Paula Andrea Diaz Huertas

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Cromatografía y sus principios

La cromatografía es una técnica físico química usada desde hace mucho tiempo en la separación de
mezclas de compuestos, es rápida y bastante útil. Adicional a la separación de compuestos, esta
también realiza ensayos mediante la polaridad, cargas moleculares, potencial redox, etc. Sin
embargo y con el pasar del tiempo esta se ha ido estudiando y a su vez se han descubierto muchas
más funciones como es el análisis de características bidimensionales y separación de compuestos
bioquímicos.

La cromatografía parte del siguiente principio, se tiene una fase estacionaria que normalmente esta
inmovilizada sobre un soporte y de una fase móvil que es la que se desplaza al contacto con la inicial,
la diferencia de estas velocidades conduce a la separación de los compuestos mezclados
(Ronbinson, et. al, 2005).

Fue descubierta por el biologo Mikhail Tswett quien gano un premio nobel en química en 1915, por
sus amplios estudios sobre separación y purificación de la clorofila (Domínguez, 1975), después de
este gran avance han sido varios los científicos e investigadores que han descubierto más sobre la
cromatografía, siendo hoy en día ampliamente usada por su gran versatilidad y a su ves se han ido
descubriendo más métodos cromatográficos.

¿Por qué es importante hacer análisis Cromatográficos en industrias de alimentos y de productos

naturales?

Es de vital importancia realizar este tipo de análisis, teniendo en cuenta que en los alimentos que
son para consumo humano deben pasar por distintas pruebas para poder garantizar su inocuidad
hacia el consumidor, como bien sabemos la cromatografía nos da resultados cada vez mas
detallados por ende las empresas podrán conocer al detalle los productos ofrecidos, adicional a esto
cuando una empresa quiere innovar en algún producto con fines específicos puede hacer uso de
este técnica y así mismo escoger entre varias muestras el que mayor porcentaje de dicho compuesto
tenga.

En la parte de alimentos naturales, los análisis cromatográficos son importantes para verificar las
propiedades de los mismos, saber cual es el compuesto que se encuentra en mayor proporción y asi
mismo poder calcular y verificar las concentraciones de los mismos.

¿Qué métodos cromatográficos aplicaría para los análisis que realiza el ente gubernamental?

Para los análisis forenses usaría la cromatografía en capa fina, cromatografía de gases y
cromatografía liquida de alta resolución.

Describa en forma general los métodos cromatográficos que aplicaría.

Cromatografía en capa fina: Es una técnica analítica y tiene como objetivo el análisis de una mezcla
de componentes, en este análisis la fase estacionaria consiste en una capa delgada de un
absorbente, depositada sobre un soporte plano como una capa de vidrio, una lamina de aluminio o
de plástico.

El procedimiento es bastante sencillo, se deposita una pequeña cantidad de la muestra problema a

la disolución en un punto en la parte inferior de la placa, luego de esto la placa se introduce en una
cubeta cromatologica, de manera que solo la parte inferior de la placa quede sumergida en el
líquido, este líquido es la fase móvil y asciende por la placa por capilaridad, a medida que el eluyente
pasa por el lugar en donde está la mezcla problema, se establece un equilibrio entre las moléculas
de cada uno de los componentes en la mezcla que son absorbidas y las que se encuentran en la
disolución. En principio los componentes se diferenciaran por solubilidad y en la fuerza de absorción,
de manera que unos componentes se desplazaran más que otros, cuando el eluyente llega a la parte
superior de la placa, esta se saca de la cubeta, se seca y los componentes separados de la mezcla se
visualizan.

Cromatografía de gases: Es una técnica analítica de usos muy extendidos, teniendo en cuenta que
ninguna otra técnica puede ofrecer su capacidad de separación o sensibilidad a la hora de analizar
compuestos volátiles. Se puede usar para determinar la composición de una mezcla de productos
químicos, para realizar una separación mediante esta técnica, se inyecta una pequeña cantidad de
la muestra a separar en una corriente de un gas inerte a una elevada temperatura, esta corriente
de gas atraviesa una columna cromatográfica que separara los componentes de la mezcla por medio
de un mecanismo de partición (Cromatografía gas-liquido), de absorción (cromatografía gas-solido)
o en muchos casos por medio de una mezcla de ambos. Los componentes separados emergerán de
la columna a intervalos discretos y pasaran a través de algún sistema adecuado de detección.

Cromatografía liquida de alta resolución: Es una técnica que permite separar, aislar e identificar los
analitos de una mezcla de compuestos químicos, por lo que es usada para la separación de
componentes de una sustancia determinada, basándose en diferentes tipos de interacciones
químicas, se caracteriza por el empleo de una fase estacionaria constituida por partículas de tamaño
muy pequeño, esto hace que la eficacia del sistema sea muy elevada, el compuesto pasa por una
columna cromatográfica a través de la fase estacionaria, mediante el bombeo de líquido a alta
presión a través de la columna, la muestra a analizar es introducida en pequeñas cantidades y sus
componentes se retrasan diferencialmente dependiendo de las interacciones químicas o físicas de
la fase estacionaria a medida que adelanten por la columna.

Describa cuáles son los mecanismos que intervienen en las separaciones cromatográficas

Cromatografía de absorción: Se basa las distintas afinidades de absorción de los componentes de

la muestra hacia la superficie de un sólido activo.

Cromatografía de reparto: Se basa en las diferencias de solubilidad de los componentes de la

muestra estacionaria, o en las diferencias de solubilidad de los componentes en la fase móvil y en
la fase estacionaria.

Cromatografía de intercambio iónico: Se basa en la distinta susceptibilidad para el intercambio de

iones de los componentes de la muestra.
Cromatografía de exclusión: Se basa en los efectos de exclusión, tales como diferencias en el
tamaño de las moléculas, forma o carga. También se usa cuando la separación se da por el tamaño
molecular.

Cromatografía de afinidad: Se utiliza para la separación una interacción biológica especifica en el

analito y la fase.

Relacione y proponga el solvente y la fase móvil que se emplearía para separar por columna una
mezcla de compuestos polares y una mezcla de compuestos no polares por cada industria descrita
en la situación problema.

Como solvente usaría gel de silice o el silicato de magnesio y como fase móvil usaría hexano, acetato
de etilo, tolueno, cloruro de metileno o eter.