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Dacie y Lewis
HEMATOLOGÍA
PRÁCTICA
10.a edición

S. Mitchell Lewis, BSc, MD, FRCPath, DCP, FIBMS

Emeritus Reader in Haematology,
University of London;
Senior Research Fellow in Haematology, Imperial College School of Medicine,
Hammersmith Hospital, Londres, Reino Unido

Barbara J. Bain, FRACP, FRCPath

Professor of Diagnostic Haematology,
St. Mary’s Hospital Campus of Imperial College
Faculty of Medicine, Londres, Reino Unido

Imelda Bates, MD, FRCP, FRCPath

Senior Lecturer in Tropical Haematology,
Liverpool School of Tropical Medicine,
University of Liverpool, Liverpool, Reino Unido
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Índice de capítulos

Autores vii 9. Métodos de laboratorio utilizados para la

investigación de las anemias hemolíticas 161
Prefacio ix S. M. Lewis y D. Roper

Abreviaturas xi 10. Investigación de las anemias hemolíticas

hereditarias: anomalías enzimáticas
y de la membrana 177
Nota xiii
D. Roper y M. Layton
1. Recogida y manipulación de la sangre 1
11. Anemias hemolíticas adquiridas 205
S. M. Lewis y N. Tatsumi
B. J. Bain y N. Win
2. Intervalos de referencia y valores normales 11
12. Investigación de las hemoglobinas anómalas
S. M. Lewis y de las talasemias 233
B. Wild y B. J. Bain
3. Técnicas hematológicas básicas 23
B. J. Bain, S. M. Lewis e I. Bates 13. Citoquímica eritrocitaria y leucocitaria 267
D. Swirsky y B. J. Bain
4. Métodos de preparación y tinción de las
extensiones sanguíneas y de la médula ósea 51
14. Inmunofenotipado 287
B. J. Bain y S. M. Lewis
E. Matutes, R. Morilla y D. Catovsky
5. Morfología de las células sanguíneas normales
y patológicas 69 15. Radioisótopos en el diagnóstico hematológico 305
B. J. Bain I. Dokal y S. M. Lewis

6. Biopsia de la médula ósea 99 16. Exploración de la hemostasia 325

I. Bates M. Laffan y R. Manning

7. Anemia ferropénica y sobrecarga de hierro 113 17. Investigación de la tendencia trombótica 379
M. Worwood M. Laffan y R. Manning

8. Investigación del estado de la cobalamina, el folato 18. Control de laboratorio de la terapia anticoagulante,
y los metabolitos en la anemia megaloblástica 139 trombolítica y antiplaquetaria 399
M. Hamilton y S. Blackmore M. Laffan y R. Manning
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vi HEMATOLOGÍA PRÁCTICA

19. Antígenos y anticuerpos de las células sanguíneas: 24. Organización y gestión del laboratorio 535
eritrocitos, plaquetas y granulocitos 413
S. M. Lewis y A. Bradshaw
S. Knowles y F. Regan
25. Seguridad en el laboratorio 553
20. Aspectos de laboratorio de las transfusiones
sanguíneas 449 S. M. Lewis

M. Rowley y C. Milkins
26. Control de calidad 561

21. Análisis molecular y citogenético 477 S. M. Lewis y B. De la Salle

T. Vulliamy y J. Kaeda
Con la contribución de B. J. Bain 27. Hematología en laboratorios de recursos
escasos 573
22. Miscelánea 511 I. Bates y B. Mendelow
S. M. Lewis
28. Apéndices 587
23. Aproximación al diagnóstico y clasificación S. M. Lewis
de los trastornos hemotológicos 521
I. Bates y B. J. Bain Índice alfabético 603
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Prefacio
Esta 10.ª edición celebra el 55 aniversario de Hematología
Práctica. Tanto la primera edición de J.V. Dacie de 1950
como las sucesivas ediciones con Mitchell Lewis como
coautor se basaron en el curso de hematología para el Lon-
don University Diploma of Clinical Pathology (DCP) y pos-
teriormente en la licenciatura en Hematología en la enton-
ces llamada Royal Postgraduate Medical School.
La ciencia médica ha crecido de forma exponencial en el
último medio siglo; sin embargo, ninguna disciplina se ha
expandido más que la hematología, tanto en sus aspectos clí-
nicos como de laboratorio. Inicialmente, la hematología de
laboratorio se restringía casi al «recuento sanguíneo» con
una cámara de recuento y un microscopio. El recuento san-
guíneo sigue siendo una prueba esencial porque proporciona
un componente importante para el diagnóstico y el trata-
miento del paciente; sin embargo, los instrumentos automá-
ticos actuales analizan las propiedades fisicoquímicas de las
células sanguíneas individuales y ofrecen datos metrológicos
precisos sobre los eritrocitos, los leucocitos y las plaquetas
a una velocidad inimaginable en aquellos primeros tiempos.
La sofisticada tecnología permite que los análisis más com-
plejos sean realizados de forma rutinaria en muchos labora-
torios; entre ellos se incluyen los estudios de ADN, el inmu-
nofenotipado para la clasificación de las leucemias, el
diagnóstico de las anemias megaloblásticas y las mediciones
con radioisótopos. No obstante, tenemos que admitir que no
todos los laboratorios disponen de las pruebas más sofistica-
das y dedicamos un capítulo a las pruebas esenciales en los
laboratorios con pocos recursos y en los centros de salud.
También tenemos en cuenta el uso creciente de los dispositi-
vos listos para su uso, comercialmente disponibles, para mu-
chas pruebas de laboratorio, y la tendencia a la realización
de algunas de estas pruebas en el punto de asistencia; apor-
tamos sugerencias sobre el papel de soporte del laboratorio
para garantizar la fiabilidad de esta última práctica.
Otro avance de enorme impacto es Internet, mediante
el cual se puede localizar cualquier tema, a menudo con
una abrumadora cantidad de información, a partir de una
sola palabra clave. Indicamos unos cuantos sitios de In-
ternet que son importantes para la hematología, inclu-
yendo los de los fabricantes de dispositivos y reactivos
especializados.
Los científicos biomédicos son, cada vez más, los res-
ponsables del trabajo de laboratorio, de la misma forma
que los hematólogos, médicamente cualificados, están más
implicados en la asistencia clínica a los pacientes. Sin em-
bargo, ambos grupos deben ser conscientes de la impor-
tancia de la organización y la dirección eficaz de un labo-
ratorio, de la necesidad de mantener unos estándares téc-
nicos elevados con controles de calidad bien establecidos y
del conocimiento de la importancia clínica de las investi-
gaciones hematológicas. Los principios de buena práctica
de laboratorio los estableció Dacie en su 1.ª edición, cuan-
do escribió: «Todos aquellos implicados en el trabajo de la-
boratorio deben comprender cuál es la importancia de las
pruebas que realizan, el valor relativo de las investigacio-
nes hematológicas y el orden en que deben emprenderse».
Hemos intentado mantener su enfoque por lo que hace al
contexto y al estilo, si bien actualizado para satisfacer la
práctica actual.
Deseamos expresar nuestro agradecimiento a todos nues-
tros colaboradores, y también a otros colegas que nos fa-
cilitaron consejo experto en temas específicos; entre ellos
debemos mencionar especialmente a Michel Deenmamode
(Radioisótopos), Mark Griffin (Salud y seguridad), Julia
Howard (Citogenética), John Meek (Química clínica), An-
drew Osei-Bimpong (Hematología general).
Como especial homenaje con ocasión del 55 aniversario,
esta edición está dedicada a Sir John Dacie, a sus estudian-
tes de diversos países, cuyas posteriores y distinguidas ca-
rreras se inspiraron en él, y al centro que él mismo fundó
en la antigua Royal Postgraduate Medical School de la
Universidad de Londres, actualmente Faculty of Medicine
of Imperial College at Hammersmith Hospital.
S. Mitchell Lewis
Barbara J. Bain
Imelda Bates
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Abreviaturas

ACD ácido citrato dextrosa DAB diaminobenzidina

AcMc, anticuerpo monoclonal DE desviación estándar
AcMo DMSO dimetilsulfóxido
ACRES sitio de amplificación creado por enzimas de 2,3 DPG2,3-difosfoglicerato
restricción (del inglés, amplification created DTT ditiotreitol
restriction enzyme site) EDTA ácido etilendiaminotetraacético
ADA adenosindesaminasa EGIL Grupo europeo para la clasificación
ADE amplitud de la distribución eritrocitaria inmunológica de las leucemias (del inglés,
ADH amplitud de distribución de la hemoglobina European Group for the Immunological
ADN ácido desoxirribonucleico Classification of Leukaemias)
ADP adenosindifosfato ELISA análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas
AET 2-aminoetil-iso-tiouronio EN eritrocito nucleado
AHA anemia hemolítica autoinmunitaria ENE esterasa no específica
ANAE alfa naftil acetato esterasa ER enzima de restricción
ANB alfa naftil butirato FAB francés-americano-británico (clasificación)
AP activador del plasminógeno FAG fosfatasa alcalina granulocítica
APAAP fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina (del FE ficoeritrina
inglés, alkaline phosphatase anti-alkaline FSc dispersión de la luz hacia delante (del inglés,
phosphatase) forward light scatter)
ARN ácido ribonucleico FVL factor V de Leiden
ASB albúmina de suero bovino g gramos o fuerza centrífuga relativa, según
ASOH hibridación de oligonucleótidos específicos contexto
de alelos (del inglés, allele-specific G6PD glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
oligonucleotide hybridization) GPI glucosilfosfatidilinositol
AT antitrombina Hb hemoglobina o concentración de hemoglobina
ATP adenosintrifosfato HbCO carboxihemoglobina
BCSH Comité británico de normalización en HCM hemoglobina corpuscular media
hematología (del inglés, British Committee HEMPAS multinuclearidad eritroblástica hereditaria con
for Standards in Haematology) prueba del suero acidificado positiva (del
C complemento inglés, hereditary erythroblastic multinuclearity
C3, C3d, componentes del complemento with positive acidified-serum test)
C3sg Hi metahemoglobina
CAE naftol AS-D cloroacetato esterasa HiCN cianometahemoglobina
CD cúmulo de diferenciación HPF hemoglobinuria paroxística por frío
CFA capacidad de fijación del anticuerpo HPLC cromatografía en fase líquida de alta resolución
CHAD enfermedad por hemoaglutinina fría (del inglés, (del inglés, high performance liquid
cold haemagglutinin disease) chromatography)
CHCM concentración de hemoglobina corpuscular HPN hemoglobinuria paroxística nocturna
media Hto hematocrito
Cp citoplasmático ICSH Comité internacional para la normalización en
CPD citrato-fosfato-dextrosa hematología (del inglés, International Council
CTP citosintrifosfato for Standardization in Haematology)
CV coeficiente de variación IDR inmunodifusión radial
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xii HEMATOLOGÍA PRÁCTICA

IEF enfoque isoeléctrico (del inglés, isoelectric PHHF persistencia hereditaria de la hemoglobina fetal
focusing) pI punto isoeléctrico
Ig inmunoglobulina PK piruvatocinasa
IgA inmunoglobulina A PML proteína codificada por el gen PML
IgD immunoglobulina D POE procedimiento operativo estándar
IgE immunoglobulina E PVP polivinil pirrolidina
IgG immunoglobulina G QSC quantum simply cellular
IgM immunoglobulina M RE recuento eritrocitario
IP immunoperoxidasa RFLP polimorfismo de la longitud de fragmentos
ITCF isotiocianato de fluoresceína de restricción
kb kilobase RL recuento leucocitario
LCP leucemia de células peludas RTCN recuento total de células nucleadas
LELV linfoma esplénico con linfocitos vellosos RVH región hipervariable
LISS medio salino de baja fuerza iónica (del inglés, SDS dodecil sulfato de sodio
low ionic strength saline) SHb sulfahemoglobina
LLA leucemia linfoblástica aguda SMD síndrome o síndromes mielodisplásicos
LLC leucemia linfática crónica SmIg immunoglobulina de superficie (del inglés,
LLC/PL leucemia linfática crónica con aumento surface immunoglobulin)
de prolinfocitos SMRA sistema de mutación refractario a la
LLTA leucemia/linfoma de linfocitos T del adulto amplificación
LMA leucemia mieloide aguda SP sangre periférica
LMC leucemia mieloide crónica SSc dispersión de la luz lateral (del inglés, sideways
LPLB leucemia prolinfocítica de células B light scatter)
2-ME 2-mercaptoetanol SSCP polimorfismo de conformación monocatenario
MESF moléculas de fluorocromo soluble equivalente (del inglés, single-strand conformation
MGG May-Grünwald-Giemsa polymorphism)
MO médula ósea TAE tris-acetato EDTA (tampón)
MPO mieloperoxidasa TBE tris-borato EDTA (tampón)
NEQAS evaluación externa de la calidad nacional (del TBS salino tamponado con tris
inglés, national external quality assessment) TCR receptor del linfocito T
NISS medio salino de fuerza iónica normal (del inglés, TE tris–EDTA (tampón)
normal ionic strength saline) TEB tris-EDTA-borato (tampón)
OMS Organización Mundial de la Salud TP tiempo de protrombina
p/v peso/volumen t-PA activador del plasminógeno tisular
PAI prueba de antiglobulina indirecta TR transcriptasa reversa
PAS ácido peryódico de Schiff TT tiempo de trombina
pb par de bases TTPA Tiempo de tromboplastina parcial activado
PBS medio salino tamponado con fosfato (del inglés, UI unidades internacionales
phosphate-buffered saline) UIBC capacidad no saturada de fijación del hierro
PBS- medio salino tamponado con fosfato que (del inglés, unsaturated iron-binding capacity)
azida- contiene azida sódica y albúmina de suero UV ultravioleta
BSA bovino v/v volumen/volumen
PCR reacción en cadena de la polimerasa VCM volumen corpuscular medio
PCR-TR reacción en cadena de la polimerasa VIH virus de la inmunodeficiencia humana
de la transcriptasa reversa vol volumen
PDA prueba directa de antiglobulina VPM volumen plaquetario medio
PDF productos de degradación de la
fibrina/fibrinógeno
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NOTA
Siguiendo las recomendaciones de la Organización Inter-
nacional de Estandarización (ISO), la Organización Mun-
dial de la Salud (OMS) y otras autoridades internacionales,
hemos utilizado el sistema internacional (SI) para expresar
las cantidades y las unidades (v. págs. 592-593). La con-
centración de las soluciones se expresa en mol/l (para las
concentraciones de las sustancias) o en g/l (para las con-
centraciones de la masa). Aunque somos conscientes de
que en algunos países aún se utilizan los g/dl para expre-
xiii
sar la concentración de hemoglobina, hemos empleado g/l
según la convención internacional. Para convertir esta
cantidad en g/dl, basta con dividirla por 10.
Hemos indicado la fuente de un reactivo, equipo o dis-
positivo en caso de que haya un único fabricante o cuan-
do se recomienda una fabricación específica. Si no se indi-
ca la fuente, el material o el equipo adecuado estarán
disponibles, por lo general, en diferentes suministradores.
Los catálogos de estos fabricantes y la información deta-
llada sobre el uso de sus equipos exclusivos pueden encon-
trarse en sus páginas web.