Lampiran 1.

Perhitungan Persamaan Regresi Amlodipin Besilat BPFI

No X Y XY X2 Y2

1 0 0 0 0 0

2 16 0,187 2,992 256 0,035

3 24 0,261 6,264 576 0,068

4 33 0,347 11,104 1024 0,119

5 40 0,437 17,48 1600 0,196

6 48 0,517 24,816 2304 0,269

Σ 160 1,749 62,656 5760 0,687

Rata-rata 26,67

n∑ XY − ∑ X ∑ Y
a=
n∑ X 2 − (∑ X ) 2

6 × 62,656 − 160 × 1,746

=
6(5760) − (160) 2

= 0,010778

b= Y −aX

= 0,291- (0,010778) (26,67)

= -0,003764

Maka persamaan regresinya adalahY= 0,010778 x-0,003764

∑ XY − ∑ X .∑ Y / n
[∑ X − ∑ ( X ) / n][Y −∑ (Y ) ]
r=
2 2 2 2
/n

62,656 − 160 × 1,746 6

=

5760 − (160)2 
0,687 − 1,74612



 6    6 

16,096
= = 0,9992
16,108

41

Universitas Sumatera Utara

 Lampiran 2. Data Kadar Amlodipin Besilat Sediaan Tablet

Penimbang Konsentrasi Konsentrasi

Nama Setara Absorban
an Teoritis Perolehan Kadar%
Sediaan (mg) si
(mg) (mcg/ml) (mcg/ml)

Amlodipin 584 19,98 0,3723 35,96 34,19 94,71

besilat 585 20,02 0,3755 36,04 34,49 95,70
Generik 583 19,94 0,3755 35,90 34,49 95,73
(PT. 585 20,01 0,3683 36,03 33,82 93,56
Hexpharm 584 19,98 0,3783 35,95 34,75 96,26
Jaya) 584 19,98 0,3765 35,97 34,58 95,79
203 20,29 0,3875 36,52 35,60 97,11
204 20,38 0,3817 36,68 35,06 95,22
Tensivask
205 20,40 0,3779 36,72 34.71 94,16
(Dexa
203 20,28 0,3676 36,50 33,75 92,11
Medika)
204 20,29 0,3804 36,68 34,94 95,31
203 20,29 0,3774 36,52 34,66 94,54
357 20,01 0,3763 36,01 34,56 95,60
358 20,04 0,3783 36,07 34,07 95,97
Normoten 359 20,10 0,3710 36,18 35,42 93,81
(Soho) 358 20,04 0,3856 36,07 34,28 97,82
359 20,10 0,3733 36,18 34,28 94,38
357 19,98 0,3733 35,96 34,32 94,96
256 20,06 0,3838 36,10 35,26 97,28
Lopiten 258 20,22 0,3838 36,26 35,26 96,52
(Guardian 255 19,98 0,3783 35,96 34,75 96,26
Pharmata 256 20,06 0,3718 36,10 34,14 94,19
ma 257 20,14 0,3810 36,25 35,00 96,18
255 19,98 0,3792 35,96 34,83 96,48

42

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Generik

Hexpharm Jaya

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 94,71 -0,581 0,337561

2 95,70 0,409 0,167201
3 95,73 0,439 0,192721
4 93,56 -0,731 2,996361
5 96,26 0,969 0,938961
6 95,79 0,499 0,249001
X = 95,291 ∑ = 4,881886

SD =
∑ ( X − Xi) 2

=
4,881886
= 0,9881
n −1 6 −1

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01 ;=6, dk =5, dari daftar tabel

distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung ≤ -ttabel

X−X
t =
SD
n

t hitung 1 : − 0,581 = −1,4402

0,4034

t hitung 2 :
0,409 = 1,0138
0,4034

t hitung 3 :
0,439 = 1,0882
0,4034

t hitung 4 :
− 1,731 = −4,2910 (data ditolak)
0,4034

t hitung 5 :
0,969 = 2,4020
0,4034

t hitung 6 :
0,499 = 1,2369
0,4034

43

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. (Lanjutan)

Karena thitung 4 ≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan pengujian

terhadap data yang dianggap tidak menyimpang.

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 94,71 -0,928 0,861184

2 95,70 0,062 0,003849
3 95,73 0,092 0,008464
4 96,26 0,622 0,386884
5 95,79 0,152 0,023104
X = 95,638 ∑ = 1,28348

SD =
∑(X − X ) 2

=
1,28348
= 0,5664
n −1 5
Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 5; dk = 4, dari daftar tabel
distribusi t di peroleh ttabel = 4,6040

X−X
t =
SD
n

t hitung 1 : − 0,928 = −3,6636

0,2533

t hitung 2 :
0,062 = 0,2447
0,2533

t hitung 3 :
0,092 = 0,3632
0,2533

t hitung 4 :
0,622 = 2,45555
0,2533

t hitung 5 :
0,152 = 0,6000
0,2533

44

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. (Lanjutan)

Karena thitung ≤ ttabel maka data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
SD
µ = X ± t(1-1/2α)dk x
n
0,5564
= 95,638 ± ( 4,6040 x )
5
= 95,638% ± 1,1454%

45

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Dalam Tablet Tensivask PT.
Dexa Medika

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 97,11 2,37 5,6169

2 95,22 0,48 0,2304
3 93,81 -0,58 0,3364
4 97,82 -2,63 6,9169
5 94,96 0,57 0,3249
6 94,96 -0,2 0,04
X =95,42 ∑ = 13,4655

SD =
∑ ( X − Xi) 2

=
13,4655
= 1,6410
n −1 5
Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01 ;=6, dk = 5, dari daftar tabel

distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung ≤ -ttabel

X−X
t =
SD
n

t hitung 1 : 2,37 = 3,5378

0,6699

t hitung 2 :
0,48 = 0,7165
0,6699

t hitung 3 :
− 0,58 = −0,8658
0,6699

t hitung 4 :
− 2,63 = −3,9259
0,6699

t hitung 5 :
0,57 = 0,8508
0,6699

t hitung 6 :
− 0,2 = −0,2985
0,6699

46

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)

Karena semua data thitung ≤ ttabel, maka data diterima

Maka kadar sebenarnya terletak antara:

μ= X ± t (1−1 / 2α ) dk x SD / n

 1,6410 
= 94,74 % ±  4,0321 ×  %
 6 

= 94,74% ± 2,7011%

47

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Dalam Tablet Normoten
(Soho)

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 95,60 0,18 0,0324

2 95,97 0,55 0,3025
3 93,81 -1,61 2,5921
4 97,82 2,4 5,76
5 94,38 -1,04 1,0816
6 95,96 -0,46 0,2116
X =95,42 ∑ = 9,9802

SD =
∑ ( X − Xi) 2

=
9,9802
= 1,4128
n −1 5
Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01 ;=6, dk=5, dari daftar tabel

distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung ≤ -ttabel

X−X
t =
SD
n

t hitung 1 : 0,18 = 0,3121

0,5767

t hitung 2 :
0,55 = 0,9537
0,5767

t hitung 3 :
− 1,61 = −2,7917
0,5767

t hitung 4 :
2,4 = 4,1616 (data ditolak)
0,5767

t hitung 5 :
− 1,04 = −1,8033
0,5767

t hitung 6 :
− 0,46 = −0,7976
0,5767

48

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)

Karena thitung ≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan pengujian terhadap
data yang dianggap tidak menyimpang.

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 95,60 0,66 0,4356

2 95,97 -1,03 1,0609
3 93,81 -1,13 1,2769
4 94,38 -0,56 0,3136
5 95,96 -0,02 0,0004

X =94,94 ∑ = 3,0874

SD =
∑(X − X ) 2

=
3,0874
= 0,8785
n −1 4

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 5; dk = 4, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,6040

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung ≤ -ttabel

X−X
t hitung =
SD / n

t hitung 1 : 0,66 = 2,6695

0,4233

t hitung 2 :
1,03 = 2,6221
0,4233

t hitung 3 :
0,56 = −1,4256
0,4233

49

Universitas Sumatera Utara

t hitung 4 :
− 0,56 = −1,4256
0,4233

t hitung 5 :
− 0,22 = 0,0509
0,4233

Lampiran 5. (Lanjutan)

Karena semua data thitung ≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan

pengujian terhadap data yang dianggap tidak menyimpang.

Maka kadar sebenarnya terletak antara:

μ= X ± t (1−1 / 2α ) dk x SD / n

 0,8785 
= 94,94 % ±  4,6040 ×  %
 5 

= 94,94% ± 1,8084 %

50

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Dalam Tablet Lopiten
(Guardian Pharmatama)

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 97,28 1,13 1,2769

2 96,52 0,37 0,1369
3 96,26 0,11 0,0121
4 94,19 -1,96 3,8416
5 96,18 0,03 0,0009
6 96,48 0,33 0,1089
X =96,15 ∑ = 5,3773

SD =
∑ ( X − Xi) 2

=
5,3773
= 1,0370
n −1 5
Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01 ;=6, dk=5, dari daftar tabel

distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung ≤ -ttabel

X−X
t =
SD
n

t hitung 1 : 1,13 = 2,6695

0,4233

t hitung 2 :
0,37 = 0,8740
0,4233

t hitung 3 :
0,11 = 0,2598
0,4233

t hitung 4 :
− 1,96 = −4,6302 (data ditolak)
0,4233

t hitung 5 :
0,03 = 0,0708
0,4233

51

Universitas Sumatera Utara

t hitung 6 :
0,33 = 0,7795
0,4233

Lampiran 6. (Lanjutan)

Karena thitung ≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan pengujian terhadap

data yang dianggap tidak menyimpang.

No Kadar [ X ] (%) X−X (X − X ) 2

1 97,28 0,736 0,5416

2 96,52 -0,024 0,0005
3 96,26 -0,284 0,0806
4 96,18 -0,364 0,1324
5 96,48 -0,064 0,0040
X =96,544 ∑ = 0,75952

SD =
∑(X − X ) 2

=
0,75952
= 0,4357
n −1 4
Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 5; dk = 4, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,6040
Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung ≤ -ttabel

X−X
t hitung =
SD / n

t hitung 1 : 0,73 = 3,7782

0,1942

t hitung 2 :
− 0,02 = −0,1232
0,1942

t hitung 3 :
− 0,28 = −1.4579
0,1942

t hitung 4 :
0,36 = −1,8685
0,1942

t hitung 5 :
0,05 = −0,3285
0,1942

52

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. (Lanjutan)

Karena semua data ttabel ≤ thitung atau≤ ttabel maka data diterima.

Maka kadar sebenarnya terletak antara:

μ= X ± t (1−1 / 2α ) dk x SD / n

 0,4357 
= 96,54 % ±  4,6040 ×  %
 5 

= 96,54% ± 0,896 %

53

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran

Diketahui : Nilai Absorptivitas spesifik (A 11 = 119a)

Tebal sel (b) = 1cm

A
c = 1
A xb
1

0,4343
c = = 0,036495 g/ml
119.1

c = 3649 μg/ml

c = 36,49 μg/ml

Konsentrasi untuk pengukuran panjang gelombang digunakan 36,49 mcg/ml.

54

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8.Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel

Berat 20 tablet = 3539,2 g

Kandungan Amlodipin Besilat pada etiket = 10 mg

Dibuat larutan uji dengan kadar lebih kurang 36 μg/ml.

Ditimbang serbuk setara dengan 20 mg amlodipin besilat, maka berat sampel yang

20mg
ditimbang adalah = × 3539,2mg
20 × 13,87

= 255,16 mg

Sampel yang telah ditimbang dimasukkan dalam labu ukur 50 ml, lalu dilarutkan dalam

metanol dan cukupkan dengan akudes sampai garis tanda, dikocok homogen.

20,06mg
Kadar larutan uji = × 1000 = 402,2 µg / ml
50ml

Kemudian dipipet 4,5 ml dari larutan uji, lalu dimasukkan kedalam labu ukur 50 ml,

dilarutkan dengan pelarut Metanol, dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda dan

dikocok sampai homogen.

55

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)
Persamaan garis regresi: Y =0,010778 X – 0,003764

Konsentrasi Luas
No (µg/ml) Puncak Yi Y - Yi (Y – Yi)2
X Y
1. 0 0 0 0 0
2. 16 0,187 0,1769 0,0101 0,00010201
3. 24 0,261 0,2624 -0,0014 0,00000196
4. 32 0,347 0,3485 -0,0015 0,00000225
5. 40 0,437 0,4348 0,0022 0,00000484
6. 48 0,517 0,5211 -0,0041 0,00001681
Ʃ 160 1,749 0,00012787
Rata-rata

∑ (Y − Yi)
2

S = n−2
0,00012786
=
6−2
= 0,0056

LOD = 3 xSB LOQ = 10 xSB

Slope Slope

3x0,0056 10x0,0056
= =
0,010778 0,010778
= 1,5587 µg/ml = 5,1957 µg/m

56

Universitas Sumatera Utara

 14. Nilai Distribusi t
Lampiran 10.

57

Universitas Sumatera Utara

 14. Nilai Distribusi t
Lampiran 10.

58

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10.Tabel Distribusi t

59

Universitas Sumatera Utara

Lampiran . Gambar Timbangan analitik

Gambar 5. Timbangan Analitik

60

Universitas Sumatera Utara

 DAFTAR PUSTAKA

Anonim. (2010). Epidemilogi Hipertensi di Indonesia. Tanggal 28 Agustus 2010.

http://www.hiperensiindonesia.or.id

Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Hal. 1133

Day, R.A., dan Underwood, A.L. (1999). Analisis Kimia Kuantitatif. Penerjemah:
Pujaatmaka Edisi ke V. Jakarta: Erlangga. Hal. 393.

Dachriyanus. (2004). Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi.

Padang: Andalas University Press. Hal. 1.

Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2009). Kimia Farmasi Analisis. Cetakan IV.
Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 13.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara

Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian.1 (3):117-
133.

Holme, D.J., dan Peck, H. (1983). Analytical Niochemistry. London: Longman.

Hal. 40.

ISFI. (2008). ISO Farmakoterapi. Jakarta: Penerbit PT. ISFI. Hal. 119.

Katzung, B.G. (2001). Farmakologi Dasar dan Klinik. Penerjemah dan Editor
Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Edisi I.
Jakarta: Penerbit Salemba Medika. Hal. 158.

Moffat, A.C. (2005). Clark`s Isolation and Identification of Drugs and Poisons.
Edisi 3. London: The Pharmaceutical Press. Hal. 1157-1158.

Mycek, M.J., Harvey, R.A., dan Champe, C.C. (2001). Farmakologi Ulasan
Bergambar. Lippincott`s Illustrated Reviews: Pharmacology. Penerjemah
Azwar Agoes. Edisi II. Jakarta: Penerbit Widya Medka. Hal. 411-412.

Roth, J.H., dan Blaschke, G. (1998). Analisis Farmasi. Penerjemah: Kisman.

Yogyakarta: UGM Press. Hal. 355-357.

Shargel, L. (1985). Biofarmasetika Dan Farmakokinetika Terapan. Edisi II

Penerjemah Fasich. Surabaya: Penerbit Universitas Airlangga. Hal. 16.

Satiadarma, K. (2004). Azas Pengembangan Prosedur Analisis. Surabaya:

Airlangga University Press. Hal. 87-91.

39

Universitas Sumatera Utara

Tan, T.H., dan Rahardja. K (2002). Obat-obat Penting. Jakarta: Penerbit PT. Elek
Media Komputindo. Hal. 308-313.

The United States Pharmacopeia. (2009).The National Formulary. Edisi 31. The
United States Pharmacopoeia Convention. Hal 1400-1401.

WHO. (1992). The Validation of Analytical Procedures Used in Examination of

Pharmaceitical Materials. Germany: WHO Technical Report Series. Hal.
288-298.

40

Universitas Sumatera Utara

 BAB III

METODE PENELITIAN

Metode penelitian yang dilakukan adalah metode deskriptif. Penelitian ini

dilaksanakan diLaboratorium Kimia Farmasi Kuantitatif Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara.

3.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah satu unit

Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu mini 1240), neraca analitik (AND GF- 200),

dan alat-alat gelas seperti labu takar, gelas ukur, beaker glass.

3.2 Bahan-bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Amlodipin Besilat

BPFI, akuades (E-Merck), Metanol (E-Merck). Sampel yang digunakan adalah

tablet generik Amlodipin (Hexparm), Normoten® (Soho), Tensivask® (Dexa

Medika), Lopiten® (Guardian Pharmatama).

3.3 Pengambilan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa

membandingkan antara satu sampel dengan sampel yang lain, karena sampel

dianggap homogen. Sampel yang digunakan adalah tablet amlodipin generik dan

nama dagang dengan jumlah zat aktif 10 ���������

3.4 Prosedur Penelitian

3.4.1 Pembuatan Larutan Induk BPFI

Sebanyak 50 mg amlodipin BPFI ditimbang seksama, dimasukkan ke

dalam labu tentukur 50 ml, ditambah dengan 5 ml metanol dikocok hingga larut

28

Universitas Sumatera Utara

dan dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda, diperoleh larutan induk

dengan konsentrasi 1000 µg/ml, larutan ini disebut Larutan Induk Baku I (LIB I).

Dari larutan ini dipipet 10 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml,

diencerkan dengan akuades sampai garis tanda, lalu dikocok homogen sehingga

diperoleh larutan dengan konsentrasi 200 µg/ml (LIB II).

3.4.2 Penetapan Panjang Gelombang Serapan Maksimum

Dipipet sebanyak 4,5 ml Larutan induk Baku (LIB II) 200 µg/ml,

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml (36 µg/ml), kemudian dicukupkan

dengan akuades sampai garis tanda, serapan diukur pada panjang gelombang 200 -

400 nm.

3.4.3Penetapan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi

Dipipet Larutan Induk Baku II (LIB II) BPFI (200 µg/ml) sebanyak 2 ml,3

ml,4 ml,5 ml,6 ml, masing-masing dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml,

ditambahkan akuades sampai garis tanda. Lalu dikocok homogen. Diperoleh

larutan dengan dengan konsentrasi 16µg/ml, 24 µg/ml,32µg/ml, 40 µg/ml, 48

µg/ml. Kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum yang

diperoleh. Hasil dapat dilihat pada Tabel 2 (Halaman 22).

3.4.4 Uji Validasi Dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi, Dan
batas kuantitasi

3.4.4.1 Uji Akurasi dengan persen perolehan kembali (% Recovery)

Uji akurasi dilakukan dengan metode penambahan baku (Standard

Addition Method) yaitu bahan baku yang ditambahkan pada sampel yaitu

9,00 µg/ml, uji recovery dilakukan 6 kali replikasi, kemudian dianalisi

dengan perlakuan yang sama seperti pada penetapan kadar sampel. pada

29

Universitas Sumatera Utara

 penetapan kadar sampel. Persen perolehan kembali (% recovery) dapat

dihitung dengan rumus sebagai berikut:

A− B
% Recovery = x 100%
C

Keterangan:

A= Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan bahan baku

B= Konsentrasi sampel sebelum penambahan bahan baku.

C= Konsentrasi bahan baku yang ditambahkan

3.4.4.2 Uji Presisi

Menurut Rohman (2007), Uji presisi (keseksamaan) merupakan ukuran

ketepatan relatif ditentukan dengan parameter RSD (Relative Standard Deviation)

dan umumnya dinyatakan dalam persen. RSD dirumuskan dengan persaman :

SD
RSD = x100%
X

Keterangan:

RSD = Relatif Standar Deviasi

SD = Standar Deviasi

X = Kadar rata-rata Amlodipin dalam sampel

Menurut Jones, (2002), untuk menghitung standar Deviasi (SD) digunakan

rumus :
SD =
∑ ( X − Xi) 2

Keterangan : n −1

SD = Standar deviasi tidak diketahui

X = kadar rata-rata sampel

X = kadar sampeln = jumlah perlakuan

30

Universitas Sumatera Utara

3.4.4.3 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)

Untuk menentukan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) dapat

digunakan rumus :

Sy (Y − Yi) 2
=
X n−2

10 × sy
LOQ = x
Slope

3 × sy
LOD = X
Slope
Keterangan:

��
� = Simpangan baku

LOD = Batas Deteksi

LOQ = Batas Kuantitasi

3.4.5 Penentuan Kadar Amlodipin Dalam Sediaan Tablet

Ditimbang 20 tablet dan diserbukkan dari 20 tablet. Ditimbang seksama

sejumlah serbuk setara dengan 20 mg amlodipin (Penimbangan serbuk sebanyak 6

kali pengulangan), dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml. Kemudian

ditambah 5 ml metanol kemudian encerkan dengan akuades sampai garis tanda.

Kemudian disaring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet filtrat dipipet sebanyak

4,5 ml larutan, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml. Lalu dicukupkan dengan

akuades sampai garis tanda, kocok homogen dan diukur serapannya pada panjang

gelombang maksimum yang diperoleh. Penetapan kadar ditentukan dengan

menggunakan persamaan regresi yaitu: Y=aX + b.

31

Universitas Sumatera Utara

3.4.6 Analisis Data Secara Statistik

Kadar amlodipin besilat dapat dihitung dengan persamaan garis regresi

dan untuk menentukan apakah data diterima atau ditolak digunakan rumus seperti

di bawah ini:

X−X
t=
SD
n

Dasar penolakan data jika -thitung≤ dan bila thitung≤-ttabel.

Untuk mencari kadar sebenarnya dengan taraf kepercayaan 99%, dengan derajat

kebebasan dk = n -1, digunakan rumus:

μ= X ± t (1− 1 / 2α )dk x SD / n

Keterangan:

μ = interval kepercayaan

X = kadar rata-rata sampel

X = kadar sampel

t = harga t tabel sesuai dengan dk = n -1a

α = tingkat kepercayaan

dk = derajat kebebasan

SD = standar deviasi tidak diketahui

n = jumlah perlakuan

32

Universitas Sumatera Utara

 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum Amlodipin Besilat

BPFI.

Penetuan panjang gelombang ini dilakukan pada konsentrasi yang

memberikan serapan dengan kesalahan fotometrik terkecil yaitu ± 0,4343 . Untuk

mendapatkan konsentrasi tersebut dapat dihitung menggunakan nilai absorptivitas

spesifik Amlodipin besilat (A 11 = 119) dari literatur. Contoh perhitungan dapat

dilihat pada Lampiran 8.

Dari perhitungan didapatkan konsentrasi pengukuran adalah 36 µg/ml dan

dari hasil pengukuran diperoleh panjang gelombang maksimum, pada 364 nm.

seperti terlihat pada Gambar 1 dan Tabel 1.

Gambar 1. Kurva serapan Amlodipin Besilat Baku Pembanding Farmakope

Indonesia (Konsentrasi 36 µg/ml)

33

Universitas Sumatera Utara

Tabel 1. Data Absorbansi Dari Kurva Serapan Maksimum

Panjang Gelombang Absorbansi

maksimum

364.0 0.4368

239.0 1.1356

Panjang gelombang metode analisis menurut PPOM yaitu 364,0 nm.

Panjang gelombang yang diperoleh ini seterusnya digunakan untuk penentuan

kadar amlodipin besilat dalam tablet.

4.2 Pembuatan dan Penetuan Linieritas Kurva Kalibrasi

Linieritas merupakan ukuran seberapa baik kurva kalibrasi yang menghubungkan

antara respon (Y) dengan konsentrasi (X).Penentuan linieritas kurva kalibrasi Amlodipin

besilat BPFI dalam pelarut metanol dengan konsentrasi 16,0 µg/ml, 24,0 µg/ml,

32,0µg/ml, 40,0µg/ml, 48,0 µg/ml pada panjang gelombang 364 nm. Data dan kurva

kalibrasi dapat pada dilihat pada Tabel 2 dan Gambar 2 dibawah ini.

Tabel 2. Data Kurva kalibrasi dari Amlodipin Besilat BPFI

No. Conc. ABS

1. 0.0000 0.000

2. 16.000 0.187

3. 24.000 0.261

4. 32.000 0.347

5. 40.000 0.437

6. 48.000 0.517

34

Universitas Sumatera Utara

Gambar 2. Kurva Kalibrasi amlodipin besilat BPFI

Dari hasil pembuatan kurva kalibrasi amlodipin besilat BPFI diperoleh

hubungan yang linier antara konsentrasi dan serapan dengan koefisien korelasi (r)

= 0,9992 dan persamaan garis regresi Y = 0,010788x - 0,003764. Koefisien

korelasi yang diperoleh memenuhi kriteria penerimaan untuk korelasi adalah r ≥

0,995 (Moffat, 2004).

4.3 Uji Validasi Metode Spektrofotometri Ultraviolet

Pada penelitian ini dilakukan uji validasi dengan metode penambahan

bahan baku (Standard Addition Method) terhadap sampel tablet lopiten (PT.

Guardian Pratama) yang meliputi uji akurasi dengan parameter persen perolehan

kembali (% recovery), uji presisi dengan parameter RSD (Relative Standard

Deviation), batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) (WHO, 1992;

Indriyanto dan Yuwono, 2003). Uji akurasi dengan parameter persen perolehan

kembali dilakukan dengan membuat 6 kali replikasi, kemudian dianalisis dengan

perlakuan yang sama seperti pada tabel dibawah ini.

35

Universitas Sumatera Utara

 Tabel 3. Data Hasil Pengujian Perolehan Kembali Lopiten dengan Metode
Penambahan Bahan Baku (Standard Addition Method).

Konsentrasi Bahan baku Persen

Berat Setelah Sebelum yang Perolehan
No Serapan
sampel/serbuk penambahan penambahan ditambahkan  A− B 
(A)  x100% 
mg bahan baku bahan baku (C)  C 
(A) (B) µg/ml
1 256,1 0,4792 44,11 34,87 9,00 102,6
2 254,9 0,4759 43,80 34,87 9,00 99,22
3 255,6 0,4765 43,86 34,87 9,00 99,88
4 256,2 0,4762 43,83 34,87 9,00 99,55
5 255,8 0,4701 43,26 34,87 9,00 93,22
6 256,4 0,4810 44,27 34,87 9,00 104,44
Kadar rata-rata (% recovery) 99,81
Standar Deviasi (SD) 3,8228
Relatif Standar Deviasi (%) 3,8300

Jumlah tablet 20 berat 20 tablet = 3539,2 mg

Tiap tablet lopiten 10 mg mengandung amlodipin besilat 13,87 mg setara dengan
amlodipin 10 mg
10mg
Berat serbuk setara 10 mg = x 3539,2 mg = 255,16 mg
13,87 mg
Dari data di atas didapatkan persen perolehan kembali (% recovery)

99,81% dengan standar deviasi (SD) sebesar 3,8228. Persen perolehan kembali ini

dapat diterima karena memenuhi syarat akurasi dimana rentang rata-rata hasil

perolehan kembali adalah 98-102%. Sedangkan dari hasil uji presisi dengan

parameter relatif standar deviasi (RSD) adalah 3,8300%. Nilai Relatif Standar

Deviasi (RSD) yang diperoleh dari pengukuran sediaan tablet yang dianalisis telah

≤5% untuk senyawa

memenuhi syarat RSD yaitu -senyawa dengan kadar

sekelumit (Rohman, 2007). Dapat disimpulkan bahwa metode yang digunakan

memenuhi persyaratan uji validasi metode sehingga dapat digunakan

36

Universitas Sumatera Utara

untukpenetapan kadar amlodipin dalam tablet. Batas deteksi (LOD) sebesar

1,5587 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) sebesar 3,1957 µg/ml.

4.4 Penentuan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet

Hasil penentuan kadar amlodipin besilat dalam sediaan tablet dapat dilihat

pada Tabel4 dibawah ini. Data lengkap dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 30.

Tabel 4. Persentase Kadar Rata-rata dan Kadar Sebenarnya Amlodipin besilat

dalam sediaan tablet.

Kadar Rata-rata Kadar Sebenarnya

No Nama Sediaan
(%)s (%)

Amlodipin besilat generik

1 95,63 95,63 ± 1,14
(PT. Hexpharm Jaya)
Tensivask
2 94,74 94,74 ± 2,70
(Dexa Medika)
Normoten
3 94,94 94,94 ± 1,81
(Soho)
Lopiten
4 96,54 96,54 ± 0,90
(Guardian Pharmatama)

Dari data di atas menunjukkan, kadar amlodipin besilat dalam sediaan

tablet generik maupun nama dagang, memenuhi persyaratan kadar tablet pada

umumnya yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0 % dari jumlah

yang tertera pada etiket.

37

Universitas Sumatera Utara

 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
1. Metode Spektrofotometri Ultraviolet dapat digunakan untuk penetapan

kadar Amlodipin besilat dalam sediaan tablet karena pada hasil uji

validasi, metode ini menunjukkan akurasi dan presisi yang baik dengan

batas deteksi (LOD) 1,5587 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) 5,1957

µg/ml.

2. Hasil penetapan kadar dari tablet generik dan nama dagang diperoleh,

untuk tablet Amlodipin Generik (PT. Hexpharm Jaya) sebesar 95,63 % ±

1,14%, tablet Tensivask® (Dexa Medica) 94,74% ± 2,70%, Normoten®

(Soho) 94,94% ± 1,81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) 96,54% ±

0,90%.

3. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa semua tablet yang diperiksa baik

yang generik maupun nama dagang memenuhi persyaratan kadar tablet

pada umumnya yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0%

dari jumlah yang tertera pada etiket.

5.2 Saran

1. Disarankan kepada peneliti lainnya agar dapat menentukan kadar Amlodipin

besilat dengan metode lainnya seperti KCKT dan Kromatografi Gas.

2. Disarankan kepada peneliti lainnya agar dapat menentukan kadar obat turunan

arilasetat lainnnya yang beredar dipasaran secara Spektrofotometri Ultraviolet

38

Universitas Sumatera Utara

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Sifat

2.1.1 Sifat Fisikokimia

Rumus Struktur

H
H3C N NH2
O
H3CO O CH3 O O
S
O O OH
Cl

Rumus molekul : C20H25ClN2O5, C6H6SO3

Nama Kimia : 3,5-pyridinedicarboxylic acid,

2-[(2Aminoethoxy)methyl]-4-(o –chlorophenyl)

1,4–dihydro–6–methyl–3–ethyl 5–methyl ester, monobenzensulfonate.

Berat Molekul : 567,05

Pemerian : Serbuk hablur, putih atau hampir putih, tidak atau hampirtidak

berbau.

Kelarutan : Mudah larut dalam etanol, dalam kloroform, dan

dalam eter, praktis tidak larut dalam air.

Penetapan kadar bahan baku : Dilakukan secara acidimetri

Penetapan kadar tablet : Dilakukan dengan metode kromatografi cair kinerja

tinggi, kromatografi gas dan spektrofotometri

ultra violet.

2.1.2 Farmakologi

17

Universitas Sumatera Utara

Hipertensi merupahkan penyakit heterogen yang dapat disebabkan oleh penyakit

spesifik (hipertensi sekunder) atau mekanisme patofisiologi yang tidak diketahui

penyebabnya (hipertensi primer atau ensensial). Pada umumnya kasus hipertensi

sekunder disebabkan oleh penyakit gagal ginjal kronik. Penyebab utama kematian

pada hipertensi adalahkardiovascular, dan gagal ginjal.Kemudian kematian

prematur ada korelasinya dengan meningkatkan tekanan darah (ISFI, 2008).

Berdasarkan struktur kimianya Amlodipin merupakan antagonis kalsium

golongan dihidropiridin (antagonis ion kalsium) yang menghambat influks

(masuknya) ion kalsium melalui membran kedalam otot polos vascular dan

otot.Amlodipin absorpsinya lambat, efeknya lebih lama, waktu paruh plasma 35

sampai 50 jam, serta efek dan kadar dalam plasma meningkat selama 7-10 hari

terapi. Amlodipin menghasilkan vasodilatasi arteri perifer dan dilatasi koroner

yang profil hemodinamiknya.Namum amlodipin menyebabkan takikardia reflex

mungkin karena waktu paruhnya yang lama menyebabkan puncak minimumdalam

konsentrasi plasma (Goodman dan Gilman, 2008).

Efek antihipertensi amlodipin adalah dengan bekerja langsung sebagai

vasodilator arteriperifer yang dapat menyebabkan penurunan resisten vaskular

serta penurunan tekanan darah.Dosis satu kali sehari akan menghasilkan

penurunan tekanan darah yang berlangsung selama 24 jam. Onset kerja amlodipin

adalah perlahan-lahan, sehingga tidak menyebabkan terjadinya hipotensi

akut.Efek antiangina amlodipin adalah melalui dilatasi arteriol perifer sehingga

dapat menurunkan resistensi perifer total (afterload).Karena amlodipin tidak

mempengaruhi frekuensi denyut jantung, pengurangan beban jantung akan

menyebabkan penurunan kebutuhan oksigen miokardial serta kebutuhan energi.

18

Universitas Sumatera Utara

Amlodipin menyebabkan dilatasi arteri baik pada keadaan oksigenisasi normal

maupun keadaan iskemia. Pada pasien angina, dosis amlodipin satu kali sehari

dapat meningkatkan waktu latihan, waktu timbulnya angina, waktutimbulnya

depresi segmen ST dan menurunkan frekuensi seranganangina serta penggunaan

tablet nitrogliserin. Amlodipin tidak menimbulkan perubahan kadar lemak plasma

dan dapat digunakan pada pasien asma, diabetes serta gout (Anonim, 2010).

Amlodipin (derivate dihidropiridin) efektif dalam menurunkan tekanan

darah. Perbedaan hemidinamik diantara penghambatan kanal kalsium bisa

mempengaruhi obat tertentu. Aktivitas reflex simpatis dengan takikardia ringan

akan mempertahankan atau meningkatkan curah jantung (Katzung, 1994).

2.1.3 Efek Samping

Efek samping umum yang dapat ditimbulkan oleh amlodipin diantaranya

pusing, nyeri kepala, rasa panas di muka dan terutama pada derivat-piridin dan

udema pergelangan kaki (akibat vasodilatasi perifer). Umumnya, efek ini bersifat

sementara (Tan dan Raharja, 2002).

2.1.4 Dosis
Hipertensi dan angina variant/stabil 1 dd 5 mg (besilat=benzosulfonat),

maksimum 10 mg (Tan dan Raharja, 2002).

2.2 Spektrofotometri Ultraviolet

19

Universitas Sumatera Utara

 Spektrofotometri serapan merupakan pengukuran suatu interaksi antara

radiasi elektromagnetik dan molekul atau atom dari suatu zat kimia. Teknik yang

sering digunakan dalam analisis farmasi meliputi spektrofotometri ultraviolet,

cahaya tampak, infra merah dan serapan atom.Jangkauan panjang

gelombanguntuk daerah ultraviolet adalah 190-380 nm(Ditjen POM, 1995).

Gugus fungsi yang menyerap radiasi di daerah ultraviolet dekat dan daerah

tampak disebut kromofor dan hampir semua kromofor mempunyai ikatan tak

jenuh. Pada kromofor jenis initransisi terjadi dari π→ π*, yang menyerap pada λ

max kecil dari 200nm (tidak terkonyugasi), misalnya pada >C=< dan –C ≡ C -

.Kromofor ini merupakan tipe transisi dari sistem yang mengandung elektron

πpada orbital molekulnya.Untuk senyawa yang mempunyai system konyugasi,

perbedaan energi antara keadaan dasar dan keadaan tereksitasi menjadi lebih kecil

sehingga penyerapan terjadi pada panjang gelombang yang lebih besar

(Dachriyanus, 2004).

Gugus fungsi seperti –OH, -NH2, dan –Cl yang memberikan transisi n→

π* disebut gugus auksokrom. Gugus ini adalah gugus yang tidak dapat menyerap

radiasi ultraviolet-sinar tampak, tetapi apabila gugus ini terikat pada gugus

kromofor mengakibatkan pergeseran panjang gelombang ke arah yang lebih besar

(efekbatokromik).

Hal-hal yang harus diperhatikan dalam analisis spektrofotometri

ultraviolet:
a. Pemilihan panjang gelombang maksimum

Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah panjang

gelombang dimana terjadi serapan maksimum. Untuk memperolehpanjang

gelombang maksimum, dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara

20

Universitas Sumatera Utara

 absorbansi dengan panjang gelombang dari suatu larutan baku pada

konsentrasi tertentu.Ada beberapa alasan mengapa harus menggunakan

panjang gelombang maksimum, yaitu:

• Pada panjang gelombang maksimum, kepekaannya juga maksimum karena

pada panjang gelombang maksimum tersebut, perubahan absorbansi untuk

setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar.

• Disekitar panjang gelombang maksimal, bentuk kurva absorbansi datar

dan pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer akan terpenuhi.

• Jika dilakukan pengukuran ulang maka kesalahan yang terjadi pada

pengulangan akan kecil sekali, karena digunakan panjang gelombang

maksimum.

b. Pembuatan kurva kalibrasi

Dibuat seri larutan baku dari zat yang akan dianalisis dengan berbagai

konsentrasi. Masing-masing absorbansi larutan dengan berbagai konsentrasi

diukur, kemudian dibuat kurva yang merupakan hubungan antara absorbansi

dengan konsentrasi. Bila hukum Lamber-Beer terpenuhi maka kurva kalibrasi

merupakan garis lurus.

c. Pembacaan absorbansi sampel atau cuplikan

Absorbansi yang terbaca pada spektrofotometer hendaknya antara 0,2-0,6.

Anjuran ini berdasarkan anggapan bahwa pada kisaran nilai absorbansi tersebut,

kesalahan fotometrik yang terjadi adalah paling minimal (Gandjar dan Rohman,

2007)

2.2.1 Hukum Lambert-Beer

21

Universitas Sumatera Utara

 Menurut Hukum Lambert, serapan berbanding lurus terhadap ketebalan sel

yang disinari. Menurut Hukum Beer, yang hanya berlaku untuk cahaya

monokromatik dan larutan yang sangat encer, serapan berbanding lurus dengan

konsentrasi (banyak molekul zat). Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu

dalam Hukum Lambert-Beer, sehingga diperoleh bahwa serapan berbanding lurus

terhadap konsentrasi dan ketebalan sel, yang dapat ditulis dengan persamaan :

A= a.b.c g/liter atau A= ε. b. c mol/liter

Dimana: A = serapan

a = absorptivitas

b = ketebalan sel

c = konsentrasi

ε = absorptivitas molar

Jadi dengan Hukum Lambert-Beer konsentrasi dapat dihitung dari

ketebalan sel dan serapan. Absorptivitas merupakan suatu tetapan dan spesifik

untuk setiap molekul pada panjang gelombang dan pelarut tertentu.

Menurut Roth dan Blaschke (1981), absorptivitas spesifik juga sering

digunakan sebagai ganti absorptivitas. Harga ini, memberikan serapan larutan 1 %

(b/v) dengan ketebalan sel 1 cm, sehingga dapat diperoleh persamaan:

A = A 11 . b. c

Dimana : A 11 = absorptivitas spesifik (ml g -1cm-1)

b = ketebalan sel (cm)

c = konsentrasi senyawa terlarut (g/100ml larutan)

2.2.2 Penggunan Spektrofotometri Ultraviolet

22

Universitas Sumatera Utara

 Spektrofotometri ultraviolet digunakan dalam analisis senyawa organik

yaitu:

1. Analisis kualitatif

Secara eksperimental, sangat mudah untuk mengukur banyaknya radiasi

yang diserap oleh suatu molekul sebagai fungsi frekuensi radiasi. Suatu grafik

yang menghubungkan antara banyaknya sinar yang diserap dengan frekuensi

(panjang gelombang) sinar merupakan spektrum absorpsi. Transisi yang terjadi

untuk suatu molekul dengan struktur kimia yang berbeda tidaklah sama sehingga

spektrum absorpsinya juga berbeda. Dengan demikian, spektrum dapat digunakan

sebagai bahan informasi yang bermanfaat untuk analisis kualitatif (Rohman dan

Gandjar, 2007).

2. Analisis kuantitatif

Penggunaan utama spektrofotometri ultraviolet adalah dalam analisis

kuantitatif. Apabila dalam alur spektrofotometer terdapat senyawa yang

mengabsorpsi radiasi, akan terjadi pengurangan kekuatan radiasi yang mencapai

detektor. Parameter kekuatan energi radiasi khas yang diabsorpsi oleh molekul

adalah absorban (A) yang dalam batas konsentrasi tertentu nilainya sebanding

dengan banyaknya molekul yang mengabsorpsi radiasi dan merupakan

dasaranalisis kuantitatif. Konsentrasi larutan analit umumnya 10 sampai 20

µg/ml, tetapi untuk senyawa yang nilai absorptivitasnya besar dapat diukur pada

konsentrasi yang lebih rendah. Senyawa yang tidak mengabsorpsi radiasi

ultraviolet-sinar tampak dapat juga ditentukan dengan spektrofotometri

ultraviolet-sinar tampak, apabila ada reaksi kimia yang dapat mengubahnya

23

Universitas Sumatera Utara

menjadi kromofor atau dapat disambungkan dengan suatu pereaksi kromofor

(Satiadarma, 2004).

Analisis kuantitatif secara spektrofotometri ultraviolet dapat dilakukan

dengan metode regresi dan pendekatan

1. Metode Regresi

Analsis kuantitatif dengan metode regresi yaitu dengan menggunakan

persamaan regresi yang didasarkan pada harga serapan dan konsentrasi standar

yang dibuat dalam beberapa konsentrasi, paling sedikit menggunakan 5 rentang

konsentrasi yang meningkat yang dapat memberikan serapan yang

linier,kemudian diplot menghasilkan suatu kurva yang disebut dengan kurva

kalibrasi. Konsentrasi suatu sampel dapat dihitung berdasarkan kurva tersebut.

2. Metode Penekatan

Analisis kuantitatif dengan cara ini dilakukan dengan membandingkan

serapan standar yang konsentrasinya diketahui dengan serapan sampel.

Konsentrasi sampel dapat dihitung melalui rumus perbandingan

AsxCb
C=
Ab

dimana As = serapan sampel, Ab = serapan standar, Cb = konsentrasi

standar, dan C = konsentrasi sampel (Holme dan Peck, 1983).

2.2.3 Peralatan Spektrofotometri Ultraviolet

Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitans atau serapan

suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Spektrofotometer merupakan

penggabungan dari dua fungsi alat yang terdiri dari spektrometer yang

menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan

24

Universitas Sumatera Utara

fotometer sebagai alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang

diabsorpsi (Day dan Underwood, 1999).

Unsur-unsur terpenting suatu spektrofotometer adalah sebagai

berikut(Khopkar, 1990):

1. Sumber-sumber lampu; lampu deuterium digunakan untuk daerah UV pada

panjang gelombang dari 190-350 nm, sementara lampu halogen kuarsa atau

lampu tungsten digunakan untuk daerah visibel pada panjang gelombang

antara 350- 900 nm.

2. Monokromotor: digunakan untuk memperoleh sumber sinar yang

monokromatis. Alatnya dapat berupa prisma maupun grating. Untuk

mengarahkan sinar monokromatis yang diinginkan dari hasil penguraian.

3. Kuvet: Pada pengukuran di daerah tampak, kuvet kaca atau kuvet kaca corex

dapat digunakan, tetapi untuk pengukuran pada daerah UV kita harus

menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini.

Umumnya tebal kuvet adalah 10 mm, tetapi yang lebih kecil ataupun yang

lebih besar dapat digunakan. Sel yang biasa digunakan berbentuk persegi,

tetapi bentuk silinder dapat juga digunakan. Kuvet yang tertutup digunakan

untuk pelarut organik. Sel yang baik adalah kuarsa atau gelas hasil leburan

yang homogen.

4. Detektor: Peranan detector penerima adalah memberikan respon terhadap

cahaya pada berbagai panjang gelombang.

5. Suatu amplifier (penguat) dan rangkaian yang berkaitan yang membuat isyarat

listrik dapat diamati.

6. Sistem pembacaan yang memperlihatkan besarnya listrik.

25

Universitas Sumatera Utara

 2.3 Validasi
Validasi adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu pada

prosedur penetapan yang dipakai untuk membuktikan bahwa parameter tersebut

memenuhi persyaratan untuk penggunaannya (Harmita, 2004).Parameter analisis

yang ditentukan pada validasi adalah akurasi, presisi, kespesifikan, limit deteksi,

limit kuantitasi, kelinieran dan rentang.

Akurasi (kecermatan) adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan

hasil analisis dengan kadar analit sebenarnya. Akurasi dinyatakan sebagai persen

perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan dan dapat ditentukan

melalui dua cara yaitu metode simulasi (spiked placebo recovery) dan metode

penambahan bahan baku (standard addition method). Dalam metode simulasi,

sejumlah analit bahan murni (senyawa pembanding kimia) ditambahkan kedalam

campuran bahan sediaan farmasi (plasebo), lalu campuran tersebut dianalisis dan

hasilnya dibandingkan dengan kadar standar yang ditambahkan (kadar

sebenarnya). Dalam metode adisi (penambahan bahan baku), sampel dianalisis

lalu sejumlah tertentu analit yang diperiksa ditambahkan kedalam sampel,

dicampur dan dianalisis kembali. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar

yang sebenarnya (hasil yang diharapkan). Dalam kedua metode tersebut, persen

perolehan kembali dinyatakan sebagai rasio antara hasil yang diperoleh dengan

hasil yang sebenarnya.

A− B
% PerolehanKembali = x100%
C

Keterangan : A = Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahanbaku

B = Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku

C = Konsentrasi baku yang ditambahkan

26

Universitas Sumatera Utara

 Presisi (keseksamaan) adalah derajat kesesuain diantara masing-masing

hasil uji, jika prosedur analisis diterapkan berulang kali pada sejumlah cuplikan

yang diambil dari satu sampel homogen. Presisi dinyatakan sebagai deviasi

standar atau deviasi standar relative (koefisien variasi). Presisi dapat diartikan

pula sebagai derajat reprodusibilitas (ketertiruan) atau repeatabilitas

(keterulangan).

Batas deteksi adalah nilai parameter, yaitu konsentrasi analit terendah

yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan

dengan blanko. Batas deteksi dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

3 xSB
Batas deteksi =
Slope

Batas kuantitasi adalah jumlah analit terkecil dalam sampel yang masih

dapat diukur dalam kondisi percobaan yang sama dan memenuhi kriteria cermat

dan seksama.

10 xSB
Batas Kuantitasi =
Slope

Kelinieran suatu metode analisis adalah kemampuan untuk menunjukkan

bahwa nilai hasil uji langsung atau setelah diolah secara secara matematika,

proporsional dengan konsentrasi analit dalam sampel dalam batas rentang

konsentrasi tertentu.

Rentang suatu metode analisis adalah interval antara batas konsentrasi

tertinggi dan konsentrasi terendah analit yang dapat ditentukan dengan presisi,

akurasi dan kelinieran (Satiadarma, 2004; WHO, 1992)

27

Universitas Sumatera Utara

 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Darah tinggi (Hipertensi) kini menjadi masalah global karena prevalensi

yang terus meningkat sejalan dengan perubahan gaya hidup seperti merokok,

obesitas, inaktivitas fisik, dan stress.Hampir di setiap Negara hipertensi

menduduki peringkat pertama sebagai penyakit paling sering dijumpai (Anonim,

2010).

Amlodipin tablet diindikasikan untuk pengobatan hipertensi, dapat

digunakan untuk mengontrol tekanan darah pada sebagian besar penderita

hipertensi.Penderita hipertensi yang tidak cukup terkontrol jika hanya

menggunakan anti hipertensi tunggal akan sangat menguntungkan dengan

pemberian amlodipin yang dikombinasikan dengan diuretik thiazida, inhibitor β-

adrenoreseptor, atau inhibitor angiotensin converting enzyme.Amlodipin juga

diindikasikan untuk pengobatan iskemia myokardial, baik karena obstruksi fixed

(angina stabil), maupun karena vasokonstriksi (angina varian) dari pembuluh

darah koroner. Dalam perdagangan amlodipin tablet terdapat dalam bentuk

generik dan nama dagang (Anonim, 2001).

Monorgafi amlodipin dalam sedian tablet tidak terdapat dalam FI edisi IV

sedangkan monografi amlodipin dalam bahan baku terdapat dalam United State

Pharmacopoeia XXXI, 2009 (USP) dengan penetapan kadar secara KCKT.

Menurut metode analisis BPOM no 01/08/02 amlodipin tablet dapatditentukan

14

Universitas Sumatera Utara

secara spektrofotometri ultraviolet dalam pelarut metanol air dimana serapan

maksimum pada panjang gelombang ± 365 nm.

Menurut Moffat, (2004) amlodipin besilat memiliki serapan maksimum

panjang gelombang 236nm dalam basa dan dalam larutan asam NH2SO4 239 nm.

Dalam sertifikat pengujian Badan POM RI, amlodipin besilat memiliki panjang

1
gelombang 360nm ( A1 = 119) dalam pelarut metanol.

Berdasarkan hal tersebut diatas peneliti mencoba menggunakan metode

spektrofotometri ultraviolet pada penentuan kadar amlodipin dalam tablet metode

ini relatif lebih murah dan sederhana dibandingkan dengan metode KCKT.

Untuk menguji validitas dari metode ini dilakukan pengujian antara lain

uji akurasi dengan parameter % recovery, uji presisi dengan parameter Standar

Deviasi Relatif (RSD), uji sensitifitas dengan parameter limit deteksi (LOD) dan

limit kuantitasi (LOQ) (WHO, 1989).

1.2 Perumusan Masalah

a. Apakah amlodipin dalam sediaan tablet dapat ditentukan kadarnya secara

spektofotometri ultraviolet dan memenuhi persyaratan uji validasi?

b. Apakah kadar amlodipin besilat dalam tablet generik dan nama dagang

memenuhi persyaratan kadar umumnya suatu tablet.

1.3 Hipotesis

Hipotesis dalam penelitian ini adalah:

a. Amlodipin besilat dalam sediaan tablet dapat ditentukan kadarnya secara

spektrofotometri ultraviolet dan memenuhi uji validasi metode.

b. Kadar amlodipin besilat dalam sedian tablet generik dan nama dagang

memenuhi persyaratan kadar umumnya suatu tablet.

15

Universitas Sumatera Utara

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah:

a. Untuk Menentukan tingkat validasi metode spektrofotometri

ultravioletpada penetapan kadar amlodipin besilat dalam sediaan tablet.

b. Untuk Mengetahui kesesuaian kadar tablet generik dan nama dagang

dengan persyaratan kadar umumya suatu tablet.

1.5 Manfaat Penelitian

Sebagai metode sederhana dalam Industri Farmasi pada penetapan kadar

amlodipin besilat dalam tablet.

16

Universitas Sumatera Utara

 Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet
Pada Penetapan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet
Abstrak

Amlodipintermasukantagoniskalsiumgolongandihidropiridin yang berkerja

menghambatmasuknya ion kalsiummelaluimembrankedalamotot polos vaskular
danototjantung. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan metode alternatif
pada penetapan kadar tablet amlodipin yang relatif lebih murah dan mudah dalam
pelaksanaannya, namun memberikan hasil dengan akurasi dan presisi yang baik
dan sekaligus menentukan kadar tablet amlodipin generik dan nama dagang yang
beredar di pasaran.
Metode yang digunakanpadapenelitianiniyaitusecaraspektrofotometri
ultraviolet dalam pelarut metanol pada panjang gelombang 364 nm. Metode ini
memenuhi persyaratan uji validasi dengan persen perolehan kembali 100,51%
danrelatifstandardeviasi (RSD) 3,7975%, batasdeteksi (LOD) 1,5587 µg/ml
danbataskuantitasi (LOQ) 5,1957 µg/ml.
Dari hasilpenelitiandiperolehkadartablet amlodipin generik (Hexpharm)
sebesar 95,63% ± 1,145% dan tablet namadagang Tensivask® (DexaMedika)
sebesar 94,74% ± 2,70%, Normoten® (Soho) sebesar 94,94% ± 1,81%, Lopiten®
(Guardian Pharmatama) sebesar 96,54% ± 0,90%.
Hasilpenelitianmenunjukkankadaramlodipindalamsediaan tablet
generikdannama dagangmemenuhipersyaratan tablet
padaumumnyayaitutidakkurang dari 90,0% dantidaklebih dari 110,0% darijumlah
yang terterapadaetiket.
Kata kunci : Amlodipin, penetapan kadar, spektrofotometri ultraviolet, validasi
metode

Universitas Sumatera Utara

 Application of Ultraviolet Spectrophotometry Method on Determination of
Amlodipine Besilat in Tablet Preparations

Abstract

Amolodipine is one of antagonis calcium the group of dihidropiridin

which inhibit the entry of calcium ions through the membrane into the vascular
smooth muscle and cardiac muscle. The purpose of this study to find an
alternative method to determination of amlodipine tablets which are relatively
cheap and easy in implementation, but it gives results with good accuracy and
precision and olso to determine the levels of amlodipine tablet generic and trade
names on the market.
The name as the method which is used to the study is ultraviolet of
spectrophotometry with solvent of methanol at a wavelength of 364 nm. This
method meets the requirements validation test with the recovery percent is
100,51% and deviation standard of relative (RSD) is 3,7975%, detection of limit
(LOD) is, 1.5587 g/ml and quantitation of limit (LOQ) is, 5.1957 g/ml.
From the study were obtained the generic rate of amlodipine tablets
(Hespharm) equal to 95.63% ± 1.145% and the trade names Tensivask® tablets
(Dexa Medika) equal to 94.74% ± 2.70%, Normoten® (Soho) equal to 94.94% ±
1.81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) amounted to 96.54% ± 0.90%.
The study showed that levels of amlodipine in tablet dosage generic and
trade name meets the requirements of tablets in the general are not less than
90.0% and not more than 110.0% of the listed amount on the label.

Key words:amlodipine, determination, spectrophotometry ulraviolet, validation

methods.

Universitas Sumatera Utara

 PENERAPAN METODE SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET PADA PENETAPAN KADAR
AMLODIPIN BESILAT DALAM SEDIAAN TABLET

SKRIPSI

OLEH:
SURYANI NURJAMAL
NIM 071524074

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015

Universitas Sumatera Utara

 PENERAPAN METODE SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET PADA PENETAPAN KADAR
AMLODIPIN BESILAT DALAM SEDIAN TABLET

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh

gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara

OLEH:
SURYANI NURJAMAL
NIM 071524074

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015

Universitas Sumatera Utara

 PENGESAHAN SKRIPSI
PENERAPAN METODE SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET PADA PENETAPAN KADAR
AMLODIPIN BESILAT DALAM SEDIAN TABLET

OLEH:
SURYANI NURJAML
NIM 071524074
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Pada tanggal :8Agustus 2013

Pembimbing Panitia Penguji,

Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Prof. Dr. rer. nat E. De Lux Putra, S.U., Apt.
NIP 19521041980031002 NIP 19530619183031001

Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.

Pembimbing II, NIP 195201041980031002

Drs. Syafruddin, MS., Apt. Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.

NIP 194811111976031003 NIP 195409101983032001

Dra. Nurmadjuzita, M.Si., Apt.

NIP 194809041974122001

Medan, Agustus 2015

Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,

Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.

NIP 195311281983031002

Universitas Sumatera Utara

 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan nikmat,

rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul "Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet Pada Penetapan

Amlodipin Besilat Dalam Sediaan Tablet". Skripsi ini diajukan sebagai salah satu

syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan

terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio

Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara,

Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Syafruddin, M.S.,

Apt., yang telah banyak memberikan bimbingan dan bantuan selama penelitian

dan penulisan skripsi ini berlangsung, juga kepada Bapak Prof. Dr. rer. nat.

Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., Ibu Dra. Nurmadjuzita, M.Si., Apt., Bapak Drs.

Nahitma Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan

masukan dalam penyusunan skripsi ini.

Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang

tulus kepada kedua orang tua, Ayahanda Djamalluddin dan Ibunda Nurasiah Sirait

tercinta, adik-adikku tersayang Fajar dan Wale atas doa, dorongan dan

pengorbanan baik moril maupun materil dalam penyelesaian skripsi ini. Juga

kepada sahabat-sahabatku tersayang David Monandar, Astri, Andre, Agnes,

Nasril, Desi, Faula, Ratna, Suci, Iyum dkk yang selalu ada memberi semangat dan

pikiran selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. Tidak lupa penulis ingin

Universitas Sumatera Utara

mengucapkan terima kasih kepada teman-teman stambuk 2007 yang tidak dapat

disebutkan namanya satu persatu, atas segala dorongan, motivasi dan bantuannya

kepada penulis sehingga skripsi ini dapat selesai.

Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan

terima kasih.

Medan, Agustus2015
Penulis,

Suryani Nurjamal
NIM 071524074

Universitas Sumatera Utara

 Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet
Pada Penetapan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet
Abstrak

Amlodipintermasukantagoniskalsiumgolongandihidropiridin yang berkerja

menghambatmasuknya ion kalsiummelaluimembrankedalamotot polos vaskular
danototjantung. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan metode alternatif
pada penetapan kadar tablet amlodipin yang relatif lebih murah dan mudah dalam
pelaksanaannya, namun memberikan hasil dengan akurasi dan presisi yang baik
dan sekaligus menentukan kadar tablet amlodipin generik dan nama dagang yang
beredar di pasaran.
Metode yang digunakanpadapenelitianiniyaitusecaraspektrofotometri
ultraviolet dalam pelarut metanol pada panjang gelombang 364 nm. Metode ini
memenuhi persyaratan uji validasi dengan persen perolehan kembali 100,51%
danrelatifstandardeviasi (RSD) 3,7975%, batasdeteksi (LOD) 1,5587 µg/ml
danbataskuantitasi (LOQ) 5,1957 µg/ml.
Dari hasilpenelitiandiperolehkadartablet amlodipin generik (Hexpharm)
sebesar 95,63% ± 1,145% dan tablet namadagang Tensivask® (DexaMedika)
sebesar 94,74% ± 2,70%, Normoten® (Soho) sebesar 94,94% ± 1,81%, Lopiten®
(Guardian Pharmatama) sebesar 96,54% ± 0,90%.
Hasilpenelitianmenunjukkankadaramlodipindalamsediaan tablet
generikdannama dagangmemenuhipersyaratan tablet
padaumumnyayaitutidakkurang dari 90,0% dantidaklebih dari 110,0% darijumlah
yang terterapadaetiket.
Kata kunci : Amlodipin, penetapan kadar, spektrofotometri ultraviolet, validasi
metode

Universitas Sumatera Utara

 Application of Ultraviolet Spectrophotometry Method on Determination of
Amlodipine Besilat in Tablet Preparations

Abstract

Amolodipine is one of antagonis calcium the group of dihidropiridin

which inhibit the entry of calcium ions through the membrane into the vascular
smooth muscle and cardiac muscle. The purpose of this study to find an
alternative method to determination of amlodipine tablets which are relatively
cheap and easy in implementation, but it gives results with good accuracy and
precision and olso to determine the levels of amlodipine tablet generic and trade
names on the market.
The name as the method which is used to the study is ultraviolet of
spectrophotometry with solvent of methanol at a wavelength of 364 nm. This
method meets the requirements validation test with the recovery percent is
100,51% and deviation standard of relative (RSD) is 3,7975%, detection of limit
(LOD) is, 1.5587 g/ml and quantitation of limit (LOQ) is, 5.1957 g/ml.
From the study were obtained the generic rate of amlodipine tablets
(Hespharm) equal to 95.63% ± 1.145% and the trade names Tensivask® tablets
(Dexa Medika) equal to 94.74% ± 2.70%, Normoten® (Soho) equal to 94.94% ±
1.81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) amounted to 96.54% ± 0.90%.
The study showed that levels of amlodipine in tablet dosage generic and
trade name meets the requirements of tablets in the general are not less than
90.0% and not more than 110.0% of the listed amount on the label.

Key words:amlodipine, determination, spectrophotometry ulraviolet, validation

methods.

Universitas Sumatera Utara

 DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ...................................................................................................... i

PENGESAHAN SKRIPSI ........................................................................ iii

KATA PENGANTAR .............................................................................. iv

ABSTRAK ................................................................................................ vi

ABSTRACT .............................................................................................. vii

DAFTAR ISI ............................................................................................. viii

DAFTAR TABEL ..................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ................................................................................ xiii

DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................. xiv

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang ........................................................................ 1

1.2 Perumusan Masalah ............................................................... 2

1.3 Hipotesis ................................................................................ 2

1.4 Tujuan Penelitian ................................................................... 3

BAB IITINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Sifat ............................................................................ 4

2.1.1 Sifat Fisika Kimia ...................................................... 4

2.1.2 Farmakologi ............................................................... 5

2.1.3 Efek Samping ............................................................ 6

2.1.4 Dosis .......................................................................... 6

2.2 Spektrofotometri Ultraviolet .................................................. 7

2.2.1 Hukum Lambert Beer ................................................ 9

Universitas Sumatera Utara

 2.2.2 Penggunanan Spektrofotometri Ultraviolet .............. 10

2.2.3 Peralatan Untuk Spektrofotometri Ultraviolet ........... 12

2.3 Validasi .................................................................................. 13

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Alat–Alat ............................................................................... 16

3.2 Bahan-Bahan ......................................................................... 16

3.3 Pengambilan Sampel ............................................................. 16

3.4 Prosedur Penelitian ................................................................ 17

3.4.1 Pembuatan Larutan Induk Amlodipin Besilat BPFI .. 17

3.4.2 Penetapan Panjang Gelombang Serapan Maksimum 17

3.4.4 Uji Validasi Dengan Parameter Akurasi, Presisi,

Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ......................... 18

3.4.4.1 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan

Kembali (%Recovery).................................. 18

3.4.4.2 Uji Presisi ................................................... .......... 18

3.4.4.3 Penentuaan Batas Deteksi (LOD)dan Batas

Kuantitasi (LOQ) ........................................ 19

3.4.5 Penetuan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sedian

Tablet .......................................................................... 19

3.4.5 Analisis Data Secara Stastistik ................................. 20

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum

Amlodipin Besilat BPFI ..................................................... 21

4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi ................................................ 22

4.3 Uji Validasi Metode Spektrofotometri Ultraviolet ............. 23

4.4 Penentuaan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan

Tablet .................................................................................. 25

Universitas Sumatera Utara

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 26

5.1 Kesimpulan ............................................................................. 26

5.2 Saran ........................................................................................ 26

DAFTAR PUSTAKA

LAMPIRAN

10

Universitas Sumatera Utara

 DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1.Data Absorbansi dari Kurva Serapan Maksimum ....................... 22

Tabel 2. Data Kurva Kalibrasi dari Amlodipin Besilat BPFI ................... 22

Tabel 3. Data Hasil Pengujian Perolehan Kembali Dari Tablet
Amlodipin Besilat Dengan Metode Penambahan Baku .......... 24
Tabel 4. Persentase Kadar rata-rata dan Kadar Sebenarnya Amlodipin
Besilat Sediaan Tablet .............................................................. 25

11

Universitas Sumatera Utara

 DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Kurva Serapan Amlodipin Besilat BPFI .............................. 21

Gambar 2. Kurva Kalibrasi Amlodipin Besilat BPFI ............................ 23

12

Universitas Sumatera Utara

 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Perhitungan Persamaan Regresi Amlodipin Besilat ...... 30

Lampiran 2. Data Kadar Amlodipin Besilat Dalam Sediaan Tablet .. 31

Lampiran 3. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Pada

Tablet Generik (Hexpharm Jaya) ................................... 32

Lampiran 4. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada

Tablet Tensivask® (Dexa Medika) ................................ 35
Lampiran 5. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada
Tablet Normoten® (Soho) .............................................. 37
Lampiran 6. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada
Tablet Lopiten® (Guardian Pharmatama) ...................... 40
Lampiran 7. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran Sampel ............... 43
Lampiran 8. Perhitungan Penimbangan Sampel dari tablet Lopiten®
(Guardian Pharmatama) ................................................. 44

Lampiran 9. Contoh Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan batas

Kuantitasi (LOQ) ........................................................... 45
Lampiran 10. Nilai Distribusi t ............................................................. 46
Lampiran 11. Sertifikat Bahan Baku POM ........................................... 47
Lampiran 12. Sertikitat Bahan Baku Amlodipin Besilat dari
PT.Indofarma ................................................................ 48
Lampiran 13. Gambar Perangkat Penelitian ......................................... 49

13

Universitas Sumatera Utara