INTRODUCCION

La enfermedad cardiovascular aterosclerótica es una de las principales causas de

mortalidad en nuestro país y en gran parte del mundo industrializado. Esta enfermedad de las
grandes arterias, es lentamente progresiva y comienza a temprana edad, si bien en general,
produce síntomas a partir de la cuarta década de la vida.

Varios factores de riesgo han sido identificados como fuertemente asociados con la
enfermedad cardiovascular aterosclerótica. El hábito de fumar, la hipertensión arterial y la
dislipoproteinemia (alteración en las lipoproteínas plasmáticas) son los factores de riesgo más
importantes. Otros factores de riesgo muy frecuentes son la presencia de antecedentes
familiares de infarto de miocardio, diabetes mellitus, obesidad, inactividad física, aumento de
fibrinógeno, etc. Por otra parte, el riesgo es mayor en hombres que en mujeres, se incrementa
con la edad y tiene un fuerte componente genético.

Numerosos e importantes estudios epidemiológicos han demostrado que el

incremento del colesterol plasmático aumenta el riesgo de enfermedad cardiovascular. El
principal objetivo del laboratorio de lípidos y lipoproteínas es la detección precoz de la
dislipoproteinemia, el diagnóstico y la clasificación del paciente y el seguimiento una
vez instalado el tratamiento.

Cabe destacar que alrededor del 70% de las dislipemias detectadas en el laboratorio
son secundarias a otras patologías, siendo posible su corrección a través del tratamiento de la
enfermedad de base. Por lo tanto, otro de los roles del laboratorio sería poder detectar y/o
descartar las causas que originan las dislipemias secundarias. De esta manera, el laboratorio
de lípidos y lipoproteínas contribuye a la prevención de la enfermedad aterosclerótica.

El colesterol total es el punto de partida del estudio de lípidos pero insuficiente por sí
solo, dado que es necesario conocer su distribución en por lo menos las dos lipoproteínas más
importantes que lo acarrean: colesterol-HDL (antiaterogénica) y colesterol-LDL (aterogénica).

Las últimas recomendaciones propuestas por el National Cholesterol Education

Programme (NCEP) han reconocido que el colesterol asociado a LDL (c-LDL) es el objetivo
primario a modificar para reducir al mínimo el riesgo cardiovascular. Por otro lado, tanto el
NCEP como la American Heart Association reconocen también que la corrección de niveles
disminuidos de c-HDL y niveles elevados de triglicéridos, son otras metas para alcanzar el
mismo fin.
 MUESTRA
Recolección:
Para el estudio de lípidos y lipoproteínas, el paciente debe estar en ayunas (12 a 14 horas). La
muestra de elección es suero, obtenido por retracción del coágulo en tubo seco y separado
dentro de los 30 minutos desde la extracción de sangre. Alternativamente, puede utilizarse
plasma obtenido con Na2.EDTA (1 g/l).
No se aconseja obtener plasma con heparina debido a su interferencia en las electroforesis,
como así tampoco oxalato, fluoruro y citrato, que pueden interferir en las determinaciones
químicas.
El ayuno de 12 a 14 horas es necesario para la determinación basal de triglicéridos puesto que
las concentraciones de este analito varían en los períodos postprandiales.
Estabilidad y almacenamiento:
El suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no procesarse en el día puede ser
conservado a 4 °C durante no más de 4 días o hasta dos meses a –20 °C. Puede agregarse
Na2.EDTA (1 g/l) al suero como conservador.
Para técnicas electroforéticas las muestras deben ser frescas (en lo posible del día), pueden
conservarse a 4 °C durante un tiempo máximo de 4 días y no deben ser congeladas.

2
 PERFIL LIPIDICO Y LIPOPROTEICO BASICO

El denominado “perfil lipídico y lipoproteico básico” está constituido por:

1) Observación del aspecto del suero.

2) Determinación de la concentración plasmática de triglicéridos.
3) Determinación de la concentración plasmática de colesterol total (c-total).
4) Determinación de la concentración plasmática de colesterol de HDL (c-HDL).
5) Determinación de la concentración plasmática de colesterol de LDL (c-LDL).
6) Cálculo del índice de riesgo aterogénico o índice de Castelli.

1) Observación del aspecto del suero

El aspecto del suero debe observarse varias horas después de haber sido separado
del coágulo sanguíneo y debe efectuarse a través de un haz de luz sobre un fondo oscuro y se
clasifica de la siguiente manera:

Límpido
Opalescente
Turbio
Lechoso

Con los sueros turbios o lechosos se realiza una segunda observación después de
dejar reposar el suero una noche en la heladera. En caso de quilomicrones presentes, éstos
forman una capa superior que sobrenada, siendo conveniente también observar si el
infranadante queda límpido o permanece turbio.
Es importante informar también si el suero está hemolizado o si es ictérico (indicador
de bilirrubinemia elevada).

3
2) Determinación de la concentración plasmática de triglicéridos (TG)

Método: Enzimático-colorimétrico según Trinder.

Fundamento del método: Los triglicéridos son hidrolizados por una lipasa específica,
liberando glicerol y ácidos grasos. El glicerol, a partir de reacciones enzimáticas acopladas,
dará un producto coloreado cuya absorbancia se mide a 505 nm.
lipasa
Triglicéridos glicerol + ácidos grasos
glicerokinasa
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP
glicerofosfatooxidasa
glicerol-1-P + O2 H2O2 + Dihidroxiacetona fosfato
peroxidasa
H2O2 + fenol + 4-aminofenazona 4(para-benzoquinona monoimino)
fenazona + H2O
(color rosado)

Interferentes: Hemólisis intensa (+)

Bilirrubina (> 20 mg/dl) (-)
Acido ascórbico (> 75 mg/dl) (-)
Acido úrico (> 20 mg/dl) (-)

Reactivos

- Reactivo para TG:

-Buffer Tris con diclorofenol pH=7,7.
-Reactivo enzimático (liofilizado): lipasa (>5000 U/L), glicerokinasa (>250 U/L),
glicerolfosfatooxidasa (>1500 U/L), peroxidasa (>900 U/L), ATP (2mM),
4-aminofenazona (1 mM).
- Testigo:
- Solución de glicerol de concentración conocida.

Técnica: Reconstituir el reactivo enzimático con buffer. En tubos de hemólisis colocar:

Blanco Testigo Muestra
Testigo -- 0,02 ml --
Suero -- -- 0,02 ml
Reactivo para TG 2 ml 2 ml 2 ml

Agitar manualmente.
Incubar 15 minutos a 37ºC ó 30 minutos a temperatura ambiente.
Medir la absorbancia a 505 nm frente al blanco de reactivo.

4
 A muestra
Cálculo: Triglicéridos = cc. testigo x --------------------
A testigo

Nota: El color es estable durante 2 horas.

La reacción es lineal hasta 1000 mg/dl.
El método es fácilmente adaptable a autoanalizador.

Valores de referencia: (NCEP 2001)

Deseable:  150 mg/dl
Límite elevado: 150-199 mg/dl
Elevado: 200-499 mg/dl
Muy elevado:  500 mg/dl

Bibliografía

-Bucolo G., David H. Quantitative determination of serum triglycerides by the use of enzymes.
Clin. Chem. 1973;19:476.

-Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6: 24-7.

- Executive Summary of the Third Report of the National Cholesterol Education Program
(NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in
Adults. (Adult Treatment Panel III). Jama 2001; 285: 2486-2497.

5
3) Determinación de la concentración plasmática de colesterol total

Método: Enzimático-colorimétrico según Trinder.

Fundamento del método: El colesterol esterificado es hidrolizado por una esterasa. El

colesterol libre así formado, junto con el existente en la muestra, es oxidado mediante una
reacción enzimática que produce peróxido de hidrógeno. Este es entonces medido mediante la
reacción de Trinder que genera un producto coloreado cuya absorbancia se mide a 505 nm.
colesterol esterasa
Ester de colesterol + H2O colesterol libre + ácidos grasos
colesterol oxidasa
colesterol libre* + O2 H2O2 + Delta-4-colestenona
peroxidasa
H2O2 + fenol + 4-aminofenazona 4(para-benzoquinona monoimino)
fenazona + H2O
(color rosado)

*colesterol libre proveniente de la hidrólisis de los ésteres de colesterol que se suma al

preexistente bajo la forma de colesterol libre.

Interferentes: Hemólisis intensa (+)

Bilirrubina (> 20 mg/dl) (-)
Acido ascórbico (> 75 mg/dl) (-)
Acido úrico (> 20 mg/dl) (-)
Hipertrigliceridemia severa. (+)

Reactivos

-Rectivo para colesterol:

a) Solución de 4-aminofenazona (25 mmol/L).
b) Solución de fenol (55 mmol/L).
c) Suspensión conteniendo lipasa fungal (300 U/ml), colesterol oxidasa (3 U/ml) y
peroxidasa (20 U/L).
-Testigo:
- solución de colesterol puro de concentración conocida.

Técnica: Preparar el reactivo de colesterol mezclando los reactivos en la siguiente proporción:

a : b : c : agua destilada ( 5 : 5 : 2 : 88).

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En tubos de ensayo colocar:

Blanco Testigo Muestra

Testigo -- 0,02 ml --
Suero -- -- 0,02 ml
Reactivo para colesterol 2 ml 2 ml 2 ml

Agitar manualmente.
Incubar 15 minutos a 37ºC ó 30 minutos a temperatura ambiente.
Medir la absorbancia a 505 nm frente al blanco de reactivo.

A muestra
Cálculo: Colesterol total = cc. testigo x ---------------
A testigo

Nota: El color es estable durante 2 horas.

La reacción es lineal hasta 500 mg/dl.
El método es fácilmente adaptable a autoanalizador.

Valores de referencia (NCEP 2001)

Deseable: 200 mg/dl.

Límite: 240 mg/dl.
Elevado: >240 mg/dl.

Bibliografía

- Trinder P. Ann. Clin. Biochem. 1969; 6:24-7.

- Executive Summary of the Third Report of the National Cholesterol Education Program
(NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in
Adults. (Adult Treatment Panel III). Jama 2001; 285: 2486-2497.

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4) Determinación de la concentración plasmática de colesterol de HDL (c-HDL)
por métodos de precipitación

Fundamento del método: Las lipoproteínas que contienen apo B: VLDL, IDL, LDL y
quilomicrones (si estuviesen presentes), precipitan selectivamente en presencia de un
polianión (ácido fosfotúngstico, dextrán sulfato, etc) y un catión divalente (magnesio,
manganeso, etc). De esta manera se obtiene HDL aislada en el sobrenadante donde se
determina su contenido de colesterol por el método enzimático-colorimétrico.

Reactivos
Existen diferentes alternativas según el polianión y el catión divalente utilizados. A continuación
se presentan dos variantes:

Precipitación con dextrán sulfato y magnesio: (Método a realizar en el TP 1)

-Reactivo precipitante:
-Dextrán sulfato (PM: 50.000) 0.032 mmol/l
-Cloruro de magnesio 1.5 mol/L.
Mezclar en partes iguales ambos reactivos antes de usar.

Técnica: En un tubo cónico colocar 0.5 ml de suero y adicionarle 0.05 ml de reactivo

precipitante. Agitar en vortex durante 30 segundos. Dejar reposar durante 30 min a 4°C o 15
min en baño de agua a la misma temperatura. Centrifugar 10 minutos a 4000 rpm. Utilizar el
sobrenadante para el dosaje del colesterol.

Precipitación con ácido fosfotúngstico y magnesio: (Método a realizar en el TP

integrador)

-Reactivo precipitante:
-Acido fosfotúngstico 0,55 mmol/L
-Cloruro de magnesio 25 mmol/L.
-Reactivo para colesterol

Técnica: En un tubo cónico colocar 0,25 ml de suero y adicionarle 0,5 ml de reactivo

precipitante. Agitar en vortex durante 30 segundos. Dejar reposar durante 10 minutos a
temperatura ambiente. En caso de temperatura ambiente mayor a 30º C, colocar en baño de
hielo. Centrifugar 10 minutos a 4000 rpm.
Utilizar el sobrenadante para el dosaje del colesterol.
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Dosaje de colesterol en el sobrenadante luego de la precipitación:
Blanco Testigo Sobrenadante
Testigo -- 0,02 ml --
Sobrenadante -- -- 0,1 ml
Reactivo para colesterol 2 ml 2 ml 2 ml

Agitar manualmente.
Incubar 15 minutos a 37ºC ó 30 minutos a temperatura ambiente.
Medir la absorbancia a 505 nm frente al blanco de reactivo.

A muestra
Cálculo: Colesterol-HDL = cc. testigo x --------------- x f *
A testigo

* f es el factor utilizado para corregir las diluciones de la muestra, efectuadas durante la

precipitación y la reacción de color. Además contempla la diferencia de volúmenes de testigo y
sobrenadante, utilizados en la reacción de color.

Vf precip. x Vf color mtra x V test

f = --------------------------------------------
V mtra x Vf color test X V sn

Vf precip: volumen final de precipitación

V mtra: volumen de suero
Vf color mtra: volumen final de la reacción de color para el desconocido
Vf color test: volumen final de la reacción de color para el testigo
V test: volumen de testigo
V sn: volumen de sobrenadante de la precipitación
f = 0.229, para la precipitación con dextrán sulfato
f = 0.624, para la precipitación con ácido fosfotúngstico

Valores de referencia (NCEP 2001)

Deseable:  40 mg/dl.
Bajo: <40 mg/dl

Bibliografía
- Lopes-Virella M.F. y col. Clin. Chem. 1977; 23:882.
- Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6: 24-7.
- Executive Summary of the Third Report of the National Cholesterol Education Program
(NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in
Adults. (Adult Treatment Panel III). Jama 2001; 285: 2486-2497.

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5) Determinación de la concentración plasmática de colesterol de LDL (c-LDL)

5.1. Cálculo según la fórmula de Friedewald

La fórmula de Friedewald permite efectuar una estimación de la concentración del c-

LDL a partir de los valores de colesterol total, triglicéridos plasmáticos y c-HDL.
col total = c-HDL + c-LDL + c-VLDL
TG
----- estima el contenido de colesterol de VLDL (c-VLDL) cuando los niveles de TG son normales
5

TG
c -LDL = colesterol total - (------- + c-HDL)
5

5.2. Determinación por precipitación selectiva

Método: Precipitación selectiva con polivinil sulfato (PVS).

Fundamento del método: La lipoproteína de baja densidad (LDL) puede ser aislada por
precipitación con polímeros de alto peso molecular como el PVS. Luego de centrifugar, en el
sobrenadante quedan VLDL y HDL. El colesterol de dichas lipoproteínas se mide utilizando el
método enzimático-colorimétrico. Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el
sobrenadante, se obtiene el c-LDL.

Reactivos

-Reactivo precipitante: Solución de sulfato de polivinilo (10 g/L) disuelto en polietilenglicol

(PM=600) al 25% P/V, pH=6,7.
-Reactivo para colesterol

Técnica: En un tubo cónico colocar 0,2 ml de suero y adicionarle 0,1 ml de reactivo

precipitante (sulfato de polivinilo). Agitar en vortex durante 30 segundos. Dejar reposar durante
10 minutos a temperatura ambiente. Centrifugar 10 minutos a 4000 rpm.
Utilizar el sobrenadante para el dosaje del colesterol:

Blanco Testigo Sobrenadante

Testigo -- 0,02 ml --
Sobrenadante -- -- 0,1 ml
Reactivo para colesterol 2 ml 2 ml 2 ml

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Agitar manualmente.
Incubar 15 minutos a 37ºC ó 30 minutos a temperatura ambiente.
Medir la absorbancia a 505 nm frente al blanco de reactivo.

A muestra
Cálculo: Colesterol-LDL = colesterol total - (cc. testigo x ----------------- x 0,312*)
A testigo

* 0,312 es el factor utilizado para corregir las diluciones de la muestra, efectuadas durante la
precipitación y la reacción de color. Además contempla la diferencia de volúmenes de testigo y
sobrenadante utilizados en la reacción de color.

Vf precip. x Vf color mtra x V test

Factor= ----------------------------------------------
V mtra x Vf color test X V sn

Vf precip: volumen final de precipitación = 0.3 ml

V mtra: volumen de suero = 0.2 ml
Vf color mtra: volumen final de la reacción de color para el desconocido= 2.1 ml
Vf color test: volumen final de la reacción de color para el testigo= 2.02 ml
V test: volumen de testigo= 0.02 ml
V sn: volumen de sobrenadante de la precipitación= 0.1 ml

Valores de referencia (NCEP 2001)

Optimo: <100 mg/dl

Cercano al óptimo 100-129 mg/dl.
Límite: 130-159 mg/dl.
Elevado: 160-189 mg/dl
Muy elevado >190 mg/dl

Bibliografía

- Seidel D., Ann. Clin. Biochem., 1982;19:278.

- Levy R.I., Clin. Chem., 1981;27:653.

- Trinder P. Ann Clin Biochem 1969; 6: 24-7.

- Assmann G, Jabs HU, Kohnert U, Nolte W, Schriewer H. LDL-cholesterol determination in

blood serum following precipitation of LDL with polyvinylsulfate. Clin Chim Acta 1984;
140(1):77-83.

- Executive Summary of the Third Report of the National Cholesterol Education Program
(NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in
Adults. (Adult Treatment Panel III). Jama 2001; 285: 2486-2497.
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Métodos directos para la medida de colesterol HDL y LDL

Los métodos directos surgieron como consecuencia de la búsqueda de exactitud y precisión en

la medida del colesterol de ambas lipoproteínas tanto para el diagnóstico, como para el
seguimiento de los pacientes en tratamiento.
Estos métodos utilizan la muestra de suero sin preparación previa, son totalmente
automatizados, se realizan en dos pasos y utilizan pequeños volúmenes de muestra. Además
permiten mayor exactitud en el pipeteo y el control de la temperatura.
El fundamento general para la medida de ambas fracciones se basa en el aislamiento de la
lipoproteína de interés mediante el enmascaramiento de las demás lipoproteínas a través de la
formación de un complejo soluble en medio acuoso. En un segundo paso se mide el colesterol
de la lipoproteína que quedó libre.

Colesterol-HDL
El fundamento de este método es formar un complejo soluble en medio acuoso con LDL, IDL y
lipoproteínas ricas en TG (VLDL, Quilomicrones y sus remanentes) utilizando un polianión.
Primer paso: los ensayos de primera generación utilizaban α- ciclodextrina en la formación del
complejo soluble, luego ésta fue reemplazada por dextran-sulfato en diferentes
concentraciones en combinación con cloruro de magnesio.
Segundo paso: en este paso se agregan las enzimas colesterol-esterasa y colesterol-oxidasa
modificadas con polietilen-glicol lo cual resulta en una actividad catalítica que disminuye en el
siguiente orden:
c-HDL > c-Quilomicrones y c-VLDL > c-LDL

Debe tenerse en cuenta que la selectividad no es absoluta, se observa un desvío positivo que
se incrementa a medida que aumenta la presencia de lipoproteínas ricas en triglicéridos.
Este paso incluye la reacción colorimétrica con el reactivo de Trinder.

Colesterol-LDL
El fundamento de este método es aislar la LDL de las demás lipoproteínas y medir
posteriormente su colesterol.
Primer paso: para obtener la LDL aislada se pueden utilizar anticuerpos policlonales anti apo A
y anti apo E que capturan a las demás lipoproteínas o utilizar un detergente no iónico que
solubiliza el colesterol de todas las lipoproteínas (HDL, VLDL, IDL y Quilomicrones) excepto el
col-LDL, formando una micela selectiva.

12
Segundo paso: se agregan las enzimas colesterol-esterasa y colesterol-oxidasa y se mide el
col-LDL a través de una reacción colorimétrica con el reactivo de Trinder.
La mayor especificidad en la reacción de col-LDL, se puede lograr agregando un detergente
junto con las enzimas haciendo que las actividades relativas del colesterol en las fracciones
aumenten en el siguiente orden: HDL < quilomicrones < VLDL < LDL.

13
6) Cálculo del índice de riesgo aterogénico o índice de Castelli.

El riesgo de sufrir procesos ateroscleróticos en un paciente depende de múltiples

factores, entre otros, del metabolismo lipoproteico. Desde este punto de vista, el índice de
riesgo aterogénico o índice de Castelli permite efectuar una mejor estimación del riesgo
aterogénico de un paciente que la concentración del colesterol total o del c-HDL en forma
aislada.

Colesterol total
Indice de riesgo aterogénico = ----------------------
c-HDL

Valor de referencia

Deseable: < 4,5

14
Seminario Nº 1. Actividades.

A-Para los siguientes ejemplos calcule el riesgo a 10 años según el Framingham

Point Scores:

Ejemplo 1:
a) Hombre de 55 años, fumador, colesterol total: 287 mg/dl, c-HDL: 30mg/dl y presión
arterial: 170mm.
b) El mismo hombre del punto a) recibe tratamiento farmacológico (antihipertensivo e
hipolipemiante) y modifica sus hábitos: deja de fumar y realiza ejercicio físico. Seis
meses después presenta: colesterol total: 180 mg/dl, c-HDL 53 mg/dl, presión arterial:
120mm.

Ejemplo 2:
a) Mujer de 23 años, fumadora, colesterol total: 230 mg/dl, c-HDL: 35 mg/dl, presión
arterial <130mm.
b) La misma mujer del punto a) deja de fumar y comienza a realizar actividad física
periódicamente. Seis meses después presenta: colesterol total: 170 mg/dl, c-HDL: 63
mg/dl, presión arterial<130mm.

15
16
B- Métodos de referencia y recomendados para determinaciones de lípidos

Método 1: (Abell-Kendall 1)

1. Extracción del colesterol (con solventes orgánicos, con zeolita)

2. Hidrólisis Alcalina
Colesterol Esterificado HO- Colesterol libre + Ácidos Grasos Libres
3. Reacción colorimétrica con Acido Sulfúrico y Anhidrido Acético (Liebermann-Burchard)
Se produce un producto de oxidación del Colesterol libre que absorbe a 410 nm

Método 2:
Colesterol esterasa
Colesterol Esterificado Colesterol libre + Ácidos Grasos Libres

Colesterol oxidasa
Colesterol libre + O2 -4-Colestenona + H2O2

Peroxidasa
H2O2 + Fenol +4-aminofenazona Se forma complejo coloreado
(absorbe a 505 nm)
2
Método 3: (Van Handel-Zilversmit )

1. Extracción de TG (con ácido silícico y cloruro de metileno ó con solventes)

2. Hidrólisis alcalina
TG HO- Glicerol + Ácidos Grasos Libres

3. Reacción colorimétrica: oxidación del glicerol y formación de compuesto coloreado

con el Acido Cromotrópico/Sulfúrico
Se forma un producto de reacción con el Glicerol (Abs. 570 nm)

Método 4:
Lipasa
Triglicéridos Glicerol + Ácidos Grasos Libres

Glicerokinasa
Glicerol + ATP Glicerol-1-P + ADP

Glicerofosfatooxidasa
Glicerol-1-P + O2 Dihidroxiacetona-P + H2O2

Peroxidasa
H2O2 + Fenol +4-aminofenazona Se forma complejo coloreado
(absorbe a 505 nm)

a) Clasificar los métodos descritos según sus características en común.

b) Buscar ventajas y desventajas de ellos.
c) Piense ejemplos de muestras sobre las que podría utilizarse cada uno.
METODO DE REFERENCIA PARA c-HDL (CDC)3

A)
Ultracentrifugación
d=1.006 g/ml VLDL
Suero 105.000xg
18 hs LDL + HDL
(puede contener pequeñas
cantidades de IDL y Lp(a))

Reacción con:
1.Heparina
2.Cl2Mn
B)
Centrifugación
3000 rpm/15’

HDL

LDL

Infranadante
(LDL + HDL)

C) Medida del colesterol del sobrenadante usando el método modificado de Abell-Kendall

1. ¿En qué propiedades fisicoquímicas de las lipoproteínas se basa cada paso del
método descrito?
2. ¿Qué clase de método se usa en C?
3. ¿En qué tipo de laboratorio cree que puede usarse este método y cuál puede ser su
utilidad?

18
 METODO DE REFERENCIA PARA c-LDL (CDC3): -Cuantificación

A)
Ultracentrifugación
d=1.006 g/ml
Suero 105.000xg Sobrenadante
18 hs VLDL

Infranadante
LDL + HDL
(puede contener pequeñas
cantidades de IDL y Lp(a))

B) Medida del colesterol del infranadante usando el método modificado de Abell-Kendall

C) Cálculo del Colesterol 

Colesterol = colesterol del infranadante – c-HDL*

*Medido según método de referencia

1. ¿En qué propiedades fisicoquímicas de las lipoproteínas se basa cada paso del
método descrito?
2. ¿Por qué se denomina  cuantificación en vez de medida del col-LDL?
3. ¿En qué tipo de laboratorio cree que puede usarse este método y cuál puede ser su
utilidad?

Bibiliografía:

1. Abell LL, Levy BB, Brodie BB, Kendall FE. Simplified methods for the estimation of
total colesterol in serum and demostration of its especificity. J Biol Chem 1951;
195:357-66.

2. Van Handel E, Zilversmit DB. Micromethod for the direc determination of triglycerides.
J Lab Clin Med 1957; 50:152-7.

3. Hailini A, Karon J, Lippel K, eds. Manual of laboratory operations. In: Lipid Research
nd
Clinics Program, Lipid and Lipoprotein analysis, 2 ed. Bethesda, MD: US. Dept.
Health and Human Services, 1982.

19
C-Cuestionario

1. Elabore un cuestionario para realizar en su laboratorio a los pacientes que

concurren a realizarse un estudio de lípidos y lipoproteínas.

2. Un paciente concurre a su laboratorio y reporta las siguientes características:

Hombre, fuma 15 cigarrillos diarios, trabaja en un estudio contable. El paciente es
asmático y durante el último mes presentó una crisis a raíz de la cual fue tratado
con glucocorticoides. Los resultados de laboratorio fueron:
Aspecto del suero: opalescente
colesterol total: 245 mg/dl
Triglicéridos: 320 mg/dl
c-HDL: 23 mg/dl
c-LDL: 200 mg/dl
¿Cómo interpreta los resultados y que sugerencias realizaría al médico?

3. En un laboratorio se recibe una muestra para un estudio de lípidos y lipoproteínas

que presenta aspecto turbio, los resultados del estudio son:

colesterol total: 330 mg/dl

Triglicéridos: 700 mg/dl
c-HDL: 85 mg/dl
c-LDL: 105 mg/dl (realizado por fórmula de Friedwald)
¿Qué errores cree que se pueden haber cometido durante el procesamiento de
esta muestra?

4. Elija una respuesta y justifique:

 Dónde mediría el colesterol total para realizar un screening:
a) escuela primaria
b) centro de PAMI
c) centro de una plaza un fin de semana
 En cuál de los siguientes casos considera que debería esperar a terminar
el tratamiento para realizar el estudio de lípidos y por qué:
a) hipertenso tratado con -bloqueante
b) mujer que consume anticonceptivos orales
c) paciente transplantado tratado con ciclosporinas
d) paciente tratado con glucocorticoides debido a un proceso
inflamatorio agudo.
 En cuál de los siguientes casos elegiría un método enzimático o un método
químico para la medida de colesterol
a) extracto alcohólico de un tejido animal
b) suero de perro
c) suero humano previamente precipitado con Heparina/Mn2+

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