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7) Trasladamos la membrana de filtro con ayuda

DETERMINACIÓN DE COLIFORMES FECALES POR de una pinza esterilizada a la placa de Petri que
EL MÉTODO DE LA MEMBRANA DE FILTRACIÓN.
contiene el Agar (m-FC), procurando que no
Materiales:
quede burbujas de aire entre la membrana y el
Etanol al 95 %.
medio de cultivo ya que en tal superficie no
1 Pinza esterilizada. ocurriría el crecimiento de los coliformes
fecales.
1 Mechero bunsen.
8) La placa se invierte y se incuba a 37°C por 24
1 Membrana de filtro. horas.

100ml de la muestra de agua. 9) Pasado las 24 horas se contaron las colonias


azul-grisáceas y se obtuvieron promedios entre
2 placas de Petri con la Base de Agar para coliformes el número de colonias en la muestra de 100 mL
Fecales (m-FC). Nota: el Análisis se hace por duplicado.

100ml de agua peptonada.

Equipos:
Sistema de filtración esterilizado. RESULTADOS:

Bomba de vacío.
Previamente
Incubadora. Como el área de la membrana es relativamente
reducida, la misma solo puede soportar el
PROCEDIMIENTO
crecimiento de un número limitado de colonias.
1) Esterilizamos las pinzas por la técnica del
El número óptimo que se estimo fue entre 20
flameado.
y 80 colonias, con un máximo de 200.
2) Extraimos la membrana de 47 mm de diámetro,
con tamaño de diámetro nominal de poro de
0.45 μm (Milipore Mixed Cellulose Ester, Fisher
Scientific). de su envoltura usando la pinza
esterilizada colocándola sobre el centro del
portafitro.
3) Vertimos 100 mL de la muestra de agua, en la
porta filtro.
4) Conectamos la bomba de vacío para permitir
que el agua pase por la membrana de filtración
de manera que los microorganismos presentes
en el agua se queden retenidos en la
membrana de filtración.
5) Esperamos que toda el agua se filtre y luego Figura 1
Lavamos el embudo con aproximadamente 100 Fig1: Colonias azul grisáseo, típicas de
coliformes fecales de muestras de agua de río
mL de agua peptonada al 0,1%.
(primera muestra), recuperadas en filtro de
celulosa e incubadas en agar m FC a 45.5 °C
por 24 h. La flecha indica la amplificación de
6) Esperamos a que la membrana de filtro este
una colonia típica.
completamente seca.
RESULTADOS DEL MUESTREO:
Figura 2

 La temperatura de la muestra de agua


tomada estaba a 20°.
Figura 3

Fig2: Colonias azul grisáceo, típicas de


coliformes fecales de muestras de agua de río
(segunda muestra), recuperadas en filtro de
celulosa e incubadas en agar m FC a 45.5 °C
por 24 h. La flecha indica la amplificación de
una colonia típica.

La cantidad de colonias formadas en el primer


muestreo fue de 192. Fig3: Indica el momento de la medición de la
Luego se aplicó la siguiente fórmula: temperatura de una determinada cantidad de
agua del río.

 El PH de la muestra de agua fue de 7.

PRIMERA MUESTRA
Coliformes fecales/100 ml=
(192)/100*100=192(UFC)

La cantidad de colonias formadas en el


segundo muestreo fue de 186.

Aplicando la fórmula anterior


SEGUNDA MUESTRA Figura 4
Coliformes fecales/100 ml=
(186)/100*100=186(UFC) Fig4: muestra al peachimetro luego de haberlo
utilizado sobre una determinada cantidad de
agua del río.

El resultado de PH que es igual a 7 se comparó


con las tablas de patrón que se tiene.
Figura 5

Fig5: tablas de patrón para la verificación del


PH.

CONCLUSIONES:

Se verifico que la cantidad de coliformes


fecales presentes en el río con la cual trabaja la
Planta de Tratamiento de Agua La Atarjea, El
Agustino es de 192 UFC.

Además la cantidad de coliformes fecales


presentes en el río con la cual trabaja la Planta
de Tratamiento de Agua La Atarjea, Carabayllo
es de 186 UFC.

Concluyendo que el río más poblado por esto


microorganismo es de la Planta de Tratamiento
de Agua La Atarjea, El Agustino con 192 UFC.

Dándonos a entender que las poblaciones


aledañas a estos ríos están en un eminente
peligro de contagiarse de este microorganismo
que puede ser fatal para su salud, por ese
motivo exigimos a que se debe tomar
estrategias técnicas para poder prevenir dichos
males sobre la población e informales que no
se debe usar dichas aguas de los ríos para el
consumo humano ni para procesar los
alimentos ya que estos microorganismos se
depositan potencial mente en los alimentos.

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