en los momentos más difíciles de toda mi carrera.
. A mi novio, que ha estado a mi lado durante toda mi carrera, brindándome ese apoyo
incondicional haciéndome crecer día tras día y ayudándome a solventar los obstáculos que se presentaban
gracias por aguantar mis cambios repentinos de humor y creer en mi incluso cuando yo no lo hacía.
A mis amigas y amigos, por compartir su amistad, por la innumerable cantidad de buenos
momentos que compartimos a lo largo de nuestra vida universitaria y apoyarme en todo momento donde
siempre estuvieron allí para decirme que si se podía.
A toda mi familia tanto la materna como la paterna que han de alguna manera u otra se
encargaron de preocuparse en seguir mis logros y demostrarme su orgullo hacia mí en todo momento.
A Lupita que aunque ya no está presente en mi vida me acompaño en todas las noches de desvelo
interminables siendo más fiel cada día.
Y de manera general a todas esas personas que se cruzaron a lo largo de mi camino en los últimos
años y que de manera independiente aportaron algo positivo en mi vida dándome el valor necesario para
terminar siendo la persona que soy hoy en día.

SANDOVAL, Oriana

ix
UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
TRABAJO ESPECIAL DE GRADO

PROPUESTA PARA EL APROVECHAMIENTO DEL MANGO


(Mangifera indica L.) COMO FUENTE PARA PRODUCIR
ÁCIDO POLILÁCTICO (PLA)
Autores: Sánchez Dayeris y Sandoval Oriana
Tutor: Jhonny Medina
Junio 2017

RESUMEN
Muchas de las especies de mangos cultivadas en Venezuela poseen dificultad para ser comercializadas en
el mercado internacional, debido a que sus características organolépticas no satisfacen las normas de
calidad establecidas en el exterior. Por lo que, en temporadas de cosecha se evidencia una sobre
producción, que en ocasiones representa un problema que puede generar un impacto negativo en el
ambiente. Es por esto, que se planteó como objetivo de este trabajo especial de grado realizar una
propuesta para el aprovechamiento del mango como fuente para producir ácido poliláctico (PLA). Para
esto, se seleccionó la especie de mango y el microorganismo para llevar a cabo la fermentación y obtener
ácido láctico (AL). Luego se caracterizó el AL obtenido y se polimerizó hasta PLA. Posteriormente, se
verificó la biodegradabilidad del PLA, y se realizó un análisis costo-beneficio de la propuesta planteada.
Los resultados obtenidos permitieron señalar que el mango bocado es el más adecuado para someterlo a la
fermentación, ya que presentó un pH de 5,53, una humedad de 80,95%, 15,06 °Brix y contenido de ceniza
de 0,35 %. Por su parte, se escogió una mezcla de Lactobacillus Bulgaricus y el Streptococcus
Thermophilus, para llevar a cabo la fermentación. Del proceso fermentativo se obtuvo AL con una
concentración de 61,25g/L y un rendimiento de 65,97%. Con un índice de refracción de 1,419; una
densidad de 1099,33 Kg/m3; y una viscosidad de 1,868x10-4 Kg/m.s. El producto obtenido de la
polimerización fue caracterizado por espectroscopia infrarroja y se observaron las bandas características
del PLA. Se obtuvo variaciones apreciables del pH en los medios hidrolíticos utilizados en la
degradabilidad del PLA. La relación de costo-beneficio obtenida fue de 0,57 por lo permitió indicar que
proceso propuesto es factibles en las condiciones presentadas.

Palabras clave: mango, fermentación, microorganismo, ácido láctico, polimerización y ácido poliláctico.

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UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
TRABAJO ESPECIAL DE GRADO

PROPOSAL FOR THE USE OF THE HANDLE


(Mangifera indica L.) AS A SOURCE TO PRODUCE
POLYLACTIC ACID (PLA)
Autores: Sánchez Dayeris y Sandoval Oriana
Tutor: Jhonny Medina
Junio 2017

ABSTRACT
Many of the species of mangoes grown in Venezuela have difficulties to be commercialized in the
international market, because their organoleptic characteristics do not meet the standards of quality
established abroad. Therefore, during harvest seasons an overproduction is evident, which sometimes
represents a problem that can generate a negative impact on the environment. It is for this reason that it
was proposed as an objective of this special grade work to make a proposal for the use of mango as a
source to produce polylactic acid (PLA). For this, the mango species and the microorganism were selected
to carry out the fermentation and to obtain lactic acid (LA). The obtained AL was then characterized and
polymerized to PLA. Subsequently, the biodegradability of the PLA was verified, and a cost-benefit
analysis of the proposal was carried out. The results obtained indicated that the bite handle was the most
adequate to be submitted to fermentation, since it had a pH of 5.53, humidity of 80.95%, 15.06 ° Brix and
ash content of 0.35 %. For its part, a mixture of Lactobacillus Bulgaricus and Streptococcus Thermophilus
was chosen to carry out the fermentation. From the fermentation process AL was obtained with a
concentration of 61.25 g / L and a yield of 65.97%. With a refractive index of 1.419; A density of 1099.33
kg / m 3; And a viscosity of 1.868x10-4 kg / m.s. The product obtained from the polymerization was
characterized by infrared spectroscopy and the characteristic bands of PLA were observed. Significant pH
variations were obtained in the hydrolytic media used in the degradability of PLA. The cost-benefit ratio
obtained was 0.57 so it was possible to indicate which proposed process is feasible under the presented
conditions.

Keywords: mango, fermentation, microorganism, lactic acid and polylactic acid polymerization.

xi
CONTENIDO
Pág.
ÍNDICE DE TABLAS Xi
ÍNDICE DE FIGURAS Xiii
INTRODUCCIÓN. 1
CAPÍTULO I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 2
1.1 Descripción del Problema 2
1.2 Formulación del Problema. 3
1.2.1 Situación actual. 4
1.2.2 Situación deseada. 4
1.3 Objetivos. 4
1.3.1 Objetivo General. 4
1.3.2 Objetivos específicos. 5
1.4 Justificación. 5
CAPÍTULO II. MARCO REFERENCIAL TEÓRICO. 6
2.1 ANTECEDENTES. 6
2.2 BASES TEÓRICAS. 9
2.2.1 El mango (Mangifera indica L.) 9
2.2.2 Propiedades nutricionales del mango 10
2.2.3 Producción del mango a nivel nacional 11
2.2.4 Aprovechamiento industrial del mango 13
2.2.5 Variedades del mango en Venezuela 13
2.2.6 Matriz de priorización, matriz de selección o matriz de decisión 15
2.2.7 Bacterias acidas lácticas (BAL) 16
2.2.8 Características generales 17
2.2.9 Lactobacillus 17
2.2.10 Streptococcus 18
2.2.11 Medios de Cultivos 19
2.2.12 Fermentación 20
2.2.13 Fermentación láctica 20
2.2.14 Fermentación sumergida 20
2.2.15 Ácido láctico 22
2.2.16 Propiedades del ácido láctico 22

xii
2.2.17 Producción biotecnológica de ácido láctico 23
2.2.18 Usos y especificaciones de ácido láctico 23
2.2.19 Parámetros de relevancia en la producción de ácido láctico 24
2.2.20 Técnica de polimerización del ácido láctico para obtener ácido poliláctico (PLA) 26
2.2.21 Acido Poliláctico 30
2.2.22 Propiedades del PLA 30
2.2.23 Aplicaciones del PLA 31
2.2.24 Biodegradación 31
2.2.25 Biodegradación de polímeros 31
2.2.26 Degradación enzimática 32
2.2.27 Análisis costo-beneficio 32
CAPÍTULO III. MARCO METODOLÓGICO. 34
3.1 TIPO DE ESTUDIO O INVESTIGACIÓN. 34
3.2 DESARROLLO SISTEMÁTICO DE LA INVESTIGACIÓN. 34
3.3 OPERACIONALIZACIÓN DE LOS OBJETIVOS. 35
3.3.1 Selección entre las diferentes especies de mango (Mangifera indica L.) cuál posee
mejores propiedades con la finalidad de utilizarlo como materia prima. 35
3.3.2 Selección el microorganismo que se empleará en la fermentación del mango
(Mangifera indica L.) para obtener el ácido láctico. 39
3.3.3 Caracterización físico-químicamente el ácido láctico obtenido para verificar su
rendimiento 43
3.3.4 Polimerización el ácido láctico para obtener ácido poliláctico (PLA). 45
3.3.5 Verificación de la biodegradabilidad de la mezcla en estudio. 47
3.3.6 Realizar un análisis costo-beneficio con el fin de determinar si es posible o no la
propuesta 47
CAPÍTULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 52
4.1 Seleccionar entre las diferentes especies de mango (Mangifera Indica L.) cuál posee
mejores propiedades con la finalidad de utilizarlo como materia prima. 52
4.2 Seleccionar el microorganismo que se empleará en la fermentación del mango
(Mangifera Indica L.) para obtener el ácido láctico. 55
4.3 Caracterizar físico-químicamente el ácido láctico obtenido para verificar su rendimiento. 60
4.4 Polimerización del ácido láctico para obtener ácido poliláctico (PLA). 62

xiii
4.5 Verificar la biodegradabilidad de la mezcla en estudio. 66
4.6 Análisis costo-beneficio con el fin de determinar si es posible o no la propuesta. 67
CONCLUSIONES. 70
RECOMENDACIONES. 71
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 72
APÉNDICE A. DATOS RECOLECTADOS PARA LA OBTENCIÓN DE PLA. 80
APÉNDICE B. CALCULOS TIPICOS. 88

xiv
ÍNDICE DE TABLAS

Tabla Pág.
2.1 Composición nutricional del mango (Mangifera indica L.) 11
2.2 Características más relevantes de diferentes variedades de mango 14
2.3. Propiedades fisicoquímicas del ácido láctico. 23
3.1. Medios de cultivo utilizados en microorganismos productores de ácido láctico. 40
3.2. Identificación preliminar morfológica y perfil de ocho azucares. 41
3.3. Nutriente utilizados en la preparación del medio de cultivo 42
3.4 Valoración de un mes de trabajo de un ingeniero con hasta un año de experiencia 48
3.5 Cantidad y valoración del personal para la obtención del ácido poliláctico 48
3.6 Costos de los equipos principales para la obtención del ácido poliláctico. 49
3.7 Costos de los análisis y caracterización para la obtención del ácido poliláctico. 50
3.8 Reactivos necesarios para la obtención del ácido poliláctico. 50
4.1 Ponderación obtenida en la valoración de las diferentes especies de Mango Analizadas. 52
4.2 Características de la pulpa del mango Bocado. 54
4.3 Ponderación obtenida en la valoración de los diferentes microorganismo analizados 55
4.4 Evolución de los Parámetros analizados durante el proceso de fermentación. 58
4.5 Porcentaje de producción de ácido láctico obtenido a través de la fermentación del mango
bocado. 59
4.6 Características teóricas y obtenidas del ácido láctico producido. 60
4.7 Grupos funcionales presentes en el ácido láctico. 62
4.8 Ponderación obtenida en la selección del métodos de polimerización utilizado. 62
4.9 Valores de la concentración luego de la pre concentración del ácido láctico 64
4.10 Valores de pH obtenidos durante la degradación del polímero en los diferentes medios
utilizados. 66
4.11 Aspectos considerados para estimar la relación costos/beneficios. 68
A.1 Variedades de mango (Mangifera indica L.) 80
A.2Método de Moddy para obtener el porcentaje de los parámetros a evaluar en la matriz de
selección para la especie del mango. 80
A.3 Variables involucradas en la determinación del contenido de ceniza del mango Bocado. 80
A.4 Variables involucradas en la determinación del pH del mango Bocado. 81
A.5 Variables involucradas en la determinación de °Brix del mango Bocado. 81

xv
Tabla Pág.
A.6 Variables involucradas en la determinación de humedad del mango Bocado. 81
A.7 Características de géneros comunes de bacterias que producen ácido láctico. 81
A.8Método de Moddy para obtener el porcentaje de los parámetros a evaluar en la matriz de
parámetros importantes para la selección del microorganismo. 83
A.9 Requerimientos de nutrientes de los microorganismos y formas comunes de satisfacerlos en
cultivos. 83
A.10 Comparación de los nutrientes para diferentes medios de cultivos. 84
A.11 Porcentajes de producción de ácido láctico de diferentes autores. 84
A.12 Variables involucradas en el proceso de fermentación. 85
A.13.Parámetros de interés involucrados en el proceso de fermentación del mango bocado. 85
A.14 Variables involucradas para la determinación de la densidad de ácido láctico. 86
A.15 variables involucradas para la determinación de la viscosidad de ácido láctico. 86
A.16 Métodos de polimerización para la producción de ácido poliláctico (PLA) 86
A.17Método de Moddy para obtener el porcentaje de los parámetros a evaluar en la matriz de
87
parámetros importantes para la selección de la polimerización
A.18 Comportamiento del pH de los diferentes medios a lo largo de la degradación. 87
A.19 Valores de pH de los diferentes medios a lo largo de la degradación. 87

xvi
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura Pág.
2.1 Frutas de mango Bocado Común (1), Hilacha (2), Pico de Loro (3) y Manga (4) 10
2.2 Producción de mango en los estados de Venezuela 12
2.3 Lactobacillus Bulgaricus 18
2.4 Streptococcus Thermophilus 19
2.5 Fases del crecimiento microbiano. 21
2.6 Estructuras isométricas del ácido láctico. 22
2.7 Síntesis de PLA a partir de ácido. 26
2.8 Reacciones de equilibrio que aparecen en la policondensación directa de LA. 27
2.9 Mecanismo de la oligomerización. 28
2.10Reacción de poli condensación del ácido láctico. 28
2.11 Mecanismo de crecimiento de cadena generalizado por coordinación/inserción de lactida a
29
PLA.
2.12 Poli (ácido Láctico) (PLA). 30
3.1 Procedimiento utilizado en el tratamiento de las muestras recolectadas. 37
3.2 Mufla usada en la determinación de cenizas. 37
3.3 pH-metro usado en la determinación del pH. 38
3.4 Balanza usada en la determinación de humedad. 38
3.5 Brixometro usado en la medición de °Brix 39
3.6 Medios de cultivo líquidos y sólidos. 41
3.7 Fermentación del mango. 42
3.8 Proceso de separación del ácido láctico. 43
3.9 Ácido láctico obtenido de la fermentación. 43
3.10 Montaje de la polimerización por condensación. 46
3.11 Tubos de ensayos utilizados en la prueba de degradación Hidrolítica. 47
4.1 Colonias de las Lactobacillus Bulgaricus y Bacillus thermophilic. 57
4.2 Comportamiento del pH °Brix y VNaOH durante la fermentación del mango. 58
4.3 Espectro IR del ácido láctico obtenido con la fermentación del mango. 61
4.4 Espectro IR del ácido láctico teórico. 61
4.5 Esquema de las etapas del proceso de polimerización del ácido láctico. 64
4.6 Espectro IR del ácido poli láctico obtenido por fermentación del mango. 65

xvii
INTRODUCCIÓN

En Venezuela se producen diferentes especies de mango, ya que es una fruta que mejor se adapta a las
diversas condiciones de suelo y clima del país, los mangos más comunes poseen dificultad para ser
comercializados en el mercado internacional, ya que sus características no satisfacen las normas de calidad
establecidas en el exterior, lo que en las temporadas de cosecha de este genera una sobre producción del
mango lo que presenta un problema que acarrea un impacto negativo al medio ambiente debido a la
acumulación y descomposición a cielo abierto de la materia orgánica. Por lo que el mango puede ser
aprovechado para producir ácido láctico y su posterior polimerización, ya que en la actualidad los
polímeros poseen un alto valor agregado debido a la complejidad de sus procesos y así aprovechar los
recursos naturales como fuente de polímeros degradables.
La Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) estimó, para el año
2014, una producción mundial de frutas tropicales cercana a los 82 millones de toneladas. Para esta
organización, el mango representa la fruta tropical que más se produce anualmente; con alrededor del 35
% de la producción mundial de frutas tropicales. En cuanto a la producción geográfica de ésta fruta, la
FAO señala que el 69% del mango se cosecha en Asia y el Pacífico; el 14% en los países de América
Latina y el Caribe, y el 9% en el continente africano. (FAO, 2014).
Se ha determinado que las características físicas y químicas de las especies Bocado e Hilacha presentan
un contenido de carbohidratos fermentables adecuado para ser considerados como fuentes alternativas
para la producción de polímeros degradables. Para producir el ácido láctico se emplea la fermentación de
sustratos ricos en carbohidratos por medio de bacterias u hongos. Este es un proceso biotecnológico que
posee características viables como: bajos niveles de contaminación, bajo precio de adquisición, poca o
ninguna forma de subproductos, rápidas tasa de producción, alto rendimiento y disponibilidad.
El objetivo fundamental es el aprovechamiento del mango como materia prima para la generación de
ácido láctico, mediante la fermentación con microorganismos, y su posterior polimerización a ácido
poliláctico (PLA). Para esto, se realizó un estudio de los diferentes tipos de mango cultivado en Venezuela
para determinar cuál se adaptó mejor a las condiciones de fermentación, luego se estudió una serie de
microorganismos productores de ácido láctico, seleccionando así los que cumplen con los requisitos para
dicha producción, luego se analizaron los diferentes parámetros para la fermentación y así obtener dicho
ácido para luego caracterizarlo y polimerizarlo obteniendo el producto final a la que se le realizó una
degradación hidrolítica y su posterior análisis de costo beneficio del proceso.
Esta investigación tiene como objetivo usar este fruto de poco uso como materia prima y aprovecharlos
para la producción y obtención de ácido poliláctico, reduciendo el impacto ambiental que generan los
mismos. Este es un gran aporte, porque contribuyen al desarrollo de procesos de menor contaminación y
conlleva al desarrollo de nuevas tecnologías amigables al ambiente para la producción industrial.

1
CAPÍTULO I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

A continuación se plantea la problemática, donde se establece el propósito de la investigación en


forma general y específica y de esta manera dar a conocer la justificación y limitaciones que pudieran
surgir durante el desarrollo de la misma.

1.1 Descripción del problema


La Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO siglas por su nombre
en inglés) en el año 2012 estimó, para el año 2014, una producción mundial de frutas tropicales cercana a
los 82 millones de toneladas. Para esta organización, el mango (Mangifera Indica L) representa la fruta
tropical que más se produce anualmente; con alrededor del 35 % de la producción mundial de frutas
tropicales. En cuanto a la producción geográfica de ésta fruta, la FAO señala que el 69% del mango se
cosecha en Asia y el Pacífico; el 14% en los países de América Latina y el Caribe, y el 9% en el
continente africano. (FAO, 2014).

En Venezuela, país ubicado en América Latina y el Caribe, se producen diferentes especies de mango
(Mangifera Indica L.), ya que constituye la fruta que mejor se adapta a las diversas condiciones de suelo y
clima del país (Carrera et al, 2008). Algunos autores han señalado que el mango fue traído al país desde
las Antillas, probablemente de Barbados, donde fueron introducidos en 1842, o desde Jamaica donde
llegaron en 1782, aunque también es posible que hayan sido traídos desde Trinidad (Pittier, H. 1926;
Serpa et al, 1961). Entre los tipos de mango con mayor producción en Venezuela se encuentran: el
Bocado, el Hilacha, el Pico de loro y la Manga (Aular et al. 2005). Estos mangos, por su grato y delicioso
sabor, son una fruta de gran popularidad y consumo, ampliamente difundida en casi la totalidad del
territorio nacional. Sin embargo, el acceso de estas especies a los mercados internacionales, donde otras
especies de mango tienen amplia aceptación, se dificulta porque las características de los frutos no
satisfacen las normas de calidad establecidas para su comercialización. (Ramírez et al, 2010). De manera,
que en las temporadas de cosecha de mango en el país se evidencia en algunas regiones una sobre
producción del fruto, que en ocasiones representa un problema que puede generar un impacto negativo en
el ambiente. Debido a la acumulación y descomposición a cielo abierto de la materia orgánica.

Ahora bien, Aular y colaboradores (2005) determinaron las características físicas y químicas de las
especies Bocado e Hilacha y encontraron que estas especies presentan un contenido de carbohidratos

2
fermentables adecuado para ser considerados como fuentes alternativas para la producción de
biopolímeros de alto valor agregado.

El ácido poliláctico (PLA), es un biopolímeros de alto valor agregado, que se produce por polimerización
del ácido láctico. Este polímero presenta muchas propiedades iguales o incluso mejores que algunos
plásticos tradicionales, por lo que representa una alternativa como material de empaque bastante
innovadora y prometedora (Medina et al, 2014).

Por su parte, el ácido láctico es un ácido orgánico, que tiene un carbono asimétrico, el cual da lugar a
actividad óptica. Existen dos isómeros ópticos, el D(-) láctico y L(+) láctico y una forma racémica
constituida por fracciones equimolares de las formas L(+) y D(-). Ambas formas isométricas del ácido
láctico pueden ser polimerizadas y pueden producir polímeros con diferentes propiedades dependiendo de
la composición. Este acido, se puede obtener químicamente por fuentes petroquímica, y
biotecnológicamente por fuentes renovables.

La producción biotecnológica de ácido láctico se basa en la fermentación de sustratos ricos en


carbohidratos por medio de bacterias u hongos para formar los enantiómeros ópticamente activos, los
cuales dependen del tipo de microorganismo utilizado. La viabilidad de este proceso biotecnológico está
sujeto a las características del recurso natural que se emplea en la fermentación, tales como: bajo precio de
adquisición, bajos niveles de contaminantes, rápidas tasa de producción, alto rendimiento, poca o ninguna
formación de subproductos, capacidad para ser fermentado con poco o ningún pre-tratamiento y
disponibilidad. Entre los recursos naturales empleados para la producción enzimática del ácido láctico, se
mencionan: el maíz, la patata, la caña de azúcar, la remolacha, la melaza, entre otros (Medina et al, 2014).
En virtud, de lo anterior y en correspondencia a las áreas de interés del Laboratorio de Polímeros del
Centro de Investigaciones Químicas de la Facultad de Ingeniería de la Universidad de Carabobo,
relacionadas con el aprovechamiento de recursos naturales como fuente de biopolímeros de alto valor
agregado, y recuperación a partir de desechos de la industria alimentaria, se planteó como objetivo
fundamental de este trabajo especial de grado realizar una propuesta para el aprovechamiento del mango
(Mangifera indica L.) como fuente para producir ácido poliláctico (PLA).

1.2 Formulación del problema


Dado que en la actualidad la producción del mango ocupa el primer lugar a nivel mundial, y que
Venezuela es el país que ocupa el quinto lugar de producción en Suramérica (FAO, 2014). Se ha planteado
la posibilidad de aprovechar al mango (Mangifera Indica L.) como fuente para producir ácido poliláctico

3
(PLA). En este sentido, surge las siguientes interrogantes: ¿Cuáles son las condiciones óptimas de
operación para obtener el mayor rendimiento de ácido láctico en la fermentación microbiana del mango
(Mangifera Indica L.)? ¿Será el mango (Mangifera Indica L.) una alternativa para ser empleado como
fuente para producir ácido poliláctico (PLA)?

1.2.1 Situación Actual


Los mangos de mayor producción en Venezuela poseen dificultad para ser comercializados en el mercado
internacional, debido a que sus características no satisfacen las normas de calidad establecidas en el
exterior. Por lo que, en las temporadas de cosecha de mango en el país se evidencia en algunas regiones
una sobre producción de mango, que en ocasiones representa un problema que puede generar un impacto
negativo en el ambiente. Sin embargo, estas especies de mango presentan un contenido de carbohidratos
fermentables adecuado para ser considerados como fuentes alternativas para la producción de
biopolímeros.

Ahora bien, en los últimos años los estudios se han dirigido al aprovechamiento de recursos naturales
como fuente de biopolímeros de alto valor agregado, y a la recuperación de biopolímeros a partir de
desechos de la industria alimentaria, sabiendo que hasta la fecha no existe un polímero producido a base
de mango (Mangifera Indica L.) como materia prima y que además sea biodegradable.

1.2.2 Situación Deseada


Se pretende utilizar los mangos venezolanos tipos Bocado, Hilacha, Pico de loro y Manga, como fuente
para la fermentación láctica debido a su gran contenido de azucares, accesibilidad y bajo costo, para que
así sean aprovechados como fuente renovable para la producción de biopolímeros de alto valor agregado y
en el beneficio de la sociedad y el ecosistema.

1.3 Objetivos.
1.3.1 Objetivo general
Realizar una propuesta para el aprovechamiento del mango (Mangifera indica l.) como fuente para
producir ácido poliláctico (PLA)

4
1.3.2 Objetivos específicos
1. Seleccionar entre las diferentes especies de mango (Mangifera indica L.) cuál posee mejores
propiedades con la finalidad de utilizarlo como materia prima.
2. Seleccionar el microorganismo que se empleará en la fermentación del mango (Mangifera indica L.)
para obtener el ácido láctico.
3. Caracterizar físico-químicamente el ácido láctico obtenido para verificar su rendimiento.
4. Polimerizar el ácido láctico para obtener ácido poliláctico (PLA).
5. Verificar la biodegradabilidad de la mezcla en estudio.
6. Realizar un análisis costo-beneficio con el fin de determinar si es posible o no la propuesta.

1.4 Justificación
El hecho de poder obtener polímeros biodegradables por medio de la fermentación láctica de una fruta,
como es el caso del mango (Mangifera Indica L.), puede llegar a causar un impacto positivo en la
sociedad Venezolana, especialmente en aquellas regiones donde esta fruta es producida en grandes
cantidades.

Debido a que el ácido poliláctico ofrece muchas propiedades que son equivalentes o mejores que las de
muchos plásticos procedentes del petróleo, siendo una característica importante la biodegradabilidad a
partir de fuentes renovables, el cual aporta a la industria mayores alternativas para producir envases y
convertirse en un sustituto de los actuales plásticos que generan una larga estadía en el ecosistema.

En Venezuela existe cada vez más la necesidad de proteger al ecosistema, y por esto que se deben buscar
nuevas alternativas para no depender petróleo en diversos procesos industriales. Por ello se hace evidente
la necesidad de crear la fabricación de productos procedentes de recursos renovables, y tengan la menor
influencia posible en el ambiente y así aminorar sus costos.

En último lugar, la mayoría de los plásticos convencionales son persistentes en el ambiente, por lo que son
una fuente significativa de contaminación ambiental. A través de la investigación se hace evidente la
necesidad de aportar conocimientos necesarios para sustituir los polímeros no degradables por
biodegradables y así reducir el impacto al ecosistema.

5
CAPÍTULO II. MARCO REFERENCIAL TEÓRICO

A continuación se presentan los trabajos, investigaciones y bases teóricas sobre los cuáles se fundamentó
la presente investigación, permitiendo así una mejor comprensión del tema en estudio.

2.1 ANTECEDENTES
Estupiñan y Parada en el año 2007. Obtuvieron el ácido poliláctico mediante policondensación con
catalizador de cinc metálico, en este trabajo, se obtuvo PLA a partir de la policondensación de ácido
láctico en presencia de un catalizador de zinc metálico; bajo condiciones de vacío y atmósfera inerte.
Durante este proceso se varió la concentración de Zn++ y el tiempo de polimerización para obtener
muestras poliméricas con diferentes propiedades. El recubrimiento polimérico sobre Ti 6Al4V, se logró a
partir de un método de electrodeposición catódica. El material obtenido fue PLA y que su preparación con
un iniciador de zinc metálico, promovió la migración y formación de grupos catiónicos que lograron
neutralizarse y coagularse sobre la superficie de Ti6Al4V.

Esta investigación tiene similitud con el proyecto a realizar ya que realizan el proceso de purificación del
ácido láctico con un catalizador de cinc metálico. A diferencia del presente trabajo experimental no parten
inicialmente de la obtención del ácido láctico a partir de un sustrato.

En el año 2010 Araya, Rojas y Velásquez. Realizaron la síntesis de ácido láctico, a través de la hidrólisis
enzimática simultánea a la fermentación de un medio a base de un desecho de piña (ananascomosus), para
su uso como materia prima en la elaboración de ácido poliláctico. En este trabajo se evaluó el potencial de
un desecho agroindustrial de piña para su utilización en la producción de ácido láctico por fermentación,
utilizando Lactobacillus casei subespecie rhamnosus. Se realizaron fermentaciones del sustrato de piña
como tal e hidrolizado enzimáticamente con invertasa. El tratamiento enzimático permitió aumentar el
rendimiento de 84 a 98% y la concentración de ácido láctico de 64 a 75 g/L, al obtenerse un consumo total
de los azúcares presentes en el medio hidrolizado, en comparación con la fermentación del medio sin
hidrólisis que presentó una concentración residual de sacarosa de 15 g/L. La productividad máxima
disminuyó de 5,5 a 3,9 g/L.h de ácido láctico, al realizar el tratamiento enzimático. Debido a la alta
eficiencia obtenida en la conversión de los azúcares en ácido láctico, la hidrólisis enzimática del medio es
la mejor opción para obtener una concentración mayor de este compuesto y para su potencial aplicación
en la producción de plásticos biodegradables.

6
A diferencia de este trabajo de investigación se utilizará el mango en vez de la piña como sustrato. Pero al
igual que el presente trabajo se realizara la fermentación con la familia de la bacteria Lactobacillus para
llevar a cabo el proceso de fermentación.

Perales en el año 2012 presentó la Modificación Estructural del Polietiléntereftalato con Ácido Poliláctico.
El presente trabajo de investigación está enfocado en la obtención de mezclas poliméricas PET/APL a
diferentes porcentajes de APL (1, 2.5, 5 y 7.5 % en peso). Para llevar a cabo lo anterior, se utilizó el
método de extrusión, siendo necesario determinar el perfil de temperaturas para generar interacciones
entre los componentes y obtener una mezcla. Los polímeros puros junto con las mezclas fueron
caracterizados a través de calorimetría diferencial de barrido (CDB), espectroscopia de infrarrojo por
transformadas de Fourier (IRFT), Difracción de rayos X (DRX), microscopía electrónica de barrido
(MEB), microscopía de fuerza atómica (MFA), pruebas mecánicas, de degradación y biodegradación. Los
resultados indican que la mezcla de PET/APL al 2.5 % en peso, es un polímero dúctil por lo tanto presenta
las mejores propiedades de tensión; sin embargo las otras mezclas pueden tener otras aplicaciones.
Finalmente, se realizó la síntesis química para obtener el copoliéster PET/APL a diferentes proporciones,
pero los resultados que se obtuvieron no fueron los esperados. El material obtenido nunca presentó las
características de un polímero termoplástico, siendo el principal problema la degradación térmica del
APL.

Esta investigación posee una cierta semejanza con el presente trabajo de investigación ya que se realizan
pruebas de determinación de la biodegradabilidad. A diferencia de que se realizará la mezcla con el ácido
poliláctico proveniente de la fermentación del mango y no de fuentes comerciales.

Valls en el año 2012 presento una investigación dondese realizó la modificación del ácido poliláctico
mediante compuestos polifuncionales. Se llevaron a cabo una serie de experimentos en el laboratorio con
el objetivo de encontrar un o varios compuestos polifuncionales capaces de mejorar las propiedades físicas
del ácido poliláctico. Con el fin de mejorar tales propiedades, se han utilizado compuestos polifuncionales
de tres grupos diferentes: polioles, anhídridos ácidos y compuestos epoxidados. Se han preparado
películas con las muestras antes y después de hacerlas reaccionar. Éstas se han caracterizado mediante
equipos de FT-IR, RMN y cromatografía HLPC con el fin de determinar cualitativamente y
cuantitativamente si la reacción realmente se ha dado, y si esta ha permitido mejorar las propiedades
físicas así como el peso molecular del PLA.

7
Este proyecto en cuanto a la presente investigación es similar debido a que plantean de manera muy clara
las posibilidades de purificación del ácido láctico una vez obtenido para su posterior polimerización, y
estás será empleado en el presente proceso experimental. Se diferencia en que fusionan el ácido poliláctico
con diferentes compuestos polifuncionales y su meta es mejorar las características del PLA.

En el año 2013 Castro y Lugo. Realizaron la Obtención de poli (ácido láctico) (PLA) mediante la
evaluación del proceso de fermentación del mosto de cují (prosopisjuliflora).El presente trabajo de
investigación se realizó con el fin de obtener un producto de uso comercial que no represente una amenaza
al ecosistema, en este caso un biopolímero totalmente biodegradable que sea derivado de recursos
renovables como el cují (Prosopisjuliflora) el cual es un árbol de tipo leguminoso, rico en proteínas y
contiene azúcares fermentables, razón por la cual surge la idea de emplearlo como materia prima. En el
proceso de fermentación del mosto de cují (Prosopisjuliflora), se evaluó la calidad fisicoquímica y
microbiológica del fruto. Se realizó la fermentación con Lactobacillus bulgaricus en condiciones de pH y
temperatura controlada, para la obtención del ácido láctico. Se hizo una policondensación directa del ácido
láctico en un tiempo de 24 horas y con una concentración de catalizador 1% de zinc metálico para la
obtención del poli (ácido láctico) y finalmente se caracterizó el PLA. Los resultados obtenidos,
permitieron determinar qué el descenso de pH no se correlaciona linealmente con el ácido producido, las
altas temperaturas, favorecen la fermentación más rápida, provocando el desarrollo de otros
microorganismos perturbadores, Lactobacillus bulgaricus se adaptó al nuevo sustrato de una forma rápida
y eficiente, en el proceso de fermentación se demostró que trabajando bajo las condiciones establecidas de
temperaturas de 34–40 ºC, pH de 4-5 y 14 ºBrix se tiene un crecimiento óptimo de la bacteria
Lactobacillus bulgaricus dando favorablemente como producto final en la fermentación el ácido láctico
con un 13.93% de rendimiento, posteriormente en la polimerización del ácido láctico se observó un capa
blanca indicando que se produjo de manera eficiente el poli (ácido láctico) (PLA).

Este trabajo experimental servirá de bases fundamentales para la investigación debido a que utilizan como
materia prima un fruto vegetal (Cují) para elaborar un polímero a partir del proceso de fermentación al
igual que esta investigación se llevará a cabo el proceso de fermentación para obtener el ácido láctico pero
a diferencia de que se utilizará el mango como materia prima.

Nava y Núñez en el año 2013 presentó una investigación donde se evalúa el biopolímero obtenido a partir
de la pectina extraída de desechos de cáscaras de frutos de parchita (passifloraedulin) y naranja (citrus
sinensis). Con la realización de esta investigación se planteó utilizar los desechos de bolsas de PEBD y a
las cáscaras de frutas y se buscó evaluar polímeros degradables, a partir de la pectina extraída de las

8
cáscaras de la naranja y parchita a concentraciones de pectina a 1, 2,5 y 5%. Para obtener la pectina se
realizó una hidrólisis ácida al albedo de la naranja y la cáscara de la parchita con HCl, posterior a ello se le
aplicó un proceso de secado a temperatura de 60 ºC, para luego pulverizar y envasar. Obtenida la pectina
se le realizó la caracterización fisicoquímica con un rendimiento aceptable entre 1 y 2,16 % y luego se
utilizó para realizar una polimerización por disolución usando el PEBD y el solvente, donde se obtuvieron
buenos resultados para la polimerización a una temperatura superior de 100ºC dando lugar a la formación
de una masa que fue sometida a prensado para obtener los biopolímeros. Posteriormente se le realizaron
análisis fisicoquímicos de densidad, punto de fusión, ensayo a la llama, ensayos mecánicos e infrarrojo
que resultaron similares a un PEBD. A su vez se le realizó un estudio de biodegrabilidad en suelo y con
las especie de hongos Aspergillus nígery Trichodermaspen los medios de cultivo Czapekdoxmodificado,
esto con el fin de determinar si este poseía características biodegradables. Obteniendo una degradación
importante en los periodos expuestos de 0, 30 y 60 días con una mayor degradación en las muestras en
contacto con el Trichodermaspen las muestras con pectina de parchita, verificándose la degradación con
un análisis de infrarrojo.

Al igual que el trabajo experimental a realizar esta investigación obtuvo los periodos de exposición del
polímero obtenido para verificar su tiempo de degradación en suelos. Y teniendo como diferencia que para
su medio de cultivo utilizaron hongos en vez de bacterias.

2.2 BASES TEÓRICAS


2.2.1 El mango (Mangifera indica L.)
El mango es una planta que pertenece al PhylumAngiospermae, Subphylum o Clase Dicotiledoneae,
División Lignosae, Orden Sapindales, Familia Anacardeaceae, Género Mangífera y Especie indica, el cual
comprende unas 39 especies, nativas del sureste de Asia e islas circundantes, salvo la Mangifera africana
que se encuentra en África (Ascanio y Pinto, 2011).

El mango (Mangifera indica L.) pertenece a la familia botánica de las Anacardiáceas (Anacardiaceae), es
una de las frutas tropicales de mayor consumo fresco en el mundo. Originario de la India, su producción
se extiende a lo largo de la franja intertropical, habiendo sido traído a Venezuela en 1842 desde las
Antillas (Avilán y col., 1993; Avilán y Rengifo, 1990), desde su introducción ha sido una de las especies
que mejor se ha adaptado a las diversas condiciones de suelo y clima que existen en Venezuela (Meléndez
y col., 1999).

9
Es un cultivo perenne de floración estacional, cuyos árboles jóvenes inician su producción generalmente
entre el tercer y cuarto año dependiendo de la variedad (Terranova editores, 1995). En Venezuela, casi
todos los cultivares florecen durante los meses de diciembre, enero y febrero y se cosecha de abril a julio,
dependiendo del cultivar y de las condiciones agroecológicas de la zona (Avilán y Rengifo, 1990). El
árbol crece hasta 15 mde altura y forma una amplia copa con numerosas ramas altas y abiertas (INCA,
2004).

El fruto clasificado como una drupa que encierra un hueso aplanado rodeado por una cubierta leñosa
(Avilán y Rengifo, 1990), es de forma muy variable, pero generalmente es ovoide, oblongo o arriñonado,
a veces redondeado u obtuso en ambos extremos, de 5 a 15 cm de longitud. Las propiedades
organolépticas del fruto como: color, aroma, sabor y olor de la pulpa tienden a presentar versatilidad
dependiendo de la variedad del mango. Sin embargo, suelen ser, verdes, amarillos, diferentes tonalidades
de rojo, mate o con brillo cuando están maduros. Su pulpa, de color amarillo intenso a casi anaranjada,
con un sabor muy dulce y aromático (Cevallos, 2006; Terranova editores, 1995).

Los mangos se agrupan en la raza Hindú y la Filipina (Aular, J. y Rodríguez, Y. (2005); de esta última
destacan los criollos, los cuales se caracterizan por presentar frutos con coloración amarilla o verdosa,
ausencia de manchas rojizas y moderada resistencia a la antracnosis en Venezuela son Bocado, Hilacha,
Pico de loro y Manga (Aular et al., 1996) Ver figura 2.1.

Figura 2.1. Frutas de mango Bocado Común (1), Hilacha (2), Pico de Loro (3) y Manga (4)

2.2.2 Propiedades nutricionales del mango


El mango presenta un bajo contenido calórico, debido a su moderado contenido de carbohidratos.
Contiene un adecuado aporte de minerales como potasio, calcio y magnesio. En cuanto a las vitaminas, los
frutos maduros son una importante fuente de provitamina A, vitamina C y betacarotenos (Rivas, 1984;

10
Cevallos, 2006). También es una fuente importante de vitamina E y folatos, y en menor medida otras
vitaminascomoB2 y niacina. Entre los minerales que contiene el mango destacan el potasio y el magnesio,
aunque presenta pequeñas cantidades de hierro, fósforo y calcio (Serna y Becerra, 1987), siendo una
buena fuente de estos nutrientes. De igual manera, constituyen un gran aporte de proteínas, grasas (Serna y
Becerra, 1987) fibras solubles (pectinas), ácidos orgánicos (cítrico y málico) y taninos, valores que se
pueden apreciar en la tabla 2.1.

Tabla 2.1. Composición nutricional del mango (Mangifera indica L.)


Agua 81,7%
Calorías (Cal) 66
Proteínas (g) 0,7
Grasa (g) 0,4
Carbohidratos totales (g) 16,8
Fibra (g) 0,9
Ceniza (g) 0,4
Calcio (mg) 10
Fósforo (mg) 13
Hierro (mg) 0,4
Sodio (mg) 7,0
Potasio (mg) 189
Vitamina A (UI) 4800
Tiamina (mg) 0,05
Riboflavina (mg) 0,05
Niacina (mg) 1,1
Ácido Ascórbico (mg) 35
Fuente: Ospina et al, 2012.

2.2.3 Producción del mango a nivel nacional


Los mangos son frutales de amplia propagación y consumo a nivel nacional. Las plantaciones comerciales
en el país están limitadas a una altitud inferior a los 600 m, temperatura media anual de 26ºC y suelos sin
limitaciones de drenajes. Las plantaciones están distribuidas en los estados Centrales y parte del estado
Zulia. La explotación del mango se realiza bajo tres (3) sistemas de producción: tradicional explotación
como cultivo único, asociado con cultivos de ciclo corto o perenne y alta densidad poco frecuente en el
país.

En Venezuela el mango ocupa el cuarto lugar en cuanto a volúmenes de producción agrícola, siendo la
variedad Bocado la que genera mayor cantidad de fruto por planta. Sin embargo, en los últimos años, se ha
reflejado una disminución fluctuante en la producción, que es justificada por el envejecimiento de las

11
plantaciones existentes, que las más recientes no han podido suplantar efectivamente, pero que se han
mantenido en un margen aceptable la disponibilidad del fruto a nivel nacional y regional.

La producción nacional está fundamentalmente dirigida como fruta fresca a los mercados internos, aunque
en los últimos años se ha venido incrementando su participación a nivel industrial y como producto de
explotación. Con relación a su exportación, aunque presenta grandes perspectivas, es muy limitada. Entre
los países a los que más se realizan exportaciones destacan el Reino Unido: 50,5%, Antillas Neerlandesas:
12,2% y Canadá: 7,57%. (Álvarez y Medina, 2008). Actualmente en el país se produce alrededor de 40
mil 45 toneladas de mango en el área industrial, según el Ministerio de Agricultura y Tierras.El estado
Monagas es el mayor productor de esta fruta y 26,76% de la población venezolana la consume, de acuerdo
con información del Instituto Nacional de Estadística (INE). Ver figura 2.2

Figura 2.2. Producción de mango en los estados de Venezuela. (VII Censo Agrícola Nacional, 2008)

12
2.2.4 Aprovechamiento industrial del mango
El mango tiene diferentes aplicaciones agroindustriales. Uno de los usos más comunes que se le da a este
fruto es la obtención de pulpa, la cual se utiliza como materia prima en la producción de otros productos
tales como; jugo de mango, néctar de mango, vino de mango, mango deshidratado u orejones, helados de
mango, conservas de mango, dulces enlatados, salsas, yogurt de mango, mermeladas de mango, entre
otros (Terranova editores, 1995; Arriola, 1986; CNP, 1998). Además, de la elaboración de la pulpa de
mango se pueden obtener varios productos secundarios, ya que la parte comestible representa un 33 – 85
% aproximadamente de la fruta fresca, mientras que la cáscara y la semilla cerca de un 7 – 24 % y 9 – 40
% respectivamente. Los productos secundarios que se generan del procesamiento industrial del mango
suman cerca del 35 – 60 % del peso total de la fruta (Berardini y col., 2005).

Los subproductos por ejemplo, las semillas del mango pueden ser usadas para la obtención de grasas,
antioxidantes naturales, almidones, harinas, aceites y piensos para animales (Bernardini y col., 2005). En
el caso de las cáscaras, éstas son usadas para producción de biogás, fibra dietética con una alta actividad
enzimática, otros estudios han demostrado la posibilidad de utilizarlas cáscaras del mango como fuente
para la obtención de pectinas (Bernardini y col., 2005).

2.2.5 Variedades del mango en Venezuela.


En la explotación comercial agrícola de cualquier rubro, la selección adecuada de los materiales vegetales
juega un papel fundamental para asegurar su éxito y adquiere mayor relevancia cuando se trata de especies
perennes como el mango. Este fruto tiene una elevada heterogeneidad, lo cual trae como consecuencia una
gran diversidad de formas y tamaños, tanto en lo que concierne a la conformación general o arquitectura
de la planta, como en lo referente al peso, color y forma de sus frutos.

En cada descripción se suministran detalles acerca de la conformación de la copa, hojas, y frutos. Dado
que el fruto constituye uno de los elementos básicos para reconocer un material se presentan los diferentes
aspectos de sus formas, los porcentajes que representan, la parte comestible o pulpa y el hueso, en relación
con totalidad del fruto. Ver tabla 2.2.

El hueso de consistencia dura, leñosa comúnmente denominada semilla, en realidad es el endocarpo, el


cual contiene en su interior a la verdadera semilla.

13
Tabla 2.2. Características más relevantes de diferentes variedades de mango.
Variedad Árbol Fruto Cascara Pulpa Hueso
Haden Textura liza,
Tamaño grande de gran Espesor medio
Alto >10m, de
(493g), forma espesor (2cm) textura
crecimiento
ovoide-oblicua, (1,9mm), y de firme, representa Pesado (43g),
erecto y copa
con 10 a 12cm color amarillo el 72% del fruto, representando el
circular; hojas
de largo y de 8 a brillante, con de color amarillo 8% del peso del
elípticas-
9cm de ancho, 8 abundante anaranjado con fruto; de forma
lanceoladas, de
a 9cm de grosor, tonalidad presencia de fibra, elíptica.
color verde
base rojiza, y color sabor dulce y
amarillento.
redondeada. gris, amarillo aroma moderado.
cremoso.
Tommy Atkins
Tamaño grande
Alto >10m, de Textura lisa y Gruesa y firme
(470g), forma
crecimiento gruesa (2mm), representando el
ovoide-oblicuo, Pesado (48g),
erecto y copa de color rojo 83% del peso del
de 11 a 12cm de representando el
circular; hojas purpura y fruto, de color
largo, 8 a 9 cm 10% del fruto,
lanceoladas, de tonalidades amarillo tostado,
de ancho, y 8cm forma elíptica.
color marrón verde y rara presencia de
de grosor, base
pardo. amarillo. fibras gruesas.
aplanada.

Palmer Alto >10m, de Tamaño grande Espesor medio,


crecimiento (416g), forma Textura lisa y textura firme,
erecto y copa oblonga y con gruesa (2mm), representa el 73% Peso medio
rectangular a frecuencia de color verde del fruto, de color (40g),
ovoidal; hojas elíptica, de 12 a amarillento amarillo representando el
ovado- 14cm de largo, oscuro, color anaranjado con 9% del fruto,
lanceoladas, de 8cm de ancho, y purpura presencia de fibra forma elíptica
color verde 7cm de grosor, abundante. fina y larga, sabor
amarillento. base oblicua. agridulce.
Irwin
Espesor medio
Árbol mediano de
Tamaño grande (2,5cm), textura
5 a 10m, de
(354g), forma Textura lisa, blanda, representa el
crecimiento erecto
elíptica, de 11 a espesor fino 80% del fruto, de Peso liviano (25g),
y copa
12cm de largo, (0,8mm), de color amarillo representando el
semicircular.
7cm de ancho, y color amarillo y tostado con 7% del fruto, forma
Hojas elípticos-
7cm de grosor, tonalidad rojiza presencia de fibra elíptica
lanceoladas, de
base ligeramente purpura. gruesa y larga, sabor
color verde
aplanada. dulce y aroma
amarillento
moderado.

Kent
Piel delgada con Pulpa de color
De porte medio Fruto grande, peso
color atractivo anaranjado, Representa el 9%
con una copa (600-700g), forma
verde pequeñas fibras y del peso total de la
vertical y oval con base
amarillento, y su moderada dulzura, fruta
compacta redondeada
base roja oscura aroma moderado

14
Tabla 2.2. Características más relevantes de diferentes variedades de mango. (continuación)
Bocado De espesor medio y
Mediano de 5 a De tamaño
textura fina,
10m, crecimiento pequeño, peso
representa el 66%
erecto y copa (157g), forma Peso liviano (25g),
Lisa, de espesor del fruto, de color
circular, hojas oblongo-oval, de 7 representa el 16%
medio y color amarillo fuerte con
elíptica- a 8cm de largo, del peso del fruto,
amarillo fuerte. presencia de fibras
lanceoladas de 6cm de ancho y de de forma elíptica.
finas y largas, sabor
color verde 5 a 6cm de grosor,
dulce y aroma
amarillento. base aplanada.
moderado.
Hilacha De espesor medio y
textura firme,
De tamaño representa el 66%
Mediano de 5 a Lisa, de espesor
mediano, peso del fruto, de color
10m, crecimiento medio (1,6mm), De peso medio
(259g), forma amarillo claro con
erecto y copa de color (36g), representa el
oblongo-oval, de 9 presencia de
circular, hojas amarillo claro y 15% del peso del
a 10cm de largo, abúndate fibras,
lanceoladas de con ciertas fruto, de forma
7cm de ancho y gruesas y largas.
color marrón tonalidades elíptica.
6cm de grosor con Sabor dulce con
pardo. verdes.
base aplanada. cierto contenido de
trementina. Aroma
moderado.
Manga De espesor medio y
De gran tamaño
Textura lisa, de textura firme,
Mediano de 5 a 10 (520g), de forma
espesor medio representando el
m, crecimiento oblongo-oval; de Peso medio (40g),
(1mm), de color 71% del fruto. Color
erecto y copa 11 a 13cm de representa el 8%
amarillo intenso, amarillo anaranjado
circular, hojas de largo, de 8 a 9cm del peso del fruto;
y cierta con presencia media
color marrón de ancho, de 8cm de forma elíptica.
tonalidad de fibras, sabor
pardo. de grosor, base
purpura. dulce y aroma
redondeada.
moderado.
Pico de Loro De forma
De color amarilla y
oblongo- De color
Pequeño de 8m, textura suave,
reniforme, de bajo amarilla-
hojas elíptica- representa el 76% Forma oblonga de
peso (185g), posee anaranjada, de
lanceoladas de del peso total del gran peso, y pesa
un pico poco grosor,
color purpura y fruto, con abundante aproximadamente
prominente y fuerte y
luego se tornan fibra y con sabor 26g.
curvo, con un adherida a la
castañas. algo acido. Aroma
lomo de curvatura pulpa
moderado.
larga.
Fuente: Sergent Eduardo, 1999.

2.2.6 Matriz de priorización, matriz de selección o matriz de decisión.


La matriz de priorización es una herramienta que permite la selección de opciones sobre la base de la
ponderación y aplicación de criterios para la toma de decisiones (AITECO, 2013). Esta matriz constituye
una de las siete nuevas herramientas de gestión y planificación que sirven de apoyo a la estrategia de la
calidad total. Hace posible determinar alternativas y los criterios a considerar para adoptar una decisión,
priorizar y clarificar problemas, oportunidades de mejora y proyectos. En general, establece prioridades
entre un conjunto de elementos para facilitar la toma de decisiones (Vilar, 1997).

15
La aplicación de la matriz de priorización conlleva un paso previo de determinación de las opciones sobre
las que decidir, como el factor de peso o ponderación que cada una de las variables que se tendrá en la
ejecución de la matriz de selección. Esta matriz es llamada matriz de prioridades de Moody. Para
seleccionar la mejor opción, en la matriz de priorización se compara cada alternativa sobre la base de la
combinación de las variables, multiplicando el valor del factor de peso (para cada criterio) por el valor de
la calificación de la alternativa y luego sumar cada fila para obtener el puntaje final para cada opción.
Finalmente seleccionar la opción de mayor puntaje (AITECO, 2013).

 Matriz de prioridades de Moody


Esta herramienta sirve para enumerar alternativas por orden de importancia, tratando de identificar el
factor que tiene la mayor influencia, según la ponderación que se obtenga en la ejecución. Esta matriz
utiliza la técnica del diagrama matricial, que consiste en colocar a cada lado las variables consideradas y
comparándolas entre sí, con el objetivo de decidir la prioridad e importancia con cada una de ellas (Vilar,
1997). Por medio de la comparación se le asigna una ponderación a cada variable según el grado de
determinación, dependencia o prioridad sobre las demás.

 Factor de peso
Dicho factor es necesario, para los criterios que se juzgaran en las opciones contra las demás. Se crea una
matriz de pares, colocando en la tabla, tanto en las filas como en columnas, cada una de las variables.
Comparando la importancia de cada una de ellas contra las demás medidos de la siguiente forma: una
ponderación de 1 para el parámetro de mayor prioridad, 0 para el de menor prioridad, y 0,5 para variables
idénticas. Se suman los valores de cada variable para llegar a un total. Luego, al totalizar la ponderación
de cada una y dividirlas entre el total de todas se obtiene el factor de peso que tiene cada variable para el
estudio, necesarias para la posterior utilización en la matriz de Moody (Vilar, 1997).

2.2.7 Bacterias ácido lácticas (BAL)


Las BAL fueron descubiertas en 1857 por Louis Pasteur siendo profesor de química y decano de
ciencias en la universidad de Lille en Francia mientras realizaba estudios tras la consulta de los
vinicultores de la región, de por qué se les descomponía y acidificaba el vino. En pocas semanas
descubrió que la substancia que lo alteraba era el ácido láctico, producto de la fermentación láctica
desencadenada por ciertos microorganismos. El término “Bacteriumacidilactici” se debe a
Weigmamn que lo propuso en 1889 al definirlas como bacterias que forman leche ácida a partir del
azúcar de la leche (Fernández, 2000; Jay, 2000).

16
2.2.8 Características generales
Las BAL poseen características ecológicas y metabólicas de importancia económica y tecnológica en
los alimentos. Su clasificación se basa en la morfología, la forma de fermentar la glucosa, su
desarrollo a diferentes temperaturas, la configuración del ácido láctico producido, la habilidad de crecer
a altas concentraciones de sal, tolerancia a la alcalinidad y acidez (Axelsson, 2004).

En la actualidad, el grupo de las BAL está conformado por cocos, cocobacilos o bacilos Gram
positivos, generalmente inmóviles y no esporulados, catalasa y oxidasa negativas, obtienen
energía exclusivamente por fermentación de azúcares produciendo ácido láctico como producto
principal o único de su metabolismo, carecen de sistemas de transporte de electrones funcionales
ligados al heme o de citocromos, y obtienen su energía por fosforilación a nivel del sustrato a la vez
que oxidan carbohidratos; no tienen un ciclo de Krebs funcional. Todas estas bacterias son
consideradas anaerobias aerotolerantes, y al contrario que las anaerobias estrictas, no son sensibles al
oxigeno por lo que pueden crecer tanto en presencia como en ausencia de él. (Madigan y col., 2004).

La mayoría de las BAL son mesofílicas, aunque algunas son capaces de crecer a temperaturas de
5oC y otras a 45oC. Toleran bien concentraciones relativamente altas de ácidos y valores de pH más
bajos que el resto de las bacterias (algunas pueden crecer a pH 3, otras entre 6 y 9, pero la mayoría
crece a un pH entre 4 y 4.5) por lo que pueden desplazarlas de los hábitats que colonizan (Jay, 2000).

2.2.9 Lactobacillus
Los lactobacilos tienen forma bacilar, variando desde bacilos largos y delgados a cortos y curvados ver
figura 2.3, no esporulados, aerotolerantes o anaerobios, acidúricoso acidófilos (pH entre 1.0 y 5.0), de
requerimientos nutricionales complejos. Es común la producción de bacteriocinas. Los límites de
temperatura para desarrollar van de 2 a 53oC con óptima de 30-40oC (Jay, 2000; Madigan y col.,
2004).El género Lactobacillus es el más grande, comprendiendo alrededor de 80 especies
reconocidas y organizadas en tres grupos, basados principalmente en las
características fermentativas. El grupo 1 incluye especies homofermentativas estrictas.

El grupo 2 está formado por especies heterofermentativas facultativas. El grupo 3 está


formado por especies heterofermentativas estrictas (Jay, 2000; Axelsson, 2004).

Las especies homofermentativas se asocian principalmente con el hombre y animales, ya que se les
puede encontrar en la cavidad oral, contenido intestinal y vagina de mamíferos; mientras que las

17
especies heterofermentativas están asociadas con los alimentos, en donde llevan a cabo
fermentaciones controladas o causan deterioro especialmente en productos empacados refrigerados,
se pueden aislar fácilmente de productos cárnicos, lácteos, pescados, aguas residuales, cerveza, frutas,
verduras y ensilados (Madigan y col., 2004).

Las bacterias del género Lactobacillus son indispensables para la industria alimentaria, principalmente
la láctea. Se emplean para producir alimentos vegetales fermentados (chucrut, encurtidos, ensilaje,
etc.), bebidas (cerveza, vino, zumos), masa agria, queso suizo (así como otros quesos duros), yogur y
embutidos. Los lactobacilos causan también problemas, a veces son los responsables de que se
deteriore la cerveza, la leche y la carne (Prescott y col., 1999).

Figura 2.3. Lactobacillus Bulgaricus (Barrientos, 2011)

2.2.10 Streptococcus
Son cocos de 0.8-1.2 µm, anaerobios facultativos, se agrupan en cadena hasta con más de 50 células
o pares, poseen una considerable actividad SOD. Tienen una compleja necesidad de factores para
su crecimiento como: Vitamina B1, aminoácidos, péptidos, bases púricas y piridímicas. Ésta es una de
las razones por las que abundan en un medio rico como la leche (Wood y Holzapfel, 1995).

El género Streptococcus contiene una amplia variedad de especies homofermentativas,


como productores de ácido láctico juegan un papel muy importante en la producción de leches
fermentadas, ensilado y una variedad de productos de fermentación. Los más conocidos son S. lactis y
S.cremoris, los cuales son responsables de la acidificación de la leche, mientras que S. diacetylactis
produce la fermentación del ácido cítrico a diacetilo, sustancia característica del aroma en la
mantequilla. También es importante S. Thermophilus que se desarrolla a 40-45oC, por lo que se emplea

18
para conseguir la acidificación del yogur, así como en la maduración de quesos de pasta cocida (Casp y
Requena, 1999; Madigan y col., 2004). Ver figura 2.4

Figura 2.4. Streptococcus Thermophilus (Barrientos, 2011)

2.2.11 Medios de cultivos


Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de
microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el
medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar
colonias. (Duran et al, 2013)

Zapata et al, (2014). Establece que los medios de cultivo se clasifican dependiendo de las características
que se necesiten para su óptimo desarrollo los cuales según su consistencia pueden ser:

 Líquidos: no contienen agar y favorecen el crecimiento bacteriano ya que las bacterias poseen una
gran libertad de movimiento y al difundirse por todo el medio encuentran su componente nutritivo y
requerimiento de oxigeno más óptimo con gran facilidad, por ejemplo: las aerobias estrictas crecen en los
primeros 10-15mm de la superficie del medio, las microaerofilas ligeramente por la superficie del medio,
las anaerobias estrictas en los 10-20mm del fondo y las facultativas por todo el medio.
 Solidos: su concentración de agar es de 1.5% a 2%, en estos las bacterias crecen con mayor dificultad,
ya que los nutrientes pueden agotarse fácilmente, se utilizan para ver colonias, aislar microorganismos,
características de crecimiento, color, tamaño, taxonomía, entre otros.
 Semi-solido: su concentración de agar es de 0.5% y se utiliza para estudiar el movimiento y algunas
propiedades bioquímicas.

19
Los medios de cultivo usados en el laboratorio fueron:
 Agar nutritivo: está compuesto de extracto de carne, peptona, NaCl, agar y agua destilada. Se usa
como medio de cultivo general para la mayor parte de los microorganismos y como base para la
preparación de medios selectivos y enriquecidos.

 Caldo nutritivo: es un medio líquido compuesto por una infusión de carne, NaCl, peptona, extracto de
levadura y también fosfato disódico. Es usado como base para otros caldos que puedan contener más
nutrientes.

2.2.12 Fermentación
Cuando se habla de fermentación, se refiere al proceso metabólico energético que comprende la
descomposición de moléculas, tales como carbohidratos, de manera anaerobia. El proceso de
fermentación es producido por acción de las enzimas, las cuales producen cambios químicos en las
sustancias orgánicas. Las fermentaciones pueden ser: naturales, cuando
lascondicionesambientalespermitenlainteraccióndelosmicroorganismosylossustratosorgánicos
susceptibles o artificiales, cuando el hombre propicia condiciones y el contacto referido. (Sansen y
Vargas, 2009).

2.2.13 Fermentación láctica


La fermentación láctica es un proceso celular anaeróbico donde se
utilizaglucosaparaobtenerenergíaydondeelproductodedesechoeselácido láctico. Este proceso lo
realizan muchas bacterias (llamadas bacterias lácticas),hongos, algunos protozoos y en los tejidos
animales; en efecto, la fermentación láctica también se verifica en el tejido muscular cuando, a causa
de unaintensaactividadmotora,noseproduceunaaportaciónadecuadadeoxígenoque
permitaeldesarrollodelarespiraciónaeróbica.Cuandoelácidolácticose
acumulaenlascélulasmuscularesproducesíntomasasociadosconlafatiga muscular, Algunas células,
como los eritrocitos, carecen de mitocondrias de manera que se ven obligadas a obtener energía por
medio de la fermentación láctica; por el contrario, las neuronas mueren rápidamente ya que no
fermentan, y su única fuente de energía es la respiración. (Sansen y Vargas, 2009)

2.2.14 Fermentación sumergida


La fermentación en cultivo sumergido se basa en la presencia de un cultivo de materias sumergidas
libremente en el seno del líquido a fermentar, en el que constantemente se introduce aire (solo o

20
enriquecido con oxígeno) en condiciones que permitan la máxima transferencia posible desde la fase
gaseosa a la fase líquida, mediante agitación con el fin de conservar la homogeneidad del sistema en un
cultivo discontinuo de microorganismos en medio líquido (García, 2002).En un cultivo discontinuo de
microorganismos en medio líquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la evolución de los parámetros
que miden el crecimiento microbiano:

1.- Fase de adaptación: los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas condiciones
ambientales (abundancia de nutrientes y condiciones de cultivo) para iniciar la fase de crecimiento
exponencial.
2.- Fase exponencial o logarítmica: en ella la velocidad de crecimiento es máxima y el tiempo de
generación es mínimo. Durante esta fase las bacterias consumen a velocidad máxima los nutrientes del
medio.
3.- Fase estacionaria: en ella no se incrementa el microorganismo (ni la masa u otros parámetros del
cultivo). En la fase estacionaria se desarrolla un metabolismo diferente al de la fase exponencial y durante
ella se produce una acumulación y liberación de metabolitos secundarios que pueden tener importancia
industrial.
4.- Fase de muerte: se produce una reducción del número de bacterias viables del cultivo, (Figura 2.5)

Figura 2.5.Fases del crecimiento microbiano. (García, 2002).

El cultivo sumergido, también llamado fermentación líquida, es el que se refiere a un sistema en el cual
los sustratos están disueltos o suspendidos en un medio acuoso y son agitados para conservar la
homogeneidad del sistema. Este sistema de fermentación tomó auge durante la II Guerra Mundial debido a
que la producción de antibióticos como la penicilina, hizo que el desarrollo de tecnología y equipamiento
para este tipo de fermentación se desarrollara de manera acelerada aun cuando el sistema de fermentación
en estado sólido es más antiguo, (Betancourt, 2003)

21
2.2.15 Ácido láctico
Fue descubierto en 1780 por un químico sueco llamado Scheele quien lo aisló de la leche agria.
Posteriormente se apreció este mismo en la sangre humana. En 1839 se produjo por primera vez ácido
láctico por fermentación de carbohidratos como sacarosa, lactosa, manitol, almidón, entre otro. Sin
embargo, el procedimiento industrial sólo se estableció en 1881, (Suriderp, 1995).

El ácido láctico, cuyo nombre químico es ácido 2-hidroxipropanóico o ácido α-hidroxipropiónico,


se representa por la estructura molecularCH3CH(OH)COOH. Se han reportado tres isómeros de este ácido,
(Suriderp. 1995)

El ácido láctico tiene un carbono asimétrico lo cual da lugar a actividad óptica. Existen dos isómeros
ópticos, el D(-) ácido láctico y L(+) ácido láctico (Figura 2.6), además de una forma racémica
constituida por 2 fracciones equimolares de las formas L(+) y D(-) obtenida por fermentación de lactosa
mediante la acción de microorganismos. El ácido D(-) Láctico se obtiene por fermentación de
azúcares como la saca rosa a través de bacilos como el Acidilaevolactiti. Las dos formas se
encuentran en estado líquido, siendo incoloros y solubles en agua. En estado sólido son altamente
higroscópicos de punto de fusión bajo. Ambas formas isoméricas pueden ser polimerizadas y se pueden
producir polímeros con diferentes propiedades dependiendo de la composición (Serna y Rodríguez, 2005).

Figura 2.6. Estructuras isométricas del ácido láctico (Serna y Rodríguez, 2005).

2.2.16 Propiedades del ácido láctico


El ácido láctico es un líquido viscoso, sin olor, sin color y no volátil. Es soluble en todas las proporciones
en el agua, en el alcohol y en el éter; insoluble en benceno y en cloroformo. Tiene una densidad
relativa entre 1,21 y 1,23 a temperatura de 25 °C. A nivel comercial puede tener concentraciones de
40 %, 75 % y 80 %.

22
El ácido láctico que se obtiene por fermentación es de color amarillento y tiene impurezas como
ácidos orgánicos (acético, butírico, tartárico, cítrico), sales minerales, azúcares, glicerina, etc. Ver tabla
2.3

Tabla 2.3. Propiedades fisicoquímicas del ácido láctico


Formula empírica C3H6O3
Peso molecular 90,08 g/mol
Gravedad especifica 1,249 a 15°C/4°C
Punto de fusión D(-) y L(+) : 52,8 a 54 ºCD y L (según su composición): 16,8 a 33 ºC
Índice de refracción 1,4414
Calor de combustión 3616 cal/g
Viscosidad 28,5 cp.
Densidad 1,1748 g/mL
Fuente: Perry & Green (2001).

2.2.17 Producción biotecnológica de ácido láctico


El ácido láctico tiene un amplio rango de aplicaciones en la industria alimenticia, química,
farmacéutica, cosmética, entre otras. Recientemente se ha acelerado la investigación del ácido láctico,
por vía biotecnológica, debido a su posibilidad de transformación en poli-láctico biodegradable
(PLA). Los esfuerzos en la investigación del ácido láctico, están enfocados a disminuir los costos de
producción a través de nuevos sustratos, nuevas tecnologías de fermentación y separación, y nuevos
microorganismos capaces de alcanzar altas concentraciones de ácido láctico, altos rendimientos y
altas productividades (Serna y Rodríguez, 2005).

2.2.18 Usos y especificaciones de ácido láctico


El ácido láctico y sus derivados como sales y ésteres son ampliamente utilizados en la industria
alimenticia, química, farmacéutica, del plástico, textil, la agricultura, alimentación animal, entre
otros. En la industria alimenticia se usa como acidulante y conservante. Las industrias químicas lo
utilizan como solubilizador y como agente controlador de pH. En la producción de pinturas y resinas,
puede ser utilizado como solvente biodegradable. En la industria de polímeros es utilizado como
precursor del poli (ácido láctico) (PLA), un polímero biodegradable con interesantes usos en la industria y
la medicina; se considera ésta la principal aplicación del ácido y la causa por la cual ha aumentado
considerablemente su demanda (Chang, 1999).

23
2.2.19 Parámetros de relevancia en la producción de ácido láctico.

 pH:
El pH de la fermentación puede fijarse al comienzo y permitirse disminuir debido a la producción del
ácido, o puede ser controlado por titulación, extracción, absorción o electrodiálisis del ácido láctico. Su
efecto ha sido estudiado bajo diferentes valores. En todos los casos, la titulación a un pH constante ha
resultado en concentraciones iguales o mayores, en comparación con los casos donde no hay control de
este. El pH óptimo para la producción de ácido láctico varía entre 5.0 y 7.0. Un pH menor a 5.7 ha sido
óptimo para las cepas de Lactobacillus, las cuales son conocidas por tolerar menores valores de pH que las
Lactococci. (Suárez, 2007).

 Temperatura:
El efecto de la temperatura en la producción de ácido láctico ha sido estudiado en pocos reportes. La
temperatura que da mayores productividades es en algunos casos menores que la temperatura que resulta
en el mayor rendimiento y concentración de ácido láctico, mientras que en otros la misma temperatura
obtuvo los mismos resultados en todas las categorías. Por ejemplo, para el Lactobacillus casei y
Lactobacillus paracasei la temperatura óptima fue reportada entre 37 y 44ºC (Suárez, 2007).

 Densidad Celular:
Las más altas densidades celulares (48-103 gr/L) han sido logradas con recirculación, pero en
fermentaciones sin recirculación se han alcanzado concentraciones entre 60 y 77 g/L de células. La
fermentación de las LAB, por lo general está acompañada de un incremento en la masa celular, lo que
constituye un subproducto indeseado si el objetivo del proceso es la producción de ácido láctico. Pero, al
obtener altas concentraciones de microorganismos, estos pueden ser usados como las materias primas
principales en la producción de probióticos (Suárez, 2007).

 °Brix
Para los zumos de fruta, un grado Brix indica cerca de 1-2 % de azúcar por peso. Ya que los grados Brix
se relacionan con la concentración de los sólidos disueltos (sobre todo sacarosa) en un líquido, tienen que
ver con la gravedad específica del líquido. La gravedad específica de las soluciones de la sacarosa también
puede medirse con un refractómetro. Por su facilidad de empleo, los refractómetros se prefieren sobre los
aerómetros marcados para la escala de Brix.

24
 Acidez titulable
En alimentos el grado de acidez indica el contenido en ácidos libres. Se determina mediante una
valoración (volumetría) con un reactivo básico. El resultado se expresa como el porcentaje del ácido
predominante en el material. En aceites es el porcentaje en ácido oleico, en zumo de frutas es el porcentaje
en ácido cítrico, en leche es el porcentaje en ácido láctico (Mora O., 2010). La acidez de una sustancia se
puede determinar por métodos volumétricos. Ésta medición se realiza mediante una titulación, la cual
implica siempre tres agentes o medios: el titulante, el titulado (o analito) y el indicador.

 Espectrofotometría de infrarrojo
Se emplea comúnmente para determinar la presencia de los distintos tipos de enlaces y grupos funcionales
en un material o una solución. Esta técnica somete al compuesto a radiación infrarroja en la banda de
longitudes de onda de 2 a 15 micrómetros (μm). Esta región se describe más a menudo en términos de
número de onda (frecuencia), 5000 cm-1 a 670 cm-1, que es fundamentalmente el número de ciclos u
ondas en una distancia de un centímetro, calculado como 1/λ, con λ en centímetros. Aunque esta radiación
es débil e incapaz de causar una alteración permanente en una molécula, suministra energía suficiente para
que sus enlaces vibren por alargamiento, tijereteo, flexión, balanceo, torsión o coleo. Puesto que los
distintos enlaces y grupos funcionales adsorben energía a frecuencias diferentes, los espectros en el
infrarrojo se aplican ordinariamente en el análisis cualitativo, es decir, en la determinación de los tipos de
grupos que hay en una molécula (Phillip et al., 1998).

El método de manejo de la muestra para registrar el espectro infrarrojo viene generalmente condicionado
por el estado físico de la misma y la región en que se desea registrar. Las muestras de líquidos, pueden
efectuarse como líquidos netos (puros) o en disolución; pueden prepararse colocando una o dos gotas
pequeñas de la muestra entre dos piezas muy bien pulidas del material de la celda. Por otro lado las
muestras sólidas pueden prepararse como dispersiones sólidas en bromuro de potasio (KBr); se emplea
aproximadamente 1 % en peso de la muestra y de KBr con un molino hasta obtener partículas de grano
muy fino. La mezcla final molida se prensa hasta obtener un disco transparente por la acción de varias
toneladas de presión (Pasto y Johnson, 2003).

La interpretación de un espectro infrarrojo no es sencilla; ciertas bandas pueden estar enmarcadas por el
solapamiento de otras. Pueden aparecer sobretodos a frecuencia exactamente el doble que la banda
fundamental. Los compuestos presentan en estos espectros una serie de complicada de picos agudos y de
mínimos. Ahora bien, es precisamente esta multiplicidad de picos lo que convierte el espectro en

25
específico; en efecto, no existen dos compuestos que den espectrogramas idénticos. Así, la identidad del
espectro de una sustancia problema con el de una sustancia patrón se acepta como prueba de su identidad
de composición. La ventaja que ofrece este método frente a otras técnicas espectrofotométricas, es la
posibilidad de identificar rápida y directamente los elementos estructurales individuales (Skoog y West,
1986).

2.2.20 Técnicas de Polimerización del ácido láctico para obtener ácido Poliláctico (PLA).
El ácido láctico utilizado en la polimerización para la producción de PLA debe ser de alta pureza. Los
polímeros basados en ácido láctico, pueden manufacturarse en diferentes rutas de polimerización, (Serna
et al., 2003). El ácido poliláctico se puede obtener básicamente por dos vías: vía policondensación del
ácido láctico y vía polimerización por apertura de anillo de lactida tal como se representa en la Figura 2.7
(Ren, 2010).

Figura. 2.7. Síntesis de PLA a partir de ácido. (Ren, 2010).

Policondensación
El método de policondensación directa, se inicia con una oligomerización o deshidratación donde se
esterifica por medio de una destilación reactiva al vacío y posteriormente, una segunda etapa de

26
polimerización, en presencia de un catalítico a alta temperatura y vacío. Por este método se obtienen
productos de bajo peso molecular (Jiménez P. et al., 2012).
El monómero del ácido láctico presenta tantos grupos hidroxilo como carboxilo; esto conlleva que la
reacción se produzca directamente por autocondensación. La policondensación del ácido láctico incluye
dos reacciones de equilibrio: el equilibrio de deshidratación por esterificación, y el equilibrio de
despolimerización del PLA dando el dímero lactida (Figura 2.8) (Ren, 2010).

Figura 2.8. Reacciones de equilibrio que aparecen en la policondensación directa de LA. (Ren, 2010)

El agua generada en este proceso puede causar la descomposición del PLA de alto peso molecular a
temperaturas de reacción elevadas. Así, el polímero resultante de estas reacciones generalmente tiene un
peso molecular demasiado bajo (Valls, 2012). El PLA formado por este método consiste principalmente
en unidades de lactilo. Tal polímero se puede componer tanto de un isómero (L o D) o de una
combinación de ambos, en diversas proporciones.

Una de las desventajas de la policondensación directa es que normalmente se obtiene un polímero de bajo
peso molecular que muestra propiedades mecánicas deficientes, lo cual se debe al aumento severo de la
viscosidad en estado fundido y la alta temperatura de funcionamiento. Además, la estero regularidad no se
puede controlar durante el curso de la polimerización (Valls, 2012).

Luego se explica el mecanismo de la oligomerización a continuación (Ver figura 2.9 y 2.10)

27
Figura 2.9 Mecanismo de la oligomerización.

Figura 2.10 Reacción de poli condensación del ácido láctico.

28
Polimerización por apertura de anillo
La polimerización por apertura de anillo (ROP) es el método más utilizado para la obtención de PLA. Esta
reacción requiere una estricta pureza de la lactida, lo que lo hace más bien caro y por tanto difícilmente
competitiva con los polímeros actuales. Se necesita un catalizador y una atmosfera inerte o al vacío. Al
controlar el tiempo de residencia y las temperaturas en combinación con el tipo de catalizador y
concentración, es posible controlar la relación y la secuencia de las unidades de isómeros D y L en el
polímero final (Valls, 2012). Dependiendo del sistema iniciador, las ROP pueden llevarse a cabo a través
de un mecanismo de coordinación/inserción, aniónico, catiónico, de hidrógeno activo, o de radicales
libres.

La ROP de lactida es catalizada por metales tales como el estaño, plomo, zinc, bismuto, itrio, hierro,
aluminio y magnesio, y lantánidos. Incluso bases fuertes tales como alcóxidos metálicos se han utilizado
con cierto éxito (Henton et al., 2005).

El mecanismo (Figura 2.9) implica una etapa previa de iniciación en la que se convierte en estaño (II)
alcóxido por reacción con un alcohol. Después la polimerización sigue en el enlace de estaño-oxígeno del
ligando alcóxido. Los catalizadores altamente activos preparados utilizando compuestos de estaño son
tóxicos. Sin embargo, otros compuestos catalizadores basados en estaño, tales como compuestos orgánicos
de estaño y octanoato de estaño presentan una toxicidad baja (Valls, 2012).

Figura 2.11 Mecanismo de crecimiento de cadena generalizado por coordinación/inserción de


lactida a PLA. (Montero, 2012)

Las condiciones típicas para la polimerización son de 180-210ºC, las concentraciones de octonoato de
estaño de 100-1000 ppm, y un periodo de tiempo entre 2 y 5 h para alcanzar el 95% de conversión, con
pesos moleculares de hasta 106 g/mol. La polimerización es de primer orden en tanto catalizador y lactida.
Frecuentemente que contienen hidroxilo iniciadores tales como 1-octanol se utilizan para el control tanto
peso molecular y acelerar la reacción (Montero, 2012).

29
2.2.21 Ácido Poliláctico
El poli (ácido láctico) (PLA), es un biopolímero termoplástico cuyo monómero es el ácido láctico, ver
figura 2.10. Debido a su biodegradabilidad, propiedades de barrera y biocompatibilidad, éste biopolímero
ha encontrado numerosas aplicaciones ya que presenta un amplio rango inusual de propiedades, desde el
estado amorfo hasta el estado cristalino; propiedades que pueden lograrse manipulando las mezclas entre
los isómeros D (-) y L (+), los pesos moleculares y la copolimerización (Castro y Lugo, 2013).

Figura 2.12. Poli (ácido Láctico) (PLA). (Castro y Lugo, 2013).

2.2.22 Propiedades del PLA


Las propiedades físicas y mecánicas dependen de la composición del polímero, de su peso molecular y de
su cristalinidad. La cristalinidad puede ajustarse desde un valor de 0% a 40% en forma de homopolímeros
lineales o ramificados, y como copolimeros al azar o de bloque. La temperatura de transición vítrea (Tg)
está entre 60 y 125°C y depende de la proporción de D o L ácido láctico en el polímero. Sin embargo, el
PLA puede ser plastificado con su monómero o alternativamente con ácido láctico oligomérico y esto
permite disminuir la Tg (Castro y Lugo, 2013).

El PLA tiene propiedades mecánicas en el mismo rango de los polímeros petroquímicos, a excepción de
una baja elongación. Sin embargo, esta propiedad puede ser afinada durante la polimerización (por
copolimerización) o por modificaciones post polimerización (por ejemplo plastificantes). El PLA puede
ser tan duro como el acrílico o tan blando como el polietileno, rígido como el poliestireno o flexible como
un elastómero. Puede además ser formulado para dar una variedad de resistencias. Al PLA se le atribuyen
también propiedades de interés como la suavidad, resistencia al rayado y al desgaste (Castro y Lugo,
2013).

30
2.2.23 Aplicaciones del PLA
La aplicación más común del PLA es en envases y empaques para alimentos. Sin embargo, el alto
crecimiento fúngico en los materiales obtenidos de bases biodegradables es un factor negativo para el uso
en alimentos. Por lo tanto, los bioempaques son más convenientes para alimentos con alta respiración y de
vida de almacenamiento corto como vegetales para el empaque de algunos productos de panadería. En los
tejidos vivos, el PLA se despolimeriza totalmente por hidrólisis química.

Esta característica hace que el PLA sea ampliamente utilizado para la producción de hilo para sutura,
implantes, prótesis, entre otros (Pinzón J. 2003). El consumo de PLA en 2007 fue de alrededor de 60 mil
toneladas y hasta el momento, sólo el 30% del ácido láctico producido se utiliza para fabricar PLA. El
productor más importante es sin dudas, NatureWorks (Nebraska, EEUU) con una capacidad de 140 mil
ton/año y precios de venta (por kilogramo) entre los € 2,5 y los € 5,5 (Castro y Lugo, 2013).

2.2.24 Biodegradación
La biodegradación es el resultado de los procesos de digestión, asimilación y metabolización de
un compuesto orgánico llevado a cabo por bacterias, hongos, protozoos y otros organismos, es un
proceso natural, ventajoso no sólo por permitir la eliminación de compuestos nocivos impidiendo su
concentración, sino que además es indispensable para el reciclaje de los elementos en la biosfera,
permitiendo la restitución de elementos esenciales en la formación y crecimiento de los organismos
(carbohidratos, lípidos, proteínas). La descomposición puede llevarse a cabo en presencia de oxigeno
(aeróbica) o en su ausencia (anaeróbica). (De Cabo, 2009).

2.2.25 Biodegradación de polímeros


Los polímeros biodegradables son aquellos capaces de ser degradados medio ambientalmente.
Representan una nueva generación de materiales capaces de reducir significativamente el impacto
ambiental en términos de consumo de energía y generación de residuos después de su utilización. En
principio, deben comportarse como los materiales plásticos tradicionales procedentes de fuentes
fósiles (petróleo), si bien, todavía presentan algunas limitaciones. (De Cabo, L. 2009).

La biodegradabilidad de los plásticos depende de la estructura química del material y de la


composición del producto final, no sólo de la materia prima empleada para su fabricación. Por esta
razón, podemos encontrarnos con materiales biodegradables obtenidos a partir de resinas naturales o
sintéticas (Esfefany, 2010)

31
2.2.26 Degradación enzimática
La degradación enzimática se realiza en tres pasos:

1) Degradación por difusión de agua en el material (inicialmente en las zonas más amorfas) seguida por
hidrólisis aleatoria.
2) La fragmentación del material a oligómero.
3) Hidrólisis más extensa acompañada por fagocitosis, difusión y metabolismo.
Durante la primera etapa de degradación, el peso molecular disminuye rápidamente con poca pérdida de
peso. Por el contrario, en la segunda etapa, se observa que la disminución en el peso molecular es menor,
así como una importante pérdida de peso y la iniciación de la formación de monómero. Durante la tercera
y última etapa, cuando se experimenta una pérdida de peso total, aproximadamente el 50% del polímero se
convierte a monómero. La hidrólisis de los oligómeros solubles continúa aún más, hasta que todo se
convierte en ácido láctico.

Generalmente, el tiempo de degradación es más corto cuanto menor sea el peso molecular, más hidrófilo y
más amorfo. Los polímeros a menudo pueden estar diseñados para satisfacer un tiempo de degradación
específico mediante la copolimerización, peso molecular y la selección de grupos terminales. (Valls,
2012)

2.2.27 Análisis costo-beneficio


El estudio costo beneficio tiene como objetivo fundamental proveer una medida de los costos en que se
incurren en la realización de un proyecto, y a su vez comparar dichos costos previstos con los beneficios
esperados de la realización de dicho proyecto (Solá, 2004).
Estimación de costo beneficio

El cálculo de la relación beneficio/ costo de los proyectos debe incluir todos los costos directos y no
directos de montaje y operación del proyecto, y los costos privados en que han incurrido los beneficiarios
durante la duración del proyecto. En tanto, que para los beneficios, se contabilizan las mejoras en la
productividad del proyecto. Es necesario tener presente que los costos son tangibles, es decir, se pueden
medir en alguna unidad económica, mientras que los beneficios pueden ser tangibles y no tangibles, es
decir, pueden darse en forma objetiva o subjetiva (Solá, 2004).

Pasos a seguir para llevar a cabo un análisis costo beneficio

32
 Determinar los costos relacionados con la ejecución del proyecto, los cuales si no se conocen con
exactitud pueden ser estimados. Para el cálculo de los costos del proyecto se deben considerar los
siguientes renglones: Mano de obra, materia prima, materiales y equipos, costos operativos varios, entre
otros. Es de hacer notar, que para la estimación de los costos del proyecto se debe tener en cuenta la
cantidad de material a producir.

 Para la valorización de los beneficios, se toma en cuenta criterios sociales y ambientales que tengan
gran significancia en la ejecución del proyecto. Existen beneficios que son tangibles para el proyecto,
debido a la entrada de recursos monetarios ocasionada por la comercialización del producto fabricado, o
aquellos que debido a su buen manejo de los recursos existentes han sido objeto de ahorros. En algunos
casos, a pesar que no se ha dispuesto de recursos monetarios por determinada acción, se ha dejado de
pagar esas cantidades de dinero como consecuencia del mejoramiento realizado con el proyecto.

Así mismo se encuentran otros tipos de beneficios, que se hacen difíciles de cuantificar; por ejemplo el
prestigio del proyecto por la fabricación del producto, el buen nombre de los autores por su compromiso
con el ambiente, el reconocimiento de organizaciones sociales y ambientales, la cantidad de clientes que
se ha captado; Además existen beneficios sociales orientados a evitar problemas con la comunidad
(demandas, problemas de salud, inactividad de labores, entre otros), problemas que perjudicarían el
desempeño del proyecto (Quiroga, 2005).

 Con los valores obtenidos para los costos y para los beneficios se procede a determinar la relación entre
ellos.

 El resultado obtenido para la relación costo / beneficio permite establece la factibilidad o no de ejecutar
el proyecto. En este sentido, si el resultado es menor que 1 el proyecto es rentable. Pero, si el resultado es
igual o mayor que 1 el proyecto no es viable, esto significa que los beneficios del proyecto serán iguales o
menores que los costos de inversión o costos totales.

33
CAPÍTULO III. MARCO METODOLÓGICO

El esta sección se presentan las herramientas empleadas en la búsqueda de consolidar los


conocimientos adquiridos de las literaturas, a través de una descripción detallada y esquematizada de
cada una de las etapas, pasos para el cumplimiento de cada uno de los objetivos planteados.

3.1 TIPO DE ESTUDIO O INVESTIGACIÓN


La presente es una investigación de campo ya que el análisis sistemático de problemas en la realidad,
con el propósito bien sea de describirlo, interpretarlos, entender su naturaleza y factores
constituyentes, explicar sus causas y efectos, o predecir su ocurrencia, haciendo uso de métodos
característicos de cualquiera de los paradigmas o enfoques de investigación conocidos o en desarrollo.
Los datos de interés son recogidos en forma directa de la realidad; en este sentido se trata de
investigaciones a partir de datos originales o primarios. Sin embargo, se aceptan también estudios
sobre datos censales o muéstrales no recogidos por el estudiante siempre y cuando se utilicen los
registros originales con los datos no agregados; o cuando se trate de estudios que impliquen la
construcción o uso de series históricas, y en general, la recolección y organización de datos publicados
para su análisis mediante procedimientos estadísticos, modelos matemáticos, econométricos o de otro
tipo. (Barrios, 2006)

A diferencia de la investigación de campo, la investigación experimental se caracteriza


fundamentalmente, por la manipulación y control de variables que ejerce el investigador durante el
experimento. En vista a la profundidad de los objetivos del estudio propuesto, la investigación puede
ser de carácter experimental también ya que es un proceso que consiste en someter a un objeto o grupo
de individuos a determinadas condiciones estimulo o tratamientos (variable independiente) para
observar los efectos o reacciones que se producen (variable dependiente). En cuanto al nivel, la
investigación experimental es demostrar que los cambios en la variable dependiente fueron causados
por la variable independiente, es decir, se pretende establecer con precisión una relación causa-efecto.
(Arias, 2006) debido a que se busca evaluar el proceso de obtención de ácido láctico del mango
(Mangifera indica L.) en función a las diferentes variables que influyen en el proceso de fermentación
para su posterior polimerización y obtener el ácido poliláctico.

3.2 DESARROLLO SISTEMÁTICO DE LA INVESTIGACIÓN


A continuación se presenta la investigación el cual se desarrollara bajo una serie de procedimientos
relacionados de forma sistematizada con estrategias que permitan alcanzar el objetivo general de la
misma.

34
Actividades Iniciales, en esta fase se identifica la problemática generada, que se hará, se recolecta toda
la documentación e información teórica de investigaciones similares, plantear diferentes medios de
soluciones a la problemática y establecen los objetivos e hipótesis, alcances y limitaciones.

Requisitos, se realizaran los procedimientos necesarios de forma teórica a fin de obtener enfoques
globales de la investigación de cómo se harán, definición de la muestra, se hará una revisión de la
disponibilidad de materia prima, de laboratorio, de equipos y de reactivos.

Organización, planificación del tiempo y costo de realización de actividades a desarrollar, tomando en


cuenta los objetivos seleccionados.

Ejecución, se realizan todas las pruebas necesarias para la obtención del polímero biodegradable y
recolección de datos.

Análisis, esta fase se realiza un estudio de la factibilidad de los resultados basados en los datos
obtenidos anteriormente.

Actividades finales, síntesis de los resultados, elaboración de conclusiones y propuestas de mejora.

3.3.- OPERACIONALIZACIÓN DE LOS OBJETIVOS

3.3.1 Seleccionar entre las diferentes especies de mango (Mangifera indica L.) cuál
posee mejores propiedades con la finalidad de utilizarlo como materia prima.

Debido a la gran diversidad de especies de mango existente, fue necesario llevar a cabo el proceso de
selección de la especie de mango (Mangifera indica L.) que posea las mejores propiedades con la
finalidad de utilizarlo como materia prima, es por esto que se analizaron las especies de mango más
cultivadas a nivel nacional, para lograrlo de manera efectiva se procedió a una revisión bibliográfica
de los diferentes tipos, logrando así establecer un conjunto de parámetros para seleccionar la especie
de mango que se utilizará en el desarrollo de este trabajo. Una vez que se identificaron y
caracterizaron todas las especies que formarían parte de este estudio preliminar se procedió a construir
una matriz de Moddy. Para esto, se calculó el factor de peso para cada variable involucrada en la
matriz. Este factor de peso se determinó en función de la comparación de cada variable con ellas
mismas, estableciendo una ponderación de 1 para el parámetro de mayor prioridad, 0 para el de menor
prioridad, y 0,5 para variables idénticas. (Ver Apéndice A, Tabla 2).

35
La matriz de selección se construyó colocando los parámetros deseados en las filas y las especies de
mangos en las columnas. Los parámetros constituyen una evaluación para las especies de mangos; por
lo cual la matriz debe llenarse de forma vertical, asignándoles a los mismos una valoración
comprendida del 1 al 5, según el grado de cumplimiento del criterio; donde los valores cercanos al
límite inferior (uno) corresponde a los parámetros más desfavorables en las especies y al límite
superior (5) para los más favorables. Cabe destacar que la valoración de las especies es independiente
entre sí, pudiendo existir una o más de ellos que posean igual ponderación para un mismo criterio. La
selección se basó en el puntaje total obtenido por las especies de mango, el cual se calculó para cada
uno, como la sumatoria del producto entre la valoración y el factor de peso. Finalmente, se seleccionó
la especie de mango que obtuvo la mayor puntuación.

Las muestras de Mango (Mangifera indica L.) seleccionando se recolectaron en el Estado Carabobo
siguiendo el procedimiento establecido en la norma COVENIN 1769-81 “Frutos de Muestras”,
aplicando un muestreo de tipo aleatorio simple o al azar. El cual permitió la selección del fruto según
el aspecto físico y sin que estas muestras presentaran picaduras de insectos o deterioros debido al
entorno. Las muestras recolectadas fueron trasladadas al Laboratorio de Polímeros del Centro de
Investigaciones Químicas (CIQ) de la Facultad de Ingeniería de la Universidad de Carabobo, en el
cual fueron tratadas siguiendo el procedimiento que se describe a continuación y muestra en la Figura
3.1.

Los mangos luego de ser recolectaron fueron sometidos a un proceso de lavado con abundante agua
clorada para remover el sucio adherido a la piel así como también otros elementos indeseables que
pudiesen venir con el fruto durante la recolección (hojas, flores, partes de tallo, entre otros). Luego se
secaron y se le retiró toda la piel de forma manual, utilizando un cuchillo de acero inoxidable, sobre
una bandeja de plástico. Posteriormente se procedió al despulpado, para lo cual se desprendió la pulpa
del fruto mediante cortes transversales en forma de tajadas para la obtención de la mayor cantidad de
pulpa. Seguidamente, se licuó la pulpa y se almacenó en recipientes de plástico. Finalmente, se
refrigeró la pulpa procesada para su conservación y su posterior uso.

36
Figura 3.1. Procedimiento utilizado en el tratamiento de las muestras recolectadas.

Las muestras almacenadas fueron caracterizadas mediante una serie de parámetros que se nombran
seguidamente. El Contenido de Ceniza, pH, Contenido de Humedad y Grados Brix utilizando los
procedimientos que se describen a continuación:

Contenido de Ceniza: este proceso de caracterización se realizó siguiendo el procedimiento


establecido en la norma COVENIN 1783-81. Para esto, se pesó 4g de mango en un crisol y se colocó
en una mufla (Ver Figura 3.2) durante 5 horas a una temperatura de 550°C.

Figura 3.2. Mufla usada en la determinación de cenizas.

37
pH: se determinó mediante el procedimiento indicado en la norma COVENIN 1315-79 a través de la
utilización de un pHmetro (Ver Figura 3.3). Para esto se utilizó 10 g de pulpa de mango disueltos en
90mL de agua destilada.

Figura 3.3. pH-metro usado en la determinación del pH.

Contenido de Humedad:la humedad se determinó según el procesamiento estandarizado de la norma


AOAC (Asociación OfficialAnalyticalChesmist) 14.004 “Determinación de Porcentaje de Humedad”,
empleando un Analizador de Humedad Marca Ohaus MB45 (Ver Figura 3.4). Para esto, se pesó
alrededor de 3g de mago en una charola de aluminio que se colocó en el equipo. La diferencia de peso
de la charola luego del proceso es considerada para determinar el porcentaje de humedad.

Figura 3.4 Balanza usada en la determinación de humedad.

38
Grados Brix (ºBrix):se determinó siguiendo el procedimiento establecido en la norma COVENIN
924-83 y se utilizando un brixometro Marca ATC (Ver Figura 3.5). Con una varilla de vidrio se
colocó unas gotas de la muestra en el brixometro y luego de un minuto se realizó la lectura.

Figura 3.5. Brixometro usado en la medición de °Brix.

3.3.2 Seleccionar el microorganismo que se empleará en la fermentación del mango (Mangifera


indica L.) para obtener el ácido láctico.
Para la selección del microorganismo que se empleó para la obtención del ácido láctico por
fermentación del mango (Mangifera indica L.), se llevó a cabo una revisión documental para indagar
sobre las características y condiciones de las bacterias productoras de este ácido (Apéndice A, tabla 7).
Esta tabla se construyó gracias al contenido bibliográfico estudiado anteriormente donde se reflejaba
el comportamiento de una gran variedad de microorganismos utilizados en fermentaciones al igual que
en dicha investigación, y para esta se tomaron las mejores bacterias que pudiesen generar ácido
láctico. Con la información recopilada se construyó una matriz de selección por valoración de puntos.
Para lo cual se tomó en cuenta diferentes variables que influyen en el proceso, tales como:
temperatura, pH, trabajo de eje, tiempo de fermentación, producción y disponibilidad.

Posteriormente, se realizó una matriz de prioridades de Moody (Apéndice A, tabla 8) para lo cual se
tomó en cuenta la valoración obtenida anteriormente y las condiciones disponibles en el Laboratorio
de Facyt Biología para llevar a cabo el proceso. En esta matriz se ordenaron las variables ya
mencionadas por orden de importancia y debido a su influencia en el proceso se le asignaron valores
de 0 al menos importante y de 1 al más importante y 0,5 para variables idénticas, donde se tomó la
sumatoria de estos valores y se dividió entre el total general, obteniendo así el porcentaje de
valoración para cada una variable.

Para la valoración integralse construyó una matriz de asignación de valores (sección 4.2, Tabla 4.4).
La matriz de selección se construyó colocando los parámetros seleccionados en las filas y los tres tipos

39
de bacterias seleccionadas, y su respectivo porcentaje de valoración obtenido en la tabla anterior,
luego se procedió a llenar la matriz de forma vertical, asignándoles a los mismos una valoración
comprendida del 1 al 5, según el grado de cumplimiento del criterio; donde los valores cercanos al
límite inferior (uno) corresponde a los parámetros más desfavorables en las especies y al límite
superior (5) para los más favorables. La selección se basó en el puntaje total obtenido por los tipos de
microorganismos, el cual se calculó para cada uno, como la sumatoria del producto entre la valoración
y el factor de peso. Finalmente, se seleccionó la bacteria que obtuvo la mayor puntuación.

Luego de la selección del microorganismo se llevó a cabo una revisión bibliográfica para conocer
sobre los medios de cultivo más comunes que se emplean para el aislamiento de microorganismos
productores de ácido láctico (Ver Tabla 3.1).

Tabla 3.1. Medios de cultivo utilizados en microorganismos productores de ácido láctico.

Sólidos líquidos
Medios/
Agar Agar Papa Agar Agar Caldo
Componentes
MacConkey Dextrosa(PDA) nutritivo (M.R.S) nutritivo
Extracto de carne
-- 10 3 8 3
(g)
Peptona (g) 17 -- 5 10 5
Agar (g) 13,5 18 15 13 --

Papa (g) -- 200 -- -- --


NaCl (g) 5 -- 5 -- 0,5
Agua Destilada
1000 1000 1000 1000 1000
(mL)
Fuente: Elaboración propia 2017.

Ahora bien, para el aislamiento del microorganismo empleado se realizó una identificación
morfológica. Para lo cual se preparó un medio de cultivo sólido y uno liquido de la siguiente manera:
Para el medio sólido, se pesó en una balanza analítica 11,5 g de Agar nutritivo. Esta cantidad, se
colocó en un matraz de 1.000 mL en el cual se disolvió con 500 ml de agua destilada.Posteriormente el
matraz fue tapado con papel de aluminio y se colocó en un autoclave Kalstein Modelo AMR-18/75 a
una presión de 15 psi y a una temperatura de 121ºC por un tiempo de 15 min (Ver Figura 3.6). Luego,
se dejó enfriar el medio de cultivo y colocó en placas Petri para su refrigeración. Para el medio
líquido, se utilizó 11,5 g de caldo nutritivo y se llevó a cabo el procedimiento señalado para el medio
sólido.

40
Figura 3.6. Medios de cultivo líquidos y sólidos.

Es de resaltar, que el microorganismos utilizado fue aislado del yogurt comercial (Migurt). Para esto,
se colocó 1 gramo de yogurt en una fiola con caldo nutritivo que fue encubada por 24 horas bajos las
condiciones que se describen en la Tabla 5, del Apéndice A. El procedimiento, se llevó a cabo en una
estufa marca Medilow a 37ºC. Posteriormente, se realizó una series de diluciones de10-1 a 10-6
sembradas en placas de petri con medio de cultivo sólido en condiciones de esterilización en una
campana de flujo laminar y con mechero Bushnepara asegurar condiciones asépticas. Luego, se
inoculó por agotamiento y se incubó a temperatura de 37 ºC nuevamente en la estufa por 72 horas.
Transcurrido el tiempo se evaluó el crecimiento en un microscopio de luz marca Leica. Para la
purificación de la bacteria se repicó en fiolas con el medio de cultivo por 48 horas para asíidentificar al
microorganismo mediante sus características microscópicas al conocer su forma con la prueba
deTinción de Gram, la cual es comparada con la morfología que se muestra en Tabla 3.2

Tabla 3.2. Identificación preliminar morfológica y perfil de ocho azucares.


Morfología bajo microscopio Identificación preliminar Identificación API 50 CHL
Cocos pequeños Pediococcuspentosauceus Lactobacilluspentosus
Cocos en parejas y cadenas cortas Lactobacillusacidophilus Lactobacillusplantarum 1
Cocos en pareja y cadenas cortas
Lactobacillusraffinolactis Lactobacillusacidophilus 3
Cocos en cadenas de 3 a 4
Cocos en pareja y cadenas cortas Leuconostoclactis Lactobacillusplantarum 1
Cocos en pareja y cadenas cortas Lactococusraffinolactis Lactobacillusbrevis 1
Fuente: Cruz Juan, (2006).

Por su parte, para el proceso de fermentación se utilizó una botella de plástico de 2000 mL como
fermentador, la cual fue modificada en el laboratorio. Para esto, se esterilizó y se le agregó 1 litrodel
medio de cultivo que contenía 200 g de mango con 40 mL del microorganismo aislado, así como los
nutrientes que se muestran en Tabla 3.3. Además, se le agregó CaCO3para ajustar el pH del sistema a
6. Posteriormente, se colocó el medio en una incubadora a 37°C y con una agitación de 150 rpm (ver
Figura 3.7). Este procedimiento se llevó a cabo en el Laboratorio de microbiología de Facyt Biología
de la Universidad de Carabobo.

41
El seguimiento del proceso se realizó mediante la medición parámetros como: la temperatura, los
°Brix y el porcentaje de ácido láctico producido. Estos parámetros fueron medidos cada 24 horas por 3
días consecutivos. Es de señalar, que para el cálculo del porcentaje de ácido láctico se tomó el
procedimiento descrito por Medina et al, (2014), el cual consiste en la titulación de 1 mL de muestra
fermentada con hidróxido de sodio (NaOH) 0,1 N, empleando fenolftaleína como indicador.

Este procedimiento se realizó por triplicado y empleando diferentes bacterias, y una mezcla de ambas
cuyo comportamiento se encuentra en el Apéndice A, Tabla 12.

Tabla 3.3. Nutriente utilizados en la preparación del medio de cultivo


Fosfato de Sulfato de Sulfato de Carbonato de
Sulfato de magnesio
potasio amonio zinc calcio
(g/L)
(g/L) (g/L) (g/L) (g/L)
0,40 2 0,25 0,4 30
Fuente: Hernández y Veitia (2015).

Figura 3.7. Fermentación del mango

Una vez finalizado el periodo de fermentación se procedió a la separación y recuperación del ácido
láctico producido. Para esto, se calentó la solución hasta los 80°C por 15 min para asegurar que los
microorganismos quedaran inactivos. Posteriormente, se filtró en un embudo de separación con papel
de filtro. El líquido obtenido se utilizó en el proceso de purificación, el cual consistió inicialmente en
centrifugar el filtrado con el propósito de eliminar las células muertas de Lactobacillus Bulgaricus
oBacillus thermophilic que aun pudieran existir. Luego, se realizó un proceso de separación líquido-
líquido con la finalidad de separar el ácido láctico del agua. Esto se llevó a cabo en un beaker de 500
mL. En el cual, la solución se acidificó con ácido clorhídrico (4N) hasta pH 3, esto es para aumentar la
concentración de ión H+y de esta manera favorecer el desplazamiento del equilibrio hacia la formación

42
del ácido láctico, y así incrementar la producción de ácido láctico durante su la extracción, tal como se
muestra en la siguiente reacción:

𝐂𝟔 𝐇𝟏𝟎 𝐎𝟔 𝐂𝐚 + 𝟐𝐇𝐂𝐥 + 𝟑𝐇𝟐 𝐎 → 𝐂𝟑 𝐇𝟏𝟎 𝐎𝟑 + 𝐂𝐚𝐂𝐥𝟐 + 𝟖𝐇 + 𝟑 𝐂𝐎𝟐

Posteriormente, se adicionó 30 mL de acetato de etilo. Luego, se agitó a 150 rpm durante 30 minutos,
y se transfirió a un embudo de separación de 250 mL de capacidad, (Ver Figura 3.8). En el cual, se
separó la fase orgánica de la acuosa. A la fase orgánica se le agregó sulfato de sodio anhidro para
extraer el agua remanente. Luego se destiló simple con la finalidad de separar el solvente orgánico del
ácido láctico para obtener de esta manera el producto purificado, el cual recolectado en una fiola y
almacenado para su posterior uso. (Ver Figura 3.9).

Figura 3.8. Proceso de separación del ácido láctico

Figura 3.9.Ácido láctico obtenido de la fermentación.

3.3.3 Caracterizar físico-químicamente el ácido láctico obtenido para verificar su rendimiento.

43
Para la caracterización del ácido láctico obtenido se llevó a cabo diferentes ensayos de laboratorio,
tales como: Índice de refracción, acidez, densidad, pH, viscosidad, y Espectrometría de infrarrojo (IR).
El procedimiento utilizado en cada uno de los ensayos realizados se describe a continuación.

Índice de refracción
Para la determinación del índice de refracción se utilizó la norma COVENIN 702:2001 el cual
establece que a través de un refractómetro normal equipado con escala normalizada, para dicha lectura
se limpiaron los prismas primeramente con alcohol y un algodón y luego con agua destilada para
calibrar dicho equipo, luego una vez seco los primas se colocaron 2 gotas de ácido láctico en el prisma
inferior, se cerró y se apretó, se dejó reposar unos minutos para que la muestra llegara a la temperatura
del instrumento, se ajustó el instrumento y la luz para dar una lectura nítida del índice de refracción.
Una vez obtenido el resultado se limpió nuevamente con alcohol y algodón y luego con agua destilada.

Acidez titulable
De acuerdo a la norma COVENIN 658:1957 para la acidez titulable se pesó 5gde ácido láctico
posteriormente fueron diluidos en 100mL de agua destilada, luego fueron transferidos 10ml de la
muestra a unafiolade 250 mL, se agregaron 5 gotas de fenolftaleína al 1% como indicador y se
procedió a titular con solución de hidróxido de sodio 0,1N hasta obtener un color rosado claro
persistente por 30 segundos aproximadamente.

Densidad
A través de la norma COVENIN 1116:77 con un pequeño envase de vidrio llamado picnómetro que se
utiliza para medir las densidades de los líquidos, en este caso fue utilizado para medir la densidad del
ácido láctico. En el Laboratorio de Ingeniería Química (LIQ) mediante diferencia de pesos entre
vacío, lleno y el volumen del picnómetro.

pH
Se determinó mediante el procedimiento indicado en la norma COVENIN 1315-79 a través de la
utilización de un pHmetro Marca Bencht .Para la lectura del pH primero, se sumergió el
potenciómetro en un vaso precipitado que contenía agua destilada, se secó el electro con papel
absorbente, luego se calibro previamente con una solución buffer 4, finalmente se tomó la muestra de
ácido láctico y se colocó en un vaso de precipitado, para dar una lectura optima del pH.

Viscosidad
Para el cálculo de la viscosidad del ácido láctico fue empleado un dispositivo llamado viscosímetro de
Ostwald, éste permite conocer la velocidad de flujo de un líquido a través de un tubo, en función de la
diferencia de presiones bajo las que se establece el desplazamiento. Su cálculo viene dado por una

44
ecuación matemática que depende de los valores de densidad y viscosidad de una sustancia de
referencia (agua destilada a 27,5 ° C); además de la densidad del ácido láctico, siendo este valor
calculado anteriormente mediante el uso del picnómetro. Este equipo fue utilizado para medir la
viscosidad del ácido láctico (Laboratorio de Ingeniería Química).

Espectrometría de infrarrojo (IR).


La cantidad de muestras a analizar fueron 3, debido a que las muestras se encontraban en fase líquida
se analizaron directamente, sin mezcla alguna, colocando dos gotas de la muestra entre dos placas de
Bromuro de potasio (KBr), las cuales conforman parte de la llamada celda de muestras líquidas.
Una vez preparada la muestra líquida se colocó en el porta muestras y se insertó en el
espectrofotómetro. El espectro de cada muestra se corrió bajo diferentes condiciones hasta que se
obtuvo la mejor resolución, el cual debe presentar en lo posible bandas finas e intensas. Una vez
obtenido el espectro óptimo para cada muestra se estableció la escala del espectro (número de onda).
El espectrofotómetro utilizado fue un Perkin Elmer 1000, es un equipo que permite la determinación
cuantitativa de compuestos absorbentes de radiación electromagnética en solución, este equipo fue
utilizado para determinar el espectro infrarrojo de los grupos funcionales del ácido láctico y el
polímero en el Centro de Investigación Química (CIQ).

3.3.4 Polimerizar el ácido láctico para obtener ácido poliláctico (PLA).

Para la selección de método de polimerización del ácido láctico se construyó una tabla comparativa en
la cual se recopiló la información necesaria sobre los factores más relevantes a considerar ydonde se
indago sobre los diferentes métodos existentes y de mayor aplicación para obtener el ácido poli láctico
tomando en cuentas las característicasmás relevantes y las condiciones básicas para cada método con
la cual se pueda llevar a cabo la reacción de manera exitosa(Apéndice A, tabla 16). Esta tabla se
construyó con el fin de estudiar más a fondo los métodos involucrados y así tomar una mejor selección
del mismo. Posteriormente con la información recopilada anteriormente se construyó una matriz de
selección por valoración de puntos. Para lo cual se tomó en cuenta algunas variables que influyen
significativamente en el proceso, tales como:presión, temperatura, tiempo, tiempo y disponibilidad de
reactivos.

Luego, se realizó una matriz de prioridades de Moody (Apéndice A, tabla 17) para lo cual se tomó en
cuenta la valoración obtenida anteriormente y las condiciones disponibles en el Laboratorio de
Polímeros del Centro de Investigaciones Químicas de para llevar a cabo el proceso. En esta matriz se
ordenaron las variables ya mencionadas por orden de importancia y debido a su influencia en el
proceso se le asignaron valores de 0 al menos importante y de 1 al más importante y 0,5 para variables

45
idénticas, donde se tomó la sumatoria de estos valores y se dividió entre el total general, obteniendo
así el porcentaje de valoración para cada una variable.

Para la valoración integral se construyó una matriz de asignación de valores (sección 4.4, Tabla 10).
Donde la matriz de selección se construyó colocando los parámetros seleccionados en las filas y los
tres métodos más utilizados para la polimerización se colocaron en las columnas con su respectivo
porcentaje de valoración obtenido en la tabla anterior, luego se procedió a llenar la matriz de forma
vertical, asignándoles a los mismos una valoración comprendida del 1 al 5, según el grado de
cumplimiento del criterio; donde los valores cercanos al límite inferior (uno) corresponde a los
parámetros más desfavorables en las especies y al límite superior (5) para los más favorables. La
selección se basó en el puntaje total obtenido por los diferentes métodos, el cual se calculó para cada
uno, como la sumatoria del producto entre la valoración y el factor de peso. Finalmente, se seleccionó
el método que obtuvo la mayor puntuación.

Para la obtención del ácido poliláctico se utilizó el procedimiento propuestopor Hernández y Veitia.,
(2014); Medina et al, (2014); y Estupiñán et al, (2007), consistente en oligomerización seguida de la
poli condensación. Para esto, se realizó el montaje que se muestra en laFigura 3.10.

1.- Oligomerización: Al inicio del proceso de oligomerización se colocó 200 mL de ácido láctico
obtenido en un balón de 250 mL, luego se calentó a 150ºC en un sistema de destilación al vacío. La
presión del sistema se redujo gradualmente de la siguiente manera: la primera hora se mantuvo en 5
pulgadas Hg de vacío, luego se disminuyó en 5 pulgadas Hg de vacío cada hora hasta llegar a la
mínima presión de vacío correspondiente a 22 pulgadas Hg de vacío.

Figura 3.10. Montaje de la polimerización por condensación.

46
2.- Policondensación: luego de la etapa de oligomerización, se agregó gota a gota 50mL de cloruro de
Estaño (II) dihidratado y ácido bórico, teniendo en cuenta que la cantidad del catalizador fuera de
0.4% en peso y la relación ácido catalizador de 1:1 molar¸ según lo propuesto por Tovar, (2015),
seguidamente, la mezcla se calentó a 170 °C bajo agitación magnética, la presión de la reacción se
mantuvo durante 4 horas en 22 in de Hg; (Pinzón et al., 2006). Se observó que durante el tiempo de
reacción, el sistema se volvió viscoso gradualmente. Posteriormente, se dejó enfriar y el producto
obtenido se disolvió en cloroformo.
La Caracterización del producto obtenido se realizó mediante Espectrometría Infrarroja con el fin de
identificar la presencia de los grupos funcionales presentes, y empleando el procedimiento descripto
en al apartad en sección 2.2.19.
Posteriormente se realizó un análisis estructural de las muestras con Espectrometría Infrarroja con el
fin de identificar la presencia de los grupos funcionales presentes en el polímero.

3.3.5.- Verificar la biodegradabilidad de la mezcla en estudio.


Para la verificación de la biodegradación del producto obtenido se realizó un ensayo de degradación
hidrolítica empleando tres medios distintos: ácido, neutro y básico. Para cada medio, se colocó en un
tubo de ensayo 6 mL de solución amortiguadora de pH 4,5, de 7,00 y de 10 respectivamente (Ver
Figura 3.11). Luego se sumergió en cada tubo un trozo del polímero obtenido y se colocó en un baño
maría a 36 °C. El seguimiento de la degradación se realizó midiendo el pH de la solución cada 24
horas durante 4 días, tal como lo señala Hernández y Veitia (2014)

Figura 3.11. Tubos de ensayos utilizados en la prueba de degradación Hidrolítica.

3.3.6. Realizar un análisis costo-beneficio con el fin de determinar si es posible o no la propuesta.

Como último objetivo de la investigación, se procedió al análisis de los costos asociados al proceso de
producción del ácido poliláctico a nivel de laboratorio. Esta estimación se realizó tomando en cuenta
aspectos básicos, como son los costos de material, reactivos, análisis, caracterizaciones y mano de

47
obra del personal. Para conocer los costos asociados a la producción del ácido poliláctico se planteó un
sistema de ecuaciones que permitió evidenciar la influencia de su desarrollo dentro del laboratorio.
Uno de los elementos importantes tomados en cuenta fue la mano de obra al momento de realizar las
pruebas determinadas, este es un factor de gran importancia, ya que es el encargado del desarrollo de
las tareas y actividades a cumplir, con la ayuda de la infraestructura, materiales, instrumentos, entre
otros. El costo relacionado a este factor, está dictado por el sueldo base del trabajador y por los
beneficios y requisitos que establece la Ley a las instituciones para el respaldo de sus empleados. En la
Tabla 3.4 se presenta las especificaciones del salario de un ingeniero y un técnico Superior
Universitario.

Tabla 3.4 Valoración de un mes de trabajo de un ingeniero con hasta un año de experiencia
Valoración (Bs/mes)
Concepto Asignación Técnico Superior Profesional
Universitario Universitario
Salario promedio -- 63997,5 121900
FAOV (BANAVIH) 3% del salario promedio 1919,925 3657
15,5 % del salario
Seguro social (IVSS) 9919,6125 18894,5
promedio
Caja de ahorros 1% del salario promedio 639,975 1219
Relación equivalente a 3
Bono de fin de año veces el salario promedio 15999,375 30475
entre 12 meses
Relación equivalente al
Vacaciones salario promedio entre 12 5333,125 10158,33333
meses
250% de la Unidad
Bono adicional Tributaria por 30 días del 13275 13275
mes
Total -- 111084,5125 199578,8333
Fuente: Colegio de Ingenieros de Venezuela (CIV)

La tabla anterior indica que un ingeniero y un técnico de tipo P1 con experiencia de cero a un año,
debe cotizar un sueldo mínimo de 121.900 Bs y 63.997,5 Bs. Partiendo de la información antes
mencionada se calculó los costos de mano de obra. Ver tabla 3.5

Tabla 3.5 Cantidad y valoración del personal para la obtención del ácido poliláctico
Desembolso por
Personal N° de persona Pago mensual (Bs)
año (Bs/año)
Técnico 1 111084,51 1333014,12
Ingeniero 2 399157,66 4789891,92
Total 510242,17 6122906,04

48
De acuerdo con los datos de la tabla anterior, se estimó el costo de mano de obra, obteniendo que el
valor por realizar cada ensayo es de 510.242,17 Bs, de igual manera cabe destacar que el número de
ensayos al mes fue un estimado, en función de los días trabajados al mes y el total de personal.

Seguido a esto, se efectuó el análisis de los equipos utilizados para la producción del ácido poliláctico,
entre los equipos utilizados, los de mayor importancia son el Biorreactor, empleado en la etapa de
fermentación, y la bomba de vacío, empleado en la etapa de polimerización, destacando que estos
tipos de equipos en su mayoría son utilizados a nivel de laboratorio y permiten controlar diferentes
parámetros como presión, temperatura, pH, velocidad entre otras condiciones necesarias para el
desarrollo del proceso. Todos los equipos utilizados en el proceso son señalados en la Tabla 3.6.

Tabla 3.6 Costos de los equipos principales para la obtención del ácido poliláctico.

Costo total por


Equipos Costo por unidad ($) Cantidad requerida
equipo ($)

Biorreactor 5000 1 5000


Campana de flujo laminar 805 1 805
Balanza analítica 339 1 339
Olla de esterilización 1460 1 1460
Bomba de vacío 479 1 479
Brixometro 59 1 59
Agitador de muestras 280 1 280
Refractómetro 355 1 355
Plancha de calentamiento y
1118 1
agitación 1118
Estufa esterilizador 619 1 619
pHmetro digital 293 1 293
Incubador de microorganismo 600 1 600
Microscopio 300 1 300
Espectrofotómetro 6000 1 6000
Total 17709

También como aspecto importante se tomaron en cuenta los costos de los análisis y caracterizaciones
de la materia prima, así como también los productos intermedios y finalmente el producto final
reflejados a continuación en la tabla 3.7.

49
Tabla 3.7 Costos de los análisis y caracterización para la obtención del ácido poliláctico.

Descripción Costo (Bs/mes) Costo (Bs/año)


Caracterización de la materia prima 325.000,00 3900000
Análisis de control intermediario del
1.300.000,00 15600000
proceso
Caracterización del producto final 1.663.000,00 19956000
Total 3.288.000,00 39456000

La obtención de los costos de los reactivos representados en la Tabla 3.10 se realizaron en función del
consumo por muestra, estimando el precio por muestra de cada reactivo utilizado en el estudio. Para
este estudio se observaron que algunos costos son elevados comparados con los de los equipos,
muchos de ellos superior a la unidad, esto debido a que el precio de adquisición de algunos de los
reactivos son muy altos. Los costos de los reactivos son de gran importancia porque influyen de
manera directa en el valor de producción del ácido poliláctico, donde se registró que para la obtención
de un ensayo mensual el valor es de 16780,19 Bs Bs.

Tabla 3.8 Reactivos necesarios para la obtención del ácido poliláctico


Unidad Consumo Costo por Costo por
Unidad de
Reactivos de Bs/Unidad por muestra muestra
medida
compra muestra (Bs/día) (Bs/año)
Agar Kg Kg/muestra 1530000 0,001 1530 382500
Caldo nutritivo Kg Kg/muestra 2160000 0,001 2160 540000
Carbonato de
Kg Kg/muestra 1180000 0,003 3540 885000
calcio
Acetato de etilo L L/muestra 128000 0,03 3840 960000
Cloruro de estaño Kg Kg/muestra 560000 0,008 4480 1120000
Fosfato de potasio
Kg Kg/muestra 100000 0,00004 4 1000
diácido
Sulfato de
Kg Kg/muestra 100000 0,000025 2,5 625
magnesio
Sulfato de amonio Kg Kg/muestra 128000 0,0002 25,6 6400
Sulfato de zinc Kg Kg/muestra 176000 0,00004 7,04 1760
Ácido clorhídrico L L /muestra 78000 0,003 234 58500
Cloruro de sodio Kg Kg/muestra 104000 0,00085 88,4 22100
Hidróxido de sodio Kg Kg/muestra 7000 0,0005 3,5 875
Levadura kg Kg/muestra 172230 0,005 861,15 215287,5
Mango kg Kg/muestra 500 0,006 3 750
Yogurt kg g/muestra 1000 0,001 1 250
Total (Bs) 16780,19 4195047,5

50
La característica esencial fue el uso de costos predeterminados, como medida de control para cada
elemento durante los ciclos de producción. Los costos se calcularon una sola vez, donde cada
elemento se controló en forma adecuada, el costo total resulto del equivalente de los elementos
controlados.

A partir de las bases de datos, se obtuvieron los valores de los materiales como también, se realizó la
búsqueda de costos referenciales a los reactivos y equipos necesarios para la construcción del
experimento; se procedió a la estimación de los costos por adecuación de infraestructura, y el resto de
las actividades relacionada a la actividad de producción de ácido láctico a nivel de laboratorio.

Gracias a lo anterior expuesto se pudo realizar el estudio de costo/beneficio mediante cálculos,


formulas y modelos matemáticos designados para determinar la inversión total en lo que refiere a
activos fijos tangibles (equipos e infraestructura), activos fijos intangibles (trámites legales),
estimación de costos variables (materia prima, y servicios industriales), los costos de producción,
costo de manufactura (mano de obra, gastos administrativos y ensayos de caracterización y control) y
rentabilidad del proyecto.

51
CAPÍTULO IV. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
En este capítulo se presenta un análisis detallado de los resultados obtenidos en esta investigación.
Esto en base a los fenómenos involucrados con la finalidad de determinar la influencia que ejercen
los mismos en el desarrollo de los objetivos planteados.

4.1 Seleccionar entre las diferentes especies de mango (Mangifera Indica L.) cuál posee
mejores propiedades con la finalidad de utilizarlo como materia prima.

Tabla 4.1. Ponderación obtenida en la valoración de las diferentes especies de Mango


Analizadas

Ponderación según el tipo de Mango.


Parámetro
Bocado Hilacha Pico de Loro Manga

°Brix 72,42 96,56 24,14 120,7

pH 68,96 86,20 34,48 17,24

Pulpa 10,35 41,40 31,05 20,70

Peso 34,48 51,72 17,24 86,20

Cosecha 155,15 62,06 31,03 93,09

Total general. 341.36 337,94 137,94 337,93

En la Tabla 4.1 se muestra la ponderación obtenida en la matriz de selección elaborada con las
especies de mango que se analizaron. En ella se puede observar que la especie que presenta el mayor
contenido de grados Brix (ºBrix) es la manga con 120,7 puntos y el hilacha 96,56 esto se debe a que la
manga fue favorecida en la valoración de puntos ya que ella se caracteriza por ser intensamente dulce
(Ver Apéndice A, Tabla 1 ) concordando claramente con los resultados esperados sin embargos
aunque esta especie predomina ampliamente en esta característica no es un resultado definitivo, pues
al analizar los otros parámetros importantes se consiguieron resultados poco favorables para el
proceso, comparado con la cantidad de azúcar que posee el mango hilacha es por esta característica
que el hilacha es favorecido con 337,94 puntos con respecto a la manga que posee 337,93.

52
En cuando a la ponderación del pH se tiene que la especie hilacha obtuvo un valor de 86,20 puntos
seguida de la de bocado con 68,96 estos valores se deben que el pH que se requiere para la
fermentación debe estar cercano a 6, ya que es un medio casi neutro idóneo para el crecimiento de la
bacteria encargada de llevar a cabo el proceso de fermentación, por lo que el hilacha es el que más se
acerca al pH deseado es por esto que en la valoración de puntos se favorece el hilacha seguido del
mango bocado, representando así una variación porcentual de un 80% con respecto al de mayor
beneficio.

Ahora bien, en el peso la manga obtuvo 86,20 puntos mientras que el bocado 34,48 al comparar estos
valores se refleja que evidentemente la manga posee un mayor peso lo que involucra la semilla y esta
no se utiliza en el proceso y una mayor cantidad de pulpa lo que no ocurre con el mango bocado ya
que este posee un menor peso (Ver Apéndice A, Tabla 1) pero es favorecido en la valoración por otras
características como lo es el pH y el porcentaje de pulpa que este posee con respecto a la semilla que
este tiene en su interior, aportando así al total general del mango bocado 341,36 puntos. Favoreciendo
indiscutiblemente en este aspecto mostrando una marcada diferencia con el mango de bocado el cual
le sigue en este sentido.

En relación a la cosecha, parámetro que se consideró con mayor importancia debido a que permite
contar con la especie de mango el mayor tiempo durante el año, se tiene que bocado obtuvo 155, 15
puntos y la manga 93,09 puntos, esto debido a que el mango bocado representa la cosecha más larga
en el año, pudiendo producir hasta 2 cosechas al año característica muy importante ya que garantizaría
una gran cantidad de materia prima durante todo el año. Esta característica que se le atribuye al
potencial genético y a las características climáticas tropicales de nuestro país en el cual se desarrolla el
fruto. Además como último punto cabe destacar que estas cosechas suelen ser muy abundantes lo que
ayudaría a compensar fácilmente la ventaja que tiene la manga respecto a su peso el cual es superior
pero su cosecha no suele ser tan abundante. Es por lo que el mango bocado se favorece con un total
general de 341,36 puntos con respecto a las otras especies, lo que determina que esta es la especie que
posee los requerimientos más favorables para ser tomado como materia prima en el desarrollo de la
fermentación. .

En referencia al total general se tiene que el bocado acumuló 341,36 puntos y las especies hilacha y
manga 337,94 y 337,93 respectivamente. Con estos resultados, se establece que la especie de mango
(Mangifera Indica L.) que posee las mejores cualidades para ser utilizado como materia prima en el
desarrollo de este trabajo especial de grado es el, Bocado.

53
Tabla 4.2. Caracterización de la pulpa del Mango Bocado.

Características Experimental Referencia


pH (Adim) 5,53 ± 0,06 4,357 ± 1,8
°Brix (Adim) 15,06 ± 0,48 16,5 ± 0,15
Porcentaje de Humedad (%) 80,62 ± 0,83 81,35 ± 2,12
Porcentaje de Ceniza (%) 0,35 ± 0,06 0,66 ± 0,02

En la Tabla 4.2, se presentan los resultados de la caracterización de la pulpa del Mango Bocado. En
ella se observa que el valor del pH es de 5,53 Adim. .donde se puede apreciar que existe una diferencia
a lo reportado por Briceño et al, (2005) esto puede ser generado por diversos factores, tales como
tiempo de maduración o relacionado con el tipo de suelo en el cual fue cultivado y las características
del terreno, esto debido a que estas muestras se tomaron aleatoriamente de árboles cultivados sin
ningún tipo de fertilizante o abono que pudiese alterar su acidez en busca de mejorar la producción por
cada árbol. Sin embargo el valor no se encuentra tan lejano con lo reportado por la referencia siendo
este un valor aceptable para el proceso de fermentación. Adicionalmente es importante resaltar que el
valor encontrado en el laboratorio se encuentra mucho más cercano a los valores ideales requeridos
por el proceso de fermentación.

En cuanto al valor de los ºBrix obtenido (15,06) se tiene…que este resultado concuerda con la
referencia la cual posee una gran similitud en lo reportado por Briceño et al., (2005) donde los °Brix
del mango bocado se encuentran alrededor de 16,5 Adim, representando este un valor muy importante
ya que representa la mayor cantidad de azúcar presente dentro del proceso que puede ser reducidas
durante la fermentación. Este parámetro va ligado indudablemente a la eficiencia en el proceso pues
tener grandes cantidades de azucares dentro de la fermentación representara de alguna manera grandes
cantidades de ácido láctico resultante. Es importante destacar en este punto que el mango de bocado
no es la especie que posee un mayor grado brix presente. Sin embargo en el proceso final será
compensado con fermentaciones más grandes hechas con materia prima más abundante a nivel
nacional y más económico.

Por su parte, se encontró que la pulpa de mango posee un porcentaje de humedad de 80,62% este
valor es muy aproximado al reportado por Briceño et al., (2005), quien señala que los frutos frescos
contienen principalmente agua, entre un 80-85% del peso fresco, ácidos volátiles en pequeñas
proporciones y el resto lo constituyen sólidos de diferente naturaleza, lo que indica que era el valor
esperado.

54
Ahora bien, el porcentaje de ceniza obtenido fue de 0,35% este es bajo en comparación con lo
reportado por Martínez (2008), esto se puede deber a parámetros climatológicos los cuales afectan el
contenido de nutrientes y las características del mango, las cenizas representan la cantidad de
compuestos inorgánicos (minerales) que se encuentran en los alimentos. El porcentaje de cenizas en
cada variedad difiere debido a que cada una de ellas presenta características específicas en su
composición por diferentes causas.

En virtud de lo señalado anteriormente, se estableció que el mango bocado dispone de las


características fisicoquímicas adecuadas para ser empleado como materia prima en la obtención del
ácido láctico, ya que reúne los requerimientos nutricionales ideales para llevar a cabo un proceso de
fermentación microbiana.

4.2 Seleccionar el microorganismo que se empleará en la fermentación del mango (Mangifera


Indica L.) para obtener el ácido láctico.

La selección de los microorganismos que se utilizaron en la obtención de ácido láctico se realizó


tomando en cuenta la ponderación obtenida en la matriz que se muestra en la Tabla 4.3.

Tabla 4.3 Ponderación obtenida en la valoración de los diferentes microorganismo analizados


Ponderación del porcentaje a cada
Valoración de 0-5
especie
Lactobacillus

Lactobacillus

Lactobacillus

Lactobacillus
thermophilic

thermophilic
Rhamnosus

Rhamnosus
Bulgaricus

Bulgaricus

Porcentaje del
Bacillus

Bacillus

Parámetro
parámetro (%)

Temperatura 28,95 5 2 3 144,75 57,9 86,85

pH 18,42 4 5 2 73,68 92,10 36,84


Tiempo de
18,42 5 3 4 92,10 55,26 73,68
fermentación
Trabajo de eje 13,16 4 5 3 52,64 65,80 39,48

Producción 13,16 4 3 5 52,64 39,48 65,80

Disponibilidad 7,89 4 4 1 31,56 31,56 7,89

ΣTT 447,37 342,10 284,22

55
En esta tabla, se observa que la temperatura posee un porcentaje del 28,95% debido al resultado de la
matriz de valoración realizada anteriormente para la selección del microorganismo. En cuanto a la
ponderación general se tiene que la Lactobacillus Bulgaricus es el microorganismo que posee la
mayor ponderación con respecto a la temperatura con 144,75 puntos. Estose relaciona con el hecho
esta bacteria pertenece al grupo de los microorganismos termófilos, que de acuerdo a Medina y
colaboradores (2014), quienes señalaron que las Lactobacillus Bulgaricusrequiere de un rango de
temperatura entre 34 a 40°C para desarrollarse. Esto es una ventaja significativa ya que puede
adaptarse a la temperatura que se utilizó en este trabajo para llevar a cabo el proceso de fermentación
en laboratorio, la cual fue de 37°C. Por su parte, Serna y Rodríguez, (2005) establecieron que, para
que la fermentación ocurra de manera rápida y completa es recomendable el uso de microorganismos
termófilos.

Con respecto a la valoración del pH esta arroja un resultado del 18,42% colocándolo como un
parámetro de prioridad ya que según Rodríguez yVeitia, (2014) establecen, que el diseño correcto del
medio tiene que ver con las características bioquímicas propias y evolución de los parámetros durante
la producción de ácido láctico, el cual está caracterizado por el descenso continuo de pH. Donde se
puede observar que la bacteria Bacillus thermophilicobtuvo un valor de 92,10 puntos seguida de la
Lactobacillus Bulgaricuscon 73,68 puntos, estos valores se deben a que la Bacillus thermophilic
presenta un pH más alto en comparación al de la Lactobacillus Bulgaricus el cual favorece de alguna
manera al proceso ya que se evita el tener que ajustar el pH con el carbonato de calcio, lo que
garantiza un ahorro económico en el proceso, además de mantener un nivel de pH óptimo para el
crecimiento del microorganismo.

Con respecto altiempo de fermentación resulto 18,42% de porcentaje de valoraciónlo cual ofrecía el
mayor rendimiento de producción de ácido láctico sin afectar el tiempo de vida de los
microorganismos. Se puede observar en la tabla 4.4 que la Lactobacillus Bulgaricus obtuvo 92,10
puntos siguiéndole la Lactobacillus Rhamnosus 73,68 puntos al comparar estos dos valores con la
bibliografía (Apéndice A, Tabla 7) destaca que fue favorecida la primera ya que esta posee un menor
tiempo de fermentación lo que es satisfactorio para la producción de ácido láctico y para la realización
del trabajo experimental.

Para el trabajo de eje se obtuvo un porcentaje de 13,16% en la valoración, tomando como base lo
propuesto por (Betancourt, 2003) donde dice, que un sistema en el cual los sustratos están disueltos o
suspendidos en un medio acuoso y son agitados para conservar la homogeneidad del sistema haciendo
que este tipo de fermentación se desarrolle de manera acelerada. Lo que la Bacillus thermophilic
obtuvo 65,80 puntos seguida de la Lactobacillus Bulgaricus con 52,64 puntos, esto debido a que la
Bacillus según la información recopilada en el Apéndice A, Tabla 7 no requiere de trabajo de eje para

56
su desarrollo, la cual es una característica que la favorece con respecto a los otros dos
microorganismos estudiados debido a que gracias a esto se puede evitar el uso de agitación durante la
fermentación. Cosa que no ocurre con la Bulgaricus que si requiere de trabajo de eje para un mayor
crecimiento.

Ahora bien, en cuanto a la producción con un porcentaje de 13,16%, por lo que la Lactobacillus
Rhamnosus obtuvo 65,80 puntos seguidos de la Lactobacillus Bulgaricus con 52,64 puntos, donde se
ve favorecida la Rhamnosus debido a la alta generación de ácido láctico de que esta presenta según la
información recopilada en la tabla del Apéndice A, Tabla 7.

En cuanto a la disponibilidad la Lactobacillus Bulgaricus y la Bacillus thermophilic obtuvieron la


misma cantidad de puntos 31,56 puntos ya que de acuerdo a lo señalado por Tejada Ronald (2015) este
indica que se encuentran en productos lácteos fermentados, y se utiliza generalmente en la producción
de yogurt dando así un fácil acceso a este. Es por esto que dicho parámetro tiene un porcentaje de
7,89% de valoración.

En virtud de lo señalado anteriormente, se establece que el microorganismo más adecuado para llevar
a cabo el proceso de fermentación para la producción de ácido láctico es la mezcla de la Lactobacillus
Bulgaricus y laBacillus thermophilic, la cual acumuló un total de 447,33 puntos y 342,10 puntos
respectivamente en la ponderación de los parámetros analizados.

Ambos microorganismos cooperan entre si durante la fermentación y el crecimiento asociado que dan
como resultado una acidificación acelerada; Estudios moleculares y genómicos indican que el
Lactobacillus bulgaricus y el thermophilic que se estimulan unos a otros para el crecimiento,
cooperando y compensándose unos a otros metabólicamente. El thermophilic degrada la urea en la
leche y por consiguiente excreta CO2 para de esta manera estimular el crecimiento del bulgaricus, lo
que se ve dificultado por la baja concentración de CO2 en la leche después del tratamiento térmico,
(Ozen&Ozilgen, 1992)

Figura 4.1 Colonias de las Lactobacillus Bulgaricus y Bacillus thermophilic

57
En la figura 4.1 se pueden observar los microorganismos Lactobacillus Bulgaricus los cuales son
homofermentativos anaerobios, facultativos, no móviles, no forman esporas y se pueden observar en
forma de bastoncillos, lisas y cremosas, al igual que otras bacterias son tolerantes a la acidez y poseen
un metabolismo fermentativo estrictamente con ácido láctico D, como producto metabólico final
importante. Crecen en un número restringido de hidratos de carbono, (Serna & Rodríguez, 2005). Por
su parte el thermophilic es una bacteria Gram-positiva y un anaerobio facultativo homofermentativo y
colonias de color blanca, con apariencia de estar secas, redondas con bordes irregulares y cremosas y
no forma endosporas (Lick et al., 2015)

Tabla 4.4. Evolución de los Parámetros analizados durante el proceso de fermentación.

pH Temperatura °Brix VNaOH % Ácido


Hora
(Adim) (°C) (Adim) (mL) Láctico
0 6,0 32 10,4 0 0
24 5,0 33 9,8 1,7 15,31
48 4,4 32 8,6 4,7 42,34
72 4,0 31 8,0 6,8 61,25

De acuerdo a los resultados obtenidos en la tabla 4.4 se puede observar que los valores obtenidos a lo
largo de la fermentación corresponden con las características ya reportadas por (Rivas y Garro, 2006)
donde se estudió el comportamiento de las variables involucradas en el proceso de fermentación, esto
quiere decir, que la bacteria se adaptó de una manera fácil al medio al cual fue sometido arrojando los
resultados esperados para dicho proceso. Donde estos datos fueron reflejados en una gráfica para así
comparar con la bibliografía y poder obtener una mejor visual deeste comportamiento (Ver figura 4.2).

12,0 12

10,0 10

8,0 8
Volumen NaOH (mL)

6,0 6 pH
°Brix
4,0 4
VNaOH
2,0 2

0,0 0
0 24 48 72
Tiempo (h)

Figura 4.2. Comportamiento del pH °Brix y VNaOH durante la fermentación del mango

58
De la figura 4.2 se puede observar que la solución inicial de mango e inóculo parte con un pH de 6,
una disminución del mismo se considera un indicador de producción de ácido, evidenciando que en las
primeras 24 h se da la mayor reducción de pH, mas no la mayor producción de ácido láctico.

Es importante señalar que el contenido de azúcar fue consumido ligeramente por la bacteria en la
fermentación ya que se redujeron de 10,4 ºBrix a 8,0 ºBrix al finalizar la fermentación; se considera
que el proceso realizado es eficiente en cuanto a producción de ácido láctico por el consumo de azúcar
durante la fermentación. Cuyo comportamiento se asemeja en la bibliografía reportada por Castro y
Lugo, (2013).

Para identificar el tiempo en que se da la mayor producción de ácido láctico en el proceso


fermentativo, dándose esto a las 72 h, comparando con lo reportado por Castro y Lugo, (2013), se
encuentra una correspondencia con los datos reportados por ellos; mostrando que la producción de
ácido láctico se da en el mismo periodo de tiempo y teniendo en cuenta que ellos utilizan el mismo
microorganismo; observando a su vez un aumento elevado de la acidez del mosto debido a las
excreción de las bacterias, luego de trascurrido ese tiempo, el pH comienza a estabilizarse, esto
principalmente porque la fermentación comienza su etapa estacionaria manteniéndose las condiciones
constantes, ya que los microorganismos comienzan a morir.

Tabla 4.5. Porcentaje de producción de ácido láctico obtenido a través de la fermentación del
mango bocado.

Microorganismo Sustrato Rendimiento

Lactobacillus Bulgaricus y
Mango 65,97%
Bacillus thermophilic,

En la tabla 4.5 se observa el ácido láctico producido en la etapa de fermentación al finalizar las 72 h
donde se obtuvo un rendimiento de 65,97% ver apéndice C, como consecuencia de la fermentación del
mango con Lactobacillus bulgaricus y el Bacillus thermophilic. Comparando este resultado con los
obtenidos por Medina et al, (2014) donde los porcentajes para ácido láctico fueron de 13.90% y con
Quintero et al, (2012) quienes obtuvieron un 17,6 %; con el resultado del presente estudio se considera
aceptable para esta etapa del proceso.

59
4.3.-Caracterizar físico-químicamente el ácido láctico obtenido para verificar su rendimiento.

Tabla 4.6. Características referenciales y obtenidas del ácido láctico producido.


Parámetro Ácido Láctico obtenido Ácido Láctico referencia
Índice de refracción, (Adim) 1,419 1,44

Viscosidad, (Kg/m.s) 1,868x10-4 28,5×10-3

Densidad, a 25°C (Kg/m3) 1099,33 1,1748

Acidez titulada, (%) 1,28 1,458

pH, (Adim) 1,49 2,4

En esta fase se muestran los resultados de los análisis físico-químicos aplicados a la obtención de
ácido láctico por media de la fermentación del mago y microorganismos, los cuales se reflejan en la
tabla 4.6 respectivamente.

Se puede apreciar un índice de refracción de 1,419 obtenido a nivel experimental y al ser comparado
con el valor referencial, Perry y Green., (2001) es muy cercano con un valor de 1,44 esta diferencia es
debida al método de purificación en la obtención de dicho acido el cual pudo influir los equipos,
tiempo de purificación, y demás parámetros de control involucrados en el proceso de purificación.

En cuanto a la viscosidad fue valorado en 1,868x10-4Kg/m.s que al ser comparado con el valor de
Perry y Green., (2001) este fue de 28,5×10-3 Kg/m.s dando un valor más bajo el cual pudo estar
influenciada por trazas de otros componentes al momento de la purificación afectando el poder
viscosante de dicho ácido.

Referente a la densidad se reporta un valor de 1099,33 Kg/m3 al ser comparado con valores
referenciales de Perry y Green., (2001) presentando un valor de 1,1748 Kg/m3 el cual fue muy cercano
al valor obtenido debido a la influencia de la temperatura y presión en el método de purificación ya
que el ácido láctico tiene la capacidad de regenerar agua si dichos parámetros no son controlados.

En relación al pH del ácido valorado en 1,49 este valor fue estudiado por la referencia reportado, con
un valor de 2,4 y a la acidez se aprecia un valor de 1,28 % y el valor presentado por la referencia que
fue de 1,458%, Hernández y Veitia., (2015). Presentan una diferencia muy marcada, debido a que la
materia prima y los microorganismos utilizados fueron completamente diferentes el cual influye
directamente en el pH y el porcentaje de acidez titulada.

60
A pesar de la desviación de los valores obtenidos a través de la caracterización del ácido producido
con la fermentación del mango en comparación a la referencia reportada son aceptables.

Posteriormente se realizó un análisis de Espectrometría de infrarrojo (IR) al ácido láctico obtenido, la


cual se puede observar en la figura 4.3

Figura 4.3. Espectro IR del ácido láctico obtenido con la fermentación del mango.

Figura 4.4. Espectro IR del ácido láctico teórico.

Al observar la figura del espectro IR del ácido láctico obtenido con el teórico para identificar los
grupos funcionales más importantes que se encuentran presentes en la estructura, en la cual se
identificaron los picos y bandas de transmitancia respectivas como lo son el grupo hidroxilo (OH) que
proviene de una señal ancha y pronunciada la cual posee un valor de 3439,61 cm-1, otra para el grupo

61
carbonilo (C=O) en 1719,39 cm-1, donde la banda del metilo (-CH) es de 1458,19 cm-1 y finalmente la
señal del grupo carboxilo (C-O) es de 1048,70 cm-1.

Al comparar el espectro obtenido con la referencia de otro autor (Ver Tabla 4.9) se puede concluir que
la magnitud de las ondas posee una similitud con respecto a los valores teóricos por lo que la
desviación no es muy significativa, esto confirma de manera cualitativa que existe la presencia del
ácido láctico.

Tabla 4.7. Grupos funcionales presentes en el ácido láctico.


Grupo Onda (cm-1) Onda de referencia (cm-1)
O=H 3439 3200
C-H 1458 1455
C=O 1719 1724
C-O 1048 1036
Fuente: (Castells y Camps, 1980).

En virtud de lo antes señalado, se establece que el ácido láctico obtenido de la fermentación del mango
posee lascaracterísticas aceptables en comparación al ácido láctico comercial. Esto, es un indicativo de
que el proceso se desarrolló de manera adecuada.

4.4.- Polimerización del ácido láctico para obtener ácido poliláctico (PLA).

La selección del método de polimerización que se utilizó en la obtención del ácido poliláctico se
realizó tomando en cuenta la ponderación obtenida en la matriz que se muestra en la Tabla 4.10.

Tabla 4.8 Ponderación obtenida en la selección del métodos de polimerización utilizado.

Valoración de 0-5 Ponderación del porcentaje a cada especie


parámetro (%)
Porcentaje del

OpeningPolimeri

OpeningPolimeri
Policondensació

Policondensació

Policondensació

Policondensació
zation (ROP) o

zation (ROP) o
n Azeotrópica

n Azeotrópica
Apertura del

Apertura del

Parámetro
n Directa

n Directa
Anillo

Anillo
Ring

Ring

Presión 43,75 4 3 5 175 131,25 218,75


Temperatura 31,25 5 3 4 156,25 93,75 125
Tiempo 6,25 5 0 4 31,25 0 25
Catalizador 18,75 5 3 3 93,75 56,25 56,25
ΣTT 456,25 281,25 425

En la tabla 4.7 se puede observar que la presión posee un porcentaje de 43,75%, resultado que arrojo
la matriz de valoración realizada anteriormente para la selección del método a emplear en la
polimerización. Esto a raíz de que la presión es de todos, el parámetro más importante para llevar a

62
cabo la reacción de manera eficiente ya que de no controlar este parámetro la reacción no se llevaría a
cabo. En cuanto a la ponderación general se obtuvo que la apertura del anillo alcanzo 218,75 puntos
seguido de la polimerización directa con 175 puntos, esto se presenta ya que la apertura del anillo es el
método más controlado con respecto a los tres en estudio, por lo que la poli condensación directa
asocia la presión con la temperatura parámetros importantes que pueden ser controlados de manera
conjunta para llevar a cabo la reacción.

Por otro lado, la temperatura obtuvo un porcentaje de 31,25% lo que indica que la reactividad de los
grupos funcionales aumenta con la temperatura por lo que la reacción suele llevarse a cabo con
suministro de calor. Es por esto que en la ponderación general el método de polimerización directa
arrojo 156,25 puntos seguido de apertura del anillo con 125 puntos, esto se debe a que el método de
polimerización directa logra alcanzar una menor temperatura en la primera etapa, lo que genera un
mejor alcance para llegar a iniciar la segunda etapa, ya que la velocidad de reacción aumenta con la
temperaturacosa que no ocurre con la apertura del anillo ya que este necesita alcanzar una mayor
temperatura para iniciar la primera etapa lo que era muy difícil de controlar ya que los instrumentos
del laboratorio eran limitados con respecto a su escala cuyo máximo podía medirse hasta 200°C.

Con respecto al tiempo de reacción este obtuvo un porcentaje de 6,25% lo que indica que este
parámetro no es por lo general de gran significancia, pero cabe destacar que para obtener polímeros
grandes se necesitan tiempos de reacción mucho más altos en el caso que no se utilice un catalizador,
lo que indica quepara aplicar a nivel de laboratorio métodos que requieran mayor tiempo no son de
gran ayuda ya que el tiempo no es de total disponibilidad. Para la ponderación de manera general la
poli condensación directa obtuvo 31,25 puntos seguido de la apertura del anillo con 25 puntos lo que
quiere decir que la poli condensación directa es la más adecuada con respecto a este parámetro ya que
el tiempo que requiere la reacción para llevarse a cabo es mucho menor, lo que es satisfactorio en el
proceso ya que permite obtener un mayor número de poli condensaciones en menor tiempo.

Para el catalizador este, arrojo un porcentaje de 18,75% lo que deja ver que la influencia del
catalizador en el proceso es de suma importancia ya que sin este es muy difícil no llevar a cabo la
reacción en su totalidad ya que este acelera dicha reacción aportando una disminución del tiempo de
reacción del proceso. Con respecto a la ponderación general la poli condensación directa arrojo
93,75puntos seguido de la apertura del anillo 56,25 esto es debido a que la apertura del anillo los
catalizadores basados en metales pesados pueden fácilmente contaminar el producto, lo que complica
la purificación del PLA obtenido y también limita sus aplicaciones en los campos del envasado de
alimentos y biomedicina (Nuria Valls, 2012) por lo que fue favorecido la poli condensación directa en
este ámbito.

63
Finalmente, al sumar la totalidad de los puntoslos resultados obtenidos señalan al método de poli
condensación directa con 456,25 puntos, como el método más adecuado para polimerizar el ácido
láctico obtenido. Esto concuerda con lo publicado por López (2004) donde establece que la
polimerización se lleva a cabo por la reacción entre grupos funcionales, usualmente de distinta
naturaleza, lo que indica que se requiere al menos un monómero para realizarse, que lo diferencia de la
polimerización por apertura del anillo, en el cual la reacción requiere de una estricta pureza de la
lactida y al menos un iniciador lo que lo hace más bien caro y menos accesible.

Posteriormente se construyó un esquema a nivel de laboratorio indicando de manera clara las etapas a
seguir en el método de la poli condensación directa tomando en cuenta los parámetros másimportantes
para el proceso. Ver figura 4.5.

Figura 4.5. Esquema delas etapas del proceso de polimerización del ácido láctico

Tabla 4.9. Valores de la concentración luego de la pre concentración del ácido láctico

Concentración Inicial (g/L) Concentración Final (g/L)

6,70 61,25

En la tabla anterior se puede observar como se pudo obtener una mayor concentración a través de la
pre concentración del ácido láctico obtenido, esto debido a que se fue retirada la mayor cantidad de

64
agua contenida inicialmente debido a que esta interfiere en el proceso de polimerización, por lo que
fue necesario aumentar la concentración para obtener un mejor rendimiento.

Análisis de Espectroscopia Infrarroja

El análisis de IR permitió (para los cuales se siguió los métodos y técnicas descritos en la sección
3.3.3) identificar los picos y las bandas de transmitancia representativas para los diferentes grupos que
componen la estructura del polímero. Los resultados de la espectrometría infrarroja mostraron que el
ácido poli láctico obtenido por la fermentación del mango mantienen presentes los picos y
característicos. (Ver figura 4.6)

Figura 4.6 Espectro IR del ácido poli láctico obtenido por fermentación del mango

El espectro IR del ácido poli láctico obtenido de la fermentación del mango se muestra en la Figura
4.6, los grupos funcionales más importantes a identificar en la estructura es el grupo carbonilo (C=O)
en 1751 cm-1, la señal fuerte del metilo (CH3) en 1449cm-1 y 2910cm-1, finalmente otra señal del
enlace C-O del grupo carboxilo en 1046cm-1 y 1235 cm-1 respectivamente. Al observar el espectro
obtenido y compararlo con otros trabajos de investigación se confirma cualitativamente que hay
presencia de ácido poli láctico ya que se reflejan claramente los grupos funcionales correspondientes a
éste.

En virtud de que el polímero obtenido a través de la fermentación del mango concuerda con las
características esperadas y señaladas por varios autores, como la presencia de los grupos funcionales
presentes en su estructura molecular, lo que nos indica que cumple con todos los parámetros que hacen

65
evidenciar la existencia del ácido poli láctico lo que hace resaltar que es óptimo para la realización de
futuras aplicaciones.

4.5.-Verificar la biodegradabilidad de la mezcla en estudio.

Tabla 4.10 Valores de pH obtenidos durante la degradación del polímero en los diferentes
medios utilizados.

Día Medio ácido Medio neutro Medio básico


0 4,00 7,00 10,00
1 3,38 5,37 8,81
2 3,20 4,64 7,61
3 2,85 4,09 6,54
4 2,27 3,44 5,71

En la Tabla 4.9 se muestran los valores de pH obtenidos durante la degradación del polímero en los
diferentes medios utilizados. En ella, se observa que en todos los medios utilizados se produce una
disminución del pH del sistema al paso de los días.

En cuanto a la variación del pH del medio buffer ácido (ver tabla 4.9), a cortos tiempos de hidrólisis es
más evidente no apreciar cambios en el pH significativos ya que posiblemente se estén atacando
predominantemente a las zonas amorfas y las cadenas fragmentadas aún no son lo suficientemente
pequeñas para difundir al medio o puede que difundan en una cantidad despreciable que fácilmente
pueda ser neutralizada por las especies conjugadas del buffer presentes en el medio. Por lo que se
puede inferir que el buffer posee una excelente capacidad amortiguante. Además, en investigaciones
ya realizadas por Figueira, 2008 sobre el tema de hidrólisis al PLA, concluyen que éste presenta una
baja degradabilidad en medios a pH ácidos y básicos moderados y neutros.

Se pudo apreciar que los cambios del pH que ocurren con el agua destilada como medio hidrolítico
(Ver tabla 4.9), ya que ésta es la solución control, por lo que la variación del pH no es controlada por
dicha solución como ocurre en las soluciones buffer, sino por una competencia entre las especies
ácidas y básicas liberadas al medio como consecuencia del proceso hidrolítico. Es decir, si predomina
la escisión o solubilización de cadenas en la matriz de PLA, se liberaran grupos carbonilos de
naturaleza ácida, disminuyéndose el pH.

66
Al observarse los cambios de pH del medio básico fuerte (pH10), se obtuvo alta variación (Ver tabla
4.9), a pesar de que se está atacando apreciablemente a la matriz del PLA, debido a la concentración
adicional de iones –OH que existen en el medio y que catalizan el ataque a los enlaces inestables,
produciéndose especies de naturaleza ácida que son liberadas de forma más brusca al medio y que
están siendo neutralizadas perfectamente por efecto del buffer. En este medio alcalino está
predominando el ataque a la matriz de PLA por la alta electrofilicidad que poseen los átomos de
carbono de los grupos carbonilos en sus cadenas, como se ha mencionado en los estudios realizados
por Shu et al, (2001) de su hidrólisis.

Finalmente se puede concluir que durante el proceso de hidrólisis ocurre una disminución del peso
molecular de las cadenas en función del tiempo de degradación, producto de las escisiones de cadena
al azar características de este proceso, esto ocurre como consecuencia del ataque del agua o los iones
ácidos o básicos a los enlaces éster de las cadenas. Este proceso es controlado por varios parámetros;
la constante de velocidad, la cantidad de agua absorbida, el coeficiente de difusión de los fragmentos
de cadenas dentro del polímero y la solubilidad de los productos de degradación. Otros parámetros que
influyen en la hidrólisis son la temperatura y pH de la solución.

Se ha demostrado en estudios previos por Fischer et al, (1973) que la degradación hidrolítica del PLA
procede en dos etapas:

Durante la primera etapa, el agua se difunde dentro de las zonas amorfas resultando una escisión
hidrolítica aleatoria de los enlaces éster en las cadenas. El grado de cristalinidad puede incluso
incrementar con el avance de la degradación

La segunda etapa comienza después de la degradación de la mayor parte de la zona amorfa. El ataque
hidrolítico procede desde el borde hacia el centro de los dominios cristalinos. Si la degradación se
lleva a cabo en medio alcalino, los grupos OH juegan un papel importante en la hidrólisis, si estos
grupos se bloquearan, una degradación no significante es lo que se observaría.

En virtud a lo anterior expuesto se puede concluir que las cadenas del PLA son más fácilmente
degradables en soluciones ácidas y básicas fuertes, sin embargo la degradación hidrolítica es más
significante en condiciones básicas, esto es debido a que asocian este comportamiento a la
predominancia de la electrofilicidad de los átomos de C en medio básico, en relación a la
nucleofilicidad de los átomos de O del carbonilo en medio ácido.

4.6.- Análisis costo-beneficio con el fin de determinar si es posible o no la propuesta.

67
Tabla 4.11. Aspectos considerados para estimar la relación costos/beneficios.

Aspectos Valor
Equipos principales e infraestructura.
Activos tangibles
Capital fijo ($/año) 7.960,01
Activos intangibles Trámites legales. ($/año)
Costos variables Materia prima y servicios industriales. 7.114,69
Capital de ($/año)
trabajo Mano de obra, mantenimiento, gastos
administrativos y ensayos de
Costos fijos 78.195,65
caracterización y control. ($/año)
Costos de inversión Total 93.270,34
Beneficios
Venta del producto ($/año) 162.500,00
Relación costo/beneficio 0,57

En la Tabla 4.10 se muestran los aspectos analizados para la estimación de la relación


costos/beneficios

Cabe resaltar, que el capital fijo fue definido por los activos tangibles que integran todos los equipos
que se utilizaran para la producción del ácido poliláctico, así como, el acondicionamiento del área
destinada a la actividad; y por los activos intangibles que constituyen: los trámites legales y aspectos
relacionados con la formulación del proyecto. El capital fijo fue estimado en 7.960,01 dólares al año
(Ver ApéndiceC).

En cuanto al capital de trabajo, este fue definido por los costos variables y los costos fijos. Los costos
variables vienen dado por la materia prima y los servicios industriales, tales como: mango, yogurt,
agar, carbonato de calcio, hidróxido de sodio, cloruro de estaño, entre otros, ensayos de
caracterización y control del producto. Estos costos fueron estimados en 7.114,69 dólares al año. En
tanto, que los costos fijos constituidos por: la mano de obra, mantenimiento, gastos administrativos,
entre otros fueron estimados en 78.195,65 dólares al año. (Ver Apéndice C).

En este sentido, se determinó un costo de inversión total de 93.270,34 dólares al año. Este costo
viene dado por la sumatoria del capital fijo y el capital de trabajo, tal como lo establece Giugni et al.
(2013).

Ahora bien, los beneficios fueron estimaron en 162.500,00 dólares al año. Para esto, se consideró los
ingresos aproximados por la venta del producto, estableciendo un precio de venta del producto en
50$ por kilogramos. Comparando los costos con un ácido poliláctico comercial, con un valor
comercial de 35$ por libra, se observa que están muy por debajo de los costos asociados a la

68
investigación. Sin embargo, a pesar de las diferencias de costo, hay que considerar que la
investigación a nivel de laboratorio puede llevar a valores más elevados, ya que los materiales
necesarios en el proceso se consiguen al detal incrementando su costo, a diferencia de un producto a
nivel industrial donde la producción es a nivel macro, obteniendo mayor cantidad de materia prima a
bajos costos.

En referencia a la relación costo beneficio, se estimó un valor de 0,57 (Ver Apéndice C). Con este
resultado se puede señalar que la preparación de este polímero biodegradable genera mayores
beneficios que costos de inversión, por lo que se maximiza el valor agregado a los consumidores, tal
como lo expone Pérez (2007). Además, se establece que la obtención del ácido poliláctico a escala de
laboratorio es factible y rentable económicamente, por lo que puede ser empleado en el sector
productor sin ningún tipo de inconveniente; ya que presenta características similares a los diferentes
polímeros biodegradables comerciales que se encuentran en el mercado.

En virtud de lo expuesto anteriormente se considera que la producción de ácido poliláctico a escala


de laboratorio es factible y rentable económicamente. Además, de favorable para el ambiente, ya que
el producto aporta al desarrollo de procesos de menor contaminación y conlleva al desarrollo de
nuevas tecnologías para la producción industrial.

69
CONCLUSIONES
1. La especie de mango seleccionada para la realización del proceso de fermentación en la obtención
de ácido láctico es la variedad Bocado.
2. El mango Bocado presentó pH de 5,53 Adim, humedad de 80,95%, 15,06 °Brix y contenido de
ceniza de 0,35 %.

3. Los microorganismos que mejor se adaptan al proceso de fermentación en estudio son


Lactobacillus bulgaricus y Bacillus thermophilic.
4. Se logra identificar las características físicas correspondientes de los microorganismos presentes en
el yogurt.
5. El ácido láctico producido en la etapa de fermentación, se obtuvo con una concentración del
61,25g/L.
6. Se obtuvo un rendimiento de 65,97%.
7. El índice de refracción del ácido láctico producido a través del mango fue de 1,419.
8. La densidad del ácido láctico obtenido fue de 1099,33 Kg/m3.
9. La viscosidad del ácido láctico producido fue de 1,868x10-4 Kg/m.s.
10. El método de polimerización más adecuado fue la policondensación directa.
11. En el proceso de polimerización se obtuvieron 15 gramos de PLA.
12. El polímero obtuvo una concentración final de 61,25 g/L luego de la pre-concentración.
13. A lo largo del tiempo de degradación, se obtuvieron variaciones apreciables del pH en los medios
hidrolíticos preparados a partir de las soluciones amortiguadoras, demostrando que el medio básico es
el mejor indicador a la degradabilidad del PLA en cuanto a la hidrolisis.
14. La relación de costo-beneficio obtenida fue de 0,57 arrojando que es un proceso rentable a las
condiciones presentadas.

70
RECOMENDACIONES
1.1 Para fines de trabajo posteriores, cerciorarse que la materia prima a emplear se encuentre en su
punto óptimo de maduración.
2.1 Evaluar la concentración de azucares fermentables de la materia prima de manera más específica
usando otro método para determinar su rendimiento en la obtención del ácido láctico.
3.1 Por otro lado, una de las cosas más importantes a la hora de producir el ácido láctico es una buena
purificación, es por esto q se deben aplicar los mejores métodos para extraer el ácido láctico del
cardo fermentado, ya que de esto depende el grado de pureza que este tenga.
4.1 Por otro lado, una de las cosas más importantes a la hora de producir el ácido láctico es una buena
purificación, es por esto q se deben aplicar los mejores métodos para extraer el ácido láctico del
cardo fermentado, ya que de esto depende el grado de pureza que este tenga.
5.1 Realizar la polimerización directa con un sistema de vacío lo que garantiza que la reacción se lleve
a cabo de forma reversible para la producción del ácido poli láctico.
6.1 Se debe estudiar más a fondo los tipos de catalizadores involucrados en la policondensación para
así acelerar la reacción, y optimizar el tiempo.
7.1 Utilizar soluciones amortiguadas que no neutralicen a la solución esto puede tener un efecto
apreciable a largos tiempos de hidrólisis.
8.1 Realizar más pruebas que identifiquen la pérdida de peso molecular.
Realizar un estudio de factibilidad económica del proceso para la obtención del ácido poliláctico

71
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79
APÉNDICE A. DATOS RECOLECTADOS PARA LA OBTENCIÓN DE PLA

Tabla A.1 Variedades de mango (Mangifera indica L.)

Pulpa Peso
Especies ºBrix pH Zafra
% (g)
Bocado 18,02 4,47 64 155 Inicios de Enero
Hilacha 18,41 4,49 73 180 - 250 Enero - Febrero
Pico de loro 17.20 4,09 71,12 185 Noviembre - Diciembre
Manga 21,17 3,97 65,59 231,85 Noviembre - Diciembre
Fuente: Lozano, Jairo. 2009.

Tabla A.2 Método de Moddy para obtener el porcentaje de los parámetros a evaluar en la matriz de
selección para la especie del mango
Parámetro °Brix pH Pulpa Peso Zafra ΣPi %
°Brix 0,5 1 0 1 1 3,5 24,14
pH 1 0,5 1 0 0 2,5 17,24
Pulpa 0 0 0,5 0 1 1,5 10,35
Peso 1 1 0 0,5 0 2.5 17,24
Zafra 1 1 1 1 0,5 4,5 31,03

ΣPT 14,5 100

Tabla A.3 Variables involucradas en la determinación del contenido de ceniza del mango Bocado
Masa del crisol Masa del crisol con Masa del crisol
N° vacío la Muestra con la ceniza % Ceniza
(m±0,0001)g (m±0,0001)g (Adim)
1 28,5951 32,6252 28,6104 0,3746
2 29,8550 33,8334 29,8685 0,3393
3 30,0802 34,2445 30,0968 0,3986
4 53,6032 57,6291 53,6142 0,2732

80
Tabla A.4 Variables involucradas en la determinación del pH del mango Bocado

Masa de la Muestra pH

(m±0,0001)g (Adim)

1 10,2 5,59
2 10,4 5,52
3 10,8 5,47

Tabla A.5 Variables involucradas en la determinación de °Brix del mango Bocado


°Brix

(Adim)
1 14,50
2 15,86
3 15,32

Tabla A.6 Variables involucradas en la determinación de humedad del mango Bocado

Masa de la muestra inicial


N° % Humedad
(m±0,0001)g

1 3,0771 80,8326
2 3,2758 80,1788
3 3,8681 80,8510

Tabla A.7 Características de géneros comunes de bacterias que producen ácido láctico
Condiciones Tiempo
Rendimie de Producci
Bacteria p Sustrato Autor
Temp Weje nto ferment ón
H
ación
0,834 g g-
Extracto
Lactobacill 150 1 Mi-Young,
37 5,7 24 h de 64 g l-1
us casei rpm 0,526 gl- et al., 2003.
levadura
1h-1
Lactobacill 4- 13,93 g l-1 López y
34-40 si -1
24 h Lactosa 60 g l-1
us 5 h Lugo, 2013

81
bulgaricus

Rhizopus
150 24-58 g l- Bulut et al.,
oryzae 30 5,7 ---- 24 h Glucosa
rpm 1 2004
NRRL 395
Ohashiet al.,
Lactobacill 10,6 g l-1
37 6,8 si 240 h Melaza 40 g l-1 1999
us lactis h-1

Lactobacill
us
150 2,17 g l-1 Tango y
herveticusA 42 5,5 -- Lactosa 100 g l-1
rpm h-1 Ghaly, 2002
TCC
15009
Lactobacill
us
5- 150 1,05 gl- Fu et al.,
plantarum 37 36 h Lactosa 41g l-1
6 rpm 1h-1 1999
ATCC
21028
Lactobacill Gonçcalves
5- 150 0,56 – 110,9 -
us 42 56 h Glucosa et al,
6,8 rpm 0,86 g g-1 45,9 g l-1
rhamnosus 1997
Rhizopus Domínguez
0,66 g g-1
oryzae 3,5 200 y
35 1,13 g l-1 -- Glucosa 60 g l-1
ATCC -6 rpm Vázquez,
h-1
52311 1999
Bacillus
Danner et
thermophili 60 6,5 -- 0,8 g g-1 335 h Glucosa 55 g l-1
al., 2002
c
0,92- 0,94
Enterococc
200 g g-1 103,1 g l- Hurok et al.,
us faecalis 38 7,0 -- Cebada
rpm 0,88 – 3,8 1 2005
Rky1
g l-1 h-1

82
Tabla A.8 Método de Moddy para obtener el porcentaje de los parámetros a evaluar en la matriz de
parámetros importantes para la selección del microorganismo
Tiempo de
Temperat Trabajo Produc Disponibili
Parámetro pH fermentaci ΣPi %
ura de eje ción dad
ón
Temperatu
0,5 1 1 1 1 1 5,5 28,95
ra

pH 1 0,5 0 1 0 1 3,5 18,42

Trabajo de
0 1 0,5 1 0 0 2,5 13,16
eje
Tiempo de
fermentació 1 1 0 0,5 1 0 3,5 18,42
n

Producción 0 0 0 1 0,5 1 2,5 13,16

Disponibili
0 0 0 0 1 0,5 1,5 7,89
dad

ΣPT 19 100

Tabla A.9. Requerimientos de nutrientes de los microorganismos y formas comunes de satisfacerlos en


cultivos.
Forma química suministrada al medio de
Nutriente
cultivo

Orgánico: Medios definidos: glucosa, acetato,


piruvato, malato, cientos de otros compuestos.
Medios complejos: extracto de levadura, extracto
Carbono
de carne de res, peptona; muchos otros extractos.
Inorgánico: CO2, HCO3.

Nitrógeno Orgánico: Aminoácidos, bases nitrogenadas


Fósforo KH2PO4, Na2HPO4
Azufre Na2SO4, H2S

83
Potasio KCl, K2HPO4
Magnesio MgCl2, MgSO4
Sodio NaCl
Hierro FeCl3, Fe(NH4)(SO4)2, quelatos de hierro
Micronutrientes COCl2, ZnCl2, CuCl2, MnSO4, Na2SeO4
Fuente: Orozco M. María P. y Solarte Juan A. (2003)

Tabla A.10. Comparación de los nutrientes para diferentes medios de cultivos


Autores Cantidad de cultivo
Bulutet al., 2004 Contiene (g/L): glucosa 25-250, sacarosa 5-100, melaza
75-400, (NH4)2SO4 2,
KH2PO4 0,65; MgSO4 0,25.
Xuedonget al., 2005 Contiene (g/L): glucosa 100, (NH4)2SO4 3,
KH2PO4 0,10-0,60; MgSO4 0,25;
ZnSO4 0,04
Xuefenget al. 2010 Contiene (g/L): glucosa 120, (NH4)2SO4 4,
KH2PO4 0,45; MgSO4 0,25;
ZnSO4 0,44; CaCO3 60
H. Ronald et al., Contiene (g/L): glucosa 30; (NH4)2SO4 1,25; KH2PO4 0,6 ; MgSO4·7H2O
2006 0,25; ZnSO4·7H2O 0,04 ; Na2HPO4·2H2O 5,37 y NaH2PO4·H2O 9,64
Hong-WeiYen et al., Contiene (g/L): 60 de almidón de papa; 2 NH4NO3; 0,25 MgSO4.7H2O; 0,25
2010 ZnSO4.7H2O; 0,3 K2HPO4 y 0,3 g KH2PO4
E. Efremenkoet al., Contiene (g/L): glucosa 120; (NH4)2SO4 3,0; MgSO4.7H2O 0,3;
ZnSO4.7H2O
2006
0,05; KH2PO4 0,2 (pH 6.0).
Bo Jinet al., 2005 Contiene (g/L): Almidón 10; pectona 5,0; extracto de levadura 5,0; KH2PO4
0,2; and MgSO4.7H2O 0,2.

Tabla A.11. Porcentajes de producción de ácido láctico de diferentes autores

Autor Microorganismo Sustrato Rendimiento

Lactobacillus
Medina et al, 2014 Harina de Cují 13,9 %
Bulgaricus

Araya et al, 2010 Lactobacillus casei Piña 84,0%

84
Quintero et al, (2012) Lactobacillus brevis Jarabe de yuca 24,4%

Lactobacillus
Orozco y Solarte delbrueckii((NRRL B--
Glucosa 90,21%
(2003) 763))
((2003)
Hernández y Veitia Rhizopus oryzae
Desechos vegetales 80%
(2015)

Tabla A.12 Variables involucradas en el proceso de fermentación


Lactobacillus Bulgaricus
Bacteria Lactobacillus Bulgaricus Bacillus thermophilic
Bacillus thermophilic
T ° T ° T
Hora pH VNAOH pH VNAOH pH °Brix VNAOH
(°C) Brix (°C) Brix (°C)

0 6,00 30 10,4 0 6,00 32 10,2 0 6,00 31 10,4 0

24 5,06 29 10,4 1,5 5,01 30 9,8 1,5 5,00 30 10,2 1,7

48 4,56 31 10 4,5 4,48 29 9,2 3,8 4,29 32 9,0 4,8

72 4,01 33 9,4 6,3 4,00 31 9,0 5,8 3,89 30 8,9 7,0

Tabla A.13.Parámetros de interés involucrados en el proceso de fermentación del mango bocado.

pH Temperatura °Brix VNaOH % Ácido


Hora
(Adim) (°C) (Adim) (mL) Láctico

0 5,8 33 10,5 0 0

24 5,0 33 9,6 1,2 10,81

48 4,1 30 8,1 3,9 35,13

72 2,9 31 7,9 6,2 55,85

85
Tabla A.14 Variables involucradas para la determinación de la densidad de ácido láctico.
Sustancia Masa del Masa del Volumen del
picnómetro lleno picnómetro vacio picnómetro
(m ± 0,01)g (m ± 0,01)g (V ± 0,01)mL
1 51,00
2 50,00 23,00 25,00
3 50,00

Tabla A.15 variables involucradas para la determinación de la viscosidad de ácido láctico.


Tiempo Temperatura de la sustancia
Sustancia (t±0,01)s (T±1)°C
10,63
Agua destilada 9,79 26
9,70
19,52
Ácido láctico 19,57 26
19,77

Tabla A.16.Métodos de polimerización para la producción de ácido poliláctico (PLA)

N° Método Presión Temperatura Tiempo Reactivos

Oligomerización Oligomerización
Policondensación 150ºC 4 horas Ácido láctico
1 22psi
Directa Polimerización Polimerización catalizador
170ºC 4 horas
Ácido láctico
Policondensación catalizadores y
2 Vacío 130°C (30-40) horas
Azeotrópica solventes

Ring
Ácido láctico
OpeningPolimerization Atmosfera
3 (180-210)°C (12-20) horas catalizadores y
(ROP) o Apertura del inerte o Vacío
solventes
Anillo

86
Tabla A.17 Método de Moddy para obtener el porcentaje de los parámetros a evaluar en la matriz de
parámetros importantes para la selección de la polimerización

Parámetro Presión Temperatura Tiempo Reactivos ΣPi %

Presión 0,5 1 1 1 3,5 43,75

Temperatura 1 0,5 0 1 2,5 31,25

Tiempo 0 0 0,5 0 0,5 6,25

Reactivos 0 1 0 0,5 1,5 18,75

ΣPT 8 100

Tabla A.18 Comportamiento del pH de los diferentes medios a lo largo de la degradación.

Día Medio ácido Medio neutro Medio básico

0 4,00 7,00 10,00

1 3,55 6,82 9,64

2 2,96 5,46 8,38

3 2,65 4,90 7,05

4 2,45 4,37 6,21

Tabla A.19Valores de pH de los diferentes medios a lo largo de la degradación.


Día Medio ácido Medio neutro Medio básico

0 4,00 7,00 10,00

1 3,30 6,58 9,28

2 3,12 5,87 8,04

3 2,80 4,86 7,18

4 2,34 3,87 6,04

87
APÉNDICE B. CALCULOS TIPICOS
CARACTERIZACIÓN DEL MANGO BOCADO.

1. Determinación del contenido de ceniza.

Se realizó siguiendo la norma COVENIN 1783-81:

M2 − M0
C= x 100%
M1 − M0

Para el Crisol N°1:


M0= 28,5951
M1= 32,6252
M2= 28,6104

Sustituyendo en la ecuación anterior los valores correspondientes para el contenido de ceniza, se tiene:

28,6104 − 28,5951
C1 = x 100
32,6252 − 28,5951

C1 = 0,3746%

De la misma manera se realizó el cálculo 3 veces más del contenido de ceniza para el mango bocado y
los resultados obtenidos se encuentran reportados en la tabla 4.4.

0,3746 + 0,3393 + 0,3986 + 0,2732


C=
4
C = 0,34642%
Aplicando el método de las derivadas parciales en la ecuación anterior para la estimación del error, se
tiene:

∂C ∂C ∂C
∆C = | | xΔM2 + | | xΔM0 + | | xΔM1
∂M2 ∂M0 ∂M1

ΔC = 0,06%

Contenido de ceniza = 0,35 ± 0,06%

88
2. Determinación del pH.

Se determinó mediante el procedimiento indicado en la norma COVENIN 1315-79:

A una temperatura de 25,0 °C se tomó la lectura del pH del mango Bocado

pH1 = 5,59

De la misma manera se realizó la lectura 2 veces más del pH para el mango bocado y los resultados
obtenidos se encuentran reportados en la tabla 4.5.

5,59 + 5,52 + 5,47


pH =
3
pH = 5,5266

3. Determinación de °Brix.

Se determinó usando la norma COVENIN 924-83:

A una temperatura de 25,5 °C se tomó la lectura de los ° Brix del mango Bocado

°Brix1 = 14,50

De la misma manera se realizó la lectura 2 veces más de los °Brix para el mango bocado y los
resultados obtenidos se encuentran reportados en la tabla 4.6.

14,50 + 15,36 + 15,32


°Brix =
3
°Brix = 15,06

4. Determinación de la humedad.

Se determinó según el procesamiento estandarizado de la norma AOAC 14.004


Se peso en la charola de aluminio 3.0771g para luego determinar el % de humedad por medio de la
balanza ohaus.

89
De la misma manera se realizó el cálculo 2 veces más del porcentaje de Humedad para el mango
bocado y los resultados obtenidos se encuentran reportados en la tabla 4.7.

80,83 + 80,17 + 80,85


H=
3
H = 80,62%

5. Determinación del rendimiento


Para calcular el rendimiento de cada muestra, se utilizó la siguiente ecuación:
Cfp
% R= C × 100
is −Cfp

Fuente: Figueredo y Hernández (2012)

Dónde:
%R: rendimiento (%)
Cfp: concentración final del producto (g/L)
Cis: concentración inicial del sustrato (g/L)
Cfs: concentración final del sustrato (g/L)
Sustituyendo los valores correspondientes en la ecuación anterior, se tiene:

6,7g/L
% R= 10,512g/L−0,356g/L × 100

% R=65,9708

CARACTERIZACIÓN FISICOQUÍMICA DEL ÁCIDO LÁCTICO PRODUCIDO

1. Determinación de la densidad del ácido láctico obtenido

Mpll − Mpv
ρ=
Vp
Fuente: COVENIN 1116-77

Dónde:
ρ: densidad del ácido láctico (kg/m3)
Mpll: masa del picnómetro lleno (kg)
Mpv: masa del picnómetro vacío (kg)
Vp: volumen del picnómetro (m3)

90
Sustituyendo los valores correspondientes para la muestra de ácido láctico obtenido en la ecuación
anterior, se tiene

0,051Kg − 0,023Kg
ρ=
2,5x10−5 m3

ρ =1120 Kg/m3

De la misma manera se realizó el cálculo 2 veces más y los resultados obtenidos se encuentran
reportados en el apéndice A tabla a.8

1120 + 1080 + 1080


ρ=
3
ρ = 1093.3333

Aplicando el método de las derivadas parciales en la ecuación anterior para la estimación del error, se
tiene:

∂ρ ∂ρ ∂ρ
∆ρ = | | xΔMpll + | | xΔMpv + | | xΔVp
∂Mpll ∂Mpv ∂Vp

Sustituyendo tenemos que:

∆ρ = 4,48 Kg/𝑚3

Finalmente se tiene que:

ρ = ( 1093 ± 5 )Kg/m3

2. Determinación de la viscosidad del ácido láctico producido

t m xρm xμagua
μ=
t agua xρagua

Fuente: Perry Greenn (2001)

91
Dónde:
μ: viscosidad del ácido láctico (kg/m.s)
tm: tiempo de la muestra de ácido láctico (s)
ρm: densidad de la muestra de ácido láctico (kg/m3)
μagua: viscosidad del agua (kg/m.s)
tagua: tiempo del agua (s)
ρagua: densidad del agua (kg/m3)

Sustituyendo los valores correspondientes para la muestra de ácido láctico obtenido en la ecuación
anterior, se tiene:

33Kg
19,62s x 1093, m3 x
8,71x10−4 Kg/m. s
μ=
10,04s x 996 Kg/m3

μ = 0,001868 Kg/m. s
Aplicando el método de las derivadas parciales en la ecuación anterior para la estimación del error, se
tiene:

∂μ ∂μ ∂μ ∂μ ∂μ
∆μ = | | xΔMt m + | | xΔρm + | | xΔμagua + | | xΔt agua + | | xΔρagua
∂t m ∂ρm ∂μagua ∂t agua ∂ρagua

Sustituyendo tenemos que:

∆𝜇 = 0,000231 Kg/𝑚. 𝑠

Finalmente se tiene que:

μ = ( 0,0018 ± 0,0002 )Kg/𝑚. 𝑠

3. Acidez titulable

Para calcular el porcentaje de acidez de la muestra, se utilizó la siguiente ecuación:

VNaOH xNNaOH xmeqácido x100


% acidez =
Vmuestra
Fuente: Ospina (2010)

92
Dónde:
% acidez: porcentaje de acidez (%)
VNaOH: volumen gastado de hidróxido de sodio (mL)
NNaOH: concentración del hidróxido de sodio (N)
meqácido: miliequivalentes del ácido láctico (meq)
Vmuestra: volumen de muestra a titular (mL)

Sustituyendo los valores correspondientes para la muestra de ácido láctico obtenido en la ecuación
anterior, se tiene que:

14,2mLx 1Nx0,09meqx100
% acidez =
100mL

% acidez = 1,278 %
Aplicando el método de las derivadas parciales en la ecuación anterior para la estimación del error, se
tiene:

∂%acidez ∂%acidez
∆%acidez = | | xΔNNaOH + | | xΔVmuestra
∂NNaOH ∂Vmuestra

Sustituyendo tenemos que:

∆%acidez = 0,0242 %

Finalmente se tiene que:

% acidez = ( 1,28 ± 0,02 )%

4. Concentración del ácido láctico obtenido por fermentación

Para calcular la concentración del ácido láctico obtenido por fermentación, se utilizó la siguiente
ecuación:

CNaOH xVNaOH xPM


Cmuestra =
Vmuestra
Fuente; Skoog (2001)

93
Dónde:
Cmuestra: Concentración de la muestra (g/L)
CNaOH: Concentración del hidróxido de sodio (mol/L)
Vmuestra: Volumen de la muestra a titular (mL)
VNaOH: Volumen gastado de hidróxido de sodio (mL)
PM: Peso molecular del ácido láctico (g/mol)

Sustituyendo los valores correspondientes para la muestra de ácido láctico obtenido en la ecuación
anterior, se tiene que:

1mL/Lx6,8mLx90,08g/mol
Cmuestra =
10mL

Cmuestra = 61,2544 g/L

Aplicando el método de las derivadas parciales en la ecuación anterior para la estimación del error, se
tiene:

∂Cmuestra ∂Cmuestra
∆Cmuestra = | | xΔVNaOH + | | xΔVmuestra
∂VNaOH ∂Vmuestra

Sustituyendo tenemos que:

∆Cmuestra = 4 g/L

Finalmente se tiene que:

Cmuestra = ( 61 ± 4 )g/L

CÁLCULOS PARA EL ANÁLISIS DEL COSTO/BENEFICIO DEL PROCESO DE


OBTENCIÓN DE ÁCIDO POLILÁCTICO.

El proceso de obtención de ácido poliláctico fue desarrollado en el laboratorio de Polímeros


perteneciente al área del centro de investigaciones químicas (CIQ). Para realizar el estudio costo-
beneficio fue necesario la implementación de un modelo de evaluación económica para estimar los
costos de inversión y beneficios involucrados por año, como lo indica Giugni et al. (2013), para una
proyección de 5 años. Para la estimación se tomó como base una producción de 3.250 gramos/año

94
de ácido poliláctico. Giugni et al. (2013) establece, que en el proceso de producción los costos se
definen en capital fijo y de trabajo, en donde su sumatoria representan el egreso para obtener el
producto final.

Capital fijo
El capital fijo representa los activos necesarios que se utilizaron para que el proceso se estructurara,
tales como los tangibles, por los equipos e infraestructura, y los intangibles.

En cuanto a los equipos esenciales utilizados para el proceso de obtención diario, estos costos
unitarios se encuentran en el apéndice B. Los costos obtenidos fueron los siguientes:
n

Ce = ∑ N. Ci
i=1

Dónde:
Ce: Costo correspondiente a los equipos ($)
N: Cantidad por equipo
C: Costo unitario por equipo ($)

Ce = 17.709 $

Los costos referente a la infraestructura (Cif) por el acondicionamiento del laboratorio, en cuanto a
la zona del proceso de producción, zona de recepción y dosificación de la materia prima y
almacenaje del producto, se estimó en función del 25% de los costos involucrados de los equipos,
por tal:

Cif = 0,25. Ce
Cif = 4.427,15 $
Los activos intangibles están definidos por los trámites legales y aspectos relacionados con la
formulación del proyecto, los costos (Cint) se establecieron en función del 30% de los costos
involucrados de los equipos, por ende:

Cint= 0,30. Ce = 0,30. 27.000.000 Bs = 8.100.000,00 Bs

Cint = 0,30. Ce
Cint = 5.312,57$

95
Ahora bien, los costos que representan al capital fijo (Cfijo) son:

Cfijo = Ce + Cif + Cint

Sustituyendo los valores correspondientes, se tiene:

Cfijo = 17.709$ + 4.427,15$ + 5.312,57$


Cfijo = 27.448$

Si la tasa de interés anual se establece en 15% del capital fijo en una proyección de 5 años, se estima
el equivalente anual por medio de la siguiente ecuación anterior:

i. 1 + in
R = Cfijo .
1 + in − 1

Dónde:

R: Equivalente anual del capital


fijo (Bs) i: Tasa de interés anual
n: Años de proyección del proyecto
Sustituyendo los datos correspondientes, se obtiene:

0,15.1 + 0,155
R = 27.448$.
1 + 0,155 − 1

R = 7960,01$

Capital de trabajo
Es el capital involucrado en las operaciones del proceso de producción, depende de las
características de la actividad productiva. Está constituido por los costos variables y fijos por año.
Los costos variables (Ccv) los integran la materia prima y los servicios industriales (agua y energía
eléctrica).

Los costos de la materia prima (CMP) se calculan en función de una producción de 13 g/día de

96
ácido poliláctico y se muestran en el apéndice B.

CMP = 6186,68$/año

Los costos de los servicios industriales (CSi) se establecieron en función del 15% de los costos
asociados de la materia prima, por ende:

Csi = 0,15. CMP

Csi = 0,15. 6.186,68$/año

Csi = 928,00$/año

Los costos variables totales en el primer año, fue:

Ccv = CMP + Csi

Ccv = 6.186,68$/año + 928,00$/año

Ccv = 7.114,69$/año

Los costos fijos (Ccf) los integra la mano de obra, responsable del desarrollo de las tareas y
actividades del proceso; mantenimiento, gastos administrativos y ensayos de caracterización y
control del producto.

Los costos de la mano de obra (Cmo) se establecieron con los 3 responsables en el proceso de
producción; como los fueron, un técnico de laboratorio, dos ingeniero químico. En el capítulo IV se
encuentra el tabulador del salario mensual. Los costos se determinan en la siguiente Tabla C.1.:

Tabla C. 1. Costos asociados a la mano de obra empleada en el proceso de obtención de ácido


poliláctico
Desembolso por Desembolso por
Personal N° de persona Pago mensual (Bs)
año (Bs/año) año ($/año)

Técnico 1 111084,51 1333014,12 1965,874259

Ingeniero 2 399157,66 4789891,92 7063,935099

Total 6122906,04 9029,81

Cmo = 9029,81$/año

Los costos asociados al mantenimiento (Cm) se establecieron en función del 5% de los

97
costos total de los equipos, por tal:

Cm = 0,05. Ce

Cm = 0,05 . 17709$/año

Cm = 885,43$/año

Los costos administrativos (Ca) se determinaron en función del 100% de los costos
asociados a la mano de obra más el 20% de los costos asociados a los activos intangibles, por ende:

Ca = Cmo + 0,20. Cint


Ca = 9029,81$/año + 0,20 . 5312,57$/año
Ca = 10092,32$/año

Los costos asociados a los ensayos de caracterización y control del producto (C ens), son
realizados para analizar la materia prima para la producción, evaluación del producto final y
control intermediario del proceso, necesario para la fase de reducción. Estos costos se representan
en la siguiente Tabla C.2.:

Tabla C. 2. Costos relacionados con los ensayos realizados en el proceso

Descripción Costo (Bs/mes) Costo (Bs/año) Costo ($/año)

Caracterización de la materia
325.000,00 3900000 5751,559189
prima

Análisis de control
1.300.000,00 15600000 23006,23675
intermediario del proceso

Caracterización del producto


1.663.000,00 19956000 29430,28594
final

Total 3.288.000,00 39456000 58188,08

𝐂𝐞𝐧𝐬 = 𝟓𝟖𝟏𝟖𝟖, 𝟎𝟖 $/𝐚ñ𝐨

Los costos fijos totales en el primer año, fue:

Ccf = Cmo + Cm + Ca + Cens

98
Ccf = 9029,81$/año + 885,43$/año + 10092,32$/año + 58188,08$/año

Ccf = 78195,64$/año

Ahora bien, los costos que representan al capital de trabajo (Ctrabajo) son:

Ctrabajo = Ccv + Ccf

Sustituyendo los valores correspondientes al primer año, se tiene:

Ctrabajo = 7114,69$/año + 78195,64$/año

Ctrabajo = 85310,33$/año

En tanto los costos de inversión total (Cinversión) para el primer año se valoran en:

Cinversión = Ctrabajo + R

Cinversión = 85310,33$/año + 7960,01$/año

Cinversión = 93270,34$/año

Beneficios
Los beneficios (B) son los resultantes de los ingresos generados por el retorno de la venta del
producto. Se estableció un precio de venta (PV) del producto en 50 dólares por kilogramos. La
producción se estimó en 13 g/día en 250 días de operación al año, abarcando una producción anual
(PA) de 3,250 kilogramos.

Los ingresos por ventas resultantes para el primer año, fue:

B = PV. PA

B = 50$/Kg. 3,250Kg/año

B = 162500$/año

99
Igualmente se sigue el mismo procedimiento anterior para realizar la proyección de los años restantes,
tomando en cuenta una tasa inflacionaria del 25% por año.

Relación costos/beneficios

La relación estimada de costo-beneficio para la obtención de ácido láctico, se determinó con el


cociente de los costos asociados a la inversión del proceso de obtención y los beneficios que se
derivan de la venta del producto al cabo de los 5 años de estimación del estudio. Para obtener estos
valores al tiempo estimado, se utiliza la herramienta del valor actual de Excel tanto en el costo total de
inversión como en los beneficios, resultando:

Cinversión
RC/B =
B
93270,34$/año
RC/B =
162500$/año
RC/B = 0,57

10
0

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