Cuestionario

1. Liste al menos tres microorganismos representativos para cada uno

de los cuatro niveles de contingencia en los laboratorios de
microbiología, mencionando la importancia que representa para su
área de formación
Nivel 1 Hepatitis canina, Escherichia coli no patógena, células y bacterias
no infecciosas.
Nivel 2 Actinobacillus, Actinomyces pyogenes, Bacillus cereus
Nivel 3 Bacillus anthracis; Brucella -todas las especies-; Burkolderia mallei
Nivel 4 Virus de la fiebre hemorrágica de Omsk; Herpesviridae;
Alphaherpesvirinae
2. ¿Qué medidas podría tomar usted para verificar la efectividad de la
esterilización en autoclave?
Colocar cinta testigo para constatar la esterilidad del material después de
haber sido sacado del autoclave
3. Defina liofilización es una técnica de deshidratación por frio, un proceso común
en la industria alimentaria conocido como deshidrocongelación (secado por
congelación suena más sencillo…) el cual tiene la virtud de mantener al máximo
las propiedades organolépticas de los alimentos. Este método se realiza al vacío.
4. Defina sonicación es el acto de aplicación de la energía del sonido
(generalmente ultrasonidos) para agitar las partículas de una muestra, con
diversos fines científicos o industriales.
5. ¿Qué metodología de esterilización es la adecuada para cada una de
las siguientes muestras ambientales?
(i) Medios de cultivo sólidos contaminados con Salmonella sp.
Horno durante 2 horas / Autoclave x 15 min
(ii)Muestras de agua residual doméstica
Esterilización Ultravioleta (UV)
(iii) Hisopos utilizados en muestreo de manipuladores de alimentos
Autoclave dentro de bolsa estéril
(iv) tejidos de procedencia animal y origen desconocido
Radiación Gamma
(v) suelo
Calor directo. Tierra en horno 80º C x 30 min aprox.
(vi) antibióticos
Con óxido de etileno
 Medio
Micoorganismo Composición Forma de Interpretación
de
Objeto del medio preparación del medio
Cultivo

Caldo LMX - Salmonella Colonias Se lleva a

fluorocult Thipy verdes, ebullición y -Bueno
Salmonella elevadas, posteriormente a -Excelente
spp húmedas esterilización a -Bueno-
Escherichia 121 º y 15 Ib excelente
Coli
Agar Citrobacter Colonias verde- Suspender 76 g
Chromocult freundii azuladas, con o del medio -Estandar
Proteus sin centro negro deshidratado en
mirabilis ATCC un litro de agua -Bueno /
43071 destilada. Dejar excelente
reposar de 10 a
15 minutos.
Caldo BHI Neisseria Rosa salmón Disolver 52 g de
meningitidis rodeadas en polvo en un litro -Regular
Streptococcus algunas de agua
pyogenes ocasiones por destilada. -Bueno
ATCC un precipitado Calentar a
Streptococcus biliar ebullición hasta -Excelente
pneumoniae su disolución
ATCC total. Esterilizar -Regular
Aspergillus en autoclave
niger durante 15
minutos a
121°C.
Agar TSI Proteus Rosa salmón Suspender 35 g
mirabilis ATCC rodeadas en del medio
Salmonella algunas deshidratado en -Bueno
typhimurium ocasiones por un litro de agua
Salmonella un precipitado destilada. Dejar -Bueno
enteritidis biliar embeber unos
ATCC 15 minutos. -Regular
Citrobacter Calentar
freundii cuidadosamente, -Bueno
Edwarsiella agitando con
spp. frecuencia y -Excelente
hervir durante un
minuto hasta la
disolución
completa.
Agar LIA Edwarsiella Emergecimiento Suspender 35 g -Excelente
spp. Escherichia Coli del medio
Klebsiella negativo deshidratado en -Regular
pneumoniae un litro de agua
ATCC destilada. Dejar -Bueno
Escherichia embeber unos
coli ATCC 15 minutos.
Agar entérico Shigella Suspender 76 g
HEKTOEN flexneri ATCC Verdes, del medio -Normal
Salmonella elevadas, deshidratado en
typhimurium húmedas un litro de agua -Regular
Proteus destilada. Dejar
mirabilis ATCC Verde- reposar de 10 a -Elevado
Escherichia azuladas, con o 15 minutos.
coli ATCC sin centro negro Calentar y hervir -Excelente
Klebsiella hasta lograr una
pneumoniae disolución -Bueno
ATCC 700603 completa. NO
ESTERILIZAR
EN
AUTOCLAVE.
Enfriar a 45°C y
distribuir en
cajas de Petri.
Agar EMB Escherichia Suspender 36 g
coli ATCC -Verdosas con del polvo en un
25922 brillo metálico y litro de agua -Regular
Klebsiella centro negro destilada.
pneumoniae azulado Reposar 5 -Elevado
ATCC 700603 minutos;
Proteus -Mucosas, rosa mezclar, -Excelente
mirabilis ATCC púrpura, calentando a
43071 confluentes ebullición -Bueno
Enterococcus durante 1 o 2
faecalis ATCC -Incoloras minutos hasta su
29212 disolución
 Conclusión
(Práctica 1)

La envoltura es de diferente grado de dificultad a medida que vas

envolviendo más material, pero no es nada imposible. Pare envolver las
pipetas, hubo un sentimiento de desesperación por el hecho de no poder
introducir el pedazo de algodón en la punta de las pipetas, debido a que el
tamaño de éstas era variado. En lo personal, me tocó una pipeta con una
punta de tamaño muy reducido y no fue muy fácil lograr que el algodón
entrara.

En conclusión, puedo decir que el envolver material es un trabajo sencillo si

lo sabes hacer. El detalle de no poder introducir el algodón se puede
corregir con práctica a lo largo del semestre, pues es algo que debo
aprender a hacer rápidamente. El envolver una caja Petri es muy sencillo.
Es como envolver tortillas, cuidando detenidamente que no quede ninguna
parte de la caja descubierta.

A todo este material se le debe agregar cinta testigo antes de introducir al

autoclave, para así, después del tiempo establecido, poder determinar y
verificar si el material fue esterilizado correctamente. Después de envuelto,
todo el material debe revisarse detenida y cuidadosamente para evitar que
alguno de estos entre al autoclave sin estar completamente envuelto.

Alexis Contreras Cortés 3AVQ

Microbiología
 Conclusión
(práctica 2)

Esta práctica trató básicamente de la preparación de un medio de cultivo.

Se preparó un Agar nutritivo y un caldo. Para ambos se tuvieron que hacer

cálculos para determinar cuánto volumen de agua destilada debía
incorporarse al matraz donde se iban a preparar (cada uno se preparó en
un matraz distinto) después de llegar a la conclusión de cuánto volumen se
debía usar, se determinó la cantidad de agar que debíamos depositar en los
matraces. Todo esto se pudo obtener gracias a una fórmula preestablecida
para estos casos.

El matraz con el caldo se tapó con gasa y algodón de la punta, después se

me metió a un refrigerador para que no se contaminara. El agar nutritivo se
calentó hasta ebullición sobre un mechero de Bunsen para prepararlo, para
posteriormente depositarlo dejarlo reposar en el refrigerador a baja
temperatura (pasteurización) y después hasta la normalidad. Después se
debe meter a autoclave para su completa esterilización y así,
posteriormente, poder proseguir a sembrar microorganismos dentro de una
caja Petri (previamente esterilizada en autoclave)

Alexis Contreras Cortés 3AVQ

Microbiología